第一篇：微生物室菌種管理及應(yīng)急程序

檢驗科微生物室菌種管理規(guī)定及應(yīng)急預(yù)案

1.0目的

為確保微生物實驗室菌種保管安全，避免微生物實驗室菌種生物安全事故的發(fā)生。2.0范圍

適用于微生物實驗室所有工作人員及管理人員。3.0職責(zé)

3.1微生物室組長負(fù)責(zé)微生物實驗室菌種管理。3.2科室主任為生物菌種保管安全 狀立即去急診科治療。

5.3 當(dāng)發(fā)現(xiàn)菌株丟失時，立即報告實驗室負(fù)責(zé)人，經(jīng)調(diào)查，若確定丟失時，由實驗室負(fù)責(zé)人上報科室負(fù)責(zé)人，并上報醫(yī)院感染管理科進一步調(diào)查處理。6.0支持文件

其它未盡事項嚴(yán)格按照下列文件執(zhí)行：《中華人民共和國傳染病防治法》、《病原微生物實驗室生物安全管理條例》、《中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法》、《人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機構(gòu)管理辦法》。

第二篇：微生物實驗菌種保藏方案

一、石蠟油低溫保藏法

本方法的原理是在長好的斜面菌上覆蓋滅菌的液體石蠟，達(dá)到菌體與空氣隔絕，使菌處于生長和代謝停止?fàn)顟B(tài)，同時石蠟油還防止水分蒸發(fā)，在低溫下達(dá)到較長期的保藏菌種的目的。保藏溫度要求在-4～4℃下。液體石蠟法適用于不產(chǎn)孢子的菌種。具體操作是：菌種為斜面培養(yǎng)菌種，斜面不宜過長；選擇純凈優(yōu)質(zhì)石蠟油，置三角燒瓶中經(jīng)過121℃高壓蒸汽滅菌1～2h，將其放烘箱中(160℃左右)干熱處理，去除滅菌時滲入的水分，待石蠟油變得清澈透明后冷卻即可加入斜面，斜面上不能出現(xiàn)氣泡，液蠟添加量以高出斜面頂部約1cm為宜。

二、甘油管冷凍保藏法

1．試驗方法介紹本法也是利用微生物在甘油中生長和代謝受到抑制的原理達(dá)到保藏目的。其方法是，將80%的甘油高壓蒸汽滅菌待用。將培養(yǎng)好的斜面菌種用無菌水制成高濃度的菌懸液(108～1010/ml)。取1ml滅菌甘油放入與甘油充分混勻，使甘油濃度約為10%-30%，于-70℃下凍存。-20℃保存時間較短。或采用體積比為8：2的甘油－生理鹽水，加入新鮮培養(yǎng)的菌體肉湯，混合均勻后至-20℃冰箱保存。

2．效果該法適用于一般細(xì)菌的保存，同時也適用于鏈球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌種，適用范圍廣，操作簡便，效果好，無變異現(xiàn)象發(fā)生。甘油－生理鹽水保存液保存菌種優(yōu)于甘油原液，其原因可能是加入生理鹽水適當(dāng)降低了甘油的高滲作用，且有肉湯培養(yǎng)物適量增加保存液的營養(yǎng)成分，從而更好地保護了待保存的菌株。

三、真空冷凍干燥法

1．試驗原理

真空冷凍干燥保藏法是兼具低溫、干燥、除氧三方面菌種保藏的主要因素，除不宜于絲狀真菌的菌絲體外，對病毒、細(xì)菌、放線菌、酵母及絲狀菌孢子等各類微生物都適用，不宜用凍干法保存的微生物不到2%。冷凍干燥法是在低溫下快速將細(xì)胞凍結(jié)，然后在真空條件下干燥，使微生物的生長和酶活動停止。為了防止在冷凍和水分升華過程中對細(xì)胞的損害，要采用保護劑來制備細(xì)胞懸液，使菌在凍結(jié)和脫水過程中起到保護作用的溶質(zhì)，通過氫鍵和離子鍵對水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。即是使樣品中的水分在冰凍狀態(tài)下，抽真空減壓，使凍結(jié)的冰直接升華為水蒸氣，使樣品達(dá)到干燥。干燥后的微生物在真空下封裝，與空氣隔絕，達(dá)到長期保藏的目的。

2．試驗步驟

1）安瓿管準(zhǔn)備選取規(guī)格約直徑為8mm，高100mm的中性玻璃安瓿管，先用2%鹽酸浸泡8～10h，再經(jīng)自來水沖洗多次，用蒸餾水涮洗2～3次，烘干；在每管內(nèi)放入打好菌號及日期的標(biāo)簽，字面朝向管壁，管口塞好棉塞，滅菌備用。

2）保護劑的選擇及制備冷凍干燥保藏法使用的保護劑種類很多，效果不盡相同，通常采用高分子化合物與低分子化合物混合使用效果更好。在配制時注意比例、濃度、pH和滅菌方法。一些對熱敏感的保護劑如血清等用過濾除菌，牛奶、葡萄糖及乳糖等要控制滅菌溫度。一般情況下，多數(shù)菌種可以用脫脂乳糖等要控制滅菌溫度。一般情況下，多數(shù)菌種可以用脫乳為保護劑。

3）菌種準(zhǔn)備及分裝菌種要求為生長良好的純種，菌齡以處于穩(wěn)定期為好，孢子是新鮮的。每支長好的斜面加2～3ml保護劑，用接種環(huán)將菌苔輕輕刮起(注意勿刮起培養(yǎng)基)，制成菌懸液。如用液體培養(yǎng)的菌種，則需經(jīng)離心收集和用滅菌生理鹽水洗滌細(xì)胞，收集的菌體用保護劑懸浮制成菌懸液。懸液中菌數(shù)要求達(dá)到108～1010cfu/ml為宜。懸液制備完成盡快分裝和凍結(jié)。分裝安瓿時可用滅菌的長滴入安瓿管底部，裝量可依據(jù)冷凍干燥機效能而定。

4）預(yù)凍分裝好的安瓿管需要進行預(yù)凍，即放在-30～-40℃下凍結(jié)20～60min，也可以用干冰和無水乙醇凍5～10min。

5）冷凍干燥經(jīng)預(yù)凍的安瓿放入干燥箱中開始抽真空干燥。此時干燥箱溫度控制在-30℃以下，并盡快使真度達(dá)到66Pa以下。此后可還漸升溫以加速水分升華，但升溫不宜過快，以

免引起樣品融化。干燥時間視凍干機效率、樣品裝量及性質(zhì)等而定，以樣品最終水分含量達(dá)到1%～3%為準(zhǔn)。具體操作時是根據(jù)凍干樣品呈酥塊工松散片狀；真空度接近空載時最高真空；樣品溫度與管外溫度接近。

干燥完畢將安瓿管在真空下用火焰燒熔密封，并用高頻真空檢測真空度。

6）保藏及凍干管的啟用密封好的凍干管在4℃或-18℃下保藏。當(dāng)需用凍干菌種時，取出安瓿管用酒精表面消毒，用小砂輪在無菌條件下打開，或?qū)碴稠敳吭诰凭珶艋鹧嫔献茻杆俚紊侠涞臒o菌水，使管破裂，然后用鑷子等輕輕敲碎管口，加入0.3～0.5ml液體培養(yǎng)基溶解凍干菌塊成為懸液，用無菌滴管或接種環(huán)移至斜面或液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

7）影響菌株生長因素

①菌的質(zhì)量：保藏的菌種應(yīng)培養(yǎng)在營養(yǎng)豐富的最適條件下，使之進入穩(wěn)定期，稍老一些的菌體對環(huán)境抵抗力強。另處，作為冷凍干燥的菌懸液細(xì)胞濃度要高不同的菌對冷凍干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液細(xì)胞濃度不高，就會使以后傳種造成困難，保存期也會受到影響。

②保護劑：不同種類的保護劑對不同微生物的作用是不同的，如個別菌種在脫脂乳作保護劑的情況下死亡率高達(dá)99.99%，而采用葡聚糖等混和保護劑時死亡率大大減少。一般情況下，那些容易保存的菌種對保護劑的要求不很嚴(yán)格，而不易保存的菌種對保護劑的要求卻很苛刻。因此，選擇好的保護劑是冷凍干燥保存菌種的關(guān)鍵因素。

③干燥速度：實驗表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率為67.3%，而3h為59%。

④空氣的影響：冷凍干燥后空氣對細(xì)菌細(xì)胞影響較大，可導(dǎo)致細(xì)胞損傷進而死亡，故在凍干后應(yīng)立即在真空下融封，才有利于長期保存。

⑤溫度的影響在干燥和真空狀況下溫度的影響遠(yuǎn)沒有上述幾項因素重要，因此可以在室溫下保存，但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。⑥含水量的影響：水分含量過高對菌存活不利，完全脫水也不利于保存，一般把干燥后的細(xì)胞含水量控制在3%以下(1%～3%)。⑦復(fù)蘇培養(yǎng)：打開安瓿管后加入無菌水使 凍干菌融化，融化速度慢比快速融化的成活率要高。

菌種能否適宜于凍干保存，需經(jīng)過實驗來證明，一般是在保存1個月進行復(fù)蘇培養(yǎng)，如果菌的成活率高于10%，即認(rèn)為可用凍干保存法保存，以后6個月、2年、5年、10年再進行檢查存活情況，以確定保存期的上限。

凍干保藏的效果因微生物種類而異，一般是細(xì)菌＞放線菌＞真菌＞藻類，而菌絲體不宜用此法保存。

3．試驗效果冷凍干燥保存的菌種存活時間長、效果好，一般菌種可保存5年以上，有的可保藏15年以上不發(fā)生變異。還具有體積小、不易污染、便于運輸?shù)葍?yōu)點，是一種用得最為廣泛的菌種保藏方法。

4．試驗儀器及試劑冷凍干燥備有不同型號和類型，但都由四個部分組成：干燥箱、蒸汽捕集器、真空泵、冷凍系統(tǒng)。干燥箱可控制溫度范圍為-40～40℃。

四、液氮超低溫保存

1．試驗原理本方法是近年推廣使用的一種菌種保存法。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體，立克氏體，各種細(xì)菌、放細(xì)菌、支原體，各種絲狀菌、酵母、藻類和原蟲，特別是一些無法用凍干保存的微生物，都可用此法長期保存。工業(yè)微生物高產(chǎn)菌種也逐步采用此法保存。液氮保存的原理是微生物在-130℃以下溫度時，它的新陳代謝作用停止，化學(xué)反應(yīng)也消失，而液氮溫度可達(dá)-196℃，在這種情況下可以長期保存。

2．試驗步驟

1)安瓿管準(zhǔn)備一般要求用95%料或GG17的玻管制作，以能承受巨大的溫差變化而不破損，大小根據(jù)需要而定。用印同在管壁上書寫菌號，160℃烘干，加棉塞滅菌備用。

2)菌種準(zhǔn)備在最適培養(yǎng)基斜面上培養(yǎng)得到健壯菌種，制成懸浮液，如為不產(chǎn)孢子的真菌，則采用斜面或液體振蕩培養(yǎng)，制成菌絲片段。將菌懸淮分裝至滅菌安瓿管中，每管0.2～0.5ml，然后用火焰將安瓿熔封。

3)凍結(jié)將熔封后的安瓿管入大慢速凍結(jié)器上，以每分鐘下降1℃的速度冷凍，當(dāng)安瓿管溫度下降至-35℃時，即可把安瓿管移入液氮內(nèi)作長期保藏。

4)菌種的復(fù)蘇培養(yǎng)直至全部溶化為止，當(dāng)溶化后即開啟安瓿移至培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)，扣作時應(yīng)特別注意安全，防止爆炸或凍傷，不宜戴線手套，要戴皮手套操作

3．試驗儀器及試劑

1）保護劑與冷凍干燥保存一樣，液氮保存菌種也需要有保護物質(zhì)，可以用10%的甘油，使用方便、效果好，但有些菌對甘油敏感，效果不佳，可選用其他保護劑，常用的有5%～10%(V/V)二甲基亞砜；20%二甲亞砜加1%蛋白陳；吐溫80及0.4mmol聚乙烯氮戊環(huán)等，糖類也可作為一種保護劑，但濃度適當(dāng)加以控制。

2）液氮罐

第三篇：微生物菌種純度檢測技術(shù)規(guī)程

微生物菌種純度檢測技術(shù)規(guī)程范圍

本規(guī)程規(guī)定了古菌、細(xì)菌、真菌、病毒（種）純度檢測的程序和方法。

本規(guī)程適用于從事微生物菌種資源保藏及研究的機構(gòu)、大學(xué)、企業(yè)、個人等。術(shù)語、定義

下列術(shù)語和定義適用于本規(guī)程

2.1

純度檢測 purity check

指通過適當(dāng)?shù)姆椒z測菌種是否為純培養(yǎng)物。

2.2

純培養(yǎng)pure culture

由單個細(xì)胞的后代組成的培養(yǎng)物，即單細(xì)胞培養(yǎng)物或無性繁殖系。通常是由挑取單個菌落或利用單胞分離技術(shù)，移種繁殖獲得。菌種的純度檢測

3.1 古菌和細(xì)菌的純度檢測

3.1.1 菌落形態(tài)

在特定的培養(yǎng)基上，將待檢測培養(yǎng)物稀釋涂布或平板劃線，適宜培養(yǎng)后，同一平板上的單菌落的大小、形狀、顏色、質(zhì)地、光澤等是否相似；對于兩種或以上形態(tài)的出發(fā)菌株，應(yīng)再分別挑取單菌落劃線或稀釋涂布培養(yǎng)，檢測是否重復(fù)出現(xiàn)相同特征。

3.1.2 細(xì)胞形態(tài)

對數(shù)生長期的培養(yǎng)物革蘭氏染色反應(yīng)應(yīng)呈現(xiàn)一致性；細(xì)胞形狀、大小、莢膜等特征應(yīng)相似

3.1.3 芽孢大小、位置、形狀

宜檢測樣品是否形成芽孢，對形成芽孢的菌種，其芽孢大小、位置、形狀應(yīng)相似。

3.2 放線菌菌種純度檢測

3.2.1 菌落形態(tài)

在特定的培養(yǎng)基上，將待檢測培養(yǎng)物稀釋涂布或平板劃線,挑取單菌落，適宜培養(yǎng)后，在同一平板上單菌落形狀、大小、表面狀況、質(zhì)地、光澤、顏色等應(yīng)相似。如懷疑為細(xì)菌污染，則30℃液體培養(yǎng)24小時，培養(yǎng)液不應(yīng)渾濁，如渾濁則視為細(xì)菌污染。

3.2.2 培養(yǎng)特征

分別接種三種以上培養(yǎng)基，在三種以上培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征應(yīng)想同，包括氣生菌絲、基內(nèi)菌絲、可溶性色素的顏色等。

3.2.3 孢子絲及孢囊

在特定的培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度及培養(yǎng)時間等條件下，孢子著生方式、孢子絲形態(tài)及其顏色或孢囊著生位置（氣絲或基絲）、孢囊的形狀，大小應(yīng)呈現(xiàn)出一致性。

3.3 酵母菌種純度檢測

3.3.1 菌落形態(tài)

應(yīng)對菌落形態(tài)相似性進行檢測。在特定的培養(yǎng)基上，通過對待檢測菌株進行稀釋或劃線涂布平板獲取單菌落，一定的培養(yǎng)條件下，比較同一平板內(nèi)，菌落的大小、形狀、顏色、隆起、表面狀況、質(zhì)地、光澤等應(yīng)一致。

3.3.2 個體形態(tài)

應(yīng)對檢測樣品的個體形態(tài)進行檢測。在指定的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件下，細(xì)胞形狀、大小及細(xì)胞的增殖方式應(yīng)一致。

3.3.3 繁殖方式

酵母繁殖的方式應(yīng)一致，如是芽殖，出芽的方位、數(shù)量應(yīng)一致。

3.4 絲狀真菌菌種純度檢測

3.4.1 菌落特征

菌落的形態(tài)等表觀特征應(yīng)一致。

3.4.2 菌絲特征

在特定的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下，菌絲分隔、菌絲形態(tài)等應(yīng)一致。

3.4.3 其他主要顯微特征應(yīng)一致

3.4.4 檢測是否有細(xì)菌污染

3.4.5 對于外觀上不能確定菌種純度的，利用單胞分離技術(shù)獲得純培養(yǎng)物進行對比，其菌絲、孢子等特征應(yīng)與原始菌株的描述一致。

3.5 病毒的純度檢測

3.5.1 純粹檢查

應(yīng)將待檢病毒液直接接種含硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基（T.G）、酪蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（G.A）、葡萄糖蛋白胨湯。通過一定溫度時間培養(yǎng)后，檢查結(jié)果應(yīng)無細(xì)菌生長為純粹。

3.5.2 支原體檢查

檢測由禽胚組織或其細(xì)胞所培養(yǎng)的病毒應(yīng)用改良Frey氏培養(yǎng)基。檢測其它培養(yǎng)方法所得病毒應(yīng)用支原體培養(yǎng)基。任何一次瓊脂平板上出現(xiàn)支原體菌落，判為陽性。陽性對照中至少有一個平板長菌落，而陰性對照中無菌落生長，則檢驗有效。

3.5.3 外源病毒檢查

病毒類制品在毒種選育和生產(chǎn)過程中，經(jīng)常使用動物或細(xì)胞基質(zhì)培養(yǎng)，因此，有可能造成外源因子（特別是外源病毒因子）的污染。為了保證制品質(zhì)量，需要對毒種和細(xì)胞進行外源因子檢測。

3.5.3.1 病毒種子批外源因子檢查

對病毒主種子批或工作種子批，應(yīng)抽取足夠檢測試驗需要量的供試品進行病毒外源因子檢測。在試驗前應(yīng)用特異性抗體（血清）中和本病毒（或單克隆抗體），所用的抗體免疫源應(yīng)采用與生產(chǎn)疫苗（或制品）不同種而且無外源因子污染的細(xì)胞（或動物）制品。如果病毒曾在禽類組織或細(xì)胞中繁殖過，則抗體不能用禽類來制備。若用雞胚，應(yīng)來自SPF雞群。以下方法可以選擇一種或多種進行。

3.5.3.1.1 動物試驗法

3.5.3.1.1.1 小鼠試驗法

取15－20g小鼠至少10只，用經(jīng)抗血清中和后的病毒懸液，每只腦內(nèi)接種0.03ml，同時腹腔接種0.5ml。至少觀察21天。在觀察期內(nèi)至少有80％最初接種的小鼠存活，試驗才有效。如果沒有小鼠出現(xiàn)病毒感染，為符合要求。解剖所用在試驗24小時后死亡或有患病體征的小鼠，直接觀察期病理改變，并將有病變的相應(yīng)的組織懸液通過腦內(nèi)和顱腔接種另外至少5只15－20g小鼠，并觀察21天，如果沒有小鼠出現(xiàn)病毒感染，則符合要求。

3.5.3.1.1.2 乳鼠試驗法

取出生后24小時內(nèi)的乳鼠至少10只，用經(jīng)抗血清中和后的病毒懸液，腦內(nèi)接種0.01ml，同時腹腔接種至少0.1ml。每天觀察，至少14天。在觀察內(nèi)至少有80％最初接種的乳鼠存活，試驗才有效。如果沒有小鼠出現(xiàn)病毒感染，為符合要求。解剖所有在試驗24小時后死亡或有患病體征的乳鼠，直接肉眼觀察其病理改變，并取有病變的相應(yīng)的組織和腦、脾制備成懸液通過腦內(nèi)和腹腔接種另外至少5只出生后24小時內(nèi)乳鼠，并每天觀察至接種第14天，如果沒有小鼠出現(xiàn)病毒感染，則符合要求。

3.5.3.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)法

3.5.3.1.2.1 非血吸附檢查

用經(jīng)抗血清中和后的病毒懸液，接種于生產(chǎn)用的同種的細(xì)胞。細(xì)胞至少接種6瓶，每瓶病毒懸液接種量不少于培養(yǎng)液總量的25％。于36±1℃培養(yǎng)，觀察14天，必要時可更換細(xì)胞培養(yǎng)液，未見細(xì)胞病變（CPE）為陰性，符合要求。

3.5.3.1.2.2 血吸附病毒檢查

上述接種病毒的各個細(xì)胞于第6－8天后和第14天，取出2瓶進行血吸附病毒檢查。用0.2％－0.5%雞和豚鼠紅細(xì)胞混合菌懸液覆蓋于細(xì)胞表面，分別置于2－8℃，20－25℃，30分鐘后顯微鏡下觀察，未見血球吸附現(xiàn)象為陰性，符合要求。

3.5.3.1.3 雞胚檢查法

在禽類組織或細(xì)胞中繁殖過的病毒種子需用雞胚檢查禽類病毒的污染。選用9－11日和5－7日齡兩組SPF雞胚，每組至少5只，分別于尿囊腔和卵黃囊接種經(jīng)抗體血清中和后的病毒懸液，每胚0.5ml。孵育7日后，取尿囊液用豚鼠和雞血細(xì)胞混合懸液做血球凝集試驗應(yīng)為陰性。被接種的雞胚至少80％存活7天，試驗有效。

3.5.3.2 生產(chǎn)用細(xì)胞外源因子檢查

3.5.3.2.1 細(xì)胞直接觀察

每批生產(chǎn)用細(xì)胞應(yīng)留取5％（或不少于500ml）,細(xì)胞懸液不接種病毒，作為對照細(xì)胞加入與疫苗生產(chǎn)相同的細(xì)胞維持液，置于與疫苗生產(chǎn)相同的條件下培養(yǎng)，觀察14天，在顯微鏡下觀察是否有細(xì)胞病變（CPE）出現(xiàn)，無細(xì)胞病變（CPE）出現(xiàn)者為陰性，符合要求。在觀察期末至少有80％的對照細(xì)胞培養(yǎng)物存活，試驗有效。

3.5.3.2.2 血清吸附病毒檢查

對生產(chǎn)用細(xì)胞外源因子檢查的（1）項細(xì)胞培養(yǎng)物在觀察期末取至少25％的細(xì)胞培養(yǎng)瓶進行血吸附病毒檢查。（方法同病毒種子批外源因子檢查的血吸附病毒檢查）

參考文獻(xiàn)

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第四篇：微生物菌種、毒株的管理規(guī)定2013版

微生物菌種、毒株的管理規(guī)定

為加強可感染人類的高致病性病原微生物菌種、毒株的管理，保障人體健康和公共衛(wèi)生安全特制定本規(guī)定。

一、菌種、毒株的保藏和管理嚴(yán)格按《中華人民共和國傳染病防治法》、《病原微生物實驗室生物安全管理條例》、《可感染人類的高致病性病原微生物菌種、毒株管理規(guī)定》等法律、行政法規(guī)的規(guī)定執(zhí)行。

二、設(shè)立《微生物實驗室菌種登記表》，其內(nèi)容包括：菌種編號、菌種名稱、菌種來源、保存日期、數(shù)量、保存條件、存放位置、保管人。

三、嚴(yán)格的登記制度、建立詳細(xì)的總賬及分類賬。

四、根據(jù)菌種的特性選擇適宜的保存方式。采用雙人管理。

五、根據(jù)菌種情況，定期檢測菌種品質(zhì)，發(fā)現(xiàn)菌種變異或退化時應(yīng)及時報告，并查明原因。

六、菌種的發(fā)放需要雙保管人員同時在場的情況下才能進行。每次使用標(biāo)準(zhǔn)菌株都應(yīng)做好使用記錄，包括標(biāo)準(zhǔn)品的名稱、編號、使用時間等。

七、購買的標(biāo)準(zhǔn)菌株初次復(fù)蘇使用時，應(yīng)批量保存在菌種管中，-20℃以下保存。

八、新的標(biāo)準(zhǔn)菌株復(fù)蘇后，傳代最多不超過3次，如超過3次將不再作為標(biāo)準(zhǔn)菌株使用。

九、標(biāo)準(zhǔn)菌株保存管一經(jīng)解凍使用后，不得再次凍存。

十、菌種必須裝在密封的專用容器內(nèi)高壓滅菌銷毀，并做好銷毀記錄。

十一、菌種、毒株失竊要及時報告處理，并有相應(yīng)的應(yīng)急預(yù)案。

微生物實驗室菌種、毒株管理者：

第五篇：2015年微生物室年終工作總結(jié)

工 作 總 結(jié)

光陰如梭，一年的工作轉(zhuǎn)瞬又將成為歷史，2015年即將過去，2016年即將來臨。新的一年意味著新的起點、新的機遇、新的挑戰(zhàn)、食品微生物室“決心再接再厲，更上一層樓”，一定努力打開一個工作新局面。透視過去的一年在領(lǐng)導(dǎo)的幫助、同事們的關(guān)心、配合下，微生物室的這一塊工作取得了一些成績。為了在2016年，更好地完成工作，揚長避短，現(xiàn)將2015年的工作總結(jié)如下：

一、微生物檢驗工作：

1．年初經(jīng)歷了辦公樓的搬遷，實驗室檢測能力的資質(zhì)認(rèn)證。為了適應(yīng)食品檢驗的更好發(fā)展，在中心領(lǐng)導(dǎo)的決定下，將原食品檢驗科分為了理化檢驗、儀器檢驗和微生物檢驗三個科室，使得科室的職能更細(xì)化更專業(yè)化。

2．隨著食品微生物檢驗標(biāo)準(zhǔn)的更改，原來只需要每批樣品檢一份，現(xiàn)在要求檢五份，使得微生物檢驗人員的工作量一下增加了五倍，而我們科室現(xiàn)有的人員只有三人，在人員少工作壓力大的情況，科室人員不怕苦不怕累，加班加點，順利完成了各項檢驗任務(wù)。截止到2015年11月，食品微生物檢驗共完成檢品418批次,其中70%的檢品是要求做五份的。

3．科室人員進修情況由于中心領(lǐng)導(dǎo)對檢驗工作的重視、也為了更好的適應(yīng)更專業(yè)化的工作，為了加強檢驗人員的培訓(xùn)和考核，逐步提高檢驗水平。5月份科室共派出兩名人員參加了省食檢院舉辦的為期半個月食品生物安全檢驗的跟班培訓(xùn)，培訓(xùn)期間開拓了視野，提高了認(rèn)識，并以優(yōu)異的成績通過了省食檢院的考核。

4．順利通過了各項審核和驗收，擴大了檢驗范圍。2015年5月，中心順利通過了實驗室檢測能力的資質(zhì)認(rèn)證。

5．微生物實驗室每天都會對培養(yǎng)箱溫度進行監(jiān)測，儀器使用情況良好。每次使用前，都檢查儀器狀況，試驗完畢都對儀器進行認(rèn)真清理，并且定期對各類儀器設(shè)備進行維護，使設(shè)備都保持正常的工作狀態(tài)。還對潔凈室定期進行消毒滅菌，并對潔凈室的環(huán)境進行監(jiān)測，做好監(jiān)測記錄，以保證實驗結(jié)果準(zhǔn)確無誤。同時，督促科室人員，提高質(zhì)量意識，養(yǎng)成良好的實驗操作習(xí)慣，及時對實驗數(shù)據(jù)進行整理，保證實驗過程規(guī)范性和數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

6．今年6月份和10月份我們科室分別接到國家食品藥品監(jiān)督管理總局下達(dá)的食品安全抽檢檢測承檢機構(gòu)的沙門氏菌和阪崎腸桿菌的盲樣考核，在時間緊任務(wù)重 的情況下，我們科室人員放棄了休息時間，在規(guī)定的時間內(nèi)，完成了這兩次盲樣的考核，在這兩次盲樣的考核中我們收獲頗多，在平時的檢驗工作中沙門氏菌只要求 做到檢出和未檢出，而在這次的考核中不單只要求我們做到檢出和未檢出，還要求我們做到血清的分型，這對我們來說是一次大的挑戰(zhàn)，而阪崎腸桿菌是我們從來沒有接觸過得，但科室還是齊心協(xié)力的完成了這項任務(wù)，也是通過這兩次的挑戰(zhàn)讓我們學(xué)到了不少的知識，也對我們以后的工作有了更高的要求。到目前為止，沙門氏 菌的盲樣考核結(jié)果為滿意，阪崎腸桿菌的結(jié)果尚未出來。這個月我們科室還將承接國家食藥總局對食品中金黃色葡萄球菌的盲樣考核。

7．對本中心的菌種的申購，轉(zhuǎn)種，保存，保管，領(lǐng)用，制定了管理制定，做好保存保管工作，實行了雙人雙鎖保管，并做好了使用登記記錄。對菌種以及污染物的處理等各環(huán)節(jié)實行有效的監(jiān)督控制，防止污染事故的發(fā)生。

8.在人員少，任務(wù)重的情況下，本科室還是積極配合中心做好生產(chǎn)企業(yè)人員 培訓(xùn)工作。

二、存在問題：

1．任務(wù)繁重，人員相對不足。

2．實驗室的建設(shè)存在瓶頸問題：在配制，洗滌，消毒場地等問題比較的突出。3．由于桶裝飲用水的標(biāo)準(zhǔn)更新，而且水樣的檢測任務(wù)也比較的重，現(xiàn)有的過濾裝置不適應(yīng)工作的需要，使得檢驗速度進展緩慢。急待于領(lǐng)導(dǎo)解決這個問題。

通過這一年的工作，食品微生物室在檢驗工作中積累了一些經(jīng)驗，取得了一些成績，但這些成績的背后都離不開各位領(lǐng)導(dǎo)的指導(dǎo)和幫助,更離不開科室成員的齊心協(xié)力。

食品微生物檢測是食品檢測的一個重要組成部分，又是食品質(zhì)量控制不可或缺的一個主要環(huán)節(jié)，通過今年一年國家食品藥品監(jiān)督管理總局對食品微生物多達(dá)3次的盲樣考核，從中也可以看出國家對食品微生物的檢測工作的重視程度，也給我們科室?guī)砹饲八从械膲毫Γ腔瘔毫閯恿Γ@才是我們一直以來不斷的進步的最根本。只有在不斷的進步中，我們才會得到了更大的發(fā)展，在進步中我們也有陣痛，但是這些都是暫時的，長遠(yuǎn)的發(fā)展才是我們一直想要的結(jié)果！相信在2016年我們會做的更好！

食品微生物室