第一篇：中國農業科學院研究生院招生簡章

中國農業科學院研究生院

2011年全日制專業學位碩士研究生統一入學考試大綱

科目代碼：341 考試科目：農業知識綜合三

一、考查目標

《農業知識綜合三》側重于農業工程綜合知識的考查?？荚噧热莺w食品加工與安全領域的主干課程，包括食品衛生學、食品安全管理與法規、食品分析與檢驗技術等學科。要求考生比較系統地理解和掌握本領域基本概念、基礎理論和基本方法，能夠運用基本原理和方法分析、判斷和解決有關實際問題。

二、適用范圍

適用于報考食品加工與安全領域的考生。

三、考試形式和試卷結構

1、試卷滿分及考試時間

本試卷滿分為150分，考試時間為180分鐘。

2、答題方式

閉卷、筆試。

3、試卷內容結構

食品衛生學、食品安全管理與法規、食品分析與檢驗技術等科目內容各占50分。

四、考試大綱

（一）食品衛生學 1.食品的生物污染 1.1 食品的細菌污染

食品細菌污染的途徑 食品細菌污染的種類 食品細菌污染的危害 食品細菌污染的檢驗和標準 食品細菌污染的預防 1.2 食品的真菌污染

食品真菌及其毒素污染的特點 食品的黃曲霉毒素污染：黃曲霉毒素污染的狀況和危害、黃曲霉毒素的性質及控制措施

食品的其他真菌毒素污染：赭曲霉素、雜色曲霉毒素、伏馬菌素、T2毒素、單端孢霉烯族類化合物、展青霉素、桔青霉素易污染的食品和控制措施 1.3 食品的腐敗變質

食品腐敗變質的概念、發生的條件、影響因素、衛生學意義及控制措施 1.4 食品的病毒污染

食品中甲肝病毒、脊髓灰質炎病毒、口蹄疫病毒、瘋牛病病毒污染的途徑與控制措施

1.5 食品的寄生蟲污染

寄生蟲的概念、危害方式以及絳蟲（含幼蟲）、蛔蟲的感染途徑、危害、預防措施

2.食品的化學污染 2.1 食品農藥殘留

食品中農藥殘留的來源、影響因素和預防控制措施 2.2 食品的重金屬污染

生物放大的概念和意義、食品中鉛、砷、汞、鎘污染的途徑、危害及預防控制措施

2.3 食品的多環芳烴污染

多環芳烴的污染來源、危害及預防措施 2.4 食品中N-亞硝基化合物的污染

食品中N-亞硝基化合物的來源、危害及預防控制措施 2.5 食品中二噁英的污染

食品中二噁英的來源、危害及預防措施 2.6 食品添加劑

食品添加劑的使用原則、存在的問題及控制 2.7 食品包裝材料的污染

食品包裝材料的污染、影響因素、預防控制措施 3.食品安全性評價 3.1 基本概念

毒性、劑量、劑量-反應關系、半數致死量、閾劑量、最大無作用劑量、ADI等食品安全性評價的基本概念

3.2 食品安全性毒理學評價程序及判斷標準 4.食物中毒

4.1 食物中毒的概念、流行病學特點、類型 4.2 細菌性食物中毒 沙門氏菌、副溶血弧菌、變形桿菌、蠟樣芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、肉毒梭狀芽孢桿菌食物中毒的原因食品、發生季節、預防措施 4.3 真菌性食物中毒

真菌性食物中毒的特點，毒蕈、霉變甘蔗、霉變甘薯、赤霉病麥等真菌毒素中毒發生的季節、原因和預防措施 4.4 天然植物食物中毒

四季豆、發芽馬鈴薯、毒蕈、鮮黃花菜、豆漿中毒的中毒物質、危害及其預防措施

4.5 天然動物食物中毒

河豚魚、有毒貝類、熱帶魚、魚膽、動物甲狀腺中毒的中毒物質、危害及其預防措施

（二）食品安全管理與法規 1.緒論

1.1 食品質量和食品安全概念

1.2 食源性疾病、污染物和食品安全危害分類

食源性疾??；食品污染物；食品安全危害：生物危害、化學危害和物理危害。1.3 食品安全質量控制體系的研究對象、內容和手段 1.4 食品供應鏈概念

2.建立實施HACCP體系的意義 2.1 HACCP體系概念及其來歷 2.2 建立實施HACCP體系的原因 2.3 建立實施HACCP體系的組織 2.4 ISO22000:2005食品安全管理體系 3.HACCP體系原理

3.1 HACCP體系的七項基本原理 3.2 HACCP體系所涉及的術語和定義

HACCP研究；HACCP計劃；HACCP體系；HACCP工作小組；直線型、模塊型和通用型HACCP方案；HACCP加工流程圖；顯著危害和非顯著危害；CCP判斷樹；關鍵控制點的關鍵限值與操作限值；糾偏。3.3 建立HACCP體系的步驟

4.建立HACCP體系的條件與前提方案 4.1 一般管理規范

4.2 ISO 9000質量管理體系

質量管理體系中質量控制點和食品安全關鍵控制點的區別 4.3 HACCP體系的前提方案——GMP GMP的主要內容和強調的環節 4.4 HACCP體系的前提方案——SSOP 4.5 HACCP體系與GMP和SSOP的關系 4.6 食品配方與食品安全

酸度、防腐劑、水分活度、配料等與食品安全 4.7 食品加工技術環節與食品安全

熱加工、發酵、輻照等加工技術環節與食品安全 4.8 對食品安全危害的控制措施 5.HACCP原理應用實例

5.1 畜禽屠宰行業可能發生的食品安全危害與控制 5.2 凈菜加工可能發生的食品安全危害與控制 5.3 肉類罐頭加工可能發生的食品安全危害與控制 5.4 果蔬汁可能發生的食品安全危害與控制 5.5 糕點加工可能發生的食品安全危害與控制管理

（三）食品分析與檢驗技術

1.食品分析的概念、性質、任務和作用 1.1 食品分析的概念及性質

食品分析是研究和評定食品品質及其變化、開發食品分析方法的一門專業性很強的技術學科。1.2 食品分析的任務與作用

是對食品工業生產中的原料、輔料、成品、半成品、副產品等進行檢測，以達到控制和管理生產、保障食品質量安全和開發新資源與新產品的目的。1.3 食品分析的內容

主要包括（1）食品營養成分分析；（2）食品添加劑分析；（3）食品中有害物質分析（4）食品的感官檢驗等。2.樣品采集及預處理方法 2.1 樣品的采集

樣品采集是指從大量的分析對象中抽取有代表性的一部分樣品作為分析材料的過程。2.2 樣品的制備

是對上述采集的樣品進一步粉碎、混勻、縮分，目的是保證樣品完全均勻，取任何部分都具有代表性。2.3 樣品的保存

樣品如不能立即分析應妥善保存，其目的是防止樣品發生受潮、揮發、風干、變質等現象。2.4 樣品的預處理方法

樣品預處理就是在樣品正式分析測定前將被測組份提取出來或將干擾成分去除的過程。一般分為（1）溶劑提取法；（2）有機物破壞法；（3）蒸餾法；（4）皂化法；（5）層析法等。3 食品分析檢驗的一般方法

食品分析所采用的分析方法主要有 3.1 感官檢驗法

通過人的感覺器官（眼、鼻、口、皮膚）所具有的視覺、嗅覺、味覺和觸覺，對食品的色、香、味、形等質量特征和衛生狀況作出判定和客觀評價的方法。3.2 物理檢驗法

通過對被測食品的某些物理性質如溫度、密度、折射率、旋光度、非典等的測定，可間接求出食品中某種成分的含量，進而判斷被檢食品的純度和品質。3.3 化學分析法

是以物質的化學反應為基礎的分析方法，主要包括重量分析和容量分析法兩大類。

3.3.1 重量分析

是將被測成分與樣品中的其他成分分離，然后稱定該成分的質量，計算出被測物質的含量。3.3.2 容量分析

也稱滴定分析，它是將已知濃度的標準溶液由滴定管加到被檢溶液中，直到所用試劑與被測物質的物質量相等為止?？山柚甘緞┑淖兩珌碛^察終點。根據標準溶液的濃度和消耗體積，計算出被測物質的含量。3.3.3 化學分析中標準溶液的配制及溶液濃度的表示方法

標準溶液是化學分析中用來直接定量測定待測組分含量的溶液，正確配制標準溶液對提高容量分析的準確度有重大意義。標準溶液的配制方法一般有直接法和間接法兩種。

溶液的濃度通常是指在一定量的溶液中所含溶質的量。常用的方法有：物質的量濃度（摩爾濃度）、溶質的質量分數（百分濃度）、溶質的體積分數、比例濃度等。

3.4 儀器分析法

借助特殊的儀器，通過測量試樣溶液的光學性質或電化學性質，從而求出被測組分的含量。常用的方法有紫外-可見分光光度法、原子吸收光譜法、熒光分析法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。3.5 酶分析法

是利用酶的反應進行物質定性、定量的方法。要求掌握酶法分析的特點。4.食品中一般成分的檢驗 不同食品其成分與含量也各不相同。要求了解下列各種成分測定的主要方法，掌握操作原理與簡單過程。4.1 水分的測定

水分測定常分為直接法和間接法兩大類。直接法是利用水分本身的物理、化學性質來測定水分的方法，如干燥法、蒸餾法和卡爾.費舍爾法；間接法是利用食品的相對密度、折射率、電導、介電常數等物理性質測定水分的方法。本大綱僅要求掌握干燥法原理。4.2 灰分的測定

食品經灼燒后的殘留物就叫灰分。灰分是食品中無機成分總量的標志。灰分測定包括總灰分、水溶性灰分、水不溶性灰分、酸不溶性灰分等。要求掌握總灰分的測定原理和方法。4.3 總酸度的測定

通過中和滴定，用標準堿液測定淺色食品中總酸度的含量。4.4 粗脂肪的測定

常用的方法為索氏提取法，適用于脂類含量較高、含結合態脂肪較少、能烘干磨細、不易吸潮結塊的樣品測定。4.5 碳水化合物的測定 4.5.1 還原糖的測定

糖類的測定是以還原糖的測定為基礎的。掌握直接滴定法測定還原糖的原理和方法。

4.5.2 淀粉的測定

常用的淀粉測定方法有酸水解法和酶水解法。本大綱要求掌握酶水解法測定淀粉的原理和方法。4.6 蛋白質的測定

蛋白質的測定主要有紫外法、比色法、凱氏定氮法、儀器法等多種方法，凱氏定氮法是測定食品中粗蛋白的常用方法。4.7 維生素的測定

食品中維生素種類繁多，測定方法也各不相同。4.7.1 脂溶性維生素的測定

主要通過皂化和有機溶劑提取后，用比色法、紫外分光光度法或液相色譜法測定。要求掌握比色法測定維生素A的原理。4.7.2 水溶性維生素的測定

用熒光法、比色法、滴定法和高效液相色譜法測定。4.8 礦物元素的測定

食品中的礦物元素通過干灰化或濕灰化的方法，將有機物分解成無機物后用比色法、滴定法或原子吸收法進行測定。5.分析結果的表示與數據處理 5.1 有效數字

就是可靠數字與可疑數字之和。有效數字的修約按“四舍六入五留雙”的原則。在有效數字的計算中，應遵循四則運算的規則。5.2 誤差、準確度與精密度

分析結果的準確度是指分析結果與真值的接近程度。準確度的高低用誤差來衡量。精密度就是幾次平行測定結果相互接近的程度。精密度的高低用偏差來衡量。食品分析中誤差常用絕對誤差、相對誤差表示，而偏差常用絕對偏差及相對偏差表示。

6.各種食物成分結果的表述

檢測結果的表示應采用法定計量單位并盡量與食品衛生標準一致。固體樣品與液體樣品的結果均有不同的表示方法。

第二篇：基因工程原理中國農業科學院研究生院

中國農業科學院究生院

《基因工程原理》復習題

一、名詞解釋

1.原核基因（Prokaryotic

gene）：由原核生物（如大腸桿菌）基因組編碼的基因，以及高等生物細胞器線粒體基因組和葉綠體基因組等編碼的基因，統稱原核基因。

2.真核基因（Eukaryotic

gene）：真核生物基因組DNA編碼的基因,以及感染

真核細胞的DNA病毒和反轉錄病毒基因組編碼的基因，統稱真核基因。

3..前導序列（Leader

sequence）：又叫前導序列區或5＇-非翻譯區（5＇-UTR），系指位于mRNA5＇-起始密碼子之前的一段長數百個核苷酸的不翻譯的RNA區段。

4.尾隨序列（Tai1er

sequence）：又稱尾隨序列區或3＇-非翻譯區（3＇-UTR），系指位于mRNA3＇-終止密碼子之后一段100多核苷酸的不翻譯的RNA區段。

復制子（Replicon）：

指有一個復制起始區（oriC）和起始基因的DNA復制單元。例如細菌染色體、病毒基因組、質?；蚪M等，凡其DNA能夠進行復制的遺傳單元，均稱復制子。真核細胞基因組的復制子是指含有一個復制起始位點的DNA（RNA）的復制子特稱復制單元。

6.增強子

（Enhancer）：又叫增強子序列或增強子元件，是真核基因中發現的一

種特異序列，能夠在距離目標基因50kb以上的位置，從上游或下游的不同位置及方向增強該基因的轉錄活性。

7.沉默子（Silencer）在真核基因啟動子中除了增強子之外，沉默子同樣也是一種可遠距離調控相關基因轉錄活性的順式元件。與增強子一樣，沉默子也能夠從啟動子的上游、下游甚至是基因內部三種不同的位置以及正向或反向，影響相關基因啟動子的轉錄起始效率。同時沉默子往往是以組織特異性或時間特異的作用方式，控制基因的表達作用。但與增強子的功能效應相反，沉默子只能抑制而不能激活相關基因的轉錄起始活性。

8.絕緣子（Insulator）亦即是增強子活性的物理邊界元件（physical

boundary

element），它是一段能夠抑制或隔離增強子功能效應的順式轉錄調節序列。絕緣子的這種功能作用的發揮，取決于它所在的位置。如果它是位于增強子和啟動子之間，便能夠阻斷增強子的功能效應；但當它是位于增強子-啟動子區段的外側，便不能夠阻斷增強子的功能作用。因此也有的作者將絕緣子稱為隔離鄰近增強子對啟動子激活作用的中間隔柵（neutral

barrier）。絕緣子的作用是與特異結合蛋白IBP的結合發揮作用。它的意義：能阻斷增強子超遠距離的激活作用影響生物的發育順序；真核絕緣子能保護順序表達以防無義基因的表達。

9.調節子（Regulon）：指在大腸桿菌基因組中，其表達活性受同一種基因編碼的蛋白質協同調節的，一組不連續相鄰排列的結構基因。調節子與操縱子不同之處在于，后者的結構基因是彼此相鄰排列的，而調節子的結構基因則是分散于染色體的不同部位，甚至是位于不同染色體上

10.基因差異表達（Differential

expression

of

gene）：

真核生物在每一特定的發育階段，或是某一特定類型的細胞中，一般只有15%的基因進行表達。這種在生物個體發育的不同階段，或是在不同組織和細胞中，發生不同基因按時間、空間進行有序表達的方式，叫基因的差異表達。

11.基因內互補（Intragenic

complementaion）：

系指編碼同樣的多肽序列，但又各具一個不同

突變的兩個基因聯合產生出一種有功能活性的蛋白質多肽的生化過程。

12.基因圖（Gene

map）：描述染色體或DNA分子上不同基因的排列順序及其間隔距離的線性圖。它包括遺傳圖和物理圖兩種。

遺傳圖（genetic

map）：是根據遺傳重組實驗繪制的，用來表示同一染色體上不同基因（或特定DNA序列區）之間的排列順序及其相對距離的線性圖。其圖距用厘摩(cM)表示。

物理圖（Physical

map）：以精確的物理長度為單位，一般以核苷酸數表示不同基因在染色體或DNA分子上的排列順序及其間隔距離的實際長度的線性圖。

13.基因簇（Gene

cluster）與基因家族（Gene

family）：系指原核生物基因組中，由不同或相關的一組相合基因組成的一種特殊的排列組合方式。同一基因簇的各個基因在遺傳上往往是緊密連鎖，它們可以是屬于同一操縱子的不同結構基因，也可以是不同操縱子的不同結構基因；它們可以是同一基因家族的不同成員，也可以是不同基因家族的不同成員。

基因家族（Gene

family：由同一生物中同一始祖基因經過重復突變進化而來，具相似的結構、相似的產物和相似的功能。它們的特征：（1）多重姓；（2）緊密連鎖（3）表型及功能方面的相關性；（4）核苷酸序列的一致性。

14.基因克隆（Gene

cloning）：基因克隆又叫DNA克隆，它是指將外源基因插入到克隆載體上形成重組DNA分子群體，并轉化到大腸桿菌寄主細胞中進行復制繁殖，以便從大分子DNA或DNA片段中分離純化目的基因或特定的DNA片段的實驗操作，叫做基因克隆或DNA克隆。

15.融合基因（Fusion

gene）：亦稱重組基因、雜種基因或嵌合基因。通常是指通過自發突變形成或利用DNA重組技術構建的。是一類具有來自兩個或兩個以上不同基因的核苷酸序列的新型基因。融合基因可以形成融合蛋白，但融合基因不一定都形成融合蛋白。

16.基因劑量

（Gene

dosage）：指的是一個細胞所擁有的同一種基因的拷貝數。

基因劑量實驗是建立在局部二倍體菌株的基礎上，專門來檢測基因拷數的增加，對其編碼產物合成速率之影響的分子遺傳學的研究技術。

17.裂口（Gap）：雙鏈DNA分子上的某一條鏈丟失一個或連續數個核苷酸造成的單鏈斷裂。

缺口（Nick）：雙鏈DNA分子的某一條鏈的相鄰核苷酸之間丟失一個磷酸二酯鍵造成的單鏈斷裂。

18.切丁酶（Dicer）：亦有人譯為RNAi核酸酶。是一種RNaseⅢ樣（RNaseⅢ

like）的核酸內切酶。能把雙鏈RNA（dsRNA）分子切割成21~23bp的小分子干擾RNA

。這是一種需要ATP的過程。

19.異裂酶（Neoschizomer）：

指一組來源不同，但具有相同的識別序列和不同的切割位點的一組核酸內切限制酶稱異裂酶

20.同尾酶（Isocaudarner）：一組來源不同，識別序列各異，但能夠切割形成相同黏性末端的核酸內切酶。

21.同裂酶

(Isoschizomer)

是一類來源不同，而識別序列相同，切割能產生相同的黏性末端的核酸內切酶。

22.拓樸異構酶（T0poisomerase）：在原核和真核細胞中發現的，具有催化單鏈DNA或雙鏈DNA產生瞬時斷裂的功能。具有切割與連接的雙重功能，導致雙鏈構型的改變。在抗癌研究中，發展抑制拓撲異構酶的活性的抗癌藥物好的開發研制具有重要意義。

23.質粒DNA遷移作用（Plasmid

mobilization）：指由共存的接合型質粒引發的非接合型質粒的轉移過程。由于結合型質粒的mob基因產生的遷移蛋白可作用于與其共存的非遷移型質粒的nic位點所產生的遷移作用，稱質粒DNA遷移作用。

24.柯斯載體（Cosmid）：是一類人工構建的，含有λ噬菌體DNA的cos序列和質粒復制子的特殊類型的質粒載體。它既具有λ噬菌體的特性，也具有質粒載體的特性。并且具有高容量的克隆能力，其DNA可以體外被包裝到噬菌體的外殼內。

25.噬菌體展示載體（Phage

display

vector）：根據單鏈噬菌體表面表達的蛋白質或多肽的噬菌體表面展示技術，當把外源基因插入在該載體的基因Ⅲ或基因Ⅷ的編碼序列中，正確表達出融合蛋白的這類特殊用途的噬菌體載體。

26.穿梭質粒載體（S

huttle

plasmid

vector）：

簡稱穿梭載體，或叫雙功能載體。是一類人工構建具有兩種不同的復制起點和選擇記號，因而可在兩種不同寄主細胞（如大腸桿菌和釀酒酵母）中進行復制與存留的質粒載體。

27.M13克隆體系的優點：

a.可方便地產生外源單鏈DNA；

b.重組子可用組織化學方法檢測；

c.lacZ基因上具多克隆位點，便于外源DNA插入；

d.可定向克隆外源基因；

28.質粒載體的結構特點：

a.具復制起點（ori）；

b.具抗生素抗性基因（選擇用）；

c.具若干核酸內切酶的單切點；

d.較小的分子量和較高的拷貝數。

啟動子封堵（Promoter

occlusion）：由一個上游啟動子驅動的轉錄作用，當其通讀過下游啟動子時，便會使該啟動子的功能受到抑制的現象，叫做啟動子封堵。

30.Ⅱ型核酸內切酶的特點：a.不具有多亞基結構（單一切割功能）；b.能識別雙鏈DNA分子中靶子序列c.切割形成不同長度的限制片段;

d由于不對稱切割，能形成粘性末端;

e

酶切反應不需能量ATP。

31.表觀遺傳信息層（Epigenetic

layer

of

information）：它是貯藏在圍繞DNA分子周圍并與DNA分子結合的蛋白質及化學物質中。表觀遺傳信息如同RNA基因一樣令人困惑，甚至比RNA基因更為重要。

32.分子伴侶（Molecular

chaperone）：

專指一類多功能蛋白質，它能促使某些蛋白質按正確方式組裝或折疊，而它本身卻不是最終形成功能蛋白質的組成部分，此類蛋白質特稱為分子伴侶。

33.RNA干擾（RNAi）：近年來研究發現，當一些小分子量的外源雙鏈RNA進入寄主細胞后，便可促進與其同源的內源mRNA發生特異性的降解作用，從而高效而特異地阻斷體內相應基因的活性，在細胞內發揮基因的剔除作用。這種現象叫RNA干擾。

34.生命體遺傳信息的三個層次是：

第一層次是由編碼蛋白質的基因組成，如人類基因組的基因編碼序列占總DNA序列的不到2%；

第二層次：僅由編碼RNA而不編碼蛋白質的基因組DNA組成。這一部分DNA叫做非編碼的DNA，它的轉錄產物稱為非編碼的RNA（不包括tRNA、rRNA和snoRNA），其相應的基因稱為RNA基因。這類基因隱藏在巨大的非編碼的染色體DNA序列當中。因此過去亦被稱為隱藏基因（cryptic

gene）；

第三層次：表觀遺傳信息層（epigenetic

layer

of

information）。

它貯藏于圍繞在DNA分子周圍并與DNA結合的蛋白質及其他化學物質中。表觀遺傳信息如同RNA基因一樣令人興奮，甚至比RNA基因更為重要。

35.全局調節（Global

regulation

system）

原核生物如細菌細胞為了適應環境條件的大范圍的重要變化，單靠一個操縱子作局部的調節顯然是不夠的，它還需一種能夠同時調節許多相關操縱子的，特殊調節體系。這種調節體系稱全局調節體系。它是由許多單一的調控途經，交織組成的一種復雜的調控網絡，來應付外界環境的壓力的同時，能適時快速作出反應。

共線性

（Collinearity）：所謂共線性包括如下4種不同的情況：

其一是指位于同一條染色體DNA分子或是同一條DNA分子上，不同基因的位置排列關系。這種情況有時特稱為同線性（Synteny）。

其二是指不同物種的相關染色體DNA分子之間，基因排列順序的一致性。

其三是指位于DNA分子與其轉錄本RNA分子之間，核苷酸堿基排列順序的一

致性。

其四是指位于DNA分子或mRNA分子上遺傳密碼子的排列順序，與相應的蛋白質多肽鏈上氨基酸排列順序之間的一致性。

37.基因工程誕生的理論基礎和技術基礎是什么？

（1）

理論基礎：

（a）

上世紀40年代明確了遺傳物質攜帶者是DNA，而不是蛋白質;明確了基因的載體。

（b）上世紀50年代相繼揭示了DNA雙螺旋結構模型和半保留復制機理，從而解決了基因的復制。

（c）

上世紀50

世紀末和60年代初相繼提出了中心法則和操縱子學說并成地破譯了遺傳密碼子，從而解決了遺傳信息的流向和基因表達問題。

（2）

技術基礎：

（a）

DNA分子的體外切割與連接技術;

（b）

DNA測序技術;

（c）

基因克隆的載體的發展與應用;

（d）大腸桿菌的轉化技術;

（e）瓊酯糖凝膠電泳技術;

（f）

核酸雜交技術。

38.RNA編輯（RNA

editing）：

在有些基因的轉錄后加工過程中，會有大量的尿嘧啶核苷酸（Us）加入到前體mRNA（pre-mRNA）的核苷酸序列中去，或是從pre-mRNA的核苷酸序列中刪除下來，甚至還會發生核苷酸堿基的取代反應。這種在RNA轉錄本成熟、修飾過程中發生的核苷酸的加入、刪除或取代的現象，叫做RNA編輯（RNA

editing）。

如此堿基飾變的結果，使得RNA轉錄本的核苷酸序列與其對應的DNA鏈的核苷酸編碼序列并不完全匹配。由此飾變的mRNA所轉譯的蛋白質多肽鏈的氨基酸序列結構，便與按照其基因的核苷酸序列推導出來的有所差別。

39（1）微小RNA(microRNA，miRNA)：

是在真核細胞中發現的一類調節型的、非編碼蛋白質的、小分子量的單鏈RNA。miRNA是由內源基因組編碼轉錄成的Pri-miRNA被果蠅酶切割生成70-80nt的pre-miRNA，經自我折疊成雙鏈的發夾結構，進入細胞質后被切丁酶進一步切割并除去單鏈環，形成21～25bp雙鏈體(miRNA：miRNA*)分子，雙鏈體解離出單鏈的存留鏈miRNA同目標mRNA結合阻止翻譯，另一條消失鏈miRNA*被降解。

39（2）miRNA與siRNA的比較

相似點：

（1）

分子結構十分相似。長度均為21～25的小分子量RNA、5，-端都具有P基團、3，-端都具有0H-基團；

（2）

都通過與RISC結合的方式發揮功能作用；

（3）

終極作用都是抑制mRNA的翻譯活性，而導致基因沉默。

不同點：

（1）

生物合成途徑不同；

siRNA主要是由外源導入的雙鏈(dsRNA)經切割產生的、少數的是由內源dsRNA切割產生。

miRNA則不然，它是由內源基因組編碼轉錄成Pri-miRNA，被果蠅酶切割生成70-80nt的pre-miRNA，由于pre-miRNA存在回文結構自我折疊成雙鏈的發夾結構→由輸出蛋白的作用進入細胞質后被切丁酶進一步切割加工成21～25bp小片段并除去單鏈環形成雙鏈miRNA，雙鏈體(miRNA：miRNA*)分子，解離出單鏈的存留鏈miRNA同目標mRNA結合阻止翻譯，另一條消失鏈miRNA*被降解。

（2）抑制翻譯的方式不同；

siRNA是通過與目標mRNA編碼區中的靶序列的結合引導RISC復合物中的切段酶，從靶序列的中間部位切割斷裂mRNA分子，從而抑制翻譯。

miRNA與此不同，它是通過與目標基因mRNA的3，-UTR序列中的結合位點的序列互補作用，促使mRNA失去翻譯活性。因此在miRNA作用過程中，雖然目標蛋白質的數量減少了，但其mRNA的豐度卻沒有明顯的變化。

（3）堿基互補水平不同；

siRNA與靶序列之間核苷酸堿基的互補水平達百分之百的完全匹配。

但miRNA則依材料來源的差異而有兩種不同的情況。植物mRNA與靶序列核苷酸堿基也是百分之百完全匹配的、而動物的miRNA與其結合位點的核苷酸堿基則不是完全互補的，兩者之間存在著若干非配對的堿基。

40.微量堿法分離純化質粒DNA的原理有如下幾點：

（1）根據質粒DNA與染色體線性

DNA在拓撲學上的差異。質粒DNA（cccDNA）是共價閉合雙鏈超盤旋構型的小分子DNA，而細胞染色體DNA在細胞裂解分離過程中斷裂成線性DNA（LDNA），雖然在化學本質上沒有本質區別，但在高級結構拓撲學上存在差異。

（2）

差異堿變性，在pH

12.0-12.5高pH條件下，線性的DNA容易變性解鏈，而質粒DNA不易變性或很少變性。

（3）

酸復性，在pH4.8條件下，cccDNA很快復性，而線性的染色體DNA不可逆的變性并與蛋白質、RNA形成沉淀物，通過離心可以把LDNA與cccDNA分開。cccDNA在上清液中。

（4）

酒精沉淀cccDNA,以2.5倍的95%

酒精沉淀質粒DNA，(濃度為66%沉淀最好)。保存在TE（pH8.o）緩沖液中，放置在－20Co下保存備用。

41.圖示λZAP載體的組成結構及優點：

T3-MCS-

T7

___________________________＼／____________________

cos_｜

｜

｜

pBluescriptSK噬菌粒

｜

｜

___｜

｜______｜____｜________________________｜______｜__｜cos

I

LacZ

T

結構組成：（1）含有具內刪除特性的pBluescriptSK噬菌粒；

（2）在pBluescriptSK噬菌粒兩端具有f1的起始子（I）和終止子（T）；

（3）在pBluescriptSK噬菌粒內部具有兩端帶有T3和T7啟動子的多克隆位點MCS；

（4）在pBluescript的內部帶有缺陷的LacZ基因；

（5）在該載體的兩端具有cos末端。

λZAP的特點：

（1）是一種具有內刪除特性的插入型λ噬菌體載體，（2）可克隆10kb大小的外源DNA。

（3）當外源DNA插入取向和讀碼結構正確，就能表達出融合蛋白質，并可用抗體篩選。

（4）當外源DNA插入在多克隆位點，使β半乳糖苷酶失活故可用Xgal顯色的組織化學篩選重組子（白色為重組子）；

（5）克隆的外源DNA可在體內隨pBluescript噬菌粒刪除下來，省去了常規的亞克隆；

（6）利用T3或T7噬菌體的RNA聚合酶，可方便地制備外源插入的DNA的任何一條鏈的mRNA。

內刪除源理：當含有外源DNA插入的重組λZAP載體，感染大腸桿菌F＋菌株，再用輔助噬菌體M13（或f1）

超感染。于是，在細胞內由此輔助噬菌體基因Ⅱ提供的反式作用蛋白質，便會識別位于λZAp載體上的f1起始子和終止子，并最終導致含有外源DNA插入的pBluescript噬菌粒在體內從λZAP載體上刪除下來。最終被輔助噬菌體M13的蛋白質包裝成單鏈DNA噬菌體顆粒，并被擠出寄主細胞。

42.M13克隆體系中β-半乳糖苷酶Xgal的顯色原理

M13克隆體系包括M13克隆載體和M13特殊的寄主菌株兩部分組成。β-半乳糖苷(LacZ)當它為四聚體時具有活性，可把無色的X-gal切割成半乳糖和深藍色靛藍，因此Xgal可作為β-半乳糖苷酶活性的一種指示劑。由于LacZ基因分子量太大。依據基因內互補作用的原理。利用基因工程的方法，即將編碼同樣的蛋白質多肽鏈序列，但各自具突變的序列，當這種載體轉入到特殊的寄主菌株中便組成具有功能活性的多肽的生化過程。根據這一原理，在M13克隆載體種上LacZ－HindⅡ片段具有β-半乳糖苷酶第2-92位氨基酸，大腸桿菌F，因子上帶有缺失了第11-42位氨基酸的缺陷性LacZ(簡稱M15基因)。當M13載體感染了這種M13特殊的寄主菌株如JM101后，便會產生具有功能活性的β-半乳糖苷酶，于是在含有指示劑Xgal和誘導物IPTG的培養基中，就會出現藍色的噬菌斑。但當外源基因插入到M13克隆載體時，無法形成四聚體的具活性的LacZ，就不能切割Xgal，故白色噬菌斑為重組子。

43.DNA標簽法分離產物未知基因的原理及主要步驟

根據DNA插入突變作用原理，用已知的插入序列為探針，分離產物未知基因的方法。由于插入的DNA序列是己知的，人為地給目的基因加上標簽，故稱DNA標簽法。

主要步驟：（1）

當一段特定的DNA標簽序列插入到野生型的基因的內部或其附近位點時，便會誘發該基因發生突變，形成突變體；（2）

用已知的標簽序列作DNA分子探針，從突變體的基因組DNA文庫中篩選出突變的基因；（3）

再利用篩選到的突變基因除標簽序列以外的序列作探針，再從野生型的基因組DNA文庫中篩選出目的基因。

44.用于克隆真核基因的大腸桿菌表達體系的優點和條件

大腸桿菌表達體系的優點：

（1）

背景知識清楚，分子生物學、遺傳學的基礎研究，特別是表達調控知識豐富；

（2）

具有完善安全的基因工程體系。包括安全的寄主菌株和載體系統；

（3）

早期轉基因表達調控研究扎實，許多基因如胰島素基因、生長素基因等，都能在大腸桿菌中高效的有效表達；

（4）

易工業化批量生產，培養方便、操作簡單、成本低廉，特別對藥用蛋白

發酵生產。

實現真核基因在大腸桿菌中有效表達的條件：

（1）真核基因的編碼序列必須是連續的cDNA，因為原核細胞中不具備剪輯加工的酶；

（2）原核的啟動子，最好是誘導型的強啟動子；

（3）以融合蛋白質的形式表達，穩定性好。

45.酵母

雙雜交體系的原理及其用途是什么？

酵母雙雜交體系簡稱Y2H。這是在上一世紀90年代初，在轉錄因子結構的基礎上發展出來的一種敏感的體內鑒定基因的方法?？捎脕碛行У胤蛛x與己知靶蛋白相互作的另一種蛋白質編碼基因，也是分離與某種特定啟動子調控元件結合的特異性轉錄因子的有效手段。

如同許多真核生物的轉錄因子一樣，酵母β-半乳糖苷酶的轉錄因子GAL4也含有兩個結構上可分開的、功能上相互獨立的結構域，即DNA結合域(DNA_BD)和轉錄激活域(AD)。應用DNA重組技術，可以把GAL4轉錄因子的這兩個結構域分開。如果把它們放置在同一個酵母細胞中，所產生的GAL4

DNA-BD和AD多肽，彼此之間不會直接發生相互作用，所以不具有轉錄因子的功能活性，無法激活相關基因轉錄。但是應用DNA重組技術，將兩個分開的GAL4的DNA-BD和AD，甚至分別來自兩個不同的轉錄因子的DNA-BD和AD重組成一個轉錄因子(使之在空間上彼此靠近)則又可重新獲得轉錄因子的功能活性，即可激活相關基因的轉錄。酵母雙雜交體系就是根據這種原理建立的。

酵母雙雜交體系包括兩種大腸桿菌-酵母菌的穿梭載體；和一種特殊的己經缺失了內源GAL4轉錄因子的酵母寄主菌株。

第一種穿梭載體叫DNA-BD質粒載體：

它具有色氨酸合成酶基因、把己知的靶基因按正確的讀碼結構和取向插入在該載體的多克隆位點上，便可與GAL4

DNA-BD多肽形成第一種雜種蛋白(X)。

第二種穿梭載體叫AD質粒載體：

它具有亮氨酸合成酶基因（leu）、是用于構建cDNA表達文庫的專用載體?？寺〉腸DNA片段按正確的讀碼結構和取向插入在該載體的多克隆位上（構成cDNA文庫），cDNA編碼的蛋白質便與GAL4的AD多肽融合成第二種雜種蛋白（Y）。

酵母寄主菌株：

將上述兩種雜種質粒共轉化到酵母雙雜交體系專用的寄主菌株特點：（1）這種菌株己經喪失了內源GAL4轉錄因子的能力；（2）具有LacZ和his3的報告基因；（3）具有trp和leu的轉化標記，即在缺少Trp和Leu的缺陷性培養基上無法生長的。

將共轉化的酵母細胞涂布在缺少亮氨酸(Leu）和色氨酸（Trp）的SD培養基上，如果由笫一種質粒表達的靶蛋白同第二種質粒表達的cDNA文庫編碼的一種蛋白質發生了相互作用，這樣DNA-BD與AD就會在空間上彼此靠近，而且它具有色氨酸和亮氨酸的編碼基因，因此在缺陷性的選擇培養上能生長，于是便構成了有功能活性的GAL4轉錄因子，從而啟動下游報告基因LacZ的表達，在含X-gal和誘導物IPTG的條件下，β-半乳糖苷酶把X-gal切割，選擇出藍色陽性克隆。這有可能分離到含有與靶蛋白相互作用的另一種蛋白編碼基因。

酵母雙雜交體系可以用于產物未知基因的分離、也可用于新基因功能的鑒定。

46.表達載體的組成：

（1）

原核啟動子，最好是誘導型的強啟動子，使外源基因蛋白表達量占總蛋白的10-30%。

如果表達的是毒蛋白，啟動子應呈現低限的基礎轉錄水平；

（2）

多克隆位點(MCS)，用于插入外源基因；

（3）

抗生素抗性基因，用作選擇標記；

（4）

復制起點(ori)，決定外源基因的拷貝數;

（5）

轉錄終止子，防止啟動子通讀作用，提高蛋白質的穩定性；

（6）

翻譯起始序列和轉譯增強子；

（7）

翻譯終止子，防止核糖體的跳躍(Skipping)。采用四聯核苷酸UAAU

效果更好。

47.簡述構建cDNA克隆的定義、主要步驟及其優越性？

（1)

定義：cDNA克?。簭膍RNA出發，經反轉錄、與載體分子重組、轉化寄主細胞增殖，將目的基因克隆化的過程稱為cDNA克隆。從理論上講該生物的每一種mRNA都應有一個克隆。故亦稱cDNA文庫

（2）

步驟：

第一步：提取處于特定發育階段的真核生物體的特定器官或組織中的總RNA，根據mRNA

poly(A)尾特點過Oligo(dT)柱，分離純化出mRNA；

第二步：利用適當引物(一般用Oligo(dT)和反轉錄酶，獲得

cDNA/mRNA雜合分子。

第三步：，用堿處理降解，或用RNaseH酶切割cDNA/mRNA雜合分子中的mRNA鏈獲得cDNA第一鏈，再由第一鏈cDNA合成第二鏈cDNA。

第四步：雙鏈DNA與適當的載體重組，將重組體的群體導入大腸桿菌寄主細胞中增殖，從而構成cDNA文庫。

（3）cDNA文庫的優點：

（a）

以mRNA材料出發，對于RNA病毒特別適用；

（b）庫容量?。ㄏ喈擠NA文庫的15％）篩選工作量?。?/p>

（c）

假陽性比例小，因每一種mRNA就應有一個克隆。

（d）

具特殊用途：①

克隆的真核基因在原核中表達需cDNA；

②

核苷酸序列測定；

③

發育過程中時空表達基因的研究分析。

48.何為柯斯質粒載體，其結構、特點是什么？

定義：柯斯質粒載體是人工構建帶有λ噬菌體的cos位點和E.coli質粒的復制子的新型質粒載體。它具有質粒載體的特點和λ噬菌體的特點。

結構：

（a）

具一個質粒的復制起點（ori）;

（b）具若干來自質粒載體的選擇記（1-2個）;

（c）具相當數量的來自質粒的核酸內切酶的單切點;

（d）具有λ噬菌體的cos位點。

特點：（1）λ噬菌體的特點：a.導入寄主細胞后，可以重新環化起來；

b.經體外包裝后轉導效率大大提高;

c.無法進入溶菌周期，也不能形成噬菌體顆粒。

（2）具質粒載體特點：a.在寄主細胞內可像質粒DNA一樣復制；

b.在氯霉素作用下擴增；

c.具有抗生素抗性記號。

（3）具有高容量的克隆能力：上限45kb，下限30kb；

（4）能與帶有同源序列的質粒DNA重組。

49.分別敘述原核基因組和真核基因組的結構特點。

（1）原核基因組的結構特點：

（a）高效的遺傳信息利用率；

①

既沒有不必要的額外重復序列，也極少存在無功能的冗余序列；

②

基因組９８％以上的核苷酸序列都是編碼基因

③

基因排列緊湊，同一個操縱子不同基因之間的間隔距離一般不超過

２０bp，而且其中還存在著轉錄起始信號和終止信號；

④

存在著編碼序列彼此重疊、編碼不同蛋白質的重疊基因。

（b）雙鏈ＤＮＡ的編碼功能；

（c）多基因聚集排列成操縱子結構形式；

（d）染色體基因組的拷貝數平均每細胞為1.1條，在富裕培養基中可高達3～4條。

（2）真核基因組的結構特點：

（a）包裝成特定的染色體結構；

（b）基因組的多倍性；

（c）具有大量的重復序列；

（d）

高比例的非編碼的DNA序列。以人為例，非編碼序列占基因組總長的98%以上，而蛋白質編碼基因的序列還不到基因組總長的2%。包括基因與基因之間的非編碼的DNA序列，以及基因內部的非編碼的DNA序列。

（e）

龐大的基因數量；

如擬南芥：25，000個左右、水稻：40，000個左右、小鼠：30，000個左右、人類：24，000個左右。

（f）基因分布密度不均一。如基因分布有富集區和荒漠區之分。

.何為基因克?。科渲饕膶嶒灢襟E

定義：基因克隆又叫DNA克隆，它是指將外源基因插入到適當的克隆載體上，形成重組DNA分子群體轉化到大腸桿菌寄主細胞中進行復制繁殖，以便從大分子DNA或DNA片段中分離純化出目的基因或特定的DNA片段的實驗操作，叫做基因克隆或DNA克隆。

其主要步驟：

（1）

DNA片段化：從實驗材料分離純化基因組DNA，經機械方法或酶

消化、超聲波等方法獲得一定長度的DNA片段。

（2）

體外重組：將片段化的DNA與適當載體分子重組。

（3）

重組子轉化：將重組子轉入到適當的寄主菌株中進行增殖。

（4）

重組子的篩選：從大量的轉化細胞中篩選陽性克隆的重組子。

（5）

目的基因的分離：用多種酶切后走凝膠電泳，并用探針進行雜交，分離出目的基因的DNA，并克隆在M13載體上進行測序。

(6）

目的基因的表達與功能鑒定。

51.DNA轉錄與復制有哪些差別？

基因的轉錄與復制的過程，無論在生物化學還是酶學方面都是十分相似的。它們二者都是在各自特有的核酸酶，即RNA聚合酶和DNA聚合酶的催化下，合成出一條與DNA模板鏈互補的新的多核苷酸鏈。盡管如此，基因的轉錄（RNA合成）和基因的復制（DNA合成）之間，仍然存在著如下幾個方面的差別：

（1）對引物需求有別

。在基因復制中，需要同時存在模板鏈和引物，DNA聚合酶才能啟動DNA新鏈的合成。而基因的轉錄則不同，它不需要引物，RNA聚合酶便能啟動RNA新鏈的合成。

（2）使用的底物不一樣。由于DNA和RNA分子的核苷酸組成成分不同，因此基因復制與轉錄所用的底物也不一樣：前者是用脫氧核糖核苷三磷酸：dATP、dGTP、dTTP、dCTP；后者是用核糖核苷三磷酸：ATP、GTP、TTP和CTP。

（3）與模板的結合狀態有異?；虻膹椭剖前凑瞻氡Ａ舴绞竭M行的，在新生成的兩條子代DNA分子中，新生鏈和模板鏈始終是結合在一起的。而基因的轉錄則不同，新合成的RNA鏈最終是要從模板上解離下來的。

（4）精確性程度差異懸殊。在基因的轉錄過程中錯誤參入RNA鏈的核苷酸頻率是10－4，也就是說每參入10，000個核苷酸，就會出現一個錯誤（萬分之一錯誤率）。而在基

因的復制核苷酸錯誤參入頻率是10－7，也就是說每參入10，000，000個核苷酸，僅出現一次錯誤（千萬分之一錯誤率）。這也就是說DNA復制的精確度是超過轉錄的1000倍！

（5）涉及范圍不同?；驈椭仆钦麄€基因組從頭至尾逐步進行，涉及范圍包括整個基因組中的所有的DNA和基因。而基因轉錄則不同，它所涉及的范圍要比復制小得多，通常只是一個基因或一個操縱子。

52.何為基因擴增，它有哪些方式？

基因擴增是指某種基因拷貝數增多的現象。

其方式有：（1）利用PCR

技術使某基因拷貝數增多；

（2）隆基因導入寄主細胞內使大量繁殖，使基因擴增(單拷貝基因可擴增到約1x106的拷貝)；

（3）環境壓力影響使某種基因適應性的擴增；

（4）程序性基因擴增。如非洲爪蟾在形成卵發育過程中其rRNA大量擴增；

（5）生物進化過程中的某種基因得以擴增。

53.真核基因與原核基因表達調解機理的差異

（1）源于細胞結構水平的差異。真核細胞轉錄和翻譯分別在細胞核和細胞質中分開進行；沒有涉及mRNA運送過程的調節。原核細胞的轉錄和翻譯是在細胞質中偶聯發生。

（2）源于染色體結構水平的差異。真核細胞基因組被包裝成染色體，存在于細胞質的有關蛋白質因子（如TF）進入細胞核必須克服染色體的層層屏障才能與順式元件結合。

（3）源于基因排列與結構的差異。真核基因為單順反子，大多為斷裂基因。轉錄后加工復雜，而原核基因為多順反子，轉錄后加工也簡單得多。

54.說明mRNA差別顯示分離產物未知基因的基本原理并評述其優缺點。

答：（1）mRNA差別顯示：是建立在基因差別表達理論基礎上，通過比較不同個體，或同一個體的不同組織或不同發育階段之間mRNA種的差別，并應用反轉錄PCR技術而發展出來的一種分離產物未知基因的方法。故又叫mRNA差別顯示反轉錄PCR，簡稱DDRT-PCR。

（2）原理：根據真核基因3，-端的mRNA分子的poly（A）尾巴前2位堿基，可把mRNA分子分成12種類群，如1個堿基可分為3大類群;根據3，-端的錨定引物，和5，-端設計隨機引物。從數理統計推算和實驗經驗，3種錨定引物和80種隨機引物(3×80＝240）240組合,大體上涵蓋95%的mRNA。

（3）mRNA差別顯示優點：

（a）簡單方便，由于使用PCR擴增和序列膠電泳技術，故簡單快捷。

（b）靈敏度高，實驗利用了PCR技術、序列電泳技術和同位素自

影技術，故具極高的靈敏度。

（c）多用性，可同時比較多個樣品間的基因表達差異。④直觀性，其每個步驟均可被直觀地檢測。

（4）mRNA差別顯示缺點：

（a）假陽性比率高。

（b）擴增的片段分子量較小。

（c）工作量大。

55.影響酶切反應的因素：

答：（1）DNA分子的性質：（a）酶切位點周圍的堿基成分；

（b）酶切位點的密度；

（c）DNA分子的構型；

（d）NA分子的甲基化程度。

（2）酶切的溫度；

（3）DNA制劑的純度。

56.產生酶切星號活性的因素：

（1）每μg樣品酶切的用量不得超過10單位；

（2）酶切反應體系中的甘油濃度不得超過5%；

（3）其他金屬離子取代二價Mg；

（4）金屬鎂離子不得低于25mmol/L；

（5）pH不得超過8；

（6）樣品中有機溶劑污染的影響。

57.一種基因產生多種蛋白質的原因分析

答：（1）主要原因：（a）.許多基因都擁有多個啟動子。在人類基因組中，至少有一半以上的基因都具有多個啟動子。在真核斷裂基因的轉錄過程中，可變啟動子的使用常常涉及到位于轉錄起點的可變首位外顯子（alternative

first

exon）?？勺儐幼拥牟煌蓡T，驅動從相應的可變首位外顯子開始轉錄反應。已經對有些基因的可變首位外顯子作了全陣列（whole

arrays）分析，結果證明每個可變首位外顯子都具有一個自身專有的啟動子?？勺兊氖孜煌怙@子的不同產生的蛋白質產物不同；

（b）

初級轉錄本的可變剪接可產生多種蛋白?？勺兗艚樱╝lternative

splicing）又稱為差異剪接（differential

splicing）或可變mRNA剪接。這是指真核斷裂基因初級轉錄本，在不同類型的或處于不同發育階段的細胞中發生的不同形式的剪接作用。結果生成具有不同序列結構特征、并編碼不同蛋白質異形體的成熟的mRNA分子。因此說，可變剪接可以使同一個基因的初級轉錄本，最終翻譯出多種不同功能的蛋白質分子。以果蠅Dscam基因為例，可形成38016種蛋白質異形體?？梢娍勺兗艚邮窃斐梢环N基因多種蛋白質現象的另一種重要原因。

（2）次要原因：（c）

RNA的編輯；致使mRNA分子核苷酸序列的結構出現了變化。此種RNA編輯具有多種不同的效應，諸如產生出新的起始密碼子、終止密碼子或是造成多肽鏈編碼序列出現變化。因此，RNA編輯的結果，改變了源自基因DNA模板鏈的遺傳信息，翻譯出不同于基因原來編碼的新的蛋白質多肽。

（d）

基因重排均可產生不同的蛋白。由于基因區段轉位作用或隨機連接造成的基因可變區固有排列順序的改變的基因重排（gene

rearrangement）或DNA重排，可使基因產生不同的蛋白。

58.控制真核基因表達調節的主要方式：

（1）基因重排的調節方式；

（2）基因擴增的調節方式；

（3）基因調節蛋白質的轉錄調節方式；

（4）RNA加工的調節方式；

（5）核質mRNA轉的調節方式；

（6）mRNA穩定性的調節方式；

（7）mRNA翻譯的調節方式。

59.真核基因表達調節的主要特點：

（1）真核生物與原核生物在基因表達調節方面的相似性，已知有不少在大腸桿菌中出現的調節機理，原則上也適用于真核生物，例如：i.兩者的轉錄調節，都是通過DNA結合蛋白質，同基因啟動子中的特異性順式元件的結合作用進行的。ii.兩者DNA結合蛋白質的多肽基序，在序列結構上也是相同的.（2）真核生物與原核生物在基因表達調節方面的差異性：i.真核生物細胞類型的多樣性，與原核相比，特別高等植物與動物，都具有數百種功能各異的不同細胞類型；ii.真核生物具有細胞核結構，因此基因的轉錄和翻譯是分別在細胞核與細胞質中分步進行的；iii.真核生物具有龐大的基因組，其長度要超過原核的700多倍；iii.真核生活物基因擁有大量的各種類型的基因，其總數可達數萬種，相當原核生物的20多倍.（3）真核基因表達調節方面與原核基因相比其復雜性或特殊性：i.發育調節,基因表達的發育階段性調節，器官和組織特異性調節；ii.分化調節，同一受精卵究竟是如何分化出各具特定功能和形狀態特征的不同類的組織、器官和細胞？；iii.表達順序性，復雜的多細胞生命體中，不同基因表達的順序性的調節機理；iv.同一生命個體中，不同細胞之間的生命活活動被此之間的協調和相對穩定性是息怎樣維持的?；v.選擇性表達，相同基因組為什么在紅細胞前體中會選擇性表達編碼血紅蛋白的基因，而在胰腺細胞中卻是選擇性表達胰島素的基因。此種精確控制基因差異表達的分子機理又是如何解釋的呢？。

(2014.4.12由北京大學生命學院黃美娟提供)

第三篇：中國農業科學院研究生院2014級新生報到須知

中國農業科學院研究生院2014級新生報到須知

2014級新同學：

你們好！歡迎你到中國農業科學院攻讀博士研究生！在您即將踏入校門報到之前，請詳細閱讀以下內容，并按規定辦理入學報到有關事宜。

一、憑我院簽發的《錄取通知書》于2014年9月1日到北京市海淀區中關村南大街12號中國農業科學院研究生院報到，其他證明均不能作為入學憑證。

二、黨的組織關系臺頭寫到“農業部直屬機關黨委”，去向寫“中國農業科學院研究生院”，不要轉到或寫到研究所；共青團的組織關系由所在單位團委直接轉到“中國農業科學院研究生院共青團委”。委托培養研究生的臨時組織關系也必須轉入上述單位。

人事檔案郵寄地址：北京市海淀區中關村南大街12號中國農業科學院研究生院研究生工作處。郵編：100081

三、憑我院簽發的《錄取通知書》到戶口所在地派出所自愿遷出本人戶口。戶口遷出時應注意以下事項：

1.戶口一律遷至“北京市海淀區中關村南大街12號中國農業科學院研究生院”，戶口遷移證上必須注明“居民身份證號”。

2.戶口只限本人，不能攜帶家屬。

3.戶口已在北京市正式落戶的新生（學校集體戶口者除外）不遷戶口。

4.農業戶口遷入學校后，均要轉為非農業戶口。

四、委托培養研究生及中國農業科學院各研究所的在職研究生不轉戶口、檔案。

五、帶全本人的被褥、蚊帳、衣物和日常生活用品(南方籍同學應帶全冬季御寒衣物)。

六、報到時須提交以下材料：1.錄取通知書；2.戶口遷移證（不

遷戶口者除外）；3.學歷、學位證書原件；4.黨（團）組織關系；5.近期免冠半身正面一寸照片8張。

七、請認真按要求辦理各種手續。若手續不全，將不予報到，并須在規定時間內回原單位重新辦理，否則將取消入學資格。如有特殊原因不能按時報到者，應由所在學校（單位）出具有效證明向學校請假，并將請假條發傳真至：010－82106609（注明工作處收）。無故逾期兩周不報到者，將取消入學資格。

2014年6月11日

第四篇：中國農業科學院2014年碩士研究生招生簡章

中國農業科學院2014年碩士研究生招生簡章

一、培養目標

學術型碩士研究生旨在培養熱愛祖國，擁護中國共產黨的領導，擁護社會主義制度，遵紀守法，品德良好，為社會主義建設服務，掌握本學科堅實的基礎理論和系統的專業知識，具有創新精神和從事科學研究、教學、管理等工作能力的高層次學術型專門人才。

全日制專業學位研究生旨在培養熱愛祖國，擁護中國共產黨的領導，擁護社會主義制度，遵紀守法，品德良好，為社會主義建設服務，掌握某一專業（或職業）領域堅實的基礎理論和寬廣的專業知識、具有較強解決實際問題的能力、能夠承擔專業技術或管理工

作、具有良好職業素養的高層次應用型專門人才。

二、報考條件

（一）推薦免試

我院接收優秀應屆本科畢業生到相關研究所推薦免試攻讀碩士學位（學術型或專業學位）?？忌鷳〉卯厴I學校2014年碩士研究生推薦免試資格。具體要求參見2014年推

免生招收公告。

（二）全國統考

1．中華人民共和國公民。

2．擁護中國共產黨的領導，愿為社會主義現代化建設服務，品德良好，遵紀守法。

3．考生的學歷必須符合下列條件之一：

①國家承認學歷的應屆本科畢業生。

②具有國家承認的大學本科畢業學歷的人員。

③已獲碩士學位或博士學位的人員（只準報考委托培養或自籌經費碩士生）。

④獲得國家承認的高職高專畢業學歷2年或2年以上（從高職高專畢業到2013年9月1日），以及國家承認學歷的本科結業生和成人高校（含普通高校舉辦的成人高等學歷教育）應屆本科畢業生，按本科畢業生同等學力身份報考，同時還須滿足以下三個條件：一，修完大學本科全部必修課程；二，在所報考專業領域的學術期刊上以第一作者發表過

1篇（含）以上文章；三，報考專業與所學專業相同或相近。

⑤自考生和網絡教育考生，須在報名現場確認截止日期（2013年11月14日）前取得國家承認的大學本科畢業證書方可報考。在校研究生報考須在報名前征得所在培養單位

同意。

4．身體健康狀況符合國家規定的體檢要求。

三、報名

考生報名前要仔細核對本人是否符合報考條件，報考資格審查將在復試階段進行，凡

不符合報考條件的考生將不予錄取，相關后果由考生本人自負。

1．報名采取網上提交報考信息和現場確認相結合的方式。

2．網上提交報考信息時間為2013年10月10日至10月31日（每天9:00-22:00），逾期不再補報，也不得再修改報名信息。預報名時間為2013年9月25日至9月28日（每天9:00-22:00）。屆時請考生自行登陸“中國研究生招生信息網”（公網網址：http：//yz.chsi.com.cn，教育網址：http://yz.chsi.cn）報名。

3．考生網上提交報名信息時，請正確詳盡填寫本人通信地址并確保其在2014年6月30前有效，以便我院準確發放錄取通知書等材料。凡因通信地址填寫不詳或填寫錯誤導致

錄取通知書等材料無法寄達的，后果由考生本人自負。

4．現場確認時間為2013年11月10日至11月14日，逾期不再補辦。

5．報名點選擇中國農業科學院（報名點代碼：1176）的考生，請在規定時間到我院現場照相、確認報考信息；選擇其他外省市報名點的考生，請按當地招生部門要求，到指

定的報名點現場照相、確認報考信息。

6．我院實行按研究所、二級學科及研究方向報名考試，考生通過復試后與導師雙向選擇的招生錄取辦法。報名前請考生仔細閱讀我院2014年招生專業目錄。各研究所、各專業招生導師信息查詢方法：進入中國農業科學院研究生院網站→招生就業→招生信息→導

師信息。

四、初試

1．2013年12月25日-2014年1月6日，考生憑網報用戶名和密碼登錄“中國研究生招生信息網”下載打印《準考證》?？忌鷳{下載打印的《準考證》及第二代居民身份

證參加初試。

2．初試時間：2014年1月4日-5日?？荚嚂r間以北京時間為準，上午8:30～11:30，下午14:00～17:00。不在該規定日期舉行的研究生入學考試，國家一律不予承

認。

3．考試地點：報名點選擇中國農業科學院（報名點代碼：1176）的考生，到中國農業科學院參加考試；報名點選擇當地省、市招生辦公室指定報名點的考生，在當地報名點

進行考試。

4．招生研究所、專業、研究方向、考試科目等信息詳見《中國農業科學院2014年碩士研究生招生專業目錄》?？荚嚳颇恐?01-思想政治理論、201-英語

一、202-俄語、203-日語、204-英語

二、301-數學

一、302-數學

二、303-數學三等為全國統一命題；其他科目均由我院自行組織命題。2014年起，原農學門類聯考科目314-數學（農）、315-化學（農）、414-植物生理學與生物化學、415-動物生理學與生物化學將改為由我院自主命

題，請考生注意。

五、復試

我院研究生復試工作由各研究所在研究生院的統一安排下分別組織進行。復試時間、地點、科目、方式均由各研究所自行規定，并在復試前通過網站向考生公布。

1．復試分數線：進入我院各研究所復試的考生，初試成績必須達到國家一類地區復試分數線要求，各研究所可根據上線生源情況制定不低于國家分數線的本研究所復試線。

2．復試時間：一般在2014年4月，具體時間由各研究所規定。

3．復試內容：一般包括外國語口語和聽力測試、專業筆試和綜合面試，具體復試科目由各研究所自定。重點考察學生的專業基礎、綜合分析能力、解決實際問題的能力和動手能力等。以同等學力資格報考的考生復試時還須加試兩門本科專業基礎課，具體科目由

報考研究所規定。

4．復試比例及權重：實行差額復試，復試人數一般為招生人數的120%左右。各研究所根據本所生源情況和專業特點，差額比例可適當擴大。復試成績不及格者不予錄取?？忌偝煽冇沙踉嚦煽兒蛷驮嚦煽兘M成，復試成績占總成績的權重一般為40%。

5．我院各研究所將在復試時將對考生有效身份證件、學歷證書、學生證等報名材料

原件及考生資格進行審查，對不符合教育部規定者，不予復試。

六、調劑政策

我院調劑原則：先院內、后院外。根據各研究所和各專業的實際需求，對一志愿報考我院且成績達到國家復試分數線的考生優先在院內各研究所之間調劑。

報考學術型和報考專業學位研究生之間的調劑政策，待初試結束后，根據教育部規定

并視第一志愿生源上線情況而定。

七、體檢

體檢工作在復試階段由各研究所分別組織進行。體檢標準將參照《普通高等學校招生體檢工作指導意見》（教學〔2003〕3號）和《教育部辦公廳衛生部辦公廳關于普通高等學校招生學生入學身體檢查取消乙肝項目檢測有關問題的通知》（教學廳〔2010〕2號）

等有關規定執行。

八、錄取

經過初試、復試、體檢等環節，各研究所在綜合考察考生思想政治表現、業務素質及身心狀況的基礎上，以考生的總成績排名決定擬錄取名單，考生通過雙向選擇的方式確定

本人導師。

擬錄取為定向及委托培養的碩士研究生，須在錄取前簽訂定向和委托培養協議書；擬錄

取的往屆考生須在考生人事檔案到達后發放錄取通知書。

錄取考生入學報到時需攜帶本人錄取通知書及本科畢業證書、學位證書原件等材料。

九、學習年限

我院學術型和全日制專業學位碩士研究生學制一般均為3年，其中在研究生院（北京）進行集中課程學習時間一般為1年，符合規定的碩士生可以申請提前畢業。

十、碩博連讀

學習成績優秀、科研能力突出的學術型碩士生可在二年級時申請碩博連讀，通過我院

組織的評審考核后，可在第三年直接進入博士階段學習。

十一、學費及待遇

按照國家規定，從2014年秋季入學起，我院對新入學研究生將統一收取學費，具體辦法另行制定，同時我院將進一步完善研究生獎助政策體系，加大對優秀在學研究生的獎

助力度。

十二、就業

定向或委托培養碩士生畢業后回定向地區或委托單位。

非定向碩士生畢業時采取畢業生與用人單位“雙向選擇”的方式，落實就業去向。

十三、咨詢方式及其他

1．我院實行院所兩級管理，考生在報名、考試過程中的相關問題可與我院招生辦公室聯系咨詢；考生在復試、錄取過程中的相關問題可直接與報考研究所聯系咨詢。

2．我院研究生招生的最新信息，如招生專業目錄、報名公告、復試方案、擬錄取名單等均可在中國農業科學院研究生院主頁上查詢，網址：http://www.tmdps.cn。

4．2014年我院將繼續招收少數民族高層次骨干計劃考生，相關政策請參考《中國農業科學院2014年少數民族高層次骨干人才計劃碩士研究生招生簡章》。

5．我院不舉辦任何形式的考前輔導班，不出售歷年真題及參考書目或辦理郵購業

務。雙休日及節假日休息，工作時間接待咨詢。

6．本簡章中如有內容與教育部最新政策相沖突，按教育部最新政策執行。

第五篇：中國農業科學院研究生院應屆畢業生出國(境)協議書

中國農業科學院研究生院應屆畢業生出國（境）協議書 甲方：

乙方：中國農業科學院研究生院

按照《中國農業科學院研究生院學生管理規定》和《國家公派出國留學研究生管理規定（試行）》中的有關規定，現甲、乙雙方在自主自愿的條件下，達成以下協議：

1、甲方確因（A.學術交流、科研合作B.攻讀學位 C.其它：）需要出國（境），所赴國家或地區為____________。

2、甲方出國（境）期限為____________，最遲應在_____年_____月_____日前回國。

3、甲方需認真遵守《國家公派出國留學研究生管理規定（試行）》中的各項規定。

4、乙方協助甲方辦理有關護照和簽證手續。乙方負責保存甲方在留學期限內的戶籍和檔案，超過規定留學期限未歸，乙方將甲方檔案和戶籍遷轉回生源所在地。

5、甲方不享受在校生待遇，留學期間要嚴格遵守我國和當地法律規定、風俗人情，如有違紀違規現象，造成的意外及其它刑事、民事責任與乙方無關。

6、甲方回國應在一個月內向乙方報到，辦理有關手續。

7、本協議自簽訂之日起生效。

8、本協議書一式三份，甲方持一份、乙方持兩份。

甲方（蓋章）代表簽字日期 乙方（蓋章）代表簽字日期 甲方國內聯系人與本人關系聯系方式