第一篇：臨床醫學檢驗職稱考試

臨床醫學檢驗職稱考試級別 臨床醫學檢驗職稱考試共分為五個級別，1臨床醫學檢驗技士（初級職稱）

2臨床醫學檢驗技師（初級職稱）

取得臨床醫學檢驗專業本科學歷或碩士學位，從事本專業技術工作滿1年即可參加臨床醫學檢驗技師資格考試。

檢驗技士/技師考試成績合格標準

據往年的分析醫學檢驗技士/技師考試成績各科目均以100為滿分計算，每科目成績達到60分為合格，考試成績有效期為2年。所有4個科目在2年內全部合格者可申請該級專業技術資格。

3臨床醫學檢驗主管技師（中級職稱）

取得臨床醫學檢驗專業本科學歷，受聘擔任臨床醫學檢驗技師職務滿4年才能報考主管檢驗技師

檢驗主管技師考試的通過標準

檢驗主管技師考試成績在初、中級各專業各科目中以100為滿分計算，每科目成績達到60分為合格，醫學教育`網搜集整理考試成績有效期為2年。所有4個科目在2年內全部合格者可申請該級專業技術資格。4臨床醫學檢驗副主任技師（高級職稱）

5臨床醫學檢驗主任技師（高級職稱）。

難度是國家統一出題，應該級別越高考試的難度越大。

醫學檢驗專業技術資格考試科目

臨床醫學檢驗技士/技師/主管技師資格考試科目分為：“基礎知識”、“相關專業知識”、“專業知識”、“專業實踐能力”等4個科目。

臨床醫學檢驗技士考試內容：臨床檢驗基礎、臨床血液學檢驗、臨床化學、臨床免疫學和免疫檢驗、微生物學檢驗、寄生蟲學及檢驗、醫療機構從業人員行為規范與醫學倫理學醫`學教育網搜集整理。

臨床醫學檢驗技師考試內容：臨床檢驗基礎、臨床血液學檢驗、臨床化學、臨床免疫學和免疫檢驗、微生物學檢驗、寄生蟲學及檢驗、醫療機構從業人員行為規范與醫學倫理學。臨床醫學檢驗主管技師考試內容：臨床檢驗基礎、臨床血液學檢驗、臨床化學、臨床免疫學和免疫檢驗、微生物學檢驗、臨床實驗室質量管理、醫療機構從業人員行為規范與醫學倫理學。

醫學檢驗職稱考試網上報名步驟 醫學檢驗技士/技師/主管技師網上報名步驟：步驟

1、考生在衛生人才網上查看報名聲明，閱讀并同意后點擊進入報名流程。步驟

2、查看報名流程，了解報名順序及注意事項后點擊開始報名，進入報名頁面醫`學教育網搜集整理。

步驟

3、進入網報系統，注冊并填寫網上報名申報表。考生可以在12月報名后，憑借“個人證件編號”及個人密碼，登錄網站查詢、修改個人報名信息。填報個人報名信息。考生確認、保存報名信息后，系統提示“報名成功”。

步驟

4、考生確認填報信息無誤后，可以打印《衛生專業技術資格考試報名申請表》。

臨床醫學檢驗考試時間 全國衛生專業技術資格考試時間一般在每年的5-6月份。

醫學檢驗考試現場審核確認所需材料

1、《XXXX年度衛生專業技術資格考試申報表》一份（A4規格）；

2、本人有效身份證明及復印件；

3、畢業證書和學位證書原件；

4、專業技術職務任職資格證書、聘書原件或聘用證明原件；

5、相關準入資格證書原件；

6、工作崗位變動的報考人員須提交轉入現崗位的有關證明；

7、已參加衛生專業技術資格考試者，須提交以往考試成績單或準考證原件、復印件。注意事項：考生在確認單上簽字后，不得再對報名信息進行修改。凡未按期到所選考點或其下設報名點進行現場確認并繳費者，視為自動放棄本次考試。

第二篇：臨床醫學檢驗職稱考試的級別

提問：臨床醫學檢驗職稱考試都有哪些啊？難度大不大？想提前規劃一下自己將來的職業生涯！

回答：您好，臨床醫學檢驗職稱考試共分為五個級別，臨床醫學檢驗技士（初級職稱）-臨床醫學檢驗技師（初級職稱）-臨床醫學檢驗主管技師（中級職稱）-臨床醫學檢驗副主任技師（高級職稱）-臨床醫學檢驗主任技師（高級職稱）。難度是國家統一出題，應該級別越高考試的難度越大。

第三篇：臨床醫學檢驗考試輔導

第一章

微生物緒論常見考點

第一章?緒論

一、微生物的分類及命名

1、微生物的分類等級為界、門、綱、目、科、屬、種，種是最基本的分類單位。目前國際上普遍采用的分類系統是伯杰分類系統。

2、根據微生物的大小、結構和組成不同，分為三大類型：

（1）非細胞型微生物：此類微生物無細胞結構，由一種核酸和蛋白衣殼組成，必須寄生在活細胞內才能生長繁殖。如病毒、類病毒和朊病毒（又稱朊粒）。

（2）原核細胞型微生物：此類微生物由單細胞組成，細胞核分化程度低，無核膜、核仁，染色體為裸露的DNA分子，缺乏完整的細胞器。如細菌、支原體、衣原體、立克次體和螺旋體。

（3）真核細胞型微生物：此類微生物細胞核分化程度高，有核膜、核仁、完整的細胞器。如真菌、單細胞藻類。

3、每種細菌DNA中的G（鳥嘌呤）+C（胞嘧啶）含量摩爾百分比有一定范圍，變化不大，DNA（G+C）mol%可以作為細菌分類的一個重要依據。

4、微生物命名由屬名和種名組成，中文命名種名在前，屬名在后。拉丁文則相反。

如：Mycobacterium

tuberculosis

中文名:

種名

+

屬名

例:

結核分枝桿菌

二、微生物的發展

1、荷蘭人列文虎克發明了顯微鏡，人類第一次觀察到微生物。

2、法國科學家巴斯德被稱為“微生物學之父”。

3、1929年，弗萊明發現了青霉素。1940年Florey和Chain將青霉素分離提純，應用于臨床。

5、德國醫生郭霍證明了微生物是傳染病的致病因子。

第二章

細菌的基本性狀常見考點

一、細菌的形態與結構

（一）細菌的大小和形態

1、細菌個體微小，通常以微米作為測量單位。

2、細菌的基本形態有三類：球菌、桿菌、螺形菌。

（二）細菌的基本結構

1、細菌的基本結構由外向內依次是細胞壁、細胞膜、細胞質和核質。

2、根據細胞壁的化學組成與結構不同，用革蘭染色將細菌分為G＋和G－兩大類。

3、磷壁酸是革蘭陽性菌細胞壁特有的結構，壁磷壁酸為革蘭陽性菌的重要表面抗原，膜磷壁酸為黏附因子。

4、外膜層是革蘭陰性菌特細胞壁的特殊成分，從外向內依次是脂多糖、脂質雙層、脂蛋白。其中脂多糖是革蘭陰性菌內毒素，脂質A是內毒素的主要毒性部分。

5、由于革蘭陰性菌和革蘭陽性菌細胞壁組成成分的不同，兩者對藥物的敏感性也不一樣。革蘭陽性菌細胞壁有五肽交聯橋，是青霉素作用的部位。

6、中介體：又稱中間體，是細胞膜內陷折疊而成的管狀囊狀結構。其功能類似真核細胞的線粒體，故有人稱之為類線粒體。

7、質粒：是細菌染色體（核質）以外的遺傳物質，為雙鏈閉環DNA分子，攜帶遺傳信息，控制細菌某些特定的遺傳性狀。F質粒控制性菌毛的產生、R質粒與細菌的耐藥性有關。

（二）細菌的特殊結構

1、鞭毛：細菌的運動器官，是由細胞質伸出的蛋白性絲狀物。

2、菌毛：主要出現在革蘭陰性菌中。分為性菌毛和普通菌毛。

僅少數革蘭陰性細菌具有性菌毛，較普通菌毛少，只有1～4根，比普通菌毛長且粗，呈中空管狀，是兩菌之間傳遞遺傳物質的通道。帶有性菌毛的細菌稱為F+菌或雄性菌，無菌毛的細菌稱為F-菌或雌性菌。細菌的耐藥性及某些毒力因子均可通過這種方式轉移。

3、莢膜：通常在機體內和營養物質豐富的環境中形成，在細胞壁外包繞的一層界限分明，且不易被洗脫的黏稠性物質。

4、芽胞：主要為革蘭陽性桿菌在一定條件下細胞質、核質濃縮脫水而形成的一個遮光性很強、具有多層膜狀結構、通透性很低的圓形或卵圓形小體。

▲細菌L型即為細菌細胞壁缺陷型。在人工誘導（少量青霉素、頭孢菌素存在）或自然情況下，細菌L型在體內或體外均可產生。

細菌L型在含血清的高滲低瓊脂培養基中能緩慢生長，可形成“油煎蛋”樣菌落（典型L型細菌）：菌落較小，中心致密并深陷人瓊脂中；四周較薄，由透明的顆粒組成，在低倍鏡下觀察菌落呈“油煎蛋”狀。

細菌L型保留了親代的遺傳特性，可返祖，可致病。

二、細菌的生理

1、細菌的基本化學組成：水、無機鹽、蛋白質、糖類、脂類、核酸（細菌含有RNA和DNA兩種核酸）。

2、細菌有帶電現象，革蘭陽性菌的等電點約為pH2～3，革蘭陰性菌的等電點約為pH4～5。

（一）細菌的生長繁殖、控制、遺傳及變異

1、細菌根據營養類型的不同，分為自養菌（以無機物作為原料）和異養菌，異氧菌又根據所需營養物質的不同分為腐生菌（以無生命的有機物作為原料）和寄生菌（以宿主體內的有機物作為原料）。

2、細菌生長繁殖的主要條件有：

（1）充足的營養物質：水、碳源、氮源、無機鹽、生長因子。

（2）合適的pH：大多數細菌的最適pH為7.2～7.6，有個別例外，結核分支桿菌在pH6.4～6.8、霍亂弧菌在pH8.4～9.2的環境中生長最好。

（3）合適的溫度：

35～37℃

（4）必要的氣體

根據細菌對氧氣?需求不一，分為：

①需氧菌：必須在有氧（空氣）的情況下才能生長。

②微需氧菌：在5%～6%的低氧環境中才能生長。

③厭氧菌：必須在無氧的環境中才能生長。

④兼性厭氧菌：在有氧和無氧環境中均能生長。

3、細菌生長繁殖的規律

（1）細菌一般一無性二分裂的方式繁殖。

（2）大多數細菌20～30分鐘繁殖一代，結核需要18～20小時才繁殖一代。

（3）細菌的生長曲線分為四個時期：

①遲緩期：適應階段，此階段細菌幾乎不繁殖。一般約1～4小時。

②對數期：細菌的形態、染色性、生理活性都較典型，可以用來觀察細菌的大小、形態、染色性、對抗菌藥物的敏感性等。一般約8～18小時。

③穩定期：細菌繁殖數與死亡數大致平衡。

④衰亡期：細菌死亡逐漸增多，死菌數超過活菌數。

4、細菌合成代謝的產物主要有：熱原質、毒素（革蘭陽性菌合成外毒素、革蘭陰性菌合成內毒素）、侵襲性酶類、色素、抗生素、細菌素、維生素。

▲我國規定生活飲用水的標準是：1ml水中的細菌總數不超過100cfu；100ml水中不得檢出大腸埃希菌。

5、細菌的控制：

（1）消毒：殺死物體上的病原微生物但不一定殺死細菌芽胞的方法。

（2）滅菌：殺滅物體上所有的微生物，包括細菌芽孢。

（3）防腐：防止或抑制微生物生長繁殖的方法。

（4）無菌和無菌操作：無菌是指沒有活的微生物存在。防止微生物進入機體或者其他操作對象的方法稱為無菌操作。

（5）高壓蒸汽滅菌法的壓力為103.4kPa，溫度為121.3℃，維持15-30分鐘。檢測高壓蒸汽滅菌效果的細菌是嗜熱枯草芽孢桿菌。

（6）用于牛奶等物品的消毒方法是巴氏消毒法。

（7）紫外線殺菌的主要機制是干擾DNA的復制。

6、正常情況下，人體與外界相同的器官都有細菌，機體的胃、骨骼、肌肉、血液、腦等無菌。濫用抗生素會導致菌群失調而發生一系列的病理反應。

7、細菌常見的變異現象：

（1）形態與結構變異：如細菌L型。①莢膜變異，從有到無；②鞭毛變異（H-O變異），從有到無；③芽胞變異，從有到無。

（2）菌落變異：S-R變異，細菌菌落光滑型與粗造型之間的變異。

（3）毒力變異：包括毒力加強和毒力減弱。

（4）抗原變異

（5）耐藥性變異：細菌對某種藥物從敏感變為不敏感。

（6）酶活性變異

（7）生化特性的變異

8、細菌的R質粒是耐藥質粒，可通過細菌間的接合或通過噬菌體進行傳遞。

9、細菌基因轉移與重組的方式有轉化、接合、轉導、溶原性轉換、原生質融合等。

（1）轉化：是受體菌直接攝取供體菌提供的游離DNA片段整合重組，使受體菌的性狀發生變異的過程。

（2）轉導：是以噬菌體為媒介，將供體菌的基因轉移到受體菌內，導致受體菌基因改變的過程。

（3）接合：受體菌和供體菌直接接觸，供體菌通過性菌毛將所帶有的F質粒或類似遺傳物質轉移至受體菌的過程。

（4）溶原性轉換：是噬菌體的DNA與細菌染色體重組，使宿主菌遺傳結構發生改變而引起的遺傳型變異。

（5）原生質體融合：兩種經過處理失去細胞壁的原生質體混和可發生融合，融合后的雙倍體細胞可發生細菌染色體間的重組。

10、細菌的主要遺傳物質是染色體，為一條環狀閉合的雙螺旋DNA。質粒也是細菌的遺傳物質。但不是主要遺傳物質。

第三章

微生物致病性與感染常見考點

1、病原微生物能否致病與病原體的毒力、數量、侵入么戶、機體的免疫力、環境因素等密切相關。

2、細菌分泌的侵襲性酶類主要有：

（1）透明質酸酶：分解結締組織的透明質酸，易于細菌擴散。

（2）膠原酶：分解細胞外基質的膠原蛋白。

（3）神經氨酸酶：分解腸黏膜上皮細胞的細胞間質。

（4）磷脂酶：可水解細胞膜的磷脂，破壞組織細胞。

（5）卵磷脂酶：分解細胞膜的卵磷脂。

（6）激酶：將血纖維蛋白酶原激活為纖維蛋白酶，以分解纖維蛋白，防止形成血凝塊。

（7）凝固酶：使血漿發生凝固，保護細菌不被吞噬細胞吞噬和殺滅。

（8）IgA蛋白酶：與細菌的黏附有關。

3、細菌毒素根據來源、性質和作用特點不同分為外毒素和內毒素。

（1）外毒素的特性：①主要是革蘭陽性菌產生；②具有菌種特異性；③毒性作用強；④毒性作用有組織選擇性；⑤具有良好的免疫原性：外毒素經過0.4%的甲醛處理可失去毒性但仍保持免疫原性變為類毒素，可刺激幾天產生抗毒素；⑥不耐熱；⑦都是蛋白質，易被酸及蛋白水解酶滅活。

（2）內毒素的特性：①主要是革蘭陰性菌產生；②化學性質是脂多糖；③抵抗力強，耐熱、耐酸、耐堿、耐強氧化劑；④細菌死亡溶解后釋放；⑤毒性及免疫原性均較外毒素弱，不能用甲醛處理成類毒素。

4、內毒素的主要生物學活性有致熱作用、白細胞增多、感染性休克、DIC等。

5、細菌全身感染在臨床上常見以下幾種情況：

（1）毒血癥：致病菌不進入血液循環，但其產生的外毒素入血。

（2）菌血癥：致病菌侵入血流，但不在其生長繁殖。

（3）敗血癥：致病菌侵入血流，在其中大量繁殖并產生毒性物質。

（4）膿毒血癥：化膿性細菌侵入血流，并在其大量繁殖。

（5）內毒素血癥：革蘭陰性細菌侵入血流，并在其大量繁殖，崩解后釋放大量內毒素。

第四章

細菌檢驗技術常見考點

一、細菌染色標本鏡檢

▲染色標本檢查的基本程序是涂片、干燥、固定、染色、鏡檢。

（一）革蘭染色

1、革蘭染色為兩種染料先后進行染色，為復染色法。

2、染液：結晶紫、盧戈碘液、95%乙醇、稀釋苯酚復紅液或沙黃。

3、染色步驟：初染1min（結晶紫）→流水沖洗→媒染1min（盧戈碘液）→流水沖洗→脫色20-30s（95%乙醇）→流水沖洗→復染0.5-1min（稀釋苯酚復紅液或沙黃）→流水沖洗→干燥→鏡檢

4、意義：鑒別細菌、指導用藥、指導臨床治療。

5、結果判定：染紫色為革蘭陽性，染紅色為革蘭陰性。

（二）抗酸染色

1、抗酸染色也是兩種染料先后染色，也是復染色法。

2、染液：苯酚復紅、3%鹽酸酒精、呂氏堿性亞甲藍

3、染色步驟：初染5～8min（苯酚復紅加熱）→流水沖洗→脫色（3%鹽酸酒精）→流水沖洗→復染1min（呂氏亞甲藍）→流水沖洗→干燥→鏡檢

4、注意事項：①苯酚加熱冒氣即可，切勿煮沸或煮干；②脫色要脫到無紅色染液脫下為止。③痰標本需要經過酸或堿處理后，使痰液化后接種。

5、臨床意義：一般用于分枝桿菌屬的檢查，如結核分枝桿菌、麻風桿菌等。

6、結果判定：染成紅色為抗酸菌，染成藍色為非抗酸菌。

二、細菌不染色標本鏡檢

▲壓滴法、懸滴法、暗視野聚光法均用于觀察細菌動力。暗視野聚光法使用暗視野顯微鏡可觀察螺旋體及其動力。

三、細菌接種與培養技術

1、液體培養基是在肉浸液中加入1%蛋白胨和0.5%NaCl，調pH至7.4，蛋白胨的作用為提供細菌生長繁殖所需的氮源。

2、半固體培養基是在液體培養基中加入0.2%～0.5的瓊脂。

3、固體培養基是在液體培養基中加入2%～3%的瓊脂。

4、細菌L型的培養基必須采用高滲（3%～5%NaC

l、10%～20%蔗糖等）低瓊脂培養基。

5、制備好的培養基放于4℃活冷暗處一般可以保存一周，最多不超過2周。

6、平板劃線接種法一般用于含有多種細菌的標本，利用此接種法可以得到單個菌落，分為分區劃線法和連續劃線法。

7、分區劃線法下一區應與上一區接觸3～4次，此方法多用于含菌量多的標本，如糞便、濃汁、痰液等標本。連續劃線法多用于含菌量少的標本。

8、斜面接種法主要用于純種增菌及保留菌種或生化反應。

9、穿刺接種法可用于觀察細菌動力，有鞭毛的細菌可沿穿刺線擴散生長。

10、液體接種法多用于普通肉湯、蛋白胨水等液體培養基接種。

11、細菌在液體培養基上的生長現象有三種，分別是：①混濁（大多數細菌）；②沉淀（鏈狀生長的細菌，如鏈球菌、炭疽芽孢桿菌等）；③菌膜（專性需氧菌，如銅綠假單胞菌等）。

12、血瓊脂上的溶血現象：

α溶血：又叫草綠色溶血，菌落周圍血培養基變為綠色環狀。

β溶血：又稱完全溶血，菌落周圍形成一個完全清晰透明的環。

γ溶血：即不溶血，菌落周圍的培養基沒有變化；紅細胞沒有溶解或無缺損。

雙環：上層溶血環，內層為θ溶血，外層為α溶血。如產氣莢膜梭菌。

13、傾注平板法用于水、牛乳、飲料及尿液等液體標本的細菌計數。

14、常用的厭氧培養法有：①皰肉培養基法；②焦性沒食子酸法；③厭氧罐法；④氣袋法；⑤厭氧手套箱法，⑥氣體噴射法。

15、最常用的營養培養基：血平板和巧克力平板。

16、鑒別培養基：如糖發酵管、三糖鐵培養基、枸櫞酸鹽培養基、克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）、伊紅-美藍瓊脂和動力-吲哚-尿素（MIU）等培養基。

17、選擇培養基：在培養基中加入某種化學成分或抗生素以抑制某些細菌的生長，而有助于需要的細菌生長，此培養基稱為選擇培養基。如SS瓊脂，其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌，因而使沙門菌、志賀菌容易得到分離。

18、增菌培養基：如乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌的生長需含血液或血清的培養基；霍亂弧菌的增菌常用堿性蛋白胨水。

19、特殊培養基：包括厭氧培養基和細菌L型培養基。巰基乙醇酸鈉是特殊培養基。厭氧培養基如皰肉培養基；細菌L型培養基是針對細胞壁缺陷的細菌L型，由于胞內滲透壓較高，培養基必須采用高滲低瓊脂培養基。

20、細菌血液培養使用的抗凝劑為聚苯乙烯磺酸鈉（SPS）。

四、細菌生化鑒定技術

（一）碳水化合物代謝試驗

1、碳水化合物代謝試驗包括：糖（醇、苷）類發酵試驗、葡萄糖氧化/發酵試驗、甲基紅試驗（MR）、V-P試驗、β-半乳糖苷酶試驗（ONPG）、七葉苷水解試驗。

2、甲基紅試驗的原理是細菌發酵葡萄糖產酸，使培養基pH下降至4.5以下，加入甲基指示劑變紅為試驗陽性。

3、V-P試驗出現紅色為陽性，ONPG出現黃色為陽性，七葉苷水解試驗出現黑色為陽性。V-P試驗常與甲基紅試驗一起使用，因為前者陽性的細菌，后者通常為陰性。

4、七葉苷水解試驗主要用于D族鏈球菌與其他鏈球菌的鑒別，前者為陽性（黑色）。

（二）蛋白質和氨基酸代謝試驗

1、蛋白質和氨基酸代謝試驗包括：靛基質（吲哚）試驗、硫化氫試驗、尿素酶試驗、苯丙氨酸脫氨酶試驗、氨基酸脫羧酶試驗。

2、吲哚試驗是由于細菌有色氨酸酶，可以分解色氨酸而產生吲哚，與對二甲基苯甲醛反應生成紅色化合物，本試驗呈現紅色為陽性。

3、硫化氫試驗是細菌能分解含硫氨基酸，產生的H2S與Fe2+反應呈黑色為陽性。主要用于腸桿菌科中屬及種的鑒別。如沙門菌屬、愛德華菌屬、亞利桑那菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬細菌，絕大多數硫化氫陽性，其他菌屬陰性。沙門菌屬中也有硫化氫陰性菌種。

4、尿素酶試驗是細菌分解尿素生成氨，使培養基呈堿性，指示劑變紅為陽性。

5、苯丙氨酸脫氨酶的陽性結果為綠色，氨基酸脫羧酶的陽性結果為培養基從黃色變為紫色。

（三）碳源利用試驗

1、碳源利用試驗包括枸櫞酸鹽利用試驗和丙二酸鹽利用試驗。

2、枸櫞酸鹽利用試驗的陽性結果為深藍色，陰性為綠色。

3、丙二酸鹽利用試驗的陽性結果為深藍色。

4、枸櫞酸鹽利用試驗在腸桿菌科中埃希菌屬、志賀菌屬、愛德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性，沙門菌屬、克雷伯菌屬通常為陽性。

（四）酶類試驗

1、觸酶試驗：細菌能催化過氧化氫生成水和氧氣，出現氣泡為陽性。

2、氧化酶試驗：某些細菌具有細胞色素氧化酶，能將二甲基對苯二胺或四甲基對苯二胺氧化成紅色的化合物，出現紅色為陽性。

3、凝固酶試驗：主要用于金黃色葡萄球菌的鑒定。

4、DNA酶試驗：細菌產生DNA酶分解DNA，是菌落周圍出現透明環。葡萄球菌、沙雷菌、變形桿菌均為陽性。

5、硝酸鹽還原試驗：出現紅色為陽性。若加入試劑后無顏色反應，可能是：①硝酸鹽沒有被還原，試驗陰性；②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產物而導致假陰性結果，這時應在試管內加入少許鋅粉（還原劑），如出現紅色則表明試驗確實為陰性。若仍不產生紅色，表示試驗為假陰性。

（五）其他及藥敏鑒定試驗

1、CAMP試驗：B群鏈球菌能產生CAMP因子，可促進葡萄球菌的β-溶血素溶解紅細胞的活性，因此在兩菌（B群鏈球菌和葡萄球菌）的交界處溶血力增加，出現箭頭狀或矢形（半月形）的溶血區。在鏈球菌中，只有B群鏈球菌CAMP試驗陽性，故可作為特異性鑒定。

2、膽汁溶菌試驗：膽汁或膽鹽可溶解肺炎鏈球菌，可能是由于膽汁降低細胞膜表面的張力，使細胞膜破損或使菌體裂解；或者是由于膽汁加速了肺炎鏈球菌本身自溶過程，促使細菌發生自溶。

3、O/129抑菌試驗：O/129抑菌試驗為藥敏試驗，0／129（二氨基喋啶）對弧菌屬細菌有抑制作用，而對氣單胞菌屬細菌無抑制作用。

4、桿菌肽試驗：A群鏈球菌對桿菌肽幾乎全部敏感，而其他群鏈球菌絕大多數對其耐藥。

5、奧普托欣（Optochin）試驗：幾乎所有肺炎鏈球菌對奧普托欣試驗敏感，而奧普托欣試驗對其他鏈球菌則無抑制作用。

五、細菌毒力鑒定

▲內毒素

常采用鱟試驗——內毒素激活鱟試劑中凝固酶原轉變為凝固酶，凝固蛋白原生成凝固蛋白。

▲外毒素

常用體內及體外毒力試驗檢測，也用ELISA法測定。

第五章

細菌對抗菌藥物的敏感試驗

一、臨床常用抗菌藥物

（一）β-內酰胺類

1、常見藥物主要是青霉素類、頭孢菌素類和單環β-內酰胺類（氨曲南和卡蘆莫南）。

2、作用機制：β-內酰胺類抗生素的作用機制相似，均是與青霉素結合蛋白（PBP）結合，抑制細菌細胞壁合成，致使細菌死亡。

（二）氨基糖苷類

1、作用機制：①依靠離子的附作用，吸附在菌體表面，造成膜的損傷；②和細菌核糖體30S小亞基發生不可逆結合，抑制mRNA的轉錄和蛋白質的合成，造成遺傳密碼的錯讀，產生無意義的蛋白質。

2、種類：①鏈霉菌屬：如鏈霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龍霉素、新霉素；

②小單胞菌屬：如慶大霉素、福提霉素；

③半合成氨基苷類：阿米卡星、奈替米星、地貝卡星等，氨基苷類抗菌藥物對需氧G-桿菌有較強的抗菌活性，對G+球菌有一定的活性。

（三）喹諾酮類

1、作用機制：①通過外膜孔蛋白和磷脂滲透進入細菌細胞；②作用于DNA旋轉酶，干擾細菌DNA復制、修復和重組。

2、種類：①第一代：為窄譜抗菌藥物，對G+球菌無作用；主要作用于大腸埃希菌，且迅速出現耐藥，較少應用于臨床。

②第二代：對G-和G+細菌均有作用；比較這類藥的抗菌活性強度依次為環丙沙星、氧氟沙星、羅美沙星、氟羅沙星、培氟沙星、諾氟沙星；

③第三代：對G+菌作用高于第二代的4～8倍，對厭氧菌亦有作用；司帕沙星、妥舒沙星、左氧氟沙星、加替沙星、格帕沙星、莫西沙星等。

（四）大環內酯類

1、作用機制：可逆結合細菌核糖體50S大亞基的23S單位，抑制細菌蛋白質合成和肽鏈延伸；

2、種類：國內常用有紅霉素、吉他霉素、麥迪霉素、乙酰螺旋霉素。新一代大環內酯類有克拉霉素、羅紅霉素、地紅霉素、氟紅霉素、阿奇霉素和乙酰麥迪霉素。

（五）其他抗菌藥物

▲磺胺類：競爭性第與二氫葉酸合成酶結合，阻止核酸形成。

▲四環素類：阻止酰胺基轉移酶RNA與mRNA核糖體的受體位點結合。分為短效（土霉素、四環素）、中效（地美環素、美他環素）和長效（多西環素、米諾環素）。

▲氯霉素類、林克霉素類：能與細菌核蛋白體50S亞基結合，使蛋白質合成呈可逆性抑制。

▲糖肽類：屬于殺菌劑，能與一個或多個肽聚糖合成中間產物形成復合物，阻斷肽聚糖合成，阻止細胞壁合成。包括萬古霉素、去甲萬古霉素、替考拉寧、多粘菌素、桿菌肽等。

◆大環內酯類的抗生素是抑菌劑。

二、抗菌藥物敏感試驗方法

▲細菌多抗菌藥物的敏感分為三種現象：敏感（S）、耐藥（R）、中介（I）。

（一）擴散法（K-B法）

1、目前常用的方法，是一種半定量的方法。采用的接種方法是平板涂布法。

2、抑菌圈的大小可以反映待檢菌對測定藥物的敏感程度，與該藥對待檢菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負相關，即抑菌圈愈大，MIC愈小。

3、含藥紙片貼于含菌瓊脂表面時應注意：①各紙片中心距離不小于24mm，紙片距平板內緣應大于15mm；②一旦碰觸培養基就不可再動；③平板最好單獨平放，不超過兩個疊放。

4、采用標準菌株是進行質控的主要措施。

◆金黃色葡萄球菌ATCC25923，大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853，糞腸球菌ATCC29212或ATCC33186。

5、紙片擴散法的培養基要求其pH值為7.2～7.4，過高或過低的pH值會影響藥物效能。堿性可擴大氨基糖苷類藥物的抑菌圈，酸性可擴大四環素類藥物的抑菌圈。

★其他高頻考點

1、MBC為最低殺菌濃度。

2、體外聯合藥物敏感試驗的FIC（部分抑菌濃度指數）：FIC指數＜0.5

協同作用；FIC指數0.5～1相加作用；FIC指數1～2

無關作用；FIC指數＞2

拮抗作用。

3、抗結核分枝桿菌的首選一線藥物是異煙肼、利福平。

4、產ESBL菌株臨床上用β-內酰胺類抗生素（青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南）治療無效。

5、耐甲氧西林金葡菌(MRSA)用β-內酰胺類抗生素治療無效。

6、產AmpC酶菌株對β-內酰胺類抗生素（青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南）及含酶抑制劑復合制劑耐藥。治療有效的藥物主要有碳青霉烯類(亞胺培南)和第四代頭(頭孢吡肟、頭孢匹羅)以及某些喹酮類和氨基糖苷類抗生素。

7、藥敏試驗時，采用的菌液濃度為0.5麥氏比濁度，相當于1.5×10^8/ml含菌量。

第六章

各菌屬特征匯總

●葡萄球菌屬

1、葡萄球均屬是一類觸酶試驗陽性的革蘭陽性（G＋）球菌，無鞭毛和芽胞，某些菌株能形成莢膜。包括金黃色、表皮、腐生、溶血葡萄球菌。

2、葡萄球菌觸和鏈球菌鑒別用觸酶試驗，葡萄球菌觸酶陽性，鏈球菌是陰性。

3、葡萄球菌的致病性用凝固酶試驗，致病性葡萄糖球菌為陽性，還可以分解甘露醇產酸，耐熱DNA酶陽性。主要見于金黃色葡萄球菌。

4、葡萄球菌的細胞壁上有葡萄球菌A蛋白（SPA），可以與人類IgG的Fc段結合，可進行協同凝集試驗。

5、葡萄球菌抵抗力強，耐熱、耐干燥、耐高鹽，是抵抗力最強的無芽胞細菌。

6、耐甲氧西林的金葡菌（MRSA），耐甲氧西林的表葡菌（MRSE），耐萬古霉素的金黃色葡萄球菌（VRSA），耐萬古霉素的表皮葡萄球菌（VRSE），MRSA的首選抗生素為萬古霉素。

7、表皮葡萄球菌為醫院感染的重要病原菌，它是導致血培養污染的常見細菌之一。

8、腐生葡萄球菌是導致尿路感染的常見病原菌之一。

★看到凝固酶、耐熱DNA酶陽性，就選金黃色葡萄糖球菌。

●鏈球菌屬

1、鏈球菌屬是一大群觸酶試驗陰性、在液體培養基上呈鏈狀排列的革蘭陽性（G＋）球菌，但在陳舊培養基或被吞噬細胞吞噬后常呈革蘭陰性（G－）。無鞭毛、無芽胞。

2、肺炎鏈球菌矛頭狀排列，由于其能產生自溶酶，菌落呈臍窩狀，鑒別試驗：奧普托欣試驗（Optochin），陽性、膽汁溶菌試驗陽性、莢膜腫脹試驗陽性、草綠色溶血圈。本菌是社區獲得性肺炎的最常見病原菌。

3、A群鏈球菌用桿菌肽試驗鑒別，為陽性。可產生溶血素和紅疹毒素，前者在血平板上形成β-溶血環，后者引起猩紅熱。對人類有致病性的90%屬A群。

4、B群鏈球菌可以水解馬尿酸和CAMP試驗陽性。

5、D群鏈球菌七葉苷試驗陽性。

6、草綠色鏈球菌是引起亞急性心內膜炎最常見的病原菌。

7、鏈球菌感染引起的變態反應疾病為風濕熱、腎小球腎炎，為Ⅲ。

8、化膿性鏈球菌產生的酶有脫氧核糖核酸酶（鏈道酶）、透明質酸酶（擴散因子）、鏈激酶（溶解纖維蛋白酶）。因為有這幾種酶的的產生，化膿性鏈球菌感染的病灶范圍廣、膿液稀薄、邊界不清。

9、根據溶血現象的不同，將鏈球菌分為甲型溶血性鏈球菌（α溶血）、乙型溶血性鏈球菌（β溶血）、丙型溶血性鏈球菌（γ溶血）。

●腸球菌屬

1、腸球菌屬是腸道的正常棲居菌。G+，成雙或短鏈狀排列的卵圓形球菌，無芽胞，無莢膜，部分腸球菌有稀疏鞭毛。

2、腸球菌能在高鹽（6.5%NaCl）、高堿（pH9.6）、40%膽汁培養基上和10℃～45℃環境下生長；

●奈瑟菌屬

1、G-，呈腎形，坦面相對，雙球菌，存在于中性粒細胞內（或胞外），無鞭毛，無芽胞，有菌毛。專性需氧，氧化酶陽性。

2、在血瓊脂平板、巧克力瓊脂或EPV瓊脂，置5%～10%C02環境中，35℃培養18～24h后可見圓形、灰褐色、濕潤、光滑、邊緣整齊、直徑1～2mm的小菌落。

3、淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌用麥芽糖發酵試驗區別，前者不發酵乳糖，后者發酵乳糖。

4、奈瑟菌屬初次分離需要5%-10%二氧化碳。營養要求高，要用巧克力平板。

5、腦膜炎奈瑟菌定植于鼻咽部，引起流腦，少數還可引起敗血癥。

6、淋病奈瑟菌人類是唯一宿主。懷疑奈瑟菌感染，標本需保溫保濕送檢。

◆卡他布蘭漢菌：氧化酶和觸酶陽性，產DNA酶，大部分菌株還原硝酸鹽和亞硝酸鹽，營養要求不高，在普通培養基上18～20℃即可生長，借此可與奈瑟菌屬相鑒別。

●腸桿菌科

1、腸桿菌科共同特征：革蘭氏陰性桿菌、氧化酶陰性、觸酶和硝酸鹽還原試驗為陽性。

2、腸桿菌中志賀、克雷伯、鼠疫耶爾菌屬、EIEC沒有鞭毛，也就是說它們的動力陰性。

3、O抗原和H抗原是腸桿菌科分群及分型的依據，4、乳糖發酵是區別致病性與非致病性，致病性不發酵乳糖，非致病性發酵乳糖。

●埃希菌屬

1、G-，短桿菌，多數有周鞭毛，有菌毛，有莢膜或微莢膜。兼性厭氧菌。

2、大腸埃希菌在EMB平板上是帶有金屬光澤呈藍紫色的菌落，麥康凱和SS瓊脂上呈粉紅色菌落。雙糖鐵發酵管（KIA）產酸產氣，IMViC試驗結果＋＋－－。

5、大腸埃希菌腸道外感染以尿系統感染為主，常見腎盂腎炎。

腸道內感染：（1）產毒素性（ETEC）：主要引起旅游者腹瀉、嬰兒腹瀉。

（2）腸致病性（EPEC）：嬰兒腹瀉。

（3）腸侵襲性（EIEC）：類似志賀菌腸炎的癥狀。里急后重。

（4）腸出血性（EHEC）：常見血清型O157：H7，引起出血性腸炎，主要見于嬰幼兒，還可引起溶血性尿毒癥。

（5）腸粘附性（EaggEC）：嬰兒急性水樣腹瀉。

●志賀菌屬

1、G-，短小桿菌，無莢膜，無芽胞，無鞭毛，有菌毛。需氧或兼性厭氧。

2、志賀菌屬是細菌性痢疾最常見的病原菌，中國最常見的是福氏（B群）和宋氏（D群）。

3、志賀菌屬用SS培養基或中國藍（麥康凱）平板，菌落為紅色或粉紅色。

4、由于志賀菌沒有鞭毛，所以它沒有H抗原，有O抗原、K抗原。

5、志賀菌引起的腹瀉常為里急后重。

●沙門菌屬

1、G-，直桿菌，無芽胞，無莢膜，周鞭毛（除雞沙門菌），多數有菌毛。

2、SS瓊脂和麥康凱瓊脂培養基：約2～4mm的透明或半透明菌落，對膽鹽耐受。產H2S者在SS瓊脂上形成黑色中心菌落。

3、傷寒沙門菌的抗原主要包括菌體（O）抗原、鞭毛（H）抗原和表面（Vi）抗原。

4、傷寒沙門菌檢測用肥達試驗：用已知的傷寒沙門菌O、H抗原，副傷寒甲、乙H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗，以檢測患者血清中抗體的含量，來判斷機體是否受沙門菌感染而導致腸熱癥并判別沙門菌的種類。

5、菌體（O）抗原刺激機體產生的抗體以IgM為主，H抗原則以IgG為主。

6、傷寒沙門菌感染1周取血液標本，2～3周取糞便，3周以后取尿液。

7、所致疾病：腸熱癥，即傷寒與副傷寒病、食物中毒、慢性腸炎、敗血癥、沙門菌的局部感染如頸部、腰部等。

●變形桿菌屬

1、G-，桿菌，多形，有周鞭毛，無芽胞、無莢膜。

2、營養要求不高，在普通培養基上呈遷徙生長。苯丙氨酸脫氨酶試驗陽性使其重要的生化鑒別反應。

3、變形桿菌X19、X2、Xk等類型的O抗原與立克次體有共同抗原成分，可發生外斐反應。

●耶爾森菌屬4、普通變性桿菌引起食物中毒，奇異變性桿菌引起嬰幼兒腸炎

1、鼠疫耶爾森菌是鼠疫的病原菌，我國將其列為甲類傳染病。

2、鼠疫耶爾森菌為G-，桿菌，球桿狀，兩極濃染，有莢膜，無鞭毛，無芽胞。

3、鼠疫耶爾森菌在血平板上菌落柔軟、黏稠，在液體培養基中，開始為渾濁生長，24小時后為沉淀生長，48小時后形成菌膜，搖動后呈鐘乳石狀下沉。半固體穿刺呈縱樹狀生長。

4、小腸結腸耶爾森菌22～25℃培養有周鞭毛，呈翻滾螺旋運動；35℃時培養該菌無動力，最適生長溫度為20～28℃。

5、小腸結腸耶爾森菌是人畜共患病原菌。

●弧菌屬

1、弧菌科氧化酶都是陽性，動力陽性的G-細菌。包括弧菌屬、氣單胞菌屬、鄰單胞菌屬等。

2、霍亂弧菌根據生物學特性上的差異，分為古典生物型和Eltor生物型兩個生物型，兩個生物型的抗原同屬O1群霍亂弧菌。

3、O1群霍亂弧菌根據菌體抗原含有A、B、C

3種抗原因子的不同，又可將其分為小川型、稻葉型和彥島型，以小川型和稻葉型為常見流行型。

4、霍亂運動呈穿梭狀或流星狀，排列呈魚群狀，在亞碲酸鉀培養基上是褐色菌落，培養基是堿性蛋白胨水。主要致病物質是霍亂腸毒素，患者大便呈米泔樣便。

5、霍亂弧菌的鑒別培養用硫代硫酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板（TCBS）。

6、霍亂弧菌在堿性蛋白胨水上生長迅速，最適pH為8.4～9.2。

7、霍亂弧菌的O1群、O139群引起霍亂，O2～O138群只引起人類胃腸炎，稱之為非O1群霍亂弧菌。

8、霍亂弧菌的生物分型

9、霍亂弧菌采集的標本若不能及時在堿性蛋白胨水中增菌，應置于文-臘二氏保存液活卡-布運送培養基中由專人運送。

10、副溶血性弧菌是一種嗜鹽菌，常存在與海水及海類產品中，是沿海地區食物中毒最常見的病原菌。

11、副溶血性弧菌與霍亂區別用蔗糖發酵試驗，前者不發酵蔗糖，在TCBS上呈藍綠色菌落，后者呈黃色菌落。

12、副溶血性弧菌能使人或兔的紅細胞發生溶血，對馬紅細胞不溶血，稱為神奈川現象。

●其他菌屬主要特征及高頻考點

1、肺炎克雷伯菌動力和鳥氨酸脫羧酶陰性、黏液狀菌落用接種環可拉絲是主要特征。

2、小結：志賀菌IMViC（-+--），大腸埃希菌IMViC（++--），產氣腸桿菌IMViC（--++）。

3、氣單胞菌屬運動活潑，在血平板上形成大而扁平的β溶血性菌落。嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌可發酵阿拉伯糖。

4、鄰單胞菌屬引起水樣腹瀉，與志賀菌類似，也是引起食物中毒。

5、假單胞菌屬、產檢桿菌屬、不動桿菌屬等不能發酵葡萄糖，均為非發酵革蘭陰性桿菌。

6、銅綠假單胞菌為專性需氧菌，在普通培養基上菌落有生姜味，可產生水溶性的綠色素，在血平板上產生透明溶血環。該菌42℃可生長，可通過該試驗區分其他假單胞菌。

7、銅綠假單胞菌可引起泌尿道、皮膚、呼吸道、燒傷創面感染等，還可以導致菌血癥、敗血癥、心內膜炎、囊性纖維變性及嬰幼兒嚴重腹瀉等。

8、不動桿菌屬有三陰特征，即氧化酶、動力、硝酸鹽還原試驗均為陰性。

9、流感嗜血桿菌能產生自溶酶，生長需要Ⅴ、Ⅹ因子。培養有特殊要求，營養要求高，初次分離需要5%～10%CO2，用巧克力平板。有金黃色葡萄糖球菌（可產生Ⅴ、Ⅹ因子）時候，會出現衛星生長現象。

嗜血桿菌的菌落呈露滴狀。

副流感嗜血桿菌的形態、菌落與?流感嗜血桿菌相似，也能產生衛星現象，在生長過程中只需要V因子而不需要X因子。

10、軍團菌屬培養要求特殊，培養基中必須含有半胱氨酸和鐵，培養基用活性炭-酵母浸液瓊脂培養基（BCYE）。傳播途徑為空氣。

12、布魯菌屬是人畜共患病原菌，包括羊、牛、豬、狗、綿羊布魯菌等。引起布病。如果在做題看到有什么草原養羊、羊接觸史的話，就選布魯菌感染。

13、彎曲菌屬，不分解糖類，氧化酶陽性，分離培養時，培養基中需含有大量抗生素，初次分離，須在5%O2、10%CO2、85%N2的氣體環境中生長。

14、幽門螺桿菌呈海鷗狀彎曲，脲酶強陽性（快速分解尿素）是特征，標本采集部位是胃，十二指腸。

15、白喉棒狀桿菌特異性標志是異染顆粒，在亞碲酸鉀培養基上是黑色菌落，培養基選用呂氏血清斜面和亞碲酸鉀，致

19、炭疽芽孢桿菌在每毫升含有0.05～0.5U青霉素的培養基中，可發生形態變異，形成大而均勻的圓球狀并相連如串珠狀，稱為串

抗酸染色分級報告標準：①－：連續觀察300個視野未發現抗酸桿菌；②±：1～2條/300視野；③1＋：1～9抗酸桿菌條/100個視野；④2＋：1～9條抗酸桿菌/10視野；⑤3＋：1～9條抗酸桿菌/每視野；⑥4＋：≥10條抗酸桿菌/每視野。

27、麻風分枝桿菌，典型的胞內寄生，所在細胞呈泡沫狀，稱為麻風細胞。犰狳對本菌高度敏感，為本菌的良好動物模型。抗酸染色為陽性桿菌。

28、厭氧菌屬，特征是在無氧條件下才能生長，懷疑厭氧菌感染用皰肉培養基培養。

29、破傷風梭菌，嚴格厭氧，有周鞭毛、無莢膜。芽胞呈正圓形，寬于菌體，位于菌體頂端，細菌呈鼓槌狀。本菌的致病物質主要是外毒素，包括破傷風痙攣毒素和破傷風溶血毒素，引起強直性痙攣。

30、產氣莢膜梭菌可以引起氣性壞疽，在牛乳培養基中是洶涌發酵生長是其主要特征。

31、肉毒梭菌引起食物中毒，致病物質是肉毒毒素，是已知最劇烈的神經外毒素。懷疑食物中毒，從患者血清中檢出毒素是最直接、有效的方法。

32、艱難梭菌可以引起腹瀉和假膜性腸炎。

33、衣原體，細胞內專性寄生。有獨特的發育周期：①原體有高度感染性，無繁殖能力；②始體（網狀體），有繁殖能力，沒有感染性。每個發育周期是40～72h。

34、沙眼衣原體培養用McCoy細胞，鸚鵡熱衣原體和肺炎衣原體用Hela-299細胞培養。

35、沙眼衣原體引起四種疾病：①沙眼；②包涵體結膜炎，致盲的主要因素是包涵體結膜炎；③泌尿生殖道感染，非淋菌性生殖道感染的主要病原，男性尿道炎的常見病因。④性淋巴肉芽腫：又稱第四性病。

36、鸚鵡熱衣原體，氣溶膠傳播，引起非典型肺炎（人畜共患病原體）。

37、肺炎衣原體，呼吸道傳播，主要引起肺炎。

38、支原體，無細胞壁，能在人工培養基上生長，能通過細菌濾器，是最小的原核細胞型微生物，典型特征是菌落為“荷包蛋”樣。治療藥物首選紅霉素。

39、肺炎支原體通過呼吸道傳播，引起原發性非典型肺炎。

40、解脲支原體通過性傳播，引起非淋菌性尿道炎。

41、立克次體，細胞內寄生，頭痛，發熱，皮疹以及中樞神經是本病特征。立克次體一個重要試驗是外斐試驗，是非特異性凝集試驗。

42、立克次體不能人工培養，檢測是利用變性桿菌的公共抗原檢測（共同抗原），OX19對應流行性斑疹傷寒，鼠型斑疹傷寒。OX2對應斑點熱，OXK對應恙蟲病。

43、鉤端螺旋體通過疫水傳播，是典型的人畜共患病，鼠和豬是最常見的儲存宿主和傳染源，是一種自然疫源性疾病。治療藥物首選青霉素。

44、梅毒螺旋體為密螺旋體，用鍍銀染色。

45、梅毒三期分型，一期硬下疳，二期梅毒疹，三期梅毒瘤

46、早期梅毒傳染性強，破壞力小，晚期破壞力大，傳染性小

47、梅毒通過性傳播，輸血傳播，垂直傳播

48、梅毒檢查非特異性試驗用牛心類脂質。WHO推薦用VDRL（性病研究實驗室試驗），RPR（快速血漿反應素試驗）做篩查，確診試驗是TPPA。

49、放線菌患者病灶有硫磺顆粒，菌體呈菊花狀，菌落由R型轉變為S型。

50、諾卡菌屬主要有星型諾卡和巴西諾卡致病，星型諾卡菌落表面無白色菌絲，巴西諾卡表面有白色菌絲，諾卡菌屬抗酸染色是弱陽性，諾卡菌為革蘭氏陽性桿菌，有細長的菌絲，菌絲末端不膨大。色素小顆粒壓碎染色鏡檢，可見顆粒呈菊花狀。不同種類可產生不同色素，如橙紅、粉紅、黃、黃綠、紫以及其他顏色。巴西諾卡菌七葉苷、黃嘌呤、肌醇、甘露醇均為陽性。星型不分解黃嘌呤。

●真菌常見考點

1、真菌檢測的標本如皮屑、指甲、頭發等，需要用10%KOH處理。

2、真菌培養一般選用沙氏培養基。

3、白假絲酵母菌鑒別要點：①芽管形成試驗（＋）；②厚膜孢子形成試驗（＋）；③脲酶試驗（－）；④不能形成假菌絲；⑤革蘭陽性。

4、新型隱球菌鑒別要點：①墨汁染色，在黑色背景下可見到透亮菌體和寬厚莢膜；②沙保弱培養基上可生成酵母型菌落；③脲酶試驗（＋）。

5、艾滋病人最易合并感染的真菌是卡氏肺孢子菌。

6、黃曲霉菌產生的黃曲霉毒素可以致癌。

●病毒常見考點

1、病毒是非細胞型微生物，基本結構是核心、衣殼。

2、流感病毒是有包膜的RNA病毒，包膜上的血凝素（HA）和神經氨酸酶（NA）是重要的表面抗原，其中HA極易發生變異。此病毒的命名方式HXNX（X為型號，比如H1N1、H2N2等）。

3、麻疹病毒是單股的有包膜的RNA病毒，可以引起病毒血癥，發病2天后口腔黏膜出現白色外繞紅暈的黏膜斑（早期診斷有重要意義），之后患者皮膚相繼出現紅色版丘疹。常見并發癥為肺炎。

4、腮腺炎病毒是有包膜的RNA病毒，感染后可引起一側或雙側腮腺腫大，青春期感染者，男性易并發睪丸炎。

5、甲型肝炎病毒（HAV）是無包膜的RNA病毒。傳播途徑是糞-口傳播，引起甲肝，還可以引起病毒血癥。產生的甲肝抗體為IgM，ELISA檢測用捕獲法。

6、乙型肝炎病毒（HBV）是DNA病毒，引起乙肝，嚴重可發展為肝癌。

常見考點：①HBV的大球型顆粒（Dane）有感染性；②乙肝兩對半：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc；③大三陽指HBsAg、HBeAg、抗-HBc均為陽性，此種模式為急性乙肝，傳染性極強；④小三陽指HBsAg、抗-HBe、抗-HBc，此種模式感染趨向恢復期；⑤乙肝的保護性抗體指抗-HBs；⑥HBeAg陽性表示乙肝的傳染性極強；⑦抗-HBs、抗-HBs、抗-HB。

16、細菌的特殊結構包括：鞭毛、菌毛、莢膜、芽胞

第四篇：臨床醫學檢驗考試輔導醫學檢驗

第九章　酶免疫技術

第一節　酶免疫技術的特點

它是將酶與抗體或抗原結合成酶標記抗體或抗原，在酶標抗體（抗原）與抗原（抗體）的特異性反應完成后，加入酶的相應底物，通過酶對底物的顯色反應，對抗原或抗體進行定位、定性或定量的測定分析。

一、酶和酶作用底物

（一）酶的要求：一個酶蛋白分子每分鐘可催化103～104個底物分子轉變成有色產物。

1.酶的活性要強，催化反應的轉化率高，純度高。

2.易與抗體或抗原偶聯，標記后酶活性保持穩定，且不影響標記抗原與抗體的免疫反應性。

3.作用專一性強，酶活性不受樣品中其他成分的影響，受檢組織或體液中不存在與標記酶相同的內源性酶或抑制物。用于均相酶免疫測定的酶還要求當抗體與酶標抗原結合后，酶活性可出現抑制或激活。

4.酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量，方法簡單易行、敏感和重復性好。

5.酶、輔助因子及其底物對人體無害，酶的底物易于配制、保存，酶及其底物應價廉易得。

（二）常用的酶

1.辣根過氧化物酶（HRP）：目前酶聯免疫吸附試驗中應用最廣泛的標記用酶。由無色的糖蛋白（主酶）和亞鐵血紅蛋白（輔基）結合而成的復合物。輔基是酶活性基團，而主酶則與酶活性無關，HRP的純度用RZ（HRP分別在403nm和275nm處的吸光度比值）表示，RZ值應大于3.0。

RZ值僅說明血紅素基團在HRP中的含量，并非表示HRP制劑的真正純度，而且RZ值高的HRP并不意味著酶活性也高，RZ值與酶活性無關。

酶活性以單位U表示：即1分鐘將1μmol底物轉化為產物所需的酶量。酶變性后，RZ值不變但活性降低，因此使用酶制劑時，酶活性單位比RZ值更為重要。

2.堿性磷酸酶（AP）：大腸桿菌來源的AP分子量80kD，酶作用最適pH為8.0；小牛腸黏膜AP分子量為100kD，最適pH為9.6；后一種AP的活性高于前者。

3.β-半乳糖苷酶（β-Gal）：β-Gal來源于大腸桿菌。因人血中缺乏此酶，以其制備的酶標志物在測定時不易受到內源性酶的干擾，從而提高特異性，被用于均相酶免疫測定。

（三）常用的底物

1.HRP的底物

（1）鄰苯二胺（OPD）：是HRP最為敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下顯橙黃色，加強酸如硫酸或鹽酸終止反應后呈棕黃色，最大吸收峰在492nm波長。OPD應用液穩定性差，易變色，需新配制后在1小時內使用，顯色反應過程需避光，而且具有致癌性。

（2）四甲基聯苯胺（TMB）：TMB經HRP作用后變為藍色，加入硫酸終止反應后變為黃色，最大吸收峰波長450nm。TMB穩定性好，成色無需避光，無致突變作用，是目前ELISA中應用最廣泛的底物。缺點是水溶性差。

（3）其他：5-氨基水楊酸（5-ASA）和2，2-聯氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽（ABTS）。

2.AP的底物

常用對-硝基苯磷酸酯（p-NPP），p-NPP經AP作用后的產物為黃色對硝基酚，最大吸收峰波長為405nm。

3.β-半乳糖苷酶（β-Gal）的底物

常用4-甲基傘酮基-R-D半乳糖苷（4-MUU），酶作用后，生成高強度熒光物4-甲基傘形酮（4-MU），其敏度性較HRP高30～50倍，但測量時需用熒光計。

二、酶標記抗體或抗原

（一）酶標記抗體或抗原的制備

標記方法應符合：技術方法簡單、產率高，且重復性好；標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性；酶標志物穩定，應避免酶、抗體（抗原）以及酶標志物各自形成聚合物等。

1.戊二醛交聯法：同源雙功能交聯劑。

（1）一步法：連接AP。

①優點：操作簡便、有效，重復性好。

②缺點：交聯時分子間比例不嚴格，大小不一，影響效果。

（2）二步法：連接HRP。

先將HRP與戊二醛作用，透析除去戊二醛，在pH9.5緩沖液中再與抗體作用而形成酶標抗體。

優點：酶標志物質量較均一，標記效率也較一步法高。

2.改良過碘酸鈉法

HRP標記抗體或抗原的最常用方法。

（二）酶標記物的純化及鑒定

常用的純化方法有葡聚糖凝膠G-200/G-150過柱層析純化和50%飽和硫酸銨沉淀提純等。

常用免疫電泳或雙相擴散法進行鑒定。

1.出現沉淀線表示酶標記物中的抗體（抗原）具有免疫活性。

2.沉淀線經生理鹽水漂洗后，滴加酶的底物溶液，若沉淀線上顯色，則酶標記物中的酶活性仍保留。

三、固相載體

除均相酶免疫測定外，各種非均相酶免疫測定反應最后都需要分離游離和結合的酶標記物。

固相抗體或抗原就是把抗體或抗原結合到固相載體的表面上，是酶免疫技術中將游離和結合的酶標志物迅速分離的最常用方法。

（一）固相載體的要求　結合抗體或抗原的容量大；可將抗體或抗原牢固地固定在其表面，經長期保存和多次洗滌也不易脫落；不影響所固定的抗體或抗原的免疫反應性，而且為使反應充分進行，最好其活性基團朝向反應溶液，固相方法簡便易行，快速經濟。

（二）固相載體的種類和選擇

1.塑料制品：聚苯乙烯塑料最常采用。抗原或抗體以非共價或物理吸附方式結合到此載體上。

主要缺點是抗體（抗原）結合容量不高、固相抗體（抗原）脫吸附率較高且不均一，孔間變異大，重復性差，從而影響測定的靈敏度、精確度及檢測范圍。

目前采用非共價和化學偶聯共價吸附方法進行抗原或抗體的固相化可改善上述缺點

2.微粒：易與抗體（抗原）形成化學偶聯，且結合容量大。均勻地分散到整個反應溶液中，因此反應速度快。可制成磁化微顆粒。自動化檢測中常用。

3.膜載體：常有硝酸纖維素膜（Nc）、玻璃纖維素膜及尼龍膜等通過非共價鍵吸附抗體（抗原），廣泛用于定性或半定量斑點ELISA的固相載體。

（三）包被與封閉

1.包被：將抗原或抗體結合在固相載體上的過程。普遍使用的聚苯乙烯載體，將抗原或抗體溶于緩沖液（常用為pH9.6的碳酸鹽緩沖液）中，加于ELISA板孔中4℃過夜。包被好的固相載體在低溫可放置一段時間而不失去免疫活性。

2.封閉：包被的蛋白質濃度過低，固相載體表面不能被此蛋白質完全覆蓋，其后加入的血清標本和酶結合物中的蛋白質也會部分地吸附于固相載體表面，最后產生非特異性顯色致本底偏高，在這種情況下，需用1%～5%的牛血清白蛋白或5%～20%小牛血清再包被一次，消除此干擾，此過程稱為封閉。

第二節　酶免疫技術的分類

包括兩種：

酶免疫組織化學技術：用于組織切片或其他標本中抗原的定位。

酶免疫測定技術（EIA）：用于液體標本中抗原或抗體的定性和定量。根據抗原抗體反應后是否需將結合和游離的酶標志物分離，EIA一般可分為均相和異相兩種類型。

一、均相酶免疫測定

利用酶標志物與相應的抗原或抗體結合后，標記酶的活性會發生改變的原理，可以在不將結合和游離酶標志物分離的情況下，通過測定標記酶的活性的改變，而確定抗原或抗體的含量。該法主要用于小分子激素和半抗原（如藥物）的測定，均相法的優點是適合于自動化測定，但反應中被抑制的酶活力較小，需用靈敏的光度計測定，反應的溫度也需嚴格控制。

（一）酶放大免疫測定技術（EMIT）EMIT的基本原理是半抗原與酶結合成酶標半抗原。當與抗體結合后，所標的酶與抗體密切接觸，使酶的活性中心受到影響而活性被抑制。反應后酶活力大小與標本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測定結果就可推算出標本中半抗原的量。

（二）克隆酶供體免疫分析（CDEIA）DNA重組技術可分別合成某種功能酶（如β-D半乳糖苷酶）分子的兩個片段，大片段稱為酶受體（EA），小分子稱作酶供體（ED），兩者單獨均無酶活性，一定條件下結合形成四聚體方具酶活性。克隆酶供體免疫測定（CDEIA）的反應模式為競爭法。

標本中的抗原和酶供體（ED）標記的抗原與特異性抗體競爭結合，形成兩種抗原抗體復合物。ED標記的抗原與抗體結合后由于空間位阻，不再能與酶受體（EA）結合，而游離的ED標記的抗原上的ED可和EA結合，形成具有活性的酶，加入底物測定酶活性，酶活力的大小與標本中抗原含量成正比。

二、異相酶免疫測定

是目前應用最廣泛的一類標記免疫測定技術。

（一）異相液相酶免疫測定　主要用于檢測樣品中極微量的短肽激素和某些藥物等小分子半抗原。酶標志物具有更好的穩定性，且無放射性污染。

1.平衡法：將待測樣品抗原、酶標抗原及特異性抗體進行一次性溫育，待反應達平衡后，測定離心沉淀物（酶標抗原抗體復合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。

2.非平衡法：先將樣品（或標準品）與抗體混合反應達平衡，然后加入酶標記抗原繼續溫育一段時間，測定離心沉淀物（酶標抗原抗體復合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。

（二）固相酶免疫測定　酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。

第三節　酶聯免疫吸附試驗

一、基本原理

把抗原或抗體結合到固相載體表面，測定時將受檢樣品和酶標記抗原或抗體與結合在固相載體上的抗原或抗體反應形成抗原抗體復合物；洗去未結合成分；加入底物后，底物被固相載體上的酶催化變成有色產物。故：

①固相的抗原或抗體；

②酶標記的抗原或抗體；

③酶反應的底物三種試劑為反應必備。

二、方法類型及反應原理

（一）檢測抗原的方法

1.雙抗體夾心法：屬于非競爭結合，檢測抗原最常用的方法，檢測含有至少兩個抗原決定簇的多價抗原。原理是先將特異性抗體與固相載體連接；加入待測標本，形成固相抗原抗體復合物；再加入酶標抗體形成雙抗體夾心，洗滌；加底物顯色，根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量檢測。

如血清標本中有類風濕因子（RF）存在，則可出現假陽性反應，因為RF是一種抗變性IgG的自身抗體，它能與多種動物的變性IgG的Fc部分結合，因此RF就可作為固相抗體和酶標抗體之間的橋接抗原。

雙抗體夾心法只適用于二價或以上的較大分子抗原的測定，不能用于小分子半抗原的檢測。

2.雙位點一步法：針對抗原分子上兩個不同且空間距離較遠的決定簇，包被使用一種單抗，酶標記使用另一種單抗。測定時將待測抗原和酶標抗體同時加入，溫育、洗滌，加入底物顯色。若待測抗原濃度過高時，過量的抗原可分別同固相抗體和酶標抗體結合而抑制夾心復合物的形成，出現鉤狀效應，顯色降低，甚至假陰性。必要時可將標本經過適當稀釋后重復測定。

3.競爭法

用于測定小分子抗原，如藥物、激素等。原理為先用抗小分子的特異性抗體包被固相，然后同時加入待測樣本和酶標記的小分子，兩種小分子競爭與固相上的抗小分子的特異性抗體結合，溫育一定時間后洗滌，加入酶底物顯色。

特點是：

①酶標記抗原與樣品或標準品中的非標記抗原具有相同的與固相抗體結合的能力；

②反應體系中，固相抗體和酶標抗原是固定限量，且前者的結合位點少于酶標記和非標記抗原的分子數量和；

③免疫反應后，結合于固相載體上復合物中被測定的酶標抗原的量（酶活性）與樣品或標準品中非標記抗原的濃度成反比。

（二）檢測抗體的方法

1.間接法：最常用的方法，屬非競爭性結合試驗。原理：將抗原包被在固相載體上，加入待測樣本形成固相抗原-受檢抗體復合物；經溫育洗滌后，加入酶標二抗，常用羊抗人IgG，在固相上即形成固相抗原-待測抗體-酶標抗抗體復合物，加入底物后根據顯色的深淺確定待測抗體含量。多用于檢測IgG類型抗體。

2.雙抗原夾心法

此法可檢測各類抗體，因此雙抗原夾心法的靈敏度和特異性要高于間接法。其原理及操作步驟類似雙抗體夾心法，也可采用一步法。由于機體產生抗體IgG的效價有限，一般不會出現鉤狀效應。

臨床上乙型肝炎表面抗體的測定常用此法。

3.競爭法

一般抗體檢測是較少采用，當相應抗原材料中含有與抗人IgG反應的物質，而且不易得到足夠的純化抗原或抗原的結合特異性不穩定時，可采用這種方法測定抗體，目前臨床運用較多的是乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）和乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）的檢測。

競爭抗體與待測抗體的特異性及親和力越接近，則測定的可靠性越強。

4.捕獲法又稱反向間接法

主要用于血清中某種抗體亞型成分（如IgM）的測定，最常用的是病原體急性感染診斷中的IgM型抗體。原理：先將針對IgM的二抗包被于固相載體，加入待測標本，其中IgM類抗體可被固相抗體捕獲，再加入特異性抗原，其與固相上捕獲的IgM抗體結合后，加入酶標記特異性抗原的抗體，形成固相二抗-IgM-抗原-酶標記抗體復合物，加底物顯色后，即可對待測標本中IgM是否存在及含量進行測定。

第四節　酶免疫測定的應用

幾乎所有的可溶性抗原抗體系統均可用酶免疫測定檢測。

均相酶免疫測定主要用于藥物和小分子物質的檢測。

非均相免疫測定中的ELISA在多種物質的檢測中被廣泛的使用。

實戰演練

目前酶免疫技術中應用較廣、提純較簡便的酶是

A.脲酶

B.堿性磷酸酶

C.葡萄糖氧化酶

D.辣根過氧化物酶

E.半乳糖苷酶

『正確答案』D

『答案解析』HRP是目前在酶聯免疫吸附試驗中應用最為廣泛的標記用酶。

酶放大免疫測定技術（EMIT）主要用來檢測

A.抗原

B.抗體

C.半抗原

D.不完全抗體

E.抗原抗體復合物

『正確答案』C

『答案解析』酶放大免疫測定技術（EMIT）主要用來檢測半抗原。

以下關于酶標記抗體或抗原不正確的是

A.過碘酸鹽氧化法只用于HRP的標記

B.未標記上的游離的抗體與酶標記抗體競爭固相上的抗原

C.制備的標記物無須純化，因為游離的酶或未標記上的抗原或抗體成分在測定過程中被洗掉

D.制備的結合物需要純化

E.標價物需要鑒定

『正確答案』C

『答案解析』每批制備的酶標志物都要進行質量和標記率的鑒定，質量鑒定包括酶活性和抗體（抗原）的免疫活性鑒定。常用免疫電泳或雙相擴散法，出現沉淀線表示酶標記物中的抗體（抗原）具有免疫活性。沉淀線經生理鹽水反復漂洗后，滴加酶的底物溶液，若在沉淀線上能顯色，則表示酶標記物中的酶活性仍保留。也可直接用ELISA方法測定。

關于酶聯免疫吸附試驗（ELISA）錯誤的是

A.屬于液相和固相酶免疫測定

B.固相常用聚苯乙烯反應板

C.通過洗滌除去未結合成分

D.底物顯色

E.既能定性又能定量分析

『正確答案』A

『答案解析』酶聯免疫吸附試驗（ELISA）屬于固相酶免疫測定。

酶免疫技術中最常用的固相載體是

A.聚氯乙烯

B.聚苯乙烯

C.硝酸纖維素膜

D.瓊脂糖

E.尼龍膜

『正確答案』B

『答案解析』酶免疫技術中最常用的固相載體是聚苯乙烯。

酶免疫技術中懸浮在溶液中具有液相反應速率的固相載體是

A.聚氯乙烯

B.聚苯乙烯

C.硝酸纖維素膜

D.磁性微粒

E.尼龍膜

『正確答案』D

『答案解析』酶免疫技術中懸浮在溶液中具有液相反應速率的固相載體是磁性微粒。

將抗原或抗體固相化的過程稱為

A.吸附

B.包被

C.封閉

D.標記

E.交聯

『正確答案』B

『答案解析』將抗原或抗體固相化的過程稱為包被。

ELISA技術中，最常用來檢測抗體的方法是

A.雙抗體夾心法

B.間接法

C.競爭法

D.捕獲法

E.應用生物素和親和素的ELISA

『正確答案』B

『答案解析』ELISA技術中，最常用來檢測抗體的方法是間接法。

下列有關雙位點一步法ELISA的敘述中，錯誤的是

A.使用針對同一抗原不同決定簇的兩種單克隆抗體作為酶標抗體

B.一種單克隆抗體作為固相抗體，另一種作為酶標抗體

C.采用高親和力的單克隆抗體將提高測定的敏感性和特異性

D.可使標本和酶標抗體同時加入

E.標本中抗原過高時，會出現鉤狀效應

『正確答案』A

『答案解析』雙位點一步法：在雙抗體夾心法基礎上，進一步發展了雙位點一步法。該法是針對抗原分子上兩個不同且空間距離較遠的決定簇的兩種單克隆抗體，即包被使用一種單抗，酶標記使用另一種單抗。測定時將含待測抗原標本和酶標抗體同時加入進行反應，兩種抗體互不干擾，經過一次溫育和洗滌后，即可加入底物進行顯色測定。但當待測抗原濃度過高時，過量的抗原可分別同固相抗體和酶標抗體結合而抑制夾心復合物的形成，出現鉤狀效應（hook

effect），顯色降低，嚴重時可出現假陰性結果。必要時可將標本經過適當稀釋后重復測定。這是應用此法必須要注意的問題。

ELISA技術中待測孔（管）顯色顏色的深淺與待測抗原或抗體呈負相關的是

A.雙抗體夾心法

B.雙位點一步法

C.間接法測抗體

D.競爭法

E.捕獲法

『正確答案』D

『答案解析』ELISA技術中待測孔（管）顯色顏色的深淺與待測抗原或抗體呈負相關的是競爭法。

雙位點一步法鉤狀效應產生是因為

A.標本中的抗原不純

B.洗滌不充分

C.孵育時間過長

D.酶標抗體過量

E.標本中的抗原濃度過高

『正確答案』E

『答案解析』雙位點一步法鉤狀效應產生是因為標本中的抗原濃度過高。

用一種標記物可檢測多種與抗原相應的抗體的ELISA方法是

A.雙抗體夾心法

B.間接法

C.競爭法

D.雙抗原夾心法

E.雙位點一步法

『正確答案』B

『答案解析』用一種標記物可檢測多種與抗原相應的抗體的ELISA方法是間接法。

關于ELISA競爭法的敘述中，正確的是

A.只用于檢測抗原

B.待測成分優先于酶標記物與固相結合C.被測物含量多則標記物被結合的機會少

D.待測管顯色顏色越淡表示被測物含量越少

E.只用于檢測抗體

『正確答案』C

『答案解析』關于ELISA競爭法的敘述中，正確的是被測物含量多則標記物被結合的機會少。

ELISA間接法中固相上包被的是

A.抗體

B.不完全抗體

C.抗原

D.抗抗體

E.酶標抗體

『正確答案』C

『答案解析』ELISA間接法中固相上包被的是抗原。

臨床上檢測IgM抗體常用的ELISA方法是

A.雙抗體夾心法

B.間接法

C.競爭法

D.雙抗原夾心法

E.捕獲法

『正確答案』E

『答案解析』捕獲法，又稱反向間接法。主要用于血清中某種抗體亞型成分（如IgM）的測定，目前最常用的是病原體急性感染診斷中的IgM型抗體。

酶免疫技術分為兩類酶免疫測定，它們是

A.均相和異相

B.固相和液相

C.酶免疫組化和酶免疫測定

D.均相和固相

E.異相和液相

『正確答案』C

『答案解析』酶免疫技術分為兩類酶免疫測定，它們是酶免疫組化和酶免疫測定。

ELISA一般不用于檢測

A.病原體及其抗體

B.Ig、補體、腫瘤標志物等蛋白質

C.非肽類激素

D.藥物

E.半抗原

『正確答案』E

『答案解析』ELISA一般不用于檢測半抗原。半抗原一般用均相酶免疫測定法。

第五篇：2015臨床醫學檢驗技師職稱資格考試真題-專業知識

2009臨床醫學檢驗技師職稱資格考試真題

一、以下每一道考題下面有A、B、C、D、E五個備選答案。請從中選擇一個最佳答案，并在答題卡上將相應題號的相應字母所屬的方框涂黑。

1．關于血液葡萄糖下列敘述中錯誤的是

A．毛細血管血葡萄糖濃度低于靜脈血葡萄糖濃度 B．血漿是測定葡萄糖的最好樣品

C．分析前血液放置一段時間會使結果偏低 D．如無特殊原因應空腹抽血測定血糖 E．維生素C可干擾GOD-POD法測定葡萄糖 答案：A

2．某病人胸痛6小時后入院，臨床檢驗ECG未見典型急性心梗改變，為進一步明確診斷應選擇 A．肌紅蛋白 B．CK、LDH C．LDH、α-HBDH D．CK-MB、cTnT E．CK、CK-MB-AST、α-HBDH、LDH 答案：D

3．已糖激酶法是測定血糖的 A．決定性方法 B．參考方法 C．常規方法 D．已經淘汰的方法

E．目前衛生部廣泛推薦的方法 答案：B

4．下列哪組酶常用于診斷肝臟疾病 A．CK GGT ALP ACP B．ALT AST GGT ALP C．AMY LD α-HBDH LPL D．ACP AST Lipase LD E．AST CK CK-MB LD 答案：B

5．急性肝炎時，人體內轉氨酶變化為 A．ALT升高，AST升高，AST/ALT>1.5 B．ALT升高，AST升高，AST/ALT<1.0 C．ALT正常，AST正常，AST/ALT=1.15 D．ALT降低，AST升高，AST/ALT>11.15 E．ALT升高，AST降低，AST/ALT<1.15 答案：B

6．下列哪種酶活性不受急性肝炎的影響 A．CK B．ALT C．AST D．LDH E．ALP 答案：A

7．下列關于ALP的敘述哪項不對 A．ALP是磷酸單酯的水解酶 B．其作用最近pH約為10 C．各年齡組具統一的參考范圍 D．在梗阻性黃疸時增高 E．在成骨細胞疾病時增多

答案：C

8．檢測尿中β2-微球蛋白是監測 A．腎小球蛋白 B．腎小管功能 C．惡性腫瘤 D．良性腫瘤 E．泌尿系統感染 答案：B

9．下列哪項疾病不會引起血尿酸增高 A．痛風 B．腎功能損害 C．白血病 D．惡性腫瘤 E．肝硬化 答案：E

10．關于B2微球蛋白敘述錯誤的是 A．存在于所有有核細胞表面

B．腎移植后如發生排斥反應，尿液B2微球蛋白可出現增高 C．炎癥及腫瘤時血漿中濃度可降低

D．尿液B2微球蛋白主要用于監測腎小管功能

E．急性白血病有神經浸潤時，腦脊液中B2微球蛋白可增高 答案：C

11．用于輔助診斷前列腺癌的酶是 A．酸性磷酸酶 B．胰淀粉酶 C．CK-MB D．膽堿酯酶 E．堿性磷酸酶 答案：A

12．用于輔助診斷有機磷中毒的酶是 A．淀粉酶 B．酸性磷酸酶 C．脂蛋白脂肪酶 D．膽堿脂酶 E．堿性磷酸酶 答案：D

13．在骨骼疾病的診斷酶學中下列哪項最有價值 A．LDH B．CK C．ALP D．ACP E．ALT 答案：C

14．可用于嗜鉻細胞瘤診斷的試驗是 A．FSH B．生長激素 C．T3、T4 D．VMA E．血皮質醇 答案：D

15．衛氏并殖吸蟲主要寄生在宿主的 A．脾

B．肝 C．骨髓 D．肺 E．肌肉 答案：D

16．藍氏賈 E．丙型鏈球菌 答案：A

23．在37℃培養無動力，25℃培養有動力的細菌是 A．普通變形桿菌 B．奇異變形桿菌 C．小腸結腸炎耶爾森菌 D．摩根摩根菌 E．大腸埃希菌 答案：C

24．下列哪種細菌為嗜鹽性細菌 A．霍亂弧菌 B．副溶血弧菌 C．大腸埃希菌 D．黏質沙雷菌 E．肺炎克雷伯菌 答案：B

25．不屬于霍亂弧菌檢查的是 A．動力觀查 B．制動試驗 C．慶大瓊脂培養 D．堿性胨水增菌培養 E．莢膜腫脹試驗 答案：E

26．關于結核分枝桿菌的生物學性狀，哪項是錯誤的 A．抗酸染色陽性，細長、稍彎曲桿菌 B．菌體上可含有一至數個異染顆粒 C．改良羅氏培養基上生長迅速 D．專性需氧 E．菌落多為R型 答案：C

27．與流感嗜血桿菌有關的是 A．革蘭陰性小桿菌

B．初次培養需要5%～10%的CO2環境 C．營養要求高 D．生長需要X、V因子 E．以上均是 答案：E

28．對于極微量（ng甚至pg水平）抗原的檢測，首先可考慮使用 A．反向間接血凝法 B．熒光抗體技術 C．放射免疫測定 D．ELISA法 E．膠乳凝集試驗 答案：C

29．下列試驗屬于凝集試驗的是 A．WB試驗 B．免疫電泳試驗 C．RIA試驗 D．ELISA試驗 E．肥達氏反應 答案：E

30．腫瘤壞死因子的簡稱是

A．IFN B．TNF C．IL D．CSF E．TSGF 答案：B

31．EA花環試驗是通過檢測何種受體而對B細胞進行計數的一種試驗 A．補體受體 B．IgG Fc受體 C．SRBC受體 D．小鼠RBC受體 E．IgG Fab段 答案：B

32．下列哪種方法用一種標記物檢測多種被測物 A．ELISA雙抗體夾心法，ELISA競爭法 B．ELISA間接法；間接法熒光免疫技術 C．ELISA競爭法；放射免疫測定

D．ELISA雙位點一步法：直接法熒光免疫技術 E．直接免疫熒光法；ELISA競爭法 答案：B

33．檢測總補體活性，采用50%溶血試驗是因為 A．50%溶血試驗比100%溶血試驗簡單

B．以50%溶血作為終點較100%溶血作為終點更敏感 C．以50%溶血作為終點較100%溶血作為終點可節約時間 D．以上都不對 E．A+C 答案：B

34．最大的沉淀反應發生在 A．前帶 B．等價帶 C．后帶 D．末帶 E．原帶 答案：B

35．下列有關抗原抗體反應特點的敘述中，錯誤的是 A．抗原抗體的反應具有特異性

B．抗原抗體只有在分子比例合適時才會出現最強的反應 C．反應曲線中，抗原抗體分子比例合適的范圍稱為等價帶 D．抗原抗體的反應具有不可逆性 E．C+D 答案：D

36．血清學試驗的后帶現象是指 A．抗體過量 B．抗原過量 C．凝集明顯 D．沉淀物顯著 E．抗原抗體數量相等 答案：B

37．參加細胞免疫最主要的細胞有 A．巨噬細胞 B．B細胞 C．T細胞

D．肥大細胞 E．漿細胞 答案：C

38．CD4+細胞是指 A．輔助性T細胞亞群 B．抑制性T細胞亞群 C．效應性T細胞亞群 D．細胞毒性T細胞亞群 E．記憶性T細胞亞群 答案：A

39．補體大多數為 A．α球蛋白 B．β球蛋白 C．γ球蛋白 D．ε球蛋白 E．M蛋白 答案：B

40．下列哪項不是自身免疫病基本特征

A．可檢出高滴度的自身抗體或與自身抗原引起反應的致敏淋巴細胞 B．大多數是自發性或特發性 C．女性多于男性，老年多于青年 D．病程一般較長，但多可徹底治愈 E．發病原因多不明確 答案：D

41．過氧化物酶染色（POX）在鑒別下列哪組白血病時有價值 A．急粒與急性單核細胞白血病 B．急淋與急粒白血病 C．AML-M3與AML-M2 D．AML-M4與AML-M3 E．AML-M3與AML-M5 答案：B

42．下列哪種疾病的異常白細胞含有豐富的類凝血活酶物質，并能消耗凝血因子 A．急性單核細胞白血病 B．急性淋巴細胞白血病 C．急性早幼粒細胞白血病 D．紅白血病

E．骨髓增生異常綜合征 答案：C

43．A型、B型血友病，分別缺乏以下哪組凝血因子 A．FⅢ、Ⅴ B．FⅣ、Ⅷ C．FⅧ、Ⅺ D．FⅧ、Ⅸ E．FⅪ、Ⅸ 答案：D

44．下列哪項檢查不符合原發性血小板減少性紫癜 A．出血時間延長

B．凝血時間（試管法）正常 C．APTT正常 D．PT延長 E．PAIgG增高 答案：D

45．哪一種疾病的血象，骨髓象中血小板，巨核細胞均減少 A．慢性特發性血小板減少性紫癜

B．自身免疫溶性血性貧血合并免疫性血小板減少性紫癜（Evan's）C．脾功能亢進 D．巨幼細胞性貧血 E．再生障礙性貧血 答案：E

46．血清鐵減少，總鐵結合力減低，運鐵蛋白飽和度減低見于 A．缺鐵性貧血 B．慢性感染性貧血 C．再生障礙性貧血 D．鐵粒幼細胞性貧血 E．溶血性貧血 答案：B

47．關于細胞比容測定的敘述，下列正確的是 A．溫氏法要求3000r離心30min B．以106mmol/L枸櫞酸鈉為抗凝劑

C．為縮短時間，溫氏法可用300rpm，離心15min D．毛細管微量法要求5000rpm，離心40min E．以草酸鉀做為首先抗凝劑 答案：A

48．下列哪種情況使血液黏度增高 A．紅細胞比積明顯降低 B．切變率降低 C．纖維蛋白原減少 D．溫度增高 E．紅細胞數減少 答案：B

49．Hayem液中氯化高汞的主要作用是 A．抗凝 B．調節滲透壓 C．防止細胞黏連 D．防腐 E．防止溶血 答案：D

50．凝血時間測定方法已經淘汰的是 A．玻片法． B．試管法 C．硅管法

D．活化凝血時間去

E．活化部分凝血活酶時間法 答案：A

51．下列哪項不是血液分析儀檢測紅細胞的參數 A．HGB B．RDW C．MPV D．Hct E．MCH 答案：C

52．影響血沉測定質量的因素不包括 A．抗凝劑

B．溫度 C．器材 D．標本處理

E．患者是否為空腹采血 答案：E

53．測定血紅蛋白的參考方法為 A．沙利氏法 B．HiCN法 C．血液分析儀法 D．全血鐵測定法

E．十二烷基硫酸鈉測定法 答案：B

54．紅細胞管型主要見于 A．腎盂腎炎 B．腎淀粉樣變 C．慢性腎小球腎炎 D．急性腎小球腎類 E．類脂質腎病 答案：D

55．尿液中見到何種細胞，最有助于診斷腎小管病變 A．白細胞 B．紅細胞 C．鱗狀上皮細胞 D．腎小管上皮細胞 E．尾形上皮細胞 答案：D

56．精液排出后多長時間不變化，可不作顯微鏡檢查 A．1h B．4h C．8h D．12h E．24h 答案：E

57．漏出液以什么細胞為主 A．淋巴細胞 B．單核細胞 C．嗜中性粒細胞 D．嗜酸性粒細胞 E．嗜堿性粒細胞 答案：A

58．積液LD與血清LD的比值大于多少時，符合滲出液的特點 A．0.1 B．0.2 C．0.3 D．0.4 E．0.5 答案：E

59．溶血性黃疸時，尿膽原呈 A．陰性 B．尿1∶5陰性 C．尿1∶10陰性 D．弱陽性

E．強陽性 答案：E

60．干化學法尿糖檢測的是 A．果糖 B．半乳糖 C．葡萄糖 D．麥芽糖 E．蔗糖 答案：C

61．干化學化尿液蛋白檢測的是 A．血紅蛋白 B．肌紅蛋白 C．黏蛋白 D．本周蛋白 E．白蛋白 答案：E

62．糞便呈黑色，質軟，富有光澤，見于 A．服用活性炭 B．服用鐵劑 C．下消化道出血 D．上消化道出血 E．進食大量蔬菜 答案：D

63．糞便顯微鏡檢查，以下錯誤的是 A．低倍鏡檢查蟲卵，原蟲等 B．高倍鏡觀查細胞等

C．正常糞便中可見較多白細胞 D．正常糞便中無紅細胞

E．正常糞便中可見未消化食物殘渣 答案：C

64．Pandy試驗與硫酸銨試驗比較，前者 A．需CSF標本量少 B．操作復雜 C．敏感性差 D．正常人肯定陰性

E．能分別測試球蛋白和白蛋白 答案：A

65． A．LD2>LD1>LD3>LD4>LD5 B．LD5>LD1>LD2>LD3>LD4 C．LD3>LD1>LD2>LD4>LD5 D．LD1>LD2>LD3>LD4>LD5 E．LD4>LD1>LD2>LD3>LD5 答案：D

68．正常成年人血清LDH同工酶電泳結果 A．LD2>LD1>LD3>LD4>LD5 B．LD5>LD1>LD2>LD3>LD4 C．LD3>LD1>LD2>LD4>LD5 D．LD1>LD2>LD3>LD4>LD5 E．LD4>LD1>LD2>LD3>LD5 答案：A

69．某病人臨床癥狀淺表性呼吸，紫紺，動脈敵國氣分析指標為pH=7.28 AB=30mmol/L SB=20mmol/L PCO26.1kPa A．代償型呼吸性酸中毒 B．代償型代謝性酸中毒 C．代償型代謝性酸中毒 D．失代償型代謝性酸中毒 E．失代償型呼吸性堿中毒 答案：B

70．肝硬變病人蛋白電泳出現我B-r橋，多是由何種免疫球蛋白增加所致 A．IgA B．IgM C．IgG D．IgE E．IgD 答案：A

71．某一膿汁標本，涂片革蘭染色鏡檢：革蘭陽性球菌，直徑1μm左右，呈單個，成對或短鏈排列；血瓊脂平板分離培養：菌落表面光滑濕潤，圓形，邊緣整齊，黃色凸起，直徑1～1.5mm，菌落周圍有完全透明的溶血環；菌落涂片革蘭染色鏡檢：革蘭陽性球菌，呈單、雙，短鏈和葡萄串狀排列，以葡萄串狀排列為主；生化試驗：觸酶陽性，血漿凝固酶（試管法）陽性，發酵葡萄糖產酸，發酵甘露醇產酸，對新生霉素敏感。應報告 A．表皮葡萄球菌生長 B．金黃色葡萄球菌生長 C．腐生葡萄球菌生長 D．中間葡萄球菌生長 E．家畜葡萄球菌生長 答案：B

72．患者貧血，黃疸和Coombs試驗直接反應陽性，可考慮 A．珠蛋白生成障礙性貧血 B．PNH

C．遺傳性球形細胞增多癥 D．G6PD缺乏癥

E．自身免疫性溶血性貧血 答案：E

73．患者，男性，45歲，1月來逐漸感到乏力，面色蒼白，一周前無特殊原因突然寒戰，高熱，全身皮下有口腔黏膜出血，頭痛，乏力，心悸進行性加重，血紅蛋白下降至60g/L，RBC2.10×1012/L0.8×109/L，分類：中性粒細胞25%，淋巴細胞74%，單核細胞1%，PLT15×109/L，網織紅細胞0.3%.骨髓增生減低，粒系，紅系及巨核系均明顯減少，成熟淋巴細胞占68%，組織嗜堿細胞易見，本病最可能診斷為 A．粒細胞缺乏癥

B．再生障礙性貧血（急性型）C．急性感染 D．急性型ITP

E．MDS 答案：B

74．貧血患者，血涂片中紅細胞大小不等，中心淡染壓擴大，血清轉鐵蛋白飽和度14%，最可能的診斷是 A．自身免疫性溶血性貧血 B．缺鐵性貧血 C．再生障礙性貧血 D．巨幼細胞性貧血 E．鐵粒幼細胞性貧血 答案：B

75．患者女性，30歲，妊娠32周，平時有偏食習慣。近因頭昏，乏力就診，化驗：RBC1.6×1012/L，Hb62g/L，MCV130fl，中性粒細胞有分葉過多現象，下列何項對確診本病最有意義 A．網織紅細胞輕度增高 B．MCHC，MCH增高 C．骨髓增生明顯活躍 D．胃酸分泌量減少 E．骨髓幼紅細胞巨幼變 答案：E

76．巨幼細胞性貧血時，下列正確的是 A．RBC↓。Hb↓ B．RBC↓↓。Hb↓ C．RBC↓。Hb↓↓ D．RBC↓↓。Hb↓↓ E．RBC↓。Hb正常 答案：B

77．關于白細胞總數與中性粒細胞變化的敘述，以下錯誤的是 A．中性粒細胞的增減影響白細胞總數

B．白細胞總數增高程度與感染的嚴重程度有關 C．白細胞總數增高程度與機體反應性有關 D．白細胞總數增高程度與感染微生物的種類有關 E．白細胞總數增高與感染灶的范圍無關 答案：E

78．瑞氏染色血涂片中不可能見到 A．異常淋巴細胞 B．幼稚細胞 C．嗜堿性點彩 D．網織紅細胞 E．中毒顆粒 答案：D

79．患者男性50歲，近1年頭昏，乏力，活動后心慌，氣急就診。血液一般檢查：紅細胞數1.2×1012/L，血紅蛋白5.5g/L，白細胞數3.2×1012/L，血小板65×109/L，網織紅細胞12%，MCV128fl，MCH34pg，MCHC340g/L.可初步診斷為 A．缺鐵性貧血 B．再生障礙性貧血 C．慢性失血性貧血 D．巨幼細胞性貧血 E．溶血性貧血 答案：D

80．下列不屬于中性粒細胞毒性變化的是 A．中毒顆粒 B．空泡 C．染色質小體 D．大小不均 E．退行性變

答案：C

二、以下提供若干組考題，每組考題共同使用在考題前列出的A、B、C、D、E五個備選答案。請從中選擇一個與問題關系密切的答案，并在答題卡上將相應題號的相應字母所屬的方框涂黑。每個備選答案可能被選擇一次，多次或不被選擇（81～84題共用備選答案）A．骨髓中原始細胞>30% B．中性粒細胞減少 C．中性粒細胞增多 D．異型淋巴細胞增多 E．骨髓中出現R-S細胞 81．傷寒 答案：B 82．急性白血病 答案：A

83．傳染性單核細胞增多癥 答案：D 84．霍奇金病 答案：E

（85～88題共用備選答案）

A．周圍血中幼稚細胞，原始細胞>30%

B．周圍血有較多幼稚粒細胞伴嗜酸，嗜堿性粒細胞增多 C．周圍血中幼紅，幼粒細胞易見，骨髓出現“干抽” D．周圍血和骨髓中淋巴細胞>60%

E．周圍血中易見盔形紅細胞及破碎紅細胞 85．慢性粒細胞白血病 答案：B 86．DIC 答案：E

87．慢性淋巴細胞白血病 答案：D 88．骨髓纖維化 答案：D

三、以下每一道考題下面有A、B、C、D、E五個備選答案。請從中選擇備選答案中所有正確答案，并在答題卡上將相應題號的相應字母所屬的方框涂黑

89．在進行OGTT時，下列結果哪些有助糖尿病的診斷 A．餐后3小時等于7mmol/L B．餐后1小時大于8mmol/L C．餐后2小時大于11.1mmol/L D．餐后30分鐘大于8mmol/L E．空腹血糖大于7mmol/L 答案：CE

90．下列屬于急性時相反應蛋白的有 A．β2微球蛋白 B．C反應蛋白 C．α1抗胰蛋白酶 D．α1酸性糖蛋白 E．甲胎蛋白 答案：BCD

91．TDM的臨床應用目的有 A．獲得個體藥物動力學參數 B．制定用藥方案 C．指導調整用藥劑量

D．確定是否存在藥物過量中毒

E．節約用藥量 答案：ABCD

92．酶法測定血清膽固醇中用到的酶有 A．甘油激酶 B．膽固醇酯酶 C．膽固醇氧化酶 D．甘油氧化酶 E．過氧化物酶 答案：BCE

93．苯丙氨酸脫氨酶試驗陽性的細菌有 A．奇異變形桿菌 B．產堿普羅威登斯菌 C．摩根摩根菌 D．陰溝腸桿菌 E．粘質沙雷菌 答案：ABC

94．下列有關單克隆抗體特點的敘述中，哪些是正確的 A．特異性強 B．靈敏度高

C．高度的均一性和可重復性 D．對pH，溫度及鹽類濃度耐受性強 E．是針對多種抗原的抗體 答案：ABC

95．關于酶免疫技術，下列說法正確的是

A．酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法 B．酶免疫技術可分為酶免疫組化技術和酶免疫測定兩大類 C．酶免疫技術是標記免疫技術中的一種 D．熒光抗體技術為酶免疫技術的一種 E．酶免疫技術只能檢測抗體 答案：ABC

96．急性白血病MIC分型包括 A．形態學分型 B．生物化學分型 C．免疫學分型 D．細胞生物學分型 E．細胞遺傳性學分型 答案：ACE

97．APTT延長可見于下列哪些疾病 A．嚴重纖維蛋白減少癥 B．血管性血友病 C．甲，乙型血友病 D．阻塞性黃疸 E．嚴重肝損害 答案：ABCDE

98．能檢出早早孕的妊娠診斷試驗有 A．酶免疫法 B．放射免疫法 C．膠乳凝集抑制試驗 D．膠乳凝集抑制稀釋試驗 E．膠乳凝集抑制濃縮試驗 答案：AB