第一篇：《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》精品課程總體設(shè)計(jì)(錄像文字說明).

《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》精品課程總體設(shè)計(jì)（錄像文字說明）

各位專家、老師、同學(xué)們：大家好！

歡迎光臨滄州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》精品課程。我是課程建設(shè)負(fù)責(zé)人侯振江，自2002年開始擔(dān)任本課程的教學(xué)，經(jīng)過教學(xué)團(tuán)隊(duì)8年的不懈努力，該課程日漸成熟和完善。下面我從課程背景、課程開發(fā)、課程定位、課程設(shè)計(jì)、教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法與手段、教學(xué)隊(duì)伍、實(shí)訓(xùn)條件和實(shí)訓(xùn)場景、教學(xué)效果和課程特色等十個(gè)方面介紹本課程的總體設(shè)計(jì)。

一、課程背景

《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)的一門專業(yè)核心課程，該課程建設(shè)經(jīng)歷了傳統(tǒng)教學(xué)、教學(xué)改革探索和基于工作過程的改革三個(gè)階段。

2002年9月-2005年6月為《血液病檢驗(yàn)》傳統(tǒng)教學(xué)階段：注重理論聯(lián)系實(shí)際，加強(qiáng)學(xué)生動(dòng)手能力的培養(yǎng)，收到了較好的教學(xué)效果。

2005年9月-2007年6月為改革探索階段：根據(jù)專業(yè)建設(shè)指導(dǎo)委員會(huì)（插圖）的意見和建議，進(jìn)行教學(xué)計(jì)劃和大綱的修改，使課程體系不斷完善，教學(xué)內(nèi)容更加豐富，緊密結(jié)合臨床，淘汰了過時(shí)的檢測項(xiàng)目，增加新的檢測技術(shù)；采用多媒體教學(xué)、病例教學(xué)法和討論式教學(xué)法等，課堂教學(xué)和臨床實(shí)習(xí)交替，初步形成了工學(xué)結(jié)合的教學(xué)模式，2006年《血液病檢驗(yàn)》被評(píng)為校級(jí)精品課程。

2008年至今為《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》基于工作過程的課程改革階段：理論與實(shí)訓(xùn)相結(jié)合、課程與工作相結(jié)合、教師與實(shí)訓(xùn)室一體化。

二、課程開發(fā)

通過對(duì)河北、河南、山東、江西、重慶、天津、吉林等7省市（插圖）110余家醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)崗位及需求知識(shí)的調(diào)查（插圖），確定了醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)學(xué)生的就業(yè)去向（插圖）【基層醫(yī)院檢驗(yàn)科、輸血科、疾病控制中心、中心血站、醫(yī)學(xué)院校和科研機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室、儀器和試劑公司】。

確定了醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)的11個(gè)崗位組成的崗位群（插圖）。

尿液檢驗(yàn)、體液檢驗(yàn)、輸血檢驗(yàn)、血液病一般檢驗(yàn)、血液病檢驗(yàn)、生物化學(xué)檢驗(yàn)、細(xì)菌檢驗(yàn)、免疫檢驗(yàn)、寄生蟲檢驗(yàn)、真菌檢驗(yàn)、病毒檢驗(yàn)。

通過分析崗位工作過程，形成典型工作任務(wù)，歸納行動(dòng)領(lǐng)域、重構(gòu)行動(dòng)領(lǐng)域并轉(zhuǎn)化為課程，以血液病檢測的工作任務(wù)為載體，將《血液病檢驗(yàn)》更名為《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》。根據(jù)職業(yè)特征分析學(xué)習(xí)領(lǐng)域，確定該課程的位臵，設(shè)計(jì)學(xué)習(xí)情境，編寫《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》課程的項(xiàng)目教材，使之集知識(shí)性、應(yīng)用性、實(shí)踐性于一體，為掌握血液病檢驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)和操作技能，提高綜合能力打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。（插圖1、2、3）

三、課程定位

1.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)人才培養(yǎng)目標(biāo)：培養(yǎng)適應(yīng)我國醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展需要的德、智、體、美全面發(fā)展，具有良好職業(yè)道德，掌握醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)領(lǐng)域?qū)嶋H工作的基本能力，技術(shù)應(yīng)用能力強(qiáng)、知識(shí)面較寬、綜合素質(zhì)高、具備從事醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)及相關(guān)職業(yè)群實(shí)際工作能力的高技能檢驗(yàn)專業(yè)人才。

2．本課程對(duì)人才的培養(yǎng)作用：

熟悉血液病檢驗(yàn)技術(shù)常用儀器的性能、原理、基本構(gòu)造、操作技術(shù)及日常維護(hù)保養(yǎng)；學(xué)會(huì)常見血液病的檢驗(yàn)流程、檢測項(xiàng)目的操作程序；掌握血液病檢驗(yàn)技術(shù)崗位所需要的知識(shí)和技能；培養(yǎng)學(xué)生的競爭意識(shí)與團(tuán)隊(duì)精神。

通過本課程的學(xué)習(xí)，學(xué)生能獲得一定的社會(huì)能力、方法能力和專業(yè)能力，為學(xué)生的可持續(xù)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。

四、課程設(shè)計(jì)

以崗位需求為中心、“典型工作任務(wù)”為載體，以校院合作為基礎(chǔ)，以工學(xué)結(jié)合為核心，以工作實(shí)踐為主線，以工作過程（項(xiàng)目）為導(dǎo)向，用任務(wù)驅(qū)動(dòng)，建立以行動(dòng)（工作）體系為框架的職業(yè)課程結(jié)構(gòu)，重新序化課程內(nèi)容，做到顯性的陳述性知識(shí)與隱性的過程性知識(shí)并重，將陳述性知識(shí)穿插于過程性知識(shí)之中，融“教、學(xué)、做”為一體，突出學(xué)生職業(yè)能力培養(yǎng)，促使學(xué)生畢業(yè)就能上崗工作。同時(shí)兼顧專業(yè)技術(shù)資格考試的需要，以實(shí)現(xiàn)雙證制。

1.以崗位分析為基礎(chǔ)，以工作任務(wù)為導(dǎo)向，以《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》的實(shí)際工作任務(wù)和檢驗(yàn)項(xiàng)目為載體，將血液病檢測項(xiàng)目的基本理論、基本方法和基本技能，按照由簡單到復(fù)雜排列，循序漸進(jìn)地推進(jìn)教學(xué)過程，堅(jiān)持理論教學(xué)為實(shí)踐教學(xué)服務(wù)，并貫徹于實(shí)踐之中，實(shí)現(xiàn)教、學(xué)、做一體化。（醫(yī)院見習(xí)視頻）

2.在仿真的血液病實(shí)訓(xùn)室進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)基本技能的訓(xùn)練，校外見習(xí)了解造血干細(xì)胞移植等項(xiàng)目的流程。校內(nèi)實(shí)訓(xùn)、校外見習(xí)與校外實(shí)習(xí)相結(jié)合，學(xué)校和醫(yī)院交替進(jìn)行。學(xué)生實(shí)訓(xùn)的標(biāo)本來自于患者，考核項(xiàng)目也是臨床常用的工作任務(wù)，讓學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中親身感受實(shí)際工作環(huán)境、工作任務(wù)，實(shí)現(xiàn)了“學(xué)習(xí)在就業(yè)崗位，就業(yè)于學(xué)習(xí)環(huán)境中”。（圖、錄像）

3.突出實(shí)踐能力的培養(yǎng)，構(gòu)建綜合性、靈活性和創(chuàng)造性的實(shí)踐教學(xué)環(huán)境，使每個(gè)學(xué)生在校學(xué)習(xí)期間都能感受到多個(gè)實(shí)踐教學(xué)環(huán)節(jié)，有助于學(xué)生掌握扎實(shí)的基本知識(shí)和技能，提高綜合素質(zhì)。

五、教學(xué)內(nèi)容 根據(jù)技能型專業(yè)人才培養(yǎng)目標(biāo)、崗位需求和前后續(xù)課程的銜接，統(tǒng)籌考慮和選取教學(xué)內(nèi)容；與醫(yī)院合作開發(fā)課程，根據(jù)技術(shù)領(lǐng)域和職業(yè)崗位（群）的任職要求，參照相關(guān)的職業(yè)資格標(biāo)準(zhǔn)，改革課程體系和教學(xué)內(nèi)容。《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》學(xué)習(xí)領(lǐng)域分成四個(gè)單元，18個(gè)項(xiàng)目，40個(gè)具體工作任務(wù)，進(jìn)行學(xué)習(xí)領(lǐng)域到學(xué)習(xí)情境的設(shè)計(jì)（插圖）。

六、教學(xué)方法與手段

（一）教學(xué)模式的設(shè)計(jì) 《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》是一門與實(shí)際工作崗位的工作任務(wù)直接對(duì)應(yīng)的課程，其操作過程與臨床的檢測項(xiàng)目操作過程一致，為實(shí)現(xiàn)工學(xué)結(jié)合提供了良好的條件。經(jīng)過幾年教學(xué)方法、教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)手段的不斷改革與實(shí)踐，通過模擬的項(xiàng)目教學(xué)、真實(shí)的技術(shù)操作及頂崗實(shí)習(xí)，實(shí)現(xiàn)了學(xué)生在校學(xué)習(xí)與實(shí)際工作的一致性，形成了以任務(wù)驅(qū)動(dòng)為核心的教學(xué)模式：按照崗位工作任務(wù)確定教學(xué)內(nèi)容——即根據(jù)實(shí)際工作任務(wù)的檢驗(yàn)技術(shù)確定教學(xué)目標(biāo)；按照完成崗位工作任務(wù)的程序確定教學(xué)流程——即以血液病的篩查步驟作為教學(xué)過程；根據(jù)完成實(shí)際工作任務(wù)的結(jié)果評(píng)價(jià)教學(xué)效果。在課堂教學(xué)中以貧血、白血病的骨髓象和凝血象檢查等典型的工作任務(wù)為核心；按照實(shí)際工作環(huán)境模擬教學(xué)場景——學(xué)習(xí)場所由多媒體教室轉(zhuǎn)移到血液病檢驗(yàn)技術(shù)的實(shí)訓(xùn)室。

1.將工作任務(wù)轉(zhuǎn)移到課堂 教師給學(xué)生一個(gè)真實(shí)的病例、一張骨髓細(xì)胞學(xué)檢查申請(qǐng)單、3～5張未染色的骨髓涂片和2張血涂片，同學(xué)們可根據(jù)工作流程，先進(jìn)行涂片的劃線、染色、風(fēng)干，再進(jìn)行顯微鏡檢查，結(jié)合臨床資料和顯微鏡檢查結(jié)果得出初步結(jié)論。這是臨床上真實(shí)的工作任務(wù)，將它轉(zhuǎn)移到課堂上，保證了教學(xué)與工作的一致性。2.任務(wù)驅(qū)動(dòng)法主導(dǎo)教學(xué)過程 傳統(tǒng)的教學(xué)模式，通過老師的講授將學(xué)生帶入未知領(lǐng)域，《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》，學(xué)生面對(duì)的是要完成每一個(gè)工作任務(wù)中的若干工作項(xiàng)目，促使學(xué)生主動(dòng)尋找完成任務(wù)的方法和途徑，教師只是學(xué)生的引導(dǎo)者和課堂的組織者，是導(dǎo)演而不是主演。對(duì)每一個(gè)具體項(xiàng)目，老師只作一般的介紹，給定與實(shí)際工作崗位相同的工作任務(wù)，指出完成工作任務(wù)的基本過程、思路和有關(guān)參數(shù)，學(xué)生根據(jù)任務(wù)要求，確定操作流程，在實(shí)訓(xùn)室獨(dú)立完成，學(xué)生的主體地位凸顯，實(shí)現(xiàn)了課堂教學(xué)與實(shí)訓(xùn)室的一體化，保證了教學(xué)內(nèi)容的開放性和職業(yè)性，3.模擬項(xiàng)目與真實(shí)項(xiàng)目之間的工學(xué)交替 在本課程的教、學(xué)、做過程中，每個(gè)工作任務(wù)的完成需要學(xué)生知識(shí)、素質(zhì)和能力與完成工作任務(wù)的不斷交替，尤其是體現(xiàn)在三年的學(xué)習(xí)周期中，多門課程和實(shí)習(xí)項(xiàng)目的交替。通過模擬血液病檢驗(yàn)技術(shù)的工作任務(wù)、真實(shí)的操作流程、頂崗實(shí)習(xí)，校、院共同考核，實(shí)現(xiàn)了課程教學(xué)與真實(shí)工作項(xiàng)目的交替。課堂與實(shí)訓(xùn)室一體化的模擬場景中完成的是“假項(xiàng)目假做”，而在醫(yī)院的見習(xí)和實(shí)習(xí)中完成的是“真項(xiàng)目真做”，實(shí)現(xiàn)課堂教學(xué)向工作崗位的遷移。重視實(shí)踐教學(xué)(實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)、實(shí)習(xí))在高技能人才培養(yǎng)過程中的作用，體現(xiàn)教學(xué)過程的實(shí)踐性。

（二）教學(xué)方法的運(yùn)用 為適應(yīng)工學(xué)結(jié)合的教學(xué)模式，結(jié)合醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的特點(diǎn)和我校的教學(xué)資源，采用項(xiàng)目教學(xué)法、PBL教學(xué)法、病例分析法和網(wǎng)絡(luò)自主學(xué)習(xí)等多種教學(xué)方法，激發(fā)學(xué)生勤于思考、勇于實(shí)踐，積極主動(dòng)完成工作任務(wù)（學(xué)習(xí)目標(biāo)）的熱情。1.項(xiàng)目教學(xué)法

在《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》的教學(xué)過程中，要完成“紅細(xì)胞疾病檢查”、“白細(xì)胞疾病檢查”“出血與血栓性疾病檢查”四個(gè)單元、18個(gè)項(xiàng)目、40個(gè)具體工作任務(wù)的學(xué)習(xí)，每個(gè)工作任務(wù)的完成都需要與實(shí)際工作相關(guān)的多方面的知識(shí)和技能。預(yù)先將學(xué)生按5人左右一組，分成若干小組，完成每個(gè)各種任務(wù)的操作，遇到問題先在小組內(nèi)進(jìn)行分析討論，然后再咨詢老師，通過小組成員的共同努力，完成工作任務(wù)的項(xiàng)目。

2.PBL（以問題為基礎(chǔ)）教學(xué)法

通過為師生進(jìn)行PBL教學(xué)法培訓(xùn)、教師們進(jìn)行PBL教學(xué)法的問題情境設(shè)計(jì)、學(xué)生進(jìn)行資料查詢、小組討論和發(fā)言、教師指導(dǎo)與總結(jié)評(píng)價(jià)完成教學(xué)過程。（視頻）

PBL的教學(xué)效果取決于教師和學(xué)生雙方的合作，因此雙方評(píng)價(jià)能客觀反映教師和學(xué)生對(duì)PBL教學(xué)效果。首先是學(xué)生對(duì)自己掌握的知識(shí)、應(yīng)用及各種技能的發(fā)展進(jìn)行自評(píng)，組內(nèi)成員之間互評(píng)。其次是指導(dǎo)教師在學(xué)生自評(píng)和互評(píng)的基礎(chǔ)上，對(duì)學(xué)生的發(fā)言次數(shù)、發(fā)言內(nèi)容和質(zhì)量、復(fù)習(xí)資料和書面報(bào)告，以及小組學(xué)習(xí)、相互合作等進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)合試卷成績對(duì)學(xué)生進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。第三是學(xué)生對(duì)教師的知識(shí)含量、教學(xué)態(tài)度、教學(xué)方法、語言表達(dá)、引導(dǎo)交流等方面進(jìn)行評(píng)價(jià)。還要通過調(diào)查問卷對(duì)學(xué)生所學(xué)內(nèi)容的理解和記憶、分析問題和解決問題的能力、自主學(xué)習(xí)、學(xué)習(xí)興趣以及合作精神進(jìn)行主觀評(píng)價(jià)。3.多媒體教學(xué)（插圖）

本課程注重利用多媒體設(shè)備，向?qū)W生展示各種任務(wù)的基本流程，強(qiáng)化知識(shí)要點(diǎn)，分析實(shí)際案例。如根據(jù)細(xì)胞圖像，討論其具備的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，再通過實(shí)訓(xùn)進(jìn)行強(qiáng)化，提高教學(xué)效果。

4.病例分析法。通過病例分析激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，促進(jìn)學(xué)生的思維，加深對(duì)血液病檢驗(yàn)項(xiàng)目的理解和應(yīng)用。這是主講教師王娟副主任醫(yī)師利用病例分析進(jìn)行教學(xué)。5.網(wǎng)絡(luò)自主學(xué)習(xí)法

網(wǎng)絡(luò)教學(xué)是引導(dǎo)學(xué)生自主學(xué)習(xí)的重要手段，通過建立網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)，形成以網(wǎng)站為載體的教學(xué)資源庫，學(xué)生不受時(shí)空的限制，隨時(shí)隨地的學(xué)習(xí)，能有效提高學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性，提升課程教學(xué)質(zhì)量。例如學(xué)生可以將自學(xué)中遇到的問題發(fā)到網(wǎng)上，通過論壇討論或老師網(wǎng)上答疑等方式，第一時(shí)間找到答案。老師也可以將作業(yè)或試題發(fā)布在網(wǎng)上，學(xué)生進(jìn)行在線自我測試，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題并解決問題。老師還可以將各種新知識(shí)、新方法、新病例發(fā)布在網(wǎng)上，學(xué)生可及時(shí)更新知識(shí)、開拓視野。網(wǎng)絡(luò)教學(xué)的運(yùn)用，突破傳統(tǒng)教學(xué)時(shí)間與空間上的局限性，學(xué)生能更及時(shí)、更全面、更主動(dòng)的學(xué)習(xí)。

（三）網(wǎng)絡(luò)資源和硬件環(huán)境

（1）以校園網(wǎng)為依托，建立血液病檢驗(yàn)技術(shù)精品課程網(wǎng)站（http://jpkc.czmc.cn）；精品課程內(nèi)容全部上網(wǎng)，且隨時(shí)更新。（2）學(xué)習(xí)資源豐富。包括網(wǎng)絡(luò)教材、骨髓細(xì)胞圖庫、教學(xué)課件、病例討論資料、自測題等，拓寬了教學(xué)信息的傳播渠道。插圖：學(xué)習(xí)資源、學(xué)生在多媒體互動(dòng)教室上課情景。

七、教學(xué)團(tuán)隊(duì)

本課程教學(xué)團(tuán)隊(duì)共計(jì)10人，其中專職教師5人，兼職教師5人，專兼教師比例為1：1，具有職業(yè)資格的副主任醫(yī)師2人 占主講教師的50%。高級(jí)職稱教師5人（50%）、中級(jí)職稱4人（40％）、初級(jí)職稱1人（10％），這些教師分別來之于山東醫(yī)科大學(xué)、河北醫(yī)科大學(xué)、華北煤炭醫(yī)學(xué)院、張家口醫(yī)學(xué)院、河北省職工醫(yī)學(xué)院等。

八、實(shí)訓(xùn)教學(xué)環(huán)境、教學(xué)場景

幾年來，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)積極拓展校外實(shí)訓(xùn)基地，先后與省內(nèi)、外22家醫(yī)院建立了合作關(guān)系，為學(xué)生創(chuàng)造了良好的實(shí)訓(xùn)教學(xué)環(huán)境，保證了實(shí)踐能力的培養(yǎng)，尤其滄州市中心醫(yī)院血液內(nèi)科為《血液病檢驗(yàn)技術(shù)》的實(shí)訓(xùn)提供了有力保障。校內(nèi)實(shí)訓(xùn)基地

（1）血液病檢驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室1個(gè)，多媒體血細(xì)胞分析系統(tǒng)、全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、血凝儀、動(dòng)態(tài)血沉儀等，能進(jìn)行血液的一般檢查，骨髓細(xì)胞檢查，應(yīng)用多媒體進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)的教學(xué)。

（2）多媒體互動(dòng)室１個(gè)，擁有雙目鏡奧林巴斯顯微鏡50臺(tái)（3）臨床檢驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室1個(gè)，配有血細(xì)胞分析、尿液分析儀、血沉儀等，能進(jìn)行血液病一般的體液檢查。

（4）生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室1個(gè)，有生化半自動(dòng)和全自動(dòng)分析儀、電泳儀、電泳掃描儀，分光光度計(jì)等，能進(jìn)行血液生化指標(biāo)的檢測。（5）免疫學(xué)實(shí)訓(xùn)室1個(gè)，有酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡等，可以進(jìn)行血液病免疫指標(biāo)的檢測。

（6）微生物學(xué)實(shí)訓(xùn)室1個(gè)，可以進(jìn)行血液病病原微生物的分離和鑒定。

（7）精密儀器室1個(gè)，有各種貴重的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)儀器，供同學(xué)們實(shí)驗(yàn)操作。

（8）實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備室2個(gè)，供血液病檢驗(yàn)等專業(yè)課實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備。

九、教學(xué)效果

（一）校外專家評(píng)價(jià)

河北省醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)原主任委員、河北醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系李順義教授，華北煤炭醫(yī)學(xué)院碩士生導(dǎo)師馮福民教授和河北北方學(xué)院鄭文芝教授對(duì)我校血液病檢驗(yàn)技術(shù)課程給予高度評(píng)價(jià)：教學(xué)資源豐富、師資結(jié)構(gòu)合理、實(shí)訓(xùn)條件優(yōu)越，尤其是院校合作、工學(xué)交替，建立了校外實(shí)訓(xùn)基地，進(jìn)行基于工作過程的教學(xué)改革，取得了顯著成效。

（二）校內(nèi)教學(xué)督導(dǎo)評(píng)價(jià)

學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)、教學(xué)督導(dǎo)室和兄弟院校有關(guān)專家多次組織觀摩血液病檢驗(yàn)技術(shù)教學(xué)，課程以血液病檢驗(yàn)項(xiàng)目為導(dǎo)向，教學(xué)內(nèi)容適合崗位需求，教學(xué)方法選擇得當(dāng)，尤其校院結(jié)合、工學(xué)結(jié)合，使教、學(xué)、做一體化，具有科學(xué)性和創(chuàng)新性。這種以“學(xué)習(xí)在就業(yè)崗位、就業(yè)于學(xué)習(xí)環(huán)境”的學(xué)習(xí)方式，非常有利于高技能人才的培養(yǎng)。

課程組教師大多來自一線，臨床經(jīng)驗(yàn)豐富，授課生動(dòng)、實(shí)訓(xùn)仿真，對(duì)學(xué)生技能的培養(yǎng)有很大幫助。利用臨床實(shí)際標(biāo)本，較好地體現(xiàn) “邊學(xué)邊做”的特點(diǎn)，教學(xué)效果好，深受學(xué)生歡迎。

（三）學(xué)生對(duì)教、學(xué)、做一體的學(xué)習(xí)方式和來自臨床一線的專業(yè)課老師非常認(rèn)可，由于理論與實(shí)踐結(jié)合緊密，激發(fā)了學(xué)習(xí)積極性和主動(dòng)性，對(duì)其他專業(yè)課程的學(xué)習(xí)起到積極的推動(dòng)作用。近三年的學(xué)生評(píng)價(jià)結(jié)果平均分在96.0分以上。

近三年的學(xué)生評(píng)價(jià)結(jié)果

姓名

04上半年

05上半年

06上半年

07上半年

08上半年

平均分 侯振江

95.6

95.8

96.2

96.2

96.1

95.98 王娟

94.8

94.1

94.4

94.8

95.6

94.14 蘇國宏

94.3

94.8

95.2

95.6

95.2

95.02 李吉勇

94.2

94.6

94.4

95.4

95.5

94.82 李紅巖

94.1

94.4

94.6

94.4

94.31 張瑞蘭

94.8

95.2

95.4

95.2

95.6

95.24

朱一堂

95.1

95.4

95.8

95.1

95.28 陳洋

94.8

94.1

94.2

93.2

94.26 吳雅峰

94.1

94.8

95.7

95.8

95.8

95.24 李洪志

94.2

95.1

94.8

95.4

95.2

94.94 2005、2006、2007年新生報(bào)到率分別為92.9%、95%和97.2%。2007屆畢業(yè)生綜合評(píng)價(jià)的稱職率：92 %。2007屆用人單位滿意率：95 %。

2007屆畢業(yè)生質(zhì)量總體評(píng)價(jià)優(yōu)秀率75%、良好率25%。

十、課程特色

1．以“典型工作任務(wù)”為導(dǎo)向，構(gòu)建課程體系，突出臨床的實(shí)用性。2．創(chuàng)建院校合作、工學(xué)結(jié)合的教學(xué)模式，突出職業(yè)性。3．全面構(gòu)建優(yōu)秀的教學(xué)資源庫，充分滿足學(xué)生自學(xué)、自測、交流和知識(shí)拓展的需要，具有拓展性。介紹完畢，謝謝各位專家、評(píng)委！

第二篇：總體設(shè)計(jì)理念的說明

總體設(shè)計(jì)理念的說明

——文化廣場設(shè)計(jì)

1、項(xiàng)目背景

該市是我國對(duì)俄羅斯貿(mào)易第二大口岸，該市被自然地形和鐵路、公路劃分為四個(gè)等組團(tuán)。該區(qū)目前是城鄉(xiāng)接合部，有大量農(nóng)民住宅，總歸對(duì)其的定位是城市新區(qū)，承擔(dān)文體中心的職能。該小區(qū)及其所位于新區(qū)臨河地帶，西側(cè)、南側(cè)邊界為城市規(guī)劃次干道，是臨河坡度較為平緩的區(qū)域，所處地塊總用地93.57公頃。

2、方案定位

有利于促進(jìn)城市發(fā)展，提升城市形象,有利于展示和傳承歷史文化,有利于生態(tài)環(huán)境和生存條件,在這三個(gè)有于的條件下著力打造具有綜合性功能的文化廣場。本方案將廣場定位為具 有時(shí)代特色和地域特色，反映城市歷史，滿足集會(huì)、市民休息、娛樂等綜合性城市開放空間。

3、規(guī)劃原則

（1.）文化原則：廣場設(shè)計(jì)應(yīng)力求挖掘本地深厚的文化底蘊(yùn)和歷史背景，并體現(xiàn)新時(shí)代城市的形象。

（2.）以人為本：設(shè)計(jì)應(yīng)體現(xiàn)以人為本的原則。營造良好的環(huán)境效果，為人們提供舒適、多樣性的活動(dòng)空間。廣場空間應(yīng)能滿足人的多維感受，并進(jìn)行無障礙設(shè)計(jì)。

（3.）生態(tài)原則：充分考慮當(dāng)?shù)貧夂蛱卣鳎⒃u(píng)估周邊地區(qū)環(huán)境特征，實(shí)現(xiàn)人與自然，廣場和區(qū)域的和皆共生。

（4.）可持續(xù)性發(fā)展原則：廣場設(shè)計(jì)為將來預(yù)留發(fā)展空間，并能與全局協(xié)調(diào)。

（5.）經(jīng)濟(jì)原則：生態(tài)方法就是最經(jīng)濟(jì)的方法，運(yùn)用生態(tài)方法指導(dǎo)設(shè)計(jì)和實(shí)施，不但可以增加環(huán)境的多樣性，也能增加建筑物的節(jié)能性及可行性，利用最少的資源和能源，得環(huán)境上、經(jīng)濟(jì)上和社會(huì)上最大的利益。

4、設(shè)計(jì)分析

設(shè)計(jì)構(gòu)思依托地域特點(diǎn)，注重文化特質(zhì)，豐富景觀內(nèi)涵,強(qiáng)調(diào)環(huán)境的融合和肌理的延續(xù)，確立城市形象設(shè)計(jì)概念，現(xiàn)代化城鎮(zhèn)風(fēng)貌。增強(qiáng)城市的識(shí)別性和標(biāo)志性景觀,設(shè)計(jì)的理念為和諧社會(huì)，通過對(duì) 道路，水景，小品等景觀元素的重點(diǎn)處理，使景觀設(shè)計(jì)與總體規(guī)劃布局取得整合。而在設(shè)計(jì)手法上則體現(xiàn)出比較強(qiáng)烈的文化氣息。

（1.）整個(gè)廣場的設(shè)計(jì)以景觀綠化為主導(dǎo)思想，構(gòu)成開放的空間布局，又加以淵源流長的水系，使得整個(gè)廣場既靈活，充滿了現(xiàn)代氣息，又蘊(yùn)涵有豐富的歷史文化；寓意開放、和諧的文化氣息。

（2.）局部的設(shè)計(jì)是廣場的點(diǎn)睛之筆。廣場主入口處，以古典的鋪裝，給人以＂家＂的感覺．廣場中心以雕塑為核心托歷史文化，加以旱地噴泉，體現(xiàn)了既寧靜又莊嚴(yán)的環(huán)境，在廣場的里一個(gè)入口設(shè)計(jì)文化景墻，以緬懷歷名人為主線與博物館相呼應(yīng)。各細(xì)部相結(jié)合整各廣場給人們一個(gè)回味歷史，展望未來的思索空間。

（3.）植物配置上，結(jié)合當(dāng)?shù)剜l(xiāng)土樹種并具代表性的樹種，與周圍建筑相結(jié)合，選取四季不同色調(diào)變化和光影效果的植物，合理布局：規(guī)則式的場景布局采用了規(guī)則式的綠地形式，并在規(guī)則式的綠地形式內(nèi)協(xié)調(diào)布有小型自由種植，使整個(gè)廣場統(tǒng)一，協(xié)調(diào)。通過對(duì)軟環(huán)境（樹木、水體、草皮）及硬環(huán)境（建筑物）的生態(tài)設(shè)計(jì)、創(chuàng)造出綠色開放空間，使自然與人工有機(jī)聯(lián)系，將自然引入都市。

第三篇：總體設(shè)計(jì)文件修改說明及承諾書

總體設(shè)計(jì)文件修改說明及承諾書

我公司現(xiàn)申報(bào)“總體設(shè)計(jì)文件審查”，與已批準(zhǔn)的設(shè)計(jì)方案相比，此次申報(bào)的設(shè)計(jì)文件審查有以下內(nèi)容的修改，特此說明：

□

1、無修改，與設(shè)計(jì)方案一致。

□

2、修改內(nèi)容如下（提供修改前后圖紙對(duì)比）：

為提高總體設(shè)計(jì)文件規(guī)劃審核效率，本單位鄭重作出以下承諾：

1、本單位已明確知曉本總體設(shè)計(jì)文件規(guī)劃審核意見，并承諾在申請(qǐng)規(guī)劃許可證前完成修改。若由于本單位在申請(qǐng)規(guī)劃許可證前變更審核通過后的總體設(shè)計(jì)文件或未按審核意見要求進(jìn)行修改，由此而引起的重新審圖及審批時(shí)間延長等問題將由本單位負(fù)責(zé)。

2、本單位承諾提供的總體設(shè)計(jì)文件修改說明（較批準(zhǔn)的設(shè)計(jì)方案）準(zhǔn)確無誤，沒有遺漏。若由于規(guī)土部門按此審查通過總體設(shè)計(jì)文件規(guī)劃審核后在規(guī)劃許可證階段又發(fā)現(xiàn)修改說明以外的新問題的，由此造成的圖紙修改、重新審圖及審批時(shí)間延長的，相關(guān)責(zé)任由本單位負(fù)責(zé)。

承諾單位（名稱）

建設(shè)單位：（章）設(shè)計(jì)單位：（章）

日期：年月日日期：年月日

第四篇：情況說明檢驗(yàn)報(bào)告

情況說明

陜西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院：

我公司于2016年8月31送樣品：油管通徑規(guī)，委托貴單位進(jìn)行檢驗(yàn)，由于我公司送樣員在填寫相關(guān)資料時(shí)，將我公司全稱（陜西麥客科技發(fā)展有限責(zé)任公司）簡寫為陜西麥客發(fā)展有限公司，導(dǎo)致檢驗(yàn)報(bào)告委托單位一欄名稱與實(shí)際名稱不符，現(xiàn)懇請(qǐng)貴院將原檢驗(yàn)報(bào)告委托單位變更為我公司全稱。

特此說明！

陜西麥客科技發(fā)展有限責(zé)任公司 2016年9月5日

第五篇：病理檢驗(yàn)技術(shù)

熒光原位雜交 FISH 用DNA探針與組織切片上互補(bǔ)的DNA雜交，通過觀察熒光信號(hào)在染色體上的位置和顏色來反映相應(yīng)基因的情況。

第一章 病理檢驗(yàn)技術(shù)概述

病理學(xué)的作用：

1、研究疾病的病因、發(fā)病機(jī)制，認(rèn)識(shí)

疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律

2、為臨床診斷疾病、治療疾病、分析預(yù)

后提供依據(jù)等。

病理檢驗(yàn)的定義：

------在臨床醫(yī)療實(shí)踐中，通過對(duì)患者病變組織或細(xì)胞進(jìn)行檢查，以協(xié)助臨床診斷疾病的方法稱為病理檢驗(yàn)。

一、病理檢驗(yàn)的主要任務(wù)

（一）確定疾病的診斷

（二）為臨床選擇治療方案提供依據(jù)

（三）提供有關(guān)預(yù)后因素的信息。（最正確、最可靠、最后的診斷）

（四）了解疾病的發(fā)展及分析療效

（五）為科學(xué)研究積累資料

（六）為提高臨床診斷水平服務(wù)

二、病理檢驗(yàn)分類

（一）細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)（脫落細(xì)胞、細(xì)針穿刺吸取）

（二）組織學(xué)檢驗(yàn)---最后的診斷

活體組織檢驗(yàn)、手術(shù)標(biāo)本檢驗(yàn)、手術(shù)中病理檢驗(yàn)

（三）尸體剖驗(yàn)

病理學(xué)技術(shù)：

在病理學(xué)臨床及科學(xué)研究工作中使用的各種技術(shù)方法統(tǒng)稱為病理學(xué)技術(shù)。病理檢驗(yàn)技術(shù)的質(zhì)量和水平是臨床病理診斷工作中至關(guān)重要的因素。“技術(shù)是病理學(xué)之母。”

第二節(jié)、病理檢驗(yàn)技術(shù)常規(guī)工作 收發(fā)工作

協(xié)助取材和尸體剖檢工作 制作制作切片及細(xì)胞學(xué)涂片 病理資料管理及檢索

藥品、物資的管理及儀器維護(hù) 大體標(biāo)本的收集和制作

第六章 組織制片技術(shù) P39 常規(guī)石蠟切片制作程序 組織固定→取材→固定→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片→染色→封片→觀察

第一節(jié) 組織塊的處理

（一）組織切片制作過程中的各種操作：

1、取材與固定：合理取材、及時(shí)固定；

2、洗滌、脫水、透明；

4、浸蠟、包埋；

5、切片、貼片（展片、撈片）和染色：

6、封片：長期保存。

一、取材：

-------按照病理檢查的目的和要求，切取適當(dāng)大小和數(shù)量的組織塊，用于制作組織切片的過程。

注意事項(xiàng)：

部位、大小、形狀、方向

二、固定和固定液

生理鹽水或10%甲醛。

固定：將組織浸入某些化學(xué)試劑，使

4、蒸汽固定法：為了固定組織中可溶性物組織細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)盡量保持在生活狀態(tài)時(shí)質(zhì)、的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置過程。

血液、細(xì)胞涂片等；

（一）固定目的：

（三）固定液的特性：

（1）防止組織、細(xì)胞的自溶與腐敗；

1、滲透力強(qiáng)，迅速滲入組織內(nèi)部

（2）凝固或沉淀細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)；

2、不會(huì)使組織過度收縮或膨脹

（3）增加組織硬度，便于制片；

3、能硬化組織，保持細(xì)胞形態(tài)和位置

（4）產(chǎn)生不同的折光率，有利于染色后觀

4、使組織對(duì)染料產(chǎn)生親和力，產(chǎn)生折光率 察辨認(rèn)。

（四）組織固定注意事項(xiàng)：

（二）固 定 方 法：

1、及時(shí)固定

1、浸泡固定法：病理外檢一般均用此法；

2、固定容器宜大

2、注射、灌注法：體積過大或整個(gè)臟器或

3、固定液應(yīng)足量：固定組織體積的10-20尸體的固定； 倍

3、微波固定法：應(yīng)用于臨床病理快速診斷，4、防止組織變形 微波固定組織溫度至關(guān)重要。微波固定介質(zhì)

5、確定恰當(dāng)?shù)墓潭〞r(shí)間 可用

（五）組織固定液 常用固定液： 1、4%甲醛（福爾馬林）：配置為市售的40%甲醛1份加水9份混合即成；

2、酒精（乙醇）：高濃度組織硬化顯著，先用80%固定數(shù)小時(shí)，再用95%固定；

3、中性緩沖甲醛液：可提高免疫組化陽性率。

4、酒精-甲醛液（A-F固定液）：

5、Zenker固定液： 1、4%甲醛（福爾馬林）：

久置能產(chǎn)生白色沉淀（三聚甲醛），容易氧化變成甲酸，嚴(yán)重影響細(xì)胞核著色。固定陳舊多血臟器如肝脾，易產(chǎn)生黑色色素，叫甲醛色素。

2、酒精（乙醇）：

高濃度組織硬化顯著，先用80%固定數(shù)小時(shí)，再用95%固定；

50%以上濃度的乙醇可溶解脂肪和類脂質(zhì)，也可以溶解血色素和損害其他色素。

中性甲醛液

配置：40%甲醛150-200ml，蒸餾水800-850ml，磷酸二氫鈉4g，磷酸氫二鈉13g。常用的固定液或標(biāo)本保存液，是免疫組化最常用的固定液。

選擇性固定液：

1、丙酮：廣泛用于組織化學(xué)中酶的固定；

2、戊二醛固定液：廣泛用于電鏡標(biāo)本的固定，應(yīng)采用緩沖液配制固定液

3、醋酸：不能保存糖，也不能固定脂肪及類脂，5%醋酸pH2～3可抑制細(xì)菌和酶的活性；

4、苦味酸：強(qiáng)酸，易燃易爆，酒精溶液可固定糖類；

5、氯化汞：只宜固定薄片組織，2mm～3mm厚的組織需固定6～18小時(shí)；

6、重鉻酸鉀：固定高爾基體、線粒體，對(duì)酸性染料著色良好；

7、鋨酸：濃度為1%～2%水溶液用于電鏡制片；

骨組織脫鈣液：

在脫鈣前，先將骨或鈣化組織鋸成4mm～5mm厚的簿片，按常規(guī)充分固定，然后進(jìn)行脫鈣。

組織脫鈣的方法及應(yīng)用：

（一）酸性溶液脫鈣：

1、脫鈣液配制：

（1）5%～10%硝酸水溶液：濃硝酸5ml～10ml，蒸餾水加至100ml；（2）硝酸甲醛液：濃硝酸10ml，10%福爾馬林90ml；

（3）Schridde液：濃硝酸20ml，10%福爾馬林100ml。對(duì)組織無明顯損害，迅速、安全；（4）5%～10%甲酸水溶液：甲酸5ml～10ml，蒸餾水加至100ml（5）甲酸酒精液：脫鈣速度較硝酸慢，但破壞組織也輕。（6）Plank-Rychlo液：脫鈣比5%硝酸液快3倍。

Jenkins混合酸脫鈣液、鹽酸氯化鈉液、枸櫞酸鈉、甲酸脫鈣液等

2、脫鈣方法：骨片懸于脫鈣液中，敞開瓶口，每日更換一次新液，最好早晚各一次。

（二）螯合劑脫鈣：速度很慢，但對(duì)組織成分幾乎沒有損害。用于免疫組化染色較理想。

1、脫鈣液配制：取乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）25g，溶解于200ml蒸餾水中，氫氧化鈉（NaOH）調(diào)整pH至7.0（大約加2.5g NaOH）。EDTA與鈣可形成一種可溶性非離子化的復(fù)合物。

2、脫鈣法：將骨片浸入脫鈣液中，每周更換一次新液。一般致密骨脫鈣需要6～8周，含有少量骨渣的組織約需一周。

（三）電解脫鈣法： 此法即在脫鈣液中通過電流，電解加速脫鈣。

1、電解脫鈣液配制：

25%鹽酸50ml，25%甲酸200ml，蒸餾水750ml；

2、脫鈣方法：直徑30cm電解槽內(nèi)盛大量電解液，將骨組織放在一個(gè)四周多孔的塑料小容器內(nèi)放入電解液內(nèi)，此容器通入白金絲或鎢絲作陽極，在電解液內(nèi)再放一白金絲或鎢絲作陰極，通入6V直流電，電流強(qiáng)度1A～2A，調(diào)節(jié)兩電極的距離來控制。電解液溫度不超30℃～45℃，一般2～6小時(shí)即可脫盡。

脫鈣后的處理

1、脫鈣后的組織經(jīng)流水沖洗4～12小時(shí)，除去殘留的脫鈣劑；

2、修去鋸面的薄層組織，切成適當(dāng)大小的組織塊，進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟及包埋；

3、用酸性液脫鈣后的組織，蘇木素染色時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長，在伊紅中的時(shí)間應(yīng)該縮短；

4、脫鈣后組織切片在染色中較易脫落，充分烤片，染色前滴加2%～5%的火棉膠液，以使之粘貼牢固。

三、洗滌、脫水、透明

（一）組織的洗滌

1、洗滌的目的：防止組織中留有較多的固定液而影響脫水劑；

2、洗滌的方法：

（1）固定劑以水配制者：常用的固定劑是甲醛溶液（10%福爾馬林溶液），用流水沖洗。大組織沖洗24小時(shí)，小組織沖洗2～4小時(shí)。

（2）固定劑含酒精者：一般不用沖洗，如需要沖洗必須用與固定劑中的酒精濃度相近或略低的酒精沖洗。

（二）組 織 脫 水

1、脫水的目的及原則：用某些溶劑逐漸將組織內(nèi)吸收的水分置換出來，以利于透明劑和石蠟或火棉膠的滲入。

2、脫水劑的種類及特征：

特征：能與水在任何比例下混合；能與透明劑在任何比例下混合；

單純脫水劑：脫水后再經(jīng)二甲苯透明才浸蠟；

酒精：最常見的脫水劑。脫水能力強(qiáng)，但易使組織收縮、脆。

單純脫水劑：脫水后再經(jīng)二甲苯透明才浸蠟； 丙酮：脫水強(qiáng)，組織收縮嚴(yán)重，價(jià)格高。異丙醇：可代替無水酒精使用。價(jià)格貴。脫水兼透明劑：脫水后即可直接浸蠟。

正丁醇：為脫水劑兼有透明劑作用。用于植物標(biāo)本的處理效果較好。叔丁醇：脫水兼透明。電鏡標(biāo)本制作時(shí)常用作中間脫水劑。

（三）組織透明或媒浸

目的是使石蠟?zāi)芙虢M織塊便于包埋。

1、二甲苯：最常用的透明劑，有毒、易揮發(fā)，透明力強(qiáng)，但組織易收縮變脆，小塊組織以30分鐘。

2、苯和甲苯：組織收縮小、不易變脆。

3、氯仿：即三氯甲烷。易發(fā)揮，透明力比二甲苯差，時(shí)間長，多用于大塊組織的透明。

4、香柏油：為柏樹樹脂，收縮小，透明時(shí)間長，常用于染色后切片的透明。

四、組織浸蠟（透蠟）P48

（一）浸蠟的目的和方法：除去組織中的透明劑而代之以石蠟，以便切片。

（二）浸蠟劑的種類：

1、石蠟：經(jīng)56℃～58℃石蠟浸蠟的組織包埋，有利于組織切片的連續(xù)性，對(duì)蠟塊資料保存可靠，一般為3-4小時(shí)。

2、火棉膠：目前使用火棉膠浸入組織較少，多用于染色前的覆蓋液。

3、碳蠟；

4、明膠。

五、組 織 包 埋 P49

（一）石蠟包埋法：為最常用的包埋法。

1、常規(guī)石蠟包埋法:包埋過程、包埋面的選擇；

2、體液標(biāo)本一般不做包埋和切片。

（二）快速石蠟包埋法：

1、操作過程：全程均加熱，20～30分鐘完成。（1）取材、固定：薄片1cmⅹ0.5cmⅹ0.3cm,在快速固定液（95%酒精、40%甲醛、冰醋酸）內(nèi)加熱煮沸1～2分鐘。（2）脫水：組織厚度不超1.5mm，加入丙酮5 ～ 8ml，煮沸5～6分鐘。（3）透明：加二甲苯加熱1～2分鐘。（4）包埋：石蠟包埋冰水冷卻硬化。

3、碳蠟包埋法：即聚乙烯二醇。包埋熔點(diǎn)為38℃和52℃左右的分子量為1500和4000兩種。適用于脂肪及脂類組織的制片。

4、明膠包埋法：

5、石蠟半薄切片包埋法：常根據(jù)組織類型進(jìn)行脫水、透明和浸蠟。

6、樹脂包埋法：適用于不脫鈣骨髓活檢組織、肝、腎穿刺活檢和淋巴結(jié)組織等。

第二節(jié) 切片器具與切片

一、切片機(jī)：制作組織切片的主要儀器設(shè)備。

（一）切片機(jī)的種類及使用：

1、石蠟切片機(jī)：能將石蠟包埋的組織切出一定厚薄的切片。分為旋轉(zhuǎn)式、滑動(dòng)式、擺動(dòng)式等。最常用的為旋轉(zhuǎn)式。

2、冷凍切片機(jī)：多為恒冷箱切片機(jī)用于組織化學(xué)、免疫組化及病理診斷。

3、火棉膠切片機(jī)：多用于眼球、內(nèi)耳、脊髓和腦的切片，切片厚度可達(dá)20μm～50μ。

二、組織切片刀 P58

（一）切片刀的種類： 其長度一般有 4cm、8cm、14cm、18cm、20cm、24cm等。

1、平凹型：一側(cè)為直線，另一側(cè)為凹度，大凹度刀適用于火棉膠切片，小凹度刀適于石蠟切片。

2、雙平型：刀身兩側(cè)均無凹度，兩面是平面。適用于冷凍切片和輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)的石蠟切片。

3、雙凹型：刀身兩側(cè)均有凹度，適用于輪轉(zhuǎn)式石蠟切片。

4、一次性刀片：需配置專用刀架。

（二）刀背套與刀柄：刀背套供磨刀時(shí)用，刀背套有金屬和塑料兩種。刀柄有木制及塑料制兩種。

（三）磨刀與被刀：

1、手工磨刀法：

①磨刀前用軟布試凈磨刀石面塵垢；

②裝上刀背和刀柄，滴磨刀油于磨刀石上；

③右手緊握刀柄，左手緊按刀背另一端，刀刃向前，逐漸推動(dòng)刀片至磨刀的一端，從右到左全部磨完。

2、被刀：用被刀皮革被刀，與磨刀的動(dòng)作相反；

三、石蠟切片制作 P60

（一）切片前的準(zhǔn)備：

修整蠟塊，然后置于冷水或冰箱中冷卻，以增加硬度；

準(zhǔn)備毛筆、眼科彎鑷子；

載玻片均勻涂上薄層蛋清甘油，占2/3；

接通攤片機(jī)電源，調(diào)節(jié)攤片（42℃～48℃）

烤片（60-70℃左右）的溫度；

（二）快速石蠟切片 P63 快速石蠟切片時(shí)，組織取材應(yīng)薄，厚度一般不超過2mm，組織固定后要重新修正至1.5mm左右厚度，以利脫水，將組織塊埋入預(yù)制的蠟塊內(nèi)，冷卻硬化后方可切片（取材、脫水、透明浸蠟、包埋見）。

切片撈至載波片上，用酒精燈略加烘烤，再入二甲苯脫蠟，經(jīng)95%酒精后即刻入水水化，隨后即可進(jìn)行常規(guī)快速蘇木素伊紅染色。

（三）冷凍切片制作 P64 組織經(jīng)過冷凍后，其內(nèi)的水分結(jié)冰，使組織變硬，有利于切成薄片。

一、設(shè)備要求：

（一）冷凍切片機(jī)：一般由轉(zhuǎn)輪式切片機(jī)或推拉式切片機(jī)加上制冷裝置而成：

1、二氧化碳制冷器；

2、半導(dǎo)體制冷器；

（二）恒冷箱冷凍卻片機(jī)：利用壓縮機(jī)通過制冷劑循環(huán)制冷。

冰凍切片機(jī)

二、制作過程

（一）取材、固定：選取有代表性的組織制片，厚度1～2mm。一般病理急診、組織化學(xué)顯示酶和免疫病理學(xué)進(jìn)行熒光抗體研究等，多數(shù)都用新鮮組織直接冷凍，切片后再進(jìn)行固定、染色或直接染色或孵化。采用二氧化碳冷凍設(shè)備制作須先固定。

（二）冷凍切片方法：

1、恒溫箱冷凍切片法

（1）開機(jī)預(yù)冷：切片前2～3小時(shí)，所需溫度如下： 各種新鮮組織冷凍切片參考溫度（℃）腦、淋巴結(jié)、肝、腎、脾、睪丸-12--16 肌肉、腎上腺、甲狀腺、子宮、卵巢-18--22 乳腺、皮膚、前列腺-22--28（2）放入、速凍、修整組織，待恒冷箱內(nèi)溫度降至要求溫度后，將組織用OT包埋，再速凍1～2分鐘，裝于機(jī)樣本夾上，修平；（3）調(diào)節(jié)抗卷板，以與刀刃平行對(duì)齊；

（4）切片：所需厚度為4μm～8μm，用毛筆展平，貼于潔凈玻片上，晾干或吹干后染色；（5）切片后處理：清潔保養(yǎng)。

2、半導(dǎo)體冷凍切片法

3、二氧化碳冷凍切片法

（三）冷凍切片粘片法

1、蛋白甘油粘片法：

按石蠟切片的粘片法處理，但溫度不宜超過40℃。烤干后即取出，70%酒精和自來水洗后即可染色。

2、Lillie明膠粘片法：切片放入1%明膠水溶液數(shù)分鐘，撈到載玻片上，5%甲醛水溶液固定5分鐘，水洗10分鐘，即可染色。

3、酒精明膠粘片法：切片浸入0.1%或0.75%明膠溶液（用40%酒精配制）數(shù)分鐘，用載玻片撈起后，室溫干燥，入氯仿1分鐘，經(jīng)95%和75%酒精洗去氯仿，再經(jīng)蒸餾水洗后即可染色。

三、注意事項(xiàng)

1、冷凍切片的組織不用固定；

2、組織盡可能新鮮，不能用濕的鹽水紗布包裹和放入10℃冰箱內(nèi)緩慢冷卻，否則組織內(nèi)水分可逐漸析出形成水晶，造成組織結(jié)構(gòu)破壞；

3、冷凍包埋劑應(yīng)適量；

4、組織太小，不能做冷凍切片；

5、冷凍時(shí)間太久的組織不能馬上切片，以免損傷切片刀；

6、一般來說骨組織和鈣化組織不能做冷凍切片。觀察

第七章組織切片染色技術(shù)

第一節(jié) 病理切片染色概述 P68

一、概念：用染液對(duì)組織切片進(jìn)行處理，使組織中的不同成分被染上相應(yīng)的顏色，產(chǎn)生不同的折射率，以利于顯微鏡觀察和分析。

三、染色的原理

染色就是染色劑和組織細(xì)胞相結(jié)合的過程。

（一）染色的化學(xué)反應(yīng)：組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與堿性染料的陽離子相結(jié)合，堿性物質(zhì)與酸性染料的陰離子相結(jié)合。具有酸性的細(xì)胞核被堿性蘇木素液所染色，堿性的胞質(zhì)與酸性染料伊紅所染色。

（二）染色的物理作用：

1、滲透作用：染料進(jìn)入組織；

2、吸附作用：把另一種物質(zhì)的分子、原子、離子集中在界面上的過程；

3、吸收作用（溶解作用）。

三、常用染料概述：

（一）染料的性質(zhì)：有色的無機(jī)物或有機(jī)化合物

1、發(fā)色團(tuán)：能使染料分子產(chǎn)生顏色的基團(tuán)，叫發(fā)色團(tuán)；

2、助色團(tuán)：能使染料分子顏色加深，并與被染物質(zhì)分子形成親和力的基團(tuán)。

（二）染料的分類：

1、據(jù)染料來源：天然、合成染料和無機(jī)化合物

2、根據(jù)染料化學(xué)反應(yīng)：酸性、堿性和中性染料

3、據(jù)染色對(duì)象：（1）組織染料： 1）結(jié)締組織和肌纖維染料：有膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維和肌原纖維等染料； 2）神經(jīng)組織的染料：尼氏體、神經(jīng)軸突、神經(jīng)髓鞘、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等染料；（2）細(xì)胞染料：細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)染料等

常用染色劑簡介見附錄一。

五、常用染色術(shù)語的概念

一、普通染色：最常應(yīng)用的是蘇木素-伊紅染色法，簡稱HE染色。

二、特殊染色：特染是為了顯示特定的組織結(jié)構(gòu)或其他的特殊成分。

三、單一染色：選用一種染料染色。

四、復(fù)染色：用兩種不同性質(zhì)的染料染色方法。

五、多種染色法：用兩種以上染料的染色法。

第三節(jié) 染色前后的處理 P74

一、染色前的處理：

1、脫蠟至水：必須經(jīng)過二甲苯脫蠟、各級(jí)酒精（100%、95%、85%、75%）至水洗的過程。

2、脫汞鹽結(jié)晶：切片在脫蠟后用0.2%～0.5%碘酒精處理5～15分鐘，使汞鹽沉淀物溶解。

3、脫甲醛色素：在切片脫蠟至水后，用Verocay液（1%氫氧化鉀水溶液1ml，80%酒精100ml）處理10分鐘，然后流水沖洗5分鐘再常規(guī)染色。

（二）染色后的處理：

1、分化作用：必須用1%鹽酸酒精脫去所吸附的染料。

2、藍(lán)化作用：分化后，用堿性水使細(xì)胞核變成藍(lán)色。

3、染色后的脫水：低度到高度酒精逐步脫水。

4、染色后的透明：透明劑用二甲苯。

三、封固：

1、封固劑：

（1）甘油明膠封固劑

配制方法：明膠10g，蒸餾水60ml，甘油70ml，石炭酸0.25g。（用前將甘油明膠置于溫箱內(nèi)融化后即可封片）。（2）中性樹膠（二甲苯樹膠液）：屬油性封固劑，組織切片需徹底脫水、透明。優(yōu)良封固劑，可直接封片。

七、染色的注意事項(xiàng)

（1）具備實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)備和染色準(zhǔn)備工作（2）正確完成固定、脫水、透明、脫蠟步驟；

（3）染色過程中，既要按書本的方法進(jìn)行操作，又要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行靈活運(yùn)用。

第八章 組織切片常規(guī)染色技術(shù) 第一節(jié) 常規(guī)染色的概念

一、染色原理

（一）蘇木素染色原理：蘇木紅和鋁結(jié)合形成帶正電的 藍(lán)色色精，帶負(fù)電的細(xì)胞核與帶正電的藍(lán)色色精以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。

（二）伊紅染色原理：伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料。在伊紅Y染料液中加入醋酸，使胞質(zhì)中蛋白質(zhì)帶正電荷，可被帶負(fù)電的伊紅染料染色，從而使細(xì)胞質(zhì)及紅細(xì)胞等染成紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比。

二、染液的配制 P80

（一）蘇木素液：從蘇木素的樹中提煉的天然染料。

1、Harris蘇木素液：最常用。

蘇木素 1g 蒸餾水 200ml 無水酒精 10ml 氧化汞 0.5g 硫酸鋁鉀 20g 配置方法見書81頁。染色3～4分鐘。保存時(shí)間為一年。

（二）伊紅染液：

0.5%伊紅酒精染液:醇溶伊紅Y0.5g，95%酒精100ml。染色時(shí)間1～3分鐘。水溶性伊紅酒精液： 沉淀酸化伊紅Y酒精液：

2、Mayer蘇木素改良配法：

（1）A液：蘇木素2g，無水酒精40ml加熱溶解；

（2）B液：硫酸鋁鉀100g，蒸餾水600ml，稍加熱使硫酸鋁鉀在水中溶解，再將A與B液混合2分鐘。用蒸餾水補(bǔ)足600ml，加入400mg碘酸鈉充分混勻，蘇木素染液呈紫紅色即可。染色時(shí)間為10～20分鐘。

3、Ehrlich蘇木素液：蘇木素2g，無水酒精100ml，甘油100ml，硫酸鋁鉀15g，蒸餾水100ml，冰醋酸10ml。（染色時(shí)間為10～20分鐘）。

4、Gill改良蘇木素液：蘇木素2g，無水酒精250ml，硫酸鋁鉀17.6g，蒸餾水750ml，碘酸鈉0.2g,冰醋酸20ml。染色時(shí)間為5分鐘。

（三）0.5%～1%鹽酸酒精分化液：

鹽酸 0.5ml～1ml, 75%酒精99ml。此液用一段時(shí)間后需要延長時(shí)間或更換液體，新液體分化時(shí)間要短。

（四）藍(lán)化液：“藍(lán)化”是指蘇木素液染細(xì)胞核后，通過鹽酸酒精分化，切片由酸性轉(zhuǎn)入弱堿性液體，使之變藍(lán)的過程。1、50℃溫水

2、稀氨水（1%氫氧化銨液）3 蒸餾水 100ml，氨水1ml。

三、染色方法 P83

（一）人工操作蘇木素-伊紅染色方法：

1、脫蠟至水：

（1）二甲苯Ⅰ脫蠟（脫蠟2-5分鐘）；（2）二甲苯Ⅱ（2-5分鐘）；（3）無水酒精Ⅰ（1-2分鐘）；（4）95%酒精1分鐘；（5）85%酒精1分鐘；（6）75%酒精1分鐘；（7）自來水洗2分鐘；

2、蘇木素染色：蘇木素液染色5-10分鐘；自來水洗1分鐘；

3、分化返藍(lán)：0.5%～1%鹽酸酒精分化數(shù)秒至30分鐘呈紫紅色；自來水1分鐘；用溫水(50℃)藍(lán)化5～15分鐘(或稀氨水藍(lán)化30秒，自來水洗5～10分鐘)；

4、伊紅染色：水溶性伊紅可直接入伊紅液，1分鐘；自來水洗1分鐘；

5、脫水、透明：

（1）85%酒精（20秒）；（2）95%酒精Ⅰ（1分鐘）；（3）無水酒精Ⅰ（1分鐘）；（4）二甲苯Ⅰ（1～2分鐘）；（5）二甲苯Ⅱ（1～2分鐘）。

6、封固：

（1）用中性樹膠封片；

（2）附貼標(biāo)簽可書寫病理編號(hào)。

（二）冷凍切片HE染色：

冷凍切片貼片后，用95%酒精和冰醋酸5ml的混合液固定1分鐘，自來水洗30秒～1分鐘，HE染色。

（三）快速石蠟切片染色：脫蠟至水、HE染色

第三節(jié) 染色中常見問題及注意事項(xiàng) P85 HE染色結(jié)果：

細(xì)胞核被蘇木素染成明顯的藍(lán)色；

細(xì)胞質(zhì)被伊紅染成紅色。

第九章 組織切片特殊染色 P87 為了顯示特定的組織結(jié)構(gòu)或組織細(xì)胞特殊成分，采用特定的染料和方法對(duì)組織切片進(jìn)行染色。第一節(jié) 結(jié)締組織染色 P88

一、膠原纖維染色

Van Gieson染色法（簡稱VG染色）（書上無）

1、染料配制：

（1）鐵蘇木素液：見Masson三色染色（2）Van Gieson苦味酸酸性品液：

甲液：1.22%苦味酸飽和水溶液90ml，乙液 ： 1%酸性品紅水溶液10ml。

兩液提前配制，臨用前混合使用。

2、染色步驟：

（1）切片脫蠟至水（2）蒸餾水洗（3）Weigert鐵蘇木素液染5～10分鐘（4）自來水洗2分鐘

（5）據(jù)情況可用0.5%鹽酸酒精分化（6）自來水洗至變藍(lán)再用蒸餾水洗（7）Van Gieson液染色3～5分鐘（8）去染液，用95%酒精分化脫水

（9）無水酒精脫水（10）二甲苯透明（11）中性樹膠封固。

3、染色結(jié)果：膠原纖維紅色,肌纖維黃色, 細(xì)胞核黑色.4、膠原纖維染色的應(yīng)用 P88（1）對(duì)梭形細(xì)胞腫瘤來源、性質(zhì)提供診斷和鑒別診斷的依據(jù)；

（2）顯示各種組織、器官病變時(shí)的修復(fù)情況與纖維化程度，如肝穿組織中纖維組織的含量與分布的觀察；

（3）鑒定心肌壞死后疤痕的形成；

（4）鑒別心內(nèi)膜彈力纖維增生癥與心內(nèi)膜心肌纖維化。

三、網(wǎng)狀纖維染色 Gomori銀染法: P92

1、染液配制：銀氨溶液：甲液：硝酸銀10.2g,蒸餾水100ml；乙液:氫氧化納3.1g,蒸餾水100ml

2、染色步驟：（1）切片脫蠟至水（2）高錳酸鉀氧化液（高錳酸鉀0.5g,蒸餾水95ml,再加3%硫酸5ml)5分鐘(3)水洗1分鐘(4)2%草酸漂白2分鐘,水洗2分鐘(5)2%硫酸鐵銨媒染2分鐘(6)蒸餾水充分洗(7)氨銀溶液染色1分鐘(8)蒸餾水洗3次(9)20%福爾馬林液還原5分鐘(10)蒸餾水洗2次(11)入0.2%氯化金液中調(diào)色2分鐘,蒸餾水洗2次(12)2%硫代硫酸鈉固定2分鐘,自來水、蒸餾水洗（13）必要時(shí)用VG或伊紅復(fù)染（14）無水酒精脫水（15）二甲苯透明（16）中性樹脂封固。

3、染色結(jié)果：網(wǎng)狀纖維呈黑色，膠原纖維呈紅色。

4、網(wǎng)狀纖維染色的應(yīng)用

（1）區(qū)分上皮性與非上皮性腫瘤；（2）區(qū)分血管內(nèi)皮瘤與血管外皮瘤；（3）判斷原位癌與早期浸潤癌；

（4）觀察肝臟病變處的網(wǎng)狀支架塌陷或增生的情況，判斷病變性質(zhì)、程度及發(fā)展與轉(zhuǎn)歸。

四、多色染色： P93

（一）Masson三色染色法： P93

1、染液配制：

（1）麗春紅酸性品紅液：麗春紅0.7g，酸性品紅0.3g，冰醋酸1ml，蒸餾水99ml（先配好醋酸溶液后，分別溶解麗春紅或酸性品紅）；亮綠液：亮綠1.0g，冰醋酸1ml，蒸餾水99ml。（2）苯胺藍(lán)液：苯胺藍(lán)2g，冰醋酸2ml，蒸餾水加至100ml。

（3）Weigert鐵蘇木素液：甲液：蘇木素1g，95%酒精或無水酒精100ml；乙液：29%三氯化鐵水溶液4ml，純鹽酸1ml，蒸餾水95ml（臨用前取甲、乙兩液混合即可，24小時(shí)內(nèi)使用有效。）

2、Masson三色的染色步驟：（1）切片脫蠟至蒸餾水；

（2）Weigert鐵蘇木素染色5～10分鐘；（3）流水稍洗；（4）鹽酸酒精分化；（5）流水沖洗數(shù)分鐘；

（6）麗春紅酸性品紅液染色5分鐘；（7）蒸餾水稍沖洗；

（8）1%磷鉬酸水溶液處理5分鐘，鏡下見肌肉纖維呈紅色，膠原纖維呈淡紅色即可；（9）不經(jīng)水而直接用苯胺藍(lán)液或亮綠液染5分鐘；（10）1%冰醋酸處理1分鐘；（11）95%酒精、無水酒精脫水；（12）二甲苯透明；（13）中性樹膠封固。

3、染色結(jié)果：膠原纖維呈藍(lán)色（用苯胺藍(lán)染）或綠色（用亮綠染），肌纖維、細(xì)胞質(zhì)呈紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)褐色。

（二）Mallory三色染色法 P94

1、染液配制：

（1）0.5%酸性品紅水溶液；

（2）苯胺藍(lán)橙黃G液：苯胺藍(lán)0.5g，橙黃G 2g，磷鎢酸1g，蒸餾水100ml。（先將1%的磷鎢酸溶液配好，一半用于溶解苯胺藍(lán)，另一半用于溶解橙黃G，加熱溶解，冷卻后分別過濾，可長期保存。臨用前將兩液混合）。（3）重鉻酸鉀液；

2、染色步驟：

（1）切片脫蠟至水；（2）Zenker固定液固定1小時(shí)；（3）充分水洗；（4）0.5%碘酒精處理5～10分鐘；（5）0.5%硫代硫酸納處理2～5分鐘；（6）充分水洗，再用蒸餾水浸洗；（7）酸性品紅液染5分鐘；（8）水洗、蒸餾水洗；（9）苯胺藍(lán)橙黃-G液染20～30分鐘；（10）直接95%酒精快速分化；（11）無水酒精脫水；（12）二甲苯透明；（13）中性樹膠封固。

3、染色結(jié)果：膠原纖維、網(wǎng)狀纖維呈藍(lán)色，心機(jī)纖 維橘紅色，紅細(xì)胞呈淺黃色，細(xì)胞核呈黑色。

結(jié)締組織復(fù)合染色的應(yīng)用（1）區(qū)分各種纖維成分；

（2）判定各種組織、器官的病變程度和修復(fù)情況；（3）鑒別某些梭形細(xì)胞軟組織腫瘤的來源的判斷（4）用于腎小球腎炎的診斷。

第二節(jié) 肌肉組織染色 P95

（一）Mallory磷鎢酸蘇木素染色法（簡稱PTAH）：

1、染液配制

（1）磷鎢酸蘇木素：蘇木素0.1g, 磷鎢酸2g, 蒸餾水100ml。

將蘇木素加入20ml蒸餾水中,加熱溶解，再將磷鎢酸溶于80ml蒸餾水中。蘇木素冷卻后將兩液混合放置3～3月后使用。此液可保存數(shù)年。急用時(shí)可加高錳酸鉀0.15g促成熟,12～24小時(shí)即可用。

（2）酸性高錳酸鉀液：5%高錳酸鉀水溶液50ml；

0.5 硫酸水溶液50ml。

2、染色步驟：

（1）組織以Zenker液固定最佳；如用甲醛固定則先要用Zenker液處理（37℃溫箱內(nèi)）3小時(shí)；

（2）切片脫蠟至水，用碘液除汞，用95%酒精脫碘；（3）充分水洗；（4）酸性高錳酸鉀液處理5～10分鐘（5）自來水洗2分鐘；（6）1%草酸漂白1分鐘；（7）自來水洗，蒸餾水洗2次；

（8）磷鎢酸蘇木素液浸染24～48小時(shí)；（9）直接用95%酒精分化；（10）無水酒精脫水；（11）二甲苯透明；（12）中性樹膠封固。

3、染色結(jié)果：橫紋肌纖維、細(xì)胞核呈紫藍(lán)色，膠原纖維、網(wǎng)狀纖維呈玫瑰紅色。

4、肌肉組織染色

常用于Mallory磷鎢酸-蘇木素染色法能顯示與區(qū)分：(1)橫紋肌纖維的正常與異常形態(tài)；

(2)診斷心肌損傷早期病變及全身彌漫性血管內(nèi)凝血有一定參考價(jià)值；(3)用于橫紋肌肉瘤時(shí)顯示橫紋，(4)用于顯示神經(jīng)膠質(zhì)。

第三節(jié) 脂肪染色 P96 蘇丹Ⅲ染色法：(書上無)

1、染料配制：

（1）蘇丹Ⅲ染液：蘇丹Ⅲ 0.15g,60%～70%酒精100ml。（將蘇丹Ⅲ染料溶于60%～70%酒精形成飽和液，作長期備用液。臨時(shí)配制時(shí)需要過濾才可使用。備用液僅用上清液。密封容器存放備用液）。

（2）甘油明膠液：明膠 5g，甘油35ml，蒸餾水 35ml。（先將明膠溶于蒸餾水中加熱溶解，再加甘油充分混合，加1～2粒石炭酸。冷卻后4℃保存，用時(shí)水浴加熱）。

2、蘇丹Ⅲ染色步驟：

（1）冷凍切片厚8μm～10μm；（2）蒸餾水稍洗；（3）Harris蘇木素1～2分鐘；（4）自來水洗，鹽酸酒精分化、反藍(lán)；（5）水洗、蒸餾水洗；（6）70%酒精浸洗；

（7）蘇丹Ⅲ染液30～60分鐘（如置于56℃溫箱中可縮短時(shí)間）；（8）70%酒精分化數(shù)秒；（9）蒸餾水洗；（10）在空氣中稍晾干；（11）甘油明膠液封固。

3、注意事項(xiàng)：采用冰凍切片染色。蘇丹Ⅲ染液溫浸時(shí)應(yīng)加蓋，防止染液中的酒精或丙酮揮發(fā)。在封固前，甘油明膠液應(yīng)放置56℃溫箱中加溫，避免搖蕩，防止封固時(shí)出現(xiàn)氣泡。切片染色后不能長期保存，應(yīng)盡快觀察或照相。

4、染色結(jié)果：脂肪呈橘紅色，脂肪酸不作色，細(xì)胞核呈淡藍(lán)色。

5、脂肪染色的應(yīng)用（1）鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡的性質(zhì)（水樣變性、脂肪變性或糖原）；

（2）顯示動(dòng)脈粥樣斑塊病灶內(nèi)的脂質(zhì)沉積、脂肪栓塞。

（3）神經(jīng)系統(tǒng)一些變性、脫髓鞘疾病的診斷有極為重要的作用。

（4）脂肪染色主要用于卵巢纖維瘤與卵泡膜細(xì)胞瘤、腎母細(xì)胞瘤、皮脂腺癌的診斷和鑒別診斷。

第四節(jié) 糖原染色與粘液染色

一、過碘酸雪夫染色法（PAS法）：P98

1、染色配制：

（1）過碘酸氧化液：過碘酸0.5g，蒸餾水100g。（此溶液應(yīng)放4℃冰箱保存）。（2）Schiff液：堿性品紅 1g，1mol/L鹽酸 20ml，偏重亞硫酸鈉（鉀）1g，雙蒸餾水200ml。（先將雙蒸餾水200ml煮沸，加入1g堿性品紅，再煮沸2分鐘。冷卻至50℃加1mol/L的鹽酸20ml，待溫度降低至25℃時(shí)，加入偏重亞硫酸鈉（鉀）1g～1.5g,溫室2小時(shí)后堿稍帶紅色，5小時(shí)后為無色液體，如有顏色應(yīng)加入活性炭1g～1.5g,用雙層濾紙過濾,盛于棕色磨口瓶內(nèi),放入4℃冰箱保存。

2、染色步驟：

（1）切片脫蠟至水；（2）蒸餾水洗；（3）0.5%過碘酸氧化液10～20分鐘；(4)充分蒸餾水洗；（5）進(jìn)入Schiff液染色10分鐘（如室溫低于15℃可稍加溫）；（6）自來水洗10分鐘；（7）用Mayer或 Harris明礬蘇木素染細(xì)胞核3～5分鐘；（8）鹽酸酒精分化；（9）水洗；（10）無水酒精脫水；（11）二甲苯透明；（12）中性樹膠封固。

3、染色結(jié)果：糖原及其它PAS反應(yīng)陽性物質(zhì) 染成紅色，細(xì)胞核染成藍(lán)色。

4、糖原染色的應(yīng)用

（1）用于顯示糖原，對(duì)明確細(xì)胞空泡的性質(zhì)、糖原貯積病和糖尿病的診斷及某些透明細(xì)胞腫瘤的鑒別診斷方面具有重要作用。

（2）用于中性黏液物質(zhì)，對(duì)低分化腺癌的診斷也有一定價(jià)值。

（3）清楚地顯示基底膜（腎炎的診斷）、網(wǎng)狀纖維、真菌菌絲、寄生蟲及腺泡狀軟組織肉瘤中胞質(zhì)內(nèi)結(jié)晶體。

（4）觀察缺血缺氧早期心肌壞死或梗死區(qū)的糖原減少情況。

粘液染色

二、奧辛藍(lán)染色法（簡稱AB染色）：P99

1、染液配制：（1）AB液：（pH 2.5)奧辛藍(lán)8GS 1g，蒸餾水97ml，冰醋酸3ml，麝香草酚2粒（防腐）。（先配好3%冰醋酸，然后溶解奧辛藍(lán)。過濾后使用。pH值2.5～3.0之間.(2)0.5%中性紅水溶液: 中性紅 0.5g,蒸餾水加至 100ml。

2、奧辛藍(lán)染色步驟：

(1）石蠟切片脫蠟至水；(2)AB液染色20～30分鐘；（3）快速蒸餾水洗；（4）0.5%中性紅染1～2分鐘；（5）快速只能流水洗；

（6）95%酒精、無水酒精脫水；（7）二甲苯透明；（8）中性樹膠封固。

3、染色結(jié)果：酸性粘液物質(zhì)（及真菌菌絲、隱 球菌的夾膜）呈藍(lán)色，中性粘液呈紅色，混合 粘液呈紫紅色，細(xì)胞核呈紅色。

4、粘液染色的應(yīng)用

（1）黏液性腫瘤的診斷和鑒別診斷，如黏液瘤、黏液肉瘤、脂肪瘤、胃腸道低分化腺癌、軟骨黏液樣纖維瘤；

（2）用于結(jié)締組織疾病及慢性胃炎腸上皮化生等的診斷。

第五節(jié) 病原微生物染色 P100 石炭酸品紅抗酸桿菌染色法：P101

1、染色配制：

石炭酸品紅液：堿性品紅 1g，無水酒精 10ml，石炭酸（5%）水溶液100ml。

（首先將堿性品紅溶于無水酒精，然后與石炭酸水溶液混合，臨使用前過濾）。

2、抗酸桿菌染色步驟：（1）石蠟切片脫蠟至水；

（2）將石炭酸品紅液滴切片上，文火熱至蒸氣出現(xiàn)，離火染15～20分鐘；（3）蒸餾水洗；

（4）1%鹽酸酒精液分化，至無紅色染料流下止；（5）蒸餾水洗；（6）1%美藍(lán)液復(fù)染2分鐘；（7）95%酒精分化，美藍(lán)脫色，以示清楚；（8）無水酒精脫水；（9）二甲苯透明；（10）中性樹膠封固。

3、染色結(jié)果：抗酸桿菌(如結(jié)核桿菌、麻風(fēng)桿菌 等）呈紅色，細(xì)胞核呈淡藍(lán)色。

4、病原微生物染色的應(yīng)用

用于結(jié)核病的干酪樣壞死灶及麻風(fēng)病中泡沫狀細(xì)胞（瘤型麻風(fēng)）內(nèi)的抗酸桿菌，其形態(tài)特點(diǎn)是：結(jié)核分支桿菌彎曲細(xì)長，長短粗細(xì)不一；而麻風(fēng)桿菌短粗成堆，數(shù)量較多（稱為麻風(fēng)團(tuán)）。

淀粉樣物質(zhì)的染色（書上無）Bennhola剛果紅染色法：

1、染色配制：

（1）1%剛果紅水溶液： 剛果紅 1g，蒸餾水100ml。（2）碳酸鋰飽和水溶液：碳酸鋰 1.25g，蒸餾水100ml。

2、染色結(jié)果：

淀粉樣物質(zhì)呈紅色，其它組織呈淺紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。

3、Bennhola剛果紅染色步驟：（1）石蠟切片脫蠟至水；（2）明礬蘇木素染液淡染細(xì)胞核3～5分鐘；（3）1%鹽酸酒精液稍分化。水洗1～2分鐘；（4）充分水洗返藍(lán)；（5）蒸餾水稍洗；

（6）1%剛果紅溶液染色10～30分鐘或更長；（7）經(jīng)碳酸鋰飽和溶液處理1～2分鐘；

（8）80%酒精液急速分化至無紅色染液流下為止；（9）水洗1～2分鐘；

（10）95%酒精脫水及無水酒精脫水；（11）二甲苯透明；（12）中性樹膠封固。

4、淀粉樣物質(zhì)的染色的應(yīng)用

（1）淀粉樣物質(zhì)染色能顯示變性程度:如全身淀粉樣變性；（2）用于全身消耗性疾病的觀察:如結(jié)核病、甲狀腺髓樣癌等；（3）用于腫瘤的診斷和鑒別診斷:如內(nèi)分泌腫瘤的間質(zhì)常出現(xiàn)淀粉樣物質(zhì)沉著，又如甲狀腺髓樣癌、胰島細(xì)胞瘤、肺小細(xì)胞癌等，淀粉樣物質(zhì)染色陽性可作為診斷重要依據(jù)；

（4）為某些疾病的診斷與鑒別診斷提供依據(jù):鈣化上皮瘤、聲帶息肉等常出現(xiàn)淀粉樣變性，可為診斷依據(jù)。

黑色素染色

Masson-Fontana染色法：

1、染液配制：

（1）Masson-Fontana染：10%硝酸銀 15ml，蒸餾水 15ml。（將濃氨水逐滴加入10%硝酸銀液中直至微乳白色，并加入蒸餾水15ml，過濾后靜置1～2小時(shí)后使用。4℃冰箱保存，恢復(fù)室溫后使用，每次使用前應(yīng)重新過濾）。（2）5%硫代硫酸鈉水溶液。

2、染色結(jié)果：黑色素、嗜銀細(xì)胞顆粒呈黑色，細(xì)胞核、膠原纖維呈紅色。

3、黑色素（Masson-Fontana）染色步驟：（1）10%福爾馬林固定組織，石蠟包埋；（2）切片脫蠟至水；（3）蒸餾水充分洗；

（4）用Masson-Fontana液室溫染18～48小時(shí)；（5）蒸餾水細(xì)數(shù)次；

（6）用5%硫代硫酸鈉水溶液固定5～10分鐘；（7）蒸餾水洗數(shù)次；

（8）用0.5%中性紅對(duì)比染色1～2分鐘；（9）蒸餾水洗5～10分鐘；（10）無水酒精脫水；（11）二甲苯透明；（12）中性樹膠封固。

4、黑色素染色的應(yīng)用 主要用于黑色素瘤的診斷，尤其是無色素性的分化差的黑色素瘤的診斷極為重要；對(duì)淋巴結(jié)內(nèi)轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞，證實(shí)有無黑色素的存在對(duì)腫瘤的診斷可提供有利的證據(jù)；還有一些腫瘤及疾病中也存在色素，如色素性神經(jīng)瘤、透明細(xì)胞肉瘤、黑色棘皮病、老年疣等等均可提供診斷依據(jù)。

第十五章 病理檢驗(yàn)技術(shù)進(jìn)展 P177

一、計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)

二、流式細(xì)胞儀技術(shù)

三、分子病理學(xué)技術(shù)

第十六章 病理檔案管理 P190

二、組織制片常用玻璃器具：（1）染色缸：

（2）標(biāo)本瓶：用于脫水、透明及染色；（3）培養(yǎng)皿：盛裝蛋清甘油；

（4）配制試劑用具：量筒、量杯、燒杯、三角燒瓶、漏斗、吸管、滴管、滴瓶、試劑瓶、蒸餾水瓶、玻璃棒及研缽等；（5）酒精燈：用于染液配制等；（6）載玻片：（7）蓋玻片：

3、免疫組化常用設(shè)備：（1）微波爐或高壓鍋；（2）微量加樣器；（3）微波震蕩器；

（4）恒溫水浴箱或濕盒；

4、常用器械盒工具：

（1）標(biāo)本巨檢器械：解剖刀、手術(shù)刀、手術(shù)剪、鑷子、血管鉗、不繡鋼尺、搪瓷盤等；（2）尸體剖驗(yàn)器械；

三、常用玻璃器材的清洗方法

（一）新購玻璃器皿的處理: 先用洗衣粉浸泡洗刷,自來水洗后再用1%～2%鹽酸水溶液浸泡數(shù)小時(shí)后，用自來水沖洗干凈，再用蒸餾水洗2次。

（二）使用后玻璃器皿的清洗方法：

（1）自來水沖洗；

（2）毛刷蘸洗衣粉洗擦干凈；

（3）自來水沖洗；

（4）涼干后放入清潔液內(nèi)浸泡24小時(shí)；

（5）自來水沖洗干凈，最后用蒸餾水洗2次；

（6）把器皿置于有孔架上涼干或溫箱中烤干，備用。

清潔液的配制：重鉻酸鉀+濃硫酸+蒸餾水

（三）新購載玻片的處理：

高質(zhì)量的已經(jīng)處理，可直接使用。對(duì)不凈的可放入清潔液浸泡5～12小時(shí)以上，流水沖洗，蒸餾水清洗，95%酒精浸泡，擦干備用

（四）新購蓋玻片的清洗：

投入清潔液中浸泡1～2小時(shí)左右，經(jīng)流水反復(fù)沖洗，蒸餾水洗，后投入95%酒精浸泡數(shù)分鐘，再轉(zhuǎn)入純酒精中浸泡，使用前用潔凈綢布擦干或在溫箱中烤干備用。

（五）舊載玻片的清洗：

用洗衣粉液煮沸30分鐘。

（六）舊蓋玻片的清洗：

先置入1%洗衣粉液中煮沸1分鐘，離火，待沸騰水泡平下后，再行煮沸，反復(fù)2～3次即可。基層醫(yī)院病理科（室）應(yīng)完成：

1、常規(guī)石蠟切片：按常規(guī)，在3~5天發(fā)出報(bào)告；

2、冷凍切片或快速石蠟切片：術(shù)中快速病理診斷。

3、常用特殊染色和免疫組織化學(xué)檢查：據(jù)臨床病理診斷的需要。

4、診斷細(xì)胞學(xué)檢查：完成臨床脫落細(xì)胞學(xué)及穿刺組織涂片檢查。

5、尸體剖驗(yàn)檢查：與臨床醫(yī)師密切結(jié)合，開展新生兒及成人尸檢，提高診斷治療水平。