第一篇：免疫組化常用方法介紹及個人經驗總結

免疫組化常用方法介紹及個人經驗總結、定義

用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究，這種技術稱為免疫組織化學（immunohistochemistry）技術或免疫細胞化學（immunocytochemistry）技術。

2、原理

根據抗原抗體反應和化學顯色原理，組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結合，再利用一抗與標記生物素、熒光素等的二抗進行反應，前者再用標記辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如鏈霉親和素等）結合，最后通過呈色反應或熒光來顯示細胞或組織中化學成分，在光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應產物，從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學成分的分布和含量。、分類

1）按標記物質的種類，如熒光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶）、鐵蛋白、膠體金等，可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標法和免疫金銀法等。2）按染色步驟可分為直接法（又稱一步法）和間接法（二步、三步或多步法）。與直接法相比，間接法的靈敏度提高了許多。

3）按結合方式可分為抗原-抗體結合，如過氧化物酶-抗過氧化物酶（PAP）法；親和連接，如卵白素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC）法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結（SP）法等，其中 SP 法是比較常用的方法；聚合物鏈接，如即用型二步法，此方法尤其適合于內源性生物素含量高的組織抗原檢測。、目前幾種常用免疫組化方法簡單介紹 1）免疫熒光方法

是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理，先將已知抗體標上熒光素，以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光，從而可確定組織中某種抗原的定位，進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏度高、快速簡便，所以在臨床病理診斷、檢驗中應用較廣。

2）免疫酶標方法

免疫酶標方法是繼免疫熒光后，于 60 年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是目前最常用的技術。

本方法與免疫熒光技術相比的主要優點是：定位準確，對比度好，染色標本可長期保存，適合于光、電鏡研究等。

免疫酶標方法的發展非常迅速，已經衍生出了多種標記方法，且隨著方法的不斷改進和創新，其特異性和靈敏度都在不斷提高，使用也越來越方便。目前在病理診斷中廣為使用的有 ABC 法、SP 三步法、即用型二步法檢測系統等。

3）免疫膠體金技術

免疫膠體金技術是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標記物。膠體金是指金的水溶膠，它能迅速而穩定地吸附蛋白，對蛋白的生物學活性則沒有明顯的影響。因此，用膠體金標記一抗、二抗或其他能特異性結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌 A 蛋白)等作為探針，就能對組織或細胞內的抗原進行定性、定位，甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒，且膠體金的電子密度高，所以免疫膠體金技術特別適合于免疫電鏡的單標記或多標記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色，因此也適合進行光鏡觀察。如應用銀加強的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。、被檢測的物質

組織或細胞中凡是能作為抗原或半抗原，如蛋白質、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受體、酶、激素、核酸及病原體等都可用相應的特異性抗體進行檢測。、特點

1）特異性強。免疫學的基本原理決定抗原與抗體之間的結合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA 顯示淋巴細胞成分。只有當組織細胞中存在交叉抗原時，才會出現交叉反應。

2）敏感性高。在應用免疫組化的起始階段，由于技術上的限制，只有直接法、間接法等敏感性不高的技術，那時的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍；現在由于 ABC 法或 SP 三步法的出現，使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結合，這樣高敏感性的抗體抗原反應，使免疫組化方法越來越方便地應用于常規病理診斷工作。

3）定位準確、形態與功能相結合。該技術通過抗原抗體反應及呈色反應，可在組織和細胞中進行抗原的準確定位，因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察，這樣就可以進行形態與功能相結合的研究，對病理學領域開展深入研究是十分有意義的。、從蛋白水平檢測角度，免疫組化技術與 Western blotting、ELISA 的異同

1）Western blotting：蛋白質免疫印跡，也是利用抗體抗原反應原理，結合化學發光等技術來檢查組織或細胞樣品內蛋白含量的檢測方法。與免疫組化技術相比，定量可能更加準確；當然 Western blotting 也可定性和定位（通過提取膜蛋白或核蛋白、胞漿蛋白分別檢測其中抗原含量，進而間接反映它們的定位），但敏感性遠遠低于免疫組化技術。

2）ELISA：酶聯免疫吸附試驗，也是利用抗體-抗原-抗原結合反應原理來檢查體液或組織勻漿中蛋白含量的檢測。與免疫組化技術相比，定量最準確，是分泌性蛋白檢測首選方法之一。

8、免疫組化個人經驗總結

1、方法操作不難，最大的難處是出現異常結果時如何解決？這就需要掌握免疫組化實驗原理，每一步知道為什么這樣做，這樣你才敢大膽地改革先前的不對的方法步驟。如抗體孵育條件主要是抗體濃度、溫度、時間，這三者一般是相互成反比的（相對），其中濃度是最重要的先決條件，溫度決定反應的速度、時間決定反應的量。就拿溫度來說，可以有 4 度、室溫、37 度，我推薦4 度最佳，反應最溫和，背景較淺；而 37 度反應速度較快，時間較短；室溫我不太提倡，除非你每次都把環境溫度控制在一定的范圍，否則，盡量選擇前兩者。

2、免疫組化最大的優勢是定位和定性。相比于其他蛋白檢測方法，免疫組化具有定性靈敏度高、定位較直接準確，是定位檢測分析首選方法。尤其對于有些因子的轉位研究十分有用。

3、免疫組化結果定量分析的前提是高質量的染色切片。免疫組化結果也能定量分析，但必須是背景染色淺而特異性染色較深的情況下，分析最為準確，這種原則可能也是我們日常審稿時判定研究結果的必備條件。

4、免疫組化實驗一定要設置陽性對照和陰性對照。陽性對照一般是用肯定表達這種抗原的切片來做；陰性對照一般是用 PBS 或非一抗替代一抗來進行反應，其余步驟均一致。前者是排除方法和實驗系統有無問題；后者是排除有無一抗外的非特異性染色。

5、免疫組化的應用廣泛，是當前實驗研究的最重要方法之一。如今發 SCI 論文時，明顯感覺僅靠量化的數據來發文章很難，加一些形態學數據或圖片，老外十分歡迎，可能是怕你學術造假吧。當然也不能做假陽性或假陰性結果。

6、免疫組化技術掌握與否的鑒定標準是同一切片或不同切片中不同抗原均從摸索濃度或條件而做出優良的染色切片。

免疫組化技術掌握與否的鑒定標準是同一切片或不同切片中不同抗原均從摸索濃度或條件而做出優良的染色切片。我在平時帶教中就發現許多研究生把我已經摸索很成熟的反應條件、濃度、方法步驟，重復運用于同一性質的切片和同一種抗體，做出來后就覺得自己已經掌握了免疫組化方法，更換一種抗體后，居然連二抗的種屬來源都拿錯了。失敗往往促進你去思考試驗原理和過程，成功有時也加快你自傲。

7、實驗方法需要動手+ 動腦。如今我還不敢說我在免疫組化什么都知道。我只所以今天敢在這里說這說那，這是因為我經過了反復的動手+動腦，把理論原理運用于實踐，在把實踐中發現的問題帶到理論知識中去解決，最終把理論與實踐融會貫通。

第二篇：病理切片與免疫組化個人經驗總結

免疫組織化學中對載波片和蓋波片的處理

（一）載波片的清潔

進行免疫組化染色必須保證載波片的潔凈否則常導致非特異性染色和組織脫片現象的出現而新的載波片常有油污等可能影響免疫組化染色的異物。因此必須對載波片進行清潔工作。常用的載波片清潔液是用重鉻酸鉀、濃硫酸和蒸餾水以不同比例混合配成不同強度的清潔液。

1． 常用清潔液的配制方法：

1．1重鉻酸鉀：濃硫酸：蒸餾水=1：1：10 重鉻酸鉀10g., 濃硫酸10ml, 蒸餾水100ml 1.2重鉻酸鉀：濃硫酸：蒸餾水=2：3：25 1.3重鉻酸鉀：濃硫酸：蒸餾水=2：5：25 2載波片的清潔方法

1。1先將載波片用清潔液浸泡12-24h 1．2流水沖洗后再用蒸餾水清洗3-5遍 1。3 95%的酒精中浸泡2h，用紗布擦干

1．4放入60℃烤箱中烤干或者自然晾干儲存在玻片盒內備用

（二）載玻片的表面處理

在免疫組化試驗中由于實驗操作步驟的繁多常引起組織切片或者細胞涂片的脫落，影響檢測效果，因此常需要用粘附濟對切片進行處理。

1APES黏附劑APES是一種新型玻片黏附劑它的黏附劑機制是通過對玻璃表面的化學修飾改變玻璃表面的化學物理特性使組織切片活細胞成分牢固的貼附于玻璃表面不易脫落并可長期保存。是目前應用最多的組織黏附劑。

1．1APES工作液配制APES1ml丙酮50ml，混勻即可。

1．2切片處理方法1。1。1干警的切片放入盛有丙酮的染色缸中浸泡5min 1．1．2浸入APES工作液停留20-30s 1．1．3純丙酮洗2次1。1。4放入烤箱37℃過夜1。1。5用干凈玻片盒裝好室溫保存備用一般可存放半年以上

2多聚賴氨酸（poly-l-lycine.pll）多聚賴氨酸水溶液是一種良好的組織黏附劑使用濃度在0。005-0。01％但是由于價格較高在免疫組化中很少用。1．1多聚賴氨酸儲備液的配制，將0.5g多聚賴氨酸充分溶于100 ml蒸餾水中，4℃或者-20℃保存備用（pll可反復水融）工作液可將pll原液稀釋10-50倍使用 1。2切片的處理方法

1。1。1干凈干燥切片浸入pll工作液，停留20-30s 1.1.3用干凈玻片盒裝好，室溫保存備用一般可存放半年以上

（三）蓋波片的處理

蓋波片的處理方法如上,處理時間可適當縮短,清潔液浸泡2h即可（摘自常雙鎖主編醫學常用實驗技術精編）

石蠟切片微波修復抗原染色程序

1載玻片防脫片劑處理：可選擇APES或poly-l-lycine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分鐘以上使切片緊密黏附 2． 切片常規脫蠟至水

3．30％H2O2+蒸餾水10份混合，室溫5-10分鐘以滅活內源性酶，蒸餾水洗3次 4．熱修復抗原：將切片浸入0.01M購船酸鹽緩沖液中（PH6。0），電路或微波爐加熱之沸騰后斷電間隔5-10分鐘后，反復1-2次。冷卻后PBS（PH7。2-7。6）洗1-2次。5滴加5％BSA封閉液室溫20分鐘，甩去多余液體不洗。6滴加適當稀釋的抗（小鼠或兔IgG）.37℃1h左右或20℃時左右，也可4℃過夜，PBS（PH7。2-7。6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度孵育時間和溫度與染色強度、背景有直接關系。一般來說陽性染色強度不夠時可提高一抗濃度和延長孵育時間背景過高時可降低一抗濃度和縮短孵育時間）

7．滴加生物素化山羊抗小鼠IgG（或兔、人IgG），20-37℃20分鐘PBS（PH7。2-7。6）洗2分鐘×3次。

8滴加試劑SABC,20-37℃20分鐘.PBS（PH7。2-7。6）洗5分鐘×4次.9.DAB顯色：使用DAB顯色試劑盒（AR1022）。取蒸餾水1ml加試劑盒中A,B,C試劑各1滴,混勻后加至切片,室溫顯色,鏡下控制反應時間,一般在5-30分鐘之間.也可自配顯色劑顯色。蒸餾水洗滌。

0．02M PBS（PH7。2-7。6）配法：

1000ml蒸餾水中加氯化鈉8.5g,Na2HPO42.8g, Na2H2PO40.4g.如果用的是含水磷酸鹽，應加上分子式中水的含量。

0．02M枸椽酸鹽緩沖液：1000ml蒸餾水中加枸椽酸三鈉（C6H5Na3O7·2H2O）3g, 枸椽酸（C6H8O7·H2O）0.4g 注意事項：

如果染色背景較高，在SABC反應之后，DAB顯色之前，用加水0。01-0。02％TWEEN20的PBS（PH7。2-7。6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后顯色。

以上摘自武漢博士德生物工程有限工程公司所產的即用型SABC免疫組化染色試劑和使用說明書。

HE染色方法

1二甲苯I脫蠟10-15min 2二甲苯II脫蠟10-15min 3無水乙醇脫二甲苯1min×2次 4.95％乙醇 5.90％乙醇 6.85％乙醇 7自來水洗2min 8蘇木蘇染色1-5 min 9自來水洗1 min 10.0.5％-1％鹽酸乙醇分化20S 11自來水洗1min 12稀氨水（1％）返藍數秒，自來水或蒸餾水洗1 min 13尹紅染色1-5 min 14自來水洗

15.85％乙醇脫水20S 16.90％乙醇30S 17.95％乙醇I 1 min 18.95％乙醇II 1 min 19.無水乙醇I 2min 20.無水乙醇II2min 21二甲苯I 2min 22二甲苯II2min 23二甲苯III2min 24中性樹膠或加拿大樹膠封固。結果：

細胞核呈藍色，鈣鹽和各種微生物呈藍染色或紫藍色，細胞質，肌纖維，纖維結締組織，紅細胞和嗜尹紅顆粒呈不同程度的紅色。摘自梁曉俐主編病理學基礎與實驗技術

第三篇：免疫組化經驗總結

免疫組化

關鍵詞： 免疫 組織化學 細胞2012-03-30 14:41 來源：互聯網 點擊次數：14044 一，免疫組織化學簡介

免疫組織化學又稱免疫細胞化學，是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應，對相應炕原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來，借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用，在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質(如蛋白質、多肽、酶、激素、病原體以及受體等)。

二，免疫組化技術的基本原理

免疫組化技術是一種綜合定性、定位和定量；形態、機能和代謝密切結合為一體的研究和檢測技術。在原位檢測出病原的同時，還能觀察到組織病變與該病原的關系，確認受染細胞類型，從而有助于了解疾病的發病機理和病理過程。

免疫酶組化技術是通過共價鍵將酶連接在抗體上，制成酶標抗體，再借酶對底物的特異催化作用，生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒，于普通顯微鏡或電鏡下進行細胞表面及細胞內各種抗原成分的定位，根據酶標記的部位可將其分為直接法（一步法）、間接法（二步法）、橋聯法（多步法）等，用于標記的抗體可以是用免疫動物制備的多克隆抗體或特異性單克隆抗體，最好是特異性強的高效價的單克隆抗體。直接法是將酶直接標記在第一抗體上，間接法是將酶標記在第二抗體上，檢測組織細胞內的特定抗原物質。目前通常選用免疫酶組化間接染色法。

三，免疫組化步驟

1，切片，烤片60℃，1h；

2，脫蠟及復水

二甲苯10min，100％乙醇5min，95％乙醇5min，90％乙醇5min，85％乙醇5min，80％乙醇5min，75％乙醇5min，60％乙醇5min，50％乙醇5min，30％乙醇5min，自來水1min，雙氧水1min；

3，1份30％H2O2加10份蒸餾水，室溫10min，蒸餾水洗3次，每次3min；

4，微波修復

將切片浸入0.01M枸櫞酸緩沖液，微波中最大火力（98℃-100℃）加熱至沸騰，冷卻（約5-10min），反復兩次；

5，將切片自然冷卻至室溫，PBS洗滌3次，每次5min；

6，封閉，5％BSA，室溫20min，甩去多余液體；

7，滴加一抗，37℃，1h，或者4℃過夜；

8，PBS洗滌3次，每次3min；

9，滴加二抗，37℃，15-30min；

10，PBS洗滌3次，每次3min；

11，滴加SABC，37℃，30min；

12，PBS洗滌3次，每次5min；

13，1ml蒸餾水中分別滴加顯色劑，混勻；

14，DAB顯色劑配置好后，滴加于切片，室溫，鏡下檢測反應時間（約5min）；

15，自來水沖洗干凈，過蒸餾水；

16，蘇木素復染2min，自來水沖洗；

17，脫水

30％乙醇3min，50％乙醇3min，70％乙醇3min，80％乙醇3min，90％乙醇3min，95％乙醇3min，100％乙醇3min，二甲苯20min；

18，樹膠封片，鏡檢。

四，免疫組化常見問題分析

1，石蠟切片在染色過程中出現脫片現象

1）烤片時間不夠，或溫度不夠，可以延長烤片時間和提高烤片溫度；

2）用含有多聚賴氨酸的玻片，可以購買到或這自己做；

3）有些組織本身就容易掉片，如骨組織等，操作時沖PBS不要直接沖到組織上，沖到組織上方，讓它流下沖洗組織；

4）用高溫修復時，溫度驟冷也可能引起。

2，邊緣效應

1）組織邊緣與玻片粘貼不牢，邊緣組織松脫漂浮在液體中，每次清洗不易將組織下面試劑洗盡所致.解決辦法：制備優質的膠片（APES或多聚賴氨酸），切出盡量薄的組織切片，不厚于4微米，組織的前期處理應規范，盡量避免選用壞死較多的組織；

2）切片上滴加的試劑未充分覆蓋組織，邊緣的試劑容易首先變干，濃度較中心組織高而致染色深。解決辦法：試劑要充分覆蓋組織，應超出組織邊緣2mm。用組化筆畫圈時，為了避免油劑的影響，畫圈應距組織邊緣3-4mm。

3，產生組織切片非特異性染色

1）抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是最重要的一條；

2）一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看；

3）內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色；

4）非特異性組分與抗體結合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果；

5）DAB孵育時間過長或濃度過高；

6）PBS沖洗不充分，殘留抗體結果增強著色，在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要；

7）標本染色過程中經常出現干片，這容易增強非特異性著色。

4，免疫組化染色呈陰性結果

1）抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤；

2）抗原修復不全，對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位，以利于與抗體結合；建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗，這是最佳的時間和次數。若不行，還可高壓修復；

3）組織切片本身這種抗原含量低；

4）血清封閉時間過長；

5）DAB孵育時間過短；

6）細胞通透不全，抗體未能充分進入胞內參與反應；

7）開始做免疫組化，我建議你一定要首先做個陽性對照片，排除抗體等外的方法問題。

5，背景

1，考慮一抗濃度高；

2，然后調整DAB孵育時間；

3，也要考慮血清封閉時間是否過短；

4，適當增加抗體孵育后的浸洗次數和延長浸洗時間等。

第四篇：個人經驗總結

一學期很快地過去了，在各級領導和家長的支持下，幼兒各方面都取得了一定的成績。為了將我的工作做得更好，特總結如下：

一、現狀分析：

我班幼兒二十五人，其中男孩十二人，女孩有十三人，年齡在兩歲半到三歲。其中十人是本期新插入的。本班大部分幼兒身體發育正常，他們喜歡問，求知欲強，對唱歌、跳舞有一定的興趣，能用簡單的語言表達愿望。經過一學期的學習，幼兒各方面進步很大。在本期以新《幼兒園教育指導綱要》和“三個代表”重要思想為指導，堅持“孩子第一”的原則，積極地將教育觀念轉變為教育行為，在一日保教各環節中認真落實《幼兒園教育指導綱要》；從而保證幼兒一日生活的愉快進行，促進孩子們全面發展。

二、政治思想方面：

本期在園領導組織下，觀看學習了師德啟示錄和教師職業道德規范。在實際工作中把這種精神踏實奉獻精神一直牢牢地記在心里，從而把孩子放在第一位，在工作中不分上下班，不計報酬，真正體現主人翁精神。

積極參加政治業務學習，做到認真做好筆記，會后寫出自己的心得體會，不斷提高自己的思想政治覺悟，不信、不傳“法輪功”的歪理邪說，使自己的思想與黨中央保持一致。

加強自身的文化修養，多讀多看報刊雜志，努力提高自己的業務能力，用新的知識不斷充實自己的頭腦，盡快適應新形式的要求。

做到了團結同志，熱愛集體，遵守幼兒園一切規章制度，保質保量的完成了本職工作。

工作中做到了服從領導安排，協調好本班教師的關系，共同配合，促進了幼兒全面發展。

三、業務工作內容

（1）教研工作

積極參加小班組的課題研究，仔細為新教師周碧上匯報課和教研課出力出策。認真聽新教師的匯報課，并記錄下來討論，幫助了別人，也豐富了自己的已有經驗。

認真完成教研組長交給的任務，主講小班教師如何開展游戲。

（2）教學工作

細致耐心的做好個別幼兒工作。按照一日活動常規的要求，進行教養活動，著重教育幼兒愛護玩具，會收拾整理玩具，學會自己洗手，學會自己愉快進餐，愉快睡眠，自己上廁所等，培養幼兒養成良好的生活衛生習慣。促進了幼兒健康發展。根據季節變化，幼兒體質差異以及戶外活動時活動量大小等及時給幼兒增減衣物，避免幼兒受熱或著涼。開展符合本班實際的體育游戲，訓練幼兒基本動作，鍛煉幼兒身體動作的協調性，充分利用日光、空氣、水等自然因素，對幼兒進行體格鍛煉。培養幼兒活潑開朗的性格，增強了幼兒的自信心，敢于在陌生人面前展示自己，從而使自己的交往能力得到了提高。

環境創設：根據本班幼兒的實際特點和我班開展的親子活動進行了環境的創設。比如：帶孩子到公園進行戶外親子活動的照片以及六一慶祝活動的照片資料等。我們還布置了一些孩子喜歡的動物掛飾，以及節日彩帶，氣球等。

常規教育：托班幼兒自控力差，一日生活的自理能力還很差，因此，在常規教育中我們與幼兒家長保持了一定的聯系，讓自控能力差的孩子在家中也進行一定的常規教育，如：這學期新插入的幼兒，常有打人的情況，我們通過與家長共同教育，使孩子改掉了這一壞習慣。劉諾言、婁潤秋和簡靖逸開學時，愛搶別人的玩具，現在也有了很大的進步。

認真開展主題活動“家園共育”。結合《綱要》精神和我班幼兒的年齡特點，我班開展了主題活動“家園共育”，并制作了網絡圖，采取了家長助教，幼兒生日會，戶外親子活動，家園欄，每月一次家長開放日等多種形式，并隨時記錄幼兒的表現和張貼幼兒活動照片。讓家長真正了解幼兒園，了解教師的工作，了解孩子的在園生活，更好地促進孩子的發展。

（三）保育工作。保育工作是幼兒園的永久之重，特別是我班幼兒年齡小，體制差，天氣變化很容易生病，對此，我們幾位老師非常重視保育工作。

記住家長的叮囑，對每個幼兒的情況牢記在心，并落實。

對特殊幼兒細心照顧。如劉諾言,孫若馨等體質差的幼兒在游戲之后要及時隔背，馮唯恒小朋友有疝氣，不能運動量太，如果肚痛就必須平著抱一會，婷婷小朋友上廁所時常常容易打濕褲腳，要時時注意，發現濕了立即換好??.協助保健醫生做好了衛生保健工作和預防工作，保證幼兒身體健康。為幼兒創設了豐富的物質環境，清潔衛生和生活環境。還為幼兒創設輕松愉快的精神環境，保證幼兒身心健康成長。

（四）家長工作

孩子年齡小，本期新生又多。家長工作是非常重要的。因此，從一開學，我們就向家長宣傳先進的育兒經驗，如：孩子入園的適應期，幼兒習慣養成，幼兒用藥的正確性等。通過家園聯系欄，家長借閱，電話聯系，便條聯系等多種形式，讓家長了解幼兒在園的情況，也讓我們了解了家長的想法，使教師我家長增進了理解和友誼。

通過開展家長會，家長開放日，“親子”活動等，促進了家園之間的相互理解、支持。在教學活動、慶祝活動等都少不了家長的支持和理解，有的家長可以為孩子提供參觀的場所；有的家長可以提供幼兒操作的材料??不論是以哪種形式的幫助都是對幼兒教育的支持和理解

（五）安全工作 在一日保教活動中，我班教師始終以“安全第一”為原則。因為孩子有了安全才有健康發展。從晨間入園到離園，老師都要隨時注意幼兒的安全，并檢查幼兒活動場所的安全隱患。托班幼兒有流尿現象，我們也同樣做到勤檢查，勤換洗，像對待自己的孩子一樣。

三、反思和今后改進方向

這一學期來，我的工作中還存在著很多不足，我班幼兒的常規還不夠好，玩玩具時，不夠愛惜，在收拾玩具和學具時，不能主動將其放回原處，并有隨地亂扔的現象。同時，今后我要認真學習新的幼兒園指導《綱要》將綱要的精神落實到教育教學工作中。刻苦鉆研新教材.加強理論學習，不斷提高自己的理論水平。

第五篇：個人經驗總結

個人經驗總結

時間的腳步匆匆，在課改的春風下作為新課程實施的具體操作者，面對新課程賦予我們的更寬泛更具有彈性的選擇空間。開展課程改革的目的在于讓幼兒更快樂，健康的成長，以下是我在一個學期實踐中的幾點總結：

一、政治思想方面：

本人熱愛祖國、熱愛中國共產黨。做為幼兒教師能時刻關注國際形式的變化，以三個代表的思想引領自我，愛崗敬業，遵守幼兒園的各種規章制度。能認真的參加政治學習，做好筆記，本學期主要學習了：十六屆三中全會的精神；兩會精神和《中國人民政治協商會議章程修正案》等內容。平時能嚴格的要求自己，以師德建設年的要求時刻提醒自己，認真的學習《中小學教師師德規范》，結合臺江區優秀青年教師：鄭婕老師的先進事跡鞭策自己的工作。時刻以“愛生敬業、誠實守信、服務家長、奉獻社會”的口號嚴格要求自己。樹立高度的責任心對待幼兒園中的新的教育形式，關注每一個幼兒和幼兒的每一個細節，以積極的情感態度和幼兒應對。積極參加團組織的活動，在活動中能積極發表自己的意見和建議，時時以一個優秀團員的標準要求自己。

二、業務工作方面

1、加強班級的管理工作，創設與幼兒互動的環境：

結合大班幼兒的特點構建一個安全、愉快、寬松的外部環境，讓幼兒在教師，集體面前想表現、敢表現、喜歡表現并能得到教師與同伴的積極應對。在環境的創設上不再只是老師單方面的努力或者簡單意義上幼兒的參與，而是讓幼兒出主意、參與設計、參與材料收集、布置、參與環境的管理，體現幼兒的思維、幼兒的發現、幼兒的操作、幼兒的記錄。物質環境上，讓幼兒有豐富的操作材料進行動手探索，在實踐的過程中對已有的經驗進行整合并獲得新經驗。本學年主要創設了：數學區、特色角、科學區、語言區等。在數學區中投放更多的操作材料，并提供記錄本，鼓勵幼兒將自己發現的記錄下來，培養記錄的好習慣；科學區中投放：磁性、浮沉、輕重等方面的操作材料，讓幼兒通過活動發現身邊的秘密；在語言區重點提供拼音方面的內容，制作了有趣的拼音樹，拼音小列車等，以游戲的形式鞏固幼兒對拼音的認識；特色區的創設能時刻進行改動，根據幼兒最近繪畫的狀況，請幼兒自己發表怎樣布置的意見，教師再和幼兒一起動手布置。結合安全教育創設安全墻飾，將幼兒的談話、繪畫內容和教師的壁畫結合，設計更生動的墻飾，讓環境更好的與幼兒互動。

最為班主任能做好班級財產的管理工作，按時領借材料，及時的歸還保管室。隨時根據主題和幼兒園要求調整班級環境和墻飾。本學期還能結合大班幼兒自尊心強的特點設計了名為“奪寶奇兵”的競賽墻飾，改變以往單純點紅點點進行表揚的形式，采用幼兒自評，一月一總評的形式。新的形式不僅調動大班幼兒競爭的積極性，也使幼兒在每月的總評后有新的開始，讓他們不會有一開始落后他人就泄氣的想法，更加努力的表現自己爭取進步。并將每月總評的結果和幼兒成長檔案上及家園聯系單上的星級寶寶評選掛鉤，使幼兒更積極的參與到其中，取得更好的效果，使家長也投入到幼兒的進中。

2、教育教學方面

根據開放教育理念，及幼兒全面平衡發展的理論基礎，以挖掘幼兒潛能為教育模式的基本框架，以幼兒的經驗、能力、興趣、需要為出發點，在課程統整化、教材生活化、教學活動化的理念指導下，用主題的形式，將各領域的學習關聯起來，園內園外活動并重，使幼兒在生活中學習，在與環境中人、事、物產生交互作用中獲取各種經驗而成長。本學期主要開展了：一切都在變、有趣的橋、綠色家園、各式各樣的服裝、運動和我等活動。我能根據主題目標、幼兒的發展需求選擇適合的活動，在開學初制訂周計劃并每周及時調整教學內容，嚴格按照周計劃開展活動，完成教育教學任務。在活動中讓孩子自主地學習，并對孩子的自主學習進行了研究和實踐，努力探索孩子自主學習的所需要的條件和因素，總結教師在實踐中，促進孩子自主學習所應具備的教育理念和教育策略，從而切切實實地促進孩子的自主學習能力的發展。小組教學和個別教育相結合，讓教師和幼兒、幼兒與同伴之間有更多的交流和對話。和社區對話，利用社區的環境開展活動，在本學期中利用白馬河公園開展了“我和小樹交朋友”“學習雷鋒好叔叔”的主題活動；在“綠色家園”的活動中，我能和孩子一起動手制作環保小標志，并一起張貼到社區的宣傳欄中，獲得較好的反響。

結合幼小銜接的特點開展數學和拼音的教育教學活動。采用一周一競賽了解幼兒的學習情況；一周兩教學是幼兒得到進步。對個別能力較弱的幼兒在平時的區角活動中進行個別輔導，并與個別家長進行交流，使每個孩子都得到進步。本學期我主要負責數學方面的教育教學，本班的孩子能熟練的掌握10以內數的加減法、區分左右、認識時鐘、根據算式編應用題、以及10 以內數的連加連減。在學期末我們還開展了“我要上小學”的系列主題活動，在活動中讓幼兒了解小學、了解小學生、了解小學生的學習情況；在平時的教育教學中模仿小學上課的形式，激發幼兒做一個優秀小學生的自豪感，樣成良好的學習習慣。

注重幼兒品德教育，無論在教育活動或生活活動中，我都從細節做起，從一點一滴培養孩子的好習慣。在本學年中開展了“我是大班小朋友”“向雷峰叔叔學習”“從小愛勞動”等主題活動。同時還結合各種不同類型的活動對幼兒盡心愛父母，愛家鄉的教育。結合安全教育活動和季節的變化對幼兒進行健康教育，還更加重視“關心他人”情感的培養，培養幼兒從小愛他人、關心他人、關心社會的良好情感。

3、愛的承諾方面

（1）平時能作到熱愛學生，衣著整潔得體，語言規范健康，舉止文明禮貌，注重自身的語言和談吐，以優美大方的形象帶給幼兒美好的體驗。輕聲細語的和孩子交流。結合主題活動，采取討論的方式，和孩子共同制定班級常規。督促、提醒幼兒按討論過的常規活動，提高幼兒的自省能力，建立以幼兒為中心的自律班級常規。培養良好的傾聽和舉手回答問題的好習慣。

（2）及時的撰寫每月愛的承諾，根據家長的意見提出新的希望和要求。

（3）認真制定幼兒成長檔案、社區成長檔案和個人成長檔案，能每月按時的增添新開展的內容，及時拍照記錄，給幼兒的成長、自身的成長留下痕跡。豐富幼兒成長檔案的內容，改變以往單純以幼兒繪畫作品為主的形式，收集幼兒繪畫、手工、數學、拼音、談話、記錄等多種活動痕跡，并結合幼兒每月一評分發“小紅花”豐富幼兒成長檔案內容。還能利用問卷調查、小表格等形式讓家長也參與到幼兒檔案的制作中。在社區成長檔案中制作班級主頁，除了能介紹最近開展的活動外，還能根據家長的疑難給予解答，根據季節和實際情況的需要增添家教文章，如《幼兒心理健康的調查》《幼兒入小學注意》等；還能請個別家長撰寫家教文章，向其余家長介紹自己的家教經驗。認真的對待教師個人成長檔案，每月及時反思，增添自己的學習心得和體會，制作個人主頁，使成長檔案更豐富。

（4）注意培養幼兒良好的生活習慣，如正確的睡姿、坐姿、站姿等，引導幼兒學會解決同伴間的小糾紛。教幼兒了解自我保護的常識和行為，如用眼衛生和換牙的注意事項等。根據天氣的變化，提醒幼兒及時的穿脫衣物，多飲水。對個別體弱的孩子格外關心。

4、特色教學方面

認真的開展特色教育，在開學初制定好教學進度，畫好所有范圖，每周五按時開展活動。在活動中更加重視用筆和用墨的講解和示范，使每個孩子都能較好的發展。注意個別幼兒的指導，糾正其不正確的用筆姿勢。注意對幼兒作品的講評，請幼兒自己觀察發現優秀的作品，對有進步的孩子及時的表揚。將每次的幼兒作品進行展示，并請家長提出自己的意見和建議，及時的修改我們的教學。在期末布置幼兒特色展示區，將幼兒一學期以來的作品分別展示，讓家長縱向比較了解孩子的進步。在期末撰寫特色教育心得《教水墨畫有感》。制作特色教育袋，整理特色教育的教材、范圖、文章等內容，為今后開展活動做好準備。

5、其他方面

（1）能認真的開展年段長工作，帶領年段教師開展教研和教育教學工作。在每次的教研活動中帶頭發表意見，總結年段教師的意見并進行交流。本學期與年段教師配合開展了年段班級家長會、家長開放日、六一海報的設計、六一游園活動、安全教育活動、畢業典禮等活動。

（2）本學期繼續擔任林張艷老師的指導教師，本學期主要對藝術教育教學方面的進行指導幫助。本學期在業務園長的帶領下，開示范課：《歌曲——勤快人和懶惰人》、《繪畫——我喜歡的橋》《繪畫——海底的故事》，效果良好。年輕教師林張艷的匯報課也有很大的進步。

（3）本學期能認真對待幼兒園里的各項任務，在教師技能技巧比賽中獲演講二等獎、繪畫三等獎、歌唱歡樂獎的好成績。指導幼兒鄭婧儀獲市科協科幻畫比賽一等獎，薛鑫儀獲二等獎。薛鑫怡、張鈺、詹妍、吳心悅、周仲卿分獲幼兒園“愛媽媽”繪畫比賽一二三等獎；薛鑫怡、林君藝、謝軒武獲幼兒園“元宵花燈制作比賽”一二三等獎。

（4）本學期還能根據幼兒的發展選擇科研的課題，從幼兒和教師的互動關系入手進行調查研究，撰寫了論文《教師在教育過程中與幼兒互動關系的研究》。

三、做好家長工作——家園合作、同向同步

1、利用家園聯系單向家長介紹幼兒每月的情況，及時的了解幼兒在家在園的情況，家園同步的開展教育教學工作。

2、本學期我們能認真的制作幼兒成長檔案和社區成長檔案，家長一起參與到制作的過程中，讓他們更深刻的體驗幼兒園教育的特殊性和趣味性，更家了解自己的孩子的發展狀況。

3、通過及時更換家教之窗的家教知識，向家長宣傳科學的育兒知識。本學期還承擔了園社區宣傳欄5月份設計工作，能根據幼兒園的動向和家長的需要制作有效的宣傳欄，為家長提供幫助，得到家長的好評。

4、按時召開班級家長會和家委會，做好記錄，能根據家長的意見和建議調整具體工作。在家委會的支持下開展好各種家長開放活動，如：家長開放日、六一游園活動等。

總之在這一年里我的工作取得了一定的成績，但仍然存在許多的不足，如性格比較急，個別的家長也對我提出了意見和建議，在今后的工作中我會在反思中不斷的改進自己提高自己。

胡天慧

2013年7月6日