第一篇：醫學檢驗職稱考試5

醫學檢驗職稱考試41-50

41、光散射法血液分析儀檢測原理

光散射法常與電阻抗法共同應用于血液分析儀檢測原理中。1.光散射法白細胞計數和分類計數原理（1）激光與細胞化學法

（2）容量、電導、光散射（VCS）法（3）電阻抗與射頻法

（4）多角度偏振光散射（MAPSS）法 2.光散射法紅細胞檢測原理

以低角度前向光散射和高角度光散射同時測量1個紅細胞。低角度（2°～3°）光散射能測量單個紅細胞體積，高角度（5°～15°）光散射能測量單個紅細胞血紅蛋白濃度，得出MCV、MCH、MCHC值，并顯示紅細胞散射圖、單個紅細胞體積和血紅蛋白含量直方圖。3.光散射法血小板檢測原理

單個球形化血小板通過激光束照射后，高角度（5°～15°）光散射能測量細胞折射指數（RI），低角度（2°～3°）光散射能測量細胞大小。在二維散射圖上得出血小板數量和相關參數。4.網織紅細胞計數原理

（1）利用新亞甲藍使網織紅細胞RNA著色，加入使紅細胞內Hb溢出的試劑，使其成為“影細胞”，然后采用VCS原理，醫|學教育網搜集整理得出網織紅細胞數和相關參數。（2）利用堿性槐黃O等熒光染料與網織紅細胞內的RNA結合，以波長488nm氬氖激光束為激光源照射網織紅細胞，得到前向散射光強度（細胞體積大小）和熒光強度（胞質內RNA多少），形成二維顯示散點圖，得出網織紅細胞數和相關參數。

顯示網織紅細胞（不同熒光強度）（左）顯示紅細胞、網織紅細胞和血小板（右）

42、臨床醫學考試條件

臨床醫學檢驗資格考試中中級主管技師的報考條件是什么？

1、取得臨床醫學檢驗專業中專學歷，受聘擔任臨床醫學檢驗技師職務滿7年；

2、取得臨床醫學檢驗專業專科學歷，受聘擔任臨床醫學檢驗技師職務滿6年；

3、取得臨床醫學檢驗專業本科學歷，受聘擔任臨床醫學檢驗技師職務滿4年；

4、取得臨床醫學檢驗專業碩士學位，受聘擔任臨床醫學檢驗技師職務滿2年；

5、取得臨床醫學檢驗專業博士學位。

43、醫學檢驗職稱考試的情況

請問，如果在從事臨床醫學檢驗工作時出現事故而受到處分，是否沒有機會再次參加臨床醫學檢驗資格考試？ 回復：

有下列情形之一的不得申請參加臨床醫學檢驗專業技術資格的考試：（1）醫療事故責任者未滿3年。（2）醫療差錯責任者未滿1年。（3）受到行政處分者在處分時期內。

（4）偽造學歷或考試期間有違紀行為未滿2年。（5）省級衛生行政部門規定的其他情形。

44、志賀菌屬生物學特性 生物學特性

1、形態與染色：革蘭陰性短小桿菌，無莢膜，無芽胞，無鞭毛，有菌毛。

2、培養特性：需氧或兼性厭氧，液體培養基中呈混濁生長，營養要求不高，能在普通瓊脂平板和SS培養基上形成中等大小、半透明的光滑型菌落，宋內志賀菌可形成扁平、粗糙的菌落。

3、生化反應：志賀菌屬的細菌分解葡萄糖產酸不產氣，不分解乳酸（宋內志賀菌可遲緩分解乳酸），吲哚試驗陰性，H2S陰性，MR試驗陽性，VP試驗陰性，不產生賴氨酸脫羧酶，不能利用檸檬酸鹽，氧化酶試驗陰性。動力檢驗陰性。

4、抗原結構：志賀菌屬只有O抗原為無鞭毛抗原，個別菌型及新分離菌株有K抗原。O抗原分群特異性抗原和型特異性抗原兩類。根據抗原結構可將志賀菌分為四群，40余種血清型（包括亞型）。

K抗原存在時能阻斷O抗原與相應抗血清的凝集作用。加熱100℃、60min可消除K抗原對O抗原的阻斷作用。在一定條件下可產生S-R變異及耐藥性變異。

45、HLA檢測

人類白細胞上有3類抗原：紅細胞血型抗原、白細胞特有抗原、與其他組織共有但也是最強的人類白細胞抗原（HLA）。HLA抗原與抗體 HLA分型方法 HLA檢測的臨床意義

46、水代謝平衡的調節

水代謝平衡的調節：口渴思飲，抗利尿激素，心房肽、腎素-醛固酮。

水的調節中樞在下丘腦，通過神經體液調節。

（1）口渴思飲

產生口渴的原因：血漿晶體滲透壓升高、血管緊張素Ⅱ增多、生活習慣等。

（2）抗利尿激素：

抗利尿激素的作用是作用于遠端腎小管的，促進水的重吸收，減少尿量。

血漿晶體滲透壓升高、血容量下降、劇烈運動和疼痛等可使抗利尿激素分泌增多。

（3）心房肽、腎素-醛固酮系統亦有調節水的功能。

47、病理性蛋白尿的分類

（1）腎前性蛋白尿：見于①漿細胞病：如多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、漿細胞白血病等。②血管內溶血性疾病：如陣發性睡眠性血紅蛋白尿等。③大面積肌肉損傷：如擠壓傷綜合征、電灼傷、多發性肌炎，進行性肌肉萎縮等。④酶類增高：如急性單核細胞白血病尿溶菌酶增高，胰腺炎嚴重時尿淀粉酶增高等。

（2）腎性蛋白尿 1）腎小球性蛋白尿：①腎病綜合征：蛋白尿以清蛋白為主，少量小相對分子質量蛋白，定性試驗多數為+++～++++，定量試驗常為3.5～10g/d，最多可達20g/d.②原發性腎小球腎炎：如急性腎炎、慢性腎炎、膜性腎炎、膜增生性腎炎、腎功能衰竭等。③繼發性腎小球疾病：糖尿病腎病：早期尿中即出現微量清蛋白，臨床腎病期尿蛋白常》0.5g/d.狼瘡性腎炎：輕型損害時，尿蛋白多在+～++之間，定量為0.5～2g/d.妊娠中毒癥：正常妊娠時，尿蛋白可輕度增高；但妊娠中毒癥者，尿蛋白多為+～++，嚴重時可達+++～++++，定量可》5g/d.2）腎小管性蛋白尿：①腎小管間質病變：如間質性腎炎、腎盂腎炎、Fanconi綜合征、腎小管性酸中毒等。②重金屬中毒：如汞、鎘、鉍、砷、鈾等，重金屬類引起中毒性腎間質疾病。③藥物中毒：某些抗生素如慶大霉素、卡那霉素、多粘菌素等；中草藥類如馬兜鈴、木通等；有機溶劑如苯中毒等。④器官移植：如腎移植排斥反應等。

（3）腎后性蛋白尿：①泌尿、生殖系炎癥反應：如膀胱炎、尿道炎、前列腺炎、精囊炎等。②泌尿系結石、結核、腫瘤等。③泌尿系鄰近器官疾病：如急性闌尾炎、慢性盆腔炎、宮頸炎、盆腔腫瘤等，泌尿系鄰近器官炎癥或腫瘤刺激。

48、肺曲霉病

肺曲霉病主要由煙曲霉感染引起，少數為黑曲霉、土曲霉、黃曲霉和構巢曲霉等。大多數是在原有肺部疾患的基礎上或因長期使用抗生素和激素后繼發感染。

臨床上分四型：（1）肺曲霉球。（2）變態反應性曲霉病。（3）支氣管－肺炎型曲霉病。（4）繼發性肺曲霉病。主要表現為咳嗽、咳痰和反復咯血。多次深部取痰涂片或培養陽性時，結合臨床可確診。治療上應注意治療原發病和增強機體免疫力。并根據不同類型及病情選擇不同的治療方案。一般預后較佳。

癥狀表現：1.肺曲霉球：一般無明顯全身癥狀，但可有刺激性咳嗽和反復大咯血。2.變態反應性曲霉病：畏寒、發熱、乏力、刺激性咳嗽，伴明顯哮喘。咯棕黃色膿痰，有時帶血。病變部位可聞干、濕羅音。3.支氣管－肺炎型曲霉病：咳嗽、咳痰、低熱、乏力、食欲減退等。醫學教，育網|搜集整理病變侵襲肺實質則呈肺炎改變，并壞死化膿，形成肺膿腫。可有肺部實變體征及濕性羅音。4.繼發性肺曲霉病：有原發疾病的表現，并有發熱、咳嗽、咳痰、咯血、胸痛、呼吸困難等。雙肺可有干、濕性羅音。

診斷依據：1.肺曲霉球多繼發于肺結核空洞、肺癌空洞或支氣管擴張的囊腔內。變態反應性曲菌病多發生在對曲霉過敏者，吸入大量曲霉孢子后，曲霉菌絲引起支氣管粘膜炎癥及肺炎。繼發性肺曲霉病多見于重病患者及機體免疫力低下者。2.咳嗽、咳痰、反復咯血。3.肺部可聞干、濕性羅音。4.痰涂片或培養和組織學檢查發現曲霉菌絲或孢子。5.血嗜酸細胞增多。6.曲酶抗原皮膚試驗及血清沉淀試驗陽性。7.胸部X線檢查可呈斑點狀、結節狀或云絮狀陰影。曲霉球典型的征象為密度均勻似球狀，其上方有薄壁半月形透亮區，曲霉球可隨體位變動而變動，呈“鐘形陰影”。好發部位為肺上葉。

治療原則：1.積極治療原發病。2.對癥治療：止咳、祛痰、平喘，繼發細菌感染時用抗生素。3.抗真菌藥物應用。4.曲霉球所致反復咯血者可手術切除病源。

49、尿脫落細胞的分級標準

尿脫落細胞學分級標準：Ⅰ級，Ⅱ級，Ⅲ級，Ⅳ級，Ⅴ級。

尿脫落細胞學分級標準（巴氏分級國際標準）

Ⅰ級：未發現異型細胞。

Ⅱ級：細胞有異型性，但無惡性證據。

Ⅲ級：具有可疑的惡性細胞，但不能確定。

Ⅳ級：具有較明顯的惡性細胞。Ⅴ級：具有肯定的惡性細胞。

注：在實際應用中為了減少疏漏，在Ⅱ級與Ⅲ級間增加一檔Ⅱ～Ⅲ級，標準是涂片內有非典型細胞或異常細胞，且出現頻率在10%以上。

按巴氏分級標準

Ⅰ級：細胞少，無不典型。

Ⅰ～Ⅱ級：有細胞，屬非腫瘤的良性病理情況。

Ⅱ級：細胞不典型，但結構良好。

Ⅲ級：有可疑惡性細胞（細胞很不典型，但不能確診為癌）。

Ⅳ級：高度懷疑癌或癌特征。

Ⅴ級：癌。

巴氏結果判斷

Ⅰ級：未見異常細胞。

Ⅱ級：發現異常細胞，但均為良性。

Ⅲ級：發現可疑惡性細胞。（1）性質不明細胞。（2）細胞形態明顯異常，難于肯定其良、惡性，需要近期復查核實。（3）未分化或退化的可疑惡性細胞與惡性裸核。

Ⅳ級：發現待證實的癌細胞（高度可疑的惡性細胞），具有惡性特征但不夠典型；或更典型但數目太少，需要復核，例如高度可疑的未分化或退化癌細胞，或少數低分化癌細胞。

Ⅴ級：發現癌細胞，其惡性特征明顯或數目較多，可作互相比較以確定為惡性者，例如高分化的鱗癌或腺癌細胞；成群未分化或低分化癌細胞。

化驗單：巴氏分級法及TBS分類

巴氏I級：完全正常。

巴氏II級：多見于絕經后或育齡伴有宮頸炎癥者，指個別細胞核異質明顯，但不支持惡性。

巴氏III級：可疑癌，需馬上做進一步確診，大約有10%的幾率向癌癥發展。

巴氏IV級：重度可疑癌，全面檢查。

巴氏V級：確定癌。

50、紅細胞滲透脆性的測定

紅細胞滲透脆性的測定用于測定紅細胞膜有無異常，通過紅細胞對系列低滲生理鹽水的抵抗能力即紅細胞脆性來反映。紅細胞滲透脆性試驗（Erythrocyteosmoticfragilitytest）靜脈血1毫升，立即測定。

本試驗是用于測定紅細胞膜有無異常，通過紅細胞對系列低滲生理鹽水的抵抗能力即紅細胞脆性來反映。抵抗力的大小與紅細胞表面積與體積的比值（S/V）有關，比值小對低滲鹽水的適應性小，易發生溶血，即脆性增大；反之，不易溶血，脆性減低。【正常參考值】

開始溶血3.8～4.6g/L氯化鈉溶液；完全溶血2.8～3.4g/L氯化鈉溶液。【異常結果分析】

增高：遺傳性球形紅細胞增多癥、自身免疫性溶血性貧血。減低：地中海貧血、血紅蛋白病、缺鐵性貧血、肝臟疾病等。

第二篇：預防醫學衛生檢驗(理化檢驗)職稱考試專業知識

專業知識

1、氣態和蒸汽態污染物是指：常溫常壓下以氣體形式分散在大氣中的污染物和以蒸汽態揮

發到大氣中的污染物。

2、氣溶膠是指： 任何固態或液態物質以微小的顆粒形式分散在氣流或大氣中。

3、空氣中多環芳烴通常的存在狀態有：蒸汽和顆粒。

4、顆粒物大小通常用粒徑表示，大氣中顆粒物的粒徑通常采用的表達方式是： 空氣動力

學當量直徑。

5、取相同狀態下的0.10ml一氧化碳和0.1ml二氧化碳凈化氣，用清潔空氣稀釋至10L并合并，計算兩種氣體的濃度分別為12.5mg/m3和19.6mg/m3，兩種氣體的濃度不同的原因是：兩種氣體分子量不同。

6、下列各項，不屬于室內污染源的是：（d）a 室內裝飾材料；b廚房油煙；c室內吸煙；

d汽車尾氣；e家用化學品

7、用硅膠管采樣時，濕度可影響最大采樣體積。濕度增大，可引起采樣體積減小。

8、現場空白管超過容許界限時，對此次采樣檢測結果應采取措施是：此次采樣檢測結果

為可疑數據，應該重新采樣檢測。

9、下列因素中，對固體吸附劑管的最大采樣體積無影響的是：（d）a固體吸附劑的性質

b采樣流速c氣溫d氣體的密度f空氣中待測物的濃度。

10、在空氣污染物檢測中，懸浮顆粒物中能用鼻和嘴吸入的那部分顆粒物稱為： 可吸

入顆粒物。（粒徑越小進入呼吸道越深）

11、用氣相色譜法分析樣品的定性依據是：保留時間。

12、采樣效率太低的方法和儀器不能采用，空氣樣品的采樣效率最好不低于90%

13、用氣相色譜分析混合物，各組分的保留時間差異取決與各組分在兩相間的分配系

數。

14、總懸浮顆粒物采樣器按采樣流量大小可分為大流量、中流量，小流量，中流離時指

流量在100L/mim。

15、如果樣品需要中間人送交實驗室，樣品的處理方法為：樣品包裝應該安全可靠，同時要加封，確保運送過程不會損壞，實驗室收到后要回執。

16、動態配氣中對稀釋氣氣源的要求是：清潔 干燥。

17、在測定樣品時，做空白試驗的目的是：消除由試劑、蒸餾水及器皿引入的雜質所

造成的系統誤差。

18、檢測食品中的鈣的EDTA法的檢測范圍時：5~50ug。

19、氫火焰離子化檢測器通常使用的氮氣-氫氣-空氣的流量比是：30：30：300.20、固定其他條件，色譜柱的理論塔板高度將隨載氣的流速增加而：先減小后增大。

21、描述色譜柱效能和總分離效能的指標分別是：理論塔板數或理論塔板高度和分離

度。

22、二硫棕法測空氣中的鉛，分單色法和混色法，單色法中，過量二硫棕的洗脫液為：

KCN-NH3。

23、《化妝品衛生規范》中規定的疏基乙酸的測定方法是：氧化還原滴定法

24、水質分析的一般檢測項目中的物理指標汞四項，是：色度、渾濁度、臭和味、溫度。

25、水質檢測項目中的化學指標有20項，不是化學指標的是： 渾濁度（化學指標有：

化學耗氧量、陰離子洗滌劑、氯化物、鉻（六價））

26、水質分析的一般檢測項目中，有一些要盡快分析，有些4h內測定，下列那些中，超過4小時仍可測定：Hg（亞硝酸鹽氮易氧化，鉻（六價）易還原，氯仿，四氯化碳易揮發，水吸收酸堿氣體而改變PH）

27、火焰原子吸收法測定鈣、鎂、鍶時，通常加入某種釋放劑以消除在火焰中不易離解的磷酸鹽等化合物的化學干擾，通常加入的釋放劑是：鑭鹽。

28、水質分析時，所測定的色度應該以除去懸浮物質的色度為標準，稱之為真色。

29、我國飲用水水質衛生標準規定，飲用水中的硬度（CaCO3計）不得超過： 450mg/L。

30、用二苯碳酰二肼分光光度法測定水中六價鉻，應注意 ： 六價鉻有氧化鋅，久放會

被還原。水樣不加酸保存，當天測定。

31、影響水質PH測定的因素是：溫度（玻璃電極的選擇性非常高，一般不受其他物

質干擾，但溫度會影響其相應值，所以PH測定會設定溫度補償。）

32、測定天然水的色度通常用鉑鈷比色法，色度單位的規定為：1mg/L鉑具有的顏色

稱為1度。

33、渾濁度的結果可在測定時直接比較讀取，然后乘以稀釋倍數，不同渾濁度范圍的讀

數精度不同，讀數精度不符合要求的是：（a）a渾濁度范圍2~10NTU，讀數精度為2NTU；b渾濁度范圍10~100NTU，讀數精度為5NTU；c渾濁度范圍100~400NTU，讀數精度為10NTU；d渾濁度范圍400~700NTU，讀數精度為50NTU；e渾濁度范圍700NTU以上，讀數精度為100NTU.34、用亞甲藍法測定水中陰離子合成洗滌劑時，消除余氯干擾作用的方法時： 1mg余

氯加1ml1%亞硫酸氫鈉溶液。

35、用重鉻酸鉀法測定COD的水樣，加硫酸酸化至PH<2后，置4℃保存，保存的天

數不應超過：5天

36、采集的國體廢棄物樣品經四分法縮分至200~500g，研磨至全量通過100目篩，然

后于105℃烘烤2~6h，作為供分析用的干燥樣品，下列各項中，不適合測定的指標是：總汞（鉛，鉻，砷，鎘均可，單質汞105℃烘烤2~6h條件下揮發，影響檢測準確度。）

37、拍之汞標準溶液，為防治汞濃度的改變，按《化妝品衛生規范》，操作是：配置

時，膠乳硝酸-重鉻酸鉀使最終濃度分別為5%和0.05%。

38、《化妝品衛生規范》規定除用于染發產品外，鉛為禁用原料，作為原料的雜質，化

妝品成品中的鉛的限量為：40ug/g39、《化妝品衛生規范》中規定的甲醇的測定方法是：氣相色譜法。

40、采用離子選擇電極測定糖精鈉時，所稱量的信號時點位（一般離子選擇電極都是

檢測對特定離子響應點位）

41、食品檢驗中，用鎘柱還原法或鎘粉還原法所測定的物質是：硝酸鹽總量加亞硝酸

鹽（硝酸鹽被還原成亞硝酸鹽然后白測定）

42、在下列方法中，用于檢測聚氯乙烯成形品中氯乙烯的方法是：氣相色譜法。

43、下列方法中，可同時測定食品中糖精鈉、乙酰磺胺酸鉀、咖啡因和阿斯巴甜的方法

是：高效液相色譜法

44、一般蛋白質hand氮量平均約為：16%

45、用蒸餾法測定食品中亞硫酸鹽，應采用的方法是：碘量法、46、國標規定，測定食品中總砷的方法————硼氫化物還原比色法，為了將五價砷還

原為三價砷，需使用：碘化鉀與硫脲

47、當量濃度廢除，所以2NHCl為：CHCl=2mol/L48、可用滴定法測定鈣，滴定的標準溶液為EDTA-2Na溶液，EDTA-2Na的化學名為：乙

二胺四乙酸二鈉鹽。

49、食用植物油中過氧化值的測定，國標規定用硫代硫酸鈉滴定法，以淀粉作指示劑，終點顏色為：藍色消失（碘消耗完畢，藍色消失）

50、室內空氣質量標準中，涉及的物理指標不包括：氣壓（氣壓大小認為因素難控制，而室內的溫度，相對濕度，風速，新風量則易受人為因素影響）

51、鮮奶的新鮮度時一個重要的質量指標，通常采用的評價指標是：酸度（°T）

52、食品包裝紙不允許含熒光性物質，檢測方法在兩種不同的波長的紫外線下檢查5

張100cm2的紙樣，任何一張紙樣中最大熒光面積不得大于：5cm253、用氫氧化鉀標準溶液滴定時，每克植物油消耗的氫氧化鉀毫克數稱為 ： 酸價

54、石墨爐原子吸收光譜法中，通常用作載氣 的氣體時：氬氣。

55、糖精鈉易溶解在：水

56、測定食品中著色劑時，在酸性條件下，用以吸附待測物中水溶性色素的物質是： 聚

酰胺（先用聚酰胺吸附柱提取水溶性色素，然后制備成水溶液，進行色譜分析）

57、苯甲酸和苯甲酸鈉的溶解度是：不同

58、測定食品中水分需稱量恒重，“恒重”指同一份樣品兩次稱量只差不超過：0.2mg59、凱氏定氮法測定蛋白質含量的樣品處理時，在硫酸銅和硫酸鉀存在下，與樣品物質

儀器加熱的是：濃硫酸（濃硝酸，濃鹽酸，濃高氯酸，王水均不對）

60、測定食品中脂肪時，如果直接用有機溶劑提取，那么所測結果的成分為：游離脂

肪酸（能被有機溶劑直接提取的脂肪稱游離脂肪）

第三篇：臨床醫學檢驗職稱考試

臨床醫學檢驗職稱考試級別 臨床醫學檢驗職稱考試共分為五個級別，1臨床醫學檢驗技士（初級職稱）

2臨床醫學檢驗技師（初級職稱）

取得臨床醫學檢驗專業本科學歷或碩士學位，從事本專業技術工作滿1年即可參加臨床醫學檢驗技師資格考試。

檢驗技士/技師考試成績合格標準

據往年的分析醫學檢驗技士/技師考試成績各科目均以100為滿分計算，每科目成績達到60分為合格，考試成績有效期為2年。所有4個科目在2年內全部合格者可申請該級專業技術資格。

3臨床醫學檢驗主管技師（中級職稱）

取得臨床醫學檢驗專業本科學歷，受聘擔任臨床醫學檢驗技師職務滿4年才能報考主管檢驗技師

檢驗主管技師考試的通過標準

檢驗主管技師考試成績在初、中級各專業各科目中以100為滿分計算，每科目成績達到60分為合格，醫學教育`網搜集整理考試成績有效期為2年。所有4個科目在2年內全部合格者可申請該級專業技術資格。4臨床醫學檢驗副主任技師（高級職稱）

5臨床醫學檢驗主任技師（高級職稱）。

難度是國家統一出題，應該級別越高考試的難度越大。

醫學檢驗專業技術資格考試科目

臨床醫學檢驗技士/技師/主管技師資格考試科目分為：“基礎知識”、“相關專業知識”、“專業知識”、“專業實踐能力”等4個科目。

臨床醫學檢驗技士考試內容：臨床檢驗基礎、臨床血液學檢驗、臨床化學、臨床免疫學和免疫檢驗、微生物學檢驗、寄生蟲學及檢驗、醫療機構從業人員行為規范與醫學倫理學醫`學教育網搜集整理。

臨床醫學檢驗技師考試內容：臨床檢驗基礎、臨床血液學檢驗、臨床化學、臨床免疫學和免疫檢驗、微生物學檢驗、寄生蟲學及檢驗、醫療機構從業人員行為規范與醫學倫理學。臨床醫學檢驗主管技師考試內容：臨床檢驗基礎、臨床血液學檢驗、臨床化學、臨床免疫學和免疫檢驗、微生物學檢驗、臨床實驗室質量管理、醫療機構從業人員行為規范與醫學倫理學。

醫學檢驗職稱考試網上報名步驟 醫學檢驗技士/技師/主管技師網上報名步驟：步驟

1、考生在衛生人才網上查看報名聲明，閱讀并同意后點擊進入報名流程。步驟

2、查看報名流程，了解報名順序及注意事項后點擊開始報名，進入報名頁面醫`學教育網搜集整理。

步驟

3、進入網報系統，注冊并填寫網上報名申報表。考生可以在12月報名后，憑借“個人證件編號”及個人密碼，登錄網站查詢、修改個人報名信息。填報個人報名信息。考生確認、保存報名信息后，系統提示“報名成功”。

步驟

4、考生確認填報信息無誤后，可以打印《衛生專業技術資格考試報名申請表》。

臨床醫學檢驗考試時間 全國衛生專業技術資格考試時間一般在每年的5-6月份。

醫學檢驗考試現場審核確認所需材料

1、《XXXX衛生專業技術資格考試申報表》一份（A4規格）；

2、本人有效身份證明及復印件；

3、畢業證書和學位證書原件；

4、專業技術職務任職資格證書、聘書原件或聘用證明原件；

5、相關準入資格證書原件；

6、工作崗位變動的報考人員須提交轉入現崗位的有關證明；

7、已參加衛生專業技術資格考試者，須提交以往考試成績單或準考證原件、復印件。注意事項：考生在確認單上簽字后，不得再對報名信息進行修改。凡未按期到所選考點或其下設報名點進行現場確認并繳費者，視為自動放棄本次考試。

第四篇：醫學檢驗材料

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：膽道疾病的臨床意義

正常時肝細胞內ALT、AST的一部分可通過肝細胞膜到肝竇狀隙而進入血液，一部分通過溶酶體分泌進入毛細膽管排人小腸，故當各種原因引起膽道梗阻時，后部分酶反流入血，可致ALT中度升高，梗阻緩解后l～2周即可恢復正常。

2012年醫學檢驗知識講解：精液檢查的要求

如果取精液檢查，應在檢查前5天內不排精。一般收集精液，可以用自慰取得，用避孕套通過性交時收集也可以。精液取到后應盛放在干燥、清潔的瓶內，并立即送檢。

精液是體液的一種。因此，很多性病可以通過精液傳染給對方。艾滋病病人的精液含有艾滋病的病毒，因此可以通過性交傳染給對方。肛交是一種危險的性行為，因為肛門附近的組織比較容易受傷害，如果有傷口破裂，那么帶有艾滋病病毒的精液就可以通過傷口傳染給被肛交的一方。這也是為什么同性戀的男性比較容易得艾滋病的原因。只要有體液的交流，異性戀的性行為也是可以傳播性病的。

醫生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節欲時間長者，可呈淡黃色，若出現鮮紅色。暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2～6毫升，常受排精次數與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時之內應液化為稀薄的液體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長度一般不超過2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2～7.8.正常精子數應超過2000萬/毫升。排精后1小時內活動精》=50%.世界衛生組織推薦精子活動力分為四級：0級：不活動；1級：精子原地擺動；2級：有中等的前向運動；3級：前向運動活躍，快速直線運動。正常的精子活動力為2～3級的精子》=40%～50%.精子形態：畸形精子小于50%.分析男性生育能力不能單從精液的一項指標定論，應對精子數量、活力、活動率、液化時間、畸形率等多方面進行綜合能力分析。

2012年醫學檢驗知識講解：精液常規檢查

精液由精子和精漿組成，其中精子占10%，其余為精漿。它除了含有水、果糖、蛋白質和脂肪外，還含有多種酶類和無機鹽。精液中含有鋅元素。

精子由睪丸產生。精漿由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌產生。精漿里含有果糖和蛋白質，是精子的營養物質。另外，精漿中還含有前列腺素和一些酶類物質。正常的精液呈乳白色、淡黃色或者無色，每毫升為精液中的精子數一般在6千萬至2億個。有活動能力的精子占總數的60%以上。畸形精子應總數的10%以下。在室溫下精子活動力持續3－4小時。

精液是堿性，女性生殖器內部則為酸性。因此，精液進入女性內部，就會被中和。

有生育力的正常男性一次射精最為2-6毫升，平均3.5ml.一次射精量與射精頻度呈負相關。若禁欲5-7天射精量仍少于2毫升，視為精液減少；若不射精，稱為無精液癥（aspermia）。精漿是精子活動的介質，并可中和陰道的酸性分泌物，以免影響精子活力。精液量減少（精漿不足）不利于精通過陰道進入子宮和輸卵管，影響受精。若一次射精量超過8毫升，精子被稀釋，也不利于生育。此可因垂體前葉促性腺素的分泌功能亢進，使雄激素的水平升高所致亦可見于禁欲時間過長者。

精液內含有一種可與青霉素相媲美的抗菌物質———精液胞漿素。專家們指出，精液胞漿素是一種具有獨特功能的蛋白質，此物質一旦進入細胞內部，就可以阻止核糖核酸的合成，從而殺死細菌。從實驗室培養中觀察到，精液胞漿素能殺死葡萄球茵、鏈球菌等多種致病菌。

精液呈灰白色，自行液化后為半透明的乳白色，久未射精者可略顯淺黃色。凡精液呈鮮紅、淡紅、暗紅或醬油色并含有大量紅細胞者稱為血精，可能由于前列腺和精非特異性炎癥、生殖系結核、腫瘤或結石所致黃色或棕色膿性精液見于前列腺炎和精囊炎。對于普通的健康男性，如果沒有不潔的性行為，或者性病，精液是什么顏色，形狀，根本是無關緊要的。男性疾病不是從表面研究精液，就可以診斷出來的。精液中的精子和女性的卵子結合，用來繁衍后代，這就是精液的唯一的功能。因此，如果吞食了精液，是絕對不可能導致女人懷孕的。對于單身男性來說，如果連對象也沒有，根本就沒有必要擔心自己的精液問題，完全就是庸人自擾。如果結婚一年以后，女方仍然沒有懷孕，那時才是應該看醫生，找出不孕的原因。

有些男性，受到一些封建迷信的宣傳，所以對于自己的精液特別重視。古人因為愚昧無知，所以有“一滴精，十滴血”，“精盡人亡”之類的錯誤說法。這是完全沒有科學根據的。古代太監，因為睪丸被割掉，連一個精子都沒有。有些太監還很長壽。現代科學研究，證明精液根本就不是所謂男性的精華所在。精液也絕對不是什么美容佳品。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗基礎輔導：m-AST的意義

m-AST可協助判斷肝實質損害的嚴重程度。

當急性肝炎病變嚴重累及線粒體時，AST/ALT比值升高，此時應注意是否發展為慢性肝炎。肝硬化時可達2.0.在Reye綜合征、妊娠脂肪肝、心肌梗死、做導管肝動脈栓塞術后，m-AST也可升高

2012年醫學檢驗考試臨檢基礎輔導：腎前性少尿

腎前性少尿：由于各種原因造成腎血流量不足，腎小球濾過率減低所致；如①腎缺血：各種原因引起的休克、過敏、失血過多、心力衰竭、腎動脈栓塞、腫瘤壓迫等。②血液濃縮：嚴重腹瀉、嘔吐、大面積燒傷、高熱等。③血容量減低：重癥肝病、低蛋白血癥引起全身水腫。④應激狀態：嚴重創傷、感染（如敗血癥）等。

2012年醫學檢驗考試臨檢基礎輔導：病理性多尿

1）內分泌疾病：如尿崩癥，指抗利尿激素（ADH）嚴重分泌不足或缺乏（中樞性尿崩癥），或腎臟對ADH不敏感或靈敏度減低（腎源性尿崩癥），患者24h尿量可多達5～15L，尿比密常為1.005以下，尿滲透壓在50～200mmol/L之間。多尿還見于甲狀腺功能亢進、原發性醛固酮增多癥等。

2）代謝性疾病：如糖尿病（DM）引起的多尿，主要機制是滲透性利尿所致，患者尿比密、尿滲透壓均增高。

3）腎臟性疾病：如慢性腎炎、慢性腎盂腎炎、慢性腎功能衰竭早期、腎小管酸中毒Ⅰ型、急性腎功能衰竭多尿期、失鉀性腎病等。腎小管破壞致腎濃縮功能逐漸減退均可引起多尿。腎性多尿常具有晝夜尿量的比例失常、夜尿量增多的特點，即晝夜間尿量比《2：1.2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：其他疾病的臨床意義

ALT廣泛存在于各組織中，機體器官有實質性損害時，ALT均可增高。如急性心肌梗死、右心功能不全、多發性肌炎、肌營養不良、急性腎盂腎炎、大葉性肺炎、支氣管炎、傳染性單核細胞增多癥、潰瘍性結腸炎、細菌性或阿米巴性肝膿瘍等疾病、瘧疾、血吸蟲病，外傷、手術等均可造成血清ALT和AST增高。

某些化學藥物如異菸肼、氯丙嗪、利福平、環磷酰胺和某些抗生素等也可引起血清ALT增高，所以ALT單項增高，需要結合病情綜合分析。

2012年醫學檢驗知識講解：血清學試驗的應用

血清學試驗在醫學和獸醫學領域已廣泛應用，可直接或間接從傳染病、寄生蟲病、腫瘤、自身免疫病和變態反應性疾病的感染組織、血清、體液中檢出相應的抗原或抗體，從而作出確切診斷。對傳染病來說，幾乎沒有不能用血清學試驗確診的疾病。實驗室只要備有各種診斷試劑盒和相應的設備，即可對多種疾病作出確切診斷。在動物疫病的群體檢疫、疫苗免疫效果監測和流行病學調查中，也已廣泛應用了血清學試驗以檢測抗原或抗體。血清學試驗還廣泛應用于生物活性物質的超微定量、物種及微生物鑒定和分型等方面。此外，血清學試驗也用于基因分離，克隆篩選，表達產物的定性、定量分析和純化等，已經成為現代分子生物學研究的重要手段。

2012年醫學檢驗考試血液檢驗輔導：嗜酸性粒細胞的計數

嗜酸性粒細胞起源于骨髓內CFU-s。經過單向嗜酸性祖細胞（CFU-EO）階段，在有關生成素誘導下逐步分化，成熟為嗜酸性粒細胞，在正常人外周血中少見，僅為0.5-5%.嗜酸性粒細胞有微弱的吞噬作用，但基本是無殺菌力，它的主要作用是抑制嗜石破天驚生粒細胞和肥大細胞合成與釋放其活性物質，吞噬其釋出顆粒，并分泌組胺酶發破壞組胺，從而起到限制過敏反應的作用。此外，實驗癥明它還參加與對嚅蟲的免疫反應。嗜酸性粒細胞的趨化因子至少有六大來源：

①從肥大細胞或嗜堿性粒細胞而來的組胺（histamine）； ②由補體而來的C3AC5A、C567，其中以C5a最為重要； ③從致敏淋巴細胞而來的嗜酸性細胞趨化因子； ④從寄生蟲而來的嗜酸性粒細胞趨化因子；

⑤從某些細菌而的嗜酸性粒細胞趨化因子（如乙型溶血性鏈球菌等）； ⑥從腫瘤細胞而來的嗜酸性粒細胞趨化因子。以上務因素均可引起的嗜酸性粒細胞增多。由于嗜酸性粒細胞在外周血中百分率很低，故經白細胞總數和嗜酸性粒細胞百分率換算而來的絕對值誤差較大，因此，在臨床上需在了解嗜酸性粒細胞的變化時，應采用直接計數法。

2012年醫學檢驗知識講解：血清學試驗的概念

抗原抗體反應是指抗原與相應的抗體之間發生的特異性結合反應。它既可以發生在體內，也可以發生在體外。在體內發生的抗原抗體反應是體液免疫應答的效應作用。體外的抗原抗體結合反應主要用于檢測抗原或抗體，用于免疫學診斷。因抗體主要存在于血清中，所以將體外發生的抗原抗體結合反應稱為血清學反應或血清學試驗。血清學試驗具有高度的特異性，廣泛應用于微生物的鑒定、傳染病及寄生蟲病的診斷和監測。

2012年醫學檢驗考試臨檢基礎知識輔導：尿紅細胞形態分析的臨床意義

1.畸形紅細胞標準

Birech報告畸形紅細胞分類 紅細胞大小不等，形態異常多樣，歸為以下7種［6］：①酵母菌樣紅細胞：在紅細胞外膜有小泡突出或細胞呈霉菌孢子樣改變。②炸面包卷樣紅細胞：紅細胞膜呈明顯的內外兩圈、四周肥厚、形似炸面包卷。③古錢樣紅細胞：形似中國古錢幣。④膜缺損紅細胞：紅細胞膜不完整，部分血紅蛋白（Hb）丟失。⑤大紅細胞：細胞體增大，中心淡，無雙盤凹陷感。⑥小紅細胞：胞體小，外膜增厚，折光增強。⑦手鐲樣紅細胞：胞體較大，呈明顯內外兩層膜改變。

黃鋒先等關于畸形紅細胞分類 ①面包圈樣紅細胞。②古錢樣紅細胞。③紅細胞膜呈顆粒樣、串珠樣。④紅細胞大小不等，大者為正常的1～2倍，小者為其1/2，顏色變淺。⑤殘碎紅細胞。⑥芽孢樣紅細胞。⑦棘狀樣紅細胞。⑧其他形狀，如細胞膜破裂成各種形狀，馬蹄形、月牙型等。其他如紅細胞呈鋸齒型、固縮型、大小一致的均稱均一型。

2.均一型紅細胞標準

紅細胞大小一致，變化均一，圖相在兩種以內，多數為正常及桑椹樣紅細胞，部分可出現影子紅細胞。此型多屬于非腎小球性血尿。

3.混合型紅細胞標準

根據畸形和均一型紅細胞所占比例的不同，可分為畸形為主的混合型紅細胞血尿（畸形紅細胞》50%）和以均一型紅細胞為主的混合型紅細胞血尿（均一型紅細胞所占》50%）兩種。

4.判定界限

畸形紅細胞占80%以上為腎小球性血尿；畸形紅細胞《20%，均一型紅細胞》80%以上為非腎小球性血尿；畸形紅細胞》20%、《80%，為混合型血尿。

5.畸形紅細胞形態變化與腎小球性血尿

畸形紅細胞各種變化形狀分為7～8種。腎小球性血尿，絕大多數為畸形紅細胞，占80%以上；非腎小球性血尿絕大多數為均一型紅細胞，占80%以上；以及以畸形紅細胞為主（》50%）的混合型和以均一型紅細胞為主（》50%）的混合型。以上畸形紅細胞、均一型紅細胞和混合型紅細胞3型結果均有趨向性，不存在可逆行，當然結合臨床癥狀觀察更為客觀。

畸形紅細胞的形成：一般認為，紅細胞通過腎小球基底膜時受損和經腎小球毛細血管壁漏出時受擠壓而變形，同時還與尿滲透壓、pH等因素有關。因此來自腎臟的紅細胞，除外形發生圖相變化外，其體積的大小也有顯著性差異。采用顯微鏡觀察檢查尿內紅細胞形態的變化，對診斷腎小球疾病引起的血尿和鑒別診斷是有一定價值和臨床意義的。棘形、靶形紅細胞的出現更具有臨床診斷價值。

2012年醫學檢驗考試質量管理與控制輔導：如何制定允許總誤差

（1）Tonks于1963年從理論上研究此問題，提出根據參考值與參考值范圍而設定，其公式是：

允許總誤差（%）=（1/4）［（參考值上界-參考值下界）/參考值均值］100%

（2）目前國際上常推薦根據生物學變異制定不精密度標準。生物學變異或稱生理變異（CVB），包括個體內變異（CVI）和個體間變異（CVG），也就是所說的生理波動。生物學變異可用來導出臨床實驗室檢測項目的不精密度、不準確度和總誤差的分析質量。體內和個體間變異分量表達為變異系數（分別為CVI和CVG）

2012醫學檢驗考試質量管理與控制輔導：準確度的總誤差概念

測定結果與真值的差異是隨機誤差（BE）和系統誤差（SE）的總和，即總誤差（TE）。也可用TE=1.96s+Bias表示（95%允許誤差限）。所選用的檢測方法的總誤差必須在臨床可接受的水平范圍內（也就是允許總誤差，TEa）。

2012年醫學檢驗考試臨檢基礎輔導：精液的精子活動率檢測

【正常參考值】正常精子活力一般在Ⅲ級（活動較好，有中速運動，但波形運動的較多）以上，射精后1小時內有Ⅲ級以上活動能力的精于應》0.60.【臨床意義】如果0級（死精子，無活動能力，加溫后仍不活動）和Ⅰ級（活動不良，精子原地旋轉、擺動或抖動，運動遲緩）精子在0.40以上，常為男性不育癥的重要原因之一。

2012年醫學檢驗考試臨床檢驗技師綜合輔導：酶的作用機理

一、酶作用在于降低反應活化能

在任何化學反應中，反應物分子必須超過一定的能閾，成為活化的狀態，才能發生變化，形成產物。這種提高低能分子達到活化狀態的能量，稱為活化能。催化劑的作用，主要是降低反應所需的活化能，以致相同的能量能使更多的分子活化，從而加速反應的進行。

酶能顯著地降低活化能，故能表現為高度的催化效率。例如前述的H2O2酶的例子，可以顯著地看出，酶能降低反應活化能，使反應速度增高千百萬倍以上。

二、中間復合物學說

目前一般認為，酶催化某一反應時，首先在酶的活性中心與底物結合生成酶－底物復合物，此復合物再進行分解而釋放出酶，同時生成一種或數種產物，此過程可用下式表示： ES的形成，改變了原來反應的途徑，可使底物的活化能大大降低，從而使反應加速。

三、酶作用高效率的機理

詳細機制仍不太清楚，主要有下列四種因素： 1.趨近效應和定向效應

酶可以將它的底物結合在它的活性部位由于化學反應速度與反應物濃度成正比，若在反應系統的某一局部區域，底物濃度增高，則反應速度也隨之提高，此外，酶與底物間的靠近具有一定的取向，這樣反應物分子才被作用，大大增加了ES復合物進入活化狀態的機率。2.張力作用

底物的結合可誘導酶分子構象發生變化，比底物大得多的酶分子的三、四級結構的變化，也可對底物產生張力作用，使底物扭曲，促進ES進入活性狀態。

3.酸堿催化作用

酶的活性中心具有某些氨基酸殘基的R基團，這些基團往往是良好的質子供體或受體，在水溶液中這些廣義的酸性基團或廣義的堿性基團對許多化學反應是有力的催化劑。

4.共價催化作用

某些酶能與底物形成極不穩定的、共價結合的ES復合物，這些復合物比無酶存在時更容易進行化學反應。

例如：無酶催化的反應 RX+H2O→ROH+Hx 慢 有酶存在時 RX+E桹H→ROH+EX快 EX+H2O→E桹H+HX快

2012年醫學檢驗考試臨床檢驗技師綜合輔導：蛋白質的變性

天然蛋白質的嚴密結構在某些物理或化學因素作用下，其特定的空間結構被破壞，從而導致理化性質改變和生物學活性的喪失，如酶失去催化活力，激素喪失活性稱之為蛋白質的變性作用。變性蛋白質只有空間構象的破壞，一般認為蛋白質變性本質是次級鍵，二硫鍵的破壞，并不涉及一級結構的變化。

變性蛋白質和天然蛋白質最明顯的區別是溶解度降低，同時蛋白質的粘度增加，結晶性破壞，生物學活性喪失，易被蛋白酶分解。

引起蛋白質變性的原因可分為物理和化學因素兩類。物理因素可以是加熱、加壓、脫水、攪拌、振蕩、紫外線照射、超聲波的作用等；化學因素有強酸、強堿、尿素、重金屬鹽、十二烷基磺酸鈉（SDS）等。在臨床醫學上，變性因素常被應用于消毒及滅菌。反之，注意防止蛋白質變性就能有效地保存蛋白質制劑。

變性并非是不可逆的變化，當變性程度較輕時，如去除變性因素，有的蛋白質仍能恢復或部分恢復其原來的構象及功能，變性的可逆變化稱為復性。例如，前述的核糖核酸酶中四對二硫鍵及其氫鍵。在β巰基乙醇和8M尿素作用下，發生變性，失去生物學活性，變性后如經過透析去除尿素，β-巰基乙醇，并設法使疏基氧化成二硫鍵，酶蛋白又可恢復其原來的構象，生物學活性也幾乎全部恢復，此稱變性核糖核酸酶的復性。許多蛋白質變性時被破壞嚴重，不能恢復，稱為不可逆性變性。

2012年醫學檢驗考試血液檢驗輔導：異型淋巴細胞

在傳染性單核增多癥、病毒性肺肝炎、流行性出血熱等病毒感染或過敏原則刺激下，可使淋巴細胞增生，并出現某些形態學變化，稱為異型淋巴細胞。Downey將其按形態特征分為三型：

1型（空泡型）：最多見。胞體比正常淋巴細胞稍大，多為圓形、橢圓形或不規則形。核圓形、腎形或分葉狀、常偏位。染色質粗糙，呈粗網狀或小塊狀，排列不規則。胞質豐富，染深藍色，含空泡或呈泡沫狀。Ⅱ型（幼稚型）：胞體較大，核圓形或卵圓形。染色質細致呈網狀排列，可見1～2個至發生母細胞化的結果。

Ⅲ型（不規則型）：胞體較大，外形常不規則，可有多數足。核形狀及結構與1型相同或更不殊途同歸，染色質較粗糙致密。胞質量豐富，染色淡藍或灰藍色，有透明感，邊緣處著色較深藍色。可有少數空泡。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：胎兒血型的預測

羊水中存在ABH（O）血型物質，故可在妊娠期預測胎兒的血型，以便對母體胎兒血型不合者進行圍生期監護、治療和對新生兒的作好搶救準備。

一、ABH分泌型血型的預測

本試驗是根據羊中分泌的血型物質可將相應抗血清中抗體中和原理設計的。將羊水與0.2毫升最適稀釋度的抗A抗B抗H血清0.2毫升分別混勻，馮分作用10min后，便血型物質將抗體中和完全，再于各管加入相對應的2%標準A型，B型，O型紅細胞懸液各0.2ml，充分混勻。置室溫30min，低速離心1分鐘觀察有無凝集。

本試驗最關鍵的部分是要選擇好抗血清的最適稀釋度。即選擇抗血清與2%標準紅細胞懸液恰能產生4+凝集的最高稀釋度，這樣才能在加入羊水后將相應抗體中和掉不再出現4+凝集。通常是將抗血清0.2ml用生理鹽水做1：1-1：256倍比稀釋后，將2%A，B，O型標準紅細胞加入0.2ml混勻，置室溫1小時后觀察結果，以出現4+凝塊的最高稀釋度定為最適稀釋度。實驗中要注意控制溫度，以免由于抗血清中冷凝集素未被完全吸收而造成結果判斷錯誤。

二、ABH（O）血型酶的測定

羊水ABH血型物質的測定，無法預測非分泌型胎兒的血型。已知由A基因產生的N-乙酰氨基半乳糖轉移酶能將N-乙酰氨基半乳聯接在H物質末端的半乳糖上，形成A血型物質，B基因產生的D-半乳糖轉移酶將D-半乳糖聯接在H物質末端的半乳糖上，形成B血型物質。當有糖供體、二價錳離子與O型紅細胞共同孵育時，羊水中的轉移酶可在紅細胞膜上合億A或B物質，利用血型測定的方法可檢測埋分泌型胎兒的血型。這時有嚴重ABO同種免疫史的孕婦非分泌型的胎兒血型鑒定提供了可能，也為在位于ABO基因部位的遺傳性疾病的產前診斷提供了可能，而可不必考慮胎兒是否為分泌型。

2012年醫學檢驗考試臨檢基礎知識輔導：精液的男性生育力指數測定

【計算公式】

I=M（N×V）/（A×106）式中I為男性生育力指數；M為活動精子百分率；N為每毫升的精子數；V為精子運動的速度；A為畸形精子的百分率。【正常參考值】

正常人生育力指數》1.【臨床意義】

1.生育指數為0，表明完全無生育能力。

2.生育指數為0-1之間，表明有不同程度的生育障礙。

2012年醫學檢驗考試血液檢驗復習輔導：HIV-抗體常見檢測方法

目前作為診斷手段使用的檢測主要包括抗HIV病毒抗體檢測、病毒培養、核酸檢測和抗原檢測。其中對病毒抗體的檢測是最常規使用的方法，這不但是由于這類檢測特異性、敏感性較高，方法相對簡便、成熟，更重要的原因是HIV抗體在病毒感染后除早期短暫的“窗口期”外的整個生命期間長期穩定地存在并可被檢測到。

在一些特殊情況下，當抗體檢測無法滿足HIV感染診斷的需要時，病毒分離及測定、核酸檢測、抗原檢測可作為輔助手段使用，這包括對非典型血清學反應樣品的診斷、HIV感染的窗口期診斷、新生兒早期診斷和對特殊樣品的診斷。

2012年醫學檢驗考試血液檢驗復習輔導：HIV-抗體確認實驗

免疫印跡試驗（WB）、條帶免疫試驗（LIATEKHIVⅢ）、放射免疫沉淀試驗（RIPA）及免疫熒光試驗（IFA）。國內常用的確認試驗方法是WB.（一）免疫印跡實驗（WB）

免疫印跡實驗是廣泛用于許多傳染病診斷的實驗方法，就HIV的病原學診斷而言，它是首選的用以確認HIV抗體的確認實驗方法，WB的檢測結果常常被作為鑒別其他檢驗方法優劣的“金標準”。

確認試驗流程：

有HIV-1/2混合型和單一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測，如果呈陰性反應，則報告HIV抗體陰性；如果呈陽性反應，則報告HIV-1抗體陽性；如果不滿足陽性標準，則判為HIV抗體檢測結果不確定。如果出現HIV-2型的特異性指示條帶，需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確認試驗，呈陰性反應，報告HIV-2抗體陰性；呈陽性反應則報告HIV-2抗體血清學陽性，并將樣品送國家參比實驗室進行核酸序列分析，WB的敏感性一般不低于初篩實驗，但它的特異性很高，這主要是基于HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化，能夠檢測針對不同抗原成分的抗體，因而能夠用WB方法鑒別初篩實驗的準確性。從WB確認試驗結果看出，初篩試驗盡管選擇質量較好的試劑，如第三代ELISA，仍會有假陽性出現，必須通過確認試驗才能得出準確結果。

（二）免疫熒光實驗（IFA）

IFA法經濟、簡便、快速，曾被FDA推薦用于WB不確定樣品的診斷。但需要昂貴的熒光顯微鏡，需要受過良好訓練的技術人員、觀察和解釋結果易受主觀因素的影響，結果不宜長期保存，IFA不宜在一般的實驗室開展和應用。

2012年醫學檢驗考試臨檢基礎知識輔導：重視血常規的復檢工作

目前血細胞分析儀己經普及到縣醫院或衛生院，這對提高血細胞常規的準確性和重復性，減輕工作人員勞動強度起促進作用。但是我們應該認識到血細胞分析儀還是一個過篩工具，至今最先進的全自動血細胞分析儀還不能完全取代人工檢查，仍然有部分標本需要復檢。據我所知有的醫院有了血細胞分析儀，把人工操作的工具、試劑全丟棄，基本上不再復檢了。有的單位即使復檢，也沒有復檢標準，隨心所欲，其復檢率只有百分之幾，這顯然是不負責任的。現就此問題談談個人看法。

一、為什么要復檢？考試用書 血細胞分析儀測定原理雖有不同，但它的各種項目的閾值是人設定的，而且是固定的，可是病人血細胞變化是千姿百態，有部分細胞難以識別或認錯干擾其它細胞計數，如有核紅細胞可影響白細胞計數；細胞碎片、血小板聚集可影響血小板計數等。尤其是白細胞形態學分類與血細胞分析儀的白細胞分類有本質上的不同，三分群僅僅是根據細胞大小來分而己，即使先進的五分類也與形態學也有很大差異，又如中性粒細胞毒性病變、變異淋巴細胞、瘧原蟲等臨床需要的指標無法顯示；有的幼稚細胞、有核紅細胞也不能區分；各參數之間有時還存在互相干擾。總之，血細胞分析儀的結果僅僅是屬于過篩而己，不能完全代替人工鏡檢。

根據1987年我赴日本考察時，日本對三分群儀器白細胞分類是不收費的，而且每一例仍然需要涂片染色，在顯微鏡下重新分類后才能報告。1989年Coulter公司制定了復檢標準，調查了11個床位及性質不同的醫療單位，它們均使用該公司的三分群血細胞分析儀，根據該公司的復檢標準，其復檢率為15%～60%，平均為40%，使手工分類減少40～85%，平均減少了60%，也就是說用節省下來的時間好好為40%需要分類的病人服務。

最近日本名古屋大學醫學部附屬醫院報告，他們用SysmexXE-2100（五分類）儀器的總復檢率為32.3%.再次證明當前最先進血細胞分析儀也不能完全替代人工檢查。

由于沒有復檢而產生的漏檢白血病、異常淋巴細胞、瘧原蟲，還有EDTA依賴性血小板假性降低等己引起的醫療糾紛，應該引起我們深思。

二、復檢內涵尚待統一

有人認為“復檢”就是要在鏡下重新進行白細胞分類計數而己，這是偏面的。復檢內涵應包據：

1、對血細胞分析儀測定的全部結果進行評估，必要時包括原標本重查，或重新用人工復查等。因此血常規手工操作不能丟；

2012年醫學檢驗考試臨檢基礎知識輔導：精液檢查的具備條件

受檢者，經歷一段經常排精過程后，禁房事5－7天（上次排精到取標本間隔時間至少不得少于100小時）；備大口有蓋清潔干燥容器一個，以手淫方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標本離體時間；貼身保溫，30分鐘內送到化驗室，并向檢驗員提供標本取出時間。精液常規觀察：精液總容量（毫升），精子活動情況，精子密度（個/毫升），精液液化時間（標本取出到精液液化的時間），不動精子（個/高倍視野）等。見不動精子，須染色方可區分：不活動的精子、死精子、未成熟精子等。

找不到精子必須離心后檢驗，仍然找不到精子；方可報告無精。經三次取樣化驗，結果仍然找不到精子方可確認無精子癥。

2012年醫學檢驗考試免疫檢驗輔導：血漿的鑒別方法

血漿是血液的液體成分，血細胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫升血漿，約占血液總體積的55%.血漿的絕大部分是水（體積的90%），其中溶解的物質主要是血漿蛋白，還包括葡萄糖、無機鹽離子、激素以及二氧化碳。血漿的主要功能是運載血細胞，同時也是運輸分泌產物的主要媒介。

將新鮮血液離心，使血細胞沉降，上層淡黃色清液即是血漿。血漿與血清的區別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子。2012年醫學檢驗考試免疫檢驗輔導：血漿的主要作用

提供基本營養物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。

提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質激素（氫化可的松、地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。

提供結合蛋白：結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。對培養中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發現的，現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，特別是在懸浮培養攪拌時，粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝解毒中起重要作用，如SeO3，硒等。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：離心技術的工具

離心機（centrifuge）是實施離心技術的裝置。離心機的種類很多，按照使用目的，可兩類，即制備型離心機和分析型離心機。前者主要用于分離生物材料，每次分離樣品的容量比較大，后者則主要用于研究純品大分子物質，包括某些顆粒體如核蛋白體等物質的性質，每次分析的樣品容量很小，根據待測物質在離心場中的行為（可用離心機中的光學系統連續地監測），能推斷其純度、形狀和相對分子質量等性質。兩類離心機由于用途不同，故其主要結構也有差異。通常所使用的離心機根據轉子轉速大小的不同可分為普通離心機、高速離心機和超速離心機三類

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：離心技術的概況

離心技術是利用物體高速旋轉時產生強大的離心力，使置于旋轉體中的懸浮顆粒發生沉降或漂浮，從而使某些顆粒達到濃縮或與其他顆粒分離之目的。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態的細胞、細胞器、病毒和生物大分子等。離心機轉子高速旋轉時，當懸浮顆粒密度大于周圍介質密度時，顆粒離開軸心方向移動，發生沉降；如果顆粒密度低于周圍介質的密度時，則顆粒朝向軸心方向移動而發生漂浮。常用的離心機有多種類型，一般低速離心機的最高轉速不超過6000rpm，高速離心機在25000rpm以下，超速離心機的最高速度達30000rpm以上。

根據離心原理，可設計多種離心方法，常見下列三大類型：

1.差速離心法。通過逐步增加相對離心力，使一個非均相混合液內形狀不同的大小顆粒分步沉淀。

2.密度梯度離心法。離心前，離心管內先裝入分離介質（如蔗糖、甘油等），使形成連續的或不連續的密度梯度介質，然后加入樣品進行離心，具體又可分為：

1）速度區帶離心法。離心前，離心管內先裝入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介質，待分離樣品鋪在梯度液的頂部，離心管底部或梯度層中間，同梯度液一起離心，利用各顆粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不同，使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層內，達到彼此分離的目的。本法可分離各種細胞、病毒、染色體、脂蛋白、DNA和RNA等生物樣品。

2）預制梯度等密度離心法。要求在離心前預先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質，常用介質有蔗糖、CsCl、Cs2SO4等，待分離樣品一般鋪在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調節樣品液密度。離心后，不同密度的樣品顆粒到達與自身密度相等的梯度層，即達到等密度的位置而獲得分離。

3）自成梯度等密度離心法。某些密度介質經過離心后會自成梯度，例Percoll，可迅速形成梯度，CsCl、Cs2SO4和三碘甲酰葡萄糖胺經長時間離心后也可產生穩定的梯度。需要離心分離的樣品可和梯度介質先均勻混合，離心開始后，梯度介質由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時，可以帶動原來混合的樣品顆粒也發生重新分布，到達與其自身密度相等的梯度層里，即達到等密度的位置而獲得分離。

3.沉降平衡離心法。根據被分離物質的浮力密度差別進行分離，所用的介質起始密度約等于被分離物質的密度，介質在離心過程中形成密度梯度，被分離物質沉降或上浮到達與之密度相等的介質區域中停留并形成區帶。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：離心技術的概況

離心技術是利用物體高速旋轉時產生強大的離心力，使置于旋轉體中的懸浮顆粒發生沉降或漂浮，從而使某些顆粒達到濃縮或與其他顆粒分離之目的。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態的細胞、細胞器、病毒和生物大分子等。離心機轉子高速旋轉時，當懸浮顆粒密度大于周圍介質密度時，顆粒離開軸心方向移動，發生沉降；如果顆粒密度低于周圍介質的密度時，則顆粒朝向軸心方向移動而發生漂浮。常用的離心機有多種類型，一般低速離心機的最高轉速不超過6000rpm，高速離心機在25000rpm以下，超速離心機的最高速度達30000rpm以上。

根據離心原理，可設計多種離心方法，常見下列三大類型：

1.差速離心法。通過逐步增加相對離心力，使一個非均相混合液內形狀不同的大小顆粒分步沉淀。

2.密度梯度離心法。離心前，離心管內先裝入分離介質（如蔗糖、甘油等），使形成連續的或不連續的密度梯度介質，然后加入樣品進行離心，具體又可分為：

1）速度區帶離心法。離心前，離心管內先裝入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介質，待分離樣品鋪在梯度液的頂部，離心管底部或梯度層中間，同梯度液一起離心，利用各顆粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不同，使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層內，達到彼此分離的目的。本法可分離各種細胞、病毒、染色體、脂蛋白、DNA和RNA等生物樣品。

2）預制梯度等密度離心法。要求在離心前預先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質，常用介質有蔗糖、CsCl、Cs2SO4等，待分離樣品一般鋪在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調節樣品液密度。離心后，不同密度的樣品顆粒到達與自身密度相等的梯度層，即達到等密度的位置而獲得分離。

3）自成梯度等密度離心法。某些密度介質經過離心后會自成梯度，例Percoll，可迅速形成梯度，CsCl、Cs2SO4和三碘甲酰葡萄糖胺經長時間離心后也可產生穩定的梯度。需要離心分離的樣品可和梯度介質先均勻混合，離心開始后，梯度介質由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時，可以帶動原來混合的樣品顆粒也發生重新分布，到達與其自身密度相等的梯度層里，即達到等密度的位置而獲得分離。

3.沉降平衡離心法。根據被分離物質的浮力密度差別進行分離，所用的介質起始密度約等于被分離物質的密度，介質在離心過程中形成密度梯度，被分離物質沉降或上浮到達與之密度相等的介質區域中停留并形成區帶。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：動脈血氣標本采集方法

一、抗凝劑的配制

首先推薦使用市場上有售的專用采血針，愿意自己配制抗凝采血針的用戶，可以用0.9%NS50ml+肝素鈉針劑2支（12500U）配制成肝素稀釋液備用，并做好無菌儲藏。每抽血氣前，用2ml注射器抽取肝素稀釋液2ml，完全濕潤整個針管后棄去肝素液，殘留在針頭及針管頭部死腔內的肝素液即可起到抗凝作用。抗凝劑少了會使血液凝集，堵塞血氣分析儀的流路系統，抗凝劑多了會影響血氣和離子的檢測結果，大劑量的抗凝劑會嚴重使離子鈣偏低，誤導臨床。

二、采血方法的選擇

成人：用肝素化的玻璃注射器或一次性注射器穿刺，采血部位首選橈動脈，次選股動脈

小兒：

1、首選用顳淺動脈或頭皮小動脈，嚴格消毒后，用肝素化的5號頭皮針連接2ml注射器，待動脈血流至注射器乳頭時，立即用小止血鉗分別夾住頭皮針塑料軟管首尾兩端（約0.5ml血），然后拔出針頭立即混勻送檢。

2、用肝素化的注射器穿刺，采血部位首選小兒橈動脈，小嬰兒可用顳淺動脈取血，取完血一定要密封。

3、因技術條件限制，不能反復動脈穿刺時，早產兒與小嬰兒可在足后跟用肝素化毛細管采取動脈化毛細血管的血亦可。動脈化毛細血管采血，用不超過42～45℃的濕巾熱敷采血部位皮膚5～15分鐘，使血液增加，血流加速，達到動脈化，然后穿刺，穿刺要深，使血流快速自動流出，棄去第一滴血，不能擠壓，用肝素化的毛細管吸取（建議采用廠家配套提供的專用毛細管），吸滿后一定要密封，混勻后立即送檢。未充分動脈化的毛細管血的PO2偏低，對PH、PCO2和HCO3—的測定結果影響不明顯。

三、采血后處理

采血后針尖或毛細吸血管兩端立即用橡皮帽或橡皮泥封住，防止空氣氣泡進入，并立即充分混勻達到抗凝目的，并立即送檢，從采血到送檢不宜超過20分鐘，以免血細胞代謝耗氧，使PO2和PH值下降PCO2升高。若不能立即測定，應將血氣標本保存在2～8℃容器內，但即使這樣待測時間也不宜超過2小時。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：VC影響血糖尿糖檢測

解放軍總醫院檢驗中心主任叢玉隆指出，維生素c（vc）可以還原尿糖檢測試劑中的酶，會導致尿糖檢測的結果失真，對于糖尿病患者來說，服用維生素要謹慎。

第一次遇到尿糖檢測失真是在1984年，叢玉隆還是醫院檢驗科的檢驗員。一天晚上急診科一患者化驗的結果是血糖8毫克。急診醫生一看檢驗報告馬上產生疑問：怎么會是8毫克？人的正常血糖最低是80毫克，如果真是8毫克，那這個人早就死了。于是檢驗科再次對病人的血樣化驗，結果還是8毫克，叢玉隆仔細檢查了檢驗程序和檢驗設備，都沒發現問題，但檢驗結果確實與病人實際病情不符。叢玉隆再仔細檢查后，發現在抽取病人血樣時，患者正輸著vc，結果終于弄明白了，原來是患者血樣中含有的大量vc還原了檢驗試劑中的酶，干擾了病人的血糖檢驗結果。

vc的影響到底有多大？叢玉隆再次做了試驗，一組人一天吃3片vc（每片100毫克），第二天檢測結果是每毫升尿含vc30毫克。一組人一天吃6片vc，第二天尿含vc90毫克。一組人一天吃了9片vc，第二天尿含vc是300毫克。叢玉隆說，假如一個糖尿病人，沒吃vc以前的尿糖是2個加號，吃了9片vc后，就可能是1個加號，甚至會出現陰性結果。

叢玉隆進行的另一個實驗證實，給健康人靜脈推注vc2000毫克，然后在不同時間段取尿，30分鐘后尿含vc600多毫克、1小時500多毫克、5小時后含幾十毫克（正常值），說明靜脈使用大劑量vc對糖尿病人的尿糖檢查干擾更大。試驗也證明5個小時以后，使用vc的病人每毫升尿含vc幾十毫克，已經屬于正常值，不再干擾檢驗結果。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：血磷測定的參考值

參考值：血清磷：0.81～1.45mmol/L

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：血磷的測定方法

血清無機磷的測定方法一般有磷鉬酸法、染料法和酶法。

磷鉬酸法是血清中無機磷與鉬酸鹽結合形成磷鉬酸化合物，再用還原劑將其還原成鉬藍進行比色測定。

染料法如孔雀綠直接顯色測定法。雖非常敏感，但影響因素多，顯色不穩定，重復性也較差，不能用于常規檢驗。

酶法是一個偶聯反應，參與反應的酶有糖原磷酸化酶、葡萄糖磷酸變位酶及葡萄糖6-磷酸脫氫酶，反應中使NADP+還原成NADPH，形成NADPH在340nm波長下測定其吸光度，該方法不受有機磷酸酯的干擾。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：火焰分光光度法的儀器

原始的火焰光度計由霧化器、火焰燃燒嘴、濾光片和光電池檢測器組成。現代的火焰分光光度計的基本框圖（見圖）示意出：試樣溶液經霧化后噴入火焰，溶劑在火焰中蒸發，鹽粒熔融，轉化為蒸氣，離解成原子（部分電離），再由火焰高溫激發發光，發射的光經切光器調制，并由單色器（通常是光柵）分光，選擇待測波長譜線，經光電轉換和電信號放大后檢出。反射鏡起聚光作用。

火焰光度法常用的火焰是在大氣恒壓下經化學反應而燃燒的。不同的燃料氣體和助燃氣組分，及其配比，稱助/燃比，決定該化學火焰能達到的最高溫度和化學作用性質（見表）。這是火焰光度法應用中要選擇的關鍵條件。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：火焰分光光度法的簡史

1859年R.W.本生利用本生燈進行焰色反應，就是火焰分光光度法的起源，用此法發現了許多新元素。1928年瑞典植物生理學家H.G.龍德加德用火焰光譜法研究植物新陳代謝作用中微量元素的定量變化，并使用了參考元素技術。由于當時使用照相方法記錄譜線，致使準確定量分析工作較為繁瑣。1935年制成第一臺火焰光譜光電直讀光度計，以及后來W.吉爾伯特制作的直接注入式燃燒器的使用，使得火焰光度法應用范圍進一步擴大。

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：火焰分光光度法的應用

火焰分光光度法主要用于堿金屬和堿土金屬元素的定量分析。方法簡單迅速，組分影響較小，取樣量小，用一份溶液即可進行多種元素分析，每毫升10微克濃度的鈉溶液也可測定。此法不僅可作為一個光化學分析方法獨立使用，而且可作為一個有特色的光檢測器，與氣相色譜儀聯用，或作為一種試樣原子化裝置，用于原子吸收光譜法中。

2012年醫學檢驗考試血液檢驗復習輔導：骨髓標本的采集選擇

骨髓標本的采集選擇

骨髓標本大部分采用穿刺法吸取。骨髓穿刺部位選擇一般要從以下幾個方面考慮：①骨髓腔中紅骨髓豐富；②穿刺部位應淺表、易定位；③應避開重要臟器。臨床上常用的穿刺部位包括胸骨、棘突、髂骨、脛骨等處。髂骨后上棘此處骨皮質薄，骨髓腔大，進針容易，骨髓液豐富，被血液稀釋的可能性小，故為臨床上首選的穿刺部位。

2012年醫學檢驗考試血液檢驗復習輔導：骨髓涂片的檢查

骨髓涂片的檢查

（1）普通光鏡低倍鏡檢驗：判斷骨髓增生程度；估計巨核細胞系統增生情況；觀察涂片邊緣、尾部、骨髓小粒周圍，有無體積較大或成堆分布的異常細胞。

（2）油鏡：選擇滿意的片膜段，觀察200～500個細胞，按細胞的種類、發育階段分別計算，并計算它們各自的百分率；仔細觀察各系統的增生程度和各階段細胞數量和質量的變化。

2012年醫學檢驗考試血液檢驗復習輔導：骨髓象的分析與報告

骨髓象的分析與報告

包括骨髓有核細胞增生程度、粒細胞與有核紅細胞比例、粒系統細胞改變、紅系統細胞改變、巨核系統細胞改變、淋巴系統細胞改變、單核系統細胞改變和其他血細胞改變。

2012年醫學檢驗考試綜合知識輔導：均相酶免疫測定

均相酶免疫測定：屬于競爭結合分析方法。

①酶增強免疫測定技術（EMIT）：了解其基本原理，反應后酶活力大小與標本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測定結果就可推算出標本中半抗原的量。

②克隆酶供體免疫分析：DNA重組技術可分別合成某種功能酶（如β-D半乳糖苷酶）分子的兩個片段，大片段稱為酶受體（EA），小分子稱作酶供體（ED），兩者單獨均無酶活性，一定條件下結合形成四聚體方具酶活性。

2012年醫學檢驗考試綜合知識輔導：異相酶免疫測定

異相酶免疫測定：又分為液相和固相酶免疫測定。

①液相酶免疫測定：其測定靈敏度與放射免疫方法相近，近年有取代放射免疫方法的趨勢。②固相酶免疫測定：如常用的酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

2012年醫學檢驗考試生化檢驗輔導：肝硬化的臨床意義

肝硬化代償期患者血清ALT可輕度增高或正常，失代償期ALT可持續升高。膽汁淤積性肝硬化ALT活性較高可與黃疸平行，AST升高不及ALT顯著。肝硬化病變累及線粒體時，多數AST升高程度超過ALT。

2012年醫學檢驗基礎知識輔導：尿的方法學評價

尿色和透明度判斷，受主觀因素影響。尿透明度還易受某些鹽類結晶的影響。臨床應用僅作參考

2012年醫學檢驗基礎知識輔導：尿的質量控制

1.使用新鮮尿尿放置時間過長，鹽類結晶析出、尿膽原轉變為尿膽素、細菌增殖和腐敗、尿素分解，均可使尿顏色加深、混濁度增高。2.防止污染。

2012年醫學檢驗基礎知識輔導：尿的生理性變化

（1）代謝產物：生理性影響尿顏色主要是尿色素、尿膽素（URB）、尿膽原（URO）等。

（2）飲水及尿量：大量飲水、尿量多則尿色淡；尿色深見于尿量少、飲水少或運動、出汗、水分丟失。

（3）藥物的影響：如服用核黃素、呋喃唑酮、痢特靈、黃連素、牛黃、阿的平使尿呈黃色或深黃色；番瀉葉、山道年等使尿呈橙色或橙黃色；酚紅、番瀉葉、蘆薈、氨基匹林、磺胺藥等使尿呈紅色或紅褐色。

（4）鹽類結晶及酸堿度：生理性尿混濁的主要原因是含有較多的鹽類，常見有：①尿酸鹽結晶：在濃縮的酸性尿遇冷時，可有淡紅色結晶析出。②磷酸鹽或碳酸鹽結晶：尿呈堿性或中性時，可析出灰白色結晶。

2012年醫學檢驗免疫檢驗考試輔導：腫瘤壞死因子的生物效應

腫瘤壞死因子的生物效應：TNF對多種腫瘤細胞均有殺傷或抑制作用，敏感性因腫瘤細胞類型而異；TNF呈劑量依賴性地抑制病毒介導的細胞病變的發展，對RNA病毒和DNA病毒均有抑制作用；TNF能夠增強T細胞產生以IL-2為主的淋巴因子，提高IL-2R的表達水平，促進T細胞增殖；還能促進B細胞增殖、分化和產生抗體；TNF有中性粒細胞和單核細胞趨化作用，并使之活化和脫顆粒，釋放炎癥介質；TNF可刺激成骨細胞內的堿性磷酸酶活性，誘導成骨細胞吸收骨質、使軟骨細胞進行軟骨更新，抑制軟骨形成。

2012年醫學檢驗免疫檢驗考試輔導：腫瘤壞死因子的應用研究

腫瘤壞死因子的應用研究：由于TNF的抗腫瘤和免疫調節功能，TNF療法的研究已被許多國家開展。動物實驗和臨床經驗表明，TNF對某些腫瘤具有明顯的抑制作用，但副作用大，建立合理的用藥方案及治療措施，可望降低用量，減輕副作用，達到最佳治療效果。

2012年醫學檢驗血液檢驗輔導：紅細胞鐮變試驗

（1）原理：在低氧分壓條件下，HbS轉變為還原狀態后溶解度降低，從而聚合成短棒狀凝膠使紅細胞變形，呈鐮刀狀。

結果：陰性，無鐮變細胞。

（2）臨床意義：陽性見于鐮狀細胞貧血（HbS病），HbBart、HbI病可見少量鐮狀細胞。

2012年醫學檢驗知識輔導：埃希菌屬的常規檢驗項目

CDC將大腸埃希氏菌O157：H7列為常規檢測項目

EHEC的血清型》50種，最具代表性的是O157：H7.在北美許多地區，O157：H7占腸道分離病原菌的第二或第三位，是從血便中分離到的最常見的病原菌，分離率占血便的40%，6、7、8三個月O157：H7感染的發生率最高。且0157是4歲以下兒童急性腎功衰的主要病原菌，所以CDC提出應將大腸埃希氏菌0157：H7列為常規檢測項目。

2012年醫學檢驗知識輔導：埃希菌屬的腸道感染

埃希菌屬的腸道感染：致病性大腸埃希菌有下列五個病原群。（1）腸產毒型大腸埃希菌（ETEC）：引起霍亂樣腸毒素腹瀉（水瀉）。（2）腸致病型大腸埃希菌（EPEC）：主要引起嬰兒腹瀉。（3）腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）：可侵入結腸黏膜上皮，引起志賀樣腹瀉（粘液膿血便）。（4）腸出血型大腸埃希菌（EHEC）：又稱產志賀樣毒素（VT）大腸埃希菌（SLTEC或UTEC），其中O157：H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征（HUS）。臨床特征為嚴重的腹痛、痙攣，反復出血性腹瀉，伴發熱、嘔吐等。嚴重者可發展為急性腎衰竭。（5）腸粘附（集聚）型大腸埃希菌（EAggEC）：也是新近報道的一種能引起腹瀉的大腸埃希菌。

2012年醫學檢驗臨床檢驗技師考試綜合輔導資料：埃希菌屬的概念

埃希菌屬包括5個種，即大腸埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫爾曼埃希菌和傷口埃希菌。臨床最常見的是大腸埃希菌。

大腸埃希菌俗稱大腸桿菌，大多數菌株是人類和動物腸道正常菌群。

2012年醫學檢驗臨床檢驗技師考試綜合輔導資料：腸桿菌科的鑒定

（1）初步鑒定：原則是：①確定腸桿菌科的細菌，應采用葡萄糖氧化-發酵試驗及氧化酶試驗與弧菌科和非發酵菌加以鑒別；②腸桿菌科細菌的分群，多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗，將腸桿菌科的細菌分為苯丙氨酸脫氨酶陽性、葡萄糖酸鹽利用試驗陽性和兩者均為陰性反應三個類群；③選擇生化反應進行屬種鑒別。

將選擇培養基或鑒別培養基上的可疑菌落分別接種克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）和尿素-靛基質-動力（MIU）復合培養基管中，并根據其六項反應結果，將細菌初步定屬。

（2）最后鑒定：腸桿菌科各屬細菌的最后鑒定是根據生化反應的結果定屬、種，或再用診斷血清做凝集反應才能作出最后判斷。

2012年醫學檢驗免疫檢驗考試輔導：細胞因子的類型

細胞因子分類按其作用大致可分為免疫調節因子和免疫調控因子兩大類。主要的細胞因子有：白細胞介素、干擾素、生長因子、趨化因子家族、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、轉化因子家族以及其他細胞因子等。

2012年醫學檢驗免疫檢驗考試輔導：細胞因子共同特性

（1）化學性質大都為糖蛋白。

（2）細胞因子可以旁分泌、自分泌或內分泌的方式發揮作用。

（3）一種細胞可產生多種細胞因子，不同類型的細胞可產生一種或幾種相同的細胞因子。

2012年醫學檢驗血液檢驗復習指導：血象特點

血液檢驗復習指導血象：血紅蛋白、紅細胞均減少，以血紅蛋白減少更為明顯。輕度貧血時紅細胞形態無明顯異常，中度以上貧血時紅細胞體積減小，中心淡染區擴大，嚴重時紅細胞可呈環狀，并有嗜多色性紅細胞及點彩紅細胞增多。網織紅細胞輕度增多或正常。白細胞計數及分類一般正常。血小板計數一般正常。

2012年醫學檢驗免疫檢驗考試輔導：單向擴散試驗

單向擴散試驗：瓊脂內混入抗體，待測抗原從局部向瓊脂內自由擴散，如抗原和相應抗體結合，則形成沉淀環。

1、試管法：將一定量的抗體混入0.7%瓊脂糖溶液中，注入小試管內，上層加抗原溶液使待測抗原在凝膠中自由擴散，在抗原抗體比例恰當位置形成沉淀環。

2、平板法：是將抗體或抗血清混入0.9%瓊脂糖內，未凝固前傾注成平板，然后在上打孔，將抗原加入孔中，放37℃讓其自由擴散，24～48h后可見孔周圍出現沉淀環，測定環的直徑或面積計算標本中待測抗原的濃度。有兩種計算方法：l）Mancini曲線：適用大分子抗原的和長時間擴散（》48h）的結果，沉淀環直徑的平方與抗原濃度呈線性關系c/d2=k.（其中c為抗原濃度 d為沉淀環直徑 k為常數）

3、單向擴散試驗檢測時的注意點：

（1）抗血清必須特異性強、效價高、親和力強，在良好條件下保存。（2）每次測定都必須作標準曲線。

（3）每次測定時必須用質控血清作質控。

（4）注意雙環現象（出現了兩種抗原性相同成分）。

（5）應用單克隆抗體測量多態性抗原時，測定值偏低；用多克隆抗體測量單克隆病時，測定值偏高

2012年醫學檢驗免疫檢驗考試輔導：雙向擴散試驗

雙向擴散試驗：在瓊脂內抗原和抗體各自向對方擴散，在最恰當的比例處形成抗原抗體沉淀線，根據沉淀線的位置、形狀以及對比關系，可對抗原或抗體作出定性分析。雙向擴散試驗也分為試管法和平板法。

1、試管法：在含有抗原的溶液和含有抗體瓊脂中間，加一層普通瓊脂，讓下層抗體和上層抗原向中間自由擴散，在抗原、抗體濃度最適時形成沉淀線。

2、平板法：

是在瓊脂板上相距3～5mm打一對孔，或者梅花孔、雙排孔、三角孔等。在相應孔中加入抗原或抗體，待其自由擴散后，抗原、抗體形成可見的沉淀線。根據沉淀線的位置可作如下分析：①抗原、抗體是否存在及其相對含量。一般沉淀線靠近抗原孔，提示抗體量大，沉淀線靠近抗體孔，提示抗原量大。

②抗原、抗體相對分子量的分析；抗原或抗體在瓊脂內自由擴散，其速度受分子量影響。分子量小者，擴散快，反之較慢。由于慢者擴散圈小，局部濃度較大，形成沉淀線彎向分子量大的一方。如若兩者分子量相等，則形成直線。

③抗原性質的分析，受檢的抗原性質可能完全相同、部分相同、完全不同，沉淀弧可分別出現完全融合、部分融合、不融合三種情況；

④抗體效價的滴定。抗體效價是抗原、抗體經過自由擴散形成沉淀線，出現沉淀線的最高抗體稀釋度為該抗體的效價。

2012年醫學檢驗血液檢驗復習指導：酸化甘油溶血試驗

（1）原理：當甘油存在于低滲溶液氯化鈉磷酸緩沖液時，可阻止其中的水快速進入紅細胞內，使溶血過程緩慢。但甘油與膜脂質又有親和性，可使膜脂質減少。當紅細胞膜蛋白及膜脂質有缺陷時，它們在pH6.85甘油緩沖液中比正常紅細胞溶解速度快，導致紅細胞懸液的吸光度降至50%的時間（AGLT50）明顯縮短。

參考值：AGLT50大于l800s（30min）

（2）臨床意義：減少見于遺傳性球形細胞增多癥（25～150s）、腎功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶貧和妊娠婦女。

2012年醫學檢驗血液檢驗復習指導：紅細胞膜的結構與功能

1.紅細胞膜的組成與結構：紅細胞膜含脂類40%，蛋白質50%，碳水化合物10%.膜的主要蛋白有主體蛋白和外周蛋白。后者包括收縮蛋白、肌動蛋白、錨蛋白和區帶（4.1～4.5）等，即骨架系統，起支架作用，對維持紅細胞的形狀、穩定性和變形性有重要作用。膜的主要脂類為磷脂和膽固醇，起屏障和保持內環境穩定性作用。

2.紅細胞膜的功能：屏障作用和可變性；半透性；免疫性；受體特性：激素類受體、遞質類受體、丙種球蛋白受體、病毒受體、EP0受體和鐵蛋白受體等。

3.影響紅細胞膜穩定的因索：紅細胞能量代謝紊亂；紅細胞膜有遺傳性缺陷；酶缺陷。

2012年醫學檢驗血液檢驗輔導：血紅蛋白病的定義與分類

血紅蛋白病的定義與分類：血紅蛋白病是一組由于生成血紅蛋白的珠蛋白肽鏈（α、β、γ、δ）的結構異常或合成肽鏈速率的改變，而引起血紅蛋白功能異常所致的疾病。血紅蛋白病多為遺傳性，如：因控制遺傳的珠蛋白基因發生突變所致的結構性血紅蛋白病；因指導珠蛋白合成速率的遺傳基因缺陷所致的珠蛋白生成障礙性貧血或稱海洋性貧血。另外，也可見獲得性血紅蛋白病。通常是由接觸或誤服化學藥物所致。

常見的結構性血紅蛋白病是因合成的珠蛋白的氨基酸序列改變而引起血紅蛋白功能或理、化性質異常的疾病，如：引起血紅蛋白異常聚合的HbS病；不穩定血紅蛋白癥、高鐵血紅蛋白血癥等。常見的珠蛋白生成障礙性貧血為α或β珠蛋白生成障礙性貧血。也有多種基因異常導致的血紅蛋白病，如HbE、Hb Constant Spring、Hb Lepore等。

2012年醫學檢驗臨床檢驗技師輔導：溶血空斑形成試驗

溶血空斑形成試驗：經典的溶血斑試驗用于檢測實驗動物抗體形成細胞的功能，其原理是將綿羊紅細胞（SRBC）免疫小鼠，4天后取出脾細胞，加入SRBC及補體，混合在溫熱的瓊脂溶液中，澆在平皿內或玻片上，使成一蒲層，置37℃溫育。由于脾細胞內的抗體生成細胞可釋放抗SRBC抗體，使其周圍的SRBC致敏，在補體參與下導致SRBC溶血，形成一個肉眼可見的圓形透明溶血區而成為溶血空斑（plaque）。

每一個空斑表示一個抗體形成細胞，空斑大小表示抗體生成細胞產生抗體的多少。這種直接法所測的細胞為IgM生成細胞，其他類型Ig由于溶血效應較低，不能直接檢測，可用間接檢測法，即在小鼠脾細胞和SRBC混合時，再加抗鼠Ig抗體（如兔抗鼠Ig），使抗體生成細胞所產生的IgG或IgA與抗Ig抗體結合成復合物，此時能活化補體導致溶血，稱間接空斑試驗。但是上述直接和間接空斑形成試驗都只能檢測抗紅細胞抗體的產生細胞，而且需要事先免疫，難以檢測人類的抗體產生情況。如果用一定方法將SRBC用其它抗原包被，則可檢查與該抗原相應的抗體產生細胞，這種非紅細胞抗體溶血空斑試驗稱為空斑形成試驗，它的應用范圍較大。

現在常用的為SPA-SRBC溶血空斑試驗。SBA能與人及多數哺乳動物IgG的Fc段呈非特異性結合，利用這一特征，首先將SPA包被SRBC，然后進行溶血空斑測定，可提高敏感度和應用范圍。在該測試系統中，加入抗人Ig抗體，可與受檢細胞產生的免疫球蛋白結合形成復合物，復合物上的Fc段可與連接在SRBC上的SPA結合，同時激活補體，使SRBC溶解形成空斑。此法可用于檢測人類外周血中的IgG產生細胞，與抗體的特異性無關。用抗IgA、IgG或IgM抗體包被SRBC，可測定相應免疫球蛋白的產生細胞，這種試驗稱為反相空斑形成試驗。

2012年醫學檢驗臨床檢驗技師輔導：淋巴細胞分離

1.純淋巴細胞群的采集：利用單核細胞在37℃和Ca2+存在時，能主動粘附在玻璃、塑料、尼龍毛、棉花纖維或葡聚糖凝膠的特性，從單個核細胞懸液中除去單核細胞，從而獲得純淋巴細胞群。主要的方法有：①粘附貼壁法；②吸附柱過濾法；③磁鐵吸引法。

2.淋巴細胞亞群的分離原則：根據相應細胞的特性和不同的標志加以選擇性純化。根據細胞的特性和標志選擇純化所需細胞的方法是陽性選擇法，而選擇性去除不要的細胞，僅留下所需的細胞為陰性選擇。常用的方法包括：①E花環沉降法；②尼龍毛柱分離法；③親和板結合分離法；④磁性微球分離法及熒光激活細胞分離儀分離法。

2012年醫學檢驗生化檢驗輔導：鋅的生理功能

（1）鋅可以作為多種酶的功能成分或激活劑；

（2）促進生長發育，促進核酸及蛋白質的生物合成；（3）增強免疫及吞噬細胞的功能；（4）有抗氧化、抗衰老、抗癌的作用。

2012年醫學檢驗生化檢驗輔導：鋅的吸收排泄

鋅在小腸上皮細胞內吸收，運送至肝和全身。從糞便、尿、汗、頭發、及乳汁排泄。可以測定血鋅或發鋅判斷體內含鋅情況。

2012年醫學檢驗生化檢驗輔導：鋅的含量分布

鋅是體內含量僅次于鐵的微量元素。鋅在在正常成人體內含量為2～2.5g，男性略高于女性，視網膜、前列腺、胰腺濃度最高；肌肉內儲鋅占全身鋅的62%，骨占28%。血鋅：80%存在于紅細胞，約18%的鋅分布于血漿。

2012年醫學檢驗技師臨檢基礎知識講解：輸血傳播性疾病的概述

常見的有：乙型、丙型肝炎，艾滋病，巨細胞病毒感染，梅毒，瘧疾，弓形體病等。獻血者有EB病毒感染，黑熱病、絲蟲病、回歸熱感染時，均有可能通過輸血傳播。此外，如血液被細菌污染，可使受血者由此引起菌血癥，嚴重者可致敗血癥。在由輸血引起的疾病中，以肝炎和艾滋病危害性最大。

2012年醫學檢驗技師臨檢基礎知識講解：常見輸血的不良反應

1.免疫性

溶血反應、非溶血性發熱反應、過敏反應、蕁麻疹、非心源性肺水腫、移植物抗宿主病、輸血后紫癜、對紅細胞、白細胞、血小板或血漿蛋白的同種（異體）免疫等。

2.非免疫性

高熱（有休克）、充血性心力衰竭、理化性溶血、空氣栓塞、出血傾向、枸櫞酸鈉中毒、鉀中毒、血液酸化、高血氨、含鐵血黃素沉著癥、血栓性靜脈炎、疾病傳播（乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒、瘧疾，巨細胞病毒感染等）。

2012醫學檢驗臨床檢驗技師輔導：淋病奈瑟菌的臨床意義

臨床意義：淋病奈瑟菌是常見的性傳播疾病淋病的病原菌，主要通過性接觸直接侵襲感染泌尿生殖道，口咽部及肛門直腸的黏膜。如單純性淋病、盆腔炎、淋菌型結膜炎。

2012年醫學檢驗臨床檢驗技師輔導：淋病奈瑟菌的生物學特性

（1）形態與染色：本菌的形態與腦膜炎奈瑟菌很相似。在膿汁標本中，此菌通常位于中性粒細胞內，而在慢性淋病時常位于細胞外。從患者體內新分離的菌株可有莢膜和菌毛，經人工培養后，呈卵圓形或球形，排列不規則。無芽胞和鞭毛。

（2）培養特性：營養要求較高，須在含有血液、血清或多種氨基酸和無機鹽類物質的培養基上生長良好。國內常用血液瓊脂、巧克力瓊脂、EPV瓊脂等培養基。初次分離時，須置5%～10à2條件下才能生長。

（3）生化反應：可發酵葡萄糖、產酸，但不酵解麥芽糖（常借此與腦膜炎奈瑟菌相鑒別）。氧化酶和觸酶試驗均陽性。主要有三種抗原：菌毛蛋白抗原、脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。對外界抵抗力極低。

2012年臨床醫學檢驗技師免疫檢驗考試輔導：淋巴細胞保存與活力的測定

1.淋巴細胞的保存技術

（1）短期保存技術：將分離的細胞用適量含10%～20%滅活小牛血清的Hanks、Tc-199、RPMIl640或其他培養液稀釋重懸。短期保存可置于4℃保存。

（2）長期保存技術：液氮深低溫（-196℃）環境保存細胞，加入二甲亞砜作為保護劑。

2.活力測定：最簡便常用的為臺盼藍染色法。臺盼藍又稱錐藍，是一種陰離子型染料，這種染料不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色，但死亡細胞的細胞膜通透性增加，可使染料通過細胞膜進入細胞內，使死細胞著色呈藍色，通過死亡細胞與活細胞的百分比可反映細胞活力。

2012年臨床醫學檢驗技師生化檢驗輔導：治療藥物監測

治療藥物監測（TDM）是指應用一定的分析技術測定體液中藥物的濃度，以藥代動力學理論為基礎和電子計算機為計算工具，研究藥物在體內的過程，使臨床給藥個體化，科學化、合理化。

無論是藥物的治療作用還是不良反應，從本質上說都是通過藥物和靶位受體間的相互作用而產生的。當藥物在體內達到分布平衡后，雖然血液和靶位的藥物濃度往往并不相等，但血藥濃度與藥物效應間存在相關性。故檢測相對易采集的血藥濃度，替代心、腦、腎等難以取樣的靶位藥物濃度的可行性基礎

2012年醫學檢驗技師輔導：水與鈉的代謝紊亂

水與鈉的代謝紊亂：等滲性缺水，低滲性缺水，高滲性缺水，水過多。

一、等滲性缺水

又稱急性缺水或混合性缺水，是外科病人最易發生的。水和鈉成比例的喪失，血清鈉仍在正常的沲圍，細胞外液滲透壓也保持正常。

（—）病因：常見的有：①消化液的急性喪失如大量嘔吐和腸瘺等；②體液喪失在感染區或軟組織內如腹腔內或腹膜后感染、腸梗阻和燒傷等。

（二）臨床表現：少尿、畏食、惡心、乏力、舌干燥、眼窩下陷、皮膚干燥、松弛，但不口渴。當喪失體液達體重的5%（相當于喪失細胞外液20%）時，出現血容量不足癥狀；當喪失體液達體重的6%～7%時，可出現嚴重休克，當體液的喪失主要是胃液時，可伴發代謝性堿中毒征象。

（三）診斷：主要依據病史和臨床表現進行診斷。實驗室檢查有血液濃縮表現，尿比重增高，但血Na+和Cl-濃度仍在正常范圍內。

（四）治療 在積極治療原發病的同時，應給予等滲鹽水，并注意補充血容量（包括晶體和膠體）糾正體克。可根據臨床表現估計補液量，也可根據血細胞比容（hct，正常值：男0.48，女0.42）來計箅。

補液量（l）=hct上升值/hct正常值×體重（kg）×0.2

二、低滲性缺水

（一）病因：①胃腸道消化液持續喪失，②大創面慢性滲液；③腎排鈉過多。

（二）臨床表現：常見癥狀若頭暈、視光模糊、軟弱無力、脈納速，甚至神志不清，肌痙攣性疼痛、腱反射減弱、昏迷等。

1、輕度缺鈉：乏力、頭暈、手足麻木、口渴不明顯。

2、中度缺鈉：除上述癥狀外，尚有惡心、嘔吐、脈細速、血壓不穩或下降、淺靜脈萎陷。

3、重度缺鈉：病人神志不清、肌痙攣性抽搐、腱反射減弱或消失，出現木僵，甚至昏迷。常發生休克。

（三）診斷：①依據病史及表現；②尿Na+和Cl-下明顯減少；③血清鈉低于135mmol/L；④紅細胞計數、血紅蛋白、血細胞比容、血非蛋白氮和尿素氮均有增高；⑤尿比重常在1.010以下。

（四）治療：①積極處理病因；②采用含鹽溶液或高滲鹽水靜脈輸注。

三、高滲性缺水

（-）病因：①攝人水不足，如食管癌吞咽困難，病危病人給水不足等；②水分喪失過多，如高熱大汗、燒傷暴露療法、糖尿病昏迷等。

（二）臨床表現

1、輕度缺水 除口渴外，無其他癥狀，缺水量為體重的2%～4%.2、中度缺水 極度口渴、乏力、尿少、尿比重高；唇干舌燥、皮膚彈性差、眼窩下陷，常出現煩躁。缺水量為體重的4%～6%.3、重度缺水 除上述癥狀外，出現躁狂、幻覺、譫妄、甚至昏迷。缺水量超過體重的6%.（三）診斷：①依據病史及表現；②尿比重增高；③血清鈉在150mmol/l以上；④紅細胞計數、血紅蛋白、血細胞比容輕度增高。

（四）治療：①盡早去除病因；②補充水分，不能經口補充者，可以經靜脈滴注5%葡萄糖溶液或0.45%氯化鈉溶液；③因血液濃縮，體內總鈉量仍有減少，故補水的同時應適當的補充鈉鹽；④尿量達40ml/h后應補充鉀鹽；⑤經補液后酸中毒仍未能完全糾正者，應給碳酸氫鈉。

四、水過多（—）臨床表現

1、急性水中毒：腦細胞腫脹或腦組織水腫致以顱內壓增高，引起各種神經精神癥狀：頭暈、失語、精神錯亂、定向力失常、嗜睡、躁動、驚厥、譫妄、甚至昏迷。有時可發生腦疝。

2、慢性水中毒：軟弱乏力、惡心、嘔吐、嗜睡等，但往往被原有疾病所掩蓋。病人體重明顯增加，皮膚蒼白而濕潤。有時唾液及淚液增多，一般無凹陷性水腫。

（二）診斷：紅細胞計數、血紅蛋白、血細胞比容和血漿蛋白量均降低；血漿滲透壓降低。

（三）治療：預防重于治療。對容易發生抗利尿激素增多的疼痛、失血、休克、創傷和大手術者以及急性腎功能不全和慢性心功能不全的病人，應嚴格限制人水量。對水中毒病人，應立即停止水分的攝人；程度嚴重者，除禁水外，用利尿劑，一般用滲透性利尿劑（甘露醇或山梨醇）靜脈快速滴注，也可靜脈注射袢利尿劑（速尿和利尿酸），尚可靜脈滴注5%氯化鈉溶液。

醫學檢驗臨床檢驗技師輔導：鐵染色與代謝的檢查特點

鐵染色顯示細胞外鐵增多，鐵粒幼細胞百分數增加、鐵顆粒增多變粗；如幼紅細胞鐵顆粒在6個以上（正常少于4個），圍繞并靠近核排列成環狀或半環稱此為環形鐵粒幼細胞，占幼紅細胞15%以上，為本病特征和重要診斷依據。

醫學檢驗臨床檢驗技師輔導：T細胞表面標志檢測

1.特異性抗原檢測：用單克隆抗體檢測T細胞表面抗原的方法有兩大類：一類是用標記抗體染色，如免疫熒光法、酶免疫法、ABC法及免疫金銀染色法；另一類用抗體致敏的紅細胞作花環試驗。

2.特異性受體的檢測原理：T細胞表面有特異性綿羊紅細胞（E）受體，當人的T細胞與綿羊紅細胞懸液按一定比例混合后，置4℃至少2小時或過夜，T細胞表面的E受體可與綿羊紅細胞結合形成玫瑰花樣的花環，稱為活性E（Ea）花環。檢測Ea花環形成細胞可反映受檢者的細胞免疫水平。

3.T細胞亞群檢測：見第二十二章流式細胞儀分析技術。

醫學檢驗臨床檢驗技師輔導：B細胞表面標志檢測

B細胞具有多種特異性抗原和受體，據此建立了相應的檢測方法，一般用以研究B細胞各分化發育階段的特性，也可藉以鑒定和計數各階段B細胞在人外周血和淋巴樣組織的分布以及疾病時的變化動態，為臨床提供診治相關疾病的有用信息。

1.B細胞表面抗原的檢測：B細胞表面有CD19、CD20、CD21、CD22和CD29等分化抗原，其中有些系全部B細胞所共有，而有些僅活化B細胞所特有，據此可用相應的CD系列單克隆抗體，通過間接熒光免疫法、酶免疫組化或ABC法加以檢測。

2.SmIg的檢測：大多采用間接熒光免疫法或包括ABC法在內的酶免疫組化法，關鍵是選用高效價、高特異性和高親和力的熒光或酶標記的多價抗人Ig抗體，也可分別用各種類型的Ig，即IgM、IgG、IgA、IgE等抗血清，檢測帶有各種類型Ig的B細胞，在人外周血中以帶有SmIgM的細胞數為最多。B細胞經熒光標記的抗Ig抗體染色，細胞膜表面呈現的熒光著色可有不同的形式，開始均勻分布呈環狀，其后集中在某些部位呈斑點狀，然后又可集在一個部位呈帽狀，最后可被吞飲入胞漿直至熒光消失。這一現象是由于淋巴細胞膜由雙層類脂組成，上嵌有蛋白分子，在體溫條件下，膜呈半液體狀，而鑲嵌物能在其中移動。當SmIg抗體發生結合時，由于抗血清為雙價，使SmIg出現交聯現象，這種抗原與抗體結合物可連成斑點和帽狀，時間過長，帽狀結合物可脫落或被吞飲而消失，因此染色后，觀察時間不能超過30min，或在染色時加疊氮鈉防止帽狀物形成或被吞飲。

2012年醫學檢驗技師輔導：水與鈉的代謝紊亂

一、等滲性缺水

又稱急性缺水或混合性缺水，是外科病人最易發生的。水和鈉成比例的喪失，血清鈉仍在正常的沲圍，細胞外液滲透壓也保持正常。

（—）病因：常見的有：①消化液的急性喪失如大量嘔吐和腸瘺等；②體液喪失在感染區或軟組織內如腹腔內或腹膜后感染、腸梗阻和燒傷等。

（二）臨床表現：少尿、畏食、惡心、乏力、舌干燥、眼窩下陷、皮膚干燥、松弛，但不口渴。當喪失體液達體重的5%（相當于喪失細胞外液20%）時，出現血容量不足癥狀；當喪失體液達體重的6%～7%時，可出現嚴重休克，當體液的喪失主要是胃液時，可伴發代謝性堿中毒征象。

（三）診斷：主要依據病史和臨床表現進行診斷。實驗室檢查有血液濃縮表現，尿比重增高，但血Na+和Cl-濃度仍在正常范圍內。

（四）治療 在積極治療原發病的同時，應給予等滲鹽水，并注意補充血容量（包括晶體和膠體）糾正體克。可根據臨床表現估計補液量，也可根據血細胞比容（hct，正常值：男0.48，女0.42）來計箅。

補液量（l）=hct上升值/hct正常值×體重（kg）×0.2

二、低滲性缺水

（一）病因：①胃腸道消化液持續喪失，②大創面慢性滲液；③腎排鈉過多。

（二）臨床表現：常見癥狀若頭暈、視光模糊、軟弱無力、脈納速，甚至神志不清，肌痙攣性疼痛、腱反射減弱、昏迷等。

1、輕度缺鈉：乏力、頭暈、手足麻木、口渴不明顯。

2、中度缺鈉：除上述癥狀外，尚有惡心、嘔吐、脈細速、血壓不穩或下降、淺靜脈萎陷。

3、重度缺鈉：病人神志不清、肌痙攣性抽搐、腱反射減弱或消失，出現木僵，甚至昏迷。常發生休克。

（三）診斷：①依據病史及表現；②尿Na+和Cl-下明顯減少；③血清鈉低于135mmol/L；④紅細胞計數、血紅蛋白、血細胞比容、血非蛋白氮和尿素氮均有增高；⑤尿比重常在1.010以下。

（四）治療：①積極處理病因；②采用含鹽溶液或高滲鹽水靜脈輸注。

三、高滲性缺水

（-）病因：①攝人水不足，如食管癌吞咽困難，病危病人給水不足等；②水分喪失過多，如高熱大汗、燒傷暴露療法、糖尿病昏迷等。

（二）臨床表現

1、輕度缺水 除口渴外，無其他癥狀，缺水量為體重的2%～4%.2、中度缺水 極度口渴、乏力、尿少、尿比重高；唇干舌燥、皮膚彈性差、眼窩下陷，常出現煩躁。缺水量為體重的4%～6%.3、重度缺水 除上述癥狀外，出現躁狂、幻覺、譫妄、甚至昏迷。缺水量超過體重的6%.（三）診斷：①依據病史及表現；②尿比重增高；③血清鈉在150mmol/l以上；④紅細胞計數、血紅蛋白、血細胞比容輕度增高。

（四）治療：①盡早去除病因；②補充水分，不能經口補充者，可以經靜脈滴注5%葡萄糖溶液或0.45%氯化鈉溶液；③因血液濃縮，體內總鈉量仍有減少，故補水的同時應適當的補充鈉鹽；④尿量達40ml/h后應補充鉀鹽；⑤經補液后酸中毒仍未能完全糾正者，應給碳酸氫鈉。

四、水過多（—）臨床表現

1、急性水中毒：腦細胞腫脹或腦組織水腫致以顱內壓增高，引起各種神經精神癥狀：頭暈、失語、精神錯亂、定向力失常、嗜睡、躁動、驚厥、譫妄、甚至昏迷。有時可發生腦疝。

2、慢性水中毒：軟弱乏力、惡心、嘔吐、嗜睡等，但往往被原有疾病所掩蓋。病人體重明顯增加，皮膚蒼白而濕潤。有時唾液及淚液增多，一般無凹陷性水腫。

（二）診斷：紅細胞計數、血紅蛋白、血細胞比容和血漿蛋白量均降低；血漿滲透壓降低。

（三）治療：預防重于治療。對容易發生抗利尿激素增多的疼痛、失血、休克、創傷和大手術者以及急性腎功能不全和慢性心功能不全的病人，應嚴格限制人水量。對水中毒病人，應立即停止水分的攝人；程度嚴重者，除禁水外，用利尿劑，一般用滲透性利尿劑（甘露醇或山梨醇）靜脈快速滴注，也可靜脈注射袢利尿劑（速尿和利尿酸），尚可靜脈滴注5%氯化鈉溶液。

2012年醫學檢驗技師輔導：再生障礙性貧血診斷

（1）概念：是由多種原因致造血干細胞減少或功能異常，從而引起紅細胞、中性粒細胞、血小板減少的一種獲得性疾病。表現為貧血、感染和出血。與造血干細胞受損、造血微環境損傷及免疫介導有關。

（2）血象與骨髓象特點：呈正細胞正色素性貧血，可有小細胞增多。網織紅細胞極低，血小板計數早期減少。骨髓各穿刺部位大多增生不良，白細胞常低于2×109/L，粒細胞顯著減少，多為淋巴細胞，骨髓巨核細胞減少。骨髓活檢對再障的診斷具有十分重要價值。

（3）再生障礙性貧血的診斷標準：①全血細胞減少，網織紅細胞絕對值減少；②一般無肝、脾腫大；③骨髓至少1個部位增生減低或重度減低，骨髓小粒非造血細胞增多；④能引起全血細胞減少的其他疾病，如陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥、骨髓增生異常綜合征中的難治性貧血等；⑤一般抗貧血藥物治療無效??

2012年醫學檢驗技師輔導：膽堿酯酶肝病的檢測意義

人體組織中有兩種膽堿酯酶，一種是分布在紅細胞和神經組織中的乙酰膽堿酯酶（又稱真性膽堿酯酶）；另一種是廣泛分布于血漿及許多非神經組織中的假性膽堿酯酶（非特異性膽堿酯酶），我們一般稱假性膽堿酯酶（CHE）。CHE是一種生物酶，具有降解膽堿酯并在自主神經系統和肌肉運動系統中起神經傳遞的功能，它存在于血清、肝、大腦、腎、腸及胰中，對其檢測常被用于有機磷中毒患者的輔助診斷。由于CHE是由肝臟生成后分泌入血的，所以它還能反映肝實質細胞損害的程度。因此，膽堿酯酶是一項具有重要臨床意義的的肝功能檢測指標。

1、急性肝炎 此組患者的ALT均》200U/L，血清CHE降低者有17例，占的比例是65%，比有關文獻報道的比例高，我們可以將CHE的測定作為一項急性肝炎有價值的輔助酶學指標。

2、肝硬化 此組患者肝臟的功能性細胞減少，使蛋白質合成降低，故其CHE均降低。值得注意的是部分肝硬化病例的ALT等一般肝功能指征不高或無明顯異常，而CHE明顯降低，提示CHE對肝硬化的診斷和病情觀察是一項有特色的指征之一。

3、肝癌 本組患者的CHE明顯降低，其下降幅度與肝細胞損害程度呈正相關，而ALT的升高與肝組織病理無固定關系。

4、大三陽與小三陽 臨床上大、小三陽患者區別在于病毒的復制不同。大三陽患者血清中能同時檢測出HBsAg、HBeAg、抗HBC，提示急慢性的HBV感染，而且有病毒復制；小三陽患者血清中能檢測出HBsAg、抗HBe、抗HBC，提示HBV在肝細胞內復制極低或停止。CHE在大三陽組的32例中有4例降低，約占13%，在小三陽組的38例中只有2例降低，因此，我們認為臨床上區別大、小三陽患者，不能預示其肝臟功能改變的程度。

CHE在肝臟受損時活力下降，是肝臟病變后唯一下降的酶，特別是蛋白質合成受損時的肝病，其降低幅度與血清白蛋白大致平行。因此，CHE在肝病的診斷及治療中是一項很有價值的檢測指標。

2011年醫學檢驗輔導之血象與骨髓象特點

血象與骨髓象特點是檢驗技師要求掌握的內容，醫學教育網搜集整理相關內容供大家參考。①血象：為正細胞低色素性貧血，血片上細胞呈兩種紅細胞并存的“雙形性”，這是本病的特征之一。點彩紅細胞可增多。獲得性原發性者可出現中性粒細胞顆粒減少、Pelger樣核異常和少量幼稚粒細胞。

②骨髓象：紅細胞系明顯增生，以中幼紅細胞為主，有的細胞呈巨幼樣改變、雙核或核固縮，胞漿常缺少血紅蛋白或有空泡。

收集細菌培養標本首先應注意無菌的原則，其次還應注意：

（1）細菌培養標本應在抗生素治療前收集，并及時送檢。

（2）血培養成人抽血5～10ml，兒童3～5ml，注入規定培養瓶。

（3）尿標本收集前應清潔外陰部，留中段尿2～3ml于無菌小瓶中。

（4）胸腹水、膿、分泌物應收集于無菌小瓶或無菌試管內。

（5）厭氧培養的標本應避免與氧接觸，并及時送檢。

1.血象：血液呈暗紫色，紅細胞數增多（[7.0～10.0）×1012/L]，血紅蛋白增高（180g～240g/L），紅細胞比容增高（0.54～0.80），網織紅細胞百分率不增多。紅細胞形態正常，可輕度大小不均，嗜多色和嗜堿點彩紅細胞增多，偶見有核紅細胞。白細胞數增高（12～15）×109/L，少數患者可達50×109/L.分類以中性粒細胞為主，核左移，嗜酸及嗜堿性粒細胞稍多，血片可見中幼粒及晚幼粒細胞。血小板增高，可達（400～500）×109/L.中性粒細胞堿性磷酸酶增高。

2.骨髓象：偶有“干抽”現象，髓液為深紅色，有核細胞增生明顯活躍，三系均增生，以紅系增生為顯著。巨核細胞增多，可成堆出現。各系各階段比值及形態大致正常。骨髓鐵減少或消失。

全血容量增加（為正常的150%～300%），紅細胞容量增加（>32ml/kg），血液比重增加（1.075～1.080），全血粘度增加（比正常高5～6倍）。血清維生素B12增高（>900μg/ml），血沉減慢，動脈血氧飽和度正常，血清鐵正常或減低，未飽和鐵結合力正常或增高。

第五篇：臨床醫學檢驗考試輔導醫學檢驗

第九章　酶免疫技術

第一節　酶免疫技術的特點

它是將酶與抗體或抗原結合成酶標記抗體或抗原，在酶標抗體（抗原）與抗原（抗體）的特異性反應完成后，加入酶的相應底物，通過酶對底物的顯色反應，對抗原或抗體進行定位、定性或定量的測定分析。

一、酶和酶作用底物

（一）酶的要求：一個酶蛋白分子每分鐘可催化103～104個底物分子轉變成有色產物。

1.酶的活性要強，催化反應的轉化率高，純度高。

2.易與抗體或抗原偶聯，標記后酶活性保持穩定，且不影響標記抗原與抗體的免疫反應性。

3.作用專一性強，酶活性不受樣品中其他成分的影響，受檢組織或體液中不存在與標記酶相同的內源性酶或抑制物。用于均相酶免疫測定的酶還要求當抗體與酶標抗原結合后，酶活性可出現抑制或激活。

4.酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量，方法簡單易行、敏感和重復性好。

5.酶、輔助因子及其底物對人體無害，酶的底物易于配制、保存，酶及其底物應價廉易得。

（二）常用的酶

1.辣根過氧化物酶（HRP）：目前酶聯免疫吸附試驗中應用最廣泛的標記用酶。由無色的糖蛋白（主酶）和亞鐵血紅蛋白（輔基）結合而成的復合物。輔基是酶活性基團，而主酶則與酶活性無關，HRP的純度用RZ（HRP分別在403nm和275nm處的吸光度比值）表示，RZ值應大于3.0。

RZ值僅說明血紅素基團在HRP中的含量，并非表示HRP制劑的真正純度，而且RZ值高的HRP并不意味著酶活性也高，RZ值與酶活性無關。

酶活性以單位U表示：即1分鐘將1μmol底物轉化為產物所需的酶量。酶變性后，RZ值不變但活性降低，因此使用酶制劑時，酶活性單位比RZ值更為重要。

2.堿性磷酸酶（AP）：大腸桿菌來源的AP分子量80kD，酶作用最適pH為8.0；小牛腸黏膜AP分子量為100kD，最適pH為9.6；后一種AP的活性高于前者。

3.β-半乳糖苷酶（β-Gal）：β-Gal來源于大腸桿菌。因人血中缺乏此酶，以其制備的酶標志物在測定時不易受到內源性酶的干擾，從而提高特異性，被用于均相酶免疫測定。

（三）常用的底物

1.HRP的底物

（1）鄰苯二胺（OPD）：是HRP最為敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下顯橙黃色，加強酸如硫酸或鹽酸終止反應后呈棕黃色，最大吸收峰在492nm波長。OPD應用液穩定性差，易變色，需新配制后在1小時內使用，顯色反應過程需避光，而且具有致癌性。

（2）四甲基聯苯胺（TMB）：TMB經HRP作用后變為藍色，加入硫酸終止反應后變為黃色，最大吸收峰波長450nm。TMB穩定性好，成色無需避光，無致突變作用，是目前ELISA中應用最廣泛的底物。缺點是水溶性差。

（3）其他：5-氨基水楊酸（5-ASA）和2，2-聯氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽（ABTS）。

2.AP的底物

常用對-硝基苯磷酸酯（p-NPP），p-NPP經AP作用后的產物為黃色對硝基酚，最大吸收峰波長為405nm。

3.β-半乳糖苷酶（β-Gal）的底物

常用4-甲基傘酮基-R-D半乳糖苷（4-MUU），酶作用后，生成高強度熒光物4-甲基傘形酮（4-MU），其敏度性較HRP高30～50倍，但測量時需用熒光計。

二、酶標記抗體或抗原

（一）酶標記抗體或抗原的制備

標記方法應符合：技術方法簡單、產率高，且重復性好；標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性；酶標志物穩定，應避免酶、抗體（抗原）以及酶標志物各自形成聚合物等。

1.戊二醛交聯法：同源雙功能交聯劑。

（1）一步法：連接AP。

①優點：操作簡便、有效，重復性好。

②缺點：交聯時分子間比例不嚴格，大小不一，影響效果。

（2）二步法：連接HRP。

先將HRP與戊二醛作用，透析除去戊二醛，在pH9.5緩沖液中再與抗體作用而形成酶標抗體。

優點：酶標志物質量較均一，標記效率也較一步法高。

2.改良過碘酸鈉法

HRP標記抗體或抗原的最常用方法。

（二）酶標記物的純化及鑒定

常用的純化方法有葡聚糖凝膠G-200/G-150過柱層析純化和50%飽和硫酸銨沉淀提純等。

常用免疫電泳或雙相擴散法進行鑒定。

1.出現沉淀線表示酶標記物中的抗體（抗原）具有免疫活性。

2.沉淀線經生理鹽水漂洗后，滴加酶的底物溶液，若沉淀線上顯色，則酶標記物中的酶活性仍保留。

三、固相載體

除均相酶免疫測定外，各種非均相酶免疫測定反應最后都需要分離游離和結合的酶標記物。

固相抗體或抗原就是把抗體或抗原結合到固相載體的表面上，是酶免疫技術中將游離和結合的酶標志物迅速分離的最常用方法。

（一）固相載體的要求　結合抗體或抗原的容量大；可將抗體或抗原牢固地固定在其表面，經長期保存和多次洗滌也不易脫落；不影響所固定的抗體或抗原的免疫反應性，而且為使反應充分進行，最好其活性基團朝向反應溶液，固相方法簡便易行，快速經濟。

（二）固相載體的種類和選擇

1.塑料制品：聚苯乙烯塑料最常采用。抗原或抗體以非共價或物理吸附方式結合到此載體上。

主要缺點是抗體（抗原）結合容量不高、固相抗體（抗原）脫吸附率較高且不均一，孔間變異大，重復性差，從而影響測定的靈敏度、精確度及檢測范圍。

目前采用非共價和化學偶聯共價吸附方法進行抗原或抗體的固相化可改善上述缺點

2.微粒：易與抗體（抗原）形成化學偶聯，且結合容量大。均勻地分散到整個反應溶液中，因此反應速度快。可制成磁化微顆粒。自動化檢測中常用。

3.膜載體：常有硝酸纖維素膜（Nc）、玻璃纖維素膜及尼龍膜等通過非共價鍵吸附抗體（抗原），廣泛用于定性或半定量斑點ELISA的固相載體。

（三）包被與封閉

1.包被：將抗原或抗體結合在固相載體上的過程。普遍使用的聚苯乙烯載體，將抗原或抗體溶于緩沖液（常用為pH9.6的碳酸鹽緩沖液）中，加于ELISA板孔中4℃過夜。包被好的固相載體在低溫可放置一段時間而不失去免疫活性。

2.封閉：包被的蛋白質濃度過低，固相載體表面不能被此蛋白質完全覆蓋，其后加入的血清標本和酶結合物中的蛋白質也會部分地吸附于固相載體表面，最后產生非特異性顯色致本底偏高，在這種情況下，需用1%～5%的牛血清白蛋白或5%～20%小牛血清再包被一次，消除此干擾，此過程稱為封閉。

第二節　酶免疫技術的分類

包括兩種：

酶免疫組織化學技術：用于組織切片或其他標本中抗原的定位。

酶免疫測定技術（EIA）：用于液體標本中抗原或抗體的定性和定量。根據抗原抗體反應后是否需將結合和游離的酶標志物分離，EIA一般可分為均相和異相兩種類型。

一、均相酶免疫測定

利用酶標志物與相應的抗原或抗體結合后，標記酶的活性會發生改變的原理，可以在不將結合和游離酶標志物分離的情況下，通過測定標記酶的活性的改變，而確定抗原或抗體的含量。該法主要用于小分子激素和半抗原（如藥物）的測定，均相法的優點是適合于自動化測定，但反應中被抑制的酶活力較小，需用靈敏的光度計測定，反應的溫度也需嚴格控制。

（一）酶放大免疫測定技術（EMIT）EMIT的基本原理是半抗原與酶結合成酶標半抗原。當與抗體結合后，所標的酶與抗體密切接觸，使酶的活性中心受到影響而活性被抑制。反應后酶活力大小與標本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測定結果就可推算出標本中半抗原的量。

（二）克隆酶供體免疫分析（CDEIA）DNA重組技術可分別合成某種功能酶（如β-D半乳糖苷酶）分子的兩個片段，大片段稱為酶受體（EA），小分子稱作酶供體（ED），兩者單獨均無酶活性，一定條件下結合形成四聚體方具酶活性。克隆酶供體免疫測定（CDEIA）的反應模式為競爭法。

標本中的抗原和酶供體（ED）標記的抗原與特異性抗體競爭結合，形成兩種抗原抗體復合物。ED標記的抗原與抗體結合后由于空間位阻，不再能與酶受體（EA）結合，而游離的ED標記的抗原上的ED可和EA結合，形成具有活性的酶，加入底物測定酶活性，酶活力的大小與標本中抗原含量成正比。

二、異相酶免疫測定

是目前應用最廣泛的一類標記免疫測定技術。

（一）異相液相酶免疫測定　主要用于檢測樣品中極微量的短肽激素和某些藥物等小分子半抗原。酶標志物具有更好的穩定性，且無放射性污染。

1.平衡法：將待測樣品抗原、酶標抗原及特異性抗體進行一次性溫育，待反應達平衡后，測定離心沉淀物（酶標抗原抗體復合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。

2.非平衡法：先將樣品（或標準品）與抗體混合反應達平衡，然后加入酶標記抗原繼續溫育一段時間，測定離心沉淀物（酶標抗原抗體復合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。

（二）固相酶免疫測定　酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。

第三節　酶聯免疫吸附試驗

一、基本原理

把抗原或抗體結合到固相載體表面，測定時將受檢樣品和酶標記抗原或抗體與結合在固相載體上的抗原或抗體反應形成抗原抗體復合物；洗去未結合成分；加入底物后，底物被固相載體上的酶催化變成有色產物。故：

①固相的抗原或抗體；

②酶標記的抗原或抗體；

③酶反應的底物三種試劑為反應必備。

二、方法類型及反應原理

（一）檢測抗原的方法

1.雙抗體夾心法：屬于非競爭結合，檢測抗原最常用的方法，檢測含有至少兩個抗原決定簇的多價抗原。原理是先將特異性抗體與固相載體連接；加入待測標本，形成固相抗原抗體復合物；再加入酶標抗體形成雙抗體夾心，洗滌；加底物顯色，根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量檢測。

如血清標本中有類風濕因子（RF）存在，則可出現假陽性反應，因為RF是一種抗變性IgG的自身抗體，它能與多種動物的變性IgG的Fc部分結合，因此RF就可作為固相抗體和酶標抗體之間的橋接抗原。

雙抗體夾心法只適用于二價或以上的較大分子抗原的測定，不能用于小分子半抗原的檢測。

2.雙位點一步法：針對抗原分子上兩個不同且空間距離較遠的決定簇，包被使用一種單抗，酶標記使用另一種單抗。測定時將待測抗原和酶標抗體同時加入，溫育、洗滌，加入底物顯色。若待測抗原濃度過高時，過量的抗原可分別同固相抗體和酶標抗體結合而抑制夾心復合物的形成，出現鉤狀效應，顯色降低，甚至假陰性。必要時可將標本經過適當稀釋后重復測定。

3.競爭法

用于測定小分子抗原，如藥物、激素等。原理為先用抗小分子的特異性抗體包被固相，然后同時加入待測樣本和酶標記的小分子，兩種小分子競爭與固相上的抗小分子的特異性抗體結合，溫育一定時間后洗滌，加入酶底物顯色。

特點是：

①酶標記抗原與樣品或標準品中的非標記抗原具有相同的與固相抗體結合的能力；

②反應體系中，固相抗體和酶標抗原是固定限量，且前者的結合位點少于酶標記和非標記抗原的分子數量和；

③免疫反應后，結合于固相載體上復合物中被測定的酶標抗原的量（酶活性）與樣品或標準品中非標記抗原的濃度成反比。

（二）檢測抗體的方法

1.間接法：最常用的方法，屬非競爭性結合試驗。原理：將抗原包被在固相載體上，加入待測樣本形成固相抗原-受檢抗體復合物；經溫育洗滌后，加入酶標二抗，常用羊抗人IgG，在固相上即形成固相抗原-待測抗體-酶標抗抗體復合物，加入底物后根據顯色的深淺確定待測抗體含量。多用于檢測IgG類型抗體。

2.雙抗原夾心法

此法可檢測各類抗體，因此雙抗原夾心法的靈敏度和特異性要高于間接法。其原理及操作步驟類似雙抗體夾心法，也可采用一步法。由于機體產生抗體IgG的效價有限，一般不會出現鉤狀效應。

臨床上乙型肝炎表面抗體的測定常用此法。

3.競爭法

一般抗體檢測是較少采用，當相應抗原材料中含有與抗人IgG反應的物質，而且不易得到足夠的純化抗原或抗原的結合特異性不穩定時，可采用這種方法測定抗體，目前臨床運用較多的是乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）和乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）的檢測。

競爭抗體與待測抗體的特異性及親和力越接近，則測定的可靠性越強。

4.捕獲法又稱反向間接法

主要用于血清中某種抗體亞型成分（如IgM）的測定，最常用的是病原體急性感染診斷中的IgM型抗體。原理：先將針對IgM的二抗包被于固相載體，加入待測標本，其中IgM類抗體可被固相抗體捕獲，再加入特異性抗原，其與固相上捕獲的IgM抗體結合后，加入酶標記特異性抗原的抗體，形成固相二抗-IgM-抗原-酶標記抗體復合物，加底物顯色后，即可對待測標本中IgM是否存在及含量進行測定。

第四節　酶免疫測定的應用

幾乎所有的可溶性抗原抗體系統均可用酶免疫測定檢測。

均相酶免疫測定主要用于藥物和小分子物質的檢測。

非均相免疫測定中的ELISA在多種物質的檢測中被廣泛的使用。

實戰演練

目前酶免疫技術中應用較廣、提純較簡便的酶是

A.脲酶

B.堿性磷酸酶

C.葡萄糖氧化酶

D.辣根過氧化物酶

E.半乳糖苷酶

『正確答案』D

『答案解析』HRP是目前在酶聯免疫吸附試驗中應用最為廣泛的標記用酶。

酶放大免疫測定技術（EMIT）主要用來檢測

A.抗原

B.抗體

C.半抗原

D.不完全抗體

E.抗原抗體復合物

『正確答案』C

『答案解析』酶放大免疫測定技術（EMIT）主要用來檢測半抗原。

以下關于酶標記抗體或抗原不正確的是

A.過碘酸鹽氧化法只用于HRP的標記

B.未標記上的游離的抗體與酶標記抗體競爭固相上的抗原

C.制備的標記物無須純化，因為游離的酶或未標記上的抗原或抗體成分在測定過程中被洗掉

D.制備的結合物需要純化

E.標價物需要鑒定

『正確答案』C

『答案解析』每批制備的酶標志物都要進行質量和標記率的鑒定，質量鑒定包括酶活性和抗體（抗原）的免疫活性鑒定。常用免疫電泳或雙相擴散法，出現沉淀線表示酶標記物中的抗體（抗原）具有免疫活性。沉淀線經生理鹽水反復漂洗后，滴加酶的底物溶液，若在沉淀線上能顯色，則表示酶標記物中的酶活性仍保留。也可直接用ELISA方法測定。

關于酶聯免疫吸附試驗（ELISA）錯誤的是

A.屬于液相和固相酶免疫測定

B.固相常用聚苯乙烯反應板

C.通過洗滌除去未結合成分

D.底物顯色

E.既能定性又能定量分析

『正確答案』A

『答案解析』酶聯免疫吸附試驗（ELISA）屬于固相酶免疫測定。

酶免疫技術中最常用的固相載體是

A.聚氯乙烯

B.聚苯乙烯

C.硝酸纖維素膜

D.瓊脂糖

E.尼龍膜

『正確答案』B

『答案解析』酶免疫技術中最常用的固相載體是聚苯乙烯。

酶免疫技術中懸浮在溶液中具有液相反應速率的固相載體是

A.聚氯乙烯

B.聚苯乙烯

C.硝酸纖維素膜

D.磁性微粒

E.尼龍膜

『正確答案』D

『答案解析』酶免疫技術中懸浮在溶液中具有液相反應速率的固相載體是磁性微粒。

將抗原或抗體固相化的過程稱為

A.吸附

B.包被

C.封閉

D.標記

E.交聯

『正確答案』B

『答案解析』將抗原或抗體固相化的過程稱為包被。

ELISA技術中，最常用來檢測抗體的方法是

A.雙抗體夾心法

B.間接法

C.競爭法

D.捕獲法

E.應用生物素和親和素的ELISA

『正確答案』B

『答案解析』ELISA技術中，最常用來檢測抗體的方法是間接法。

下列有關雙位點一步法ELISA的敘述中，錯誤的是

A.使用針對同一抗原不同決定簇的兩種單克隆抗體作為酶標抗體

B.一種單克隆抗體作為固相抗體，另一種作為酶標抗體

C.采用高親和力的單克隆抗體將提高測定的敏感性和特異性

D.可使標本和酶標抗體同時加入

E.標本中抗原過高時，會出現鉤狀效應

『正確答案』A

『答案解析』雙位點一步法：在雙抗體夾心法基礎上，進一步發展了雙位點一步法。該法是針對抗原分子上兩個不同且空間距離較遠的決定簇的兩種單克隆抗體，即包被使用一種單抗，酶標記使用另一種單抗。測定時將含待測抗原標本和酶標抗體同時加入進行反應，兩種抗體互不干擾，經過一次溫育和洗滌后，即可加入底物進行顯色測定。但當待測抗原濃度過高時，過量的抗原可分別同固相抗體和酶標抗體結合而抑制夾心復合物的形成，出現鉤狀效應（hook

effect），顯色降低，嚴重時可出現假陰性結果。必要時可將標本經過適當稀釋后重復測定。這是應用此法必須要注意的問題。

ELISA技術中待測孔（管）顯色顏色的深淺與待測抗原或抗體呈負相關的是

A.雙抗體夾心法

B.雙位點一步法

C.間接法測抗體

D.競爭法

E.捕獲法

『正確答案』D

『答案解析』ELISA技術中待測孔（管）顯色顏色的深淺與待測抗原或抗體呈負相關的是競爭法。

雙位點一步法鉤狀效應產生是因為

A.標本中的抗原不純

B.洗滌不充分

C.孵育時間過長

D.酶標抗體過量

E.標本中的抗原濃度過高

『正確答案』E

『答案解析』雙位點一步法鉤狀效應產生是因為標本中的抗原濃度過高。

用一種標記物可檢測多種與抗原相應的抗體的ELISA方法是

A.雙抗體夾心法

B.間接法

C.競爭法

D.雙抗原夾心法

E.雙位點一步法

『正確答案』B

『答案解析』用一種標記物可檢測多種與抗原相應的抗體的ELISA方法是間接法。

關于ELISA競爭法的敘述中，正確的是

A.只用于檢測抗原

B.待測成分優先于酶標記物與固相結合C.被測物含量多則標記物被結合的機會少

D.待測管顯色顏色越淡表示被測物含量越少

E.只用于檢測抗體

『正確答案』C

『答案解析』關于ELISA競爭法的敘述中，正確的是被測物含量多則標記物被結合的機會少。

ELISA間接法中固相上包被的是

A.抗體

B.不完全抗體

C.抗原

D.抗抗體

E.酶標抗體

『正確答案』C

『答案解析』ELISA間接法中固相上包被的是抗原。

臨床上檢測IgM抗體常用的ELISA方法是

A.雙抗體夾心法

B.間接法

C.競爭法

D.雙抗原夾心法

E.捕獲法

『正確答案』E

『答案解析』捕獲法，又稱反向間接法。主要用于血清中某種抗體亞型成分（如IgM）的測定，目前最常用的是病原體急性感染診斷中的IgM型抗體。

酶免疫技術分為兩類酶免疫測定，它們是

A.均相和異相

B.固相和液相

C.酶免疫組化和酶免疫測定

D.均相和固相

E.異相和液相

『正確答案』C

『答案解析』酶免疫技術分為兩類酶免疫測定，它們是酶免疫組化和酶免疫測定。

ELISA一般不用于檢測

A.病原體及其抗體

B.Ig、補體、腫瘤標志物等蛋白質

C.非肽類激素

D.藥物

E.半抗原

『正確答案』E

『答案解析』ELISA一般不用于檢測半抗原。半抗原一般用均相酶免疫測定法。