第一篇：生物制藥復習重點

【專業符號】

rhIFN 重組人干擾素 EPO 促紅細胞生成素 rhGH 重組人生長激素

rhtPA 重組人組織纖溶蛋白酶源激活劑 INS 胰島素 HBV 乙肝病毒

HBsAg 乙型肝炎表面抗原 IL 白細胞介素 CSF 集落刺激因子 SOD 超氧化物歧化酶 PEG 聚乙二醇

Ag 抗原Ab 抗體 SCF 超臨界流體 RCF 相對離心力 HPLC 高效液相色譜

SDS-PAGE SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法 HIC 疏水作用層析 IEF 等點聚焦電泳

PCR 聚合酶鏈反應技術 ELISA 酶聯免疫反應

G-CSF 粒細胞集落刺激因子 LacZ β-半乳糖苷酶

IPTG 異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷 DTT 二硫蘇糖醇 CM 羧甲基

DEAE 二乙氨基乙基 MVL 脂質體多囊顆粒 McAb 單克隆抗體 IFN干擾素

CSF集落刺激因子 HAMA人抗鼠抗體反應 GF生長因子 【名詞解釋】

1生物藥物：來源于生物體的，用于預防治療和診斷或用于調節機體生理功能，促進集體康復、保健物質。

干細胞：是一類未分化的細胞或原始細胞，是具有自我復制能力的多潛能細胞。轉基因動物：將外源基因導入哺乳動物的受精卵和胚胎中，使導入基因與受精卵染色體整合，并將外源基因穩定的傳給自帶，使子代表現外源基因的性狀。基因治療：在基因水平上治療疾病的方法，其手段包括，基因置換，基因修正，基因修飾，基因失活，引入新基因等。反義藥物（信息藥物）：是根據堿基互補原理，用人工合成或生物體內合成的載有特殊生物信息的藥物分子和特殊核酸酶。生物技術：利用生物有機體和其部分組成成分，形成新的技術手段來發展新產品和新工藝的一種技術體系。

細胞工程：通過細胞融合入，核質轉移，染色體或基因移植以及組織和細胞培養等方法，重組細胞的結構和內含物，以獲得人們所需的特定的細胞，細胞產品和新物種的生物工程技術。

酶工程：指通過化學方法，酶學方法和DNA重組技術改善自然酶的形成，結果和性質，提高酶的催化效率，降低成本并在大規模工業生產化中應用。

微生物工程：又稱發酵工程，是一門利用微生物的生長和代謝活動來生產各種有用物質的工程技術，是生物工程的重要組成部分。

2生化藥物：從生物體分離純化制得的生化基本物質，以及用化學合成，微生物合成或現代生物技術制得的一類藥物。生物技術藥物：利用生物體或其組成部分發展產品的技術體主要是DNA重組技術研制的藥物。

基因工程藥物：利用重組DNA技術，將該基因導入可以大量產生的受體細胞中不斷繁殖或表達，并能進行大規模生產的基因或蛋白質。

生物制品：引用普通的或以基因工程，細胞工程，蛋白質工程，發酵工程等生物技術獲得的微生物，細胞及各種動物和人源組織和液體等生物材料制備，用于疾病預防，治療和診斷的藥品。

疫苗：一切通過注射或黏膜途徑接種，可以誘導機體產生針對特定致病原的特異性抗體或細胞免疫，從而使機體獲得保護或消滅該致病原的生物制品。親和層析：利用生物分子與配基之間所具有的專一而又可逆的親和力

紙層析法：紙纖維上吸附的水為固定相，有機溶劑為流動相，當流動相流經固定相，樣品中各組分電荷，親和力等差異，各組分分配不同，以不同速度前進而分離。

超臨界流體萃取技術：supercritical

fluid,scf 利用超臨界流體，即其溫度和壓力略超過或靠近臨界溫度（Tc）和臨界壓力（pc），介于氣體和液體之間的流體為萃取劑，從固體或液體中萃取出某種高沸點或熱敏性成分。

4基因工程:是指在分子水平上按照人們的設計方案將DNA片段插入載體DNA分子，從而實現DNA分子體外重組，產生新的自然界從未有過的重組DNA，然后再將之引入特定的宿主細胞，進行擴增和表達，使宿主細胞獲得新的遺傳性狀的技術。

蛋白質工程：基因工程的基礎上，結合蛋白質結晶學，計算機輔助設計和蛋白質化學等多學科的基礎知識通過對基因的人工定向改造等手段，對蛋白質進行修飾，改造和拼接以生產出能滿足人類需要的新型蛋白質的技術。

重組DNA技術：在體外將兩個或多個不同的DNA片段全部或部分構建成一個DNA分子的方法。

限制性內切酶：一類能識別并切割雙鏈DNA分子中特異核苷酸序列的DNA水解酶。

聚合酶鏈反應技術：指在四種脫氧核苷三磷酸存在下，以寡聚糖核苷酸為引物，以單鏈DNA為模板，經DNA聚合酶催化，合成DNA互補鏈達到基因擴增目的的過程。

原位雜交：直接用探針與菌落或組織細胞中核酸雜交，未改變核酸位置。

插入失活：抗四環素基因上插入一個外源基因后，導致抗四環素基因失活，變成只對氨芐青霉素有抗性。

5初生氨基酸：微生物通過固氮作用，硝酸還原自然界吸收氨使酮酸氨基化成相應的氨基酸，或微生物通過轉氨酶作用，將一種氨基酸的氨基轉移到另一種酮酸上，生成的新氨基酸。

固定化酶：借助物化方法，將酶限制或定位于特定空間仍具有催化活性。

次生氨基酸：在微生物作用下，以初生氨基酸為前體轉化成的其他氨基酸。

吸附法：通過載體表面和酶分子表面的次級鍵相互作用。物理吸附：通過氫鍵，疏水鍵和π-電子力等將酶固定于不溶性載體。

共價結合法：借助共價鍵將酶的活性非必需側臉集團和載體的功能基因進行偶聯。交聯法：利用雙功能或多功能試劑CHO—戊二醛CHO在酶分子間，或酶分子與載體間。交聯以共價鍵。

包埋法：將酶或細胞定位于凝膠網絡或微膠囊內技術。

脂質體：是具有脂雙層結構和一定包裹空間的微球體。

抗體藥物：抗體是有機體在抗原性物質的刺激下所產生的一種免疫球蛋白，能與細菌，病毒或毒素等異源性物質結合而發揮預防，治療疾病作用。

細胞因子：多種細胞所分泌的能調節細胞生長分化、調節免疫功能、參與炎癥發生和創傷愈合等小分子多肽。

多肽類藥物：機體特定腺體合成并釋放的一種物質，通過與遠程敏感細胞表面的手提相互作用而使靶細胞發生變化。

基因工程技術：利用重組DNA及蛋白質工程技術對編碼抗體的基因按不用需要進行加工改造和重新裝配，經轉染適當的受體細胞所表達的抗體分子，第二代單克隆抗體。

單克隆抗體：由一個雜交瘤細胞的細胞株（或克隆系）產生的抗一種抗原決定簇的抗體。

單克隆抗體技術：體外能無線增殖的骨髓瘤細胞和能分泌抗體的小鼠肝臟B淋巴細胞融合，制備雜種細胞，再通過篩選和克隆化培養生產某種預定性質的單克隆抗體，又可在體外無限增值。

質粒：獨立于染色體外能夠進行自我復制的雙鏈DNA分子。

【填空題】 疫苗分類

1傳統性疫苗:a滅火疫苗b減毒疫苗 2新型疫苗:a重組疫苗b核酸疫苗

3治療（預防）性疫苗:a重組幽門螺桿菌疫苗Hp；b乙肝（HBV）治療性疫苗；c針對自身免疫性疾病治療性疫苗；d心血管病疫苗；e腫瘤疫苗；f糖尿病疫苗 抗體藥物結構分類

1診斷性抗體：單克隆抗體和多抗2鼠源和兔源3治療性抗體：人源性或人源化抗體

抗體藥物按結構分5類

1鼠或兔源抗體：用于各種診斷試劑，OKT-3，美國FDA批準的第一單抗，抗CD3，用于治療和預防急性腎移植排斥反應。

2嵌合抗體：人源序列2/3，鼠源1/3 3人源化抗體：人源序列90%，鼠源序列10%

4全人源抗體：噬菌體展示技術Humira,轉基因小鼠技術Vectibix 5抗體片段：Fab、scFv.、dsFv、Diabody、Minibody

生物技術的基本內容

a基因工程 b細胞工程 c酶工程d 微生物工程：發酵工程

酶與細胞的固定化方法

酶：a可溶——間歇；b固定化——間歇（吸附、包埋）；連續（交聯、共價鍵結合）

基因藥物種類

1基因治療2反義核酸藥物3小干擾RNA 生物制品分類疫苗 2 抗毒素及免疫血清 3血液制品 4 細胞因子及重組DNA產品 5 診斷制品

生物藥物分類

按化學本質和化學特性分類氨基酸類藥物及其衍生物：a單一氨基酸制劑 b 復方氨基酸制劑 2 多肽和蛋白質類藥物：a多肽 b 蛋白質類藥物 c 細胞生長因子酶類藥物：a助消化的酶類 b消炎酶 c 心血管疾病的治療酶 d 抗腫瘤類 e 其他酶類 f輔酶類藥物核酸及其降解物和衍生物：a核酸類 b多聚核苷酸 c核苷、核苷酸及其衍生物 5 多糖類藥物 6 維生素與輔酶脂類藥物：a磷脂類 b多價不飽和脂肪酸和前列腺素 c膽酸類d固醇類 f卟啉類 按原料來源分類：人體組織來源、動物組織來源、微生物來源、植物來源、海洋生物來源

按功能用途分類：治療藥物、預防藥物、診斷藥物、其他生物醫藥用品、常用提取方法 ：1.酸、堿、鹽水溶液提取方法2有機溶劑提取 3表面活性劑提取方法與反膠束萃取法 4雙水相萃取法 5 超臨界萃取法

測定蛋白質的濃度方法：凱氏定氮法、紫外吸收法、分光光度法、考馬斯亮蘭法 蛋白質純度的方法：色譜純、電泳純、結晶純

層析分離方法：吸附層析、分配層析、離子交換層析、凝膠層析、親和層析、疏水作用層析

空間結構分析方法

二級結構的比例：圓二色譜法

三維結構：a X射線晶體衍射法-蛋白質晶體b 核磁共振c電子顯微鏡

按分子大小分離方法：有超濾法、透析法（膜分離法）、凝膠過濾法、超速離心機法

按所帶電荷差異分離方法：電泳、離子交換層析、等點聚焦

親和層析方法：免疫親和層析、生物親和層析、金屬螯合親和層析、染料親和層析、凝集素親和層析

重組DNA技術必備的四個工具：工具酶、載體、目的基因（靶基因）、宿主細胞 主要工具酶：限制性內切酶、T4 DNA連接酶、大腸桿菌DNA聚合酶I、反轉錄酶 質粒三種構型：cccDNA、LDNA、OCDNA PCR技術反應周期三個步驟：高溫變性、低溫退火、適溫延伸

PCR技術的應用：遺傳性疾病的基因診斷、傳染病的診斷（肝炎病毒）、癌基因監測、法醫學（親子鑒定）上的應用、DNA測序、基因克隆、引入基因點突變，基因融合等

DNA重組體篩選和鑒定方法：抗生素抗性基因分析法、X-gal顯色反應篩選重組體、質粒小量快速提取加酶切鑒定 20種蛋白質氨基酸和分類

根據R基側鏈的極性：a非極性AAb極性AA

最大吸收波長：Trp最大吸收波長為279nm, phe259nm, tyr278

α-氨基參加的反應:與亞硝酸反應（脯氨酸除外）、與酰化試劑反應、烴基化反應、Edman反應、脫氨基反應、α-氨基和α-羧基共同參加的反應和作用：茚三酮反應、成肽反應、發酵法的基本過程：培養基與滅菌—菌種—菌種—滅菌接種發酵—產品提取及分離純化

氨基酸分析主要方法：紙層析法、薄層層析法、高效液相層析法（HPLC）、質譜（MS）

氨基酸分離方法：溶解度法、特殊試劑沉淀法、吸附法、離子交換法、等電點沉淀法

氨基酸的生產方法和特點：蛋白質水解法、化學合成法、發酵法、酶法

固定化方法：a載體結合法：共價結合法、離子結合法、物理吸附法b交聯法c包埋法：格子型、散膠囊型 多肽抗生素的作用：抗菌活性，免疫活性，抗氧化作用，結合礦物質，殺蟲、抗病毒作用

多肽藥物的種類：

1、多肽激素：促皮質激素、胃泌素、胸腺素

2、多肽類細胞生長調節因子：表皮生長因子、轉移因子等

3、其他生化藥物：蜂毒、蛇毒、各種水解物

與蛋白質分離純化相關的理化特性：分子大小，分子形狀，帶點特性，溶解特性，與配體特異性結合不同，吸附性質，變性和復性

蛋白質的粗分級方法：硫酸銨分級沉淀，有機溶劑分級沉淀，超速離心，等電點沉淀，透析、超過濾，蛋白質結晶

蛋白質溶液的濃縮方法：鹽析濃縮，有機溶劑沉淀濃縮，葡聚糖凝膠濃縮，聚乙二醇透析濃縮，超濾濃縮，真空減壓濃縮與薄膜濃縮

【簡答題】

生物制藥分類方法？能舉二例。（填空題）生物制品的概念（名解）、特點、分類（填空）。其質量控制和質量檢定是采用生物學分析方法，其效價或生物活性檢定有其變異性生物制品原材料、中間品、成品、運輸、貯存、甚至使用保持在“冷鏈”系統中 3 特別是預防制品使用對象不是病人，而是健康人群生物制品的質量控制實行生產全過程監控。

離子交換色譜的操作步驟 1 離子交換劑預處理離子交換劑轉型（陽離子交換劑用NaOH處理，可轉為Na+型，用HCl處理，則轉為H+型；陰離子交換劑用NaOH處理轉為OH-型，用HCl處理轉為Cl-型等）3 裝柱溶劑或緩沖液平衡 5 上柱（加樣）洗脫和收集（洗脫液中應含有離子，樣品離子交換，交換劑親和力）7再生（再次轉型）分離純化原理根據分子形狀與分子大小 2 根據電荷差異根據分子極性與溶解度大小 4 根據吸附特性根據生物配基特性 基因工程的基本過程目的基因（靶基因）的制備能自我復制并具有選擇幾號的載體的選擇與制備目的基因與載體的鏈接將重組DNA分子轉入適當的宿主細胞，并在其中進行復制、擴增 5 重組子的篩選與鑒定 6 表達產物的鑒定工程菌（細胞）的大規模培養 8 表達產物的分離與純化 Ⅱ型限制酶的基本特性識別位點為4~8核苷酸序列 2 識別位點即為切割位點位點上核苷酸順序通常呈雙重旋轉對稱結構，即呈回文結構。理想質粒載體具備的條件其分子結構中帶有多克隆位點（MCS），多個單一限制酶切位點構建后的重組質粒必須易于轉化 3 帶有一個以上強選擇性標記分子量較小，屬松弛型復制控制（拷貝數多，可大10~200個拷貝受宿主細胞的控制不嚴），便于操作 5 宿主范圍小，無感染性具有復制起始點（origin,ori）表達載體具備的條件 1 一個強啟動子Lac（乳糖啟動子）或Trp（色氨酸啟動子）、及其兩側的調控序列 2 有SD序列且該序列與起始密碼ATG之間要有合適的距離在克隆基因與啟動之間有正確的閱讀框架外源基因下游有轉錄終止子等 目的基因獲得的常用方法 1 基因分離的物理方法 2 基因的化學合成聚合酶鏈反應技術（PCR）4 cDNA文庫的建立（逆轉錄法）5 基因組文庫法鳥槍法，又成散彈法

AA在醫藥中的應用：構成蛋白質的基本組成單位；蛋白質營養價值是氨基酸作用的反映（八必須）；氨基酸制劑：改善營養狀況促進康復（精氨酸組氨酸外界補充）；治療消化道疾病：谷氨酸甘氨酸及其衍生物；治療肝病：精氨酸鹽酸鹽、谷氨酸鈉、蛋氨酸、瓜氨酸；治療腦及神經系統疾病；腫瘤治療；高氨血癥、肝機能障礙：精氨酸；低鉀癥心臟病、肝病、糖尿病：天冬氨酸；禿發癥：半胱氨酸；降壓，心絞痛：組氨酸

固定化酶概念與特性：借助理化方法，將酶限制或定位與特定空間，仍具有催化活性，此即為固定化酶，又叫固著酶;優點：穩定性提高，半衰期延長；酶與底物易于分開，可長期反復使用；產品易純化，質量高；可連續生產，自動控制；酶利用率高；“三廢”少；缺點：要進行固定化載體和固定化條件的選擇；活力有損失；酶需經純化制備；投資大，成本高；對操作管理人員要求高。

發酵法的基本過程：培養基與滅菌；接種及發酵罐培養控制；取樣及分離純化。技術關鍵是選擇合適工業化的高產氨基酸新菌種及其優化發酵條件。

固定化生產L-Asp:菌種培養（天冬氨酸酶）；E-coli的固定（菌體明膠戊二醛凝固洗滌）；轉化反應（延胡索酸銨轉化液）；產品純化與精致（過濾PH2.8結晶稀氨水溶解 活性炭脫色真空干燥）

多肽及蛋白質類藥物的制備過程：原材料的獲取---預處理---細胞破碎（研磨、超聲、滲透壓、酶）---蛋白溶解（酸堿、醇、去垢劑、尿素）---粗提（沉淀、相分離、分子篩、透析）----精制（各種色譜、電泳分離、差速離心）---保存（濃縮、干燥 制劑、）

胸腺素（α1）制備工藝：

1、大腸桿菌慣用密碼子將Tα1、28個氨基酸轉化為核苷酸序列，pET-rhTα1基因的串聯，得到Tα1的n（2-8）串體；

2、對基因工程菌進行誘導表達；（3）基因工程菌的培養和高密度發酵；（4）融合蛋白的粗提、純化和裂解：（5）胸腺素α1的純化。

簡述胰島素的結構特點：51個氨基酸，有A（21）、B（30）兩條鏈，兩個鏈之間由兩個二硫鍵連接，在A鏈本身還有一個二硫鍵

胰島素提取制備方法的基本過程：1.提取2.堿化、酸化3減壓濃縮4去脂、鹽析5精制（1）除酸性蛋白（2）鋅沉淀（3）結晶

基因工程方法生產胰島素的基本步驟：在實驗室中將人胰島素基因A、B鏈的人工合成基因分別組合到E.coli的不同質粒上，然后再移至菌體內，著種重組質粒在E.coli細胞內進行正常的復制和表達，從而使帶有A、B鏈基因的工程菌株分別產生人胰島素A、B鏈，然后再用人工的方法，在體外通過二硫鍵使這2條鏈連接成有活性的人胰島素。

淋巴細胞雜交瘤技術的基本過程：1選擇制備親本細胞 2細胞融合 3篩選及克隆化培養 4大量生產 5分離純化。

第二篇：生物制藥考試重點

生物制藥考試重點

第一章

藥物是用于預防、診斷、治療人的疾病。改善生活質量和影響人體生物學進程的物質。藥物可分為化學藥物、中藥、生物藥物三大類。P1 生物藥物是指利用生物體、生物組織或其成分、綜合應用多門學科的原理和方法進行加工、制造而成的一大類藥物。P1 天然生化藥物是指從生物體（動物、植物和微生物）中獲得天然存在的生化活性物質。抗生素是指由生物（包括微生物、植物和動物）在其生命過程中所產生的一類在微量濃度下就能選擇性地抑制他種生物或細胞生長的生理活性物質及其衍生物。P2 生物制品，一般指的是用微生物及其代謝產物、原蟲、動物毒素、人或動物的血液或組織等直接加工制成，或用現代生物技術方法制備的，用于預防、治療、診斷特定傳染病或其他有關疾病的藥品。P3 自1982年重組人胰島素投放市場以來，利用基因工程開發生物藥物已經成為一個重要的發展方向。P4 1989年我國研發出第一個擁有自主知識產權的生物醫藥產品——重組人干擾素a-1b。（細胞因子）P5 生化制藥主要是從動物、植物、微生物和海洋生物中提取、分離、和純化生物活性物質，加工制造成為生化藥物。天然的生化藥物包括氨基酸、多肽、蛋白質、核酸、酶和輔酶、糖類、脂類藥物等。P5 微生物制藥是以發酵工程技術為基礎、利用微生物代謝過程生產藥物的制備技術。微生物制藥生產的藥物包括抗生素、酶抑制劑、免疫調節劑以及維生素、氨基酸、核苷酸等。P5 生物技術制藥是利用現代生物技術（包括基因工程、細胞工程、酶工程、發酵工程和蛋白質工程等），生產多肽、蛋白質、酶和疫苗、單克隆抗體等。P5 迄今為止，已上市的基因工程藥物多數以E.coli表達系統生產，其次是釀酒酵母和哺乳動物細胞（中國倉鼠卵細胞CHO和幼倉鼠腎細胞BHK）。P6

第二章

生物活性物質的制備技術很多，主要是利用它們之間特異性的差異，如分子大小、形狀、酸堿度、極性、溶解度、電荷和對其他分子的親和性等建立起來的。P9 傳統的生化制藥的基本工藝過程可分為：材料的選擇和預處理，組織與細胞的破碎及細胞器的分離，活性物質的提取和純化，活性物質的濃縮、干燥和保存。P9 細胞破碎后，一般采用差速離心方法分離細胞內質量不同的細胞組分，沉降于離心管內不同區域，分離后即所得所需組分。P14 某一物質在溶劑中的溶解度大小與該物質的分子結構及所使用的溶劑的理化性質有密切關系，一般遵循“相似相溶”的原則。P14 提取的原則是“少量多次”，即對于等量的提取溶液，分多次提取比一次提取的效果好得多。P14 生物活性物質的初步分離與純化，一般采用沉淀分離法，即通過改變某些條件或加入某種物質，使溶液中某種溶質的溶解度降低，從而從溶液中沉淀析出。沉淀分離法包括鹽析沉淀、等電點沉淀和有機溶劑沉淀等。P15

.o一般的透析時間是24h，每小時換水一次，整個過程在4C下進行。P16 電泳技術既可用于分離各種生物大分子，也可用于分析某種物質的純度，還可用于相對分子質量的測定。P17 常用的干燥方法是真空干燥和冷凍干燥。P18 生物活性物質的保存可分為干粉保存和液態保存兩種方法。P18 高產菌種或分泌新型特效藥物菌株的選育，包括自然選育和人工選育兩種兩種方法，后者又分誘變育種、雜交育種和基因工程育種等方法，其育種原理都是通過基因突變或重組來獲得優良菌株。P19 常用的自然選育方法是單菌落分離法。P19 凡是利用誘變劑處理分散而均勻的微生物群體，促進其基因發生突變的育種技術就稱為誘變育種。P19 一個優良菌株不僅要高產，而且要具有足夠的遺傳穩定性，火力強，產孢子豐富，發酵周期短，培養基要求比較粗放，能廣泛適應環境條件等優良特性。突變菌株選育后，為了應用到工業生產上，要對菌種純度、生長速度、產孢能力、培養條件、產品提取難度、保藏法等進行研究。（問答題）P20 菌種保藏的原理是根據微生物生理、生化特點，創造條件使菌體的代謝處于不活潑、生長繁殖受抑制的休眠狀態。這些人工造成的條件主要是低溫、干燥、缺氧和營養缺乏等，在這些條件下，可實現菌種的長期保藏。（問答題）P21 一般次級代謝產物合成的基本途徑包括：前體聚合、結構修飾和不同組分的裝配。P23 發酵的基本過程包括以下幾個部分：1.培養基的配制，培養基、發酵罐及其輔助設備的滅菌：2.大規模的有活性、純種的種子培養物的生產；3.發酵罐中微生物在優化條件下大規模生產目的產物；4.發酵產物的分離提取；5.發酵廢液的處理。（問答題）P25 發酵罐是微生物發酵的核心設備，是現代生物工程領域中的一種重要的生物反應器。P27 下游加工的工藝流程圖：

基因工程藥物的研制開發一般包括五個階段：1.制備基因工程菌株（或細胞）及實驗室小試階段，主要涉及DNA重組技術，稱為基因工程上游技術；2.中試與質量鑒定階段，主要涉及基因工程產物的分離、純化，稱為基因工程下游技術；3.臨床前研究階段；4.臨床試驗階段；5.試生產階段。（問答題）P29 酶工程制藥是生物制藥的主要內容之一，主要包括藥用酶的生產和酶法制藥兩方面的技術。P47 酶的提取是指在一定的條件下，用適當的溶劑（或溶液）處理含酶原料，使酶充分溶解到溶劑（或溶液）中的過程。

第三章

氨基酸的生產方法主要有水解法、化學合成法、微生物發酵法及酶合成法等。目前，除少數氨基酸采用水解提取法外，大部分氨基酸已采用化學合成法和發酵法生產，個別也采用前體發酵和酶合成法生產。P55 賴氨酸的結構：P58

第四章

自1953年人工合成了第一個有生物活性的多肽——催產素以后，整個50年代夠集中于腦垂體所分泌的各種多肽激素的研究。P71 白蛋白的性質：p80 白蛋白的生產工藝路線：

絨毛膜促性激素：是一種糖蛋白激素，作用于卵巢，使黃體發育，臨床用于男性垂體功能不足所致的性功能過低癥和隱睪癥，由于黃體功能不全引起的子宮出血和習慣性流產。與子自孕馬血清、絕經期婦女尿中提取的促性激素合用，可誘發排卵，治療不育癥。亦可用于皮膚瘙癢癥、神經性皮炎等。P90 白細胞結束-2主要功能是介導白細胞間的相互作用。P92

第五章

酶能治療某些腫瘤，如L—天冬酰胺酶可用于治療白血病。P96 尿激酶：尿激酶是絲氨酸蛋白酶，絲氨酸和組氨酸是其活性中心的必需氨基酸。尿激酶是專一性很強的蛋白水解酶，血纖維蛋白溶酶原是它唯一的天然蛋白質底物，它作用于精氨酸-纈氨酸

第三篇：淺談生物制藥

淺談生物制藥研究現狀及前景分析

摘要：本文回顧了我國生物制藥60年的發展，總結了我國生物制藥的成就和我國生物制藥的現狀及我國面臨的問題，并對我國生物制藥的發展提出建設性意見，做出展望。

關鍵詞：生物制藥，生化制藥，基因工程制藥，細胞工程制藥

生物技術的快速發展使得人類在疾病的預防、診斷和治療方面取得空前的進步。生物制藥就是把生物工程技術應用到藥物制造領域的過程。廣義的生物制藥產業包括與藥品（包括醫療器械）研制、生產、流通有關的所有集合；狹義的醫藥產業僅指生物制藥工業。目前生物制藥主要應用在腫瘤、神經退化性疾病、自身免疫性疾病、冠心病、銀屑病等疾病的治療上。

1、我國生物制藥在過去的成就

我國的生物制藥產業伴隨著新中國成立走過了不平凡的、傳奇性的60 周年。前30 年是在計劃經濟的體制下，主要是從牲畜原料中提取天然生化藥物，并在多肽合成，微生物發酵等方面也獲得很大進展；后30 年則處在改革開放的形勢下，迎來了世界生物技術藥物發展的新勢態。1982年我國第一個重組基因藥物牛胰島素上市；1989 年我國自行研制采用中國健康人血白細胞來源的干擾素基因克隆表達IFN A1b 獲得成功, 1993 年上市。之后我國生物制藥產業飛快發展，在微生物制藥方面，中國己經成為抗生素生產大國。

2、世界生物制藥產業的發展現狀

幾年來隨著生物技術的應用，生物制藥產業快速發展。目前，世界上生物制藥公司數量與日俱增，全世界從事研發工作的生物技術公司已有6000多個，其中以醫藥產品研究占有三分之二。而世界上生物制藥的高新技術比較集中于西歐、美國和亞洲的一些國家和地區，發達國家占據的份額較大。經濟的快速發展，人們生活水平的提高使得人們對醫藥的需求不斷提高，這對于醫藥行業的發展既是機遇也是挑戰。

3、我國生物制藥的進展

我國生物制藥的起步和開發較晚，直到國家“863”、“973”高技術計劃、國家自然基金等國家科技計劃項目的出臺，才有了快速發展，在近30 年的時間里逐漸縮短了與國外的差距。特別是功能基因組研究、干細胞研究、生物芯片研究等技術更是已經跨入了國際一流的行列。2006－2010 年，我國生物制藥產業總產值保持了年均25％左右的快速增長趨勢。2008 年生物制藥產業總產值768.7 億元，同比增長了30.60％，高于整個醫藥行業的增長率，占全部醫藥產業產值的8.9％；2009 年總產值達到了887.2 億元，同比增長29.1％。

我國在生物制藥方面的研究主要集中在生化藥物、基因工程藥物和細胞工程藥物。

3.1生化藥物

生化藥物是指在生物化學研究成果的基礎上，利用生物體中起重要作用的各種基本物質，通過一定的提取、分離、純化等手段研制出的具有生物活性的物質，如氨基酸、多肽、蛋白質、酶、輔酶、多糖、核苷酸、脂和生物胺等，以及它們的衍生結構。目前，我國對于生化藥物的研究已經有一定的進展：在抑制腫瘤生長、抗血栓、腦出血臨床應用、抗疲勞、治療骨關節炎等方面都獲得了一些科研成功。

3.2基因工程藥物

基因工程藥物的生產一般是通過先確定對某種疾病有預防和治療作用的蛋白質，然后利用限制性內切酶，從外源基因中將控制該蛋白質合成過程的目的基因取出來，再通過DNA連接酶把目的基因與載體（質粒、噬菌體、病毒）DNA 連接，接著轉入微生物或細胞內進行克隆，并使目的基因最終在宿主細胞內成功表達，獲得所需的蛋白質。

干擾素具有廣譜抗病毒效能，是治療乙肝的有效藥物，也是國際上批準惟一治療丙型病毒性肝炎的藥物，它是一種常見的基因工程藥物，我國對其做了大量的研究。因為只有在發生病毒感染或受到干擾素誘導物的誘導時，人體內的干擾素基因才會表達產生干擾素，而且數量微乎其微。而利用基因工程可以大量的生產干擾素，所以基因工程的優勢就顯而易見了。

3.3細胞工程藥物

細胞工程藥物是根據細胞生物學和工程學原理，定向改變細胞內的遺傳物質從而獲得新型生物或特種細胞產品的一門技術，它是細胞工程技術在制藥工業方面的應用。目前全世界生物技術藥物中使用動物細胞工程生產的已超過80%。植物細胞工程的應用集中體現在大規模植物細胞培養生產藥用成分和轉基因植物生產藥物兩個方面，同時植物生物反應器在國外的生物制藥領域已經開始發展，并取得一定的科研成功，而國內也正在逐漸被重視起來。

目前我國在細胞融合、核移植、植物藥物提取等方面已經獲得一定的研究成果。其中乳腺生物反應器的研制是最被看好的一個細胞工程制藥方向。早在2005年中國農業大學李寧教授等人首次利用體細胞克隆技術獲得人乳鐵蛋白轉基因克隆牛和人ɑ-乳清白蛋白轉基因克隆牛，該技術接近國際先進水平。

4、生物制藥發展的趨勢

近年來由于新藥研究的成本的增加，為了減少資金投入，增大消費群體，很多大的醫藥公司把目光投向了發展中國家，開始了向發展中國家進軍。而我國作為世界上最大的發展中國家，已經成為了新藥研發的熱點地區。從相關數據與統計得知，世界500 強的制藥公司中絕大多數都在中國建立了各種類型R&D機構。尤其是近年來，這種趨勢正日益增強。

5、我國生物制藥存在的問題及意見

5.1我國生物制藥存在的問題

盡管外界的環境很利于我國生物制藥的發展，而且我國也在這方面得到了較大的進展，我們還是看到了很多不足。主要表現在：（1）用于研究的投入資金不足且結構不合理。生物制藥研究所需的投入是驚人的，與一些發達國家相比，我國有限的生物制藥研究投資使得新藥開發緩慢，缺乏競爭力；（2）科研成果缺乏創新性。我國的生物制藥研究現在仍然處在模仿階段，擁有自主知識產權的產品較少；（3）科研成果產業化的力度不夠。我國的科研成果轉化率較低，由于不能順利產業化，無法達到生產刺激科研、科研帶動生產的目的；（4）國際合作渠道不暢。雖然我國的生物制藥科研水平在一些領域上已經處于世界領先地位，但是總體上和美國等比較還是存在一定的差距，所以打開國際合作的渠道、學習國外相關領域的經驗，全面縮小與國際先進水平之間的差距是十分必要的。

5.2對我國生物制藥產業的意見（1）實現研發和產業化的無縫對接

雖然在我國高校和研究院有著很大一批人從事生物制藥方面的研究，但是很多研究成果并不能迅速產業化。而生物制藥企業也不能高效和科研機構的研發水平相媲美。所以，二者可以根據自己的特點進行合作，企業可以以更少的投入獲得更多具有市場價值的知識，高校可以獲得來自企業的科研經費的支持，實現高校和企業的雙贏。

（2）加快產業升級

產業升級是指產業結構的改善和產業素質與效率的提高，核心是用先進實用技術改造傳統產業。現今，很多規模小的企業頻頻出現基礎產品過剩、高端產品供應不足和產業整體大而不強的問題，解決這些問題就要加速行業整合、兼并和重組，加快產業升級，提高產業整體的競爭力。在醫藥行業中，產業升級包含三個層面的意義：產品種類的升級、產品標準的升級和質量保障體系的升級。為此，監管部門應加快對新藥的審批速度，提高新藥創新的門檻，使得新藥可以獲得價格優勢，得到相應的回報。而整個生產體系和行業也應該提高質量保障體系，使得缺乏競爭力的小企業退出市場，加快產業升級。

（3）制定專利戰略

所謂專利戰略，是指企業從長遠戰略目標出發，充分有效地利用專利制度、專利技術、專利情報信息，研究分析競爭對手狀況，為取得專利競爭優勢，以求在競爭中處于優勢地位而采取的綜合性對策。在生物制藥企業中，專利已經取代設備、廠房等成為最有價值的資產。在生物制藥知識產權保護中，專利是最有效的方式，也是生物醫藥企業價值評估的核心指標，只有擁有大量高質量的專利技術，才能形成技術、市場優勢，以保證企業的可持續發展。生物制藥企業通過專利戰略可以減少資金和時間的投入，避免重復研制，更可以針對競爭對手的專利作出調整來獲得市場的主導權。

6、生物制藥的展望

隨著現代生物技術的迅猛發展，運用基因組學、蛋白質組學、生物信息學等現代生化與分子生物學技術，結合基因工程、蛋白質工程、細胞工程、酶工程、生物芯片等常用技術，在將一些疾病的發病機理的認識清楚的基礎上，針對生物制藥研究中存在的問題，展開綜合研究是生物制藥發展的趨勢。同時，和生物技術相關的許多領域也能也對新藥的研究有很大的意義。如計算機模擬和分子圖像處理技術相結合可以提高設計具有特定功能特性的分子的能力，這一技術很可能成為藥物研究和藥物設計的得力工具。藥物與使用該藥物的生物系統相互作用的模擬在理解藥效和藥物安全方面會成為越來越有用的工具。另外，人類的遺傳信息也是醫藥的寶貴資源，對以后生物制藥的發展有很大的意義。

總之，通過我國科研人員的不斷努力，綜合多學科的研究成果，不斷利用新技術，一定會使我國的生物制藥研究達到國際領先水平，我國的生物制藥產業獲得長足發展。

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第四篇：復習重點

復習重點

1試述國際貿易的作用

2簡述國際分工各個發展階段的主要特點

3簡述影響國際分工發展的因素

4試述對外貿易政策積極理論的歷史演變過程

5簡述侵略性貿易保護主義的特點及新貿易保護主義的特點

6簡述普惠制方案的主要內容

7簡述進口配額制簡述進口配額制

8比較分析買方信貸與賣方信貸的異同之處

9簡述貿易條約和協定所依據的法律原則

10簡述WTO（GATT）的基本原則

11為什么對外貿易在國民經濟中處于特殊中介地位

12簡述中國對外貿易在國民經濟中的作用

13簡述中國對外貿易的方針

14試述中國發展外貿的主要理論依據

15試述改革開放后我國外貿經營管理體制改革各階段的主要措施

16大經貿戰略的基本概念，新內涵、指導思想、主要內容、目標及實施措施 17試述調節國際收支的主要政策措施

18試述影響匯率變動的主要因素

19試述匯率變動對經濟的影響

20簡述匯票的定義及其主要票據行為

21簡述本票與匯票的不同

22簡述支票與匯票的不同

23簡述信用證的業務流程

24比較分析國內金融市場與傳統國際金融市場的不同

25比較分析傳統國際金融市場與歐洲貨幣市場的不同

26簡述國際金融市場的作用

27比較分析外匯期貨交易與遠期外匯交易的異同

28試述歐洲貨幣市場的作用與影響

29試述國際貨幣制度的歷史發展過程及主要內容

30比較分析三種國際貨幣制度的不

31試述歐元創立的過程

32試述歐元誕生對國際的影響

33簡述IMF貸款的特點

34簡述世界銀行貸款的特點

35試述我國外匯管理制度的歷史演變過程及主要措施

36試述人民幣匯率制度的歷史演變過程

第五篇：生物制藥技術

08藥學***3陳省委

組合生物合成藥物進展

摘 要50年來抗生素在人類疾病治療中發揮了重要作用,今后的幾十年里它們也將是關鍵的治療劑。盡管在過去的20年中通過靶向篩選發現了一些微生物藥物,但是這種篩選方法很難發現新類型藥物。組合生物合成可以彌補這種不足,通過基因工程方法改造微生物基因和酶,產生新的抗生素,發現那些在自然界中不能發現的藥物。

關鍵詞 基因工程合生物合成新抗生素

微生物種類繁多,其產物化學結構豐富多彩,生物活性十分廣泛,是開發各種新產品的豐富資源,但是傳統的篩選方法已遠遠不能滿足社會發展的需要。隨著分子生物學和生物技術的發展,以及基因組學、蛋白質組學、生物信息組學、代謝組學研究的深入,人們對微生物基因組的研究也有了顯著進展,已經闡明了許多與微生物代謝有關的生物合成基因,為微生物組合生物合成藥物的研究和開發奠定了良好的基礎。

一、研究背景

自1928年弗萊明發現青霉素和1942年瓦克斯曼發現鏈霉素以來,微生物藥物在疾病防治和拯救人類生命中起著十分重要和不可替代的作用,特別是抗生素被國外科學家譽為20世紀醫學領域的皇冠寶石。微生物藥物一直是臨床最常用的藥物,在西方發達國家,抗生素占臨床處方藥物的20%以上,在中國約占處方藥物的30%。但自上世紀70年代后,隨著脊髓灰質炎、天花、麻風等傳染性疾病先后在全球范圍內被消滅,國家對微生物藥物研究的支持逐漸下降,抗傳染病藥物研究進入了困難時期。上世紀90年代后,我國在已有億乙肝病毒攜帶者的基礎上,又出現了100萬以上人類免疫缺陷病毒(HIV)攜帶者。2002年末以來,重急性呼吸窘迫綜合征(SARS)的出現使我國的傳病控制告急,不得不重新思考微生物藥物的研究策略在新的時期里,微生物藥物研究再度升溫,原因

①新病原微生物不斷出現,如SARS、艾滋病(AIDS)瘋牛病等;②生物武器的使用,如炭疽等;③各種耐菌株在世界范圍的傳播;④許多傳染性疾病,如肺核、血吸蟲病等的死灰復燃。目前國內外側重研究的生物藥物,主要有抗新病原微生物,抗耐藥菌,抗病毒,抗腫瘤抗生素以及微生物來源的生理活性物質。微物藥物的研究主要

包括以下內容:①抗新病原微生藥物的尋找與開發;②細菌耐藥機制及其抗耐藥細藥物研究;③微生物藥物的生物合成基因研究;④組生物合成微生物藥物研究。其中組合生物合成微生藥物是近年發展較快的研究領域,將在創新藥物研中發揮重要作用。

二、組合生物合成生物技術,尤其是基因工程技術的不斷發展,為生物醫藥領域開辟了廣闊的前景;通過基因工程技術所得到的藥物也在臨床治療某些疑難疾病中發揮著越來越重要的作用。

廣義,基因工程產品分為兩類

①單基因直接產物。通常是指單個基因編碼序列的翻譯產物(蛋白質),它們一般是生物大分子如干擾素和單克隆抗體,目前生物醫藥領域中開發的多數產品均屬于此類,其中包含有效地用于臨床治療的如重組人胰島素、干擾素和促紅細胞生成素。我國在此領域獨創的藥物不多,而且這類藥物的一個突出缺點是它們比較容易被仿制,只要有了相應的細胞系即可利用基本設備進行生產。

②多基因間接產物。是指由多基因編碼的多酶體系介導而合成的小分子化合物和多肽,包括自然界由微生物和植物產生的天然產物,如抗生素、生理活性物質或萜類化合物等結構比較復雜的化合物。它們品種繁多,性能各異,僅就目前研究得比較深入的聚酮體和萜類化合物,就包括具有抗腫瘤作用的阿霉素、紫杉醇,具有免疫抑制作用的FK506、西莫羅司,具有降血酯作用的洛伐他汀、銀杏內酯,具有抗結核桿菌作用的利福霉素,抗瘧藥物青蒿素等。

組合生物合成(combinatorial biosynthesis)是在微生物次級代謝產物合成基因和酶學研究基礎上形成的。組合生物合成的概念是結構不同但生物合成途徑相似的抗生素生物合成基因之間可以進行重組、組合或互補產生新結構的化合物。盡管微生物藥物的結構多樣,但形成這些產物的主要生化反應機制卻基本相同,它們通常是由非常簡單的化學物質,如小分子羧酸和某些氨基酸作為合成起始單位和延伸單位,通過由一系列基因編碼的多酶體系參與的生物化學反應(構成一個合成途徑)而形成的,參與這些天然產物生物合成的多酶體系是由多個結構明顯分開的功能區域所組成。研究表明,參與這類小分子生物合成的基因通常是連鎖或鄰接而構成一個基因簇(cluster),這為基因的克隆和操作提供了方便,同時由于參與

次級代謝生物合成酶系對底物的特異性,專一性要求不是很嚴格的,對結構相類似的底物均可識別,這一特點為不同基因組合產生新的化合物創造了條件。因此,有針對性地對某些基因進行操作,如替換、阻斷、重組以及添加、減少組件等,均有可能改變其生物合成途徑而產生新的代謝旁路(metabolic pathway),繼而形成新的化合物,這就為組合生物合成提供了基礎,國際上已有通過這些手段得到多個化合物的報道。

三、研究的科學意義

開展微生物基因工程組合生物合成創制新型藥物研究,具有如下意義。

1、利用組合生物合成體系,完成化學方法不能完或難以完成的活性化合物的合成,如抗癌藥物紫杉(taxol)等;這類活性化合物在自然界中含量少、需要大、醫學價值高,而且通常化學合成困難(成本高,難大,環境污染嚴重),為了確保紅豆杉資源的可持續用,除正在開展的苗圃栽培,并以苗圃作為紫杉醇提的原料之外,通過生物合成來使它們具最終的商業值是一個極具潛力的手段。例如,與抗癌藥物紫杉醇用相似的埃波霉素(epothilone)已在鏈霉菌中通過合生物合成方法獲得表達,現已進入開發研究階段。、對一些現有的結構復雜的天然產物如青蒿素銀杏內酯等有效組分進行定向合成,對臨床用抗生品種進行有針對性的修飾和改造,如對紅霉素進行造產生酮內酯型的大環內酯類抗生素,獲得對臨床藥菌具有活性的抗生素衍生物;或者通過對現有天產物或抗生素的結構改造,獲得具有全新活性的或化性能有明顯改善的天然產物或新抗生素。、組合生物合成產生新化合物的潛力很大,化合數是以可操作基因的指數方式形成,如設R為可利的基因數,n是每個基因的不同等位形式(即不同天產物來源的數目),從理論上講經過基因組合可得Rn種排列組合,即得到Rn個化合物。通過組合生合成,獲得一大批新化合物,作為高通量藥物篩選樣庫的來源之一。、由于多基因組合操作的平臺是以易于大規模產的微生物體系為基礎,使創制新型藥物的研究便產業化。、組合生物合成的研究,必將推動我國在基因水對天然資源的利用,更好地利用植物代謝產物,挖掘前實驗室條件下無法進行培養的生物體,包括海洋的生物體。隨著研究和應用的發展,植物和海洋生物級代謝產物的組合生物學研究,也將蓬勃

發展起來。

四、國內外研究現狀

1985年,Hopwood教授[4]在世界首次報道用遺工程的手段合成“非天然”的天然產物isochromanequinone,該工作為后來的組合生物合成奠定了礎。在以后的十幾年里,這一領域成為天然產物代工程研究中最活躍的領域,許多微生物次級代謝研的專家都加入這一領域的工作,因為組合生物合成潛力制造出很多先導化合物。目前的發展趨勢由最初的基礎研究逐步演變為基礎與應用兼顧,有的地向產業化邁進。該領域的研究也同樣得到工界的重視,美國加州高新技術產業公司研制的埃波素(epothilone D)已進入III期臨床評價階段。埃霉素原來由纖維堆囊黏細菌產生,其產量低,繁殖時間長,產品無法進行產業化生產。該公司利用基因組合技術使纖維堆囊黏細菌的埃波霉素生物合成基因在鏈霉菌中得到表達,并通過酰基轉移酶域替換及羥基化酶基因的阻斷,獲得了主要產生埃波霉素中抗腫瘤活性最好組分的epothilone D的基因工程菌。我國自上世紀80年代初開展以多基因組合工程技術研制新藥的研究,在聚酮類抗生素如大環內酯類抗生素、利福霉素、安莎霉素及抗生素產生菌分子生物學研究方面,取得一定進展。國家重大專項支持的基因工程必特螺旋霉素己進入臨床研究,基因工程必特螺旋霉素的研制為組合生物合成技術應用于小分子化合物的創制中提供了良好的工作基礎和經驗。我國微生物代謝產品研究歷史悠久,已形成多學科協調合作的體系,近年來在國家的支持下該體系已得到一定的發展,加強了微生物及代謝產物資源的開發。我們已逐步建立難培養極端微生物和未培養微生物資源及海洋微生物的挖掘工作,建立并完善從土壤或其他來源直接分離DNA技術。我國有很強的有機化學合成能力,可以合成進行組合合成的起始單元,開展前體介導的組合生物合成(precursor-directed biosynthesis)研究。我們已建立并不斷完善多種生物活性篩選模型,有天然產物化學分離鑒定及藥理、藥效、毒理評估的配套學科。

目前基因工程技術的發展水平,在單基因操作方面已經比較成熟;在多基因操作層次上雖然技術難度相對比較大,但近年來在此研究領域已有了迅猛的發展,已積累了較好的研究基礎,許多次級代謝產物生物合成基因簇已得到克隆,基因結構與功能已得到闡明,并且發展了一系列大容量載體和合適的宿主表達系統。組合生物合成已形成國際藥物領域研究的熱點和一個重要發展方向。

五、研究方向與前景

我國天然微生物及植物資源豐富,以微生物作為平臺的藥物生產歷史悠久、種類繁多,利用這一寶庫開展組合生物合成研究,建立新型化合物庫,作為新型藥物或先導化合物的重要來源之一,有重要的理論與實際意義。組合生物合成為當今世界研究熱點,我國也有一定工作基礎,開展這方面的研究將有利于加深對次級代謝生物合成機理的研究與應用、促進生物技術新藥研制中的作用,對發展我國新藥有重要意義,并推動新藥研究中高通量篩選技術與方法的建立與善,篩選出有價值的新藥。

我們要重點加強難培養微生物及海洋生物資源挖掘工作,建立并完善從土壤或其他來源直接分DNA技術,以豐富組合生物合成基因資源;加強微物天然化學研究,建立微量、快速、高效鑒定天然產化學結構的技術和方法;充分利用我們已經建立的種生物活性篩選模型,通過廣泛地聯合與協作,擴展合生物合成技術在創新藥物中的應用,建立我國基工程微生物組合生物合成創制新型藥物或先導化合研究的技術平臺。該研究將有助于開拓和促進我國新技術在新藥研究與開發中的應用,對創制具有我自主知識產權的新藥將會有積極推動作用。

對本課程的意見：

1、可能是因為選課人太少的問題，上課的時候沒有很好的聽課氣氛，不過主要

還可能是自己的原因，自己不能集中精神聽講。

2、以后只要選課的人比較多了，應該會好一些，上課的人少了，總是覺得就像

這門課不重要，老師講的很清晰，主要是我們上課時常開小差。自從上了大學，就沒太有人管了，有時聽起課來就愛聽不聽，這倒是對每門課都差不多的。

3、課堂上可以稍微提問一下，因為提問往往可以引起同學們的注意，這樣走神的情況可能會少一些。

4、課堂中還可以穿插一些與課程有關的歷史、說一下那些地方比較適合做研究、考研究生去哪里比較好啊什么的，這樣既可以對現在的科研大環境有所了解，課堂內容也不至于太單調。

最后謝謝老師兢兢業業地為我們把課上完，盡管上課人數少，你還是把課完整地給我們講完，謝謝老師為我們的付出。