第一篇：實驗室小浮選實驗方法

試驗室小浮選試驗方法

一 試驗步驟 調試浮選機，使轉速、充氣量達到規定值。2 稱量煤樣(稱準到0.1克)（144g）。向浮選機內先加入約1/3容積的水，使水位達到第一道標線。開動浮選機，加入稱好的干煤樣。待攪拌至煤全部潤濕后再加入清水，使礦漿液面達到第二道標線。礦漿凈體積約1.5升。開動計時器。預攪拌兩分鐘后，向礦漿液面下加入預先量好體積的捕收劑，1分鐘后，再向礦漿頁面下加入預先量好體積的起泡劑。10秒鐘后，以30次/分的速度，沿浮選槽整個泡沫生成面，按一定的刮泡深度刮泡3分鐘，泡沫產品集中于一個器皿中。要控制補水速度，使在整個刮泡期間保持礦漿液面恒定。刮泡階段后期，應用洗瓶將粘在浮選槽壁上的顆粒清洗至礦漿中 3分鐘后，關閉浮選機，并停止補水，把尾煤排放至專門容器內。粘在浮選槽壁上的顆粒要清洗至尾煤容器中。粘在刮板及浮選槽唇邊的顆粒應清洗至精煤產品中。向浮選槽加人清水，并開動浮選機攪拌清洗直至浮選槽干凈為止。

注 ：各道浮選工序操作時間要嚴格按照上述規定執行，誤差不超過兩秒。精煤和尾煤分別脫水（過濾），置于不超過75℃的恒溫干燥箱中進行干操。冷卻至空氣干燥狀態后，分別稱重、測定灰分，必要時(當浮選人料硫分超過1%時)測定硫分。重復試驗一次。

二 試驗注意事項 精煤和尾煤重最之和(即計算入料重量)與實際浮選人料重量相比，其損失率不得超過2%，2浮選入料的加權平均灰分與化驗灰分之差應符合下列規定: a.煤樣灰分小于20%時，相對誤差不得超過士5%，b．煤樣灰分大于或等于20%時，絕對誤差不得超過±0.5%。3 兩次平行試驗的精煤產率允許誤差應小于或等于1.6%。精煤灰分允許誤差:當精煤灰分小于或等于10%時，絕對誤差小于或等于0.4%，當精煤灰分大于10%時，小于或等于0.5%。4 試驗過程中的加藥時間要控制好。

第二篇：實驗室實驗教師崗位職責

實驗室實驗教師崗位職責

1、實驗教師要根據學校的學期工作計劃和教研組的教學進度計劃，制定本學科的實驗教學工作學期計劃。

2、根據本學科教材的要求，要保證全部演示實驗和學生分組實驗的正常開出，并認真落實各項制度。

3、實驗教師要刻苦鉆研業務。要通讀本學科教材，熟練掌握本學科全部演示實驗和學生分組實驗的操作技術，并對實驗現象做出恰當的理論解釋。

4、要按時開出實驗課，積極協助任課教師輔導好學生的實驗課，保證實驗課正常進行，并認真填寫好實驗記錄單。

5、與任課教師一起組織好學生的科技活動、實驗競賽、實驗復習和考評工作，為學生實驗技能的訓練和提高，提供有效的服務。

6、熟悉實驗室、儀器室、準備室的管理規則，熟悉儀器業務知識，及時編報儀器采購計劃，對儀器要精心管理，科學存放，及時維護。掌握一套檢測和維修的過硬本領，保證儀器的完好率，要適應新科學、新技術在實驗教學中應用的新形勢，不斷更新自己的業務知識。

7、要積極開展實驗教學研究活動，不斷改進實驗方法，提高實驗效果，大力開展自制教具的研制活動，積極自制，代用和改進教具，創造條件，多開實驗。

8、注意培養學生良好的、科學的實驗習慣，要求他們遵守實驗室紀律，愛護設備，精心使用儀器，體現文明禮貌的作風。

9、做好實驗室、儀器室、準備室的衛生工作、安全防范和財產保護工作，熟悉防火器材的使用，經常檢查安全措施的落實情況。根據儀器設備性能，定期完成維修保養工作。

10、調進或調出實驗室，要辦好交接手續，及時完成教學儀器帳目管理任務，帳目清楚，實物點清，以保證實驗室工作正常進行。

實驗室管理規則

一、實驗前，學生要做好預習準備。

二、在實驗過程中，要仔細觀察各種實驗的情況。作好記錄，認真填寫好實驗報告。要求自己清楚，數據、曲線、表格應該按規定格式填寫、描述。在規定時間內上交。

三、實驗時應注意安全，使用玻璃儀器時，當心割破手指。使用易爆、易燃、腐蝕性、有毒性試劑時，應該、聽從指導老師的指導，嚴格操作步驟。防止以外事故的發生。

四、用過的藥品、試液應集中到在規定的桶內，不得亂倒亂拋，保持實驗室的清潔、衛生。

五、實驗完畢后，洗干凈所用過的實驗器材并整理好，擺放整齊。

六、室內要盡量做好防塵、防潮、防磁場等。

實驗員職責

一、忠誠黨的教育事業，熱愛本職工作，樹立全心全意為教學服務的思想。認真學習教學大綱和教材，刻苦鉆研業務，積極參加業務進修，不斷提高管理水平和實驗技能。

二、積極參加教研組活動，熟悉所管年級的教材和各種實驗。開學初主動向任課教師了解本學期的實驗計劃，每學期把它們按年級、按章節寫出實驗一覽表，做到心中有數，及時準備。

三、建立健全教學儀器、設備、藥品的保管、使用帳目，做到進出、缺損、消耗登記，做到賬物相符，儀器、設備擺放有條理、科學、美觀。努力做到三清：賬卡清、數量清、質量清。四懂：懂性能、用途、操作、維修保養。經常檢查儀器設備情況及存在的問題，及時匯報和解決。保證儀器、模型、標本等的完好率。

四、根據教學計劃，獨立地提前做好學生實驗及演示實驗的準備工作，保證實驗按時完成。課前認真備好教案，積極協助教師輔導學生上好實驗課。實驗完畢，認真驗收儀器，標本等設備。認真填寫實驗記錄。

五、對易燃、易爆、劇毒等危險品的存放、保管、使用，要按公安部門規定嚴格管理，并做好實驗室的防火、防盜工作，確保師生的人身安生，保護好國家財產。

六、協助教師積極開展科技實驗，自制教具和儀器維修等活動，培養學生愛科學、學科學、用科學的積極性。

七、加強責任感，以身作則，嚴格遵守教學儀器使用、保養的規章制度。堅持原則，對違犯規章制度的行為敢于制止。

八、每學期初，制定實驗室工作計劃，期末總結實驗室工作情況、任課教師實驗情況、儀器使用情況及存在的問題，制定下學期購物計劃。

九、搞好室內衛生，加強防火、防盜、防破壞安全措施，確保安全。

十、認真遵守實驗員守則，遵守作息制度，加強政治學習。努力提高工作能力及思想水平。

實驗室學生實驗守則

1、做分組實驗是學生理論聯系實際的重要手段，對提高學生的觀察能力、操作能力、分析和解決問題的能力有重要作用。因此，每個學生必須高度重視實驗課，珍惜每一堂實驗課。

2、學生在實驗前要認真作好預習，明確實驗目的、要求、原理、步驟以及實驗的內容和注意事項。不預習不準作實驗。

3、進實驗室時要保持良好秩序，按實驗小組順序就座，實驗時要遵守紀律，不準喧嘩、不打鬧。

4、實驗開始前要認真聽取教師講解有關實驗問題，看清教師的示范。

5、實驗開始須首先檢查實驗用品是否齊全，如發現短缺或損壞，及時向教師報告。

6、實驗過程中，要嚴格遵循實驗步驟，操作要規范，儀器的連接和安裝要穩固，取用藥品要適量，接通電源，點火加熱，接觸藥品或動力時要注意安全。實驗時如發現異常現象或儀器損壞等情況后，立即停止實驗并及時向教師報告，不得擅自處理。

7、實驗過程中要認真觀察實驗現象，仔細分析思考，實事求是做實驗記錄。

8、實驗結束時要切斷電源、水源、火源等，清洗容器，清理實驗用品并擺放整齊，遇有損壞、丟失儀器時應及時報告。廢液要倒入廢液缸，其它廢物扔入垃圾箱，嚴禁將廢液倒入水槽中，經教師檢查允許后，方可離開實驗室。

9、實驗要注意安全，節約水電及實驗材料，要愛護室內一切設施和用品，未經允許不得擅自動用，要保持實驗室的清潔，不要亂扔碎紙和雜物，下課時輪班值日，打掃衛生。

10、實驗課后要及時寫出實驗報告，對失敗的實驗要申請重（補）做。

第三篇：實驗室能力驗證方法

實驗室能力驗證方法

第一條 為建立規范的安全生產檢測檢驗機構能力驗證工作機制，根據國家安全生產監督管理總局（以下簡稱國家總局）賦予省級煤礦安全生產監察局的職責，制定本辦法。

第二條 本辦法所稱的能力驗證，是指利用實驗室間指定檢測數據的比對，確定實驗室從事特定測試活動的技術能力。

第三條 能力驗證活動應當遵循科學合理、操作可行、非營利性和避免不必要的重復驗證的原則。

第四條 安徽煤礦安全生產監察局依照有關國家標準、國際準則制定有關實驗室能力驗證工作的基本規范和實施規則，統一監管和綜合協調能力驗證活動。

第五條 能力驗證的組織者應當建立并保存能力驗證檔案及相關記錄，包括：

（一）實施能力驗證的有關文件；

（二）能力驗證的提供者的資質證明；

（三）能力驗證的組織者對能力驗證的提供者的確認記錄；

（四）能力驗證的參加者名單；

（五）能力驗證的技術報告；

（六）能力驗證結果和后續處理文件。

第六條 能力驗證的組織者應當于每年年底向國家總局報告下一的能力驗證計劃，包括：名稱、目的、能力驗證的內容和關鍵技術要素設計、組織單位、實施時間、擬參加實驗室的范圍和數量、能力驗證提供者的資質證明和審核材料等。

第七條 能力驗證的提供者應當符合相關國家標準或者技術規范的要求，其技術能力在相應領域和關鍵技術要素方面領先，并具備可持續性。

第八條 安徽煤礦安全生產監察局組織有關方面專家，對能力驗證的提供者是否符合相關國家標準或者技術規范的要求進行評價。符合要求的，省局確定其作為能力驗證的提供者。

省局鼓勵能力驗證的組織者利用經過國家認監委確定的能力驗證的提供者。

第九條 能力驗證的參加者應當向能力驗證的組織者及時反饋相關信息，并保存相關記錄。

能力驗證結果離群的，應當采取相應的糾正措施。

第十條 能力驗證的組織者應當及時向國家總局通報能力驗證計劃的完成情況、能力驗證結果、后續處理措施等有關事項。

第十一條

第十二條 省局在能力驗證活動完成后向有關方面通報能力驗證活動的結果。同時向社會報告能力驗證結果，定期公布能力驗證滿意結果的實驗室名單。

第十三條 達到滿意結果的安全生產檢測檢驗機構和能力驗證的提供者，在規定時間內接受安全生產檢測檢驗機構資質認定評審時，可以免于該項目的現場試驗。

鼓勵各有關方面利用能力驗證的結果，優先推薦或者選擇達到滿意結果的安全生產檢測檢驗機構承擔省局委托、授權或者指定的檢驗檢測任務。

第十四條 能力驗證的組織者應當對能力驗證的提供者和能力驗證的實施過程實施有效管理。

第十五條 對于能力驗證的結果可疑或者離群的安全生產檢測檢驗機構機構，能力驗證的組織者應當要求其在規定期限內進行整改并驗證整改效果，也可視情況暫停或者撤銷其相關項目的資質認定或者認可，暫停其承擔省局授權、委托或者指定的檢驗檢測任務的資格，直到完成糾正活動并經能力驗證的組織者確認后，方可恢復或者重新獲得認可以及承擔省局授權、委托或者指定的檢驗檢測任務的資格。

第十六條 能力驗證的提供者違反職業道德，弄虛作假或者泄露機密的，省局應當取消其承擔能力驗證的提供者的資格。

能力驗證的參加者弄虛作假、進行串通，經查屬實的，能力驗證組織者視其結果為不滿意。情節惡劣的，省局應當取消其相應項目的檢測資質資格，并報告國家總局備案。

第十七條 省局可以采取組織專家評議、向實驗室征求意見、抽查檔案、要求能力驗證的組織者和提供者報告能力驗證的實施情況等方式，對實驗室能力驗證活動進行監督。

第十八條 能力驗證的參加者對能力驗證的結果有異議的，可以向能力驗證組織者進行申訴；對違規行為可以向能力驗證組織者或者國家總局進行投訴。

第十九條 下列用語的含義：

本辦法所稱能力驗證的提供者，是指從事能力驗證的設計和實施的安全生產檢測檢驗機構。

本辦法所稱能力驗證的參加者，是指參加實驗室間比對，以確定校準或者檢測能力的安全生產檢測檢驗機構。

本辦法所稱的結果可疑，是指按照有關的技術統計方法確定的能力驗證結果界于標準認可值（或者中位值）之間的結果。

本辦法所稱的離群（即結果離群），是指按照有關的技術統計方法確定的明顯偏離標準值（或者中位值）的結果。

第二十一條 本辦法由安徽煤礦安全生產監察局負責解釋。

第二十二條 本辦法自二0一三年十二月一日起施行。

第四篇：《梅毒實驗室診斷方法》

梅毒實驗室診斷

梅毒的實驗室診斷方法主要有顯微鏡檢查法和血清學檢測法。

一、顯微鏡檢查法

（一）暗視野顯微鏡檢查

【基本原理】

梅毒硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損的滲出液涂片，以及淋巴結穿刺液涂片等，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發出亮光，從而可根據其特殊形態和運動方式進行檢測。

【儀器材料】

1．暗視野顯微鏡。

2．鈍刀（刮勺）、載玻片、蓋玻片、注射器具、無菌生理鹽水。

【標本采集】

1．皮膚黏膜組織液：無菌生理鹽水浸濕的棉拭子擦去皮損表面的污物，鈍刀輕刮、擠壓皮損表層，取滲出液與預先滴加在載玻片上的生理鹽水混合后加蓋玻片鏡檢。

2．淋巴液：無菌操作下穿刺淋巴結，注入生理鹽水并反復抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于載玻片上，加蓋玻片鏡檢。

【操作步驟】

1．加鏡油：在暗視野顯微鏡的聚光器上滴加鏡油。

2．聚光：將標本玻片置載物臺上，上升聚光器使鏡油接觸載玻片底面。

3．鏡檢：在鏡下觀察，尋找有特征形態和運動方式的梅毒螺旋體。

【結果判讀】

XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX、告XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX梅毒螺旋體在暗視野顯微鏡鏡下表現為纖細、白色、有折光的螺旋狀微生物，長5～20mm，直徑小于0.2mm，有6～12個螺旋，具有旋轉、蛇行及伸縮等三種特征性的運動方式。暗視野顯微鏡下發現有上述特征的螺旋體為陽性結果。

【結果報告】

1．陽性：見到上述特征的梅毒螺旋體。

2．陰性：未見到上述特征的梅毒螺旋體。

【臨床意義】

1．暗視野顯微鏡檢查陽性,可確診梅毒。

2．螺旋體檢查是診斷早期現癥梅毒的最好方法，世界衛生組織指定為性病實驗室必備項目之一。

3．如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性，應復查和血清學檢查。

【注意事項】

1.取材時盡量避免出血，以免影響鏡下觀察。

2.取材后應立即置暗視野顯微鏡下觀察。

3.鏡下觀察時應注意與其他螺旋體相鑒別。

（二）鍍銀染色檢查

【基本原理】

梅毒螺旋體具有親銀性，可被銀溶液染色，從而可以在鏡下觀察到梅毒螺旋體。

【儀器材料】

1．顯微鏡。

2．羅吉氏固定液、鞣酸媒染劑、Fontana氏銀溶液。

【標本采集】

1.皮膚黏膜組織液：無菌生理鹽水浸濕的棉拭子擦去皮損表面的污物，鈍刀輕刮、擠壓皮損表層，取滲出液涂片。

2．淋巴液：無菌操作下穿刺淋巴結，注入生理鹽水并反復抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于載玻片上。

【操作步驟】

1．涂片干燥：將標本涂于干凈載玻片作一薄片，于空氣中自然干燥。

2．固定：用固定液將涂片固定2～3分鐘。

3．洗滌：用無水乙醇洗滌玻片上的油污。

4．媒染：加媒染劑于涂片上，微加熱產生蒸汽，染30秒。

5．銀染：水洗，加銀染液于涂片上，微加熱產生蒸汽，染30秒。

6．鏡檢：水洗、待干，用油鏡檢查。

【結果判讀】

顯微鏡下見到染成棕褐色的梅毒螺旋體為陽性結果。

【結果報告】

1．陽性：見到染成棕褐色梅毒螺旋體。

2．陰性：未見到染成棕褐色的梅毒螺旋體。

【臨床意義】

同暗視野顯微鏡檢查法。

【注意事項】

應注意與其他螺旋體加以鑒別。

二、血清學檢測法

（一）非梅毒螺旋體抗原血清試驗

非梅毒螺旋體抗原血清試驗，包括性病研究實驗室（VDRL）試驗、快速血漿反應素（RPR）環狀卡片試驗、甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）等。

n

VDRL試驗

【基本原理】

梅毒螺旋體感染人體后，宿主會產生抗類脂抗原的抗體（反應素），與一定比例的心磷脂、卵磷脂及膽固醇混合物抗原反應，可檢測梅毒患者血中的抗類脂抗原的抗體。

【儀器材料】

1.水平旋轉儀、顯微鏡。

2.試劑盒：VDRL抗原原液、VDRL緩沖液、抗原滴管及針頭、帶直徑14mm漆圈的玻璃反應板、VDRL試驗結果參照圖片。

3.30mL平底玻璃小瓶、生理鹽水。

【標本采集】

1.血清：抽取靜脈血，室溫靜止凝固后，分離新鮮血清。也可采用凍存的血清。

2.腦脊液：采用腰椎穿刺術獲得，應由相關專業人員操作。

【操作步驟】

1.VDRL抗原配制。

2.VDRL玻片定性試驗

（1）滅活：血清標本56℃滅活30分鐘。

（2）吸樣：吸取0.05mL血清放入反應板圈中，將血清涂布到整個圈內。

（3）加抗原：用標準針頭加入1滴抗原。

（4）反應：將反應板置水平旋轉儀上旋轉4分鐘，〔(180±5)次/分鐘〕，立即置低倍顯微鏡下觀察。

3.VDRL定量試驗

（1）加稀釋液：在圈內加入0.05mL生理鹽水（根據需要確定稀釋度）。

（2）樣本稀釋：吸取0.05mL樣本與各圈中鹽水作系列稀釋并涂布整個圈內。

（3）以下步驟同定性試驗（2）～（4）。

【結果判讀】

凝集反應強度分級：

3＋

～

4＋：大的或中等大小的絮狀物，液體清亮

2＋：絮狀物較小，液體較清亮

1＋：絮狀物較小，均勻分布，液體混濁

±：抗原復合物顆粒稍粗

－：抗原顆粒均勻、細小

【結果報告】

1．定性試驗：

（1）陽性：鏡下可見1＋～4＋的絮狀凝集物。

（2）陰性：不產生凝集反應。

2．定量試驗：

滴度：鏡下可見絮狀凝集物的血清最高稀釋倍數。

【臨床意義】

對一期、二期、潛伏期和晚期梅毒患者的敏感性分別為78%、100%、96%和71%。腦脊液VDRL陽性對神經梅毒有診斷意義。

【注意事項】

1．VDRL用抗原需當天配制。

2．試驗反應完畢，應立即觀察結果。

n

RPR試驗

【基本原理】

RPR試驗是VDRL試驗的一種改良方法。該法在心磷脂、卵磷脂和膽固醇等組成的抗原中加入活性炭顆粒，與待檢血清（漿）中的反應素結合，形成肉眼可見的黑色絮狀物。

【儀器材料】

1．水平旋轉儀。

2．RPR試劑盒：RPR抗原、直徑為18mm圓圈的反應卡片、抗原滴管、針頭。

【標本采集】

1．血清：抽取靜脈血，室溫靜止凝固后，分離新鮮血清。也可采用凍存的血清。

2．血漿：各種抗凝劑制備的血漿。

【操作步驟】

1．定性試驗

（1）

加樣：吸取0.05mL血清(漿)放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個圈內。

（2）加抗原：將抗原輕輕搖勻，用9號針頭[每毫升（60±1）滴]加1滴抗原。

（3）反應：將卡片置水平旋轉儀旋轉8分鐘[（100±5）轉/分鐘]。立即在亮光下觀察結果。

2．定量試驗

（1）稀釋液準備：在圈內加入0.05mL生理鹽水（根據需要確定稀釋度），勿將鹽水涂開。

（2）加樣：吸取0.05mL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個圈內。

（3）同定性試驗（2）～（4）。

【結果判讀】

凝集反應強度分級：

3＋

～

4＋：圓圈內出現中到大的黑色絮狀物，液體清亮

2＋：圓圈內出現小到中的黑色絮狀物，液體較清亮

1＋：圓圈內出現小的黑色絮狀物，液體混濁

－：圓圈內僅見碳顆粒集于中央一點或均勻分散

【結果報告】

1．定性試驗：

（1）陽性：出現1＋～4＋強度的凝集反應。

（2）陰性：不產生凝集反應。

2．定量試驗：

滴度：出現凝集反應的血清最高稀釋倍數。

【臨床意義】

1．RPR試驗適用于梅毒篩查、療效觀察、復發或再感染的檢查。

2．對未經治療的一期、二期和潛伏梅毒患者的敏感性分別為86%、100%和98%。

【注意事項】

試驗應在23～29℃環境中進行。

n

TRUST試驗

TRUST試驗是用甲苯胺紅顆粒代替RPR試驗中的碳顆粒作為指示物，所以陽性結果為紅色絮狀物。其基本原理、儀器材料、標本采集、操作步驟、結果判讀、結果報告、臨床意義及注意事項等與RPR試驗基本相同。

（二）梅毒螺旋體抗原血清試驗

梅毒螺旋體抗原血清試驗是以梅毒螺旋體為抗原的特異性的抗原抗體反應，用以檢測梅毒抗體，常用的方法有梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）、梅毒螺旋體血球凝集試驗（TPHA）、熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）、梅毒螺旋體酶聯免疫吸附試驗（TP-ELISA）和梅毒螺旋體蛋白印跡試驗（TP-WB）等方法。

n

TPPA試驗

【基本原理】

TPPA試驗是用超聲裂解梅毒螺旋體制備的抗原，致敏明膠粒子，其致敏粒子與待檢血清中的抗梅毒螺旋體抗體結合，產生肉眼可見的凝集。

【儀器材料】

1.微量震蕩器。

2.試劑盒：“A”溶解用液、“B”標本稀釋液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”質控血清。

3．U型反應板。

【標本采集】

同RPR試驗。

【操作步驟】

1．試劑準備：試驗前將待檢樣本和試劑應恢復到室溫。

2．加稀釋液：每份樣本做4孔，加B液至反應孔內，第1孔100μL，第2～4孔各25μL。

3．樣本稀釋：取血清25μL加至第1孔，混勻后取25μL至第2孔，連續倍比稀釋至第4孔，最后1孔混勻后棄去25μL。

4．加對照液：第3孔加D液25μL，第4孔加C液25μL。

5．混合：將反應板置震蕩器震蕩30秒。

6．反應：置濕盒內，孵育2小時后，或放4℃冰箱過夜觀察結果。

【結果判讀】

觀察凝集反應強度，分級如下：

4＋：

粒子光滑覆蓋整個孔底，有時邊緣有折疊

3＋：

粒子光滑覆蓋大部分孔底

2＋：

粒子光滑聚集覆蓋孔底，周圍有一細胞環

1＋：

粒子光滑集聚覆蓋孔底，周圍有一明顯細胞環

±：

粒子沉集孔底，中央形成一小點

－：

粒子緊密沉積孔底中央

【結果報告】

1．陽性：未致敏粒子不出現凝集（第3孔），血清1︰80以上稀釋與致敏粒子產生1＋～4＋凝集反應。

2.陰性：未致敏粒子和致敏粒子均不產生凝集反應。

【臨床意義】

1.TPPA可作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如RPR等)初篩陽性標本的確證試驗。

2．梅毒患者經過抗梅治療后，TPPA試驗仍可陽性，故TPPA試驗陽性不能作為療效觀察的指標。

3．TPPA陽性不能區分既往感染和現癥感染，應結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果進行診斷。

【注意事項】

1.試驗結果為“可疑”時，應選用其他的試驗方法進行復驗。

2.如未致敏粒子出現凝集反應，樣本進行吸收后再進行試驗，或改用其他試驗方法。

n

TPHA試驗

【基本原理】

TPHA試驗用超聲裂解的梅毒螺旋體菌體為抗原，致敏經醛化、鞣化的羊或禽類紅細胞，與抗梅毒螺旋體抗體反應，產生肉眼可見的抗原抗體凝集。

【儀器材料】

1.微量震蕩器。

2．TPHA試劑盒：“A”溶解用液、“B”標本稀釋液、“C”致敏粒子、“D”

未致敏粒子、“E”質控血清。

3.U型反應板。

【標本采集】

同RPR試驗。

【操作步驟】

1．試劑準備：試驗前試劑恢復到15～25℃。

2．加稀釋液：加B液至反應板，第1孔25mL，第2孔100mL，第3～5孔各加25mL。

3．樣本稀釋：取血清25mL加至第1孔，混勻后取25mL至第2孔，混勻后取25mL至第3孔，混勻后棄去25mL，再從第2孔取25mL至第4孔，混勻后取25mL至第5孔，混勻后棄去25mL。

4．加對照液：第3孔加D液（未致敏細胞）75μL，第4、5孔加C液（致敏細胞）各75mL。

5．混合：將反應板置震蕩器震蕩30秒。

6．反應：置濕盒內，15～25℃孵育4小時，或放4℃冰箱過夜觀察結果。

【結果判讀】

同TPPA試驗。

【結果報告】

同TPPA試驗。

【臨床意義】

同TPPA試驗。

【注意事項】

有些采用禽類紅細胞為載體的TPHA試驗，血清不用吸收，可直接進行試驗。

n

FTA-ABS試驗

【基本原理】

以完整的梅毒螺旋體作為抗原，與經吸收劑吸收的梅毒血清抗體反應形成抗原抗體復合物，再加入熒光素（FITC）標記的抗人免疫球蛋白，形成帶有熒光的抗原抗體復合物，在熒光顯微鏡下螺旋體顯出蘋果綠色熒光。

【儀器材料】

1．熒光顯微鏡。

2．試劑盒：梅毒螺旋體抗原片、吸收劑、熒光素標記抗體、陽性對照血清、PBS緩沖液、固定劑。

3.血清稀釋板。

【標本采集】

同VDRL試驗。

【操作步驟】

1.血清滅活：將血清標本于56℃滅活30分鐘，備用。

2.血清稀釋：待檢血清用吸收劑1：5稀釋，陽性血清及陰性血清分別用PBS緩沖液和吸收劑1:5稀釋。置37℃濕盒內，30分鐘。

3.加樣：每次試驗必須設PBS緩沖液、吸收劑、PBS液1︰5稀釋陽性和陰性血清及吸收劑1：5稀釋陽性和陰性血清共6個對照涂片。每個涂片分別加入10μL稀釋后的血清或緩沖液，置37℃濕盒內，30分鐘。

4.洗滌：用PBS-

Tween-80液洗玻片2次，每次5分鐘，最后用蒸餾水洗一次，冷風干燥。

5.加熒光抗體：每個涂片加10μL按要求稀釋的熒光抗體,置37℃濕盒內30分鐘。

6.洗滌：同步驟4。

7.封片鏡檢：用固定劑封片，讀片。

【結果判讀】

1.陽性對照：無論PBS緩沖液還是吸附劑稀釋，熒光強度應相同。

2.陰性對照和空白對照：不產生熒光。

【結果報告】

1.陽性：熒光鏡下見到不同程度發綠色熒光的螺旋體。

2.陰性：無熒光或密螺旋體微顯淡綠色。

【臨床意義】

1.FTA-ABS是梅毒螺旋體抗原血清學試驗的“金標準”。

2．對未經治療的一期、二期、潛伏梅毒和晚期梅毒患者的敏感性分別為84%、100%、100%和96%，特異性均可達97%。

3.其他同TPPA試驗。

【注意事項】

1.抗原片每次洗滌要干凈，避免其他雜質影響判讀結果。

2.試驗需有高質量熒光顯微鏡和技術熟練的操作人員。

n

TP-ELISA試驗

【基本原理】

TP-ELISA試驗是用包被在固相板條上經超聲裂解、純化處理或重組的梅毒螺旋體抗原，與待檢血清中的梅毒特異性抗體結合，再與酶標記的抗人免疫球蛋白單克隆抗體反應，形成抗原抗體復合物而使底物顯色。

【儀器材料】

1.酶標儀、洗板機。

2．試劑盒組成：96孔反應板、標本稀釋液、洗滌液、酶結合物、底物液、終止液、陽性對照、陰性對照。

【標本采集】

同RPR試驗

【操作步驟】

1.加稀釋液：取標本稀釋液加到反應板孔內。

2.孵育：分別加入陽性、陰性對照和待檢血清，置37℃孵育一定時間,洗板。

3.加酶結合物：加酶結合物，置37℃孵育一定時間,洗板。

4.加顯色劑：加底物，37℃避光孵育。

5.終止反應：加終止液，酶標儀測OD（光密度）值。

【結果判讀】

1．每次試驗的陽性、陰性對照應在規定的數值范圍內

2．根據陽性、陰性OD值設定閾值（cut-off值）。

【結果報告】

1．陽性：標本OD值大于或等于cut-off值。

2．陰性：標本OD值小于cut-off值。

【臨床意義】

（1）適用于流行病學調查或大樣本量標本的檢測。

（2）ELISA陽性不能區分既往感染和現癥感染，應結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如RPR等)結果進行診斷。

【注意事項】

1.不同批號試劑不能混用。

2.溫度和時間必須嚴格控制。

■

TP-WB試驗

【基本原理】

用超聲粉碎的梅毒螺旋體或梅毒螺旋體重組的不同抗原，印跡至硝酸纖維膜條上。通過酶聯反應，可檢測梅毒血清中多種特異抗原成分的抗體。

【儀器材料】

1.水平搖床。

2.試劑盒:硝酸纖維膜條、酶標抗體、陽性質控血清、陰性質控血清、底物液、終止液、標準陽性反應帶結果參比圖譜。

【標本采集】

同RPR試驗

【操作步驟】

1．反應：每反應槽加2.0mL工作緩沖液，浸濕膜條5分鐘，加入0.02mL待檢樣本，置水平搖床上(50轉/分)，18～25℃反應45分鐘。

2．洗滌：棄去反應槽中液體，加入

2.0mL工作緩沖液，置水平搖床洗滌3次，每次5分鐘。

3．加酶結合物：

加入酶標抗體，置水平搖床反應30分鐘。

4．洗滌：同步驟2。

5．顯色：每槽加2.0mL底物，置水平搖床上反應8～10分鐘。

6．終止:

待陽性對照帶顯色清晰，加入1.0

mL終止劑2分鐘后棄去槽中液體，用蒸餾水洗2次，用鑷子取出反應條，置濾紙上。

【結果判讀】

1．根據陽性結果參比圖譜判定結果。

2.將試驗的硝酸纖維膜條上端標記線與參比標記線對齊。

3．觀察45KD、17KD及15.5KD帶區顯色帶。

【結果報告】

1．陽性：

45KD、17KD及15.5KD帶區均出現顯色帶。

2．陰性：

45KD、17KD及15.5KD三個條帶均未顯色。

【臨床意義】

1．同TPPA試驗

2．可以用于檢測IgM或IgG抗體。

【注意事項】

1．洗滌要充分，否則易造成試驗膜條帶背景的顏色偏深。

2．硝酸纖維膜條有對照反應條帶，在試驗中應顯示，如未顯示，則試驗無效。

3．當45KD、17KD及15.5KD中只有一個或兩個條帶出現明顯色帶為可疑結果，需重新試驗。

n

快速免疫層析法

【基本原理】

利用免疫層析原理，采用吸附有顯色標記的梅毒螺旋體重組抗原的濾紙條，快速檢測標本中的梅毒螺旋體抗體。

【儀器材料】

試劑盒：測試板、一次性滴管。

【標本采集】

同RPR試驗，可用全血。

【操作步驟】

1．加樣：用一次性滴管滴加一定量標本于加樣孔中。

2．加緩沖液：立即加入一定量的緩沖液。

3．觀察結果：規定時間內判讀結果。

【結果判讀】

1.觀察質控條帶,判斷試驗有效性，如沒有出現質控條帶，說明試驗無效，需重復試驗。

2．觀察標本條帶。

【結果報告】

1．陽性:

出現標本條帶和質控條帶。

2．陰性：無標本條帶，出現質控條帶。

【臨床意義】

1．可以用于標本的快速篩查。

2．快速檢測陽性不能區分既往感染和現癥感染，應結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如RPR等)結果進行診斷。

【注意事項】

1．試劑盒從冷藏環境中取出時，應平衡至室溫后方可使用。

2．本試驗方法存在一定的假陽性和假陰性。

三、其它方法

（一）梅毒IgM抗體的檢測

與其它細菌及病毒感染一樣，在梅毒中特異性IgM抗體的合成是第一次感染后的體液免疫應答。在梅毒中螺旋體IgM抗體出現在早期梅毒患者中，在潛伏期及晚期患者也能發現。在自發痊愈的患者中IgM水平下降的速度比治療痊愈的患者慢。IgM分子大使其不能通過胎盤屏障及完整無損的血腦屏障。因此若在新生兒血中檢測到IgM抗體是兒童產前感染的診斷標志；如在患者的完整無損的血腦屏障的腦脊液（CSF）中出現，則表示患有活動性神經梅毒。在最近未接受治療的患者血液中或CSF中出現抗梅毒IgM抗體均表示需要治療。

測定IgM抗體方法的基本原理是采用分離柱，使血清中的IgM和IgG按其分子量大小在分離過程中的沉降速度不同，將IgM和IgG分別收集，再進行FTA-ABS等試驗。亦可采用抗IgM單克隆抗體的酶標法、蛋白質印跡法等進行檢測。目前測定IgM抗體的方法的敏感性還很不理想，但是檢查到IgM抗體則有助于對以下病例中的試驗結果更可靠的解釋：先天性梅毒、早期一期梅毒、晚期梅毒、非梅毒螺旋體試驗的血清陽轉前的早期感染患者的判愈試驗及有梅毒史或其它螺旋體感染史患者的再感染。

（二）胎傳梅毒(或先天梅毒)的實驗室診斷

具有下列實驗室四個指標之一，可診斷為胎傳梅毒(或先天梅毒)：①暗視野檢查梅毒螺旋體陽性；②患兒非梅毒螺旋體血清抗體滴度持續上升；③患兒非梅毒螺旋體血清學定量試驗結果比母親高4倍（低于或等于該值并不排除胎傳梅毒）；④患兒檢出19S-IgM抗體。

（三）神經梅毒的實驗室診斷

1．神經梅毒的實驗室診斷標準包括：①梅毒血清學檢查陽性；②腦脊液細胞計數或蛋白測定結果異常；③腦脊液VDRL試驗陽性。

2．腦脊液VDRL試驗是神經梅毒的標準試驗，陽性結果可診斷為神經梅毒，但該試驗存在假陰性。

3．腦脊液的FTA－ABS試驗陰性可排除神經梅毒，但特異性不高，可能產生假陽性。

4．腦脊液檢查內容

（1）細胞計數：正常時白細胞數應小于3×106/L，若白細胞數大于10×106/L，提示中樞神經系統有炎癥現象。

（2）蛋白質量測定：總蛋白質量正常為0.1～0.4g/L，神經梅毒可稍升高，或高達1.0～2.0g/L。

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END

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第五篇：實驗室意外情況及處理方法

1、著火

生化實驗室經常使用大量的有機溶劑，如甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等，而實驗室又經常使用電爐等火源，因此極易發生著火事故。

閃點：液體表面的蒸汽和空氣的混合物在遇明火或火花時著火的最低溫度;自燃點：液體蒸汽在空氣中自燃時的溫度。

由上表可以看出，乙醚、二硫化碳、丙酮、和苯的閃點都很低，因此不得存于可能會產生電火花的普通冰箱內。低閃點液體的蒸汽只需接觸紅熱物體的表面便會著火，其中二硫化碳尤其危險。

2、預防火災的操作規程

(1)嚴禁在開口容器和密閉體系中用明火加熱有機溶劑，只能使用加熱套或水浴加熱。(2)廢有機溶劑不得倒入廢物桶，只能倒入回收瓶，以后再集中處理。量少時用水稀釋后排入下水道。

(3)不得在烘箱內存放、干燥、烘焙有機物。

(4)在有明火的實驗臺面上不允許放置開口的有機溶劑或傾倒有機溶劑。

滅火方法

實驗室中一旦發生火災切不可驚慌失措，要保持鎮靜，根據具體情況正確地進行滅火或立即報火警(火警電話119)。

(1)容器中的易燃物著火時，用玻璃纖維布滅火毯蓋滅。

(2)乙醇、丙酮等可溶于水的有機溶劑著火時可以用水滅火。汽油、乙醚、甲苯等有機溶劑著火時不能用水，只能用滅火毯和砂土蓋滅。

(3)導線、電器和儀器著火時不能用水和二氧化碳滅火器滅火，應先切斷電源，然后用1211滅火器滅火。

(4)個人衣服著火時，切勿慌張奔跑，以免風助火勢，應迅速脫衣，用水龍頭澆水滅火，火勢過大時可就地臥倒打滾壓滅火焰。

3、爆炸 生物化學實驗室防止爆炸事故是極為重要的，因為一旦爆炸其毀壞力極大，后果將十分嚴重。生物化學實驗室常用的易燃物蒸汽在空氣中的爆炸極限(體積%)見表1—2。加熱時會發生爆炸的混合物有：有機化合物～氧化銅、濃硫酸～高錳酸鉀、三氯甲烷～丙酮等。常見的引起爆炸事故的原因有：①隨意混合化學藥品，并使其受熱、受摩擦和撞擊;②在密閉的體系中進行蒸餾、回流等加熱操作;③在加壓或減壓實驗中使用了不耐壓的玻璃儀器，或反過于激烈而失去控制;④易燃易爆氣體大量逸入室內;⑤高壓氣瓶減壓閥摔壞或失靈。

4、中毒

生化實驗室常見的化學致癌物有：石棉、砷化物、鉻酸鹽、溴乙錠等。劇毒物有：氰化物、砷化物、乙腈、甲醇、氯化氫、汞及其化合物等。中毒的原因主要是由于不慎吸入、誤食或由皮膚滲入。

中毒的預防： ①保護好眼睛最重要，使用有毒或有刺激性氣體時，必須配戴防護眼鏡，并應在通風櫥內進行;②取用毒品時必須配戴橡皮手套;③嚴禁用嘴吸移液管，嚴禁在實驗室內飲水、進食、吸煙，禁止赤膊和穿拖鞋;④不要用乙醇等有機溶劑擦洗濺灑在皮膚上的藥品。

中毒急救的方法主要有：①誤食了酸或堿，不要催吐，可先立即大量飲水，誤食堿者再喝些牛奶，誤食酸者，飲水后再服Mg(OH)2乳劑，最后飲些牛奶;②吸入了毒氣，立即轉移室外，解開衣領，休克者應施以人工呼吸，但不要用口對口法;③砷和汞中毒者應立即送醫院急救。

5、外傷

(1)化學灼傷：

①眼睛灼傷或掉進異物：眼內濺入任何化學藥品，應立即用大量水沖洗十五分鐘，不可用稀酸或稀堿沖洗。若有玻璃碎片進入眼內則十分危險，必須十分小心謹慎，不可自取，不可轉動眼球，可任其流淚，若碎片不出，則用紗布輕輕包住眼睛急送醫院處理。若有木屑、塵粒等異物進入，可由他人翻開眼瞼，用消毒棉簽輕輕取出或任其流淚，待異物排出后再滴幾滴魚肝油。②皮膚灼傷：

酸灼傷：先用大量水洗，再用稀NaHCO3或稀氨水浸洗，最后再用水洗。堿灼傷：先用大量水沖洗，再用1%硼酸或2%醋酸浸洗，最后再用水洗。

溴灼傷：這很危險，傷口不易愈合，一旦灼傷，立即用20%硫代硫酸鈉沖洗，再用大量水沖洗，包上消毒紗布后就醫。

(2)燙傷：使用火焰、蒸汽、紅熱的玻璃和金屬時易發生燙傷，應立即用大量水沖洗和浸泡，若起水泡不可挑破，包上紗布后就醫，輕度燙傷可涂抹魚肝油和燙傷膏等。(3)割傷：

這是生物化學實驗室常見的傷害，要特別注意預防，尤其是在向橡皮塞中插入溫度計、玻璃管時一定要用水或甘油潤滑，用布包住玻璃管輕輕旋入，切不可用力過猛，若發生嚴重割傷時要立即包扎止血，就醫時務必檢查傷部神經是否被切斷。

實驗室應準備一個完備的小藥箱，專供急救時使用。藥箱內備有：醫用酒精、紅藥水、紫藥水、止血粉、創口貼、燙傷油膏(或萬花油)、魚肝油、1%硼酸溶液或2%醋酸溶液、1%碳酸氫鈉溶液、20%硫代硫酸鈉溶液、醫用鑷子和剪刀、紗布、藥棉、棉簽、繃帶等。

6、觸電

生物化學實驗室要使用大量的儀器、烘箱和電爐等，因此每位實驗人員都必須能熟練地安全用電，避免發生一切用電事故，當50HZ 的電流通過人體25mA 電流時呼吸會發生困難，通過了100mA 以上電流時則會致死。

(1)防止觸電：①不能用濕手接觸電器;②電源裸露部分都應絕緣;③壞的接頭、插頭、插座和不良導線應及時更換;④先接好線路再插接電源，反之先關電源再拆線路;⑤儀器使用前要先檢查外殼是否帶電;⑥如遇有人觸電要先切斷電源再救人。

(2)防止電器著火：①保險絲、電源線的截面積、插頭和插座都要與使用的額定電流相匹配;② 三條相線要平均用電;③生銹的電器、接觸不良的導線接頭要及時處理;④電爐、烘箱等電熱設備不可過夜使用;⑤儀器長時間不用要拔下插頭，并及時拉閘;⑥電器、電線著火不可用泡沫滅火器滅火。