第一篇：土壤有機碳檢測方法介紹與自我總結

土壤有機碳檢測方法介紹

土壤有機碳是以有機物形式存在于土壤中的C元素的一種存在形式，作為土壤碳庫中的重要組成部分，一方面在土壤品質監測中是一項重要的檢測項目，另一方面對研究空氣中二氧化碳來源也有很大的作用。

土壤有機碳根據其穩定性可分為活性有機碳、慢性有機碳和惰性有機碳三種，其中活性有機碳是反映土壤肥力和土壤管理措施的較好指標。而根據土壤中有機碳的溶解性質又可分為溶解性有機碳和非溶解性有機碳。非溶解性有機碳屬于惰性有機碳，由于不能溶解不能被植物吸收也不易產生遷移，所以在土壤質量監控和環境監測方面沒有實際意義，而活性有機碳和慢性有機碳大多屬于溶解性有機碳。

目前土壤有機碳的檢測方法主要是干燒法和濕氧化法。常用的重鉻酸鉀和濃硫酸濕氧化滴定技術由于不能確保樣品完全氧化，檢測效果較差檢測結果必須進行修正。而干燒法目前又有土壤直接高溫燃燒和土壤經溶液萃取后高溫燃燒溶液兩種方法。

土壤直接燃燒法大多需在樣品燃燒前使用磷酸溶液或鹽酸溶液去除土壤中的無機碳。磷酸酸性較弱不易將土壤中的難溶碳酸鹽氧化（西南地區廣布卡斯特地貌，碳酸巖形成的土壤比重較高），而直接燃燒需要在900℃以上的溫度才能保證燃燒完全，碳酸鹽在800℃左右就會分解，所以檢測結果受無機碳干擾明顯。鹽酸溶液雖然可將大部分碳酸鹽去除，但是殘留的鹽酸會對催化劑和檢測器的壽命造成嚴重影響，使用時必須將樣品再次淋洗、烘干才能上機檢測，沖洗過程中又會造成溶解性有機碳的損失，所以檢測結果也不是很準確。這正是Tekmar在第6帶產品設計生產時取消固體進樣器的一個主要原因。所以相對來說檢測更準確的則是溶液萃取法。

溶液萃取法是通過一定濃度的鹽溶液將土壤中的有機碳轉移至液相后再對溶液進行檢測的方法。一方面該方法只將溶液中的溶解性碳轉移至溶液，溶液再上儀器進行檢測，檢測過程中儀器會自動清除無機碳，所以檢測結果準確可靠；而不溶解性碳（包括難溶性碳酸巖和不溶性有機碳）不是土壤的有效養分或污染物所以實際監測意義不大，這也是為什么中國農科院和中科院下屬單位長期將溶液萃取法作為土壤有機碳檢測手段的根本原因。

第二篇：骨質疏松癥與自我檢測

骨質疏松癥與自我檢測

信息來源：預防保健科 時間：2013-02-20

1.什么是骨質疏松癥？

骨質疏松癥是一種骨質變脆，從而容易發生骨折的疾病。當人體成長到30歲左右，骨骼強度達到頂峰，然后骨骼強度開始下降，特別是在步入老年后，骨量下降尤為明顯。而女性在絕經后的3-5年內，因為雌激素的減少，骨量也會快速丟失。骨質的流失會造成骨骼內部產生海綿樣的小孔，骨骼異常疏松，脆弱不堪，即使是輕微的創傷或無外傷的情況下容易發生骨折。

2.那些人容易患骨質疏松癥？

① 已經絕經的婦女和65歲以上的人群 ② 有骨質疏松家族史的人群

③ 長期進行低鈣飲食、營養缺乏的人群 ④ 身材消瘦、體重偏輕的人群

⑤ 過早閉經或進行過卵巢切除手術的人群 ⑥平時有酗酒或大量吸煙的習慣 ⑦ 愛喝濃茶或長期喝咖啡

⑧ 患有糖尿病、腎功能不全等疾病，以及因為患病而需要長期、大劑量使用免疫抑制劑、糖皮質激素的人群。

3.怎樣自我檢測骨質疏松？ ①

腰背疼痛、骨痛 ②

身材變矮 ③

駝背 ④

腿抽筋

⑤

脊柱、髖部或腕部任一部位的骨折。

只要出現上面任意一條，便可懷疑您存在骨質疏松。

第三篇：電腦無法開機,自我檢測方法

將BIOS電池放電（恢復BIOS出廠默認值）建議插拔一下顯卡、內存，清理一下衛生，并且擦亮顯卡、內存的金手指。

電腦開機無顯示故障的排除方法。

第1步：首先檢查電腦的外部接線是否接好，把各個連線重新插一遍，看故障是否排除。第2步：如果故障依舊，接著打開主機箱查看機箱內有無多余金屬物，或主板變形造成的短路，聞一下機箱內有無燒焦的糊味，主板上有無燒毀的芯片，CPU周圍的電容有無損壞等。第3步：如果沒有，接著清理主板上的灰塵，然后檢查電腦是否正常。

第4步：如果故障依舊，接下來拔掉主板上的Reset線及其他開關、指示燈連線，然后用改錐短路開關，看能否能開機。

第5步：如果不能開機，接著使用最小系統法，將硬盤、軟驅、光驅的數據線拔掉，然后檢查電腦是否能開機，如果電腦顯示器出現開機畫面，則說明問題在這幾個設備中。接著再逐一把以上幾個設備接入電腦，當接入某一個設備時，故障重現，說明故障是由此設備造成的，最后再重點檢查此設備。

第6步：如果故障依舊，則故障可能由內存、顯卡、CPU、主板等設備引起。接著使用插拔法、交換法等方法分別檢查內存、顯卡、CPU等設備是否正常，如果有損壞的設備，更換損壞的設備。

第7步：如果內存、顯卡、CPU等設備正常，接著將BIOS放電，采用隔離法，將主板安置在機箱外面，接上內存、顯卡、CPU等進行測試，如果電腦能顯示了，接著再將主板安裝到機箱內測試，直到找到故障原因。如果故障依舊則需要將主板返回廠家修理。

第8步：電腦開機無顯示但有報警聲，當電腦開機啟動時，系統BIOS開始進行POST（加電自檢），當檢測到電腦中某一設備有致命錯誤時，便控制揚聲器發出聲音報告錯誤。因此可能出現開機無顯示有報警聲的故障。對于電腦開機無顯示有報警聲故障可以根據BIOS報警聲的含義，來檢查出現故障的設備，以排除故障。

無法開機，指示燈不亮故障診斷

當電腦出現無法開機故障時，按照下面的方法進行檢測：

（1）首先檢查電腦的電源線是否連接好。如果正常，接著打開主機箱檢查主板電源線是否與主板電源接口連接正常。

（2）如果連接正常，接著查看主機箱內有無多余的金屬物或觀察主板有無與機箱接觸，如果有，則可能由于短路造成的無法開機。

（3）如機箱中沒有多余的金屬物，主板也沒有與機箱接觸，接著拔掉主板電源開關線，用鑷子將主板電源開關接口短路，電腦如果能夠啟動，則可能是機箱上的電源開關連接線接觸不良或損壞，維修電源開關線即可。

（4）如果將主板電源開關短路電腦不能啟動，接著將主板上的電源線拔下，用一根導線將連接主板電源接口的電源接頭的綠線孔和旁邊的黑線孔連接短路，觀察電源的風扇是否轉動，如果電扇不轉動，則可能是電源損壞，更換電源。

如果電源風扇轉動，則故障可能由主板的開關電路故障造成，接著用萬用表測試主板的開關電路，并排除故障。

Phoenix的BIOS自檢響鈴及其意義 1短 系統啟動正常

1短1短1短 系統加電初始化失敗 1短1短2短 主板錯誤 1短1短3短 CMOS或電池失效 1短1短4短 ROM BIOS校驗錯誤 1短2短1短 系統時鐘錯誤 1短2短2短 DMA初始化失敗 1短2短3短 DMA頁寄存器錯誤 1短3短1短 RAM刷新錯誤 1短3短2短 基本內存錯誤 1短3短3短 基本內存錯誤

1短4短1短 基本內存地址線錯誤 1短4短2短 基本內存校驗錯誤 1短4短3短 EISA時序器錯誤 1短4短4短 EISA NMI口錯誤 2短1短1短 前64K基本內存錯誤 3短1短1短 DMA寄存器錯誤 3短1短2短 主DMA寄存器錯誤

3短1短3短 主中斷處理寄存器錯誤 3短1短4短 從中斷處理寄存器錯誤 3短2短4短 鍵盤控制器錯誤

3短1短3短 主中斷處理寄存器錯誤 3短4短2短 顯示錯誤 3短4短3短 時鐘錯誤

4短2短2短 關機錯誤 4短2短3短 A20門錯誤

4短2短4短 保護模式中斷錯誤 4短3短1短 內存錯誤 4短3短3短 時鐘2錯誤 4短3短4短 時鐘錯誤

4短4短1短 串行口錯誤 4短4短2短 并行口錯誤

4短4短3短 數字協處理器錯誤

AMI 的BIOS自檢響鈴及其意義

1短: 內存刷新失敗。更換內存條。

2短: 內存ECC較驗錯誤。在CMOS Setup中將內存關于ECC校驗的選項設為Disabled就可以解決，不過最根本的解決辦法還是更換一條內存。

3短: 系統基本內存（第1個64kB）檢查失敗。換內存。4短: 系統時鐘出錯。

5短: 中央處理器（CPU）錯誤。6短: 鍵盤控制器錯誤。

7短: 系統實模式錯誤，不能切換到保護模式。

8短: 顯示內存錯誤。顯示內存有問題，更換顯卡試試。

9短: ROM BIOS檢驗和錯誤。

1長3短: 內存錯誤。內存損壞，更換即可。

1長8短: 顯示測試錯誤。顯示器數據線沒插好或顯示卡沒插牢。高頻率常響： CPU過熱報警。

Award 的BIOS自檢響鈴及其意義

1短: 系統正常啟動。這是我們每天都能聽到的，也表明機器沒有任何問題。2短: 常規錯誤，請進入CMOS Setup，重新設置不正確的選項。

1長1短: RAM或主板出錯。換一條內存試試，若還是不行，只好更換主板。1長2短: 顯示器或顯示卡錯誤。

1長3短: 鍵盤控制器錯誤。檢查主板。

1長9短: 主板Flash RAM或EPROM錯誤，BIOS損壞。換塊Flash RAM試試。不斷地響（長聲）: 內存條未插緊或損壞。重插內存條，若還是不行，只有更換 一條內存。

不停地響: 電源、顯示器未和顯示卡連接好。檢查一下所有的插頭。重復短響: 電源問題。無聲音無顯示: 電源問題。

第四篇：碳計量方法專題培訓培訓總結

“碳計量方法專題培訓”培訓總結

2010年4月2日，本人作為北京經開投資開發股份有限公司成員參加了國家發改委培訓中心主辦的“碳計量方法專題培訓班”。

我國是《聯合國氣候變化框架公約》和《京都議定書》的締約方，中國政府已鄭重向全世界宣布：到2020年，單位國內生產總值（GDP）二氧化碳排放量比2005年下降40%-45%。國務院常務會議在提出上述目標的同時，還提出要把綠色發展作為我國在可持續發展框架下應對氣候變化的重要手段。國家發展和改革委員會是中國政府應對氣候變化工作的綜合協調主管部門。因此，學習碳排放計算方法是落實控制目標要求的一項必不可少的技術基礎。

通過本次培訓和國家發改委CDM中心主任揚宏偉的講授，系統學習了以下內容：目前我國節能減排工作面臨的形勢和任務；節能提高能效的政策措施；優化經濟結構的主要路徑和方法；優化能源結構的主要路徑和方法；植樹造林，增加碳匯的戰略思路；我國實用節能減排技術介紹與分析；國際通行碳計量、碳認證方法；不同領域碳計量、碳認證案例分析與介紹；清潔發展機制項目中介公司、節能技術推廣公司與開展不同領域碳計量、碳認證業務工作的有機結合。

參加本次會議的是全國各地區與碳排放相關行業的管理人員，會上我代表北京經開公司與各地政府有關人員及相關企業界人士進行了相關交流和業務探討。尤其是，可再生能源和節能、環保、金融機構等相關行業項目管理人員對經開公司目前開展的低碳高端產業園區具有濃厚的興趣。在會后，我們介紹了目前北京經開公司開展的低碳產業、低碳產業地產等相關碳計量工作的進展和公司未來低碳戰略的定位等。

總體來說，本次培訓收獲很大，強烈感受到目前國內與碳排放相關的整個行業迅猛發展的勢頭，從政府節能減排、碳政策的制定，研究機構的碳計量、碳產業、碳研發，再到企業的節能減排、碳金融、碳融資、項目合作等。發展低碳經濟必將成為勢不可擋的中國經濟發展潮流。

第五篇：細胞凋亡檢測方法總結

1、磷脂酰絲氨酸外翻分析（Annexin V法）

磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine, PS）正常位于細胞膜的內側，但在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環境中(圖3)。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白，能與PS高親和力特異性結合。將Annexin-V進行熒光素（FITC、PE）或biotin標記，以標記了的Annexin-V作為熒光探針，利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。

PS轉移到細胞膜外不是凋亡所獨特的，也可發生在細胞壞死中。兩種細胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細胞膜是完好的，而細胞壞死在其早期階段細胞膜的完整性就破壞了。

碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI能夠透過細胞膜而使細胞核紅染。因此將Annexin-V與PI匹配使用，就可以將凋亡早晚期的細胞以及死細胞區分開來。

在雙變量流式細胞儀的散點圖上，左下象限顯示活細胞，為（FITC-/PI-）；右上象限是非活細胞，即壞死細胞，為（FITC+/PI+）；而右下象限為早期凋亡細胞，顯現（FITC+/PI-）。右上象限為獨立的核（FITC-/PI+）。

Annexin-V可以再鈣離子存在的情況下，和細胞表面外翻的磷脂酰絲氨酸結合，而磷脂酰絲氨酸的外翻是細胞凋亡的早期事件。

PI是一種DNA染料，當細胞凋亡的晚期，細胞的細胞膜通透性增加，PI從而進入細胞核與DNA結合。

所以

Annexin-V陰性-PI陰性 代表正常細胞

Annexin-V陽性-PI陰性 代表凋亡早期的細胞

Annexin-V陽性-PI陽性 代表凋亡晚期的細胞或壞死的細胞

Annexin-V陰性-PI陽性 一般不存在這一群細胞，如果出現這一團細胞可能是PI標記時間過長，或者操作過于劇烈而傷害到原本正常的細胞。（還有一種說法是凋亡最后階段的細胞，細胞已經沒有細胞膜了說以不結合Annexin-V而只結合PI）

2.線粒體膜電位變化的檢測

實驗原理

JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針?？梢詸z測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，JC-1 聚集在線粒體的基質(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以產生紅色熒光（FL-2 通道）；在線粒體膜電位較低時，JC-1 不能聚集在線粒體的基質中，此時JC-1 為單體(monomer)，可以產生綠色熒光（FL-1 通道）。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過 JC-1 從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降，同時也可以用JC-1 從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。

JC-1 單體的最大激發波長為 514nm，最大發射波長為 527nm；JC-1 聚合物(J-aggregates)的最大激發波長為 585nm，最大發射波長為 590nm。

A-C 為對照，細胞亞群(R1)在 FL-2和FL-1 通道同時顯示 JC-1 的熒光信號。D-F 顯示 JC-1在FL-2通道熒光信號降低的細胞亞群(R2)顯著增加，證明線粒體膜電位△Ψm 下降，細胞發生凋亡。凋亡與線粒體膜電位的去極化相關。細胞凋亡時線粒體膜電位發生去極化，JC-1進入線粒體以單體形式存在，僅在Fl-1通道有熒光。

檢測原理

正常細胞：JC-1聚集在線粒體內，形成多聚體，呈鮮紅色熒光，細胞質內有綠色；即紅光++，綠光++。

凋亡細胞：由于線粒體跨膜電位的破壞，不能聚集到線粒體內，紅色熒光減弱，單體的形式存在于胞質內發綠色熒光。即紅光+，綠光++

3、Caspase-3活性的檢測

Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中caspase-3為關鍵的執行分子，它在凋亡信號傳導的許多途徑中發揮功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞漿中，在凋亡的早期階段，它被激活，活化的Caspase-3由兩個大亞基（17KD）和兩個小亞基（12KD）組成，裂解相應的胞漿胞核底物，最終導致細胞凋亡。但在細胞凋亡的晚期和死亡細胞，caspase-3的活性明顯下降。

(1)Western blot 分析Procaspase-3的活化，以及活化的Caspase-3及對底物多聚ADP-核糖聚合酶[poly（ADP-ribose）polymerase，PARP]等的裂解。

(2)熒光分光光度計分析

檢測原理：活化的Caspsae與其特異性底物DEVD-pNA結合切割，釋放出游離pNA，通過測定其吸光度，根據其發光強度的高低代表其活化程度。

(3)流式細胞術分析

PharMingen 多克隆或單克隆 Caspase-3 抗體可以識別 Caspase-3 活化形式，它特異性識別由無活性的 Pro-Caspase-3 活化水解后的暴露的斷裂端, 熒光標記多克隆兔抗 Active-Caspase-3 抗體為流式細胞術分析凋亡細胞的 Caspase-3 而設計。1、2、3是早期凋亡現象；

4、5是晚期凋亡現象。

4、TUNEL法(末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記)

細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端，從而可進行凋亡細胞的檢測，這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法（terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL）。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂，因而沒有3'-OH形成，很少能夠被染色。TUNEL實際上是分子生物學與形態學相結合的研究方法，對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色，能準確地反應細胞凋亡典型的生物化學和形態特征，可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養的細胞和從組織中分離的細胞的細胞形態測定，并可檢測出極少量的凋亡細胞，因而在細胞凋亡的研究中被廣泛采用。

5、DNA ladder 細胞凋亡晚期，核酸內切酶在核小體之間剪切核DNA，產生大量長度在180-200 bp 的DNA片段。細胞經處理后，采用常規方法分離提純DNA，進行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色，在凋亡細胞群中可觀察到典型的DNA ladder。在瓊脂糖凝膠電泳上表現為梯形電泳圖譜(DNA ladder)。壞死細胞---連續性條帶。

一、形態學觀察方法

1、HE染色、光鏡觀察：凋亡細胞呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。【蘇木精 — 伊紅染色法，(hematoxylin-eosin staining)，簡稱HE染色法。蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ；伊紅為酸性染料，主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色?！?/p>

2、丫啶橙（AO）染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側，可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。

3、臺盼藍染色：如果細胞膜不完整、破裂，臺盼藍染料進入細胞，細胞變藍，即為壞死。如果細胞膜完整，細胞不為臺盼藍染色，則為正常細胞或凋亡細胞。此方法對反映細胞膜的完整性，區別壞死細胞有一定的幫助。

4、透射電鏡觀察：可見凋亡細胞表面微絨毛消失，核染色質固縮、邊集，常呈新月形，核膜皺褶，胞質緊實，細胞器集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小體和凋亡小體被臨近巨噬細胞吞噬現象。

一、細胞凋亡的形態學檢測

1、光學顯微鏡和倒置顯微鏡

（1）未染色細胞：凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現發泡現象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。

（2）染色細胞：常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化，核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態。

2、熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡

一般以細胞核染色質的形態學改變為指標來評判細胞凋亡的進展情況。常用的DNA特異性染料有：HO 33342(Hoechst 33342)，HO 33258(Hoechst 33258), DAPI。三種染料與 DNA的結合是非嵌入式的，主要結合在DNA的A-T堿基區。紫外光激發時發射明亮的藍色熒光。

Hoechst是與DNA特異結合的活性染料，儲存液用蒸餾水配成1mg/ml的濃度，使用時用PBS稀釋成終濃度為2~5mg/ml。

DAPI為半通透性，用于常規固定細胞的染色。儲存液用蒸餾水配成1mg/ml的濃度，使用終濃度一般為0.5 ~1mg/ml。

結果評判：細胞凋亡過程中細胞核染色質的形態學改變分為三期：Ⅰ期的細胞核呈波紋狀（rippled）或呈折縫樣（creased），部分染色質出現濃縮狀態；Ⅱa期細胞核的染色質高度凝聚、邊緣化；Ⅱb期的細胞核裂解為碎塊，產生凋亡小體(圖1)。

3、透射電子顯微鏡觀察

結果評判：凋亡細胞體積變小，細胞質濃縮。凋亡Ⅰ期（pro-apoptosis nuclei）的細胞核內染色質高度盤繞，出現許多稱為氣穴現象（cavitations）的空泡結構(圖2)；Ⅱa期細胞核的染色質高度凝聚、邊緣化；細胞凋亡的晚期，細胞核裂解為碎塊，產生凋亡小體。圖2

七、凋亡相關蛋白TFAR19蛋白的表達和細胞定位分析

TFAR19（PDCD5）是由本研究室在國際上首先報導的一個擁有自己知識產權的人類新基因，前期的功能研究表明，它是促進細胞凋亡的增強劑。利用熒光素（FITC）標記的TFAR19單克隆抗體為探針，對細胞凋亡過程中TFAR19蛋白的表達水平及定位研究發現，凋亡早期TFAR19表達水平增高并出現快速核轉位現象，伴隨著細胞核形態學的變化，持續較長時間，在凋亡小體中仍然可見。同時我們發現，凋亡早期TFAR19蛋白的核轉位早于磷脂酰絲氨酸（PS）外翻和細胞核DNA的片段化，提示TFAR19蛋白的核轉位是細胞凋亡更早期發生的事件之一。進一步的研究證明，凋亡早期TFAR19的核轉位具有普遍意義，不同細胞凋亡早期均出現TFAR19高表達和核轉位。這為研究細胞凋亡早期所發生的事件，提供了一種新的技術和指標。