第一篇:園藝專業(yè)畢業(yè)生優(yōu)秀論文1
河 南 科 技 學 院 2013屆本科畢業(yè)論文
論文題目:
不同處理對“豐花月季”花粉生活力的影響
學生姓名:
婁騰雪
所在院(系):
園藝園林學院
所學專業(yè):
園藝
導師姓名:
李桂榮
完成時間:
2013年5月
目 錄
摘要................................................................................................................................1 1 引言............................................................................................................................3 2 材料與方法................................................................................................................3 2.1 試驗材料.................................................................................................................3 2.2 試驗方法.................................................................................................................3 2.2.1 花粉的采集..........................................................................................................3 2.2.2 試驗設計..............................................................................................................4 2.2.3 花粉培養(yǎng)..............................................................................................................5 2.2.4 觀察及記錄結(jié)果..................................................................................................5 3 結(jié)果與分析................................................................................................................5 3.1 正交試驗結(jié)果極差分析.........................................................................................6 3.2 正交試驗結(jié)果方差分析.........................................................................................6 3.3 試驗因素各水平間的多重比較.............................................................................7 4 小結(jié)與討論................................................................................................................8 4.1 關于蔗糖濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究.....................................8 4.2 關于硼酸濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究.....................................8 4.3 關于CaCl2濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究.................................9 4.4 關于MgSO4濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究...............................9 4.5 關于ZnSO4濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究.............................10 參考文獻......................................................................................................................10 致謝..............................................................................................................................12
不同處理對“豐花月季”花粉生活力的影響
作者 婁騰雪 指導教師 李桂榮
(河南科技學院園藝園林學院,河南 新鄉(xiāng) 453003)
摘要:本研究以“豐花月季”品種為試材,采用正交試驗設計,研究蔗糖濃度、硼酸濃度、CaCl2濃度、MgSO4濃度、ZnSO4濃度5個因素對其花粉生活力的影響,以期找出最適宜“豐花月季”花粉萌發(fā)的培養(yǎng)條件。結(jié)果表明:蔗糖濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)的影響最大,其余依次為硼酸濃度、ZnSO4濃度、CaCl2濃度,MgSO4濃度的影響最小。一定濃度的蔗糖、硼酸、CaCl2對花粉的萌發(fā)有較大的促進作用,但超過一定濃度時起抑制作用,而ZnSO4濃度對花粉的萌發(fā)率影響是在一定范圍內(nèi)先降低后升高,MgSO4濃度對花粉的萌發(fā)影響不太明顯。最適宜“豐花月季”花粉萌發(fā)的離體條件是:200g/L 蔗糖+100mg/L 硼酸+50mg/L CaCl2+20mg/L MgSO4+40mg/L ZnSO4。
關鍵詞:“豐花月季”,花粉萌發(fā),正交試驗
Effects of different treatments on ‘Floribunda Roses’
pollen viability
Author Lou Teng-xue
Supervisor Li Gui-rong(School of Horticulture and Landscape Architecture, Henan Institute of
Science and Technology, Xinxiang, Henan 453003)
Abstract: In this study, ‘Floribunda Roses’ were used as experimental materials.The study discussed five factors influence on pollen viability by orthogonal experiment design, and the five factors were the concentration of sucrose, the concentration of boric acid, the concentration of CaCl2, the concentration of MgSO4 and the concentration of ZnSO4, so as to find out the best matching, namely, the optimum culture conditions of ‘Floribunda Roses’ pollen germination.The results showed that the concentration of sucrose had the greatest influence on ‘Floribunda Roses’ pollen germination, the concentration of boric acid, the concentration of ZnSO4, and the concentration of CaCl2 had greater influence, and that the concentration of MgSO4
had minimal impact.A certain concentrations of sucrose, boric acid and CaCl2 for pollen germination had great role in promoting, but when the factors exceeded a certain concentration, they would had inhibitory effect.The effect of the concentration of ZnSO4 on pollen germination rate was later increased after the firstly decreased within a certain range.The concentration of MgSO4 had little effect on pollen germination.200g/L sucrose + 100 mg/L boric acid + 50mg/L CaCl2 + 20mg/L MgSO4 + 40mg/L ZnSO4, was the best in vitro culture medium for ‘Floribunda Roses’ pollen germination.Key words: ‘Floribunda Roses’, pollen germination, the orthogonal experiment method 引 言
“豐花月季”(Rosa hybrida),為薔薇科薔薇屬植物,被稱譽為“花中皇后”,又稱“月月紅”,是中國十大名花之一。它花姿綽約,色彩絢麗,芳香馥郁,開花期長,且適應性強,栽培容易,每到開花季節(jié),繁花似錦,五彩繽紛,能充分體現(xiàn)群體美。可用于園林布置花壇、花境、庭院花材,可制作月季盆景,作切花、花籃、花束等。花可提取香料。根、葉、花均可入藥,具有活血消腫、消炎解毒功效。隨著消費者對“豐花月季”品質(zhì)的要求越來越高,“豐花月季”新品種的選育也越來越重要,迫切需要培育出更多新、奇、罕、特、異的符合消費市場需求的品種,因此“豐花月季”的育種愈發(fā)顯示出其重要性。
在花卉的育種過程中,為了進行人工輔助授粉或雜交授粉,或為了解決親本的花期不一致或遠緣雜交的困難,常需要保存花粉的活力。花粉是有性繁殖植物遺傳物質(zhì)的載體,影響有性繁殖植物的授粉、胚胎發(fā)育、遺傳基礎[1],花粉生活力是花粉具有存活、生長、萌發(fā)或發(fā)育的能力。研究花粉的生活力和可育性是育種工作必不可少的基礎性工作。其中花粉萌發(fā)率是衡量花粉生活力大小的指標之一,也是最重要的指標[2]。因此,如何提高“豐花月季”花粉萌發(fā)率是一個需要深入研究的課題。
花粉的離體培養(yǎng)過程中,花粉萌發(fā)除了與本身的質(zhì)量有關外,不同培養(yǎng)基成分對花粉萌發(fā)和花粉管生長具有不同程度的影響。影響花粉萌發(fā)最重要的因素有兩個:⑴蔗糖,蔗糖在培養(yǎng)基中有兩個作用:一方面可以為花粉萌發(fā)提供能源,另外一方面可以作為花粉代謝的底物并保持滲透壓平衡;⑵硼,硼酸可以促進花粉的萌發(fā)和花粉管的伸長[1]。另外,花粉的萌發(fā)除了與這兩個因素有關以外,還與幾種礦質(zhì)元素如Ca2+、Mg2+、Zn2+等密切相關[3]。近年來,有關適合“豐花月季”花粉萌發(fā)的培養(yǎng)基的報道不多,且集中于對蔗糖和硼酸的研究。為此,本試驗選擇不同濃度的蔗糖、硼酸、CaCl2、MgSO4和ZnSO4,采用正交試驗設計,研究不同成分組合對“豐花月季”花粉生活力的影響,獲得最優(yōu)花粉離體培養(yǎng)的培養(yǎng)基,為月季人工授粉、雜交育種以及花粉單倍體培養(yǎng)等提供一定的理論依據(jù)。材料與方法
2.1 試驗材料
2012年5月采集生長健壯的“豐花月季”植株上含苞待放的花蕾為試材。2.2 試驗方法 2.2.1 花粉的采集
早晨6-7點,從生長健壯的“豐花月季”植株上隨機選取10朵含苞待放的花蕾。放進廣口瓶帶回實驗室。輕輕剝掉花瓣,取出花藥,放在墊有硫酸紙的帶
蓋培養(yǎng)皿中,及時剔除其中的雜質(zhì)和破裂的花藥,然后將培養(yǎng)皿放置在陰涼干燥處陰干,室溫條件下,經(jīng)一定時間后花粉開裂,待花粉完全散出后放在4℃的冰箱中密閉干燥保存,備用。2.2.2試驗設計
試驗設計采用蔗糖濃度、硼酸濃度、CaCl2濃度、MgSO4濃度和ZnSO4濃度5個因素,各因素設置5個水平,如下:
①蔗糖(g/L):0、100、150、200、250; ②硼酸(mg/L):0、50、100、150、200; ③CaCl2(mg/L):0、50、100、150、200; ④MgSO4(mg/L):0、10、20、30、40; ⑤ZnSO4(mg/L):0、10、20、30、40。
采用正交表L25(56),共設置25個組合,詳見表1,其中添加瓊脂粉6g/L,pH5.8-6.0,設定溫度為28℃。以下每處理組合重復4次,每次重復相當于一個區(qū)組,各區(qū)組間采用隨機區(qū)組設計。
表1 “豐花月季”花粉萌發(fā)的正交試驗設計
Tab.1 The orthogonal experiment design of ‘Floribunda Roses’ pollen germination
試驗因素
試驗號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 蔗糖濃度/(g/L)0 0 0 0 0 100 100 100 100 100 150 150 150 150 150
硼酸濃度/(mg/L)
0 50 100 150 200 0 50 100 150 200 0 50 100 150 200
CaCl2/(mg/L)
0 50 100 150 200 50 100 150 200 0 100 150 200 0 50
MgSO4/(mg/L)
0 10 20 30 40 20 30 40 0 10 40 0 10 20 30
ZnSO4/(mg/L)
0 10 20 30 40 30 40 0 10 20 10 20 30 40 0 17 18 19 20 21 22 23 24 200 200 200 200 200 250 250 250 250
0 50 100 150 200 0 50 100 150 200
200 0 50 100 200 0 50 100 150 20 30 40 0 30 40 0 10 20
0 10 20 30 20 30 40 0 10 25 250 2.2.3 花粉培養(yǎng)
按照培養(yǎng)液配方配制培養(yǎng)基,用潔凈的玻璃棒蘸取一定量的培養(yǎng)基滴在凹玻片的凹槽內(nèi)(要適量,過多會影響后期的觀察,而過少又不適宜花粉生長),制作發(fā)芽床,待凝固后,用牙簽挑取花粉,輕輕振動,使花粉均勻地撒在發(fā)芽床上(避免出現(xiàn)重疊),每凹槽內(nèi)50-100粒花粉,然后用凡士林涂抹蓋玻片,蓋住發(fā)芽床并密封,最后貼上標簽寫明處理、播種日期。各處理在28℃,黑暗培養(yǎng)。2.2.4 觀察及記錄結(jié)果
供試“豐花月季”花粉在28℃下培養(yǎng),為避免水分蒸發(fā)造成誤差過大,應盡可能增大培養(yǎng)環(huán)境的空氣濕度。培養(yǎng)4h后,在10×40倍光學顯微鏡下觀察花粉萌發(fā)率,每處理組合重復4次,每個培養(yǎng)基隨機觀察3個視野,每個視野不少于50粒花粉,記錄萌發(fā)花粉粒數(shù)和花粉總粒數(shù)。花粉萌發(fā)標準:以花粉管長度超過花粉粒直徑的1/2為萌發(fā)花粉。
花粉萌發(fā)率(%)=視野中萌發(fā)花粉粒數(shù)/視野中花粉總粒數(shù)×100%。數(shù)據(jù)分析采用DPS數(shù)據(jù)分析軟件進行數(shù)據(jù)處理及Duncan新復極差多重比較分析差異顯著性。結(jié)果與分析
由圖1可知,25個不同處理之間“豐花月季”花粉的萌發(fā)率存在明顯的差異。其中處理14花粉萌發(fā)率最高,達到21.75%;處理19、16、23花粉萌發(fā)率稍低于處理14,分別為21.48%、20.53%、20.21%;其余的處理均在20%以下,花粉萌發(fā)率最低的是處理12,萌發(fā)率只有1.08%。圖1所列是不同處理組合下“豐花月季”花粉萌發(fā)率的測定結(jié)果,但其并不能說明各試驗因素對“豐花月季”花粉萌發(fā)率的影響,所以仍需對其進行進一步的數(shù)據(jù)分析。
花粉萌發(fā)率(%)The pollen germinationrate(%)
2520***6789101112******試驗號Test number圖1 正交試驗設計“豐花月季”花粉的萌發(fā)率Fig.1 'Floribunda Roses' pollen germination by theorthogonal experiment design3.1 正交實驗結(jié)果極差分析
為進一步探討各試驗因素對“豐花月季”花粉萌發(fā)率的影響,對圖1進行極差分析,結(jié)果如表2所示,在5個因素中蔗糖濃度的極差最大,表明其對花粉萌發(fā)的影響最大,其次是硼酸濃度、ZnSO4濃度和CaCl2濃度,MgSO4濃度對花粉萌發(fā)的影響最小。
表2 L25(56)正交試驗極差分析表
Tab.2 The range analysis of the L25(56)orthogonal experiment design
試驗因素 蔗糖濃度 硼酸濃度 CaCl2 MgSO4 ZnSO4 極小值 3.12 8.23 9.62 11.36 9.12
極大值 19.28 15.39 14.77 13.75 15.97
極差R 16.17 7.15 5.15 2.39 6.85
調(diào)整R' 14.46 6.4 4.61 2.14 6.12 注:極小值指同一試驗因素各水平下所對應的花粉萌發(fā)率的最小均值;極大值指同一試驗因素各水平下所對應的花粉萌發(fā)率的最大均值;極差R指各試驗因素在其取值范圍內(nèi)萌發(fā)率變化的幅度。
3.2 正交試驗結(jié)果方差分析
極差分析較為簡便,結(jié)論直觀,但是因為計算比較粗放,不能給出誤差大小 的估計,因而需要進一步用方差分析進行驗證。方差分析能夠準確的估計誤差,在結(jié)合誤差后提高了檢測的精確性,因而使用方差分析使結(jié)果更準確。方差分析的結(jié)果見表3。由表3可知,區(qū)組和MgSO4濃度的P值>0.05,即區(qū)組和MgSO4濃度對花粉萌發(fā)率的影響不顯著;蔗糖濃度、硼酸濃度、ZnSO4濃度和CaCl2濃度的P值≤0.01,即蔗糖濃度、硼酸濃度、ZnSO4濃度和CaCl2濃度對花粉萌發(fā)率的影響都極顯著。其影響大小順序為:蔗糖濃度>硼酸濃度>ZnSO4濃度>CaCl2濃度>MgSO4濃度。由方差分析得出的影響大小順序與極差分析得出的結(jié)果相同。
表3 L25(56)正交試驗方差分析表(隨機區(qū)組模型)
Tab.3 The variance analysis of the L25(56)orthogonal experiment design(randomized block model)
變異來源 區(qū)組 蔗糖濃度 硼酸濃度 CaCl2濃度 MgSO4濃度 ZnSO4濃度 誤差 總和
Ss(平方和)D(f自由度)Ms(均方)
F值 <1 37.2684 7.6688 4.6432 0.8591 7.035
P值
0.0001 0.0001 0.003 0.4953 0.0002 0.24 21.27 4.38 2.65 0.49 4.01 6.85 45.43 4 4 4 4 4 48
0.12 5.32 1.09 0.66 0.12 1 0.14
3.3 試驗因素各水平間的多重比較
表4 L25(56)正交試驗的5個影響因素各水平的差異顯著性檢驗(SSR檢驗)
Tab.4 Difference significance of the each level of 5 affecting factors in the L25(56)orthogonal
experiment design(SSR test)
水平1 2 3 4 5
花粉萌發(fā)率/(%)
蔗糖濃度 3.12dC 14.64bB 11.16cB 18.28aA 13.68bcB
硼酸濃度 8.23cB 11.72bAB 15.39aA 13.94abA 12.59abA
CaCl2濃度 14.18abA 14.77aA 9.62cB 11.85bcAB 11.47bcAB
MgSO4濃度 11.36aA 12.05aA 13.75aA 12.02aA 12.7aA
ZnSO4濃度 11.45bcBC 11.61bcBC 9.12cC 13.73abAB 15.97aA
注:表中顯示的多重比較結(jié)果為縱向排列,比較的是同一試驗因素不同水平的差異顯著性。1、2、3、4、5分別代表各試驗因素的5個水平,不同小寫字母和大寫字母分別代表差異性顯著(p≤0.05)和極顯著(p≤0.01)。
經(jīng)方差分析表明,模型誤差不顯著,說明試驗因素間交互作用不顯著,各因素所在列有可能未出現(xiàn)交互作用的混雜,此時各試驗因素水平間的差異能真正反映因素的主效,因而進行各試驗因素水平間的多重比較有實際意義,并從各試驗因素水平間的多重比較中選出各試驗因素的最優(yōu)水平相組合。采用Duncan新復極差法進行多重比較,結(jié)果見表4。結(jié)果表明:蔗糖濃度的最優(yōu)水平是水平4(200g/L),硼酸濃度的最優(yōu)水平是水平3(100mg/L),CaCl2濃度的最優(yōu)水平是水平2(50mg/L),MgSO4濃度的最優(yōu)水平是水平3(20mg/L),ZnSO4濃度的最優(yōu)水平是水平5(40mg/L)。綜合極差分析和方差分析的結(jié)果,因此200g/L 蔗糖+100mg/L 硼酸+50mg/L CaCl2+20mg/L MgSO4+40mg/L ZnSO4是“豐花月季”花粉離體培養(yǎng)的最優(yōu)培養(yǎng)基。小結(jié)與討論
4.1 關于蔗糖濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究
在花粉的離體培養(yǎng)過程中,花粉萌發(fā)和花粉管生長對培養(yǎng)基中糖類的濃度具有嚴格的要求。糖在培養(yǎng)基中有兩個作用:一方面可以為花粉萌發(fā)提供能源,另外一方面可以作為花粉代謝的底物并調(diào)節(jié)滲透壓。在一定范圍內(nèi),蔗糖對花粉萌發(fā)有明顯影響,培養(yǎng)基中蔗糖濃度過高或濃度過低均對花粉萌發(fā)不利。濃度過大花粉會造成原生質(zhì)脫水,發(fā)生質(zhì)壁分離,使花粉不能萌發(fā),過低則會使花粉壁破裂,導致花粉失去活力[4-6]。
經(jīng)正交試驗極差分析和方差分析表明,蔗糖濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)的影響達到了極顯著水平(F=37.2684,P=0.0001),在所選的5個試驗因素中,其對“豐花月季”花粉的萌發(fā)影響最大。由表4可知,其最適濃度為200g/L,最高萌發(fā)率達19.28%。當蔗糖濃度為200g/L時,供試“豐花月季”花粉萌發(fā)率最高,分析原因可能為:此時的蔗糖既能為“豐花月季”花粉提供足夠的能源,又能使“豐花月季”花粉內(nèi)外的滲透壓達到平衡,維持正常生活力,使花粉生活力達到最強。本試驗篩選出的最適“豐花月季”花粉離體萌發(fā)的蔗糖濃度為200g/L,這與一些研究結(jié)果基本一致,如初慶剛[7]研究結(jié)果顯示:櫻桃屬植物花粉萌發(fā)的最適蔗糖濃度為150g/L和200g/L;但與一些研究結(jié)果有一定的差異,如周旭紅等[8]研究結(jié)果顯示:大多香石竹花粉萌發(fā)的最適蔗糖濃度為100g/L,這可能與供試材料的種類、栽培條件、品種特性和培養(yǎng)基的類型(固體或液體)有關。4.2 關于硼酸濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究
培養(yǎng)基中適量的硼酸是花粉萌發(fā)所必需的,特別是培養(yǎng)初期,一定濃度的硼
酸有利于花粉的萌發(fā)與花粉管伸長[9-10]。硼在植物體中屬于微量元素,分布不均,在花的柱頭和子房中含量最高[11],硼酸促進花粉萌發(fā)的作用機理是硼離子與糖結(jié)合能夠形成絡合物,其能夠增加花粉對糖的吸收、運轉(zhuǎn)和代謝,增加氧的吸收,同時硼能夠促進構成花粉管膜的成分--果膠物的合成[12],因而有利于花粉管生長。但是硼酸濃度過高或不加硼酸都會導致花粉萌發(fā)率低,萌發(fā)速度慢,花粉管長度短以及花粉管形狀不規(guī)則等一系列非正常狀態(tài)。
經(jīng)正交試驗極差分析和方差分析表明,硼酸濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)的影響達到了極顯著水平(F=7.6688,P=0.0001)。由表4可知,當硼酸在100mg/L時最有利于“豐花月季”花粉萌發(fā)。這一濃度時花粉的萌發(fā)率始終高于其它濃度,最高萌發(fā)率為15.39%。如果采用高于這一濃度的硼酸則會與蔗糖一樣,降低環(huán)境水勢而對花粉萌發(fā)不利。本試驗篩選出的最適“豐花月季”花粉離體萌發(fā)的硼酸濃度為100mg/L,這與一些研究結(jié)果基本一致,如屈海泳等[13]研究結(jié)果顯示:桃花粉萌發(fā)的硼酸濃度100mg/L;但與一些研究結(jié)果有一定的差異,如初慶剛[7]研究結(jié)果顯示:櫻桃屬植物的硼酸濃度為150mg/L,供試材料的種類、栽培條件、品種特性和培養(yǎng)基的類型(固體或液體)可能是造成差異的原因。4.3 關于CaCl2濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究
CaCl2對花粉萌發(fā)和花粉管生長也有重要的影響。大量研究表明,Ca2+的動態(tài)變化對啟動花粉萌發(fā)、調(diào)節(jié)花粉管伸長等環(huán)節(jié)具有重要作用[14]。一般認為,花粉內(nèi)存在較多的鈣,而硼較缺乏,因此萌發(fā)時胞外鈣離子對萌發(fā)率的影響不如硼來的顯著[15]。這與我們的試驗研究結(jié)果是一致的。許多植物的花粉壁上貯存有足夠的鈣,當花粉水合時,鈣被釋放出來以供花粉萌發(fā)和花粉管生長的需要,因此在有些情況下外源鈣對花粉的萌發(fā)和花粉管生長并非必需。
表4表明,Ca2+對“豐花月季”花粉的離體培養(yǎng)同樣表現(xiàn)出在一定的濃度下促進其萌發(fā),超過這個濃度則表現(xiàn)出抑制作用的特性。最有利于“豐花月季”花粉萌發(fā)的CaCl2濃度為50mg/L。在不含Ca2+的培養(yǎng)基中,“豐花月季”花粉同樣能萌發(fā),其萌發(fā)率為14.18%,稍低于50mg/LCaCl2時的萌發(fā)率,但隨著著Ca2+濃度的增加,“豐花月季”花粉萌發(fā)率迅速下降,在Ca2+濃度為100mg/L時達到最低,說明CaCl2表現(xiàn)出較強的抑制作用,達到0.05的顯著性抑制水平。在梨花粉的萌發(fā)中也有這種趨勢[16]。可見離體培養(yǎng)時正常花粉萌發(fā)需適當?shù)耐庠粹},缺鈣或鈣濃度過高都會導致花粉和花粉管生長受阻[17]。4.4 關于MgSO4濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究
MgSO4對花粉萌發(fā)和花粉管生長影響不大,但有促進作用。各濃度間無顯著差異,最大萌發(fā)率僅為13.75%,這與王嵐嵐等[18]以月季品種‘Sorbet fruite’的花粉為材料,通過單因子試驗比較液體培養(yǎng)基中Mg2+對月季花粉離體萌發(fā)的影
響是一致的。
4.5 關于ZnSO4濃度對“豐花月季”花粉萌發(fā)率影響的研究
ZnSO4對花粉萌發(fā)和花粉管生長也有重要的影響。鋅是吲哚乙酸生物合成所必需的元素,缺鋅可使植物蛋白質(zhì)合成受阻從而影響花粉萌發(fā),因此加入一定量的鋅離子就能促進“豐花月季”花粉的萌發(fā)。
表4表明,40mg/L ZnSO4對“豐花月季”花粉萌發(fā)和花粉管生長有顯著的促進作用,其萌發(fā)率比不含Zn2+的培養(yǎng)基的萌發(fā)率提高了39.48%,達到0.01的顯著性水平。而在20mg/L時,“豐花月季”花粉生活力最低,為9.12%。低含量(如10mg/L)的硫酸鋅對“豐花月季”花粉萌發(fā)的作用不顯著;而稍高含量(如20mg/L)的硫酸鋅對花粉的萌發(fā)卻有顯著的抑制作用,高濃度(如30mg/L和40mg/L)對花粉萌發(fā)有顯著促進作用。說明在一定范圍內(nèi),“豐花月季”花粉萌發(fā)率隨Zn2+濃度的增加先下降后提高。李春林等[19]對普通油茶進行花粉離體萌發(fā)研究表明,一定量的鋅離子能促進普通油茶無性系花粉萌發(fā),但過高濃度的鋅離子會使花粉內(nèi)部的合成產(chǎn)物大量積累,從而使花粉萌發(fā)受到抑制。
參考文獻
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首先,我要感謝李桂榮老師,本論文是在老師的親切關懷和悉心指導下完成的,傾注了老師大量的心血。我從中不僅學習了很多專業(yè)知識理論,更掌握了很多實際操作技能。老師淵博的學術知識,嚴謹求實的治學態(tài)度,精益求精的工作作風,深深地感染和激勵著我。在此,向我敬愛的老師表示最崇高的敬意和最誠摯的感謝!另外,在論文修改過程中感謝姜立娜老師的指導。
我還要感謝大學四年來所有的任課老師和輔導員,他們對我的專業(yè)知識和人格素養(yǎng)方面都有很大的啟發(fā);感謝我的所有同學,他們使我度過了愉快的大學生活,也給予了我很多幫助。在此,我特別感謝李國鳳、賈真珍、付婷同學,在本試驗過程中,給予了我極大的幫助。
最后,感謝我的母校——河南科技學院和我的父母對我的精心栽培!
第二篇:園藝專業(yè)畢業(yè)生優(yōu)秀論文4
河 南 科 技 學 院 2014屆本科畢業(yè)論文(設計)
Zn2+脅迫對菜用大黃種子萌發(fā)和幼苗生長的影響
學生姓名:李軍麗
所在學院: 園藝園林學院
所學專業(yè):園藝
導師姓名:姜立娜
完成時間:2014年5月9號
Zn2+脅迫對菜用大黃種子萌發(fā)和幼苗生長的影響
作者 李軍麗 指導教師 姜立娜
(河南科技學院園林學院,河南 新鄉(xiāng) 453003)
摘要:以菜用大黃的種子為實驗材料,研究Zn2+脅迫對種子萌發(fā)及幼苗生長和葉綠素含量的影響,從而更好地認識重金屬Zn對綠色植物生長發(fā)育的影響。設置Zn2+濃度梯度為20、50、100、150、200、300、500、700mg/L,以去離子水為對照。結(jié)果表明,在Zn2+脅迫條件下,菜用大黃種子的發(fā)芽指標隨著Zn2+濃度的增加表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢。發(fā)芽勢、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)都是在Zn2+濃度為100mg/L時達到最大,電導率在鋅濃度為100mg/L時最低,幼苗根長、莖長和葉綠素的含量都隨著Zn2+濃度的增加而逐漸降低。研究表明,適量的Zn2+雖然能促進種子的萌發(fā),但是幼苗的根長、芽長和葉綠素含量將受到不同程度的影響,生產(chǎn)上應該酌量施用鋅肥。
關鍵詞:菜用大黃,種子萌發(fā),幼苗生長,電導率,葉綠素含量
Effects of Zn2+ Stress on Culinary rhubarb Seeds Germination and Seedling Growth
Author:Li Junli Teacher:Jiang Lina
(College of Horticulture and Landscape Architecture, Henan Institute of Science and
Technology, Xinxiang Henan 453003)
Abstract:By the seeds of culinary rhubarb for the experiment materials, the research aimed to study the effects of Zn2+ stress on culinary rhubarb seeds germination,seedling growth and chlorophyll content,to better know the stressing effects of heavy metal Zn2+ on growth and development of green plant.Zn2+ concentration was 20, 50, 100, 150, 200, 500 and 700 mg/L, respectively.Take deionized water as control.The results indicated that all of the data firstly rose and then dropped with the
increasing of Zn2+ stress.The germination potential,rate and index up to their maximum value all at 100mg/L.Conductivity in the Zn2+ concentration is 100mg/L for the lowest.Seeding root length,stem length and chlorophyll content increased with the concentration of Zn2+ was decreased.Research shows that,although the amount of Zn2+ can promote the germination of seeds,but the seeding root length,shoot length and chlorophyll content will be affected to varying degrees,the production should be application of Zn2+ fertilizer.Key words:Culinary rhubarb,Seeds germination,Seedling growth,Conductivity,Content of chlorophyll
目 錄
引言.............................................................................................................................................1 1 材料與方法.............................................................................................................................1 1.1 材料......................................................................................................................................1 1.2 方法......................................................................................................................................2 1.2.1 發(fā)芽試驗..........................................................................................................................2 1.2.2 幼苗根長和莖長的測定.................................................................................................2 1.2.3電解質(zhì)外滲率的測定.....................................................................................................2 1.2.4葉綠素含量的測定..........................................................................................................2 2 結(jié)果與分析.............................................................................................................................2 2.1 Zn2+濃度對菜用大黃種子萌發(fā)情況的影響....................................................................3 2.2 Zn2濃度對菜用大黃幼苗根長和莖長的影響
..............................................................3 2.3 Zn2濃度對菜用大黃電解質(zhì)外滲率的影響....................................................................4 2.4 Zn2濃度對菜用大黃幼苗葉綠素濃度的影響................................................................4 3小結(jié)與討論.............................................................................................................................5 3.1 小結(jié)......................................................................................................................................5 3.2 討論......................................................................................................................................6 參考文獻.....................................................................................................................................6 致謝..................................................................................................................................................................8
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引 言
菜用大黃(Rheum rhaponticum L.)是蓼科(Polygonaceae)大黃屬(Rheum)多年生草本植物,以其葉柄為食用部位,根可以入藥,全世界有500多個品種[1]。菜用大黃株高1-1.5 m,根狀莖粗壯。莖直立,上部分枝,具稀疏的短柔毛,背面被毛;花期6-7月,果期7-8月。菜用大黃為瘦果,有3棱,沿棱生3翅,并帶有膜狀的種翼,其種子千粒重20 g左右,發(fā)芽力可保持3年以上[2-3]。菜用大黃具有粗大多汁的葉柄,富含維生素A、C、B1、B2、Ca、P、K等礦質(zhì)元素,以及人體必須的多種氨基酸、琥珀酸等物質(zhì),這些營養(yǎng)物質(zhì)與大多數(shù)蔬菜和水果類似[4]。據(jù)資料顯示:除含有一定量的糖分、蛋白質(zhì)、及少量的單寧而外,每100 g鮮葉柄含胡蘿卜素4.05 mg、維生素C150 mg[5],果膠含量為1.30 g,略高于蘋果和梨,有機酸主要為蘋果酸。菜用大黃還可用于制作罐頭、甜點、餅派、果醬、糖漿及果酒等食品,已成為西方人日常生活中的傳統(tǒng)食品[6-8],根部含蒽、醌類衍生物及大黃素,具有極高的藥用價值。同時菜用大黃具有株體大、適應性強、產(chǎn)量高、豐產(chǎn)性好、收獲期長、管理方便等特點,一次定植可以連續(xù)收獲4-6年,具有穩(wěn)定的經(jīng)濟產(chǎn)量性狀和較高的經(jīng)濟效益[9]。
為了創(chuàng)造使菜用大黃更好的生長的土壤條件,滿足市場需求,對適宜菜用大黃生長的土壤條件進行研究是非常有必要的。植物的生長發(fā)育除需要“大量元素”外,還需要及少量的“微量元素”,這些微量元素在植物體內(nèi)雖然含量很少,但它對植物的生長發(fā)育起著至關重要的作用。鋅是植物生長發(fā)育不可缺少的微量元素之一,它可以作為六大類功能酶中不同輔助因子的成分,有調(diào)節(jié)酶活性的作用。鋅與碳水化合物轉(zhuǎn)化有密切關系,參與葉綠素的合成,促進光合作用。鋅也對作物根系細胞膜、細胞結(jié)構的穩(wěn)定性及功能完整性必不可少,鋅起保護根表和根內(nèi)細胞膜的作用,可提高作物的抗旱能力[10]。
目前,我國對菜用大黃的研究雖有資料介紹,但是還不夠成熟,對于菜用大黃生長所需的營養(yǎng)元素方面的介紹更是少之又少。本試驗通過對重金屬鋅對菜用大黃的種子的發(fā)芽特性以及幼苗生長狀況進行研究和分析,從而更好地了解重金屬鋅對菜用大黃生長發(fā)育的脅迫作用,為進一步進行土壤修復提供技術依據(jù)。材料與方法
1.1 材料
本試驗所用菜用大黃種子資源由河南科技學院菜用大黃引種課題組提供,于2013年6月采自新鄉(xiāng)古固寨實驗基地,本試驗于2013年11月在河南科技學院育種實驗室進行,所用種子的千粒重為22.5g。1.2 方法 1.2.1發(fā)芽試驗
本試驗采用的是紙上發(fā)芽的方式。首先選取無病蟲害,籽粒飽滿一致并且無破損的菜用大黃種子若干粒,用蒸餾水浸泡處理24小時,使種子吸水膨脹。然后以ZnSO4為基礎,配制ZnSO4梯度濃度溶液,濃度分別為0、20、50、100、150、200、300、500、700 mg/L的ZnSO4溶液。取干凈的培養(yǎng)皿27個,將浸種后的種子吸干水分,按每皿30粒放入鋪有雙層濾紙的培養(yǎng)皿中,分別加入不同濃度的ZnSO4溶液,每個濃度重復3次,在培養(yǎng)皿的側(cè)面貼上標簽,蓋好后放入21℃的恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。保證培養(yǎng)箱每天12小時的光照,每天用相應濃度的鋅溶液補充蒸發(fā)掉的水分,使種子能夠在溶液濃度恒定的條件下進行發(fā)芽。每天以胚根突破種皮3mm為標準統(tǒng)計萌發(fā)粒數(shù),在5天后計算發(fā)芽勢,7天后計算發(fā)芽率,并計算出發(fā)芽指數(shù)。培養(yǎng)14天后測定幼苗的根長、莖長和葉綠素的含量。
發(fā)芽勢(%)=(規(guī)定天數(shù)正常發(fā)芽種子數(shù) /供試種子總數(shù))×100% 發(fā)芽率(%)=(全部正常發(fā)芽種子數(shù) /供試種子總數(shù))×100% 發(fā)芽指數(shù)(GI)=∑(Gt/Dt)(Gt為t時間內(nèi)的發(fā)芽數(shù),Dt為相應的發(fā)芽天數(shù))[11] 1.2.2幼苗根長和莖長的測定
待培養(yǎng)14天后,分別從各個濃度的樣品中隨機選取10株幼苗,測量其根長和莖長,最后算出平均值。1.2.3電解質(zhì)外滲率的測定
電解質(zhì)外滲率采用電導儀測定,參照張志良的方法[12]。
用不同濃度的ZnSO4溶液浸種菜用大黃種子24小時后,隨機取浸種種子各20粒,用蒸餾水洗凈吸干, 放入 50 mL錐形瓶中, 加蒸餾水 20 mL, 浸泡 4.5 h。搖動錐形瓶, 使溶液均勻, 過濾到 50 mL燒杯中,每個處理重復三次,測定濾出溶液的電導率。
1.2.4 葉綠素含量的測定
取0.25g培養(yǎng)好的菜用大黃葉片用80%的丙酮提取,以每分6000轉(zhuǎn)離心10分鐘,取其上清液,用分光光度計檢測在663和645nm處的吸收值,依據(jù)Lambert-Beer定律計算葉綠素的含量[13],單位為mg/g。結(jié)果與分析
2.1 Zn2+濃度對菜用大黃種子萌發(fā)情況的影響
發(fā)芽率和發(fā)芽勢是經(jīng)常用來評價種子發(fā)芽常用的指標,反映了種子的發(fā)芽 速度和發(fā)芽整齊度。由表1可知:不同濃度的Zn2+溶液處理后的菜用大黃種子的萌發(fā)情況不同,以去離子水(0mg/L)為對照,在低濃度的Zn2+溶液處理下,菜用大黃種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢都高于對照,其中,當Zn2+溶液處于100mg/L時,種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢都處于最高狀態(tài),分別為86%和82%,對菜用大黃的種子的萌發(fā)起到促進作用。可是在高濃度的Zn2+溶液處理下,菜用大黃種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢都低于對照,當處于200mg/L時種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢急劇下降,對菜用大黃種子的萌發(fā)起到抑制作用,且隨著Zn2+濃度的提高,抑制作用逐漸增大。這說明Zn2+溶液對菜用大黃種子萌發(fā)的影響呈現(xiàn)低促高抑的現(xiàn)象。
發(fā)芽指數(shù)可以在一定程度上表示種子在萌發(fā)過程中營養(yǎng)物質(zhì)的分解和重建狀態(tài),在一定的Zn2+濃度下,發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)三個指標綜合起來可以反映植物在芽期的耐性。發(fā)芽指數(shù)越大說明發(fā)芽的速度越快,長勢也就越好。發(fā)芽指數(shù)是反應種子品質(zhì)好壞的一個重要參數(shù)。
從表1可以看出,不同濃度的Zn2+溶液處理對菜用大黃的發(fā)芽指數(shù)影響比較大。當Zn2+濃度為100mg/L時,菜用大黃的發(fā)芽指數(shù)最高,當Zn2+濃度為200mg/L時,種子的發(fā)芽指數(shù)低于對照,并且隨著濃度的逐漸增大,發(fā)芽指數(shù)也在逐漸變小,菜用大黃種子受到的抑制越大。再次表明低濃度的Zn2+有利于種子的萌發(fā),高濃度的Zn2+對種子的萌發(fā)起到明顯的抑制作用。
表1 鋅濃度對菜用大黃萌發(fā)情況以及根長和莖長的影響
Zn2+濃度 發(fā)芽率 發(fā)芽勢 發(fā)芽指數(shù) 根長 莖長(mg/L)(%)(%)(cm)(cm)0(CK)78 70 7.34 4.46 2.29 20 74 71 7.67 4.32 2.27 50 81 77 7.86 4.04 2.14 100 86 82 7.91 3.98 1.89 150 80 72 7.46 3.56 1.74 200 73 65 6.18 2.69 1.56 300 68 64 5.43 1.80 1.62 500 67 64 4.89 1.12 1.45 700 64 60 4.21 0.56 1.26 2.2 Zn2+濃度對菜用大黃幼苗根長和莖長的影響
Zn2+作為植物正常生命活動必需的營養(yǎng)元素,適量的Zn2+對植物的生長是
2+必不可少的。由表1可以看出,隨著Zn濃度的增加,各處理幼苗的根長和莖2+長在逐漸縮短。比如在0mg/L的Zn溶液處理下,根長達4.46cm,莖長達
2+2.29cm,但是在700mg/L的Zn溶液處理下,根長只有0.56cm,莖長也只有2+1.26cm,在高濃度的條件下幾乎看不到正常生長的幼根和幼芽。在Zn濃度低2+于100mg/L時根長雖有縮短,但縮短沒那么明顯,當Zn濃度超過100mg/L2+時,根長縮短加劇。這說明重金屬Zn對菜用大黃的根長和莖長都具有抑制作2+2+用,且隨著Zn濃度的增加,對根長的抑制作用就越明顯。重金屬Zn不僅影響種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢,還影響到菜用大黃幼苗的生長,降低了菜用大黃的幼苗的根長和莖長,這說明Zn對菜用大黃幼苗的生長具有抑制作用。
2+2.3 Zn2濃度對菜用大黃電解質(zhì)外滲率的影響
植物細胞膜是植物細胞與外界環(huán)境進行物質(zhì)交換和信息傳遞的界面和屏障,它是選擇透過性膜。生物膜系統(tǒng)的穩(wěn)定性是細胞進行正常生理功能的基礎,也是植物遭受傷害的關鍵部位。所以可以用細胞膜的透性來評價植物對重金屬污染物的反應,細胞膜的透性是反應植物合成代謝與抗逆性的主要的生理指標,它可以通過檢測其電導率的變化來反應[14]。從表2中可以看出,Zn濃
2+
2+度不同對菜用大黃種子測出的電導率也不一樣,這說明Zn濃度對菜用大黃種2+子的細胞膜透性有影響。當Zn濃度低于100mg/L時,電導率都低于對照+(0mg/L),且隨著Zn濃度的增加,種子的電導率也在逐漸下降。在100mg/L
2+
2+時,電導率最低。當Zn濃度繼續(xù)增大時,電導率也逐漸增大,超過200mg/L時,高于對照(0mg/L)。
表2 鋅濃度對菜用大黃電導率的影響
Zn2+濃度(mg/L)電導率(Us/cm)0(CK)36.33 c BC 20 35.67 cd C 50 34.67 d CD 100 32.67 e D 150 34.33 d CD 200 36.33 c BC 300 38.00 b AB 500 39.67 a A 700 39.33 ab A 注:同列數(shù)字后的小寫字母分別表示在0.05水平上的差異顯著性,大寫字母分別表示0.01水平上的差異顯著性。
2.4 Zn2濃度對菜用大黃幼苗葉綠素濃度的影響
葉綠素是植物進行光合作用的主要色素,其含量的高低直接影響植物的光合作用。由表3可以看出,當菜用大黃的幼苗生長到第14天時,隨著Zn2+濃度 +的增加,葉綠素a、葉綠素b和葉綠素(a+b)的含量均呈現(xiàn)出降低的趨勢,且下降明顯。
表3 鋅濃度對菜用大黃幼苗葉綠素含量的影響
Zn2+濃度 葉綠素a 葉綠素b 葉綠素a+b(mg/L)Chla(mg/g)Chlb(mg/g)Chla+b(mg/g)0(CK)0.7783 0.2504 1.0287 20 0.7586 0.2401 0.9987 50 0.7390 0.2298 0.9688 100 0.7292 0.2311 0.9603 150 0.6896 0.1911 0.8807 200 0.6692 0.1856 0.8548 300 0.6050 0.1627 0.7677 500 0.6043 0.1515 0.7558 700 0.6101 0.1420 0.7521 3 小結(jié)與討論
3.1 小結(jié)
本試驗采用培養(yǎng)皿紙上發(fā)芽的方式,對不同濃度Zn2+溶液處理下菜用大黃的種子萌發(fā)特性及對幼苗生長的影響進行了研究。結(jié)果表明,Zn2+溶液處理對菜用大黃種子的萌發(fā)具有低濃度促進作用和高濃度抑制的作用。在本實驗中,與對照相比,當Zn2+濃度低于150mg/L時,對菜用大黃種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)都具有不同程度的促進作用。在100mg/L時,發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)都達到最高。當Zn2+濃度大于150mg/L時,與對照相比,Zn2+濃度越高菜用大黃種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)就越低,可能是高濃度的鋅破壞了菜用大黃種子的內(nèi)部結(jié)構及酶的活性,從而抑制了種子的萌發(fā)。種子的電導率在Zn2+濃度為100mg/L時最低,高于150mg/L時逐漸升高。測定用不同濃度的Zn2+溶液處理后的菜用大黃種子的電解質(zhì)外滲率,可以反應出重金屬Zn2+對種子的膜系統(tǒng)的影響。電導率越低,種子細胞內(nèi)物質(zhì)滲出越少,細胞膜的完整性也就越高。本實驗進一步說明了低濃度的Zn2+能促進種子的萌發(fā)。
根長、莖長和葉綠素的含量可以反應出用不同濃度的Zn2+溶液處理后的菜用大黃的幼苗的生長情況。在本實驗中,與對照相比,隨著Zn2+濃度的增加,幼苗的根長、莖長和葉綠素的含量在不斷減少,這說明Zn2+不僅能抑制菜用大黃的幼根和幼芽的生長,而且對葉綠色的合成也有抑制作用。3.2 討論 Zn2+是植物生長的必須營養(yǎng)元素,適量的Zn2+對許多關鍵酶的合成、蛋白質(zhì)結(jié)構的穩(wěn)定起著非常重要的作用,Zn2+還對氧化脅迫造成的膜脂過氧化、質(zhì)膜損害、膜滲透性的改變具有穩(wěn)定和保護效應[15]。有研究表明,重金屬對植物種子的萌發(fā)及幼苗的影響存在一個較低濃度下的刺激效應和較高濃度下的抑制效應[16]。本文針對Zn2+脅迫下菜用大黃種子的萌發(fā)進行了進一步研究,從試驗結(jié)果來看,本次試驗結(jié)果與前人研究基本一致。種子在萌發(fā)過程中,一定濃度的Zn對種子本身的膜系統(tǒng)有修補能力,可以使破損的膜系統(tǒng)得到修復,能夠2+有效地減少萌發(fā)種子細胞內(nèi)物質(zhì)的滲出,使種子在萌發(fā)期間的滲透率有所下降,使低濃度的Zn處理后種子的電導率低于對照,膜的完整性也得到了修2+復。當Zn的濃度過高時,種子的細胞膜選擇透性遭到了破壞,種子的電導率2+隨著鋅濃度的升高而升高,種子的電解質(zhì)外滲率也隨之增大。通過對不同濃度Zn2+溶液處理后菜用大黃種子的電導率的測定,進一步說明了適量的Zn2+能夠促進菜用大黃種子的萌發(fā)。結(jié)果還表明鋅可以抑制菜用大黃幼苗的根長、芽長和葉綠素的含量。Stobart等認為,葉綠素含量降低的原因是重金屬抑制葉綠素酸脂還原酶的活性和影響了氨基-r-戊酮酸的合成,而這兩者對于葉綠素的合成是必須的,所以導致葉綠素的含量降低[17],至于鋅在哪個濃度能夠使幼苗的根長、莖長、葉綠素的含量和種子的萌發(fā)情況以及其它生理指標能夠更好的協(xié)調(diào),還有待進一步研究。
參考文獻
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畢業(yè)在即,畢業(yè)設計是我們大學生活最后一項工作,也是最重要的。在論文完成之際,衷心感謝我的指導老師姜立娜老師在我畢業(yè)論文選題、論證、實施和撰寫過程中給予的精心指導和幫助。感謝在試驗過程中,我的同學郭巧燕給我的幫助。在此,對以上給予我大力支持和幫助的老師和同學表示最衷心的感謝!同時,誠摯的感謝院系領導及各位老師大學五年來的關心支持和教導!
第三篇:園藝專業(yè)畢業(yè)生優(yōu)秀論文3
有核品種與無核品種葡萄花粉生活力及貯藏條件的對比研究
作者 魯曉曉 指導教師 李桂榮
(河南科技學院園藝園林學院,河南 新鄉(xiāng) 453003)
摘要: 該試驗以有核品種葡萄和無核品種葡萄的新鮮干燥花粉為研究材料,每個品種分別貯藏在常溫、5℃、0℃、-18℃、-40℃條件下,采用蔗糖200g/L+硼酸50mg/L+瓊脂8g/L的同一固體培養(yǎng)基作為營養(yǎng)基質(zhì),進行有核品種與無核品種葡萄花粉的離體萌發(fā)培養(yǎng)對比研究。結(jié)果表明:不同溫度下貯藏的花粉生活力隨著貯藏時間的延長均呈下降的趨勢,-18℃、-40℃貯藏下的花粉生活力下降最為緩慢,常溫貯藏條件下花粉生活力下降最為迅速。剛開始貯藏時不同品種之間的花粉生活力存在明顯的差異,并且有核品種葡萄的花粉生活力高于無核品種葡萄。
關鍵詞:有核葡萄;無核葡萄;花粉生活力;貯藏條件
Comparison of nuclear and seedless grape varieties of pollen viability
and storage conditions Author:LU Xiao-xiao
Tutor :LI Gui-rong
(Henan University of science and technology school of horticulture gardens, Xinxiang
Henan 453003)Abstract: The experiment with fresh dry pollen nuclear grape varieties and varieties as study material, each species separately stored at room temperature, 5 ℃, 0 ℃,-18 ℃,-40 ℃, using the same solid sucrose 50mg/L+ agar 200g/L boric acid 8g/L medium as nutrient medium with nuclear variety and seedless grape varieties pollen germination in vitro comparative study.Results indicated that the stored pollen viability over time at different temperatures to extend the storage time of the downward trend, 0-18℃ and-40℃ storage fell most pollen viability of slow room temperature under storage conditions declined most rapidly pollen viability.There are obvious differences in pollen viability between different cultivars started during storage, and nuclear grape pollen viability than seedless grape varieties with high pollen viability.Keywords: nuclear grape, seedless grape, pollen viability, storage conditions
1.引言
葡萄為葡萄科(Vitaceae)葡萄屬(Vitis)植物,無核葡萄育種是目前世界各國葡萄育種工作的重要目標,隨著人們生活水平的不斷提高無核葡萄在鮮食和制干上顯示出愈來愈重要的作用,在國際市場中銷售量最大最受人們歡迎的鮮食和制干品種主要是無核葡萄品種。目前,選育優(yōu)質(zhì)無核葡萄新品種已成為國內(nèi)外,特別是發(fā)達國家葡萄育種的重要目標之一。花粉在有性繁殖中傳遞著雄性親本的遺傳信息,早期采集、貯存花粉以及測定花粉生活力是進行人工雜交授粉的基礎。花粉的壽命很短,但在特殊的條件下保存,可在較長時間內(nèi)保持其生活力。不同植物花粉在自然條件下的壽命、貯藏條件及生活力的測定存在差異。其中花粉萌發(fā)率是衡量花粉生活力大小的指標之一,也是最重要的指標
[2,3][1]。
在我國傳統(tǒng)的無核葡萄育種,大多以有核品種為母本與無核品種雜交,而這也是目前我國育種工作者應用最多的一種無核葡萄育種方法,而在雜交育種這一無核葡萄選育的重要途徑中,花粉生活力是確保雜交育種成功的一個重要條件。由于不同葡萄品種的花期經(jīng)常不一致, 在培育無核葡萄雜交育種過程中, 常涉及花粉采集和花粉貯藏問題。有關花粉生活力的研究較多[5-10]
[4],但葡萄花粉生活力的測定及貯藏條件研究還不是太多
[11-13],尤其是關于有核與無核品種葡萄花粉生活力的對比研究。因此展開無核品種和有核品種葡萄花粉生活力及貯藏條件的對比研究具有重要意義。并且該試驗研究了常規(guī)條件下不同貯藏溫度和時間對不同品種葡萄花粉生活力的影響及不同品種花粉生活力的對比,以期為葡萄花粉的短期貯藏及雜交育種提供理論依據(jù)。2.材料與方法 2.1試驗材料
試驗材料均于2013年5月13日取自于中國農(nóng)業(yè)科院鄭州果樹研究所,共10個品種:有核品種為芳香拉查基、澤玉、京秀、鄭州早紅、瑞比爾;無核品種為希姆勞德、京紫晶、8611、8612。在葡萄的初花期選擇生長健壯的植株,采下發(fā)育正常的花序,分別裝入保鮮袋,再放入裝有冰袋的保溫箱內(nèi)帶回實驗室。2.2花粉的采集
將帶回實驗室的花序,除去頂部發(fā)育較差的花蕾后,取出花藥,放在墊有硫酸紙的帶蓋培養(yǎng)皿中,及時剔除其中的雜質(zhì)和破裂的花藥,然后將培養(yǎng)皿放置在陰涼干燥處自然陰干,室溫條件下,經(jīng)一定時間后花粉開裂,待花粉完全散出充分干燥后倒入研缽中研磨,經(jīng)過絲底小篩過濾后,收集備用。2.3花粉的貯藏條件
將收集好的每個品種的花粉均分為5等份,分別裝入離心管中,將管口用密封條密封,再分別放入裝有氯化鈣的干燥器中密封,再將分裝好的不同品種的花粉,標記后分別置于常溫、5℃、0℃、-18℃、-40℃條件下遮光貯藏。2.4試驗方法
采用離體萌發(fā)法測定花粉萌發(fā)率。每個處理都按蔗糖200g/L+硼酸50mg/L+瓊脂8g/L濃度比例的固體培養(yǎng)基作為營養(yǎng)基質(zhì),進行不同品種、不同貯藏條件下葡萄花粉的離體萌發(fā)培養(yǎng)以測定其花粉的生活力。每個品種貯藏前測定其新鮮干燥花粉的萌發(fā)率,貯藏后每隔5d取出貯藏的花粉進行生活力的測定,以花粉萌發(fā)率作為花粉生活力的指標。2.4.1 花粉的培養(yǎng)
按上述配方配置培養(yǎng)基,將PH調(diào)至6.0~6.5,將配好的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,待培養(yǎng)基冷卻凝固后用棉簽蘸取少量花粉,均勻的撒播在培養(yǎng)基表面,并在顯微鏡下觀察是否撒播均勻,若花粉分布均勻,再將墊有濕潤濾紙的培養(yǎng)皿蓋蓋在其上,最后貼上標簽寫明品種、處理、播種時間,置于25℃條件下的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)避光培養(yǎng)。每個處理設置3個重復。2.4.2 觀察及記錄結(jié)果
培養(yǎng)8h后,在10×20倍光學顯微鏡下觀察花粉萌發(fā)情況,統(tǒng)計萌發(fā)率,每個處理隨機觀察3個視野,每個視野不少于50粒花粉,記錄每個視野的花粉萌發(fā)粒數(shù)和花粉總粒數(shù),并拍照,之后計算花粉萌發(fā)率,取均值。花粉萌發(fā)標準:以花粉管長度超過花粉粒直徑的1/2為萌發(fā)花粉。花粉萌發(fā)率的計算公式:
花粉萌發(fā)率(%)=視野中萌發(fā)花粉粒數(shù)/視野中花粉總粒數(shù)×100%。試驗結(jié)果數(shù)據(jù)處理采用Excel軟件進行作圖與分析。3.結(jié)果與分析
3.1 有核品種與無核品種葡萄花粉生活力的比較
圖1 有核品種與無核品種葡萄新鮮花粉生活力的比較
Fig.1 Comparison of nuclear and seedless grape varieties before storage of fresh pollen viability
圖2 有核品種與無核品種葡萄貯藏后花粉生活力的比較
Fig.2 Comparison of nuclear and Seedless grape of pollen viability after storage 如圖1所示,貯藏前有核品種葡萄的花粉平均萌發(fā)率分別為鄭州早紅50.41%、芳香拉查基46.22%、瑞比爾43.04%、澤玉40.35%、京秀24.13%;無核品種葡萄的花粉平均萌發(fā)率分別為希姆勞德26.51%、京紫晶31.09%,其中立川無核、8611、8612三個無核品種有花粉但其花粉萌發(fā)率為0,顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)立川無核花粉形態(tài)為干癟,形狀皺縮不規(guī)則,8611和8612兩個無核品種的花粉則是圓形飽滿,發(fā)育正常的,屬于花粉敗育。貯藏前各品種的花粉萌發(fā)順序為:鄭州早紅>芳香拉查基>瑞比爾>澤玉>京紫晶>希姆勞德>京秀>立川無核、8611、8612。
如圖2所示,在貯藏5d、10d、15d、20d、25d后,不同貯藏溫度下各品種的花粉萌發(fā)率的情況,總的來說其花粉萌發(fā)率都是隨著貯藏時間的增加而逐漸的下降,但不同品種的花粉其花粉萌發(fā)率下降的幅度而有所差異。同樣的貯藏時間、貯藏溫度下有核品種葡萄的耐貯藏能力要比無核品種的好些。因此,從整個花粉萌發(fā)情況看來可,有核品種葡萄的花粉萌發(fā)率要比無核品種的萌發(fā)率高,即其花粉的生活力要高于無核品種葡萄。
3.2 不同貯藏溫度對葡萄的花粉生活力的影響 3.2.1 不同貯藏溫度對有核葡萄品種花粉生活力的影響
圖3不同貯藏溫度下有核葡萄品種的花粉萌發(fā)率
Fig.3 The germination rate of nuclear grape cultivars under different storage temperature of pollen 從圖3可知,有核品種葡萄剛開始貯藏時,每個品種的花粉萌發(fā)率都相對較高,但隨著貯藏時間的延長,其花粉萌發(fā)率均呈現(xiàn)下降趨勢。常溫條件下貯藏時,隨著貯藏時間的延長其花粉生活力下降的幅度較大,在貯藏10d后每個品種的花粉萌發(fā)率都下降了近一半。甚至在貯藏25d后京秀、鄭州早紅、瑞比爾三個品種花粉的平均萌發(fā)率下降到10%以下,分別為7.64%、9.41%、7.38%,由此可見,常溫條件下貯藏有核品種花粉效果較差。但如若短時間內(nèi)進行花粉貯藏,其效果還是比較理想的,而且比較方便。相比較而言,5℃、0℃條件下貯藏的花粉隨著貯藏時間的增加,其生活力下降的速度相對較緩慢些,貯藏25d后其花粉平均萌發(fā)率可以保持在14.54%~25.12%左右。
當有核品種葡萄花粉貯藏在-18℃、-40℃的低溫條件下時,隨著貯藏時間的增加,各品種花粉的萌發(fā)率呈緩慢下降趨勢,其下降幅度相對常溫、5℃、0℃貯藏條件下的花粉萌發(fā)率而言較小,且在貯藏25d以后其花粉的萌發(fā)率多數(shù)都保持在20%以上,如芳香拉查基可保持在29.97%,瑞比爾可保持在29.88%。由此可見,在此低溫條件下,其貯藏效果都比較好,適于長時間貯藏花粉。
3.2.2不同貯藏溫度對無核葡萄品種花粉生活力的影響
圖4不同貯藏溫度下無核品種葡萄的花粉萌發(fā)率
Fig.4 The germination rate of seedless grape cultivar pollen under different storage temperature
供試的5個無核品種葡萄中,立川無核、8611、8612三個無核品種有花粉但其花粉萌發(fā)率為0,顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)立川無核的花粉形態(tài)為干癟,形狀皺縮不規(guī)則,8611和8612兩個無核品種的花粉則是圓形飽滿,發(fā)育正常的但無花粉萌發(fā),屬于花粉敗育。希姆勞德和京紫晶2個無核品種葡萄,在不同貯藏溫度下,隨著貯藏時間的延長,其花粉萌發(fā)率呈下降趨勢(圖4)。從圖4可知,貯藏前希姆勞德和京紫晶2個無核品種的新鮮花粉萌發(fā)率分別為26.51%、31.09%,但其在常溫條件下貯藏15d后的花粉的萌發(fā)率均低于5%,京紫晶的花粉生活力甚至已接近0;5℃、0℃貯藏溫度下其花粉萌發(fā)率下降的幅度較常溫下緩慢,-18℃、-40℃貯藏條件下的花粉萌發(fā)率下降的速度最為緩慢。由此可見,與有核品種葡萄貯藏溫度隨貯藏時間的變化很相似,-18℃、-40℃低溫條件下貯藏無核品種葡萄花粉效果較好,5℃、0℃貯藏條件下效果次之,常溫貯藏花粉效果較差。4.小結(jié)與討論 4.1 小結(jié)
試驗結(jié)果表明,無論是有核品種葡萄還是無核品種葡萄,不同溫度下貯藏的花粉生活力隨著貯藏時間的延長均呈下降的趨勢,-18℃、-40℃貯藏下的花粉生活力下降最為緩慢,5℃、0℃貯藏條件下其次,常溫貯藏條件下花粉生活力下降最為迅速。另外,有核品種與無核品種葡萄花粉生活力的對比中可以得出,不僅貯藏后不同品種之間的花粉生活力存在明顯的差異,貯藏前不同品種之間的新鮮花粉生活力也存在較大的差異,貯藏前有核品種葡萄的花粉平均萌發(fā)率分別為鄭州早紅50.41%、芳香拉查基46.22%、瑞比爾43.04%、澤玉40.35%、京秀24.13%;無核品種葡萄的花粉平均萌發(fā)率分別為希姆勞德26.51%、京紫晶31.09%,其中立川無核、8611、8612三個無核品種有花粉但其花粉萌發(fā)率為0。總的來說,有核品種葡萄的花粉生活力要高于無核品種葡萄。另外,也有花粉萌發(fā)率隨時間變化卻有短時間升高或者不變的趨勢,如有核品種澤玉和無核品種京紫晶,在-18℃貯藏條件下,澤玉在貯藏20d時其花粉生活力高于15d,京紫晶則是在這兩個時間段內(nèi)的花粉生活力呈持平狀態(tài),這可能是因為每次測花粉萌發(fā)率時,將密封的瓶蓋打開,使其與空氣接觸,改變了瓶內(nèi)的濕度和氧氣濃度,增強了花粉的代謝,使其活力短時間內(nèi)增加;也可能是因為冷熱交替,刺激了花粉 的萌發(fā);還有可能是品種的遺傳基因所決定的,具體原因有待進一步研究。
4.2 討論
關于花粉生活力快速降低的原因有多種學說,有人認為是花粉進行非常旺盛的物質(zhì)代謝所致;有人認為與干燥條件有關;也有人認為與蛋白質(zhì)代謝有關。花粉老化的相同點是呼吸基質(zhì)耗盡、酶失活、干燥損傷及代謝產(chǎn)物阻塞
[14]
。花粉保持生活力的長短,一方面是由遺傳因素所決定的,另一方面也受環(huán)境因素的影響。不同品種葡萄其花粉生活力隨貯藏時間的延長下降的速度也不相同。花粉貯藏時,隨著貯藏時間的增加,花粉內(nèi)貯藏物質(zhì)的消耗增多,酶活性下降,水分逐步流失,花粉的生活力會逐漸下降
[15]
[2]。
花粉貯藏溫度和濕度是影響花粉貯藏時間長短的主要因素。花粉在高溫、高濕的情況下,酶的水解活性增強,代謝作用亦隨之加強,并且進行著強烈的呼吸作用,消耗大量養(yǎng)分,且易被微生物感染發(fā)霉變質(zhì)而喪失萌發(fā)率。花粉貯藏過程中,保持較低的環(huán)境濕度,可以使其代謝受到抑制,酶活性減弱,呼吸作用降低,使花粉活力維持較長時間,貯藏花粉的壽命往往與環(huán)境相對濕度呈負相關
[16]
[7]
。本試驗研究表明,-18℃、-40℃葡萄干燥花粉的貯藏效果最好,隨著貯藏時間的延長,花粉生活力逐漸降低,主要原因是花粉內(nèi)養(yǎng)分逐漸消耗,酶活性逐漸降低,;在常溫條件下花粉生活力下降最為迅速,主要原因是貯藏溫度較高,花粉內(nèi)酶活性較強,代謝作用加快,過度消耗花粉內(nèi)貯藏的養(yǎng)分;而5℃、0℃條件就處于二者之間,是短期貯藏最為理想便捷的貯藏方式。
供試10個葡萄品種中,雖得出有核品種葡萄的花粉生活力要高于無核品種葡萄,但所測得的新鮮花粉萌發(fā)率都不是太高,并且立川無核、8611、8612三個無核品種有花粉但其花粉萌發(fā)率為零,顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)立川無核花粉形態(tài)為干癟,形狀皺縮不規(guī)則,8611和8612兩個無核品種的花粉則是圓形飽滿,發(fā)育正常的,屬于花粉敗育,具體原因還有待研究。
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第四篇:園藝專業(yè)畢業(yè)生自我介紹
我叫XXX,一個愛笑、開朗、樂觀、積極向上的女孩,通過高職三年的洗禮,長成了一個成熟的畢業(yè)生,在校期間我努力掌握了有關園藝方面的知識,例如:植物識別、組織培養(yǎng)、園林建筑材料、觀賞蔬菜培養(yǎng)、測量學等,還有一些相關的電腦軟件,如CAD、pS等,并且通過了計算機一級考試,獲得兩次三等獎學金,還考取了園藝有關證書,如綠化工、插花工。
我應變能力強,能夠在不同的文化背景下出色的工作,是一個反應快,有強烈的進取心,很很快適應新單位的工作。
第五篇:園藝技術專業(yè)畢業(yè)生個人簡歷
姓 名
張吾
性 別
男
民 族
漢
籍 貫
江蘇泰興
出生年月
1991年9月
政治面貌
預備黨員
身 高
170cm
體 重
180
身體狀況
健康
專 業(yè)
園藝技術
學 歷
大專
學習成績
優(yōu)秀
英語水平
通過了英語三級b考試
計算機水平
1.通過計算機一級考試成績:優(yōu)秀
2.能熟練的運用office軟件,并且對于cad軟件也能進行常規(guī)的操作
3.對于計算機一般的故障也能自主的解決。
教育經(jīng)歷
在大學的3年中,我努力學習并且注意鍛煉自己的能力。我拿到了學校一些獎學金和證書。
大一上學期:三等獎學金優(yōu)秀班干部
大一下學期:三等獎學金國家勵志獎學金
同時還獲得:“生如宏歌,魅力揚帆”解說比賽一等獎
“大愛無聲”演講比賽二等獎
商學院“征文比賽”三等獎
“墨影留真,歌頌校園”優(yōu)秀獎
主干課程
所有的主干課程平均能達到優(yōu)秀水平
主修的課程有:植物學 cad 植物生理學 花卉栽培 蔬菜栽培
果樹栽培 觀賞樹木 土壤肥料 等等
實習和社會實踐
在學校的教學基地進行過實習,實習成果還算不錯,在實習的過程中我把課上老師講的理論知識轉(zhuǎn)換成實踐經(jīng)驗,使我受益匪淺。期間我還擔任了實習小組的小組長。
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自我介紹: