第一篇:南方醫科大學研究生細胞培養技術考試重點總結
一.細胞培養技術的概念,簡史
在體外對細胞培養并進行研究的技術, 也叫細胞克隆技術.細胞培養技術是生物技術中最核心、最基礎的技術。
細胞培養技術主要包括二大方面內容: 1.微生物細胞培養技術
2.動, 植物細胞培養技術 :1)器官培養技術 2)組織培養技術 3)細胞培養技術 二.細胞培養的優點
1.得到的是活細胞:能長時間、直接觀察、研究活細胞的形態、結構、生命活動 2.可控制:(1)可控制-選擇對象:類型: 上皮?間質?性質:正常?腫瘤?(2)可控制-調節條件:各種因素:物理、化學、生物等因素(3)可控制-利用方法。采用各種研究技術、記錄方法:
研究:倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記--記錄:攝影照片、縮時電影、電視--3.應用廣(1)學科多:(2)對象廣:各種動物:低等動物--高等動物--人類;一種動物:不同年齡;不同組織: 正常或異常(腫瘤)
4.較經濟:花錢較少但可得到大量、同時、重復性好的生物學性狀相似的實驗對象 5.不易污染環境
三、細胞培養的缺點
1.現人工無法完全模擬體內環境:
a.失去彼鄰關系b.失去神經體液的調節和細胞相互間的影響
2.細胞趨向單一化
3.失去原有組織結構和細胞形態
4.分化減弱或不顯:要正確認識體外培養細胞是一種特定條件下生長的細胞群體。5.某些類型細胞還很難培養 6.大規模培養難度大
四.體外細胞培養的方式
1.粘附型培養: 附著在某一固相支持物表面才能生長的細胞。
粘附是大多數有機體細胞在體內外生存和生長發育的基本存在方式
2.懸浮型培養: 不必附著于固相支持物表面,而在懸浮狀態下即可生長的細胞。來源:來自血,脾或骨髓,尤以血中白細胞.癌腫細胞也可以.特點:在懸浮中生長良好,細胞圓形,單個或小細胞團
優點 : 生存空間大,提供數量大,傳代方便(不需消化),易于收獲可獲得穩定狀態.缺點:觀察不方便, 很多細胞不能懸浮生長(尤以正常細胞)五.體外培養細胞的生長形態分類 根據形態大致的不同,主要2類:
1.上皮樣:來源:來源于外胚層,內胚層細胞如:皮膚及其衍生物, 消化道,乳腺,肺泡, 上皮性腫瘤 形態:類似體內的上皮細胞,扁平,不規則多角形,中有圓形核易相連成片相靠—緊密相連—成薄層—鋪石狀
2.成纖維細胞樣:培養中形態與成纖維細胞類似。來源:中胚層間充質組織起源的組織如:真正的成纖維細胞:心肌,平滑肌,成骨細胞,血管內皮
形態:似體內成纖維細胞的形態,胞體梭形或不規則三角形,胞質向外伸出2—3個長短不等的突起,中有卵圓形核。3.其它,不定型 六.常用術語
1.細胞系(cell line):原代培養物首次傳代后,就可以稱細胞系。不能或有限傳代下去稱有限細胞系。能連續傳代的稱連續細胞系。
2.細胞株:某類細胞經傳代克隆并保持了該類細胞理化特征的細胞群體。3.原代培養:直接取自生物體的組織細胞并進行培養
4.傳代培養:將細胞從一個培養物內分散到另一個培養物的過程。5.轉染(transfection):將某個基因轉移到培養細胞核內。
6.lipofection:常用細胞轉染劑(脂質體),它搭載基因(DNA)后形成復合物可轉染到動物細胞。
第二章 細胞培養的條件及設備
一、細胞培養室
二、常用設備 1.超凈工作臺; 2.純水裝置; 3.抽氣泵; 4.消毒裝置; 5.干燥裝置;
6.CO2培養箱(孵箱); 7.液氮生物容器; 8.冰箱; 9.離心機 10.天平
11.顯微鏡 12.過濾裝置 13.空調 14.酸度計 15.干燥器
三、常用消耗器材
1.培養瓶及各種相關玻璃用品、塑料用品和棉制品 2.手術器材
四、培養用液
1.天然培養基(液):血清、雞胚浸出液、鼠尾膠
2.人工合成培養液:合成培養基、平衡鹽溶液、緩沖液、蒸餾水、消化液和抗菌素等
五、消耗性器皿的清洗、包裝及消毒
第三章 細胞培養基本技術
一、原代培養基本技術:取材→漂洗→剪切→消化→計數→接種
二、傳代培養技術:去舊換新液→消化→分裝
三、細胞凍存及復蘇技術
培養液高度:2.5~3.0mm 第四章 每代細胞基本的生長過程
一.游離期:細胞接種后最初一段時間, 細胞在培養基中呈懸浮狀, 胞體圓形 二.貼壁期:細胞附著于支持物上 三.潛伏期: 四.指數增長期
影響因素
1.細胞種類
(附著最強)巨噬細胞(30’)一成纖維
細胞——上皮細胞——血細胞(最弱)2.生物因素
血清、培養液中的促附著因子 3.機械,物理等
離心:促進附著
流動:培養液流動可阻止細胞附著
低溫:可抑制附著 增加細胞粘附的措施(因素)1.增加支持物粘附性
a.賴氨酸類 b.血清
c.某些生物活性物質,纖維性物質 d.減少接種時細胞懸液的量
待細胞粘附和貼壁之后,再補充足夠的培養液 e.減少培養液中血清的含量
使培養液黏度降低
f.培養液中離子成分及其濃度
如,培養液中的Ca含量過低時不利于
細胞的粘附、貼壁和鋪展 g.培養液的溫度
低溫會減低細胞的活動,妨礙黏附和貼壁 伸展過程
細胞懸浮在培養液中時,近似球體形狀
當接觸堅硬平面
即鋪展于底物上,扁平狀
與底物形成很多接觸點
伸展分幾個階段
(1)開始階段
開始附著鋪開
細胞附著于底物
球形的細胞,下方表面與底物接觸成扁
但尚未形成新的偽足(2)放射狀鋪展階段
在球形細胞體的周圍形成很多偽足隆起 偽足形狀
主要 柱形絲狀: 直徑0.2-0.5um 長10-20 扁平片狀: 厚0.1-0.5 寬2-5 尚有: 小泡狀葉狀: 直徑1-2 開始時: 絲狀多
以后 片狀增加
許多偽足
形成薄的胞質小片牢固貼于底物
胞體中央部分 扁
整亇細胞扁平(3)極化階段
細胞最后伸展附著的情況
實驗:用多種細胞,以顯微操作及縮時電影
定位細胞附著于玻璃和聚苯乙烯情況
檢測--顯微針頭— 結果:附著規律 附著點: 附著規律
幾乎未見于細胞的中央區
(如不在核之下)總在邊緣,邊緣”擺動”活動的部位
凸的邊緣
在薄的邊緣
附著區:
約為細胞下面表面的15-35% 附著、伸展的條件
底物
細胞能在很多固體表面附著
最終鋪展的程度,取決于底物的性質
影響因素:
活性物質(貼附、伸展因子):血清、培養液中,或細胞分泌的生物活性物質被底物吸附后可利于細胞的鋪展
細胞借助這些分子,可附著于各種”非特異性”的底物上
如Fn,膠原,聚賴氨酸
機械,物理因素 三.潛伏期 細胞活著但無分裂.細胞株6—24h 原代24—96h ? 四.指數(對數)增長期
? 細胞增殖旺盛, 數量成倍增多, 最適合實驗研究.3—5d以后來到.? 判斷方法: ? a.細胞群體倍增時間 ? B.細胞分裂指數
? 五.停止期(衰退期)
? 細胞長滿瓶壁, 有活力, 不增殖, 能存活一段時間.如傳代進入下一循環.傳代培養到一定的代數時,細胞的生命活動明顯減弱。即使及時傳代也無效 表明培養物已經進入衰退期,再向前發展,只有退化、死亡
接觸抑制和
密度依賴性生長仰制 增殖的密度抑制 實驗
方法:3T3細胞,接種105于6cm培養皿,5d細胞計數
于加入10%、20%、30%牛血清的培養液中,結果:
第二篇:細胞培養技術總結
血清使用問題的總結
一、血清滅活問題。
1、問:加到培養基中的血清必須滅活嗎? 答:不是必須的,看做什么實驗了。
2、問:四季青胎牛血清滅活是56℃30分鐘嗎?
答:如果用于培養大多數的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。但是如果用于培養一些表面具有補體受體的細胞,如內皮細胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min。
3、問:我要做滋養細胞培養,胎牛血清要滅活嗎?
答:進口的一般都已滅活,國產的不一定,最好還是滅活一下再用較安全。
4、問:我用病毒上清轉染細胞,培養用的血清需要滅活嗎?因為血清中可能有些補體和抗體,是不是會影響轉染?我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結合,影響轉染,正確嗎?細胞是單核細胞白血病細胞,病毒是病毒包裝細胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養基加病毒孵育幾小時,目的是什么?
答:血清一定要滅活,可以先用無血清培養基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主結合過程的干擾,一般是2-6小時,根據細胞的狀態決定。血清不一定需要滅活,滅活的目的是將血清中的補體滅活!這要根據實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個小時。
5、問:(1)我買的是杭州四季青的新生牛血清,要滅活嗎?有些說法是需要,有些說直接解凍后就可以加入到培養基中;我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有關系嗎?
答:關于血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在一定爭議的話題。大多數實驗室將血清的熱滅活還是作為常規來執行,因為有兩個作用,第一是滅活補體,第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實驗者并沒有考慮熱處理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負面影響。
我在實驗室處理血清的時候,有一次水浴箱在滅活過程中出現故障,溫度升高到80℃,血清變成了凝膠狀,我重新處理了另外一份血清,將兩份血清對比,發現高溫直接影響到血清所含的抗體蛋白。在56℃下滅活半小時以上,肯定也會對里面的蛋白起到破壞作用。下次有機會我做個延長滅活時間的實驗試試,看看到底有多大的影響。熱滅活之后,血清放在四度冰箱久了,就會有沉淀產生,這常常會被認為是微生物污染或者是黑膠蟲污染。為了驗證到底有沒有污染,常常又會把血清放置37℃溫育,但是血清中的蛋白會進一步析出,最后還是要做鏡檢,無菌培養試驗,和革蘭氏染色試驗,非常麻煩。
我看過一份資料,里面提到70%的實驗者認為滅活是理所當然的。常規滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時間則從15分鐘到60分鐘不等。其中最常用的手法是56℃熱處理30分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高,許多早先認為是熱滅活的原因已經不再成立,只有少數對血清進行熱滅活的研究者在實驗中證實了這一步驟的有效性和必要性。有人比較過11個不同細胞株,發現其中熱滅活對6 個細胞株(HBAE,MDBK,Vero,成纖維細胞,MRC-5)的生長帶來負面影響,三個細胞株(FOX-NY,MDCK和CHO-K1)不受熱滅活的影響,而只有兩個細胞株(Balb/3T3,Sp2/0Ag14 hybrid),在熱滅活之后,細胞生長有輕微的改善。所以,在正常的操作下,熱滅活通常對細胞的生長沒有明顯的促進作用。
你可以摸索一下,血清從-20℃冰箱拿出來之后在常溫解凍,然后混勻分裝成兩份,一份滅活,一份不滅活,比較這兩種血清對細胞是否有影響。然后再確定是滅活還是不滅活。這個過程最多也就一個星期。同時你還要考慮血清滅活與否對你后續的實驗有沒有影響。
問:(2)分裝后的血清從-20℃取出放4℃讓其液化,卻見血清比較混濁,有沉淀產生,這屬正常嗎? 答:正常。
二、血清滅活時溫度問題。
1、問:因為實驗室水浴鍋失控,血清滅活時,溫度到了61.7℃,這血清還能用嗎?
答:多長時間啊?短時間應該可以吧,我有一次加熱了一個多小時,還照樣用。
2、問:我滅活胎牛血清時,用的電磁爐,定在了70℃,本來說調溫度到56℃再放血清的,后來忘了,就把血清放進去了,所以滅活的溫度肯定超過56℃了,不知道這樣對血清有沒有影響?
答:常規滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時間則從15分鐘到60分鐘不等,其中最常用的手法是56℃熱處理30分鐘。看看你養的細胞是什么,一般的話估計問題不大,要是很珍貴的細胞還是慎重一點啊。熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質,在對補體滅活以外,熱處理同時也對血清中可能存在的支原體具有滅活作用。現在好像不主張熱滅活,熱滅活經常給血清產品帶來負面影響,對血清的加熱經常導致血清中沉淀的產生,此外,有研究結果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細胞的促粘附作用。
三、血清的制備方法問題。
1、問:我的實驗需要自己制備一些血清用于培養細胞,有沒有人知道用于培養細胞的血清需要怎樣的制備過程?
答:自己制備血清當心污染啊。如果無菌條件好的話,用靜置析出方法就行。
2、問:一般我們用得胎牛血清用前還要滅活,我想用大鼠的血,不知道要不要滅活?
答:你直接把采來的血液在離心管里4℃過夜,離心,取上清,在無菌過濾,也可滅活,然后分裝凍存,用時再配。
3、問:如果滅活會不會對血清中的一些因子有損傷?
答:加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在進行免疫學研究、培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。滅活一般不會對血清中的一些因子損傷的。
四、血清的保存問題。
1、問:2006年6月到期的GIBCO胎牛血清到2007年5月還能用嗎? 答:只有試試了,如果一直在-20℃凍著來者,應該還可以,先少用點看看。養細胞系應該沒問題,原代不行。
2、問:請問我自然溶化好的胎牛血清和1640培養基今天用不上,明天用,我不想放到冰箱里,放在室溫下一晚行嗎?100毫升培養瓶加多少培養基呢?
答:可以放4℃。4-5ml。
3、問:4℃冰箱內保存3個月的胎牛血清,能否繼續使用?相關細胞和其它試劑的代價比較高,不敢輕易嘗試。
答:需要長期保存的胎牛血清必須要保存在-20至-70℃的低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間不要超過1個月。
五、FBS可否代替人AB型血清?
問:我現在在做人的外周血b淋巴細胞的培養,文獻上要求用人的AB型血清,但是我覺得很多代理商都沒有。我想FBS代替,但不知道可否,我先是擔心免疫排斥之類,但是我查了些資料后,應該不會(我覺得)。但是我又不能夠TRY。因為細胞因子確實太貴了,所以咨詢一下。謝謝!答:你最好照文獻的做。除非你系列實驗證明你用代用品的結果與文獻的相同(你還是要用到文獻的試劑)。細胞培養的影響因素很多,特別是培養基的成分。
六、血清和培養基的種類及品牌問題。
1、問:細胞培養的胎牛血清用哪個公司的產品比較好呢?周圍有人用PAA或Hyclone的,這兩種跟Gibco或sigma出品的差別大嗎? 答:如果是長得非常快得細胞如pa317,293,c6等惡性腫瘤細胞,一般得國產血清就可以,如果是原代培養的細胞,最好應用胎牛血清或類標準胎牛血清,Hyclone公司血清的質量不如GIBCO(同類血清)。國產的杭州四季青和甘肅民海(中美和資)不錯。有些細胞(如:sf9,293還有其他一些元代細胞),用Gibco的比其他兩種好很多,會大大加速試驗進度。對于其他一些細胞(如:vero,MDCK,pk)四季青,Hyclone的小牛血清足矣!另外,Gibco的還要看產地。
2、問:最近要訂一瓶胎牛血清,實驗室之前都在用小牛血清,沒有買過胎牛血清。請問哪個公司的好一些?問過試劑公司,有兩種:一種是PAA的(分普通級和優級),一種是Hyclone的(只有普通級,而且是新西蘭產的)。試劑公司推薦使用PAA優級的,但看好多文獻都用Hyclone的,公司說是因為現在Hyclone的都不是美國進口的了。請問用的哪種胎牛血清比較好?
答:民海的效果還不錯,要是不放心國產的,那就買進口的。進口的好多公司都有,新西蘭產的效果一般。Hyclone和Gibco的都還可以。民海的似乎比四季青的要好些。復蒙的感覺也不錯。
3、問:四季青“無噬菌體、低內毒素胎牛血清”與“無支原體胎牛血清”的區別?培養腫瘤傳代細胞用哪一個比較好些? 答:用無支原體胎牛血清就可以啦。
4、問:SKBR-3細胞培養用哪種型號的1640培養基及胎牛血清? 答:我一直用GIBCO的1640,你可以買含HEPES的1*10L的包裝,胎牛血清也是用的GIBCO,10%就行。請查閱: www.tmdps.cn
七、培養基血清濃度問題。
問:在1640里加血清時加多了,90ml里加了20ml血清,約為18%,以前都是加10ml的,查了網上多建議用10%-15%,有關系嗎?
答:我認為一般來說血清濃度的較大波動對細胞的狀態影響較大,建議再加90ml1640調成10%。血清濃度大當然細胞狀態感覺要好,但是高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續實驗的結果。10%的濃度培養鼻煙癌細胞很好。
八、心肌細胞原代培養時血清的使用問題。
1、問:在進行心肌細胞原代培養時,需要用含血清的培養基中止胰酶的消化作用,我現在使用的是含血清10%的培養液,但近日看北醫一個細胞培養的課件發現,有用1%血清培養液進行中止消化的,想問一下,1%的是否可以,效果是否有保證?這樣確實能節省不少血清的。答:關于心肌細胞元代培養的FBS問題:
(1)1%的血清完全培養基可不可以,得看你胰酶的用量。但是在心肌細胞元代培養就不行。10%的FBS完全培養基效果都不太好,開始心肌細胞元代培養需要高濃度的FBS,20%左右,但這就有出現另一個問題,在FBS完全培養基中,成纖維細胞呈優勢細胞,須得在培養基加入適量的BrdU以抑制其生長,純化心肌細胞。
(2)FBS的作用不僅僅是拿來中和胰酶,只是FBS中的一些蛋白質如α-巨球蛋白等有抑制胰酶活性作用。
(3)元代心肌細胞培養的FBS使用,有講究:剛開始使用20%左右的高濃度的FBS,后逐漸遞減為無血清的DMEM/F-12培養基培養。
2、問:我胰酶的用量是0.08%,并混和了0.08%的膠原酶。FBS要高濃度遞減是否是說的在細胞培養中啊,難道在消化時終止也需要如此高的濃度嗎,還有,我的BRDU只用到48小時就不用了,因為擔心其損傷太大,可以持續用多久呢?
答:我用10%FBS終止的,然后差速1h,然后還是用10%FBS的HG-dmem養的,沒有用brdu,心肌細胞還是比較多和穩定的,我第3天就可以用,第2天晚上看就會有搏動。
九、牛血清污染噬菌體的問題。
1、問:有誰知道小牛血清制造過程中怎樣能夠避免噬菌體的污染,以及對已污染噬菌體的牛血清怎樣能夠除去噬菌體?
2、問:我也想知道,我用的血清中大部分都有噬菌體,它對細胞培養到底有什么影響? 暫無回答。
十、問:MTT加藥的時候加不加血清?加藥時要用無血清的培養基嗎? 答:我的藥就是用含血清的培養基稀釋的,不含血清的培養基對細胞有毒性或抑制作用,無形中對細胞造了一個serum-free的模型,細胞在提內本來就是有血清供應,如果該藥物都不能對抗,那該藥物就沒有什么臨床價值了,這是我的理解。
十一、AB血清的制備問題。
問:本人想從人的外周血中分離AB血清的,用于B淋巴細胞的培養。謝謝大家給點建議。人的血,來之不易啊。答:是AB血型人的血清嗎?這種血清即沒有抗A型抗原抗體,也沒有抗B型抗原抗體。分離血清時將采集的血液注入試管中,待血液凝固后離心分離血清。可將采集的血液放在37℃水浴箱中促進血液凝固,減少凝固時間。離心可在2500~3000rpm,10min,足可以分離血清。分離后將血清吸出保存即可。分離血清的量可按采集血液的50%左右計算,因為紅細胞占總血液的50%左右。當然整個過程要注意無菌操作。
十二、PC12細胞培養所用血清問題。
問:我正準備購買上海細胞所的未分化的PC12細胞,需要滅活的馬血清,可現在買血清很困難,好像是海關有封鎖,代理商這么說的,我原定購買的Gibco的horse surum,現在無法買到了,好容易找到一個目前可以進血清的公司Hyclone,有一種Donor Equine serum是馬血清嗎?
答:Hyclone的Donor Equine serum可以用,我以前用的就是這個。我當時是在鼎國(重慶辦事處)買的,100ml大概140元,具體不記得了。當時是看它比別的進口的馬血清便宜。另外:我買了以后滅活的。
十三、血清或培養基產生了顏色或沉淀的問題:
1、問:我用的是四季青的胎牛血清,56℃30分鐘滅活后出現了白色少量絮狀沉淀,是不是污染?還能不能再用?血清的生產日期是2006年7月(現在是2007年6月11日)。
答:應該問題不大。你可以取少量血清放入培養皿中,37℃過夜培養看看就知道是否污染了。血清中沉淀物的出現有許多種原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。
2、問:我用MTT法測細胞的增殖,用DMSO裂解細胞,發現把DMSO加入到孔中就會形成乳白色(用的含胎牛血清的1640培養基,由于沒有離板子的離心機,所以沒有去除培養基直接加的DMSO)。以前用含小牛血清的培養基沒有看到有這種情況。該怎么解決?
答:為什么要用離心機離心呢?難倒你養的是懸浮細胞嗎?如果是貼壁細胞的話直接將MTT倒掉,再加DMSO即可,我們就是這么做的,效果很好!并且測細胞的增殖的話如果不去掉MTT就加DMSO的話誤差應該很大!有時不一定就是血清的原因,可能跟你的MTT放置的時間或以及其他成分有關!
3、問:(1)GIBCO胎牛血清500ml,今天解凍后沒有混勻直接分裝,結果使得前面的幾管是清亮的,后面就帶有棕色的,不知有沒有影響?估計有什么影響?前面的成分好還是棕色的成分好啊?
答:肯定有。最好還是重新混合重新分裝,我覺得有效成分會集中在棕顏色部分。
問:(2)為什么會出現棕色呢?
答:血清中的棕色多一些可能是因為紅蛋白的含量高些的緣故吧。問:(3)血清滅活之后可以存放嗎?我的是前天滅活的,但是沒有加到培養基里,而是放在冰箱里,那下次可以直接用嗎?還是再次滅活啊? 答:當然可以,如果多的話,分裝后最好放在-20℃,下次用時再解凍,也不用再滅活。最好用一管拿一管,少許血清可以放在4℃。分裝時還要注意不要裝得太滿,以免溢出污染。
十四、問:懸浮細胞培養時能否加血清?如果加了會有什么結果?為什么懸浮細胞培養時就不能加血清?
答:血清是細胞培養基中重要的培養成份之一,對細胞生長有廣泛影響。在細胞培養時,我們通常會加入10%的血清。血清的質量對細胞培養的成功至關重要。一般說來,牛血清包括以下成分:生長因子(如激素,白細胞介素等),他們可以促進細胞生長;貼附因子,他們可以促進細胞的貼壁,往往只有細胞貼壁才能增值(懸浮培養的細胞除外);蛋白質(如血清白蛋白,球蛋白等),既可以作為營養物質,又可以中止胰酶的作用;還有很多成分不明的物質。血清還可以起到解毒作用,如脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性。血清還可以是細胞免受機械損傷。因此,無論是貼壁細胞還是懸浮細胞,血清是必不可少的。除非因實驗要求無血清培養時,例如:為使細胞同步化時,我們會采用無血清培養的。單純的說懸浮細胞培養不能加血清就沒有太多的道理了。
十五、Gibico的胎牛血清內是否含糖?
問:我想做糖誘導細胞凋亡的試驗。細胞培養液里加入了20%的胎牛血清。因此胎牛血清里是否含有糖對我實驗的培養液糖終濃度影響比較大。今天打電話問GIBCO公司的技術顧問,回答我糖濃度少于5μg/ml,因此基本可認為是不含糖。但我今天把胎牛血清送到我們醫院檢液科,結果卻是:6.2mmmol/l(葡萄糖氧化酶法)。難道是檢測人血清的血糖濃度的方法不能用于檢查牛血清嗎?(另起茶水驗尿事件?)檢驗科沒有給我回答。答:應該是不含糖的。請參照gibco的網站:http://www.tmdps.cn/content/sfs/brochures/B_08A00_0619_FBS_bro.pdf。第五頁我做了個記號。直接點擊鏈接就可以看到它的說明書頁面。我想我們肯定要以公司的說明書為準。至于為什么檢驗科測起來有誤差,我想可能是樣本不一樣,需要用標志品矯正有關。具體需要檢驗科的戰友解釋了。
十六、關于中和消化液需要的血清量。
問:用胰蛋白酶消化細胞后,需要用血清中和。具體這種中和作用所要求的胰蛋白酶和血清之間的比例是多少?
答:做了很久的試驗,真的沒有想過胰酶和血清的對應關系。不過細想下來,這個應該也沒有固定的比值。血清的品種都是不同的,成分必然有差異,如何能確定其與胰酶的比值關系?我們消化細胞的時候,如果是傳代,細胞變形后,吸出胰酶直接加入適量的hanks液或者全培,這個量看自己的喜好和吹打細胞方便而定。一般都可以中止消化的。不會存在繼續消化的事情。如果是從組織上消化細胞做原代培養,我一般都使用全培進行中止,而且加的很多,0.25%的胰酶,用10%血清,按1:2的比例應該是足夠的。當然全培是2,一般我養細胞的時候,會用國產的比較便宜的血清配制全培,專門用于中止消化,這樣有幾個好處:一是中止消化的效果應該好于hanks液吧,再是也有利于維持細胞活性。而且這部分液體會被離心去掉,血清便宜,離心掉了不會心疼。而養細胞的時候用好血清。個人觀點,僅供參考。
十七、血清中的懸浮物問題。
1、問:發現培養的細胞瓶中背景有許多的小黑點,培養液中也有一些漂浮的物。看了之前的帖以為是膠原蟲。本打算換液,換液前特意看了下前些天配的培養液,肉眼發現培養液中有懸浮的顆粒狀物質(不多),于是放在鏡下觀察,新鮮培養液中有一些懸浮的小顆粒,不多。(培養液是R1640+20%牛血清+1%雙抗)于是又將分裝在4℃保存的小牛血清拿出觀察,肉眼可見5、6個白色小小球狀的物質,在血清瓶稍靠下的部位懸浮。鏡下觀察,也有少量的不知什么物質的東西漂浮。小牛血清是Hyclone新西蘭的,標簽上寫已經經過2μm濾膜過濾處理。根據上述培養液的情況,是否說明培養液已被污染?如果是正常的血清是不是在鏡下不應該看到雜物,哪怕是極少量的?根據上述血清的描述,是不是說明血清也存在問題,還能用嗎?補充:細胞培養以來生長狀態就不好。買血清的時候廠家說明不用滅活,所以未滅活。
答:(1)血清應該-20℃保存,解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大實驗顯示非常容易產生沉淀物。(2)血清中沉淀物的出現有許多種原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在血清解凍后,也會存在于血清中,亦可造成沉淀物。(3)若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清,再放回冷凍,若存放于4℃時,請勿超過一個月,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白,可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。
(4)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
(5)排出了血清的原因,在考慮實驗用品和無菌操作的問題。
(6)細菌病毒、衣原體、黑膠蟲污染也很常見,如果細胞死的太多,影響較大建議更換培養液。
2、問:今天在配培養液時,發現血清里面有小碎片樣的漂浮物,血清仍然清亮,不渾濁。不知道是什么,問了實驗室的學長,說仍然可以用,但還是不放心,沒有用血清。求助園子的各位達人,這可能是血清出了什么問題?我的血清用了一個月不到,四季青的。
答:可能的原因:(1)培養液配置時Votex不夠,當時是清亮的,但過一段時間會析出來;(2)真菌污染。
十八、污染和過濾的問題。
1、問:懷疑血清染菌,想用濾膜過濾一下,可否自己用0.22μm濾膜過濾?對血清性質有多大影響?有做過的么?
答:可以過濾的,血清當出廠時都是0.22μm或0.1μm過濾除菌。想證明有沒有染菌不用過濾這么麻煩,只要放置于37℃過夜就可以了,如果有微生物污染會變渾濁的,如果還是澄清的就說明沒有問題的。實驗室中血清很難直接過濾,一般要加到培養基中再過濾。我們實驗室制備培養基時,都使用濾膜過濾,一般而言如果制備1-2瓶培養基,一個濾膜及一支30ml注射器可以過濾50ml小牛血清。如果大量制備培養基也可以將血清加到培養基中,使用0.22微米的大濾膜一起過濾。
2、問:我懷疑我用的完全1640培養液被污染了,準備重新過濾消毒,過濾后是否需要補充胎牛血清?如需又如何補充?
答:完全1640培養液被污染了,如果是支原體的話,過濾沒有作用,支原體可以通過濾膜。我們用1640液,都是配液后保留500ml,然后其他的分裝100-200ml,現用現配因為血清比1640要貴,如果你想過濾的話,建議你加原比例血清,因為血清不會很容易通過濾膜。最主要的還是找到可能污染的原因。
3、問:加好了血清雙抗的培養基由于污染了再過濾后還能用嗎? 答:建議不要用了。在加了雙抗的情況下已經污染,那么細菌污染的可能性會較小了。一般的過濾除不能去除病毒或者部分真菌的污染的。
4、問:我準備把使用的完全1640培養液重新過濾一遍,不知道培養液中的血清成分是否能通過濾膜,過濾后是否還需要補充胎牛血清?如需又如何補充?
答:可以透過,但是隨著液體量的增多會很慢,如果不加壓會比較麻煩,還有最好用低蛋白吸附的,不然損失是比較大的。
十九、更換無血清培養基后細胞大量死亡的問題。
問:我使用Lipofectamine2000轉染成骨細胞,在轉染前要換上無血清的培養基。本來條件模的好好的,轉染效率也可以接受。但是寒假一回來就發生了怪事:細胞在有血清的培養基中長的好好的,一換無血清的培養基就死亡。大概4個小時就能看到較多的細胞飄起來。但是原來我換無血清培養基,就算放那里10個小時都是沒問題的啊。已經換了不同批次的培養基,甚至吸管什么的都換過了,但是就是不行,是怎么回事?
答:(1)兩周后的培養液應補加谷氨酰胺,或者重新配液,轉染時應不含抗生素。
(2)確認操作方法和環境,建議檢查一下。
(3)Lipofectamine2000,脂質體的毒性很大,如果有質粒參與對細胞損傷更大,如果Lipofectamine2000在常溫放置過,對細胞更大,假期冰箱是否斷過電。
(4)培養箱的溫度、c02濃度,濕度。
二十、完全培養液的相關定義。
問:“完全培養液一詞”,是指加了血清的培養液嗎?我在做含藥血清的實驗,涉及到血清添加量的問題。所以想弄明白文中所指的“完全培養液”是否是含藥血清。
答:原液是指配置后過濾除菌。不完全培養液是指不含有血清的原液,其他成分已補充。完全培養液是指不完全培養液加入血清后稱完全培養液。二
十一、血清相關知識總結。使用胎牛血清的注意事項:
血清是細胞培養中最重要的元素之一。下面是實驗室里常會遇到的問題,僅供大家參考:
1、保存血清最好的方法: 建議血清應保存在-5℃ 至-2O ℃。然而,若存放于 4 ℃ 時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。
2、如何解凍血清才不會使產品質量受損:
建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃ 冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。
3、血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理:
血清中沉淀物的出現有許多種原因,但最普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
4、何謂熱滅活:
一般是以 56℃,30 分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有 : 溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。
5、關于胎牛血清的滅活: 有必要做熱滅活嗎? 實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在 37℃ 環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節省您寶貴的時間,更確保您血清的質量!
6、血清相關知識: 如何避免沉淀物的產生?
我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作 :(1)解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。(2)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
(3)請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(5)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30 分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
第三篇:個人總結 - 南方醫科大學
述職報告
我于2010年1月擔任中醫藥學院學生工作辦公室主任,到現在試用期滿一年。一年以來,在學院黨委的正確領導下,同事們的熱情幫助和支持下,經過自身的努力,我的思想覺悟、工作能力和水平都有所提高,較好地履行了工作職責。本著總結經驗,找出差距,繼續努力的目的,把今年的工作情況向上級組織匯報如下:
一、聯系實際,注重實效,切實做好學生思想政治教育工作。
1、加強學生黨建工作,充分發揮學生黨員的先鋒模范作用。規范黨員發展制度,制定黨員發展統一標準,嚴把黨員“入口”關,確保黨員發展水平和質量上一個新的臺階,2010年共發展學生黨員109名,發展入黨積極分子212名。充分發揮黨員的先鋒模范作用,開展向“黨員看齊”的黨日活動。
2、團日活動主題鮮明、形式新穎,內容上緊緊地扣住“文化育人,豐富課余生活”的航標,涉及到理想信念教育、思想道德修養、愛心教育、專業實踐、社會服務、環境保護、志愿者服務等多方面。在活動中始終堅持“立足基層、面向團員,重在創新、注重實效”的原則,共開展了12次團日活動。
3、做好學生干部的培養教育,學生干部是學生工作得以順利開展的主力軍,一直以來把培養一支積極主動、富有朝氣和創造力的得力、踏實的學生干部隊伍作為學生工作的重點。本人采取學生干部例會、學生干部培訓、團日活動交流會、暑期實踐工作總結交流 1 會、班干部經驗交流會等形式進行培訓交流,同時做好對低年級的學生干部傳、幫、帶工作。
4、做好學生日常的思想政治工作,確保學生思想情緒、生活秩序的穩定,及時化解學生矛盾,同時學院積極與心理咨詢中心聯系,第一時間對該生進行了心理干預,一年來共與30多名存在心理問題的學生談心。對3名重點人、難點人進行了及時的思想疏導。
二、狠抓學風建設,努力營造良好的學習氛圍。
1、以班集體建設為核心,以評“優良學風班”和為切入點,緊緊圍繞上課報告等“五項制度”,推進創建優良學風班級活動,明確班級發展目標,發動全體學生爭創優良學風班級活動。
2、圍繞學風建設,積極開展學術競賽活動。為了提高學生的科研能力,組織開展學院學生科技論文選拔,調動了學生科研的積極性。07中西醫專業趙曉華等同學組建的團隊過關斬將,獲得了第七屆“挑戰杯”廣東大學生創業計劃競賽金獎和第七屆“挑戰杯”中國大學生創業計劃競賽金獎,李旭妍等同學獲得了第七屆“挑戰杯”南方醫科大學大學生創業計劃競賽銀獎和第七屆“挑戰杯”廣東大學生創業計劃競賽銀獎。
三、做好考研、考公務員和就業指導,努力提高畢業班就業率。
1、指導畢業班研究生和公務員考試,邀請考研專家開展講座,對考研學生進行面對面的交流;在考研復習的不同階段,邀請研究生錄取學生、教師進行指導;2010年全院共有72位學生考上了第四軍醫大學、中山大學、南方醫科大學等國內大學。做好公務員報 考面試指導和參軍入伍的政治審查工作,全院共有3名學生順利參軍入伍。
2、抓好畢業就業指導和服務工作。高度重視畢業生就業指導工作,堅持“早動員、早開展、早落實”的就業指導方針。成立學生黨員就業服務小組,學生黨員在努力完成自己應聘就業的同時,廣泛收集就業信息,協助就業困難同學積極應聘。通過努力我院2010屆畢業生就業率達到92.13%,超額完成學校下達指標。
四、堅持以學生為本,做好學生管理工作
1、加強教育、嚴格管理,確保學生的安全穩定。安全是學校發展的底線,我院堅持“安全第一、預防為主”的工作理念,積極開展校紀校規和安全防范教育,不定時排查“重點人、難點人”。在平時工作中,利用點名加強安全宣傳力度,如:消防、防傳銷、防詐騙等知識宣講;在院內衛生檢查時,將安全檢查作為衛生檢查的一個重點;受學生2號公寓樓發生火災的觸動,組織全體輔導員到學生寢室開展安全大檢查,要求各班開展安全定期自查活動,共收繳大功率電器十余件。
2、及時處理學生的突發事件。九月十五日學院發生了學生跳樓事件、我們及時成立事故處理組,較好的與學生家人溝通,處理了后事。
3、做好后進學生的教育工作。學生工作的重點不僅僅是要培養優秀學生,更要重點關注后進學生的教育工作,對于個別學生產生厭學情緒時,我耐心地與學生分析原因,化解心結,共同制定改進 提高的途徑。對于違紀或處在違紀邊緣的學生,我抱著不放棄不拋棄的工作態度,努力扶正后進學生的努力方向。
4、做好綜合測評和評獎評優工作。綜合測評直接關系到學生的個人利益,在遵循學校制定的測評制度下,召開學生骨干會,制訂加減分細則,使綜合測評在加、扣分等學生敏感問題上有更大的操作性和說服力。在此基礎上公平、公開地完成各類獎學金的評審、發放和表彰工作,一年來報學校表彰的優秀學生155名、優秀學生干部25名。
5、完善貧困生解困體系,關心家庭困難學生生活,做好校級特困生、貧困生評定工作,做好政府獎、助學金評定工作。協助學校做好申請助學貸款學生的申請、審核、發放、還款、催款工作。做好臨時困難補助金的發放工作。本人帶的教班共有16名學生辦理了助學貸款。
五、豐富學生課余生活,活躍學生第二課堂。
1、積極推進寒暑期社會實踐活動。寒暑假社會實踐共有167名同學參加:三下鄉、地中海貧血宣傳、新農村合作醫療調查等等,2、加強校園文化建設,開展各類文藝、體育等競賽,豐富學生課余文化生活。
3、青年志愿者服務不斷深化。在亞運志愿服務方面,07級共有142名同學參加志愿服務活動,所屬的THS155和THS172的兩個小隊獲得了“16屆亞運會組委會天河體育場優秀團隊”稱號,還有一大批同學獲得了“微笑之星”、“優秀志愿者”等榮譽稱號。存在的不足和今后努力的方向
雖然我在工作中取得了一定的成績,但還存在一些問題和不足:一是政治理論修養不足,思考問題不夠深入,造成了工作中的局限性;二是主動學習的意識還不夠,更多的是忙事務性工作,總結思考不多;三是工作繁忙時,有急躁的情緒,處理和化解工作中的矛盾方式方法還要更加細致深入。這些問題反映出自己的主觀能動性還發揮得不夠,以及還要加強個人修養,這些不足我將在以后的工作中認真加以克服和改進。以上匯報有不當之處,請領導和同志們批評指正。
中醫藥學院學生工作辦:黃芳
2010年12月16日
第四篇:南方醫科大學2013級研究生畢業要求
南方醫科大學研究生發表學術論文
暫行規定
第一章 總 則
第一條 為進一步規范和提高研究生發表學術論文要求,不斷提升學位授予質量,特制定本規定。
第二條 本規定所指學術論文是指研究生在攻讀相應學位期間,以學位論文相應內容為基礎公開發表的學術論著。研究生為學術論著的第一作者,署名單位為南方醫科大學,導師應為通訊作者,通訊作者單位為南方醫科大學。
第三條 導師為聯合培養單位者,第一作者單位可以為南方醫科大學附屬××醫院,也可以為1南方醫科大學和2××醫院(1、2為共同第一作者單位,但1、2的順序不得顛倒);通訊作者單位署名要求同第一作者單位。
第四條 與國外單位聯合培養者,學校可以為非排名第一的第一作者單位,但導師必須為共同通訊作者。
第五條 學術論著有并列作者時,其后的作者排名按前面作者人數依次順延計算。
第六條 本規定所指的SCI(科學引文索引)以各檢索系統《期刊引用報告》為依據,SCI論文分區以中國科學院文獻情報中心提供的《JCR期刊影響因子及分區情況》為準。中文核心期刊(北京大學版)、CSSCI來源期刊(中國社會科學引文索引來源期刊目錄,中國社會科學研究評價中心版)、中文統計源期刊(中國科技信息研究所版)、《南方醫科大學人文社科類期刊目錄》以學校認可、研究生學院網站上公布的為準。
第二章 申請博士學位
第七條 各專業(公共衛生與預防醫學一級學科下的公共衛生政策與管理、心理衛生學等兩個自主設置二級學科除外,中西醫結合、中藥學和藥學專業中進行中藥研究的除外)學術學位博士研究生,應以第一作者在本專業或相關專業SCI收錄期刊發表學術論著1篇;或以共同第一作者(前二位)在本專業或相關專業SCI論文分區二區以上(含)期刊(或IF>5)發表學術論著1篇;或以共同第一作者(前三位)在本專業或相關專業SCI論文分區一區以上(含)期刊(或IF>10)發表學術論著1篇。
第八條 公共衛生與預防醫學一級學科下的公共衛生政策與管理、心理衛生學等兩個自主設置二級學科專業的學術學位博士研究生,應以第一作者在《南方醫科大學人文社科類期刊目錄》一類期刊發表1篇學術論著,或以第一作者在《南方醫科大學人文社科類期刊目錄》二類期刊至少發表2篇學術論著,或發表第二章第七條要求的學術論著。第九條 中西醫結合、中藥學專業及藥學專業中進行中藥研究的學術學位博士研究生應以第一作者在本專業中文核心期刊發表學術論著至少3篇;或發表第二章第七條要求的學術論著。
第十條 各專業專業學位博士研究生(含在職博士研究生),其發表論文要求同本專業學術學位博士研究生。
第十一條 各專業學術學位碩博連讀研究生,應以第一作者在本專業或相關專業SCI論文收錄期刊發表學術論著至少2篇;或以第一作者在本專業或相關專業SCI論文分區三區以上(含)期刊(或IF>3)發表學術論著1篇;或以共同第一作者(前二位)在本專業或相關專業SCI論文分區二區前半區以上(含)期刊(或IF>7)發表學術論著1篇;或以共同第一作者(前三位)在本專業或相關專業SCI論文分區一區以上(含)期刊(或IF>10)發表學術論著1篇。
第十二條 各專業專業學位碩博連讀研究生,其發表論文要求同學術學位碩博連讀研究生。
第十三條 本章中未特別注明的第一作者均指排名第一的論文第一作者。
第十四條 博士研究生以第一作者在本專業或相關專業SCI論文分區一區期刊發表學術論著者或以第一作者在本專業或相關專業SCI論文分區二區以上(含)期刊發表2篇學術論著者,可準予提前答辯畢業,并申請相應學位,但提前時間原則上不超過1年。
第三章 申請碩士學位
第十五條 各專業(馬克思主義理論、公共管理學一級學科下的社會醫學與衛生事業管理、公共衛生與預防醫學一級學科下的公共衛生政策與管理除外)全日制學術學位碩士研究生應以第一作者(排名第一)在中文核心期刊發表1篇學術論著;或符合以下條件的本專業或相關專業SCI論文分區論著:
(1)SCI論文分區四區以上(含)期刊的論著第一作者;(2)SCI論文分區三區以上(含)期刊(或IF>3)的論著前二作者;
(3)SCI論文分區二區以上(含)期刊(或IF>5)的論著前三作者;
(4)SCI論文分區一區以上(含)期刊(或IF>10)的論著前四作者。
第十六條 馬克思主義理論、公共管理學一級學科下的社會醫學與衛生事業管理、公共衛生與預防醫學一級學科下的公共衛生政策與管理專業全日制學術學位碩士研究生,應以第一作者(排名第一)在中文統計源(含)以上期刊或《南方醫科大學人文社科類期刊目錄》期刊發表1篇學術論著。第十七條 各專業全日制專業學位碩士研究生,其發表論文要求同本專業全日制學術學位碩士研究生。
第十八條 在職人員申請碩士學位者應以第一作者在中文統計源以上期刊發表1篇學術論著。
第十九條 為鼓勵我校碩士研究生延續和進一步深入課題研究,爭取發表高水平學術論著,對于畢業當年考取我校博士研究生的碩士研究生,如已達到學科專業碩士研究生培養方案的要求,通過碩士學位的課程考試、完成課題研究和碩士學位論文答辯,導師允許其不發表學術論文,可申請授予碩士學位。
第二十條 導師近三年內曾以第一作者或通訊作者在本專業或相關專業的SCI論文分區二區以上期刊發表過學術論著的,其所指導的碩士研究生確因課題需要不便發表學術論著,并已達到學科專業碩士研究生培養方案的要求,通過碩士學位的課程考試、完成課題研究和碩士學位論文答辯,經導師提出申請,由導師在兩級學位評定委員會陳述理由,經學校學位評定委員會表決,通過后也可以不發表學術論文而授予碩士學位。
第二十一條 學術學位碩士研究生以第一作者(排名第一)在本專業及相關專業SCI論文分區三區以上(含)期刊(或IF>3)發表學術論著的,可提前申請畢業答辯和相應學位,但提前時間原則上不超過1年。已完成住院醫師規范化培訓的專業學位碩士研究生可申請提前畢業答辯,否則不得申請提前畢業答辯。
第四章 相關成果界定
第二十二條 為鼓勵研究生開展技術創新,研究生學位論文研究成果以排名前二位獲得授權國家發明專利1項或成功申請國際發明專利1項,等同于以第一作者(排名第一)在本專業SCI論文分區第四區期刊發表學術論著1篇。
第二十三條 凡學位論文為保密課題的研究生,課題密級應由下達課題主管部門批準,經學校保密委員會審核后交研究生學院培養科備案。承擔機密級(含)以上課題的博士研究生應以第一作者(排名第一)在相應的保密論文集發表3篇學術論著或向有關部門提供政策咨詢報告,碩士研究生應在相應保密論文集發表1篇學術論著或向有關部門提供政策咨詢報告,才可申請答辯。所發學術論著或政策咨詢報告須由學位評定委員分委員會辦公室組織專家組鑒定是否達到相應學位申請要求。承擔秘密級課題的研究生,應將學位論文的非保密內容按相應要求公開發表,方能申請答辯。
開題報告前,研究生必須填報《南方醫科大學研究生學位論文涉密申請表》、《南方醫科大學研究生從事涉密課題研究保密承諾書》,經校保密委員會或下達課題主管部門保密委員會審查同意并送研究生學院培養科備案,否則不予認定。
第二十四條 研究生提交的學術論文只限定于在期刊正刊上發表的學術論著。
第二十五條 申請各類博士學位、碩士學位的學術論文,不包含文獻綜述、病例分析報告。
第二十六條 對于導師排名第一、研究生排名第二的學術論文,且第一作者單位、第二作者單位、通訊作者單位均為南方醫科大學的,視同研究生為第一作者的學術論文。本條僅適用于碩士研究生。
第五章 其 他
第二十七條 學位申請人在提出學位申請前,應按規定在學校研究生管理系統填報《研究生發表論文信息采集》,并提交發表論文的原件和復印件(包括封面、刊物目錄和論文全文),或提供發表學術論文出處的超鏈接(電子版)供審查。
第二十八條 提交的學術論文應以正式刊出為準,對于在國(境)外發表的SCI收錄的學術論文,也可以是清樣、校樣或錄用函,但需導師簽名擔保。對于未能如期正式發表的,取消導師以后的擔保資格。第二十九條 緩授學位研究生,如以中文學術論文申請學位,最遲應在畢業1年內申請補授學位;如以SCI收錄期刊學術論文申請學位,最遲應在畢業3年內申請補授學位。
第六章 附 則
第三十條 各學科專業、學位評定分委員會可根據本學科發展要求,制定不低于本規定的發表論文標準。
第三十一條 本規定從2013級研究生起嚴格執行。第三十二條 本規定由研究生學院負責解釋。
第五篇:南方醫科大學2010年研究生推免
附件1
南方醫科大學關于推薦2011年優秀應屆本科畢業生
免試攻讀碩士學位研究生工作管理辦法(暫行)
推薦優秀應屆本科畢業生免試攻讀碩士學位研究生(以下簡稱推免生),是國家激勵本科學生勤奮學習、全面發展和培養選拔優秀人才的重要措施,是我校全面加強素質教育,促進創造性人才培養和提高研究生質量的重要舉措。為做好“推免生”工作,根據教育部教學?2006?14號文件及其附件《全國普通高等學校推薦優秀應屆畢業生免試攻讀碩士研究生管理辦法(試行)》的精神和規定,結合我校具體情況,特修訂本管理辦法。
第一章 推薦的范圍和比例
第一條 “推免生”的推薦范圍為我校應屆畢業的全日制本科優秀生;“免試”的涵義是免予參加全國統一的研究生入學考試(初試),但必須經過面試(復試);“應屆”的涵義是指每年研究生招生報名階段開始時已進入本科最后一學年學習的本科生(不包括專升本學生)。
第二條 推薦的比例
1、各學院報送的推薦人數占應屆畢業本科生人數的比例,視當年教育部下達給我校的推薦免試研究生名額而定;
2、屬學校重點扶持的學科如符合推薦條件的學生數量特別多,或長期以來正常招收的研究生生源特別短缺,因而需增加推薦免試生名額的,須另行申請。
第二章 推薦生的條件
第三條 基本條件
1、擁護黨的基本路線,有正確的世界觀、人生觀、價值觀,有為祖國、為人民、為社會主義現代化建設服務的志向和強烈的責任感;嚴格遵紀守法,道德品質好,勤學敬業,富有上進心和團結合作精神;
2、文、理、工科類本科一至三年級共六個學期的主干課程成績平均績點應達到2.5以上,主干課程低于70分的不超過4門,醫科類學生一至四年級的主干課程成績平均績點應達到3.0以上,主干課程低于70分的不得超過3門;
3、必須獲得全國大學英語六級合格證書(憑六級考試成績單),必須 1
在本校考點參加考試的證書方有效;
4、能較深入地分析、解決問題,具備較強的研究能力和創新精神。文科學生要具有較強的研究能力和寫作能力;理工科學生要具有較強的實驗技術能力和思維能力;
5、申報 “思政系列”的學生必須是中國共產黨黨員。
第四條 優先條件
1、凡獲 “挑戰杯”、“創業計劃競賽”、“數學建模競賽”、“電子設計競賽”等全國性比賽第二獎勵級別(即包括二等獎和相當于二等獎)及其以上獎勵的參賽者;
2、對有特殊學術專長或具有突出培養潛質者,經三名以上本校本專業教授聯名推薦,經學校推免生遴選工作領導小組審查,可不受綜合排名限制,學生有關說明材料和教授推薦信要進行公示;
3、對在國內外大學生學術性比賽的獲獎者、在國內外公開出版物(需有CN或ISSN刊號)上發表有一定篇幅和質量的學術論文者、在校學習期間取得具有一定理論價值和推廣價值的科研成果并獲獎者;
4、已和相關研究生專業的導師合作科研,是該項目的主要骨干,該項目已在學校科技處、醫科處或社科處備案(其中教學研究項目在教務處備案),并有階段性成果,經本專業導師組認定者;
5、獲省級或以上“優秀學生干部”、“優秀共青團員”等表彰的學生。
第五條 排序量化指標
各專業在品學兼優的畢業生中按量化指標進行排序,擇優推薦。具體各項量化指標和標準如下:
1、學習成績:以專業平均成績為基礎分;
2、學術、科研獲獎加分:參加國家級比賽獲一等獎,5分,二等獎,4分,三等獎3分;參加省級比賽獲一等獎,3分,二等獎,2分,三等獎,1分(不累計加分);在省級以上學術性刊物公開發表論文1篇,1分(可累計加分)。集體獎(5人以上)分值減半;
3、外國語水平:非外語專業英語通過國家大學英語六級成績達到良好(總分的75%)2分;
4、榮譽表彰:獲全國表彰,3分;獲省級表彰,2分;獲校級表彰,1分(不累計加分),集體表彰(5人以上)分值減半;
5、其它獲獎:參加國家級比賽獲前三名,2分;省級前三名獎,1分(不累計加分);集體獎(5人以上)分值減半。
第六條 身體素質和心理素質的基本要求:身體健康,符合報考研究生的體檢標準;體育成績和國家規定的體育鍛煉標準測驗合格;心理素質健全,有良好的心理承受能力和調節能力。
第七條 有關獎懲方面的基本要求:
1、在本科前三學年或四學年中至少獲得一次學校學業獎學金或單科獎學金。
2、在校期間無任何違法違紀行為,未受過任何處分。
第三章 推薦工作的組織領導
第八條 學校成立推薦免試攻讀碩士學位研究生遴選工作領導小組,由主管教學的副校長任組長,成員包括教務處、校紀檢監察部門、學生處、研究生學院負責人各一人,領導小組下設辦公室,辦公室設在教務處,教務處處長任辦公室主任。
第九條 各學院需成立由主管教學的院負責人任組長的推免工作小組,小組成員一般應為5至7人,由黨政負責人和學科帶頭人組成。
第十條 各單位應高度重視“推免生”工作,推薦工作應貫徹德、智、體、美全面發展,以學業成績為主線,注重對免試生的政治思想、道德品質和創新思維、科研能力的綜合考核,保證免試生具備較高的綜合素質和良好的培養潛力。
第十一條 推薦免試攻讀碩士學位研究生的工作,是一項政策性和紀律性很強的任務,必須嚴格按照規定辦理,堅決反對并抵制營私舞弊等不正之風;學校推免工作遴選領導小組和各學院推薦工作小組必須認真受理師生的投訴,確保推薦工作公開、公平、公正地進行,確保工作質量。
第十二條 各單位要對申請推薦免試的學生做好具體的指導工作,包括動員和答疑;協助學生及時與擬報讀的外單位聯系;指導學生填報志愿,避
免過于集中申報少數熱門專業或過于集中在原就讀的二級學科單位,免試生可以實行跨學科推薦。
第四章 推薦工作的程序
第十三條 動員:各學院應深入學習領會本辦法的精神,在每年的6月底以前,對三年級(四年制)或四年級(五年制)的本科生進行申報推免生的動員工作,有條件的申報者可在暑假前后向擬報讀的接收單位或學科點進行初步聯系。
第十四條 申請:各本科生所在院系一般在每年9月中上旬完成申請學生的資格審查,有科研成果及相關證明材料的,須作為附件(可用復印件)連同申請書一并上交所在院系。
第十五條 初審:各學院推免審核小組應由推薦免試攻讀碩士學位研究生工作小組主持,并可組織本單位教務員、該專業的政治輔導員、班主任和主要學生干部參加,在9月中旬對報名者有關條件進行初審,按規定比例上報候選人名單,讓其按教務處要求準備上報材料。
第十六條 筆試:推免生遴選工作領導小組認真審核各學院上報的推薦名單,符合條件的學生可參加由教務處統一組織的英語筆試(考試難易程度參照研究生入學考試要求)。
第十七條 面試:推免生遴選工作領導小組根據每個學生的綜合得分及筆試成績確定參加統一面試的候選學生名單,根據學生所報專業確定面試組專家名單。面試內容分為“基礎和專業綜合測試”與“外語口試”,其中基礎和專業綜合測試的內容不宜太窄,一般應掌握在一級學科領域,有的學科可擴大到學科門類,外語口試可兼顧公共外語和專業外語(其中“基礎和專業綜合測試”與“外語口試”任何一項平均成績不及格,不得推薦)。
第十八條 審批:學校推免生遴選工作領導小組在每年9月底完成對本推免生名額的最終審核確定工作,并即向全校公布擬正式推薦的名單,10月中旬正式發文予以確認。
第十九條 經學校同意推薦的免試生材料,凡推薦到我校各碩士點的,統一由教務處轉送研究生院;凡向外校推薦的,由學生所在學院負責寄送,有關單位應及時與接收單位聯系,以便免試生在研究生報名期結束前能獲得接收單位的信息反饋。
第二十條 推薦免試研究生的錄取辦法由研究生學院另行擬定。
第五章 附則
第二十一條 本管理辦法第二章第三條中的“主干課程”指必修課與專業選修課。
第二十二條 已獲推薦免試攻讀碩士學位資格,但在本科畢業或研究生正式入學前有以下情況者,學校將中止或撤消其免試直接進入研究生階段學習的資格:
1、不能按時完成本科階段學業或取得畢業資格但未獲得學士學位者;
2、本科畢業論文不能獲得良好以上成績者(醫科類學生畢業綜合能力測評成績不合格者);
3、因身心健康原因需要休學或停學者;
4.有違紀違法行為者。
第二十三條 本辦法由教務處負責解釋;在推薦工作進行期間,由學校推免生遴選工作領導小組負責解釋。