第一篇：細菌檢驗標本的采集

細菌檢驗標本的采集

1、血液和骨髓標本的采集

（1）、急性腦膜炎、骨髓炎、關節炎、細菌性肺炎和腎盂炎發熱患者，應在抗生素治療或更換前，從不同部位采集血液標本，做2次血液培養（應在抗生素治療前完成），立即送到實驗室。

（2）、疑似心內膜炎患者，急性病例，在抗生素治療或改變前1-2小時，從各個不同部位采血3次做血液培養。

2、腦脊液標本的采集

CSF采集后，置于無菌試管中。15分鐘內運送實驗室，絕不可冷藏。每種檢驗需要最小量：細菌培養≥1ml，真菌≥2ml，抗酸桿菌≥2ml。

3、尿標本的采集

（1）、中段尿采集，清潔外陰及尿道口周圍（女性瓣開大小陰唇，男性翻開包皮沖洗拭干），自然排尿，讓尿流不間停，截留中段尿，置于無菌大口容器或尿運送杯中，不少于1ml。

（2）、滯留尿管集尿，常規是≤2小時送交實驗室。

4、下呼吸道標本的標本處理

告訴病人先用冷開水漱口清洗咽喉，咳出痰液，置于無菌廣口容器中，常規培養≤2小時送交實驗室立即接種。

5、糞便標本的采集

（1）、常規性培養，直接留置糞便標本于清潔、干燥廣口容器中或轉移至Cary-Blair保存運送。

（2）、直腸拭子，無菌拭子插入肛門2-4cm，在肛門括約肌外柔和地旋拭子，可在拭子上明顯見到糞便，插入Cary-Blair系統管運送。患者不能自行采集。

6、眼、耳、鼻、喉標本的收集

（1）、眼結膜標本，預先沾濕拭子，在結膜上滾動采集標本。標本在15分鐘內送達實驗室。

（2）、眼角膜標本采集，在麻醉下，用刮留學在潰瘍或創傷邊緣刮取碎屑，直接接種在培養基平板上培養和涂片。眼部感染所獲取的標本量很少，建議醫師取樣后直接接種于平板上培養和涂片。（3）、口腔咽部標本，先用一個拭子揩去潰瘍或創面淺表分泌物，第二個拭子采集潰瘍邊緣或底部，常規培養≤2小時運送實驗室。

（4）、患有外耳炎患者，需要深部耳拭子，因為淺表拭子可能遺漏鏈球菌引起的蜂窩織炎。

（5）、鼻標本留取，用一根無菌棉拭子，伸進側鼻孔約2.5cm，下鼻黏膜接觸，輕輕地旋轉拭子，蘸取黏膜上分泌物，緩慢抽出。置于運送培養基或將拭子直接送檢。

7、膿液標本的采集

（1）、開放膿腫，用無菌鹽水或70%乙醇擦去表面滲出物，用拭子深入潰瘍基底或邊緣部，采集二個拭子，分別做培養和革蘭染色。

（2）、閉鎖膿腫用注射器抽取，刺入無菌橡皮塞中送檢。

8、生殖系統標本的采集

陰道、子宮頸陷凹、子宮內膜、生殖道創傷、前庭大腺、羊水膜及前列腺等分泌物應由醫師采集，收集于無菌試管內送檢。淋病奈瑟菌檢查時，不論男女尿道及子宮均需用拭子插入尿道及子宮3cm深取樣送檢，要避免受陰道分泌物污染拭子。

9、抗凝血檢驗標本的采集

（1）、血常規（血液分析）標本的采集

清除患者恐懼心理，EDTA-K2專用抗凝管，順暢采靜脈血1ml，立即顛倒混勻8次，及時送檢（＜2小時出結果）。

（2）、凝血試驗（如血凝四項、D-二聚體）

0.109ml/L枸櫞酸鈉與血液1:9比例抗凝，用專用真空采血管，采靜脈血至2ml，立即顛倒混勻8次，及時送檢，＜2小時出結果。采血時盡可能縮短止血帶使用時間，不要用力拍打血管，避免產生氣泡，采血不順暢要重抽。

（3）、血沉（紅細胞沉降率）標本的采集

0.109ml/L枸櫞酸鈉抗凝劑與血液1:4比例抗凝（比例要準確），顛倒混勻8次，及時送檢，采血后＜3小時內測定。

（4）、糖化血紅蛋白標本的采集

EDTA-K2抗凝管，靜脈血2ml，顛倒混勻8次，及時送檢。（5）、血氣分析標本的采集

向病人解釋動脈采血目的和方法，消除其恐懼心理，常規消毒皮膚（直徑5-7cm），注射器抽吸肝素0.5ml濕潤注射器內壁（余液全部棄去），以最快速度抽取鮮紅動脈血液3-5ml，將注射器針頭斜面刺入軟木塞內（隔絕空氣），將標本連同化驗單及時送檢。

（6）、腦利鈉肽（brain natriuretic peptide）

BNP采用EDTA抗凝（建議用塑料材料的樣品試管），抽靜脈血2ml，顛倒混勻8次，立即送檢，4小時出結果或及時分離血漿放-20c可保存兩天。

10、臨床體液常規檢驗標本采集（1）、尿液標本的采集和處理

1）尿標本應避免經血、白帶、精液、糞便等混入。還應注意避免煙灰、手紙等異物混入。

2）、標本留取后，應及時送驗，以免細菌繁殖、細胞溶解等。3）、標本送驗時應注意避光。

4）、尿液常規篩查盡量不要使用防腐劑，在標本收集后2小時之內送檢。5）、標本需防腐時（24小時定量）

①甲醛，每100ml尿加入400g/l甲醛0.5ml，用于管型、細胞檢查。②甲苯，每100ml尿加入甲苯0.5ml，用于尿糖、尿蛋白的防腐。（2）、糞便檢查

1）、一般檢驗留取指頭大小（約5g）新鮮糞便即可，放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內送檢，標本容器最好用內層涂脂的硬紙盒。

2）、檢查蟯蟲卵需要用軟黏透明紙試子，在清晨排便前由肛門四周試取標本，也可用棉試子試取，但均須立即鏡檢。

3）、檢查阿米巴滋養體，應于排便后迅速送檢，立即檢查。冬季需采取保溫措施。4）、一般檢驗不應采取尿壺或便盆中的糞便標本。（3）、腦脊液檢查

標本收集后應立即送檢，不能超過1小時。將CSF分別收集于三個無菌試管（或小瓶）中，每管1-2ml；第一管做細菌培養，必須留于無菌小試管中；第二管做化學或免疫學檢查；第三管做一般性狀檢查和顯微鏡檢查。

（4）、漿膜腔積液檢查

1）、由穿刺取得的標本為防止細胞變性、出現凝塊或細菌破壞溶解等，送檢及檢查必須及時。

2）、為防止凝固，最好加入100g/L乙二胺四乙酸二鈉或二鉀（EDTA鈉鹽或鉀鹽）抗凝，每0.1ml可抗凝6ml漿膜腔積液，及時完成細胞涂片檢查。3）、PH測定應用肝素抗凝專用采樣器。（5）、滑膜液檢查

微生物培養應置于滅菌消毒試管，顯微鏡鏡檢應用肝素抗凝標本，每毫升約用肝素鈉25單位，血液標本應與滑膜液標本在同一時間內收集。收集后立即送檢。

（6）、精液檢查

1）、在3個月內檢查2次至數次，二次之間間隔應＞7天，但不超過3周。2）、采樣前至少禁欲3天，但不超過7天。3）、采樣后1小時內送到檢驗科。

4）、用清潔干燥廣口塑料或玻璃小瓶收集精液，不宜采用避孕套內的精液。5）、應將射精精液全部送驗（冬天注意保溫）。6）、盡可能用手淫法。（7）、前列腺液標本收集

臨床醫師作前列腺按摩術后，采集標本于清潔玻片上，立即送檢，培養標本按細菌標本處理。

（8）、陰道分泌物標本采集

1）、取陰道分泌物、用生理鹽水涂片。

2）、滴蟲檢查，在寒冷天，標本要采取保溫措施，立即送檢（培養標本按細菌檢驗標本處理）。

第二篇：細菌標本采集規范

臨床微生物學標本采取和處理的規范化要求

正確的采取、處理與運送用于細菌培養的標本是臨床細菌檢驗成功的關鍵。標本采取與處理的規范化是準確、及時地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎；而標本采取與處理不當將嚴重影響檢驗結果，給臨床以誤導，延誤對患者的正確治療。為此，我們提出初步的參考意見，并希望在實踐中不斷完善。

一、血液細菌培養標本的采集和處理

臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血液感染的患者，需做血液細菌培養以明確病原。

1.采血時機：在患者發熱期間越早越好，最好在抗菌治療前，以正在發冷發熱時或發冷發熱前半小時為宜。

2.采血次數及間隔：在急性發熱性疾病如腦膜炎、細菌性肺炎，需馬上做抗菌治療；或急性骨髓炎、化膿性關節炎等要緊急手術的患者，應立即從兩臂分別取2份標本。對感染性心內膜炎患者，建議在24h內取血3次，每次間隔不少于30 min；必要時次日再做血培養2次。對發熱原因不明者兩次抽血間隔60 min；必要時于24～48h后再抽血2次。因為1次血培養不足以說明問題，可能會遺漏陽性結果。

3.采血部位：多次采血應在不同部位的血管穿刺以排除皮膚菌叢污染的可能。要避免從血管插管內取血，因插管常被污染，其培養結果不能反映真實情況。在不同部位取血，2次分離出同樣菌種才是確定病原菌的有力證據。

4.采血量：采血量與血培養的檢出率相關，所以采血量一定要足夠。成人一般為10ml，新生兒與嬰幼兒為1～2 ml。

二、下呼吸道分泌物(痰培養)的標本采取和處理

下呼吸道分泌物(痰)的細菌學檢查對病原學診斷起著重要作用，但痰標本的質量往往難以保證，造成病原學診斷和實際引起感染的病原菌脫節，直接影響抗菌藥物的應用、甚至耐藥菌的出現或流行。痰標本的細菌學檢驗地帶網檢查應注意如下幾個問題。

1.標本的采取：自然咳痰：要求患者清晨留取，留取標本前用清水漱口3次，之后用力咳出。咳痰較困難者可用霧化蒸氣吸入以利痰液咳出。幼兒可用手指輕叩胸骨柄上方以誘發咳痰。

2.氣管穿刺法：僅用于昏迷患者，由臨床醫師 進行操作。

3.纖維支氣管鏡抽吸：通常用于在給患者行纖維支氣管鏡檢查時順便抽取。

4.胃液抽取法：多用于可疑患有肺結核的患者在有可能將痰液咽下的情況時采用。

5.標本的運送：標本采集后應立即送檢，以避免雜菌過度生長。

三、尿液細菌培養標本的采集和處理

尿液的細菌培養檢查對于膀胱和腎臟感染的及早發現和病原學診斷很有價值。對于尿道、前列腺以及內、外生殖器炎癥的診斷也有一定價值。

1.標本收集時間：需在應用抗菌藥物之前或停用抗菌藥5 d之后留取尿液標本；尿液在膀胱內應停留6～8h以上，使細菌有足夠時間繁殖。

2.標本收集方法：

(1)清潔排尿法：女患者以手指將陰唇分開，用肥皂水或碘伏清洗外陰，然后以清水沖洗尿道口周圍，擦干并排出前段尿液后，用無菌容器接取中段尿；男患者應翻轉包皮沖洗，用碘伏消毒尿道口；嬰兒消毒其陰部后，將無菌小瓶直接對準尿道口排尿后立即送檢。

(2)膀胱穿刺法：為避免尿道正常菌群的污染，收集尿液最好的方法是膀胱穿刺。尤其做厭氧菌檢查時必須采用膀胱穿刺法。穿刺時膀胱應充盈，皮膚嚴格消毒后用裝有19或20號針頭的注射器在恥檢驗地帶網骨聯合距臍1/3處穿刺。膀胱穿刺的適應癥有：①有尿道感染的臨床癥狀，但中段尿培養細菌數很低，而又難以確定感染源者。②嬰幼兒、新生兒、不能用導管者。③懷疑有厭氧菌感染時。

(3)腎盂尿采集法：若取左右兩側腎盂尿，應請泌尿科醫生采取，左右側的標本要標記明確，以免出現錯誤。

(4)對用封閉式引流裝置的留置導尿患者留取尿液標本培養時，用適當的消毒劑嚴格消毒引流管和導尿管連接處的管壁，用裝有21號針頭的注射器穿刺導尿管壁吸取尿液。不可打開導尿管和引流管連接處收集標本，培養用的尿液標本也不能從引流袋中留取。(5)膀胱鏡檢查、輸尿管插管或逆行腎盂造影時，收集的尿液可用來做細菌培養。

(6)做病毒學檢測時用容器收集清潔的標本即可，不需特殊方法收集。標本中加入抗生素可抑制細菌的過度生長，且標本需冷藏。

2.標本的運送和保存：用無菌帶螺帽的容器盛標本，標本應在1 h之內送檢，超過2 h者應重送，否則易致假陽性結果。

四、糞便標本微生物學檢查的質量要求

1.標本采集：糞便標本應在發病早期并且盡量在用抗生素治療前采集，直接用棉拭子，也可用直腸拭子，置小瓶中送檢。

2.顯微鏡檢查：糞便直接涂片革蘭染色，可作為艱難梭菌、弧菌、彎曲菌、葡萄球菌、白色念珠菌等初步篩查，鹽水滴片用作腸道寄生蟲檢查。

3.標本保存和運送：標本置密封好的小瓶中，記錄姓名、日期、標本號、及時送檢，一般不長于2小時。

五、生殖道標本的采集和處理 1.男性標本：

(1)如疑為急性淋病奈瑟菌或其他化膿性細菌感染應在清洗龜頭部后，以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒劑消毒后，擠出分泌物立即以無菌棉拭子采取，立即送檢，或以專用的細拭子插入尿道口1～2cm，旋轉采取。

(2)如疑為前列腺炎、精囊炎或慢性淋病奈瑟菌感染應由醫師按摩前列腺，以無菌手續自尿道口采取前列腺液送檢。

2.女性標本：

(1)成年婦女自宮頸采取標本，應在擴陰器的支持下，選取有炎癥或分泌物部位，先以無菌棉拭子拭去表淺層分泌物，再用另一拭子取分泌物送檢。如做厭氧或真菌培養應另外采取標本。

(2)如未成年幼女疑患性傳播疾病時，不應使用擴陰器，應以無菌拭子在陰道口處采取分泌物送檢。

六、胸腹水、腦脊液標本的采集

均由醫師以無菌手續穿刺取得，必須應用帶蓋的無菌容器，立即送檢。

七、對不合格標本的處理

微生物室對于下列標本收集不符合規定的標本將予拒收，并通知臨床，按標本要求復送：

1.申請單項目與標本不符。

2.申請單姓名、科別、床號與標本的標簽不符。3.標本已有明顯的污染跡象(如開塞)。

4.標本量過少或已明顯干燥。

第三篇：檢驗 標本 采集 手冊

檢驗 標本 采集 手冊

吉林大學第一醫院檢驗科 2005 年 11 月

重要警示語

將每一份標本都看作是無法重新獲得、將每一份標本都看作是無法重新獲得、唯一的標 1 本，必須小心地：采集、保存、轉運。必須小心地：采集、保存、轉運。醫學實驗室都接受 ISO 15189:2003 的認可 CAP 文件分析前程序，ISO/IEC15189 文件定義為：按照時 間順序，從臨床醫生開出醫囑開始，到分析檢驗程序 時終止檢測結果報告發回的步驟，包括：檢驗申請、患者準備、原始樣品采集、運送到實驗室完成分析前 程序的主體: 大部分工作都是醫生、護士、運輸人員、檢驗人 員共同協調，在實驗室檢測以外的空間完成的。分析前質量管理最易出現問題： 臨床反饋不滿意的檢驗結果，60%報告最終可溯源 到標本質量不合要求。可靠的檢驗結果，第一個環節必須依賴于標本 的高質量。要獲得高質量的標本： 臨床醫生：應主動明確地告之患者如何配合好 護理人員和檢驗人員：采集好、檢測好標本 運輸人員：及時快速規范轉運好標本 在實驗室進行檢測、檢驗結果審核、報告數據發回。

一、采集標本前質量保證、對策 2

（一）加強溝通，合理選項 醫生應認真、完整地填寫檢驗申請單，講清每項填寫的意。特別是： 患者服藥史、特殊病理變化、留取標本、送檢標本的時間等。

（二）患者準備，至關重要 醫護人員應了解在標本采集前影響結果的非病理性因素（藥物、飲食、運動、治療、生理變化、生活環境和習性、標本采集時間）正確指導患者，采取切實措 施，規范采集標本前患者的一切行為，保證采集的標本符合疾病的實際情況，留 取合格的標本。應告之患者：試驗名稱、所需標本類型、為什么要檢測、檢測報 告時間、如何獲得結果。

（三）采集前準備： 條碼生成與粘貼 足夠合格的采血人員 標準化的采血程序手冊 合格的采血器材 1 二.標本基本類別血液.全血、血漿、血清 尿液 便 腦脊液 心包、胸腔和腹腔積液 關節積液 羊水 胃及十二指腸液 前列腺液和精液 痰 其他（包括乳汁、淚液、房水、唾液、膿液和各種分泌物等）各種穿刺物 3 [血液標本的采集] 一.血液標本基本要求 保持標本完整性：控制各種干擾因素 保持標本新鮮：最好的尺度是時間 拒絕不合格血標本：高脂肪、溶血、凝固、二.標本采集的時間

（一）隨機和急診標本 隨機和急診標本是指無時間限定或無法規定時而必須采集的血和尿標本，一 般無法讓患者進行準備。此類標本主要是門診、急診和搶救病人必須做的一些檢 查標本，或在體內代謝相對較穩定的檢查物質，或受體內外干擾較小的檢查物質。凡此類標本在送檢時應加以注明，評價檢驗結果時應注意晝夜節律影響。便于分 析檢查結果時參考。

（二）空腹標本 空腹標本一般指進食 8h 后（但不能超過 12h,禁食時間過長可引起部分指標 異常；如補體 C3、轉鐵蛋白等。）采集的血和尿標本，住院病人多在清晨，此類 標本常用于臨床生化定量檢查。因為標本是在空腹和安靜時采集的，所以受飲食 質、量以及日間生活、生理活動的影響較小。對病人來講，若多次檢查同一項目，也便于比較、對照。測定血肌酑時還應禁肉食 3 天，且不能飲咖啡、茶等。乳糜 血患者檢測血脂應素食 3 天后。

（三）指定時間標本 指定時間標本多屬功能試驗采集的各種標本，因試驗目的不同，采集標本的 時間各有不同，必須按試驗要求采集，如葡萄糖耐量試驗等。三.血液標本檢驗結果的干擾因素

（一）脂血 血液中脂蛋白成分的增加常會導致血清、血漿渾濁或奶酪狀，通常稱之為脂 血。血清或血漿渾濁本身具有一定的臨床意義，實驗室報告這一結果，同時血清 渾濁可導致許多指標出現假性升高（如總蛋白）。另處，由于指質可以置換水，經常導致血 K、Na 的的濃度在電極法測定時比火焰光度計法高。脂蛋白可以結 合親脂成分，降低與抗體的結合，從而干擾免疫檢測結果。4

（二）溶血 溶血的標本可以給測定值帶來很大的影響，標本溶血后血細胞內含量高的物 質進入到血清可造成結果假性升高，同時溶血可干擾測定中的反應過程及比色，常會導致許多被測指標的濃度假性升高。

（三）黃疸 由于血清總膽紅素含量太高干擾許多指標的測定結果。

（四）某些藥物的影響 某些藥物對測定結果的影響

是不容忽視的。藥物的影響主要有（1）藥物的 代謝產物對某些試驗方法的物理或化學干擾；藥物增加一些蛋白質的結合水平，從而影響這些物質的存在方式；藥物自身與蛋白質結合。總之，正確全面了解藥 物對測定結果的影響對檢驗醫師和臨床醫師都是十分必要的，這對正確解釋檢驗 結果有幫助的。

（五）巨酶 免疫球蛋白與酶的復合物被稱之為巨酶，幾存在于所有的診斷酶中，這些結 合可以提高酶的半壽期，從而導致酶的活性升高。最明顯的例子就是 CK1 及 CK2，CK1 是 CK-BB 與免疫球蛋白的復合物，CK2 是線粒體 CK 的多聚物，巨 巨 這兩種類型的巨 CK 均可使 CK-MB 活性上升。另一個例子是巨淀粉酶，它的顯 著特征是使血中淀粉酶活性升高，而尿中淀粉酶則正常。

四、靜脈采集基本要求

（一）患者體位 住院患者臥位。從臥位到直立位：則血漿量減少 12%。大多數細胞成分及大 分子物質有 5%-15%升高。不應在輸液側采血：如不可避免，必須注明。否則一 切后果采血者負責。試管準備：按檢驗條碼要求準確備齊各種試管而不能混用

（二）血管選擇 應選用較大的血管。血管小：采血時易發生塌陷，引起凝血。不能采到足 夠的血量。

（三）注射器 針頭外徑 1mm。5 針頭外徑＞1mm 可引起創傷，導致血管碎片入血，促發凝血。針頭外徑 ＜0.7mm 血液采集時間延長，針頭內壓力剃度可導致溶血和血小板激活。消毒部位：穿刺處所用消毒液已干

（四）止血帶 壓脈帶控制在 1 min 內。一旦血液入針筒，就應去除。病人握拳：不能一握 一放。抽血過程：應緩慢，不宜過快，將血液沿管壁徐徐注入標本容器，以免產生 大量泡沫或溶血。保證血量：按條碼要求選擇采血容器顏色。避免抽血不當或血量不足。采血容器的顏色、用途和采血量 頭蓋顏色 紫色 藍色 黑色 綠色 紅色 黃色 添加劑 EDTA-K2 枸櫞酸鈉 枸櫞酸鈉 肝素 分離膠促凝 分離膠促凝 用途 采血量（ml）2.0 2.7 1.8 2.0 4.0 4.0 血常規、HLA-B27、心肌損傷標志物 凝血常規、等凝血試驗 血沉 血流變學、D-D、FDP 生化檢驗 免疫檢驗

（五）采集多種血液標本的次序： NCCLS 推薦 1.多種血液標本時，采血次序為：血培養管、普通血清管、枸櫞酸鈉管、凝膠分離管/普通血清試管、肝素管/肝素凝膠分離管、EDTA 管、葡萄糖 檢測管。2.同一患者采集多種試管，采血次序：EDTA 管、其他試管、凝血標本。3.試管混勻：抗凝血必須及時、充分、輕輕顛倒混勻血液和抗凝劑，至少 5 次以上。避免采血損傷和用力轉入容器。

（六）抗凝血量

1、血液比例過高——由于抗凝劑相對不足，血漿中出現微血凝塊。

2、血液比例過低——抗凝劑相對過剩，對很多檢驗會造成嚴重影響。

（七）記錄標本信息：標本管上（條碼）注明姓名、科別、床號等相關信息。6

（八）標明采血時間 從采血和離心之間的延誤可導致試驗結果的質量，因此，標明采血時間很重 要。

（九）生物安全 所有采集標本的器皿均應加塞密閉

（十）標本運輸和儲存 采血完成后，時間耽擱越少，檢驗結果的可靠性就越高。1.標本運輸 溫度：在運輸到檢驗科前，標本必須置于室溫下，標本轉運必須符合儲存 條件。ICSH建議：在室溫（18～25℃）下，4h完成檢測分離血漿和血清：血 細胞與血清或血漿接觸＞2h： 血漿或血清將濃縮、分析物被破壞。冷凝集試驗、血氨、凝血項目檢測立即送檢。同一病人同時有數管血標本送檢，應標明采血先后順序，以便結果不一致 時可進行溯源運輸必須平穩。泡沫可使蛋白質變性，血小板激活。試管置于專用試管架和有合適溫度的容器轉運。2.儲存條件： 如不能及時檢查，應放在室溫、－4℃、－20℃、－80℃冰箱中保存。

（十一）避免標本溶血： 是保證標本質量的重要環節。應將溶血標本棄置并記錄，重新采血。標本溶血常見原因：采血不熟練、劣質采血器和試管、注射器血急速注入 試管、試管混勻用力過猛、從已有血腫的靜脈采血、采血量不足、穿刺處所用 消毒液未干、注射器和針頭連接不緊采血時空氣進入產生泡。肉眼未見溶血，但乳酸脫氫酶、血紅素、轉氨酶或鉀等值異常增高時，應 警惕是否發生了非顯性溶血。（十

二）血液濃縮原因： 使用壓脈帶時間過長 進針處按摩、擠壓或摸索尋找 長期靜脈治療 7 硬化或阻塞的靜脈

（十三）拒收標本標準

1、患者信息不全

2、標簽不清，不具備識別系統的唯一性

3、抗凝不當、標本凝固

4、時間延誤

5、溶血標本

6、儲存溫度不當

7、采自輸

液管

8、樣本外漏、容器破損

9、明顯受污染的樣本

10、標本量過少

11、標本項目與申請項目不符

12、醫囑作廢的標本

13、容器不合格，影響檢驗結果

（十四）接受標本：必須認真核對標本

1、姓名

2、申請項目

3、標本類型

4、試管和抗凝劑合適性

5、標本是否泄漏或容器損壞

6、標本量是否足夠

（十五）治療藥物濃度監測采樣時間〕 1 氨基糖苷類抗生素：一般在用藥結束后稍晚一點的時間開始，若滴注為 1h，在滴注結束后 10min 取血樣，若滴注小于 1h,一般在給藥 30 min 取樣。

2、卡馬西平：達穩態血藥濃度時，給下一劑量前立即采樣（谷值）。

3、苯巴比妥：由于半衰期長，采樣時間不重要，可加固定在同一時間采樣，以便比較。

4、丙戊酮：給下一劑量前立即采樣（谷值）8

5、地高辛：給藥后 8—24 小時。(不管是靜脈給藥還是口服給藥，完成藥物 的分布過程需要 8～12h.。

6、茶堿：口吸服后 2～4h。

7、奎尼丁：若每 6h 服藥一次，則給藥后 6h 左右取血；若每 8h 服藥一次，則給藥后 5～6h 左右取血。總之，應于下次給藥前采血測谷濃度。

8、環孢霉素：服藥后 12h。

9、必要時遵照醫囑。〔微生物標本的采集〕一.血液及骨髓(一)采集時間

1、一般原則(1)、病人發熱初期或發熱高峰.(2)、使用抗菌素前(3)、已經用藥者,應在下次用藥前 2.、布魯桿菌感染(1)、最佳時間:發熱期(2)、還可多次采血,24 小時抽 3～4 次 3.、沙門菌感染(1)、可在不同時間采集標本（2、)腸熱癥患者在病程 1～3 周內采集標本 4.、亞急性心內膜炎：除發熱期外,應多次采集

5、急性心內膜炎：治療前 1～2 小時內分別在 3 個不同部位抽血樣培養。

6、急性敗血癥：腦膜炎、骨髓炎、關節炎、急性未處理的細菌性肺炎和腎 盂腎炎除在發熱期采血外，應在治療前短時間內在身體不同部位采血，分別作需 氧、厭氧培養。

7、不明原因發熱（1）、發熱期內多次采血（2）、如果 24 小時培養為陰性結果，應繼續采集 2～3 份或更多次血樣進行 培養。9

8、肺炎鏈球菌感染：最佳時期為高熱、寒戰或休克時。

9、分枝桿菌感染：感染初期采血

（二）采集部位及頻率

1、急性敗血癥：24 小時內抽血 3 次或更多，在不同部位如左、右手臂或頸 部采集。

2、急性心內膜炎：治療前 1～2 小時內，在三個不同部位采集血標本

3、亞急性心內膜炎：第一天在身體不同部位取三次標本。如果 24 小時培養 為陰性結果，應繼續采集 2～3 份或更多次多部位采集血樣進行培養。

4、無名熱 ：不定期多次、多部位。24 小時內不超過 3 次，如果培養為陰 性結果，應繼續采集送檢。

（三）標本采集量 成人：10 毫升血液 兒童：3～5 毫升 嬰幼兒：1～2 毫升

（四）標本采集注意事項

1、用 75%酒精消毒瓶蓋，不用碘酒消毒

2、嚴格作好抽血部位的無菌操作

3、同時做需氧和厭氧培養時，先將標本注如厭氧瓶中，然后再注如需氧瓶 里。

4、注如標本的培養瓶立即送檢，如不能立即送檢時，放室溫保存，切勿放 冰箱內

5、化驗單上注明采血時間

二、尿液標本

（一）采集時間：抗菌素應用之前，晨起第一次尿液

（二）采集方法

1、段尿采集方法：清洗尿道口，排尿棄去前段尿，留取中段尿 10 毫升于無 菌容器中立即送檢。

2、集尿法：結核分枝桿菌集菌檢查。將 24 小時尿留在一清潔容器中，取沉 渣 10 毫升送檢 10

3、尿法：通過導尿管留尿 10 毫升于無菌容器中立即送檢

（三）注意事項

1、尿嚴格進行無菌操作

2、集后立即送檢

3、用藥之前進行培養

4、液中不得加防腐劑 三.、糞便標本

（一）采集時間

1、瀉病人在急性期用藥前采集

2、沙門菌感染

（二）集方法

1、自然排便法：自然排便后，挑取有膿血，黏液部位的糞便于無菌容器內 送檢。

2、直腸拭子法：不易獲得糞便可采用直腸拭子法采集。

（二）注意事項

1、標本新鮮

2、用藥前采集

3、腹瀉病人在急性期采集

四、痰及上呼吸道標本

（一）標本采集時間

1、用藥前清晨痰

2、鼻咽拭子

（二）采集方法

1、自然咳痰法：清晨起床后，清水反復漱口后用力除第一口痰于無菌容器 中立即送檢。

2、上呼吸道標本：采用無菌棉拭子

（三）注意事項 標本采集后立即送檢，如不能立即送檢，放冰箱保存

五、化膿和創傷標本 用藥前，無嚴格時間要求 腸熱癥在 2 周以后；胃腸炎病人在急性期采集新鮮糞便 11

（一）標本采集

1、開放性感染：標本采集前清創創口，然后用無菌拭子采取膿汁及病灶深 部分泌物于無菌管中立即送檢。

2、閉鎖性膿

腫：無菌操作，穿刺抽取標本于無菌管中立即送檢。

（二）注意事項

1、藥前采集標本

2、能立即送檢標本，放 4℃保存，但培養淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌標本除 外。

六、穿刺液

（一）腦脊液

1、集時間 懷疑為腦膜炎的病人，在用藥前應立即采集腦脊液進行培養

2、集方法 用腰穿方法采集腦脊液 3~5 毫升于無菌管中立即送檢

（二）注意事項

1、于細菌檢測：收集腦脊液后 15 分鐘內送檢，腦脊液不可放冰箱保存。

2、于病毒檢測：腦脊液標本應放置冰塊，在 4℃15 分鐘內送檢。

3、行腰穿過程中，嚴格無菌操作

（三）膽汁及穿刺液

1、檢測時間：懷疑感染存在，應盡早在用藥之前或停止用藥后 1～2 天采集 標本

2、采集方法：無菌穿刺抽取標本于無菌管中立即送檢，量不少于 1 毫升

七、燒傷標本

（一）、采集時間 早期、深 П 度燒傷溶痂和Ⅲ度焦痂分離期、后期每天采 集燒傷標本于無菌管中立即送檢

（二）、采集方法

（三）、注意事項

1、嚴格無菌操作

2、床前采集標本進行厭氧培養

3、燒傷 12 小時以后進行采集創面標本，可獲得陽性結果

八、生殖道標本 用無菌拭子，直接從燒傷創面的膿汁多部位采集 12

（一）標本采集 尿道分泌物、陰道分泌物、宮頸分泌物、宮嗆內容物、前列腺按摩液、精液 等嚴格無菌操作留取于無菌管中立即送檢。

（二）注意事項

1、嚴格無菌操作

2、采取宮頸標本避免觸及陰道壁

3、床前采集標本進行厭氧培養 九.組織標本

（一）采集時間

1、淺表皮膚黏膜

2、深部組織

3、尸檢標本

（二）采集方法

（三）注意事項

1、嚴格無菌操作

2、各種活檢組織標本，常溫下最長保存 24 小時

3、甲醛固定的組織塊標本不用于病原微生物分離 附：樣本拒收標準

1、樣本上無患者條碼或條碼不符和要求

2、樣本外漏、容器破損及明顯受污染的樣本

3、樣本的檢驗項目申請不適合進行

4、當日重復送樣本（血培養除外）使用抗生素之前采用 手術或內窺鏡檢查是采集 死后迅速采集 無菌操作留取標本于無菌管中立即送檢 〔骨髓形態標本的采集〕

一、髓標本的采集是由臨床醫生采集，應適量不得超過 0.2ml，取材應避免混血。

二、腦脊液標本的采集是由臨床醫生采集，采集后應立即送檢，接到標本后應及 時制作標本。

三、血液涂片的采集（包括血細胞形態檢查和瘧原蟲檢查）方法兩種： 由臨床護士用 BD 管采血，采血后標本應盡快送檢，應在 2 小時內制成血涂 片，標本不可放置過久。13 在未制作血涂片前，標本嚴禁放入冰箱內保存，分院送檢的標本應制成血涂 片送檢。冬季室外送檢的標本應保溫，避免標本受凍溶血,如果標本放置時間超過 24 小時（夏季溫度高）可拒收標本。〔細胞遺傳（染色體）標本的采集〕

一、預約時要求患者采血化驗前半個月內盡量避免應用各種藥物。

二、到本室采血時要求患者精神盡量放松，因為患者過度緊張時機體釋放的血管 緊張素會影響染色體的生長。〔脫落細胞標本的采集〕

一、痰標本： 留取痰標本的方法有自然咯痰、氣管穿刺吸取、經支氣管鏡抽取等，以自然咯痰為主，本應新鮮。應囑患者用力咳出氣管深處真正的呼吸道分泌 物，于干凈痰盒內，密封送到細胞室，而勿混入唾液及鼻咽部分泌物。

二、液體標本（胸、腹水、心包液、尿液、腦脊液等）要求新鮮，送實驗室應立 即制片，否則細胞自溶退化而破壞，影響診斷。如不能立即制片，可在標本 中加入 40%甲醛溶液以防止細胞自溶。液體標本要求標本量 50-100ml（腦 脊液除外）。

三、乳腺溢液：詢問病史，讓病人自行或制片人員沿乳腺導管輕輕擠壓，將第一 滴溢液去掉，再擠出制片，如有血選擇血性乳液，粘片制成薄厚均勻的涂片，馬上固定。

四、氣管鏡刷片、婦科刮片由臨床醫生涂制。但標本需馬上固定。若做液基細胞 按液體標本方法制片。

五、穿刺細胞學：到時本室取標本。〔血尿定位標本的采集〕

一、患者清晨 3 點排尿一次，這次尿不要，然后留取 3 點 6 點全程尿一次。全部 收集在干燥、清潔、無污染的容器內來檢驗時帶來。

二、早 8 點到檢驗科由血尿定位定提供清潔尿杯分三杯留取新鮮尿液。

三、本室可保存尿液中存在的有形成分形態冰箱溫度為 2℃～8℃。〔糞便標本的采集〕 14 糞便標本的采集方法直接影響檢驗結果的準確性，通常采取自然排出的糞 便：

1、留取新鮮指頭大小（5 克）的大便，放入干燥、清潔、無吸水性的容器 內送檢。不要混入其它雜物，容器上應貼好標簽、條碼或注明患者姓名、科別、床號、收集時間及

檢測項目。

2、本應選擇具有病理意義的便（如濃血、血粘液、水樣等選取）應在半小 時內送檢，2 小時內檢測完畢，否則應 PH 變化及消化酶的影響可使便的細胞成 分破壞分解。最多不應超過 4 小時。

3、無法排便而又必須檢查時，可經肛門用肛試子采便。

4、試驗應囑咐患者在收集標本前三天禁食動物性食物，并禁服鐵劑和維生 素 C.且連續檢查三天，收集后須迅速送檢。

5、寒冷時應保持溫度，避免凍溶防止有形成分破壞。〔尿標本的采集〕

一、根據不同檢驗目的。留取晨尿和餐后 2h 尿、12h 尿、24h 尿及隨機尿。.尿常規檢驗通常為：

（一）、新鮮晨尿（這時的尿標本較濃縮和酸化，不受運動及進餐等影響。適用于尿蛋白、尿沉渣、尿亞硝酸鹽檢驗及細菌培養）和隨機尿（尿液可 能被稀釋或受進餐、藥物以及新陳代謝等影響，尿中成分檢出情況不盡相同。餐后尿檢測易出現糖尿）。

（二）、尿膽原檢測以 14：00～16：00 時間段內留取的尿液為好。

（三）、尿液定量檢查需要留取 12h 或 24h 的混合尿液，留取時應按規定時 間內排出之尿液裝入含有合適防腐劑的潔凈容器內，混勻后記錄總量，取 10ml 送檢。1、12h 尿：適用于 Addis 計數。試驗當日清晨起，除正常飲食外，不得 再飲水，以利尿液濃縮。于晚上留尿開始時，囑患者排尿并棄去，收集此后 12h 內的全部尿液。2、24h 尿：適用于代謝產物 24h 定量測定或 24h 尿沉渣抗酸桿菌檢查。留取要求同 12h 尿。15

二、尿液標本采集應清潔、干燥的一次性容器，應用時貼上條碼。避免經血、白帶、精液、糞便混入。標本留取后及時送檢，以免因光線、細菌滋生造成 化學物質和有形成分的改變和破壞。作細菌檢驗的標本，在微生物標本采集 注意事項介紹。

三、尿標本的防腐與保存： 冷藏法：4℃冰箱，不得超過 6 小時。但應注意，有些成分如尿酸鹽在低 溫時會沉淀析出，影響其化學成分的測定；同時，堿性尿液中的 紅細胞以及細胞管型即使在冰箱中也會破壞。因此，要根據檢測 項目的需要，選擇不同的防腐及保存方法。甲苯法：100ML 尿加 0.5ML 甲苯，適用于 24 小時尿液化學檢查。〔前列腺標本留取注意事項〕 由臨床醫師進行，標本少時 1 滴，多時可達 1ml 左右。置潔凈載物玻片上，立即送檢。以防干涸。〔精液標本的采集〕

一、囑患者禁止合房七天，留取精液。

二、直接用干燥、防漏、潔凈的容器留取。容器不易過大，以免沾留太多。要求 在半小時內保溫送檢驗科。冬天最好放在內衣口袋里。

三、標本采集次數：精子生成的日間變化較大，因此，對于少精癥患者不能僅憑 1 次檢查結果診斷。一般間隔 1～2 周再檢查 1 次，連續檢查 2～3 次后再作 判斷。

四、避免用避孕套工具留取。影響活動力。

五、必要時在醫生指導下留取。〔漿膜腔穿刺液的采集〕由臨床醫師進行；穿刺必須注意無菌操作，勿使細菌污染穿刺部位及標本。采取量由檢驗目的按條碼要求而定。為防止細胞變性、凝塊發生或細菌溶解，應 及時送檢及檢驗。如不能送檢，可加適量的枸櫞酸鈉抗凝劑（藍色真空管）內，混均后立即送檢。如要觀察標本有無凝固現象，則不能加抗凝劑。[胃液標本采集] 16 先將晨間空腹殘余胃液抽空棄去。然后在 1h 內連續抽出胃液放入同一瓶內。〔腦脊液標本的采集〕

一、本由醫通過腰椎穿刺采集。穿刺應順利，避免將因液混入標本。

二、標本一般收集 3 管，每管 2ml。第 1 管做細菌培養；第 2 管做化學或免疫檢 查；第 3 管做常規及細胞計數。

三、標本就及時送檢、及時檢驗。久置可致細胞破壞、變性、自容，糖分解及病 原菌破壞或溶解等影響檢驗結果。17 患者

1、狀態

2、時間 避免劇烈活動、禁食 12h 后作為采血標準。一般生理成分在晨起時都處于較低水平，隨著起床和活動增加而逐步 上升，下午較高，入夜休息和睡眠后漸低，晨起前最低。個體日變動差(最高與最低)項目 鈉(mmol/L)鉀(mmol/L)氯(mmol/L)磷(mmol/L)總蛋白(mmol/L)白蛋白/球蛋白(mmol/L)尿素氮(mmol/L)尿酸(mmol/L)

3、生活環境

4、藥物

5、吸煙

6、性別 停服能干擾檢查項目的藥物，特別是進行臟器功能試驗時更為重要 吸煙對檢查的影響與吸煙量成正比.對許多檢查項目有影響，女性受性期周期影響較大，男女發育階段也 日變動差 4.8 0.4 3 0.22 0.6 0.3 1.2 0.49 項目 膽固醇(mmol/L)甘油三酯(mmol/L)堿性磷酸酶(King U)丙氨酸氨基轉移酶(U/L)3.6 日變動差 0.52 0.33 門冬氨酸

氨基轉移酶(U/L)3.9 乳酸脫氫酶(U/L)膽堿酯酶(⊿ph)淀粉酶(somogy U/L)2.7 0.1 17 有一定的差別。

7、年齡 一般是從嬰乳兒、兒童、青少年、青壯年、更年期和老年，從生長發 育代謝旺盛至代謝減慢、衰老，各種生物活性物質從活躍到降低，免疫功能 從發育不全到發育完善直致衰老、萎縮，其相關的檢查也有相應的變化。18

第四篇：檢驗標本采集處理

一﹑臨床常用檢驗項目的標本采集和處理

（一）血常規檢驗標本

一般用EDTA-2K（EDTA-K2-2H2O）1.5～2.2mg/ml抗凝（EDTA抗凝管）采血。采血注意事項為：

1.采血后立即上下顛倒混勻（5-10次，不可用力震蕩）；

2.應按抗凝管刻度準確采血至2ml；3.采血后應盡快送檢（需顯微鏡觀察形態的標本采血后 應及時推片固定，因為超過2h WBC形態會發生改變）。

（二）紅細胞沉降率（血沉，ESR）測定標本

靜脈采集枸櫞酸鈉（109mmol/L，即32.06g/L）抗凝血（枸櫞酸鈉抗凝管采血）。注意事項：

1.采血后立即上下顛倒混合5-10次；

2.單獨采1管血,準確采血至2ml（抗凝劑：全血 = 0.4 ：1.6）； 3.采血后應盡快送檢（必須2h內檢測）。

（三）凝血檢測（PT、APTT、TT、FBG、DD）標本

靜脈采集抗凝血（最好真空負壓系統采血），抗凝劑用枸櫞酸鈉（109mmol/L，即32.06g/L,抗凝劑:全血 = 0.2：1.8）。采血注意事項：

1.空腹采靜脈血（餐后脂血影響檢測結果，使因子Ⅶ活化，導致PT延長）；

2.采血時患者應保持平靜狀態30min以上（劇烈活動可使因子Ⅷ活化，APTT明顯縮短）； 3.應單獨1管血；

4.必須準確采血至刻度線2.0ml；

5.采血后應立即上下顛倒混勻5-10次，不可有凝塊； 6.采血后應盡快送檢（必須2h內檢測）。

（四）血型 與 血交叉標本

為EDTA-2K抗凝血。采血注意事項：

1.最好血型與血交叉各采1管血（要求保留血樣）； 2.采血量分別為1.0ml和1.0～2.0ml； 3.采血后立即上下顛倒混勻（5～10次）。

（五）尿液常規檢查標本

１.尿液常規檢查標本應按以下原則進行采集：

（1）新鮮晨尿最佳，門診病人亦可留隨機尿；

（2）尿液采集于干凈帶蓋容器中，不可使用未經洗滌的裝藥物或試劑的器皿；

（3）避免混有經血、白帶、精液和糞便；

（4）尿液標本冰箱可保存6～8h，但細胞等有型成分會有破壞，會有結晶析出；

（5）尿液成分定量檢查應留取24h防腐混合尿100～200ml（須記取24h尿液總量）；

（6）根據不同檢測目的選擇不同的防腐劑：臨床最多用的尿液防腐劑為:①甲醛（formalin），用于尿液有形成分檢查，濃度為400mg/L尿液即40%；②甲苯（toluene），常用于尿糖和尿蛋白等化學成分的定性或定量檢查，5-20ml/L尿液；③濃鹽（hydrochloric ａｃｉｄ），用于定量測定尿１７－羥、１７－酮、腎上腺素、兒茶酚胺和尿鈣等，濃度為１ｍｌ/L尿液。

２.尿液常規檢查標本采集方法：

（１）晨尿最好（安靜狀態下留取清晨第一次尿，濃縮，無其他影響）；

（２）隨機尿較常用（隨時留尿，適用于門診和急診病人，結果易受多種因素影響）；

（３）清潔尿（中段尿、導管尿、膀胱穿刺尿，用于病原微生物學培養、堅定和藥敏）；

（４）24h尿（用于尿液成分24h定量檢查分析，一定要教會病人留取24h尿正確方法）。

（５）３ｈ、１２ｈ等計時尿和餐后尿等特殊實驗尿，則應按醫囑要求進行留尿。

（六）糞便常規檢查標本

1.一般應為新鮮的自然排出的糞便３～５ｇ，必要時可肛拭子采取； 2.送檢糞便應盛于潔凈帶蓋的塑料盒中送檢，要做好標記；

3.要選取糞便的膿、血、黏液等異常成分進行檢查，表面無異常時應從糞便表面、深處及糞端多處取材；

4.檢查蟯蟲卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前，于肛門周圍皺襞處拭取標本，并立即送檢；

5.檢查血吸蟲卵時應取黏液、膿、血部分，如須孵化毛蚴應留取不少于30g的糞便，并盡快送檢，必要時留取整份糞便送檢。

6.檢查痢疾阿米巴滋養體時，應床邊留取新排出的糞便，從膿血和稀軟部分取材，并立即保溫送實驗室，并且實驗室接受標本后應立即進行檢查。

7.做便隱血試驗時，應囑病人檢查前3d內禁食肉類、含動物血的食物及某些蔬菜，禁服鐵劑和維生素C等對實驗有干擾作用的藥物。

（七）漿膜腔積液檢查標本

（1）漿膜腔積液標本一般由醫生無菌穿刺采取；

（2）送檢標本量：理學檢查、化學檢查、細胞學檢查各留取２ml；細菌學檢查用 無菌管采集標本，厭氧菌培養留取１ml，結核菌檢查留取１０ml。

（3）標本采集后必須立即送檢（否則可出現細胞變性，標本凝集，細菌溶解）；

（4）用于細胞學檢查時，可在標本中加適量EDTA鹽抗凝，但還須留取１管不加抗凝劑的標本用于觀察積液的凝固性；化學檢查標本宜用肝素抗凝。

（八）臨床化學檢驗標本

臨床化學檢驗多用非抗凝血標本，有條件應使用真空負壓采血管。臨床化學檢驗血標本采集主要注意事項是：

1.多項化學檢測一般可采1管血；

2.采血量視檢查項目多少不同而異，單通常為4.0～5.0ml； 3.如果檢測項目不是很多，生化和免疫也可以采1管血；

4.多項檢測同時采血時應按下列順序采血：①血培養；②無添加劑管；③凝血管；④有添加劑管的順序為：a櫞酸鹽管；b肝素管；cEDTA管；d草酸鹽/氟化鈉管。

5.不論是抗凝血還是非抗凝血，為了縮短血清或血漿與血細胞的接觸時間，以避免由此而影響結果的準確性，血液標本收集后，都必須盡可能早地將血清或血漿從全血中分離出來。從血液標本采集開始，必須在2h內將全血處理為血清或血漿。

（1）血清（非抗凝血）：采血后標本必須顛倒混合5～10 次，22～25oC（室溫）15～30min后可自行（自發）完全凝固，禁用木棍和玻棒等剝離凝塊；冷藏標本凝集較慢，加促凝劑時凝集加快。

（2）血漿（抗凝血）：應采用抗凝管采血，采血后立即顛倒混合5～10次，采血后數min內可離心分離血漿。

（3）冷藏標本：用于穩定血液中溫度依賴性成分的（抑制細胞代謝），標本于2-8oC冷藏（標本采集后立即置冰屑或冰水混合物中，冷藏必須充分）；標本需冷藏的測定項目有：兒茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血氣、NH3、乳酸、丙酮酸等。，全血標本一般不冷藏，血鉀測定標本冷藏不得＞2h（4）代謝抑制劑和防腐劑的應用：用于抑制細胞代謝。血標本中加入氟化鈉后，血細胞未分離情況下血標本中Glu，22～25oC穩定24h，2～8oC穩定48h；氟化鈉不適用于新生兒及兒童的Glu測定（因兒童PCV高，細胞糖酵解難以控制）；氟化鈉-麝香草酚混合劑不適合酶學檢測（因氟化鈉-麝香草酚混合劑能抑制酶活性）；甲醛—草酸鉀抗凝保存劑不適用于血糖測定。

（5）實驗室離心標本的準備：不主張用小棍強行剝離凝血塊(誘發溶血)；必須剝離時應動作輕柔；真空采血管應一直保持封閉垂直位置直到離心取出血清或血漿。

（6）關于標本離心（指標本處于離心機里的一段時間）

①離心時間和相對離心力：離心時間為5～10min；相對離心力（RCF）為1000～1200×g；

②溫度控制離心：離心時產熱，不利于分析物穩定。溫度依賴性分析物（ACTH﹑環腺苷酸﹑兒茶酚胺等）離心溫度應控制在4oC；無特殊溫度要求的分析物離心溫度在20～22oC；冷藏運送標本應利用溫度控制離心機離心。

③再離心：最好一次完成標本離心。普通采血管二次離心時必須在首次離心后短時間內完成；帶分離膠的采血管不可以二次離心。

（7）離心后標本處理（指標本離心后和用于檢測的血清或血漿被取出 一定量之前）(1)血清/血漿與接觸的細胞/凝塊應于采集后2h內盡快分離；(2)分離出的血清或血漿的儲存：

①8h內可以儲藏于22oC，8h以上儲藏于2～8oC 48h以上儲藏于－20oC；

② 標本不可反復凍融（只能一次，且不可儲藏于無霜冰箱）；

③分離膠上面的血清或血漿，可保存2-5天；

④用非凝膠分離物質時，離心后必須立即移開血清或血漿；

⑤ 血清或血漿必須密閉保存（置于帶塞或封口的試管中）。

（九）血氣分析標本

血氣分析標本為動脈（股﹑肱﹑撓動脈）抗凝全血，抗凝劑為肝素鈉（0.05mg/ml，即1000u/ml，用9g/L的生理鹽水配制）。標本采集注意事項為： 1.采血一定要用厭氧技術（讓血液盡量少的與空氣接觸）；

2.采血前先吸入足夠量液體肝素抗凝劑于注射器內，使其盡可能濕潤注射器內壁，然后排出液體肝素，留下注射器死區內液體肝素約0.1ml即可； 3.采血量0.5～1.0ml（最好2.0ml）；

4.抽出的血液不能有氣泡，如有氣泡應立即排出；

5.標本采好后立即封閉注射器針頭，用兩手挫動注射器針筒使標本混勻后立即送檢。

（十）微生物學檢驗標本

微生物學檢驗標本的正確采集﹑運送及處理，與細菌的培養﹑鑒定結果有十分密切的關系；對可疑烈性呼吸道傳染病（如SARS ﹑炭疽﹑肺鼠疫等）患者采集標本時，必須按國家規范化要求嚴格注意生物安全；醫生﹑護士﹑檢驗人員均應重視微生物學檢驗標本正確采集的有關問題，并有責任向患者及其家屬進行正確采集標本的宣傳和指導。1．微生物學檢驗標本采集、運送、驗收和處理注意事項

（1）標本采集

1）申請單標記必須清楚（姓名、性別、年齡、病例號、臨床診斷、標本來源、采集時間、檢查項目、抗生素應用情況等），以便實驗室能夠合理選擇培養環境和培養基； 2）盡量在抗生素應用前采集標本，以避免漏檢和提高陽性檢出率； 3）標本采集應嚴格執行無菌操作；

4）咽拭、肛拭、傷口拭子等拭子標本，應插入運送培養基送檢；

5）痰、尿液、傷口拭子等混有正常菌群的標本，不可放入肉湯培養基內送檢； 6）采集標本的容器必須經滅菌處理，但不可用消毒劑。

（2）標本運送

1）標本采集后應盡快送到微生物實驗室；

2）標本采集后在室溫下超過2h未送達實驗室，可視為不合格標本。

（3）標本驗收

1）實驗室只能接受和處理合格標本；

2）實驗室對不合格標本退回必須說明原因，并應及時與臨床聯

（4）處理

根據檢驗目的結合臨床資料選擇合適的培養基接種標本；混有正常菌群的標本應做定量細菌培養；不能精確定量或常規定量操作較困難的痰、傷口拭子等標本，應分離出優勢菌做細菌鑒定和藥敏實驗，同時注明細菌量化指標；抗菌藥物治療的標本，必要時應加入某些物質以中和藥物對細菌的抑制作用。2．微生物學檢驗標本采集和處理

（1）尿液標本采集和處理 通常留取晨起第一次尿液（此時尿液在膀胱內儲存4h以上）；尿液采集后要及時送檢，并保證2h內接種；不能及時送檢和接種時，尿液應置4-8℃冰箱保存；冷藏標本應于8h內接種；懷疑沙門氏菌感染時，應于發病2w左右采集尿液，懷疑鉤端螺旋體感染時，應于發病后2w采集尿液，上述時間此時陽性率高。尿液微生物學檢驗標本采集方法如下。1）中段尿采集法：成年男性和女性分別用肥皂水清洗尿道口和外陰部，再用滅菌水沖洗尿道口，然后排尿棄去前段尿液，于帶蓋的無菌盛器中留取中段尿液5～10ml 2）導尿法：用導尿管導取10～15ml尿液，置滅菌容器中送檢；長期留置導尿管者應更換新導尿管留尿；留置導尿時，用無菌消毒法消毒導尿管外部及導尿管口，用無菌注射器通過導尿管抽取尿液送檢（不可采集尿液收集袋中的尿液送檢）；

3）集尿法：懷疑結核分枝桿菌感染時，于清潔盛器中留取24h尿液，取其沉渣10～15ml送檢；

4）恥骨上膀胱穿刺法：培養結果與臨床病情矛盾時可采用此法，一般較少應用； 5）腎盂尿采集法：必須由臨床醫生采集。

（2）糞便標本采集和處理 1）采集時間：

①腹瀉患者于急性期，盡量在用藥前采集糞便；

②傷寒患者于發病2w以后采集糞便；

③懷疑霍亂時立即采集糞便送檢。2)采集方法：

① 自然排便：取新鮮糞便的黏液、膿血、或絮狀物等有意義成分，2-3g或1-2ml，盛無菌容器內或置于保存液或增菌液內送檢；

②直腸拭子：用于難以獲得糞便或排便困難的患者和嬰幼兒，標本采集后插入滅菌試管內送檢。

（3）痰及下呼吸道標本采集和處理 1）自然咳痰法：

① 晨痰為佳；

② 先冷開水漱口清潔口腔和牙齒；

③ 再用力咳出呼吸道深部的痰；

④ 痰量不得少于1ml；

⑤痰咳出困難時可先霧化吸入NaCl溶液（100g/L，加溫到45℃）使痰容易咳出。2）小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，將拭子深入咽部，小兒因壓舌板刺激引起咳嗽，噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上可送檢。

3）支氣管鏡、支氣管穿刺、支氣管肺胞灌洗等采集法：此采集方法必須由醫生操作。

（4）血液及骨髓培養標本

1)抗生素治療前，嚴格無菌靜脈采血8～10ml（兒童1～4ml）；

2）無菌注入專用培養瓶（成人、兒童、需氧菌、厭氧菌、L型菌不同培養瓶）中送檢； 3）如已用抗生素不能停用時，可于48h內分別于下次用抗生素之前，采取6份血液標本送檢；

4）必要時可需氧菌、厭氧菌（占10%）和L型菌同時培養；

5）疑為心內膜炎時，為提高陽性檢出率，可酌情不同部位、不同時間，多次采血或動脈采血進行培養；

6）必要時可取骨髓1～2ml，無菌注入專用培養瓶中送檢(5）腦脊液培養標本

1)采集時間：懷疑腦膜炎時應立即采集腦脊液，最是在應用抗生素之前采集腦脊液。2)采集方法：無菌腰穿采集腦脊液3～5ml，分裝到3個無菌小瓶中（各1～2ml）。用于細菌和病毒檢測時腦脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于2ml。

（6）穿刺液培養標本包括胸水、腹水、心包液、關節液、鞘膜液等穿刺液培養標本。1)采集時間：一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前，或在停止使用抗菌藥物之后2-3d采集標本。2)采集方法：

①無菌操作穿刺抽取標本或外科手術采集標本；

② 標本采集量應＞1ml（結核分支桿菌培養時應為1～5ml）；

③ 標本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢；

④可在盛器中先加入滅菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固（0.5ml肝素可抗凝5ml標本）

（7）胃液及膽汁培養標本

抽取空腹胃液5ml，置無菌管內送檢；膽汁培養標本由十二指腸引流法或膽囊穿刺法或手術中留取膽汁，采集膽汁量為5ml，置無菌管內送檢；胃液和膽汁采集后必須立即送檢。

（8）膿汁和病灶分泌物培養標本采集前局部消毒，然后無菌采取膿汁或病灶分泌物或組織。標本采集后立即置無菌管內送檢。

（9）眼.耳.鼻.咽拭子培養標本用拭子常規采集各種標本。標本采集過程中應注意避免被黏膜上的正常菌群污染，標本采集后連同拭子一起置無菌管內送檢。

（10）泌尿生殖道培養標本

1）尿道分泌物：清洗尿道口采取尿道口溢出的膿性等分泌物，或用無菌拭子插入尿道2～4cm處輕輕轉動后取出，置無菌試管中送檢。

2）陰道、宮頸分泌物：通過陰道擴張器，用滅菌拭子采取陰道口或宮頸管1～2cm處分泌物，置無菌試管中送檢。

3）宮腔分泌物：在必要時用外套保護膜的滅菌導管抽取。

4）前列腺液：清洗尿道口沖洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液送檢。

5）精液：受檢者應5d未排精，清洗尿道口后手淫或體外排精法，射精于無菌容器內送檢。

6）潰瘍分泌物：滅菌生理鹽水溶液清洗患處，用無菌拭子取其邊緣或基底部的分泌物，置無菌試管中送檢。(11）燒傷感染培養標本

燒傷12h后用無菌棉拭子無菌操做采集標本；要注意從多個創面取樣；燒傷嚴重感染時易發生敗血癥，創面取樣的同時應該采集血樣送做血培養（最好同時做需氧菌培養和厭氧菌培養）。

（12）厭氧菌感染培養標本 1）標本采集

①要注意避免標本污染和與空氣接觸，嚴格遵守無菌操作；

②用注射器抽取胸水、腹水、心包液、關節液、膽汁、腦脊液或無菌手術抽出膿液；

③抽出液體標本后，要盡快排除注射器內的空氣。2）標本運送

① 標本采集后不得冰箱儲存，必須盡快（半小時內）送實驗室；

② 運送方法：

a注射器運送（標本抽取后盡快排除空氣）或接種到專門的運送培養基中直接運送； b含運送培養基的無氧小瓶運送； c厭氧罐運送（組織塊）；

d 大量液體標本運送時要裝滿標本瓶并立即驅氧，加蓋運送； e一般不采用棉拭子法。(13）真菌感染培養標本 1）淺部真菌感染標本采集

① 皮膚：常規消毒皮膚，從皮膚癬菌皮損邊緣刮取鱗屑，置無菌平皿內送檢；皮膚潰瘍則采集病損邊緣膿汁或組織；

② 指（趾）指甲：消毒指（趾）指甲并去掉其表面部分，取可疑病變部分，用刀片修成小薄片5～6片，置無菌容器內送檢；

③毛發：采集根部斷折處，至少5～6根送檢。2）深部真菌感染標本采集

① 血液：無菌采血8～10ml，注入未用過抗生素的或可中和抗生素的血培養瓶中，立刻送檢；如不能立刻送檢時血培養瓶應放室溫，但不可超過8～9h；

② 腦脊液：采樣量不少于3～5ml，分別注入兩支無菌試管中送檢（一管做真菌培養和墨汁染色；一管測隱球菌抗原和其他培養）；③呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染標本采集同一般菌培養標本。

（14）病毒感染標本

1）標本采集原則：根據不同檢查目的采集不同的標本，見表1。盡量于疾病早期采集標本；尸檢標本應在患者死亡后6h內采集標本。2)標本采集方法：

① 呼吸道病毒感染標本用咽拭子采集；讓患者先咳嗽，再口服0.5%乳蛋白水解物15ml，反復含漱3～4次后吐到容器中立即送檢；兒童常應用無菌棉拭子，先沾好0.5%乳蛋白水解物，再去涂拭扁桃體周圍組織，并立即泡在0.5%乳蛋白水解物中，立即送檢；

②乙腦病毒需采集血清或血漿，置無軍菌容器中盡快送檢；

③ 尿液則取其中段尿立即送檢（否則置4℃冰箱12h內接種）；

④腸道病毒和柯薩奇病毒則采集新鮮糞便，盡快送檢。

3）標本運送及保存：多數病毒對熱不穩定，標本采集后應立即送檢接種；如48h內接種，須置4℃冰箱保存；空運標本須置冰壺中48h內送到實驗室并接種。

第五篇：細菌標本采集規范

臨床微生物學標本采取和處理的規范化要求

正確的采取、處理與運送用于細菌培養的標本是臨床細菌檢驗成功的關鍵。標本采取與處理的規范化是準確、及時地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎；而標本采取與處理不當將嚴重影響檢驗結果，給臨床以誤導，延誤對患者的正確治療。為此，我們提出初步的參考意見，并希望在實踐中不斷完善。

一、血液細菌培養標本的采集和處理

臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血液感染的患者，需做血液細菌培養以明確病原。

1．采集方法：靜脈采血，以無菌操作方法抽取血液后，直接注入血培養瓶中，輕輕顛倒混勻，以防血液凝固。如果同時作需氧和厭氧培養，應先將標本接種到厭氧瓶中，再注入需氧瓶，嚴格防止將空氣注入厭氧瓶中。

2.采血時間以及血培養份數：在患者發熱期間越早越好，最好在抗菌治療前，用藥前24小時內采集2～3次血液標本，可使細菌檢出率高達99%。對間歇性寒戰或發熱的患者，應在寒戰或體溫高峰到來之前0.5～1小時采血，亦可在寒戰或發熱后1小時采集血液標本。特殊感染患者采血培養時應遵循以下原則：（1）可疑急性發熱性菌血癥、敗血癥患者：應在使用抗菌藥物之前，在24小時內從不同部位采集2～3份血液標本培養。

（2）可疑細菌性心內膜炎患者、感染性心內膜炎患者：在1～2小時內采集3份血標本培養，如果24小時后陰性，再采集兩份血標本培養。

（3）不明原因發熱患者：先采集2～3份血標本，抽血間隔60 min，24～36小時后體溫升高之前，再采集2份血標本進行培養。因為1次血培養不足以說明問題，可能會遺漏陽性結果。

（4）可疑菌血癥但血培養持續陰性時；應改變血培養方法，以獲得罕見或苛養的微生物。

（5）在急性發熱性疾病如腦膜炎、細菌性肺炎，需馬上做抗菌治療；或急性骨髓炎、化膿性關節炎等要緊急手術的患者，應立即從兩臂分別取2份標本。3.采血部位：采血部位通常為肘靜脈。疑為亞急性心內膜炎的患者，以肘動脈或股動脈采血為宜。疑為細菌性骨髓炎或傷寒患者，在病灶或髂前（后）上棘處嚴格消毒后抽取骨髓。多次采血應在不同部位的血管穿刺以排除皮膚菌叢污染的可能。要避免從血管插管內取血，因插管常被污染，其培養結果不能反映真實情況。在不同部位取血，2次分離出同樣菌種才是確定病原菌的有力證據。采血時要求嚴格無菌操作，防止皮膚正常菌群污染。

4.采血量：采血量與血培養的檢出率相關，所以采血量一定要足夠。成人一般為8～10ml/瓶，新生兒與嬰幼兒為1～5 ml/瓶，骨髓采血量為1～2ml/瓶。5.標本運送與保存：含血樣的培養瓶應立即送往實驗室；不能及時送檢的標本，應將其放在室溫，切忌冰箱存放，因為某些苛養菌可在低溫環境中死亡，而使培養陽性率下降。

二、下呼吸道分泌物(痰培養)的標本采取和處理

下呼吸道分泌物(痰)的細菌學檢查對病原學診斷起著重要作用，但痰標本的質量往往難以保證，造成病原學診斷和實際引起感染的病原菌脫節，直接影響抗菌藥物的應用、甚至耐藥菌的出現或流行。痰標本的細菌學檢驗地帶網檢查應注意如下幾個問題。

1.標本的采集：痰液標本最好在應用抗菌藥物之前采集，以深咳晨痰最好，主要有自然咳痰法、支氣管鏡采集法、胃內采痰法、小兒采痰法和氣管穿刺法等。

(1)自然咳痰法：為最常用的采集痰液方法。留取標本前，囑咐患者用清水漱口數次，然后將痰吐入無菌帶蓋的痰杯中。對無痰或少痰的患者可采用霧化吸入加溫至45℃的10%NaCl水溶液，使痰液易于排出。對咳痰少的幼兒，可輕壓胸骨上部的氣管，促進痰液的排出。

(2)氣管穿刺法：僅用于昏迷患者，由臨床醫師進行操作，主要用于厭氧培養。

(3)支氣管鏡采集法：用氣管鏡在肺部病灶附近用導管吸引或者用支氣管刷直接取材，患者不易接受，故不常用。

(4)胃內采痰法：無自覺癥狀的肺結核患者（尤其嬰幼兒）不會咳嗽，有時將痰誤咽入胃中，可采集胃內容物做結核分枝桿菌培養。清晨空腹時將胃管插入患者胃內抽取胃液送檢。

(5)小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子深入咽部，小兒收到刺激咳嗽時，可咳出肺部或氣管分泌物粘在拭子上。

2.標本的運送與保存：痰液標本采集后應立即送檢，以防止某些細菌在外環境中死亡。做結核分枝桿菌和真菌培養的標本不能及時送檢時，可放4℃保存，以免雜菌生長。

三、尿液細菌培養標本的采集和處理 尿液的細菌培養檢查對于膀胱和腎臟感染的及早發現和病原學診斷很有價值。對于尿道、前列腺以及內、外生殖器炎癥的診斷也有一定價值。

1.標本收集時間：需在應用抗菌藥物之前或停用抗菌藥5 d之后留取尿液標本；尿液在膀胱內應停留6～8h以上，使細菌有足夠時間繁殖。最好留取早晨清潔中段尿標本。2.標本收集方法：

(1)清潔排尿法：女患者首先用肥皂水或碘伏清洗會陰部及尿道口，再用清水沖洗，擦干并排出前段尿液后，用無菌容器接取中段尿10～20ml；男患者應翻轉包皮沖洗，用碘伏消毒尿道口；嬰兒消毒其陰部后，將無菌小瓶直接對準尿道口接取尿液；均加蓋立即送檢。

(2)膀胱穿刺法：為避免尿道正常菌群的污染，收集尿液最好的方法是膀胱穿刺。尤其做厭氧菌檢查時必須采用膀胱穿刺法。穿刺時膀胱應充盈，皮膚嚴格消毒后用裝有19或20號針頭的注射器在恥檢驗地帶網骨聯合距臍1/3處穿刺。膀胱穿刺的適應癥有：①有尿道感染的臨床癥狀，但中段尿培養細菌數很低，而又難以確定感染源者。②嬰幼兒、新生兒、不能用導管者。③懷疑有厭氧菌感染時。(3)腎盂尿采集法：若取左右兩側腎盂尿，應請泌尿科醫生采取，左右側的標本要標記明確，以免出現錯誤。

(4)對用封閉式引流裝置的留置導尿患者留取尿液標本培養時，用適當的消毒劑嚴格消毒引流管和導尿管連接處的管壁，用裝有21號針頭的注射器穿刺導尿管壁吸取尿液。不可打開導尿管和引流管連接處收集標本，培養用的尿液標本也不能從引流袋中留取。

(5)膀胱鏡檢查、輸尿管插管或逆行腎盂造影時，收集的尿液可用來做細菌培養。(6)做病毒學檢測時用容器收集清潔的標本即可，不需特殊方法收集。標本中加入抗生素可抑制細菌的過度生長，且標本需冷藏。

3.標本的運送和保存：尿液標本采集后應立即送檢、及時接種，室溫下保存時間不能超過2小時，4℃冷藏時間不能超過8小時，否則尿液細菌迅速繁殖，使尿中細菌計數不準確。但疑為淋病奈瑟菌感染患者的標本不能冷藏保存。

四、糞便標本微生物學檢查的質量要求

1.采集方法：糞便標本多采用自認排便法，特殊情況下可采用直腸拭子法。（1）自然排便法：患者用藥前自然排便后，采集有膿血、黏液部分糞便2～3克；外觀無異常的糞便應從糞便不同部位取材；液體糞便取絮狀物，盛于無菌容器或保存液中送檢。（2）直腸拭子法：對于不易獲得糞便或排便困難的患者，可采用直腸拭子法采集。將拭子前端用無菌甘油或鹽水濕潤，然后插入肛門約4～5cm（幼兒2～3cm）處，輕輕在直腸內旋轉，擦去直腸表面黏液后取出，盛入無菌試管或保存液中送檢。

2.標本保存和運送：糞便標本應立即送檢；如不能立即送檢，放入Cary-Blair運送培養基或pH7.0的磷酸鹽甘油（0.033mol/L PBS與等體積的甘油混合）中運送和保存。標本置密封好的小瓶中，記錄姓名、日期、標本號、及時送檢，一般不長于2小時。

五、生殖道標本的采集和處理 1.男性標本：

(1)如疑為急性淋病奈瑟菌或其他化膿性細菌感染應在清洗龜頭部后，以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒劑消毒后，擠出分泌物立即以無菌棉拭子采取放入無菌試管中，立即送檢，或以專用的細拭子插入尿道口2～3cm，旋轉采取。(2)如疑為前列腺炎、精囊炎或慢性淋病奈瑟菌感染應由醫師按摩前列腺，以無菌手續自尿道口采取前列腺液送檢。2.女性標本：

(1)成年婦女自宮頸采取標本，應在擴陰器的支持下，選取有炎癥或分泌物部位，先以無菌棉拭子拭去表淺層分泌物，再用另一拭子取分泌物放入無菌試管中立即送檢。如做厭氧或真菌培養應另外采取標本。

(2)如未成年幼女疑患性傳播疾病時，不應使用擴陰器，應以無菌拭子在陰道口處采取分泌物放入無菌試管中立即送檢。

六、胸腹水、腦脊液標本的采集

1.采集方法：（1）腦脊液多由臨床醫生采集，通過腰穿法無菌操作采集腦脊液3～5ml，盛于無菌試管或培養瓶中。

（2）胸腹水均由醫師以無菌手續穿刺取3～5ml，必須應用帶蓋的無菌容器，立即送檢。

2.標本運送與保存：收集到的腦脊液標本應立即送檢，15分鐘內送到實驗室，同時注意保溫，不可置于冰箱保存，否則會使一些細菌死亡（如腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌），影響細菌的檢出率。

七、對不合格標本的處理

微生物室對于下列標本收集不符合規定的標本將予拒收，并通知臨床，按標本要求復送：

1.申請單項目與標本不符。

2.申請單姓名、科別、床號與標本的標簽不符。3.標本已有明顯的污染跡象(如開塞)。4.標本量過少或已明顯干燥。

5.尿培養應留樣于無菌試管或帶蓋無菌杯中。（不合格標本大部分是因為留在尿常規杯中）。尿培養標本不合格者，多以污染而致三種以上雜菌生長居多。特別需杜絕的是一些患者見無菌容器太小直接留取中段尿有難度，于是把小便拉在痰盂等大容器中，再把小便倒在無菌容器中送檢。

6.痰培養應留樣于帶蓋無菌痰杯中。（不合格標本大部分是因為留在尿常規杯中）。痰培養標本不合格者，多以口水居多或口腔污染嚴重。挑取痰標本直接涂片鏡檢，WBC＜10/LP，上皮細胞＞25/LP不適合做細菌培養。

7.大便培養標本不合格者，多以送檢時間過長導致標本干燥無法培養，故大便標本須及時送檢（1小時內，最好在上班時間直接送細菌室檢驗）。