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電阻抗法血液分析儀檢測原理

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第一篇:電阻抗法血液分析儀檢測原理

電阻抗法血液分析儀檢測原理

2009-8-7 9:52 【大 中 小】

電阻抗法血細胞計數原理又名庫爾特原理。

1.紅細胞檢測原理:將等滲電解質溶液稀釋的細胞懸液置入不導電的容器中,將小孔管(也稱傳感器)插進細胞懸液中。小孔管內充滿電解質溶液,并有一個內電極,小孔管的外側細胞懸液中有一個外電極。當接通電源后,位于小孔管兩側電極產生穩定電流,稀釋細胞懸液從小孔管外側通過小孔管壁上寶石小孔(直徑<100μm,厚度約75μm)向小孔管內部流動,使小孔感應區內電阻增高,引起瞬間電壓變化形成脈沖信號,脈沖振幅越高,細胞體積越大,脈沖數量越多,細胞數量越多,由此得出血液中血細胞數量和體積值。

電阻抗原理示意圖

三分類血球分析儀工作原理示意圖

2.白細胞分類計數原理

根據電阻抗法原理,經溶血劑處理的、脫水的、不同體積的白細胞通過小孔時,脈沖大小不同,將體積為35~450fl白細胞,分為256個通道,其中,淋巴細胞為單個核細胞、顆粒少、細胞小,位于35~90fl的小細胞區,粒細胞(中性粒細胞)的核分多葉、顆粒多、胞體大,位于160fl以上的大細胞區,單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、原始細胞、幼稚細胞等,位于90~160fl的單個核細胞區,又稱為中間型細胞。儀器根據各亞群占總體的比例,計算出各亞群細胞的百分率,醫學教育網整理并同時計算各亞群細胞的絕對值,顯示白細胞

體積分布直方圖。

3.血紅蛋白測定原理

當稀釋血液中加入溶血劑后,紅細胞溶解并釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血劑中的某些成分結合形成一種血紅蛋白衍生物,在特定波長(530~550nm)下比色,吸光度變化與稀釋液中Hb含量成正比,最終顯示Hb濃度。不同類型血液分析儀,溶血劑配方不同,所形成血紅蛋白衍生物不同,吸收光譜不同,如含氰化鉀的溶血劑,與血紅蛋白醫學教育網整理作用后形成氰化血紅蛋白,其最

大吸收峰接近540nm。

第二篇:電阻抗法血液分析儀檢測原理

電阻抗法血液分析儀檢測原理

電阻抗

電阻抗法血液分析儀檢測原理 2009-8-7 9:52 【大 中 小】 電阻抗法血細胞計數原理又名庫爾特原理。

1.紅細胞檢測原理:將等滲電解質溶液稀釋的細胞懸液置入不導電的容器 紅細胞檢測原理 中,將小孔管(也稱傳感器)插進細胞懸液中。小孔管內充滿電解質溶液,并有 一個內電極,小孔管的外側細胞懸液中有一個外電極。當接通電源后,位于小孔 管兩側電極產生穩定電流,稀釋細胞懸液從小孔管外側通過小孔管壁上寶石小孔(直徑<100um,厚度約 75um)向小孔管內部流動,使小孔感應區內電阻增高,引起瞬間電壓變化形成脈沖信號,脈沖振幅越高,細胞體積越大,脈沖數量越多,細胞數量越多,由此得出血液中血細胞數量和體積值。

三分類血球分析儀工作原理示意圖

2.白細胞分類計數原理 根據電阻抗法原理,經溶血劑處理的、脫水的、不同體積的白細胞通過小孔 時,脈沖大小不同,將體積為 35~450fl 白細胞,分為 256 個通道,其中,淋巴 細胞為單個核細胞、顆粒少、細胞小,位于 35~90fl 的小細胞區,粒細胞(中 性粒細胞)的核分多葉、顆粒多、胞體大,位于 160fl 以上的大細胞區,單核細 胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、原始細胞、幼稚細胞等,位于 90~160fl 的 單個核細胞區,又稱為中間型細胞。儀器根據各亞群占總體的比例,計算出各亞 群細胞的百分率,醫學教育網整理并同時計算各亞群細胞的絕對值,顯示白細胞 體積分布直方圖。

3.血紅蛋白測定原理 當稀釋血液中加入溶血劑后,紅細胞溶解并釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶 血劑中的某些成分結合形成一種血紅蛋白衍生物,在特定波長(530~550nm)下比色,吸光度變化與稀釋液中 Hb 含量成正比,最終顯示 Hb 濃度。不同類型 血液分析儀,溶血劑配方不同,所形成血紅蛋白衍生物不同,吸收光譜不同,如 含氰化鉀的溶血劑,與血紅蛋白醫學教育網整理作用后形成氰化血紅蛋白,其最 大吸收峰接近540nm。

第三篇:血液分析儀五分類技術原理

血液分析儀五分類技術原理

隨著電子技術、流式細胞技術、激光技術、電子計算機技術和新熒光化學物質等各種高新技術在血細胞分析儀中的應用.使血細胞分析儀的檢測原理不斷完善、測量參數不斷增加、檢測水平不斷提高.尤其在白細胞五分類技術方面,已發展到利用多項技術(如射頻、細胞化學染色、流式細胞術和熒光染色技術等)聯合同時檢測一個白細胞.再用先進的計算機技術區分、辨別經上述方法處理后的各自細胞間的細胞差別.綜合分析實驗數據,得出較為準確的白細胞分類結果。為臨床疾病的診斷、治療提供了重要的實驗室依據。近年來。可以對白細胞進行五分類計數的血細胞分析儀已經普遍使用。本文就目前血細胞五分類測定中常用技術及其最新應用進展作一綜述。血細胞五分類技術的原理

1.1 流式細胞術

流式細胞術(flow cytometry,FCM)是一種綜合應用光學、機械學、流體力學、電子計算機、細胞生物學、分子免疫學等學科技術,使被測溶液流經測量區域,并逐一檢測其中每一個細胞的物理和化學特性,從而對高速流動的細胞或亞細胞進行快速定量測定和分析的方法。首先,待測細胞經處理或染色后被壓人流動室,與此同時,不含細胞的緩沖液在高壓下從鞘液管噴出,鞘液管人口方向與待測樣品流成一定角度,這樣鞘液就能被包繞著樣品高速流動,組成一個圓形的流束,待測細胞在包繞下單行排列,依次通過檢測區域.在激光束的照射下產生散射光和激發熒光。這兩個光源信號分別反映了細胞體積的大小和內部的信息.經光電倍增管接收后可轉換為電信號,再通過模,數轉換器.將連續的電信號轉換為可被計算機識別的數字信號,經計算機處理,可將分析結果顯示在屏幕上。

為了保證細胞單個排列地逐一通過檢測區域,鞘流技術在流式細胞術中被廣泛應用。根據層流理論,由于兩種液體的流速和壓力不同。在一定條件下樣品溶液與包裹它的鞘液在流動中可以保持相互分離并且同軸。同時鞘液流可以加速樣品溶液中顆粒的流動并迫使他們的流動軌跡保持在液流的中軸線上,使細胞單排列地逐一通過檢測區域,這便是所謂的液流聚焦原理

1_2 阻抗法 根據庫爾特原理,將不良導體血液按一定比例稀釋于等滲的電解液中,在小孔電極的兩側加一恒流源.在負壓作用下,使稀釋的血細胞通過小孔。當細胞通過截面時會由于電阻增大產生相應的脈沖,其脈沖的幅度與細胞的體積成正比,脈沖的頻度與細胞的數量成正比。這便是著名的庫爾特原理或稱變阻脈沖原理。利用庫爾特原理可以有效地區分淋巴及單核細胞。1.3 激光散射法/多角度偏振光散射技術

根據光散射理論,當激光照射到流動室內流過的每一個細胞時,由于細胞的物理特性,部分光線從細胞上經不同的角度散射。其中,前向小角度散射光的光強可以反應細胞體積;大角度散射光的光強可以反應細胞核,漿復雜度和細胞顆粒的信息;而側向散射光的光強可以反應細胞膜、核膜、細胞質的變化。因此,可以依據細胞表明光散射的特點對細胞進行分類。www.tmdps.cn用激光光源產生的單色光束直接進入計數池的敏感區,在不同角度(10度~7O度)對每個細胞進行掃描分析,測定其散射光強度,從而提供細胞結構、形態的光散射信息。由于粗顆粒細胞的散射強度比細顆粒細胞更強,故光散射對細胞顆粒的構型和顆粒質量具有很好的區別能力。

多角度偏振散射技術用偏振激光束射照單個排列細胞,并進一步分辨細胞。該技術采用了l0度窄角和偏振加消偏振檢測法,分辨能力有所提高。它首先測試中性,單核細胞,用0度~90度的散射數據,再測得90度D的衍射差,將嗜酸性和中性細胞分開.而嗜堿性粒細胞、淋巴細胞及單核細胞則按其大小和內部結構不同的復雜性,所產生的散射光也各異,用可調較的門限加以區分。其采用特定程序自動儲存分析數據,并經計算機軟件處理,在屏幕上顯示6個散點圖和2個直方圖。

1.4 各種細胞化學特性應用技術

利用五種白細胞自身不同的化學性質.應用相應的化學試劑加以區分

由于嗜酸性(或嗜堿性)粒細胞均有較強的堿性(或酸性),因此在特殊的溶血劑作用下,經過特定時間及溫度的孵育,可使除嗜酸性(嗜堿性)粒細胞之外的所有細胞溶解或萎縮.經處理之后的細胞根據阻抗脈沖計數法,可得相應嗜酸性(嗜堿性)細胞有效數值。

利用五種白細胞過氧化物酶活性的差異對白細胞進行染色,測定其酶反應強度,對白細胞進行分析。血液中五種白細胞的過氧化物酶活性排列順序為:嗜酸性粒細胞>中性粒細胞>單核細胞。淋巴細胞和嗜堿性粒細胞均無過氧化物酶。將待測血液加入清洗劑和甲醛的等滲液體內經孵育,再加入過氧化氫和四氯一萘酚,細胞內過氧化酶分解產生氧離子,使四氯一萘酚顯色并沉淀,并定位于酶反應部位。根據酶反應強度的不同,利用光電檢測技術測定相應吸光度值的方法,用以區分嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、單核細胞。

1.5 電導,射頻法

與早期的三分類血液分析儀利用庫爾特原理不同的是,它在內外電極上加了一個RF射頻發生器。RF是射頻電流的簡稱.它是一種高頻交流變化電磁波。按照工作頻率的不同,RF可以分為低頻(LF)、高頻(HF)、超高頻(UHF)和微波等不同種類.不同頻段的RF工作原理不同,和HF頻段一般采用電磁耦合原理,而UHF及微波頻段的RF一般采用電磁反射原理。在血液分析儀中多采用高頻電磁波,其原理是交變電流通過導體時,會在導體周圍形成交變電磁場,形成電磁波。因導體的密度及導電性質等差異,其周圍所形成的電磁場也不相同。因此當射頻電流穿透細胞膜透入胞內時,由于核的大小、化學組分、顆粒多少以及漿核比例的不同,使RF信號發生不同的變化。借此可以將體積大小相同但內部結構不同的細胞區分開來,如淋巴細胞與嗜堿性細胞。

1.6 熒光法

利用不同細胞的細胞膜、胞內因子以及胞內DNA、RNA、胞內離子鈣等不同染色特性,選用具有特異性抗原或抗體的熒光染料載體,使待分離的細胞分別標記相應的熒光物質,經過特定波長的激光照射激發出不同波長的熒光,利用各種PMT管檢測熒光信號的個數,可以完成待檢細胞的計數 如進一步分析計數淋巴細胞或網織紅細胞等 血細胞五分類技術的應用及展望

2.1 五分類血液分析儀的現狀

全自動五分類血細胞分析儀是多學科相互交叉、滲透、綜合的產物,涉及技術領域包括電子技術、計算機技術、傳感器技術、信號處理技術、生物化學、臨床醫學、精密機械、光學、自動控制、流體力學等領域。絕大多數“五分類”分析儀采用了流式細胞分析方法,而聯合檢測法則代表了五分類血細胞分析儀的最新發展趨勢。

BECKMAN COULTRER GENS全自動五分類血球分析儀采用其獨特的VCS技術,其中V(體積法)用于分析細胞體積;C(電導法)用于分析細胞核型;S(散射法)則用于分析細胞的顆粒特性。測試時。患者標本經過分血片等樣本分配系統進入攪拌杯中,再加入溶血劑攪拌.溶血.完全破壞紅細胞,剩下的白細胞在樣本壓力作用下進入流式通道。運用VCS聯合檢測方法,在流式通道的某一位點。對通過的單列白細胞,進行逐個的、同時的、三重的檢測以及三維分析,以確定其亞群性質。

雅培公司新推出的CELL-DYN Ruby全自動血液分析儀運用合并流式細胞術及多角度偏振散射分離技術檢測白細胞。其采用多角度偏振散射技術對白細胞進行區分和按序分離,通過四個角度的光學檢測進行白細胞分析。其中,0度用于區分細胞體積大小;10度用于區分細胞的復雜性;90度用于區分細胞核的分葉性;90度D用于區分細胞的顆粒性。通過90度偏振和90度去偏振區分嗜酸性粒細胞和嗜中性粒細胞,同時通過多個散點圖分析來鑒別和分類未成熟細胞和干擾物質。

拜爾公司的ADV IA120利用化學特性中過氧化物酶活性與激光散射技術結合原理進行白細胞五分類測定。該儀器有4個測量通道:血紅蛋白測量通道、紅細胞/血小板測量通道、嗜堿性粒細胞測量通道、過氧化物酶測量(白細胞分類)通道。其利用五種白細胞過氧化物酶活性的差異對白細胞進行染色.測定其酶反應強度,對自細胞進行分析。在測試過程中.每個細胞產生2個信號:組化染色結果與光散射結果。www.tmdps.cn以X軸代表吸光率(組化染色酶反應強度),Y 軸代表光散射(細胞大小),一起定位于細胞圖上(cytogram)。計算機系統對存儲資料進行分析處理,并結合嗜堿性或分葉細胞通道結果計算出白細胞總數及分類。值得一提的是,該設備對RBC及PLT的測定也摒棄了傳統的阻抗法,而是采用激光法對其進行測定的。

希森美康(SYSMEX)公司五分類血液分析儀的檢測原理按生產時間的先后可分為三大類:多通道阻抗與射頻聯合檢測技術.代表機型有SE一9000;激光流式細胞檢測結合細胞組化染色技術,代表機型有SF一3000;激光流式細胞檢測結合核酸熒光染色技術,代表機型有SF一2l00。SYSMEX XE一2100全自動血細胞分析儀是綜合了前向散光、側向散光和側向熒光三種光學檢查技術,結合電阻抗技術來進行白細胞分類的。直流電阻抗法(DC)用于測量細胞體積大小。激光散射產生的前向散射光、側向散射光可用于探測白細胞體積大小、細胞內含物的情況(細胞核以及顆粒情況),側向熒光則可以反映細胞內脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量。綜合各個測量方法,得到白細胞五分類的圖形和數據。SYSMEX XT一2000i全自動血液分析儀運用核酸熒光染色技術,配合激光流式分析系統,保證了精確的WBC五項分類結果。

HORIBA ABX 公司生產的Pentra系列五分類血液分析儀采用獨有的雙鞘流通道,結合阻抗法、化學染色技術及吸光度法對白細胞進行精確的分析。流式通道內有兩個檢測裝置,60um的鞘流微孔用于阻抗法體積檢測,42um 的光窗用于吸光度測定分析細胞內容物。實現對大量細胞進行的順序、快速、準確地分析與測定。以上所介紹的幾種血液分析儀是目前我國醫療機構常見的具有代表性的幾種測定白細胞五分類的機型。另外,日本光電公司生產的MEK一8222K在中國的擁有量也較大.因其工作原理與雅培公司的CELL—DYN Ruby相似.也是采用半導體激光法和多角度激光散射技術,只是試劑的配方有所區別,因此不再贅述。

國內邁瑞公司生產的BC一5500的白細胞分類結合了液流聚焦技術、激光散射技術和化學染色技術。其光源采用半導體激光系統,通過多角度的激光散射,提供細胞的大小、細胞核、細胞顆粒大小及復雜性的信息.并結合試劑對嗜酸性細胞和嗜堿性細胞的特異處理,將嗜酸性細胞和嗜堿性細胞區分開來,剛篩選出各類異毒細胞,實現精確的五分類檢測結果。

由于不同儀器的檢測原理及相關試劑的差異,各類設備均有其相應的特點。總體來講,光學檢測法結合特種化學試劑如染色物質等.由于其針對某一被檢物質的特異性,因此其測定及分析結果較電阻法精確度要高,但相應的試劑成本加大,同時對操作人員及環境的要求也會有所提高。

2.2 五分類血液分析儀的展望

從五分類血液分析儀的發展進程可以看出,臨床對血細胞的分析已不滿足于簡單的對WBC、RBC、PLT的計數,而是更傾向對于其各類細胞及其亞群的進一步分析,包括從細胞內部的DNA,RNA及免疫等方面進行分析。岡此,血細胞分析儀已從對細胞的簡單的物理性能的研究轉向對細胞內部化學性質及免疫性質的研究方向發展,即從細胞學向分子生物學,從分子生物學向免疫學方向發展。同時,隨著工業科技的進步,儀器的精度、速度、集成化、一體化的程度會更高,相信在不久的將來會有更先進的血液分析系統面世。

第四篇:血液分析儀參數

BC-5180CRP招標參數

1.*儀器功能:一次進樣同時進行血細胞五分類檢測和C-反應蛋白檢測(五分類血液細胞分析儀+CRP反應一體機)。

2.檢測原理:采用激光散射法對白細胞進行五分類檢測,采用免疫比濁法進行C-反應蛋白(CRP)測定。

3.分類通道:具有獨立的嗜堿性粒細胞通道

4.*檢測參數:≥26項可報告參數(不含散點圖和直方圖)

5.研究參數:≥6項,具有異常淋巴細胞、有核紅細胞和原始細胞報警信息 6.*進樣方式:全自動批量進樣,單個封閉進樣

7.檢測模式:具有獨立CRP、五分類+CRP等3種以上全血檢測模式 8.樣本添加:可隨時添加樣本 9.進樣器容量:≥40個

10.進樣模式:具有獨立的靜脈全血、末梢全血、預稀釋血檢測模式 11.樣本用量:五分類+CRP模式≤40μl,CRP模式≤20μl 12.*檢測速度:五分類+CRP模式≥50個樣本/小時

13.預稀釋模式:自動定量分注稀釋液,具備五分類+CRP功能 14.WBC線性范圍:0~400×109/L 15.*CRP線性范圍:0.2~320mg/L 16.CRP攜帶污染:≤1.0%

17.操作系統:全中文操作分析報告軟件 18.排堵方式:正反沖洗,高壓灼燒

19.具有原廠配套的試劑、校準品、質控品,并提供校準品溯源性文件 20.工作電壓:(100V-240V~)允差±10% 21.維修服務:山東省有經過工商注冊的廠家維修服務機構 22.同系列五分類血球儀山東地區裝機≥100臺

第五篇:人體成分分析儀是采用生物電阻抗法測量人體的脂肪量(本站推薦)

人體成分分析儀是采用生物電阻抗法測量人體的脂肪量、去脂體重、肌肉量、水分含量、蛋白質含量、無機質含量等人體成份的設備,提供有關體脂百分比、體質指數、體型評估、階段評估、調節指南、基礎代謝量、腹型肥胖、身體年齡等方面的實測數據及過去數據

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