第一篇：LNG汽車各種常見的問題解析

LNG汽車各種常見的問題解析

一般剛接觸LNG汽車的車主，應該會遇到各種問題，而又不知道解決的方法，為此，筆者整理了一些LNG汽車常見問題解析，希望

可以幫到大家。

LNG汽車加氣量怎么計算？怎么知道何時需要加氣？

（1）LNG的計量方式與汽柴油相同，一種是以體積來計量，計量單位是立方米（汽柴油計量單位是升），一種是以質量來計量，計量單位是公斤（汽柴油計量單位是噸）。根據不同地區的計量習慣，可以選擇立方米或公斤作為計量單位。無論用什么計量單位，加氣量是相同的，加氣機都可以自動計量，換算關系是1公斤LNG大約與1.4方立方米天然氣相當。

（2）LNG汽車駕駛室裝有LNG液量顯示器，與汽柴油車的油量顯示一樣，液量顯示部分包括液量圖標、液量刻度線、液量指針和液量值（L）。鑰匙開關打開電源，顯示屏全亮3秒后開始顯示氣瓶各參數值，包括液量值和氣瓶壓力值，客戶可以根據剩余液量值選擇加氣時間，當液量刻度線低于液量警戒線(該數據由汽車生產商決定，液量警戒線一般為氣瓶有效容積的12.5%)，液量刻度線紅色線段，狀態燈閃爍，提醒客戶及時加液。

LNG汽車加氣時間長嗎？加一次氣要多長時間？

加注相同體積的LNG和汽柴油所需時間相當，LNG加液機最大加液能力150到200L/min,正常加氣時間為5到10分鐘。

LNG重卡、LNG客車續駛里程是多少？

LNG汽車的續駛里程由車輛配備的LNG車用瓶體積和百公里耗氣量決定的，續駛里程可以達到400到1000公里，和柴油車輛相當。例如：LNG客車配備1個275升車用瓶可以存儲大約140立方天然氣，百公里耗氣量約30方，可以續航400多公里；LNG重卡配備2個450升的車用瓶可以存儲大約500立方天然氣，百公里耗氣量50方，可以續航900多公里。

LNG汽車與柴油車輛的優勢有哪些？

1、續駛里程長：LNG重卡用450L瓶可行駛400Km以上，加氣時間短。

2、經濟性更優：車輛節約燃油成本，設備簡單，維護成本低，車輛超載效果更突出。

3、安全性高：LNG的燃點為650℃，比汽、柴油高；LNG的爆炸極限為5%—15%，爆炸極限比汽、柴油窄，且氣化后密度很低，稍有泄漏即揮發擴散。

4、清潔環保：LNG組分純，CO等排放量少，環境效果明顯。

天然氣汽車能使用柴油嗎？

目前國內天然氣重卡都是使用單一燃料，即只能使用壓縮天然氣CNG或者液化天然氣LNG，不能使用柴油。因為柴油和天然氣的工作原理差異較大，柴油為壓燃式，天然氣為點燃式，所以一般來說，汽油和天然氣可以混合使用，但柴油和天然氣不能混合使用。

LNG汽車（攪拌車、水泥罐車、長途大巴、公交車、牽引車）實際運營中的百公里氣耗量是多少，比柴油如何？

LNG汽車實際運行中百公里耗氣量與同功率的柴油車相比，根據不同氣源地氣質的影響，大約1.3方左右天然氣替代1升柴油，例如：百公里油耗40升的重卡，同功率的LNG重卡百公里耗氣大約50方左右。

為什么LNG氣罐要時不時放氣啊，會不會有危險？

若長時間不使用液化天然氣汽車，因氣瓶內液體不斷氣化，導致氣瓶內壓力不斷增大。當壓力超過一定值時，氣瓶的副安全閥自動打開泄壓，保證氣瓶安全，在副安全閥失靈或發生故障時，主安全閥工作，從而保護氣瓶的安全；當發生意外事故如氣瓶外殼被外力破壞、真空失效或系統壓力急劇升高時，主、副安全閥先后打開泄壓，保證車輛的安全。氣瓶放氣時因為主要成分為甲烷，甲烷比空氣輕，易揮發，不容易聚集發生危險。

給天然氣車加氣過程中，加氣站都要求車內不能坐人，是因為不安全嗎？

燃點對比：柴油：燃點220℃；汽油燃點427℃。但汽油揮發性強，汽油蒸汽要對柴油燃點低，液化石油氣（LPG）:燃點490℃，天然氣：燃點650℃。

比重對比：液化石油氣（LPG）:與空氣比重1.5～2，發生泄漏時往下沉積，易造成爆炸的安全隱患。天然氣（NG）：與空氣比重0.5 8～0.79，發生泄漏時會很快往空中揮發，不易造成安全隱患。

爆炸極限對比：液化石油氣（LPG）：1.7% ~ 9.7%。極易發生爆炸。天然氣（NG）：爆炸極限5～15%。不易發生爆炸。

壓力對比：LNG比CNG充氣壓力低，約為CNG充裝壓力的1/40，不易泄漏。LNG充裝壓力僅為0.5MPa，CNG充裝壓力卻是20Mpa。

從以上看出，LNG的各項安全性指標均高于常見的幾種燃料，所以以LNG為燃料的安全性相對于其它燃料來說，安全性更高。但是從為更好保證乘客安全角度，保證加氣站內明火隱患控制，對于安全風險的有效控制方面，要求加氣站加氣時車內不能坐人。

LNG的氣瓶安全嗎？

LNG儲氣瓶出廠前要進行特殊檢驗。氣瓶經常規檢驗后，還需充氣作火燒、爆炸、墜落、槍擊等試驗，合格后，方能出廠使用。

汽車用LNG氣瓶是作為一種低溫絕熱壓力容器，設計有雙層（真空）結構。內膽用來儲存低溫液態的液化天然氣，在其外壁纏有多層絕熱材料，具有超強的隔熱性能，同時夾套（兩層容器之間的空間）被抽成高真空，共同形成良好的絕熱系統。外殼和支撐系統的設計能夠承受車輛在行駛時所產生的相關外力。

內膽設計有兩級安全閥在超壓時起到保護作用。在超壓情況下首先打開的是主安全閥（開啟壓力為1.6MPa左右），其作用放散由于絕熱層和支撐正常的漏熱損失導致的壓力上升、或真空遭破壞后以及在失火條件下的加速漏熱導致的壓力上升。副安全閥（開啟壓力一般為2.4MPa以上）的壓力設定點較主安全閥高，在主安全閥失效或發生堵塞時，副安全閥啟動。

外殼在內部超壓條件下的保護是通過一個環形的抽空塞來實現的。如果內膽發生泄漏（導致夾套壓力超高），當壓力達到0.1～0.2 MPa抽空塞將打開泄壓。萬一抽空塞發生泄漏將導致真空破壞，這時可以發現外殼出現“冒汗”（大面積結水珠）甚或結霜現象。當然，在與氣瓶連接的管道末端出現的結霜或凝水現象是正常的。所有的管路、閥件都設置在氣瓶的一端，并用護環或保護罩進行防護。

車輛發生事故或碰撞時，LNG會不會容易爆炸？

LNG儲存在壓力為0.05至0.5MPa的絕熱容器中，與CNG相比，儲存壓力小，LNG氣化后密度低（比空氣輕），一旦有泄漏即揮發擴散，不易發生爆燃現象；LNG燃點為645℃，爆炸極限為5%—15%，液態LNG不容易被點燃，比汽柴油更安全。LNG儲氣瓶出廠前要進行特殊檢驗，氣瓶經常規檢驗后，還需充氣作火燒、爆炸、墜落、槍擊等試驗，車輛碰撞后一般不會發生損壞，一旦泄露，由于比空氣輕，很快揮發，不宜聚集發生燃燒。LNG汽車現在比較少，車輛售后維修如何保證？

（1）LNG汽車只是在發動機、燃料存儲供應系統和點火裝置方面和柴油車有所不同，其他方面都相同，維修總體差異比較小；

（2）汽車廠商都有配套完善的售后服務體系和服務網絡，在推廣LNG汽車前已經對銷售LNG汽車經銷商和4S店進行LNG汽車維修保養的相關培訓，能夠滿足客戶的需要，我們也會提供相應的簡單技術咨詢服務。

（3）LNG發動機及LNG存儲供應系統技術成熟，發生故障的可能性很小，而且隨著LNG汽車的日益增加，其他車輛維修廠也逐步掌握LNG汽車的維修技術，LNG汽車的維修將和柴油車一樣方便。

LNG車輛的維修費用高嗎？

與柴油車相比，主要區別在燃料供應系統，發動機使用LNG做燃料，運行平穩、噪音低、不積炭、能延長發動機使用壽命,不需經常更換機油，并且LNG不含硫化氫對缸體無腐蝕，可節約一定的維修費用。

柴油車可以改裝成LNG燃料車嗎？改裝大概要多少錢？

柴油車可以改裝成LNG燃料車由柴油機改裝的LNG車分為，雙燃料燃氣汽車，是指燃用LNG與柴油混合燃料的汽車；單燃料燃氣汽車一般為更換燃氣發動機來實現。雙燃料車輛改裝費用大約8-10萬元。

目前雙燃料重卡改裝技術如何？改造后的動力是否有影響？

LNG單燃料整車功率與同等功率柴油車相比，輸出功率完全一樣，沒有衰減；改裝雙燃料車 瞬間爆發力會有所下降，但不超過10%，車輛平穩運行后，雙燃料發動機輸出功率會略高于傳統柴油機輸出功率。

LNG車輛會不會比柴油車自重會重，對記重收費來說會不會造成損失?

根據不同生產廠家生產的LNG牽引頭配備二個450升瓶自重比柴油車牽引頭自重重一噸左右，國家對公路運輸載貨的標準為總質量不超55噸，意味著車輛本身自重越輕載貨越多，車輛自重重一噸就少拉一噸貨，車主就少掙一噸運費。

天然氣發動機與柴油發動機比哪個壽命更長，更耐用？

發動機使用LNG做燃料，運行平穩、噪音低、不積炭、不稀釋潤滑油，能延長發動機使用壽命。

水泥攪拌車能否用LNG作為燃料，效果如何？

LNG水泥攪拌車現在已經大規模使用，以下是江蘇淮安LNG水泥攪拌車運行狀況：柴油水泥攪拌車百公里綜合油耗為50L柴油，相同路況下，LNG水泥攪拌車百公里綜合氣耗為50kg，油氣兩類型車輛的能耗比為1:1.378，LNG水泥攪拌車與普通柴油車輛相比，燃料費用節約率為（7.8×50 – 6.22×50）÷7.8×50×100% = 20%。

LNG車為什么比柴油車貴，都貴在哪了？

主要是鋼瓶價格貴，因為LNG車輛需要裝置儲存液化天然氣的專用鋼瓶，雙層真空結構，汽車用LNG氣瓶是作為一種低溫絕熱壓力容器，設計有雙層（真空）結構。內膽用來儲存低溫液態的液化天然氣，在其外壁纏有多層絕熱材料，具有超強的隔熱性能，同時夾套（兩層容器之間的空間）被抽成高真空，共同形成良好的絕熱系統。其次是天然氣發動機是新型產品，初期銷量規模小，研發費用分攤比高。隨著銷量的增加，發動機價格會越來越接近甚至低于柴油發動機。

LNG鋼瓶需要定期年檢嗎？

能和車輛一起年檢嗎？LNG鋼瓶需要定期檢驗，但目前國家目前還沒有明確規定，一旦出現問題由鋼瓶廠家負責維修；天然氣鋼瓶的使用年限達10年以上，從客戶購車起，基本不用更換氣瓶；LNG鋼瓶是單獨檢驗，車輛年檢時不對鋼瓶進行檢驗。

放散氣挺可惜的，有什么辦法能夠減少鋼瓶放散嗎？

LNG氣化是由其自身特點決定的，車輛正常行駛或短暫停運氣化的LNG直接進入發動機燃燒，不會發生放散現象；長期停駛時LNG自然氣化后會造成LNG車用瓶內壓力提高，達到LNG車用瓶安全閥設定壓力時會起跳，釋放氣體，降低壓力。車載鋼瓶放散量有限，回收不經濟，一般采取放散氣體自然揮發方式。

LNG氣瓶結霜與漏氣是一回事嗎？

LNG氣瓶出現“結霜”現象的原因可能有：

（1）當氣瓶內膽的真空受到破壞，使絕熱能力下降或失效，這時可能發生氣瓶外殼“冒汗”或“結霜”現象，這種故障不是漏氣現象。但若車輛出現這種現象，應報氣瓶廠家維修。

（2）當氣瓶管路出現泄漏時，在漏點可能出現“冒汗”或“結霜”現象，這種故障屬于漏氣，當車輛出現漏氣故障，應檢修后在使用車輛。

（3）當車輛運行使用LNG時，在氣瓶頭部會出現“ 冒汗”或“結霜”現象，這不是故障，而是一種正常現象。

（4）當環境溫度過低或空氣濕度過大，這時可能發生氣瓶外殼“冒汗”或“結霜”現象，這不是故障，而是一種正常現象。

使用LNG汽車國家有什么優惠政策嗎？

使用LNG車輛能夠減少尾氣排放，符合國家節能減排的要求，國家和地方對于LNG車輛有相應的優惠政策。例如：財政部交通運輸部關于印發《交通運輸節能減排專項資金管理暫行辦法》的通知、交通運輸節能減排專項資金申請指南等文件鼓勵車輛使用清潔能源。

公交車用LNG單燃料還能享受燃油補貼嗎？

公交企業屬于社會公用事業，在城市中按照政府核定的線路、站點、票價和時刻表營運，公交車原來大部分都是耗油或油氣兩用，政府給予燃油補貼，現在公交車改用LNG單燃料后，只是燃料發生了變化，公交企業可以申請燃料補貼，具體標準可以參照替代燃油的量進行折算，相關具體政策都是地方政府決策制定的。此外，使用天然氣后能夠大幅度降低二氧化碳等汽車尾氣污染物的排放，為地方政府政府節能減排做出貢獻，可以根據國家財務部、交通運輸部《交通運輸節能減排專項資金管理暫行辦法》申請節能減排專項資金。

使用LNG汽車需要注意些什么？

(1)出車前LNG汽車的日常維護除普通車輛的日常維護項目外，還應該注意：上車首先檢查燃氣泄漏報警器，如遇有故障燈亮應及時查找原因和報修，不得擅自操作；連接檢查檢視氣瓶、支架等連接部件的緊固情況；檢查轉換開關、儀表、閥門、管道連接、固定情況。氣量檢查接通電源，打開點火開關（不起動發動機），檢查氣量顯示器指示的氣量，確保不影響正常運營；漏電檢查檢查點火系統和發電機是否有漏電、跳火現象，如有應及時修理；保持LNG發動機清潔，特別是電氣設備不得有油污。

(2)起動、行車：在起動發動機前，拉好手制動，將變速箱換至空檔，在空檔狀態下，將鑰匙轉到“ON”位置，接通電源后檢查各儀表指示是否正常后等待幾秒后方可啟動；起動時間不能超過10秒，連續起動要間隔半分鐘；如果連續啟動3次不能正常啟動，則應仔細檢查燃氣系統以及電路系統有無故障；每次起動后，禁止大油門運轉冷態發動機，冷起動后應逐漸提高發動機轉速。起動時嚴禁猛踩油門。應怠速運行發動機1－3分鐘才能逐步提速起步；發動機怠速時間嚴禁超過10分鐘。行車中應勤觀察各儀表（開關）的工作情況，注意聽察涉及氣路的異響，選擇良好路面行駛，防止對氣路系統形成撞擊，當感覺到有異常情況時，應立即停車，檢查確認安全后繼續運行。否則應立即報修，等待處理。

第二篇：LNG汽車常見問題解答

1、LNG的主要用途有哪些？

1、民用： 賓館、酒店等公共設施。具有安全、方便、快捷、污染少等特點。

2、車船用：作為車船燃料使用，經濟效益好、環保性能高等特點。

3、冷能用：作為冷源，速冷食品以及塑料、橡膠、海水淡化等用途。

4、工業用：作為工業氣體燃料，用于玻璃廠、陶瓷廠、發48電廠等。

2、LNG加氣站分類及特點有哪些？

標準式加氣站：主要適應于加氣在3 – 5萬m3 /天，占地面積在5 – 7畝左右，主要用于車輛較多、充裝量較大的重型卡車或大 城市的城際大巴。3-5萬m3 /天標準加氣站主要設備 按雙泵雙液機設備配置。

撬裝式加氣站：設備體積小巧，占地面積小；工廠制造，現場基本無施工，制造成本低；撬裝設計，可以整體遷移，轉到其他地方使用；設備工廠制造，供貨周期短，投入運行快。

L-CNG加氣站：該站綜合性能比較強，既能充裝LNG，又能充裝CNG；在LNG價格比較優惠的地區及較大的城市能充分發揮其效能。

3、各類天然氣加氣站的區別？

根據氣源的不同情況，可以分為以下幾類加氣站：

LNG加氣站：槽車運輸LNG氣源，通過低溫泵和LNG加氣機直接給LNG車輛充裝LNG，包括城際大巴、公交、重卡。

CNG 加氣站：

1、母站：管道燃氣供應CNG 氣源，可以給槽車，也可以給公交出租車加氣

2、標準站：管道燃氣供應CNG氣源

3、子站：槽車供應CNG氣源，可給公交、出租車加氣；

LNG/CNG加氣站：LNG和CNG 兩種氣源合建站，可給城際大巴、公交、出租車、重卡加氣；

L-CNG加氣站：LNG通過增壓、汽化后轉化成CNG 氣源，通過柱塞泵和高壓汽化器將LNG 氣化后變成CNG,由CNG加氣機給CNG公交、出租車進行加氣； LNG/L-CNG加氣站：LNG氣源，CNG氣源是通過LNG轉化而成，是LNG加氣站和L-CNG 站的合并，既可以給LNG車輛加氣也可以給CNG車輛加氣，像城際大巴、公交、出租車、重卡等。

4、一立方的天然氣等于多少升柴油？天然氣和柴油間如何換算？

一立方天然氣熱值等于0.86升柴油；一方天然氣產生的動力與0.75-0.8升柴油相當。

5、LNG加氣站有的地方用公斤計量，有的地方用立方米計量，哪個更合理？

用公斤計量和用立方米計量實質是一樣的，只是計量單位不同，根據地方習慣確定，不同地區計量單位應根據客戶情 況、市場情況等綜合分析而確定。使用立方米為單位可以根據氣化率的變化而調整銷售價格，公斤則是較為普遍的計量單位。絕大部分LNG加氣機都采用質量流量計，以公斤計量銷售偏差最小，若以標方計量銷售，需考慮氣化率指標定價，確保客戶利益。

6、為什么LNG加注時有時加的多有時加的少？（LNG充裝經常出現450L的車載瓶罐，充裝的LNG質量超200KG）

由于氣源產地不同，LNG的密度、熱值、氣化率、溫度會稍有差別，加注量略有波動，不影響加氣計量的準確性。LNG加氣設備按照國家標準，定期由國家計量部門定期檢定，確保計量的準確定。

7、LNG汽車加氣量怎么計算？怎么知道何時需要加氣？

（1）LNG的計量方式與汽柴油相同，一種是以體積來計量，計量單位是立方米（汽柴油計量單位是升），一種是以質量來計量，計量單位是公斤（汽柴油計量單位是噸）。根據不同地區的計量習慣，可以選擇立方米或公斤作為計量單位。無論用什么計量單位，加氣量是相同的，加氣機都可以自動計量，換算關系是1公斤LNG大約與1.4方立方米天然氣相當。

（2）LNG汽車駕駛室裝有LNG液量顯示器，與汽柴油車的油量顯示一樣，液量顯示部分包括液量圖標、液量刻度線、液量指針和液量值（L）。鑰匙開關打開電源，顯示屏全亮3秒后開始顯示氣瓶各參數值，包括液量值和氣瓶壓力值，客戶可以根據剩余液量值選擇加氣時間，當液量刻度線低于液量警戒線(該數據由汽車生產商決定，液量警戒線一般為氣瓶有效容積的12.5%)，液量刻度線紅色線段，狀態燈閃爍，提醒客戶及時加液。

8、LNG汽車加氣時間長嗎？加一次氣要多長時間？

加注相同體積的LNG和汽柴油所需時間相當，LNG加液機最大加液能力150到200L/min ,正常加氣時間為5到10分鐘。

9、LNG重卡、LNG客車續駛里程是多少？

LNG汽車的續駛里程由車輛配備的LNG車用瓶體積和百公里耗氣量決定的，續駛里程可以達到400到1000公里，和柴油車輛相當。例如：LNG客車配備1個275升車用瓶可以存儲大約140立方天然氣，百公里耗氣量約30方，可以續航400多公里；LNG重卡配備2個450升的車用瓶可以存儲大約500立方天然氣，百公里耗氣量50方，可以續航900多公里。

10、LNG汽車與柴油車輛的優勢有哪些？

1、續駛里程長：LNG重卡用450L瓶可行駛400Km以上，加氣時間短。

2、經濟性更優：車輛節約燃油成本，設備簡單，維護成本低，車輛超載效果更突出。

3、安全性高：LNG的燃點為650℃，比汽、柴油高；LNG的爆炸極限為5%—15%，爆炸極限比汽、柴油窄，且氣化后密度很低，稍有泄漏即揮發擴散。

4、清潔環保：LNG組分純，CO等排放量少，環境效果明顯。

11.天然氣汽車能使用柴油嗎？

目前國內天然氣重卡都是使用單一燃料，即只能使用壓縮天然氣CNG或者液化天然氣LNG，不能使用柴油。因為柴油和天然氣的工作原理差異較大，柴油為壓燃式，天然氣為點燃式，所以一般來說，汽油和天然氣可以混合使用，但柴油和天然氣不能混合使用。

12、我更換了LNG汽車，要是你們的加氣站停氣了怎么辦？

（1）新奧在全國1 0 0多個城市經營城市燃氣和加氣站業務，從來沒有因為新奧的原因發生大面積停氣現象，有著良好的品牌形象和信譽保證；

（2）新奧在廣西北海、山西沁水、寧夏銀川、湖南長沙建有自己的LNG工廠，現在日生產能力110萬方，到2013年河北唐山、河南平頂山、江蘇溧陽、江西九江和云南曲靖的LNG工廠都將投產，產能將達到330萬方/日，并根據市場需求情況擴大產能，完全能夠保證客戶的需要。

（3）新奧能源下轄新奧能源物流有限公司,具備一級道路運輸資質，是目前國內最大的非管輸LNG天然氣承運商，擁有天然氣專用運力500多臺，外協運力1500多臺，年運送能力達到6.5億方，曾多次克服冬季資源緊缺、大雪封路及凍雨災害的困難，保證按時將LNG運送給客戶；

（4）新奧建有LNG應急保障體系，眾多項目城市建有LNG儲配站，在長株潭地區還建有規模龐大的儲備庫，儲氣能力1200萬方,在其他區域和重點城市也將建設多座儲備庫。新奧能源現有LNG儲配站60多座，LNG儲存能力約1600萬方，可為各地發展車船用LNG業務提供氣源保障和儲備調劑，同時在各地配備移動加液車解決臨時加氣等問題。

13、LNG加注站網點較少，如何解決在外地加不到氣的問題？

目前LNG加氣站網點確實不像加油站布點廣，加氣方便，但隨著發展，會不斷增加，經常跑外地運輸的客戶可依據續航的里程定制好加氣站點，比較發達的省份已基本滿足了LNG汽車的續航要求，新奧能源已經在全國建設LNG加氣站，并與全國各大經營商建立同盟關系，站點資源豐富，如您需要在外地加氣，可聯系新奧能源，新奧能源可以根據行駛里程、行駛路線定制相應加氣服務站點，愿意為您服務。

14.車輛停運十天以上、LNG放散完后或車輛在外出現故障時，如何解決臨時加氣問題？

（1）盡量避免車輛停運；

（2）車輛出現故障新奧可以提供移動加液車或撥打95158救援。（3）放散完后需重新遇冷鋼瓶，初次加液耗氣量較多。

15.LNG加氣站的建設有那么快嗎？手續不完備停氣了怎么辦？

撬裝站在設備到位、具備施工條件的情況下需要半個月時間達到試運行；加氣站的建設運營，一般情況下都取得政府的同意，一般情況下不會停氣，有應急解決措施。

16、你們的氣源都是哪來的，有保障嗎？

新奧能源現自有北海、晉城、銀川、長沙四座LNG工廠，生產量達110萬方/日，尚有唐山、平頂山、溧陽、九江LNG工廠正在建設，2012年將陸續投產，將新增產量140萬方/日； 在全國建有60多座LNG儲配站，儲配能力達3000多萬方；與國內主要LNG工廠均簽有長期采購協議，外部長期協議量320萬方/日。

17、我車輛經常在* *線路上運行，你們在這條線路上有LNG加氣站嗎？

目前我們在全國大部分地區都有LNG加氣站站點，經常跑外地運輸的客戶可依據續航的里程定制好加氣站點，比較發達的省份已基本滿足了LNG汽車的續航要求，如您是一名客戶，可聯系新奧能源（021-51876027-8511 周先生），我們可為您定制好加氣站點，為您做好服務。新奧可以根據行駛里程、行駛路線定制相應加氣服務站點。.一座LNG撬裝站日加氣能力有多大？ 大約能夠多少輛車使用？

LNG加氣站日加氣能力不同，主要與設備配置有關，包括儲罐、潛液泵、LNG加液機的數量，一般撬裝站的配備為一臺60立方米儲罐，一臺潛液泵、一臺加液機，加氣能力約1萬立方米，可滿足約50臺公交車加氣。

19、車輛經常在礦區及復雜路況行駛，天然氣會不會動力不足？

天然氣車輛的發動機是發動機廠家根據天然氣的特點設計的，能夠滿足天然氣車輛的正常行駛，發動機的額定輸出功率是同樣的，對于陡坡、超載等特殊狀況，天然氣汽車起步加速時間稍長，但動力性不下降，客戶可以按照自己車輛行駛狀況和車輛載重情況，根據車輛廠商的推薦，選擇合適車型。同時天然氣發動機在設計時已經考慮爆發力不足的情況，通過瞬間增加氣量的方法來增加爆發力，氣柴油比可達1.4，所以原廠設計的發動機基本不存在爆發力不足的情況。

20、聽說天然氣動力不如柴油車動力好，是這樣嗎？

不是的，動力性不降低。這是因為汽車動力指標主要由最高車速、加速能力和最大爬坡度來表示，其影響因素有發動機的功率和扭矩，變速器的傳動比分布，整車的總體重量等重要指標，天然氣為動力與柴油的比較動力性能同功率的發動機基本相同，只是其加速性能略有下降。.使用LNG怎么有的時候感覺經濟性比較好，有的時候好像不理想呢？是不是氣的質量有問題？

由于產地不同，氣源熱值稍有差別，可能會對經濟性有一些影響，但影響不大，此外，與車輛行駛環境、駕駛員熟練程度，駕駛習慣也有一定關系。

22、使用LNG汽車需要注意些什么？

答:(1)出車前LNG汽車的日常維護除普通車輛的日常維護項目外，還應該注意：上車首先檢查燃氣泄漏報警器，如遇有故障燈亮應及時查找原因和報修，不得擅自操作；連接檢查檢視氣瓶、支架等連接部件的緊固情況；檢查轉換開關、儀表、閥門、管道連接、固定情況。氣量檢查接通電源，打開點火開關（不起動發動機），檢查氣量顯示器指示的氣量，確保不影響正常運營；漏電檢查檢查點火系統和發電機是否有漏電、跳火現象，如有應及時修理；保持LNG發動機清潔，特別是電氣設備不得有油污。

(2)起動、行車:在起動發動機前，拉好手制動，將變速箱換至空檔，在空檔狀態下，將鑰匙轉到“ON”位置，接通電源后檢查各儀表指示是否正常后等待幾秒后方可啟動；起動時間不能超過10秒，連續起動要間隔半分鐘；如果連續啟動3次不能正常啟動，則應仔細檢查燃氣系統以及電路系統有無故障；每次起動后，禁止大油門運轉冷態發動機，冷起動后應逐漸提高發動機轉速。起動時嚴禁猛踩油門。應怠速運行發動機1－3分鐘才能逐步提速起步；發動機怠速時間嚴禁超過10分鐘。行車中應勤觀察各儀表（開關）的工作情況，注意聽察涉及氣路的異響，選擇良好路面行駛，防止對氣路系統形成撞擊，當感覺到有異常情況時，應立即停車，檢查確認安全后繼續運行。否則應立即報修，等待處理。

(3)回場后應檢查氣瓶、支架、管路、儀表、閥門等固定情況；檢查氣路有無漏氣現象；檢查汽化器熱水循環水路的工作情況；清潔各儀表、閥外表面，關閉閥門；檢查氣瓶廂的封閉情況和加氣孔蓋的鎖止情況，如有異常應立即報修處理；定期檢查、清潔發動機的空濾；定期清潔供氣系統中的天然氣過濾器；定期清潔減壓器的加熱水循環系統。

(4)LNG駕駛操作要領：LNG車同柴油車在駕駛操作上大體相同，但由于LNG發動機的本身特性，我們在實際駕駛時需注意以下幾點： 起步，時應嚴格遵守一檔起步的原則，嚴禁二檔起步。換擋，在行駛中可根據行駛的道路狀況和車輛載重選擇合適的檔位，盡可能以經濟車速行駛。正確駕駛、平穩地接合離合器，及時換檔，避免突然加速和緊急制動，減少車身和動力系統的負荷。由于燃氣車輛低轉速時輸出功率不高，使用的是電子點火系統，所以應改變以前的柴油車駕駛習慣，在加檔前可適當提速，但仍應盡量保持發動機轉速在1200 – 1500轉/分時換檔。

(5)使用過程中的其他注意事項：檢漏時，駕駛員師傅們可用礦泉水瓶自制肥皂液并隨車攜帶，以方便檢查漏點；如有天然氣泄漏，處理時需做好自身防護工作，各類接頭盡量以緊固為主，避免拆卸管路接頭，以防低溫腐蝕；處理故障時如閥門被冰塊凍住，應用溫水解凍后，方可操作，不能用錘或其他物件敲擊冰塊；不得用手直接接觸低溫管道，如需接觸需戴好防護手套；在充裝、維修時需戴護目鏡、臉罩、絕熱手套，禁止駕駛員私自操作；嚴禁用水沖洗發動機，當車輛過積水路面時，應減速慢過，以避免水濺到電器元件上，造成短路，損壞電控系統；氣瓶在熄火后或行駛中閥體周邊出現結冰屬于正常現象，如果發動機長時間不工作而閥體周邊出現結冰，說明閥體出現泄漏，應即時處理。

23、LNG價格會不會和柴油一樣波動很大？等我們換了LNG汽車后LNG漲價了怎么辦？

國內投運的LNG工廠已經有50多個，LNG接收站5個，在建的LNG工廠和接收站有數十個，隨著西氣東輸、川氣東送、海氣上岸、國外天然氣大規模引進、國內管網建設日趨完善，管輸氣資源日益充裕，LNG將主要用于車船燃料，LNG資源充足，LNG價格相對穩定，受國際原油價格波動影響很小；新奧和客戶簽訂長期合作協議，約定LNG銷售價格和價格變動機制，明確雙方責任義務，保障雙方的共同利益。

24.單燃料LNG重卡相比柴油重卡大約能節省多少燃料成本？

根據不同地區的柴油價格和LNG價格，使用LNG車后，節約的成本不同：以山東為例，柴油車百公里耗油量50升，每升柴油7.32元；油氣比按照1:1.3計算，LNG重卡百公里耗氣應為65立方米，每立方米LNG銷售價格按照4.2元計算，柴油車百公里燃料費為366元LNG車百公里燃料費為273元，百公里節省燃料費93元。不同地方、不同時期，不同車輛節約程度不同，一般節約20%以上。

25.LNG汽車（攪拌車、水泥罐車、長途大巴、公交車、牽引車）實際運營中的百公里氣耗量是多少，比柴油如何？

LNG汽車實際運行中百公里耗氣量與同功率的柴油車相比，根據不同氣源地氣質的影響，大約1.3方左右天然氣替代1升柴油，例如：百公里油耗40升的重卡，同功率的LNG重卡百公里耗氣大約50方左右。

26．為什么LNG氣罐要時不時放氣啊，會不會有危險？ 若長時間不使用液化天然氣汽車，因氣瓶內液體不斷氣化，導致氣瓶內壓力不斷增大。當壓力超過一定值時，氣瓶的副安全閥自動打開泄壓，保證氣瓶安全，在副安全閥失靈或發生故障時，主安全閥工作，從而保護氣瓶的安全；當發生意外事故如氣瓶外殼被外力破壞、真空失效或系統壓力急劇升高時，主、副安全閥先后打開泄壓，保證車輛的安全。氣瓶放氣時因為主要成分為甲烷，甲烷比空氣輕，易揮發，不容易聚集發生危險。

27．給天然氣車加氣過程中，加氣站都要求車內不能坐人，是因為不安全嗎？

燃點對比：柴油：燃點220℃；汽油燃點427℃。但汽油揮發性強，汽油蒸汽要對柴油燃點低，液化石油氣（LPG）:燃點490℃，天然氣：燃點650℃。

比重對比：液化石油氣（LPG）:與空氣比重1.5～2，發生泄漏時往下沉積，易造成爆炸的安全隱患。天然氣（NG）：與空氣比重0.5 8～0.79，發生泄漏時會很快往空中揮發，不易造成安全隱患。

爆炸極限對比：液化石油氣（LPG）：1.7% ~ 9.7%。極易發生爆炸。天然氣（NG）：爆炸極限5～15%。不易發生爆炸。

壓力對比：LNG比CNG充氣壓力低，約為CNG充裝壓力的1/40，不易泄漏。LNG充裝壓力僅為0.5MPa，CNG充裝壓力卻是20Mpa。

從以上看出，LNG的各項安全性指標均高于常見的幾種燃料，所以以LNG為燃料的安全性相對于其它燃料來說，安全性更高。但是從為更好保證乘客安全角度，保證加氣站內明火隱患控制，對于安全風險的有效控制方面，要求加氣站加氣時車內不能坐人。

28.LNG的氣瓶安全嗎？

LNG儲氣瓶出廠前要進行特殊檢驗。氣瓶經常規檢驗后，還需充氣作火燒、爆炸、墜落、槍擊等試驗，合格后，方能出廠使用。

汽車用LNG氣瓶是作為一種低溫絕熱壓力容器，設計有雙層（真空）結構。內膽用來儲存低溫液態的液化天然氣，在其外壁纏有多層絕熱材料，具有超強的隔熱性能，同時夾套（兩層容器之間的空間）被抽成高真空，共同形成良好的絕熱系統。外殼和支撐系統的設計能夠承受車輛在行駛時所產生的相關外力。

內膽設計有兩級安全閥在超壓時起到保護作用。在超壓情況下首先打開的是主安全閥（開啟壓力為1.6MPa左右），其作用放散由于絕熱層和支撐正常的漏熱損失導致的壓力上升、或真空遭破壞后以及在失火條件下的加速漏熱導致的壓力上升。副安全閥（開啟壓力一般為2.4MPa以上）的壓力設定點較主安全閥高，在主安全閥失效或發生堵塞時，副安全閥啟動。

外殼在內部超壓條件下的保護是通過一個環形的抽空塞來實現的。如果內膽發生泄漏（導致夾套壓力超高），當壓力達到0.1～0.2 MPa抽空塞將打開泄壓。萬一抽空塞發生泄漏將導致真空破壞，這時可以發現外殼出現“ 冒汗”（大面積結水珠）甚或結霜現象。當然，在與氣瓶連接的管道末端出現的結霜或凝水現象是正常的。所有的管路、閥件都設置在氣瓶的一端，并用護環或保護罩進行防護。

29.車輛發生事故或碰撞時，LNG會不會容易爆炸？

LNG儲存在壓力為0.05至0.5MPa的絕熱容器中，與CNG相比，儲存壓力小，LNG氣化后密度低（比空氣輕），一旦有泄漏即揮發擴散，不易發生爆燃現象；LNG燃點為645℃，爆炸極限為5%—15%，液態LNG不容易被點燃，比汽柴油更安全。LNG儲氣瓶出廠前要進行特殊檢驗，氣瓶經常規檢驗后，還需充氣作火燒、爆炸、墜落、槍擊等試驗，車輛碰撞后一般不會發生損壞，一旦泄露，由于比空氣輕，很快揮發，不宜聚集發生燃燒。

30.LNG汽車現在比較少，車輛售后維修如何保證？

（1）LNG汽車只是在發動機、燃料存儲供應系統和點火裝置方面和柴油車有所不同，其他方面都相同，維修總體差異比較小；

（2）汽車廠商都有配套完善的售后服務體系和服務網絡，在推廣LNG汽車前已經對銷售LNG汽車經銷商和4S店進行LNG汽車維修保養的相關培訓，能夠滿足客戶的需要，我們也會提供相應的簡單技術咨詢服務。

（3）LNG發動機及LNG存儲供應系統技術成熟，發生故障的可能性很小，而且隨著LNG汽車的日益增加，其他車輛維修廠也逐步掌握LNG汽車的維修技術，LNG汽車的維修將和柴油車一樣方便。

31.LNG車輛的維修費用高嗎？

與柴油車相比，主要區別在燃料供應系統，發動機使用LNG做燃料，運行平穩、噪音低、不積炭、能延長發動機使用壽命,不需經常更換機油，并且LNG不含硫化氫對缸體無腐蝕，可節約一定的維修費用。

32.柴油車可以改裝成LNG燃料車嗎？改裝大概要多少錢？

柴油車可以改裝成LNG燃料車由柴油機改裝的LNG車分為，雙燃料燃氣汽車，是指燃用LNG與柴油混合燃料的汽車；單燃料燃氣汽車一般為更換燃氣發動機來實現。雙燃料車輛改裝費用大約8-10萬元。

33.目前雙燃料重卡改裝技術如何？ 改造后的動力是否有影響？

LNG單燃料整車功率與同等功率柴油車相比，輸出功率完全一樣，沒有衰減；改裝雙燃料車 瞬間爆發力會有所下降，但不超過10%，車輛平穩運行后，雙燃料發動機輸出功率會略高于傳統柴油機輸出功率。

34.LNG車輛會不會比柴油車自重會重，對記重收費來說會不會造成損失?

根據不同生產廠家生產的LNG牽引頭配備二個450升瓶自重比柴油車牽引頭自重重一噸左右，國家對公路運輸載貨的標準為總質量不超55噸，意味著車輛本身自重越輕載貨越多，車輛自重重一噸就少拉一噸貨，車主就少掙一噸運費。

35.天然氣發動機與柴油發動機比哪個壽命更長，更耐用？

發動機使用LNG做燃料，運行平穩、噪音低、不積炭、不稀釋潤滑油，能延長發動機使用壽命。

36.水泥攪拌車能否用LNG作為燃料，效果如何？

LNG水泥攪拌車現在已經大規模使用，以下是江蘇淮安LNG水泥攪拌車運行狀況：柴油水泥攪拌車百公里綜合油耗為50L柴油，相同路況下，LNG水泥攪拌車百公里綜合氣耗為50kg，油氣兩類型車輛的能耗比為1:1.378，LNG水泥攪拌車與普通柴油車輛相比，燃料費用節約率為（7.8×50 – 6.22×50）÷7.8×50×100% = 20%。

37.LNG車為什么比柴油車貴，都貴在哪了？

主要是鋼瓶價格貴，因為LNG車輛需要裝置儲存液化天然氣的專用鋼瓶，雙層真空結構，汽車用LNG氣瓶是作為一種低溫絕熱壓力容器，設計有雙層（真空）結構。內膽用來儲存低溫液態的液化天然氣，在其外壁纏有多層絕熱材料，具有超強的隔熱性能，同時夾套（兩層容器之間的空間）被抽成高真空，共同形成良好的絕熱系統。其次是天然氣發動機是新型產品，初期銷量規模小，研發費用分攤比高。隨著銷量的增加，發動機價格會越來越接近甚至低于柴油發動機。

38.LNG鋼瓶需要定期年檢嗎？能和車輛一起年檢嗎？

LNG鋼瓶需要定期檢驗，但目前國家目前還沒有明確規定，一旦出現問題由鋼瓶廠家負責維修；天然氣鋼瓶的使用年限達10年以上，從客戶購車起，基本不用更換氣瓶；LNG鋼瓶是單獨檢驗，車輛年檢時不對鋼瓶進行檢驗。

39.放散氣挺可惜的，有什么辦法能夠減少鋼瓶放散嗎？

LNG氣化是由其自身特點決定的，車輛正常行駛或短暫停運氣化的LNG直接進入發動機燃燒，不會發生放散現象；長期停駛時LNG自然氣化后會造成LNG車用瓶內壓力提高，達到LNG車用瓶安全閥設定壓力時會起跳，釋放氣體，降低壓力。車載鋼瓶放散量有限，回收不經濟，一般采取放散氣體自然揮發方式。

40.LNG氣瓶結霜與漏氣是一回事嗎？

LNG氣瓶出現“結霜”現象的原因可能有：（1）當氣瓶內膽的真空受到破壞，使絕熱能力下降或失效，這時可能發生氣瓶外殼“冒汗”或“結霜”現象，這種故障不是漏氣現象。但若車輛出現這種現象，應報氣瓶廠家維修。

（2）當氣瓶管路出現泄漏時，在漏點可能出現“冒汗”或“結霜”現象，這種故障屬于漏氣，當車輛出現漏氣故障，應檢修后在使用車輛。

（3）當車輛運行使用LNG時，在氣瓶頭部會出現“ 冒汗”或“結霜”現象，這不是故障，而是一種正常現象。

（4）當環境溫度過低或空氣濕度過大，這時可能發生氣瓶外殼“冒汗”或“結霜”現象，這不是故障，而是一種正常現象。

41.我購買的柴油車3年后要當做二手車處理，LNG汽車會不會不好出手？

LNG二手車會好出手的，因為只要LNG比柴油有明顯的經濟性優勢存在，LNG汽車有發展前景，目前LNG車輛大約有四萬輛，未來還會不斷發展壯大，未來數年內加大力度建設LNG氣站，LNG氣站網點數量會成倍增加，另外隨著用戶對LNG汽車認知度的提高和國家不斷出臺對節能環保的LNG汽車的支持政策，所以其正規的二手車市場很快誕生的，目前掌握LNG二手車信息是非正規渠道的，如新疆開展LNG業務比較早地區收購LNG汽車等等，擔心LNG二手車不好出手是不客觀的，目前只是因為LNG汽車剛剛起步發展階段，LNG是個新興產品，會越來越緊俏。

42.LNG客車、重卡、公交主要有哪些生產企業？

隨著車用LNG業務的迅速發展和天然氣發動機、LNG供氣系統技術的不斷完善，國內主要汽車生產商都有LNG整車推向市場。LNG客車和公交主要生產商有鄭州宇通、蘇州金龍、廈門金龍、丹東黃海、聊城中通、重慶恒通、合肥安凱、福田歐輝客車等；LNG重卡主要生產商有陜汽重卡、中國重汽、北方奔馳、福田歐曼、東風天龍、集瑞聯合重卡、華菱重卡、一汽解放等，此外水泥攪拌車、裝載機、自卸車等大部分原可以配置柴油發動機的車輛現在都有以LNG作為燃料的車型推向市場。目前新奧能源已與陜汽、重汽、金龍、宇通等整車生產廠商簽訂戰略合作協議，共同發展LNG業務。

43.目前生產LNG車輛的廠商和發動機廠商有哪些？

整車生產廠家有： 陜汽、東風、長安、重汽、金龍、宇通等。發動機生產廠家：濰柴、玉柴、無柴、上柴等目前我公司已與陜汽、重汽、金龍、宇通等整車生產廠商簽訂合作戰略協議，共同發展LNG業務。

44.使用LNG汽車國家有什么優惠政策嗎？

使用LNG車輛能夠減少尾氣排放，符合國家節能減排的要求，國家和地方對于LNG車輛有相應的優惠政策。例如：財政部交通運輸部關于印發《交通運輸節能減排專項資金管理暫行辦法》的通知、交通運輸節能減排專項資金申請指南等文件鼓勵車輛使用清潔能源。

45.公交車用LNG單燃料還能享受燃油補貼嗎？

公交企業屬于社會公用事業，在城市中按照政府核定的線路、站點、票價和時刻表營運，公交車原來大部分都是耗油或油氣兩用，政府給予燃油補貼，現在公交車改用LNG單燃料后，只是燃料發生了變化，公交企業可以申請燃料補貼，具體標準可以參照替代燃油的量進行折算，相關具體政策都是地方政府決策制定的。此外，使用天然氣后能夠大幅度降低二氧化碳等汽車尾氣污染物的排放，為地方政府政府節能減排做出貢獻，可以根據國家財務部、交通運輸部《交通運輸節能減排專項資金管理暫行辦法》申請節能減排專項資金。

第三篇：銷售常見問題解析

1、網上了解價格

這類客戶通常會連續轉過幾家店后才會決定是否購買，例如：在網上了解的是N518 來店后直接會問N518多少錢，銷售員在這時千萬不要直接報價，因為我們在價格方面沒有優勢，當客戶問這個問題的時候是一個非常好的轉型的一個機會，通常我會說您好，電紙書N518系列有三款型號，不知道您說的是哪款，此時要看是什么樣的客戶，如果是那種比較強勢的就不要吞吞吐吐的，要自信一些很有底氣的報價：N518我們全國的統一價格是XXXX當客戶轉身要走時一定不要放棄，緊跟一句您就看中518了嗎？我們最新的產品您了解一下吧，我給您介紹一下好嗎？通常客戶都會停下腳步 等待你介紹，這時的機會很大，接下來你可以問客戶問題，先要了解客戶對產品到底了解多少，根據他所了解的一些產品相關的東西你在給出相應的問題和解決方案，切忌：想盡一切辦法給客戶驚喜，最后讓他覺得你給介紹的產品才是他最需要的2、長期關注價格 經常在賣場里詢價

這類客戶通常會給銷售員一個假象，路過我們店面的時候會順嘴問一句你家XX電紙書多少錢，你說什么都不理你就讓你報下價格，然后轉身就走。

如果遇到類似這樣的客戶大家不要慌，越是這樣的客戶說明他越是謹慎，越是謹慎就越經不住我們嚇，這時最好的武器就是我們的形象，案例：我遇到過這樣的一個客戶，產品是N518我報的價格是2980 當時他就很生氣說了一句你們怎么這么貴，當時我就覺得有希望，我說不是我們價格貴，是全國都是這個價格 我又問他您問到多少錢啊 他很不情愿的告訴我2600 我就笑了一下您被騙了 應該是2300當我說完這句話的時候客戶就是滿臉的疑問緊接著我就很熱情的把請進店里 跟他說產品售后，給他贈值服務，跟他講為什么價格亂為什么什么價格都有在問他相關的需求為他提出其他的方案，有的時候即使你知道客戶就是要高端你也要適當的推下低端很真誠的和他說：其實您用510就可以了完全不用那么高端的，讓客戶覺得你是在為他著想，是客戶更加信任你 最后價格絕對不是問題。

備注（請專賣店的銷售人員利用好自己的形象，我們的專業術語，一定把講客戶和談客戶區分開，朋友式的聊天和買賣式的交易談話給人的感覺是完全不一樣的，一切為客戶著想 最后肯定是談客戶，而不是講客戶）

3.預算有限

我比較喜歡轉型，我相信每個人都有自己的銷售方法 我最喜歡的還是轉型，因為在轉型的過程當中你又機會和客戶走的更近，讓客戶更加信任你，主要表現就是你在不停的為他解決問題，最后你選出的產品肯定是可以滿足他需求的產品。轉型的前提 對產品要非常了解，任意拿出幾款產品都要說出各自的優勢 無論高端低端都有個自得特點 用心就能想的出來 簡單列舉幾個低端比高端價格除外。1 N510D20510待機時間超長 一定比d20長 穩定性好體積小 比D20更方便攜帶n517n518單手持的時候517明顯比518要舒服，518指示燈亮影響看書，體積比517重，筆沒有517的舒服

3d21f21我想每個人對這兩款產品都很尷尬 有 D21的時候針對個人用戶F21就不知道該怎么推了 不過個人發

現F21翻頁速度要比D21快很多

請大家根據個人需求去推相應的產品，不要一味的推高端，一切為客戶著想才是一個成功的銷售員該做的。

產品技巧的演示

位置: 這里的位置是指你和客戶所站的位置，1、你要站在一個不容易讓客戶很輕松就出店的位置可以理解為客戶前面讓他不容易擺脫你

2、盡量的和客戶站的近一些 特別是中老年人 因為賣場一般都比較雜亂 有的時候你在介紹產品的時候容易聽不清對你銷售產品有影響

3、盡量讓客戶正面對著一個死角這樣的話在你給他演示的過程中避免它看見代理商的店 讓他的注意力集中在你的店里防止出去詢價

演示內容:產品演示前盡量裝一些市面上比較暢銷的書籍，或比較不錯的有聲讀物，來吸引客戶，初步讓客戶產生興趣，盡量找一些比較不錯的PDF文件或者反復試驗不出問題的 WORD文檔，在演示帶手寫的電子書的時候一定要讓客戶體會到漢王手寫識別的功能，在演示OCR軟件的時候盡量用公司提供的演示樣張。根據需求演示功能 給自己留有余地：銷售過程中要問清客戶需求了解需求后在演示相應的功能，在沒有確定成交的情況和已經滿足客戶的初步需求的時候 剩下的產品特點先不要說，因為這一點可能成為我們和客戶談判最后的底牌，同時也是為轉型做鋪墊

銷售過程中要問的問題

其實在銷售過程中有很多問題，并不是固定的 我總結的這點也只不過是平時比較常問的，主要的目的還是要引導客戶，幫助客戶發現自己需求，但在問問題之前請銷售員一定不要刻意的去問，是在兩個人聊天聊的挺投機的時候去問，比如第一句就在客戶進店點名電子書的時候去問，主要起兩個作用 1、看客戶是否對我們的產品有所了解，如果說聽說過 或者直接說了解過那這個人很可能就知道產品的價格在報價的時候就要多加注意

2、如果說沒了解過 那我們就可以熱情主動的和客戶說那您坐 我給您詳細介紹下，緊接著拿出演示機給客戶講解。第二問題就是要近一步的鎖定客戶的目標。看客戶到底需求什么樣的產品，第三個問題主要還是在同客戶溝通的時候去提出來這個問題的目的是吧客戶引開，當客戶說出喜歡看什么書時可以把我們準備好的資源給客戶看，近一步交流 了解客戶。當客戶自己不知道該選擇什么，或者你和客戶已經談的很好的并且很信任你你可以這樣去發問 您覺得這款怎么樣？ 可能客戶已經有理想的選擇 可你提出這個問題可能會給他一個新的驚喜。第五個問題當客戶被你說東心了在猶豫的時候千萬不要和停下來。這個時候問這句話是最合適的 因為如果你幫他解決完他擔心的問題他基本沒有退路了當你給客戶介紹完產品，并且很全面客戶仍以言不發 起身要走 這時一定要上前問一句，肯定是你之前某個細節出了問題不要放棄近一步了解。在銷售過程中沒有固定話術，大家記住一點引導客戶 不停的拋出問題和難題，然后在不停的解決你所給客戶拋出去的難題。@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@2

首先，賣產品就是在賣自己，顧客之所以會選擇購買你的產品就是因為相信你，相信從你口中介紹出來的產品，你在推銷你的產品的同時也是在推銷你自己，所以想做好銷售就要先學會做人。

銷售是一門學問，不是簡單的介紹產品，報個價，這樣的事情任何人都能做得來，就像“輕松銷售法”里面所說的以明確、清楚、只鎖定一個目標為一個方向。每一句就是要達到一個目的為一個單位。比如如果顧客正在詢問產品可以這樣主動反問顧客問題：“先生/小姐，請問您是個人用還是單位用”這樣問的目的是要了解顧客是個人用戶還是單位采購。

做銷售最重要的一點就是要“強勢”，在有些人看來強勢是厲害一點，態度

蠻橫一點，其實不然。強勢是讓你在跟顧客交流時能占有主動權，主動去引導顧客，使顧客跟著你的思路走下去，不要出現顧客帶著你走的局面，這樣銷售產品會顯的比較被動，換句話說顧客會欺負你，比如討價還價，索要贈品等。如果你不能滿足他的要求他就會拿不買來要挾你。

總的來說今天再看輕松銷售法要比第一次看理解的更透徹一點，因為這畢竟是自己做零售的這一年來親身經歷的事情，想說的還有很多現在就分享到這里。@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@2222

將客戶依照其個性分解為17種類型，根據這些客戶類型的談話特點，我們相應采取一些溝通談話的對策

1、健談型

? 客戶可能只顧自己的感受暢談，不要讓夸夸其談的顧客將你引入和銷售會談毫不相關的其他話題中，要抓住一切機會禮貌地將談話引入正題。(經常會有被說暈的感覺,聽對方滔滔不決的講他們公司和公司的產品)

2、少言寡語型

這種客戶說得太少，甚至你問一句他就答一個字，不然就是用“哼”、“啊”作答。然而，你不要失去耐心，盡量不要用封閉式的提問，提出一些不能僅僅用“是”或“否”回答的問題，選擇開放式的提問打開他的話匣子。話語要顯示出你獲得信息的熱情，來調動客戶的積極性。要比平日更具耐性，直至客戶開尊口，并示意客戶說下去。（說了半天對方沒音，還要來一個喂？一定不要出現這個景象,一定要多問客戶）關鍵字“什么”、“哪里”、“告訴”、“怎樣”、“為什么”、“談談”、“如何”

3、因循守舊型

? 這種客戶會聆聽，但會在購買決策上磨蹭，如果不及時采取促成交易的行動或條件，時間消耗下去也將會失掉這單生意。要向客戶指出信息帶來的幫助，如果有非常合適的項目也可以提供給他，或提出來更好的方案。如果這次你的提案和以往有些不同也可以強調新方案的優勢，說明與以往的不可比性。

4、反對型

? 往往客戶上來先表示反對，來挫你的銳氣。事實上是要爭取談判的主動地位。有可能反對是無理的，但你盡量不要與其爭論和回擊、保持冷靜，聽他把話說完，同時面帶微笑表示談判還可以進行下去。一方面你抓住客戶提出的需要（主要是執行效果的）表示可以調整方案

如果你能夠現場就把方案調整過來了，馬上再來詢問“如果這樣如此--------可不可以？”；另一方面把客戶的意見加到方案中，來確認“您看是不是這樣？”。＊若客戶再反對，你可能要重新思考方案的價值了，＊給自己留后路先撤回來＊，請客戶再給機會進行下一個方案＊。

5、膽怯型

這類客戶往往是沒有經驗或沒有決策權，不愿意負責。如果是他沒有經驗，要提供引導、保證和支持，幫助客戶克服成交的擔心心理，鼓勵客戶，證明他決策的正確，使其放松壓力，表示你可以成為他信任的朋友。若是他沒有決策權，一方面可以陳述方案的要點與效果的描述令他確信這是個好生意；再有就是請他引見

能夠決策的人物出場。

6、自我為中心型

? 這種客戶具有優越感、愿意用以上對下的口吻講話。保持上下的距離會令他有良好的感覺。仔細地聆聽并且恭維他，在合適的時候，向他征詢意見，把他的主意變成你的生意。（如果您的業務可以輔射到河北，天津就建議您用個北方區更劃算，您看呢？）

7、果斷型

? 這類客戶很自信，知道將要得到什么。如果方案得到認同不要給客戶過多的銷售解釋，盡快將注意力提到合同要求上。對客戶關心的內容只給必要的細節，要嚴格忠于事實，因為他可能是通過細節來驗證他的判斷。

8、精明型

? 這類客戶善于搬出不同方案進行比較，或用一方的信息銷售人員的方案對付另一方信息銷售人員，要應用巧妙的恭維來表達對他的判為討價能力的贊賞，同時表示在象他這樣如此精明的客戶面前，你就遇到了識貨的人/懂行的人/專家。這類客戶是砍價的專家，甚至胡砍一通，你就更要采用“示弱”的姿態，點明對方的精明已經使你無利可圖，要對方手下留情。（您可真是高手，我們從來沒有過您這么多的增值服務，希望您今年用的好，能與您長期合作我非常榮幸）

9、質疑型

? 這類客戶會找到方案中的問題點提出懷疑，不要躲避問題，對他的反對做出反應，但不要和他爭論，確實是你的問題就坦然承認，也別做過多解釋，否則你越描越黑，給他感覺問題越來越大。若不是你的問題，只是對方虛張聲勢或小題大做，要敢于說話，應用邏輯和已證明的事實，有可靠的數據支持最好。

10、牢騷型

? 這是個事事不順心的客戶，牢騷是他發泄和減壓的方式。你要特別快樂，不要被他的心情所影響，力圖找到困擾他的麻煩是什么，搞清是與你方案有關的原因還是除此之外的原因。是與你有關的原因，要聽清楚，表示同情和關切。是你能解決的不妨表示可以幫忙試試，千萬別都攬下來！有些你做不到。若不是你的原因，客戶他發完了牢騷可能就好了。別讓客戶陷在牢騷里，樂觀開導，轉移話題，為了繼續談你的事。(立邦)

11、條理型

? 這類客戶做事緩慢，似乎對你提出的每句話都在權衡，你急他不急。你表示很急切，可能他會采取更保守的態度，或用你急切的心態壓制你。調整你的步伐，和他保持一致，放慢速度，你可能還可以獲取對方更多的需求信息，在給對方的方案還可以盡量向細節上擴展，使他有充分的時間接受如做些宣傳方面的信息。最好在見面前就給他方案，留時間讓他消化，但也要注意方案的周全性。

12、依賴型

? 這類客戶在做決定時需要有人幫助、參謀，來證明他決定的正確。你最好把參謀的角色擔當起來。為了解客戶的需要，在你可以在首次接觸時就問他一些問題，然后在后面跟進時說明你的產品方案就是為他量身訂做的，能最好地滿足他的需要。在談話時將上一次的結果作為這次的開始，“您上次要我做一個有關某某的計劃，我給您做好了”“我把和您溝通的內容

做了一個方案,我給您發過去您看一下?”。在細節的處理上，可以解釋為就是圍繞客戶的要求制定的13、挑剔型

? 這類客戶看好信息可能也不會說OK，因為至少他要與你討價還價，還會提出一些不滿意，實際上，他需要你的東西才會花精力與你談判，你必須強調信息的好處,后期的增值服務,證明我們的信息值這個價錢，而且不要把你能守住的底價過早地報出來，留有還價的余地。再有，做讓步的時候要讓對方感到，你的每次讓步都是不容易的。而且可以讓對方付出一些代價，例如你答應客戶提出的優惠的價格，但要讓對方介紹幾個客戶等。

14、沖動型

這類客戶很容易下結論，談判的節奏也比較快。見面要直接步入正題，不要繞圈子，可以提出建議，通過這個建議客戶就能直接提出結果。就是說結論要從客戶的嘴里說出來。你要注意的是把合同帶上，能簽就簽，不往后拖。

15、分析型

? 這類客戶喜歡數據、事實和詳盡的解說，這種客戶富有條理，如果對客戶提案需要做些數據支持的準備，在提案過程中注意你的條理性，給客戶的信息越多越好。結論最好是清楚的，不要模棱兩可。(一般在和市場部策劃部負責人談判時會遇到這樣的問題,特別是一些大企業)

16、感情型

? 這類客戶對個人感情看得極重，你應該和這類客戶逐漸熟識，每次通話都帶給他一個好消息或提到一個好消息，讓他能高興起來。全身心地投入談話并且保持你對他的專注。和他建立日常聯系，建立私人友誼對工作深有益處。

17、固執型

這類客戶總是裝出很重要的樣子，擺老大的派頭。他如果對方案明顯地表示出錯誤和不專業也不要指出來，向客戶表明你是極尊重他的，抬高客戶，同時也抬高你自己，有可能的話向他致以真摯的夸獎。注意他流露出來的意向，抓住他的意思，把你的主意變成是他的主意通過的可能性就會大大提高。

? 一流的公司賣標準

? 二流的公司賣品牌

? 三流的公司賣服務

? 四流的公司賣產品差導化

? 五流的公司在同質化的產品下打價格戰

只要用心,一切皆有可能

銷售是一份靈活的工作,只要用心去分析和維護每一位新老客戶,那么一定可以做出卓越的成績

第四篇：質粒提取常見問題解析

質粒提取常見問題解析

涂布棒在酒精蘸一下，然后燒一下，能不能保證把所用的菌燒死？

參考見解：涂布棒可以在酒精中保藏，但是酒精不能即時殺菌。蘸了酒精后再燒一小會，燒的是酒精而不是涂布棒。建議涂布棒還是干燒較長時間后，冷卻了再涂。同時作多個轉化時，應用幾個涂布棒免得交叉污染。

原先測序鑒定沒有問題的細菌，37℃搖菌后發現質粒大小或序列出現異常? 參考見解：這種情況出現的幾率較小，常出現在較大質粒或比較特殊的序列中。解決辦法：

1、降低培養溫度，在20～25℃下培養，或室溫培養可明顯減少發生概率。

2、使用一些特殊菌株，如Sure菌株，它缺失了一些重組酶，如rec類等，使得質粒復制更加穩定。

3、質粒抽提有一個酶切不完全的原因就是溶液Ⅱ中的NaOH濃度過高造成的，請大家注意一下！

【有兩種方法可以在提質粒前判斷菌生長是否正常：

1、利用你的嗅覺。只要平時做實驗仔細點就能聞出大腸桿菌的氣味，新鮮的大腸桿菌是略帶一點刺鼻的氣味，但不至于反感。而在泥水狀的菌液中你只要一湊過去就感覺到其臭無比或者沒有氣味，可以和正常菌液對照。

2、肉眼觀察活化菌株。對于生長不正常的菌液進行劃板驗證或者稀釋到濃度足夠低涂板，第二天觀察單克隆生長情況，LB平板生長的DH5A正常形態在37℃16h后直徑在1mm左右，顏色偏白，半透明狀，濕潤的圓形菌斑，如果觀察到生長過快，顏色又是泛黃的話基本上不正常了。】

未提出質粒或質粒得率較低，如何解決？ 參考見解：

1、大腸桿菌老化：涂布平板培養后，重新挑選新菌落進行液體培養。

2、質粒拷貝數低：由于使用低拷貝數載體引起的質粒DNA提取量低，可更換具有相同功能的高拷貝數載體。

3、菌體中無質粒：有些質粒本身不能在某些菌種中穩定存在，經多次轉接后有可能造成質粒丟失。例如，柯斯質粒在大腸桿菌中長期保存不穩定，因此不要頻繁轉接，每次接種時應接種單菌落。另外，檢查篩選用抗生素使用濃度是否正確。

4、堿裂解不充分：使用過多菌體培養液，會導致菌體裂解不充分，可減少菌體用量或增加溶液的用量。對低拷貝數質粒，提取時可加大菌體用量并加倍使用溶液，可以有助于增加質粒提取量和提高質粒質量。

5、溶液使用不當：溶液2和3在溫度較低時可能出現渾濁，應置于37℃保溫片刻直至溶解為清亮的溶液，才能使用。

6、吸附柱過載：不同產品中吸附柱吸附能力不同，如果需要提取的質粒量很大，請分多次提取。若用富集培養基，例如TB或2×YT，菌液體積必須減少；若質粒是非常高的拷貝數或宿主菌具有很高的生長率，則需減少LB培養液體積。

7、質粒未全部溶解(尤其質粒較大時)：洗脫溶解質粒時，可適當加溫或延長溶解時間。

8、乙醇殘留：漂洗液洗滌后應離心盡量去除殘留液體，再加入洗脫緩沖液。

9、洗脫液加入位置不正確：洗脫液應加在硅膠膜中心部位以確保洗脫液會完全覆蓋硅膠膜的表面達到最大洗脫效率。

10、洗脫液不合適：DNA只在低鹽溶液中才能被洗脫，如洗脫緩沖液EB(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA，pH8.5)或水。洗脫效率還取決于pH值，最大洗脫效率在pH7.0-8.5間。當用水洗脫時確保其pH值在此范圍內，如果pH過低可能導致洗脫量低。洗脫時將滅菌蒸餾水或洗脫緩沖液加熱至60℃后使用，有利于提高洗脫效率。

11、洗脫體積太小：洗脫體積對回收率有一定影響。隨著洗脫體積的增大回收率增高，但產品濃度降低。為了得到較高的回收率可以增大洗脫體積。

12、洗脫時間過短：洗脫時間對回收率也會有一定影響。洗脫時放置1min可達到較好的效果。

細菌離心加入溶液I蝸旋振蕩后，發現菌體呈絮狀不均勻或呈細砂狀？ 參考見解：

1、很可能是細菌發生溶菌，可減少培養時間或者試試平板培養，質粒提取前用PBS將菌落洗下，相較來說固體培養基上細菌生長的要好一些。

2、質粒抽提過程很大程度上是受細菌生長情況決定的，剛活化的菌比負80℃保存菌種所培養出來的菌液狀態好，保存久的菌株可能會造成質粒濃度低，質粒丟失等不明原因。

3、判斷生長的菌液是否正常，可以用肉眼觀察，在光線明亮處搖蕩新鮮培養液，如果發現菌液呈漂絮狀，情況很好。如果發現呈泥水狀，即看不到絮狀，只是感覺很渾濁，則可能提不出好的質粒，或者沒有質粒。

4、菌液不宜生長太濃，搖床速度不宜過高。達到OD600 1.5就可以了，（尤其是對于試劑盒提取要注意）另外如果只是簡單的酶切驗證根本無需酚氯仿抽提（安全考慮，慎重），只要溶液I/ II /III比例恰當，轉管過程仔細吸取不會有太多雜志。

為什么加了溶液Ⅱ后，菌體沒有逐漸由混濁變澄清？提出來的條帶幾乎沒有，但是RNA很亮（沒加RNA酶）？

溶液Ⅱ主要就是NaOH，如果菌液沒有由混濁變澄清，參考見解：

1、可能是因為溶液儲存不當，或屢次操作沒有及時蓋好溶液瓶蓋，導致其吸收空氣中的CO2失效。RNA在菌體中量較多，相對少量的菌體裂解，可有較DNA明顯的條帶。

2、可能是菌量大，加溶液Ⅱ后，菌體并不能完全裂解，所以沒有變清，這也會導致質粒產率低下．

3、可能是質粒的拷貝數不高，質粒產率不高．如果是使用自己配的試劑，建議做中提或大提；或者買試劑盒提．用自己配的試劑，不加RNA酶，最后RNA是很亮的，要去除干凈就要用比較好的ＲＮＡ酶。

4、如果不是試劑的原因，可能是質粒表達的過程中使膜蛋白變化（數量變多），很難使用堿裂解法，可以嘗試用其他比較劇烈的方法(比如高溫或者低溫研磨等),然后使用一般的發放。

5、可能質粒隨乙醇一起倒掉了。

加入溶液II后，菌液仍然呈渾濁狀態，或者混濁度沒有明顯的改變？ 裂解不完全,參考見解：

1、問題可能是發生在溶液II上。首先看看10％SDS是否是澄清的？NaOH是否是有效的？如果使用的是試劑盒，也要首先確認溶液II是否澄清沒有沉淀？

2、可能是細菌濃度很高，適當調整增加溶液I/II/III的體積。

3、可能是“雜菌”污染，如果菌液生長異常快，就有可能被雜菌污染。這種情況一般表現為和目的菌有相同的抗性，生長速度異常，能夠提出質粒，跑膠的條帶也異常的亮，但產物不是自己想要的質粒，要特別注意一下。抽提DNA去除蛋白質時，為什么要是酚/氯仿混合使用？怎樣使用酚與氯仿較好？ 參考見解：酚與氯仿都是非極性分子，水是極性分子，當蛋白水溶液與酚或氯仿混合時，蛋白質分子之間的水分子就被酚或氯仿擠去，使蛋白失去水合狀態而變性。經過離心，變性蛋白質的密度比水的密度大，因而與水相分離，沉淀在水相下面，從而與溶解在水相中的DNA分開。而酚與氯仿有機溶劑比重更大，保留在最下層。

作為表面變性的酚與氯仿，在去除蛋白質的作用中，各有利弊，酚的變性作用大，但酚與水相有一定程度的互溶，大約10％～15％的水溶解在酚相中，因而損失了這部分水相中的DNA，而氯仿的變性作用不如酚效果好，但氯仿與水不相混溶，不會帶走DNA。所以在抽提過程中，混合使用酚與氯仿效果最好。經酚第一次抽提后的水相中有殘留的酚，由于酚與氯仿是互溶的，可用氯仿第二次變性蛋白質，此時一起將酚帶走。也可以在第二次抽提時，將酚與氯仿混合（1:1）使用。

呈粉紅色的酚可否使用？如何保存酚不被空氣氧化？

參考見解：保存在冰箱中的酚，容易被空氣氧化而變成粉紅色的，這樣的酚容易降解DNA，一般不可以使用。為了防止酚的氧化，可加入疏基乙醇和8-羥基喹琳至終濃度為0.1％。8-羥基喹琳是帶有淡黃色的固體粉末，不僅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性，它是金屬離子的弱螯合劑。用Tris pH8.0水溶液飽和后的酚，最好分裝在棕色小試劑瓶里，上面蓋一層Tris水溶液或TE緩沖液，隔絕空氣，以裝滿蓋緊蓋子為宜，如有可能，可充氮氣防止與空氣接觸而被氧化。平時保存在4℃或－20℃冰箱中，使用時，打開蓋子吸取后迅速加蓋，這樣可使酚不變質，可用數月。

為什么用酚與氯仿抽提DNA時，還要加少量的異戊醇？

參考見解：在抽提DNA時，為了混合均勻，必須劇烈振蕩容器數次，這時在混合液內易產生氣泡，氣泡會阻止相互間的充分作用。加入異戊醇能降低分子表面張力，可以降低抽提過程中的泡沫產生。一般采用氯仿與異戊酵為24：1之比。也可采用酚、氯仿與異戊醇之比為25：24:1（不必先配制，可在臨用前把一份酚加一份24：1的氯仿與異戊醇即成），同時異戊醇有助于分相，使離心后的上層水相，中層變性蛋白相以及下層有機溶劑相維持穩定。加入酚/仿抽提，離心后在水相和有機相間沒有出現變性蛋白相層，在隨后的乙醇沉淀步驟中卻出現大量的半透明沉淀，溶解后發現蛋白濃度很高？

乙醇沉淀時，較純的質粒沉淀是白色的（PEG純化的沉淀是透明的肉眼不易發現），如沉淀是半透明的凝膠狀，則應是蛋白含量高。參考見解：首先看看平衡酚是否已被氧化？pH是否是8.0？其次檢測溶液III反應完成后的離心上清pH是否在8.0左右？有時由于溶液III配置的問題，會出現溶液III反應后離心的上清pH與8.0偏差較大的現象，這會降低平衡酚抽提蛋白抽的有效性，pH偏差過大也會導致水相和平衡酚互溶。使用酚仿抽提方法，質粒的純度很好，但酶切不能完全切開? 參考見解：

1、確認酶的有效性。

2、平衡酚是否被氧化（正常是黃色，而氧化后是棕色的）。

3、是否不小心吸入了痕量的酚。

4、乙醇沉淀后，70%乙醇漂洗的是否充分（殘留的鹽類會影響酶切）。

5、乙醇漂洗后是否完全干燥（殘留的乙醇會影響酶切）。

堿裂解法提取的質粒DNA進行瓊脂糖電泳進行鑒定時，看到的三條帶分別是什么？ 參考見解：堿法抽提得到質粒樣品中不含線性DNA，得到的三條帶是以電泳速度的快慢排序的，分別是超螺旋、開環和復制中間體（即沒有復制完全的兩個質粒連在了一起）。如果你不小心在溶液II加入后過度振蕩，會有第四條帶，這條帶泳動得較慢，遠離這三條帶，是20-100kb的大腸桿菌基因組DNA的片斷。提取質粒中RNA沒有去除？ 可能是RNase失效或效率不高。參考見解：

1、更換RNase A，并保證其儲存條件是正確的

2、手工提取質粒的，可單獨增加一步去除RNA的步驟，溶液III反應后，在離心的上清中加RNase，室溫下去除RNA 10min～30min（需要保證RNase A是經過失活DNase的），同時較高溫度（如50℃）會更加快速完全的去除RNA，經驗所得經過高溫處理的質粒質量不是很高。

提取的質粒電泳后，為連續的一片火箭狀？ 參考見解：

1、質粒如果鹽離子多，會有走膠變形的現象，如果提到的質粒不夠純，會有電泳條帶不平齊的現象。

2、當電壓太大時，容易出現火箭狀，而降解應該是彌散狀。

3、可能是宿主菌影響的，質粒抽提好后，用酚-氯仿處理一下再酶切，若有改善，則為宿主菌影響。轉化到其它宿主菌再切。

4、NaOH的濃度過高，會出現火箭狀的結果。

用堿裂解法提取質粒，裂解5分鐘，沒有用酚 / 氯仿抽提，最后用滅菌水溶解質粒DNA15min。雙酶切后跑膠一條帶都沒有，原因是什么？ 參考見解：

1、溶解時間稍微短了點，但是根據各個實驗室RNase不同，這個條件是不同的。在溶解的過程要渦旋處理促進溶解。

2、確認一下酶切過程中是不是有DNA酶的污染，比如酶切體系的Buffer或者是水，特別是水中；其次是酶切體系的問題；建議再把提取的產物用70%酒精重新洗滌一遍，也可以用酚 / 氯仿重新抽提一下。

3、也可能在用乙醇洗時把質粒倒掉了。

4、沒有用RNase消化，不要用放久的 RNase否則會有DNA酶的污染；

5、在沒有進行酶切時,把所提的質粒跑一下核酸電泳看看,如果是提核酸的問題那這一步電泳結果應該沒有大于三千的條帶,這樣可以先排除核酸提取的問題.若是沒有酶切時間過長等其他問題的話可以那可以檢查一下所用的溶解DNA的溶液是否有DNAse污染的問題，建議將超純水換成TE。

用堿裂解法提取的質粒,取3ul轉化感受態大腸桿菌涂amp抗性平板，卻出現陽性克隆較少（含綠色熒光蛋白，陽性克隆應該顯綠色，在紫外燈下非常明顯，就幾十個菌落）大部分菌落不發綠，這些菌落比發綠的菌落小一些的現象，為什么？ 參考見解：

1、做一次陰性對照,拿空白菌涂布在含amp的平板上,如生長,說明amp過期,一般這種情況不多見。一般粉末狀的amp不容易失效,如果amp有效的話,可以配制遠高于標準的濃度,如果細菌耐藥的話,也能生長良好,如不耐藥,則放置數天仍不見細菌生長。

2、拿陰性和陽性的細菌各取數個放于高濃度的amp液體培養基中,如能生長,說明空白菌中帶有耐藥菌,建議換菌.3、提質粒的菌受污染了，重新劃線挑單克隆。

培養基、抗生素、質粒提取都沒有問題，而細菌菌液提取不到質粒？

參考見解：如果是氨芐抗性的，有可能是質粒丟失造成的。主要是培養時間較長，導致培養基中的beta-內酰胺酶過多，作用時間過長，同時培養基pH值降低，氨芐青霉素失活，從而使無質粒的菌株大量增殖。解決的辦法：可以添加葡萄糖，縮短培養時間，改用羧芐青霉素。|||謝謝樓主,還有什么專題也要貼出來啊!|||謝謝分享

到一個小tips。轉帖過來和菜鳥分享。大蝦憑手感就可以了,我們還是要學學的,受益匪淺

1．溶液I—溶菌液：

溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌體細胞壁的主要化學成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵，因而具有溶菌的作用。當溶液中pH小于8時，溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖：增加溶液的粘度，維持滲透壓，防止DNA受機械剪切力作用而降解。

EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金屬離子，抑制脫氧核糖核酸酶對DNA的降解作用（DNase作用時需要一定的金屬離子作輔基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因為溶菌酶的反應要求有較低的離子強度的環境。

2．溶液II－NaOH－SDS液：

NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是穩定的。但當pH＞12或pH＜3時，就會引起雙鏈之間氫鍵的解離而變性。在溶液II中的NaOH濃度為0.2mo1／L，加抽提液時，該系統的pH就高達12.6，因而促使染色體DNA與質粒DNA的變性。

SDS：SDS是離子型表面活性劑。它主要功能有：（1）溶解細胞膜上的脂質與蛋白，因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜。（2）解聚細胞中的核蛋白。（3）SDS能與蛋白質結合成為R-O-SO3-?R＋-蛋白質的復合物，使蛋白質變性而沉淀下來。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取過程中，必須把它去除干凈，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA時）受到干擾。

3.溶液III--3mol／L NaAc（pH4.8）溶液：

NaAc的水溶液呈堿性，為了調節pH至4.8，必須加入大量的冰醋酸。所以該溶液實際上是NaAc-HAc的緩沖液。用pH4.8的NaAc溶液是為了把pH12.6的抽提液，調回pH至中性，使變性的質粒DNA能夠復性，并能穩定存在。而高鹽的3mol／L NaAc有利于變性的大分子染色體DNA、RNA以及SDS-蛋白復合物凝聚而沉淀之。前者是因為中和核酸上的電荷，減少相斥力而互相聚合，后者是因為鈉鹽與SDS－蛋白復合物作用后，能形成較小的鈉鹽形式復合物，使沉淀更完全。

4．為什么用無水乙醇沉淀DNA？

用無水乙醇沉淀DNA，這是實驗中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。DNA溶液是DNA以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般實驗中，是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混合，其乙醇的最終含量占67％左右。因而也可改用95％乙醇來替代無水乙醇（因為無水乙醇的價格遠遠比95％乙醇昂貴）。但是加95％的乙醇使總體積增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA損失也增大，尤其用多次乙醇沉淀時，就會影響收得率。折中的做法是初次沉淀DNA時可用95％乙醇代替無水乙酵，最后的沉淀步驟要使用無水乙醇。也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA。一般在室溫下放置15－30分鐘即可。

5．在用乙醇沉淀DNA時，為什么一定要加NaAc或NaCl至最終濃度達0.1～0.25mol/L？ 在pH為8左右的溶液中，DNA分子是帶負電荷的，加一定濃度的NaAc或NaCl，使Na+中和DNA分子上的負電荷，減少DNA分子之間的同性電荷相斥力，易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀，當加入的鹽溶液濃度太低時，只有部分DNA形成DNA鈉鹽而聚合，這樣就造成DNA沉淀不完全，當加入的鹽溶液濃度太高時，其效果也不好。在沉淀的DNA中，由于過多的鹽雜質存在，影響DNA的酶切等反應，必須要進行洗滌或重沉淀。

6．加核糖核酸酶降解核糖核酸后，為什么再要用SDS與KAc來處理？

加進去的RNase本身是一種蛋白質，為了純化DNA，又必須去除之，加SDS可使它們成為SDS-蛋白復合物沉淀，再加KAc使這些復合物轉變為溶解度更小的鉀鹽形式的SDS-蛋白質復合物，使沉淀更加完全。也可用飽和酚、氯仿抽提再沉淀，去除RNase。在溶液中，有人以KAc代替NaAc，也可以收到較好效果。

7．為什么在保存或抽提DNA過程中，一般采用TE緩沖液？

在基因操作實驗中，選擇緩沖液的主要原則是考慮DNA的穩定性及緩沖液成分不產生干擾作用。磷酸鹽緩沖系統（pKa＝7.2）和硼酸系統（pKa=9.24）等雖然也都符合細胞內環境的生理范圍(pH)，可作DNA的保存液，但在轉化實驗時，磷酸根離子的種類及數量將與Ca2＋產生Ca3(PO4)2沉淀；在DNA反應時，不同的酶對輔助因子的種類及數量要求不同，有的要求高離子濃度，有的則要求低鹽濃度，采用Tris-HCl（pKa=8.0）的緩沖系統，由于緩沖液是TrisH+/Tris，不存在金屬離子的干擾作用，故在提取或保存DNA時，大都采用Tris-HCl系統，而TE緩沖液中的EDTA更能穩定DNA的活性。

8．如何選擇聚乙二醇（6000）的濃度來沉淀DNA？

采用PEG（6000）沉淀DNA，大小不同的DNA分子所用的PEG的濃度也不同，PEG的濃度低，選擇性沉淀DNA分子量大，大分子所需PEG的濃度只需1％左右，小分子所需PEG濃度高達20％。本實驗選擇性沉淀4.3kb的pBR322質粒DNA，每毫升加入0.4毫升的30％ PEG，其最終PEG濃度為12％。PEG選擇性沉淀DNA的分辨率大約100bp。

9．抽提DNA去除蛋白質時，怎樣使用酚與氯仿較好？

酞與氯仿是非極性分子，水是極性分子，當蛋白水溶液與酚或氯仿混合時，蛋白質分子之間的水分子就被酚或氯仿擠去，使蛋白失去水合狀態而變性。經過離心，變性蛋白質的密度比水的密度為大，因而與水相分離，沉淀在水相下面，從而與溶解在水相中的DNA分開。而酚與氯仿有機溶劑比重更大，保留在最下層。

作為表面變性的酚與氯仿，在去除蛋白質的作用中，各有利弊，酚的變性作用大，但酚與水相有一定程度的互溶，大約10％～15％的水溶解在酚相中，因而損失了這部分水相中的DNA，而氯仿的變性作用不如酚效果好，但氯仿與水不相混溶，不會帶走DNA。所以在抽提過程中，混合使用酚與氯仿效果最好。經酚第一次抽提后的水相中有殘留的酚，由于酚與氯仿是互溶的，可用氯仿第二次變性蛋白質，此時一起將酚帶走。也可以在第二次抽提時，將酚與氯仿混合（1:1）使用。

10．為什么用酚與氯仿抽提DNA時，還要加少量的異戊酵？

在抽提DNA時，為了混合均勻，必須劇烈振蕩容器數次，這時在混合液內易產生氣泡，氣泡會阻止相互間的充分作用。加入異戊醇能降低分子表面張力，所以能減少抽提過程中的泡沫產生。一般采用氯仿與異戊酵為24：1之比。也可采用酚、氯仿與異戊醇之比為25：24:1（不必先配制，可在臨用前把一份酚加一份24：1的氯仿與異戊醇即成），同時異戊醇有助于分相，使離心后的上層水相，中層變性蛋白相以及下層有機溶劑相維持穩定。

11．為什么要用pH8的Tris水溶液飽和酚？呈粉紅色的酚可否使用？如何保存酚不被空氣氧化？

因為酚與水有一定的互溶，苯酚用水飽和的目的是使其抽提DNA過程中，不致吸收樣品中含有DNA的水分，減少DNA的損失。用Tris調節至pH為8是因為DNA在此條件下比較穩定。在中性或堿性條件下（pH5～7），RNA比DNA更容易游離到水相，所以可獲得RNA含量較少的DNA樣品。

保存在冰箱中的酚，容易被空氣氧化而變成粉紅色的，這樣的酚容易降解DNA，一般不可以便用。為了防止酚的氧化，可加入疏基乙醇和8-羥基喹琳至終濃度為0.1％。8-羥基喹琳是帶有淡黃色的固體粉末，不僅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性，它是金屬離子的弱螯合劑。用Tris pH8.0水溶液飽和后的酚，最好分裝在棕色小試劑瓶里，上面蓋一層Tris水溶液或TE緩沖液，隔絕空氣，以裝滿蓋緊蓋子為宜，如有可能，可充氮氣，防止與空氣接觸而被氧化。平時保存在4℃或－20℃冰箱中，使用時，打開蓋子吸取后迅速加蓋，這樣可使酚不變質，可用數月。

第五篇：應屆生簡歷常見問題解析[范文]

應屆生簡歷常見錯誤解析

畢業季來臨，大批應屆生走出校門，尋找工作，開始職業生涯的第一步就是要做一份個人簡歷，而對于應屆生來說，經驗的缺失導致簡歷中常常出現很多問題，今天小編就為大家解析一下應屆生簡歷的常見錯誤。

1.簡歷不簡

所謂簡歷，以簡為主。然而很多應屆生自身沒有多少履歷，卻能搞出厚厚的一沓簡歷，仿佛簡歷寫的越多，閱歷就越豐富，其實是大錯特錯。

企業hr看簡歷的時間往往只有一兩分鐘，如果在這個時間內沒有找到需要的信息，那么很有可能被pass掉，因此，應屆生簡歷要講求簡潔明了，把自己的主要信息和經歷簡明扼要的寫出來，更容易俘獲hr的心。

2.華而不實

小編經常會遇到這樣的簡歷：有著精美的封面和包裝，色彩斑斕，格式前衛，再附上一張靚照，然而內容卻乏陳可數。要知道hr是在工作而不是逛藝術展，hr想要的是你的職業素養和個人信息，千萬不要本末倒置，以為通過簡歷的包裝就能吸引hr的眼球，這往往是出力不討好的事。

3.沒有重點

一份好的簡歷一定是重點突出的，比如你需要應聘技術性工作，就注重敘述你的作品，證書等資料，而如果應聘銷售類職位，則可以著重體現自己的實習經歷和一些社團學生會經歷等，做到與應聘職位相符合，很多應屆生的簡歷如同流水賬，重點不突出，要知道，hr可是沒有時間幫你提煉信息。

以上就是職通天下人才網總結的應屆生簡歷常見問題，希望找工作的同學們有則改之，無則加勉。