第一篇：第五章 微生物的營養和培養基習題整理（最終版）

第五章 微生物的營養和培養基

一、選擇題

1.大多數微生物的營養類型屬于：（）

A.光能自養

B.光能異養

C.化能自養

D.化能異養 2.藍細菌的營養類型屬于：（）

A．光能自養

B.光能異養

C．化能自養

D.化能異養 3.碳素營養物質的主要功能是：（）

A.構成細胞物質

B.提供能量

C.A，B 兩者 4.占微生物細胞總重量70%-90% 以上的細胞組分是：（）

A.碳素物質

B.氮素物質

C.水 5.能用分子氮作氮源的微生物有：（）

A.酵母菌

B.藍細菌

C.蘇云金桿菌 6.大腸桿菌屬于（）型的微生物。

A.光能無機自養

B.光能有機異養

C.化能無機自養

D.化能有機異養 7.自養型微生物和異養型微生物的主要差別是：（）

A.所需能源物質不同

B.所需碳源不同

C.所需氮源不同 8.基團轉位和主動運輸的主要差別是：（）

A.運輸中需要各種載體參與

B.需要消耗能量

C.改變了被運輸物質的化學結構 9.單純擴散和促進擴散的主要區別是：（）

A.物質運輸的濃度梯度不同

B.前者不需能量，后者需要能量

C.前者不需要載體，后者需要載體

10.微生物生長所需要的生長因子（生長因素）是：（）

A.微量元素

B.氨基酸和堿基

C.維生素

D.B，C二者 11.培養基中使用酵母膏主要為微生物提供：（）

A.生長因素

B.C 源

C.N 源 12.細菌中存在的一種主要運輸方式為：（）

A.單純擴散

B.促進擴散

C.主動運輸

D.基團轉位 13.微生物細胞中的C素含量大約占細胞干重的：（）

A.10%

B.30%

C.50%

D.70% 14.用牛肉膏作培養基能為微生物提供：（）

A.C 源

B.N 源

C.生長因素

D.A，B，C 都提供 15.下列物質可用作生長因子的是（）。A.葡萄糖

B.纖維素

C.NaCl

D.葉酸 16.藍細菌和藻類屬于（）型的微生物。

A.光能無機自養

B.光能有機異養

C.化能無機自養

D.化能有機異養 17.某種細菌可利用無機物為電子供體而以有機物為碳源屬于（）型的微生物。A.兼養型

B.異養型

C.自養型

D.原養型

18.實驗室培養細菌常用的培養基是（），培養放線菌的是（），培養真菌的是（A.牛肉膏蛋白胨培養基

B.馬鈴薯培養基

C.高氏一號培養基

D.查氏培養基

19.培養百日咳德氏菌的培養基中含有血液，這種培養基是（）。A.基礎培養基

B.加富培養基

C.選擇培養基

D.鑒別培養基 20.下列培養基（）是合成培養基

A.LB培養基

B.牛肉膏蛋白胨培養基

C.麥芽汁培養基 D.查氏培養基 21.用來分離固氮菌的培養基中缺乏氮源，這種培養基是一種（）。A.基礎培養基

B.加富培養基

C.選擇培養基

D.鑒別培養基 22.水分子可以通過（）進入細胞。

A.主動運輸

B.擴散

C.促進擴散

D.基團轉位 23.需要載體但不能逆濃度運輸的是（）。

A.主動運輸

B.擴散

C.促進擴散

D.基團轉位 24．實驗室常用的培養細菌的培養基是（）

A牛肉膏蛋白胨培養基 B.馬鈴薯培養基

C.高氏一號培養基

D.麥芽汁培養基 25．下列物質屬于生長因子的是（）

A．葡萄糖

B．蛋白胨

C．NaCl

D．維生素

26．培養料進入細胞的方式中運送前后物質結構發生變化的是（）A.主動運輸

B.被動運輸

C.促進擴散

D.基團移位 27．E．coli屬于（）型的微生物。

A.光能自養.B.光能異養

C.化能自養

D.化能異養 28．實驗室常用的培養放線菌的培養基是（））。A 牛肉膏蛋白胨培養基 B.馬鈴薯培養基

C.高氏一號培養基

D.麥芽汁培養基 29．酵母菌適宜的生長PH值為（）A.5.0-6.0 B.3.0-4.0 C.8.0-9.0 D.7.0-7.5 30．細菌適宜的生長PH值為（）A 5.0-6.0 B.3.0-4.0 C.8.0-9.0 D.7.0-7.5 31．藍細菌屬于（）型的微生物。

A.光能自養

B.光能異養

C.化能自養

D.化能異養 32．硝化細菌屬于（）型的微生物。

A.光能自養

B.光能異養

C.化能自養

D.化能異養 33．培養硝化細菌的碳源、氮源、能源依次是（）A．葡萄糖、氨、葡萄糖

B．葡萄糖、銨鹽、太陽能 C．二氧化碳、硝酸鹽、氨

D．二氧化碳、氨、太陽能 34．藍藻常利用的碳源、氮源依次為（）A．CO2、氨基酸

B．氨基酸、葡萄糖 C．CO2、硝酸鹽

D．葡萄糖、蛋白胨

35．微生物需要的營養物質中需要量最大的是（）A．碳源

B．氮源

C．生長因子

D．無機鹽 36．下列有關碳源的敘述，不正確的是（）

A．碳源主要用于構成微生物的細胞物質和一些代謝產物 B．某些碳源可以作為微生物的主要能源物質

C．蛋白質一定不能作碳源

D．不同種類的微生物的碳源可能不同 37．下列關于生長因子的敘述不正確的是（）

A．生長因子是指微生物生長不可缺少的微量有機物

B．一般是酶、核酸的組成部分 C．自身不能合成，必須由外界補充

D．主要包括維生素、氨基酸和堿基等 38．大腸桿菌屬于（）型的微生物。

A.光能無機自養

B.光能有機異養

C.化能無機自養 D.化能有機異養 39．硝化細菌屬于（）型的微生物。

A.光能無機自養

B.光能有機異養

C.化能無機自養 D.化能有機異養 40．某種細菌可利用無機物為電子供體而有賈稀為碳源，屬于（）型的微生物。A.兼養型

B.異養型

C.自養型

D.原養型

41、化能無機自養微生物可利用（）為電子供體。A.CO2

B.H2

C.O2

D.H2O 42．用來分離產胞外蛋白酶菌株的酪素培養基是一種（）。A.基礎培養基

B.加富培養基

C.選擇培養基

D.鑒別培養基 43.固體培養基中瓊脂含量一般為（）。A.0.5%

B.1.5%

C.2.5%

D.5% 44．用來分離固氮菌的培養基中缺乏氮源，這種培養基是一種（）。A.基礎培養基

B.加富培養基

C.選擇培養基

D.鑒別培養基 45．水分子可通過（）進入細胞。

A.主動運輸

B.擴散

C.促進擴散

D.基團轉位 46．被運輸物質進入細胞前后物質結構發生變化的是（）。A．主動運輸

B.擴散

C.促進擴散

D.基團轉位 47.以下碳源中，微生物優先利用的是（）

A.葡萄糖

B.蔗糖

C.淀粉

D.纖維素

二、是非題

1.最常用的固體培養基的凝固劑是瓊脂。（）

2.大多數微生物可以合成自身所需的生長因子，不必從外界攝取。（）3.培養基按其制成后的物理狀態可分固體.液體和半固體培養基。（）4.碳源對微生物的主要作用是構成細胞骨架和提供能源。（）

5.實驗室做固體培養基時；常加1-2%的瓊脂作凝固劑；做半固體培養基時，瓊脂加入量通常是0.5%。（）

6.促進擴散必須借助于特異載體蛋白和能量。（）

7.營養物跨膜的主動運輸必需依靠載體和能量，而被動擴散不需要載體和能量。（）8.微生物的碳源物質既提供碳素營養，又提供微生物代謝能量。（）9.微生物可以合成自身所需的生長因子，不必從外界攝取。（）

10.對含葡萄糖的培養基進行高壓蒸汽滅菌時可在121.3℃加熱20min即可。（）11.半固體培養基常用來觀察微生物的運動特征。（）

12.在用于分離G+細菌的選擇培養基中可加入結晶紫抑制G-細菌的生長。（）13．培養營養缺陷型微生物的培養基必須同時加入維生素、氨基酸、嘌呤及嘧啶。（）14．為使微生物生長旺盛，培養基中營養物質的濃度越高越好。（）15．伊紅美藍（EMB）培養基中，伊紅美藍的作用是促進大腸桿菌的生長。（）１6．在固體培養基中，瓊脂的濃度一般為0.5—1.0%．（）

17．主動運輸是廣泛存在于微生物中的一種主要的物質運輸方式。（）18.光能自養菌和化能自養菌都利用二氧化碳作碳源合成細胞有機物。（）

19.基團轉位運輸方式中, 除了在運輸過程中物質發生化學變化這一特點外, 其它特征均與主動運輸方式相同。（）

20.單純擴散不能進行逆濃度運輸, 而促進擴散則能進行逆濃度運輸。（）

三、填空題

1.實驗室常用的有機氮源有____________和____________等, 培養基按其制成后的物理狀態可分為____________、____________和____________。

2.在營養物質運輸中需要載體參加的運輸方式是__________、__________和__________，其中乳糖通過__________ 方式運輸，3.光能異養菌以__________作能源，以__________為碳源，以__________作供H體將__________合成細胞有機物。

4.化能自養菌以__________取得能量，以__________作碳源合成細胞有機物。

5.根據微生物生長所需要的碳源和能源的不同，可把微生物分為________、______、______、_______ 四種營養類型。

6.在營養物質的四種運輸方式中，只有__________運輸方式改變了被運輸物質的化學組成。7.微生物所需要的營養物質包括__________、__________、_________、__________和另一種不可缺少的物質__________。

8.化能自養型和化能異養型微生物，生長所需的能量前者來自于__________的氧化放能、而后者則來自于__________的氧化放能，生長所需的碳源前者以__________為主,后者則以__________為主要來源。

9.主動運輸運送營養物質的方式主要存在于好氧細菌中，它能將________、_________、___________運進微生物細胞。

10.在營養物質運輸中，能逆濃度梯度方向進行營養物運輸的運輸方式是__________、__________。

11.在營養物質運輸中既消耗能量又需要載體的運輸方式是____________________。12.光能自養型和光能異養型微生物的共同點是都能利用__________；不同點在于前者能以__________作唯一碳源或主要碳源，而后者則以__________作主要碳源，前者以__________作供氫體而后者則以__________作供氫體。

13.生長因子主要包括__________、__________和__________，其主要作用是____________________、____________________。

14．根據__________，微生物可分為自養型和異養型；根據__________，微生物可分為光能營養型和化能營養型；根據__________，微生物可分為無機營養型和有機營養型。15.在營養物質運輸中, 能逆濃度梯度方向進行營養物運輸的運輸方式是 __________, __________。

16.在營養物質運輸中順濃度梯度方向運輸營養物質進入微生物細胞的運輸方式是 __________ 和 __________。

17．根據碳源、能源和電子供體性質的不同，微生物的營養類型可分為__________、__________、__________ 和__________。

18．按用途劃分，培養基可分為__________、___

_______、__________和____ ______等4種類型。

19．常用的培養基凝固劑有__________、__________和__________。

20.11．實驗室常用的有機氮源有__________ 和__ __等，無機氮源有__ __和__________ 等；為節約成本，工廠中常用___ __等作為有機氮源。21.在營養物質運輸中既消耗能量又需要載體的運輸方式是__________, __________。22.微生物的營養類型, 根據其所需C素營養物質的不同, 分為 __________ 和 _________； 根據其生長所需的能量來源不同分為 __________ 和 __________。23.化能自養型和化能異養型微生物, 生長所需的能量前者來自于 __________ 的氧化放能, 而后者則來自于 __________ 的氧化放能； 生長所需的碳源前者以 __________ 為主, 后者則以 __________ 為主要來源。

四、解釋題

1.碳氮比； 2.光能自養型； 3.化能自養型； 4.化能異養型； 5.水活度； 6.培養基； 7.生長因子； 8.單純擴散； 9.主動運輸； 10.天然培養基 11.基團移位； 12．選擇培養基； 13．基礎培養基； 14．合成培養基；

五、簡答題

1.微生物需要哪些營養物質，它們各有什么主要生理功能？ 2.試述劃分微生物營養類型的依據，并各舉一例微生物說明之。3.試比較營養物質進入微生物細胞的幾種方式的基本特點。

4.舉例說明微生物在生長過程中培養基pH值可能發生的變化，并提出解決方法。5.簡述固體培養基的配制和滅菌方法。

6.以EMB（伊紅美藍乳糖瓊脂培養基）為例，分析鑒別培養基的作用原理。

7．列表比較微生物的四大營養類型。8．配制培養基的原則和方法是什么？ 9．四種物質運輸方式的比較

10．何謂培養基？培養基有哪些類型？

第二篇：微生物實驗室培養基制作個人總結

一．培養基的制備

儀器材料 微波爐、高壓滅菌器、玻璃器皿、三角瓶，PH試紙、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、氯化鈉、氫氧化鈉。操作方法

１． 肉湯培養基制作 ⑴成分

肉浸膏（0.3%牛肉膏）500ml 蛋白胨 5g 氯化鈉 2.5g 磷酸氫二鉀 0.5g ⑵準備工作 配制調節PH用的0.1M氫氧化鈉和1M氫氧化鈉溶液。⑶操作

①稱取牛肉膏，放入玻璃皿中，另入適量蒸餾水配成0.3%。②按比例加入適量蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀攪拌。③攪拌加熱至完全溶解。

④PH值調至7.8，煮沸10min，站足水分。

⑤待冷至40～50℃時，過濾。濾液分裝于無菌試管內（達試管的1/3）或每管加4-5ml。塞好棉塞。

⑥置高壓滅菌器內高壓滅菌（121.3℃，20分鐘即可）2．普通瓊脂培養基制作

⑴成分 肉湯培養基 500ml 瓊脂 8-15g ⑵制法

①先矯正肉湯培養基PH值。

②加入適量瓊脂煮沸溶解，矯正PH值至7.4～7.6。③滅菌后使雜質沉淀。

④取其上清液滅菌后分裝。倒入無菌平皿內凝固即成普通瓊脂平板。

二、平板劃線接種法 【方法】

1． 在平板底面上用記號筆作好標記，如菌種、班級，姓名、接種日期等，并在平板底面邊緣作一原劃線標記。

2．右手拿接種環，燒灼滅菌并冷卻后，取混合菌液少許。3．左手斜持（45°角）瓊脂平板，略開蓋，平板在乙醇燈火焰左前上方約5～6cm距離。右手持已取標本的接種環在瓊脂平板表面之一側邊緣，作原劃線，見圖5-2A。

4．接種環燒灼滅菌，冷卻后自原劃線末端沾取少許標本，使接種環與平板表面成30～40°角，運用腕力將接種環在平板上來回劃線，見圖5-2B。劃線要密但不能重疊，充分利用平板的表面積，不要劃破瓊脂表面，并注意無菌技術，避免空氣中細菌的污染。也可用分區劃線法，即從原劃線末端沾取標本后只劃平板的1/5～1/4，劃畢燒灼滅菌接種環，冷后同樣劃線，共計4～5次。接種環燒灼滅菌后方可放下（圖5-2C、D、E）。

三.細菌在培養基中生長特性的觀察 1.瓊脂培養基 ⑴大小

⑵形狀：圓形、不整形、針尖狀、露滴狀、同心圓狀、顆粒狀。⑶邊緣：整齊、波浪狀、鋸齒狀、卷發狀。

⑷表面性狀：光滑、粗糙、同心圓狀、放射狀、皺狀、顆粒狀。⑸濕潤度：濕潤、干燥。

⑹隆起度：表面隆起、輕度隆起、中央隆起、扣狀扁平。

⑺色澤及透明度：無色、白色、黃色、橙色、紅色；透明、半透明、不透明。⑻質地：堅硬、柔軟、粘稠。

⑼溶血性：α型溶血 菌落周圍有透明溶血環。

β型溶血 半透明帶綠色溶血環。

γ型溶血 不溶血。

藥物敏感試驗

基本原理

細菌對抗菌藥物的敏感試驗，通常簡稱為細菌的藥敏試驗。在給患傳染病動物進行治療時，測定細菌對藥物的敏感性，不僅有助于選擇合適的藥物，而且可為藥物的用量提供依據。某種細菌對藥物的敏感度，是指抑制該細菌生長所需的最低藥物濃度。細菌在體外的敏感度和臨床的療效大體是符合的，但也有不一致者。目前供藥敏試驗的方法很多，可歸納為兩大類，即稀釋法和擴散法。有的以抑制細菌生長為評定結果的標準，有的則以殺滅細菌為標準。一般可報告為某菌對某抗菌藥物敏感、輕度敏感或耐藥。

稀釋法是將抗菌藥物稀釋為不同的濃度，作用于被檢菌株，定量測定藥物對細菌的最低抑菌濃度(minimal inhibition concentration, MIC)或最低殺菌濃度(minimal bacteriocidal concentration, MBC)，可在液體培養基或固體培養基中進行。

擴散法（diffusion method）是將抗菌藥物置于已接種待測細菌的固體培養基上（或內），抗菌藥物通過向培養基內的擴散，抑制敏感菌的生長，從而出現抑菌環（帶）。藥物擴散的距離越遠，達到該距離的藥物濃度就越低，故可根據抑菌環的大小，判斷細菌對藥物的敏感度。抑菌環（帶）邊緣的藥物含量即該藥物的敏感度。此法操作簡便，容易掌握，但只用于定性。因受紙片含藥量不均及接種量等多種因素影響，結果不夠準確，因此試驗時應同時設立已知敏感度的標準菌株作為對照。

器材準備

1．菌種 大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、炭疽桿菌。

2．藥敏試紙 含青霉素、鏈霉素、慶大霉素、氯霉素、磺胺嘧啶等藥敏試紙，分裝于滅菌平皿中。

3．培養基 普通肉湯、普通瓊脂平板培養基。

4．其他 95％酒精、小鑷子、麥氏比濁管、1mL刻度吸管、橡皮膠頭等。

實驗步驟

1．試管雙倍稀釋法

（1）抗生素原液的配制及保存：將抗生素制劑無菌操作溶于適宜的溶劑如蒸餾水、磷酸鹽緩沖液中，稀釋至所需濃度。抗生素的最初稀釋劑通常用蒸餾水，但是有些抗生素必須用其它溶劑作初步溶解。常用抗生素原液的溶劑和最初稀釋劑見表6-1。若制劑中可能含有雜菌，配制后宜用細菌濾器過濾除菌（可用玻璃濾器或微孔濾膜，孔徑0.22?m，但不可用纖維墊濾器）。分裝小瓶，在－20℃冷凍狀態下保存，可保存3個月或更久，每次取出一瓶保存于4℃冰箱，可用1周左右。

（2）培養基：一般采用普通肉湯培養基。如細菌生長緩慢，可加入0.25％～1％葡萄糖或5％～10％血清。

（3）方法：被測菌種懸液的制備：將較多量的菌種移種于肉湯培養管中，置37℃溫箱中培養6h（生長緩慢者可培養過夜），使生長濁度達9×108個/mL（相當于麥氏比濁管第3管）。

抗生素溶液的雙倍連續稀釋：取13×100mm滅菌帶棉塞試管13支（管數多少可依具體需要而定）。另將上述菌液作1︰10 000倍稀釋（生長緩慢的細菌可稀釋1︰1 000或更少），除第1管加入稀釋菌液1.8mL外，其余各管均各加1.0mL。繼于第1管加入抗生素原液0.2mL，混合后吸出1.0mL加入第2管中，用同法依次稀釋至第12管，棄去1.0mL。第13管為生長對照。

表6-1 抗生素原液的溶劑和稀釋劑

抗生素

丁胺卡那霉素 氯芐青霉素 桿菌肽 羧芐青霉素 頭孢羥唑 頭孢唑林 頭孢甲氧霉素 頭孢菌素I 氯霉素 氯潔霉素 多粘菌素B或E 紅霉素

溶劑 蒸餾水

0.1mol/L PBS（pH值8.0）

蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水

0.1mol/L PBS（pH值8.0）

甲醇 蒸餾水 蒸餾水 甲醇

稀釋劑 蒸餾水

0.1mol/L PBS（pH值8.0）

蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水

0.1mol/L PBS（pH值8.0）慶大霉素 卡那霉素

新青霉素I、II、III 青霉素G 萘啶酸 鏈霉素 四環素 妥布霉素 萬古霉素

蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 0.1mol/L NaOH

蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水

蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水 蒸餾水

培養及結果觀察：置37℃培養16～24h，觀察結果。凡藥物最高稀釋管中無細菌生長者，該管的濃度即為MIC。

MBC的測定：從無細菌生長的各管取材，分別劃線接種于瓊脂平板培養基，于37℃培養過夜（或48h），觀察結果。瓊脂平板上無細菌生長而含抗生素最少的一管，即為MBC。也可將上述各管在37℃繼續培養48h，無細菌生長的最低濃度即相當于該抗生素的MBC。

結果報告：一般以MIC作為細菌對藥物的敏感度，如第1～8管無細菌生長，第9管開始有細菌生長，則把第8管抗生素的濃度報告為該菌對這種抗生素的敏感度；如全部試管均有細菌生長，則報告該菌對這種抗生素的敏感度大小為第1管中的濃度或對該藥耐藥；如除對照管外，全部都不生長時，則報告為細菌對該抗生素的敏感度等于或小于第12管的濃度，或高度敏感。

2．擴散法（K-B法）

（1）含藥濾紙片的制備：含有各種抗菌藥物的濾紙片是擴散法中應用最多的。目前，我國生產含藥濾紙片的單位不多，購買較為困難，即使購買也易過期失效，所以一般可應用自制的藥敏濾紙片。其方法如下：

濾紙片：選用新華1號定性濾紙，用打孔機打成直徑為6mm的小圓片，根據需要將數片包成一紙包或放入帶棉塞的小瓶或小平皿內，121℃滅菌15min，置100℃干燥箱內烘干備用。

藥液的配制：常用藥物的配制方法及所用濃度見表6-2。

表6-2 藥敏紙片的制備及含藥濃度

藥 物 青霉素 劑 量 注射用粉劑

制備方法

20mg加pH值6.0 PB緩沖液15.5mL，取1mL加PB緩沖液9mL

20mg加pH值6.0 PB緩沖液20mL 20mg加pH值7.8 PB緩沖液 8mL 以pH值7.8 PB緩沖液作100倍稀釋 以pH值6.0 PB緩沖液稀釋 20mg加水20mL溶解

藥液濃度（?g/mL）

200 1 000 2 500 2 500 1 000 1 000

紙片含量（?g）10 25 25 10 10 新青霉素 注射用粉劑

注射用粉劑

鏈霉素

注射用針劑 注射用針劑

氯霉素

口服粉劑 土霉素 口服粉劑或片劑

25mg粉末，加2.5mol/L HCl 15mL 溶解后，以pH值6.0 PB緩沖液或水稀釋 000 1 000 1 000 1 000 1 000 1 000 1 500 3 000 3 000 1 000 3 000 1 000 1 000 1 000 1 000 10 000 10 000 1 000 10 000 10 000 10 000 125 10 10 10 10 10 10 30 30 10 300 10 10 10 10 100 100 100 100 100 100 1.25 四環素 口服粉(片)

同土霉素

劑

注射用粉劑 口服片劑

以生理鹽水稀釋 同土霉素

以pH值3.0 PB緩沖液溶解后以pH值6.0 PB緩沖液稀釋

以pH值8.2 PB緩沖液溶解后稀釋 以水溶解，以pH值7.8 PB緩沖液稀釋 同紅霉素

以pH值7.8 PB緩沖液稀釋 以pH值7.8 PB緩沖液稀釋 以pH值7.2 PB緩沖液稀釋 以pH值7.8 PB緩沖液稀釋

以1mol/L NaOH 1mL溶解1片，用pH6.0 PB緩沖液稀釋 以1mol/L NaOH 1mL溶解1片，用pH6.0 PB緩沖液稀釋

以二甲基酰胺或丙酮溶解 以水稀釋

以水或pH值8.2 PB緩沖液稀釋 100mg加2.5mol/L HCl 1.25mL，加水至5mL，以pH值6.0 PB緩沖液稀釋 100mg加水1mL，濃HCl 0.7mL溶解，以pH8.2 PB緩沖液稀釋

100mg加水2mL，濃HCl 0.5mL溶解，以pH8.2 PB緩沖液稀釋

100mg加濃HCl 1mL，溶解后以pH6.0 PB緩沖液稀釋

1片研碎后加水2mL，濃HCl 0.25mL，以pH值6.0及7.8 PB緩沖液稀釋 金霉素

口服粉劑

新霉素 紅霉素 口服片劑 注射用粉劑 注射用粉劑

卡那霉素

注射用針劑

慶大霉素 注射用針劑 多粘菌素 注射用粉劑 萬古霉素 注射用粉劑 呋喃妥因 粉劑或片劑 呋喃西林 粉劑或片劑 痢特靈 磺胺嘧啶片劑

粉劑或針劑

鈉

磺胺二甲基針劑

嘧啶

長效磺胺 片劑 周效磺胺 片劑 磺胺甲基異惡唑

磺胺5-甲氧嘧啶

磺胺增效劑

片劑 片劑 片劑

含藥紙片的制備：將滅菌濾紙片用無菌鑷子攤布于滅菌平皿中，以每張濾紙片飽和吸水量為0.01mL計，每50張濾紙片加入藥液0.5mL，不時翻動濾紙片，使濾紙片將藥液均勻吸凈，一般浸泡30min即可。然后取出含藥紙片置于一紗布袋中，以真空抽氣使之干燥。或直接將濾紙片攤于37℃溫箱中烘干，烘烤的時間不宜過長，以免某些抗生素失效。對青霉素、金霉素等紙片的干燥宜用低溫真空干燥法。干燥后，立即裝入無菌的小瓶中加塞，置于干燥器內保存，也可將紙片貯藏于－20℃或家用冰箱冰凍。少量供工作用的紙片從冰箱中取出后應在室溫中放置1h，使紙片溫度和室溫平行，防止冷的紙片遇熱產生凝結水。

藥敏紙片的鑒定：取制好的紙片3張，以標準敏感菌株測其抑菌環，大小符合標準者則為合格。紙片的有效期一般為4～6個月。

（2）操作方法：K-B法是用含有一定量抗生素的藥敏紙片，貼在已接種試驗細菌的瓊脂平板上，經37℃培養后，抗生素濃度梯度通過紙片上彌散作用而形成，在敏感抗生素的有效范圍內，細菌的生長受到抑制，在有效范圍外，細菌能夠生長，故能形成一個明顯的抑菌環。以抑菌環的大小來判定試驗菌對某一抗生素是否敏感及敏感程度。

用接種環挑取菌落4～5個，接種于肉湯培養基中，置37℃培養4～6h。

菌液稀釋：用滅菌生理鹽水稀釋培養液使濁度相當于硫酸鋇標準管（配制方法：1.175％氯化鋇0.5mL、1％硫酸溶液99.5mL，充分混勻，將此溶液置于與肉湯培養基相同的試管中，用前充分振搖）。

用無菌棉拭子蘸取上述肉湯培養液，在管壁上擠壓，除去多余的液體，用棉拭子涂滿瓊脂表面，蓋好平皿，在室溫下干燥5min，待平板表面稍干即可放置含藥紙片。

用滅菌鑷子以無菌操作取出含藥紙片貼在涂有細菌的平板培養基表面。一個直徑9cm的平皿最多只能貼7張紙片，6張紙片均勻地貼在離平皿邊緣15mm處，一張位于中心。貼紙片時要輕輕按壓，以保證與培養基密切接觸。將平皿放37℃恒溫箱，培養16～18h，觀察結果（如圖6-1）。結果判定：觀察含藥紙片周圍有無抑菌環，量取其直徑（包括紙片直徑）大小，用毫米數記錄，按抑菌環直徑的大小報告敏感、中度敏感和耐藥，具體標準見表6-3。

表6-3 抗菌藥物的抑菌環與敏感標準

抗菌藥物 丁胺卡那霉素 腸桿菌、腸球菌 葡萄球菌和青霉素敏感細菌 嗜血桿菌 桿菌肽 腸桿菌科 綠膿桿菌 先鋒霉素I 氯霉素 氯林可霉素 粘菌素

復方甲氧異惡唑 紅霉素 每片含藥量(?g)

耐藥 10 10 10 10 100 100 30 30 2 10 25 15

≤11 ≤11 ≤10 ≤19 ≤8 ≤17 ≤13 ≤14 ≤12 ≤14 ≤8 ≤10 ≤13

抑菌環的直徑（mm）

中等敏感 12～13 12～13 12～23

9～12 18～22 14～16 15～17 13～17 15～16 9～10 11～15 14～17

敏感 ≥14 ≥14 ≥24 ≥20 ≥13 ≥23 ≥17 ≥18 ≥18 ≥17 ≥11 ≥16 ≥18 慶大霉素 卡那霉素 甲氧苯青霉素 萘啶酸 新霉素 呋喃妥因 苯唑青霉素 青霉素G 葡萄球菌 其他細菌 30 5 30 30 300 1 10 10 300 10 300 300 10 30 2

≤12 ≤13 ≤9 ≤13 ≤12 ≤14 ≤10 ≤20 ≤11 ≤8 ≤11 ≤12 ≤12 ≤11 ≤9 ≤14

13～14 14～17 10～13 14～18 13～16 15～16 11～12 21～28 12～21 9～11 12～14 13～16 13～18 12～13 10～11 15～16

≥15 ≥18 ≥14 ≥19 ≥17 ≥17 ≥13 ≥29 ≥22 ≥12 ≥15 ≥17 ≥19 ≥14 ≥12 ≥17 多粘菌素B 鏈霉素 磺胺 四環素 妥布霉素 萬古霉素 氯潔霉素

注意事項

1．稀釋法

（1）接種量：接種細菌量的多少與MIC有一定關系。如用敏感的葡萄球菌對氯芐青霉素進行檢測時，接種量增加1 000倍，MIC只略有增加，但對甲氧苯青霉素的敏感度則因接種量的不同而有較大變化，即使同一菌株，接種量小時為敏感，接種量增大時，其MIC則增加許多倍。

（2）培養基成分及培養條件：培養基的組成成分應保持恒定，外觀清晰透明，pH值適宜。為了觀察方便，還可向各管中加入葡萄糖及指示劑，以指示劑顏色的改變判定其是否生長。同時要注意選擇適宜的培養溫度，一般在12～18h觀察藥敏試驗結果。如時間過長，細菌將會在高濃度的藥物中生長。其原因，一是由于被輕度抑制的細菌開始繁殖，另一方面則是因為有些抗生素在37℃情況下不穩定，在其被破壞之后，受抑制的細菌也會再次生長繁殖。

（3）對于一些色澤深或本身呈混濁的中草藥，其試管培養后不易觀察細菌的生長情況。可從培養管移至平板培養基上，觀察各管中的細菌是否被殺死。這種方法只能測定藥物的最低殺菌濃度。

抑菌圈圖示

含藥紙片

抑菌圈

細菌菌苔（4）稀釋時，每一個稀釋度均應更換吸管。菌液及抗生素的加量要準確。

2．擴散法

（1）K-B紙片擴散法必須使用Mueller-Hintion（MHA）培養基，因其解釋度的數據是用此培養基積累的，MHA培養基普通冰箱可保存2～3周，用前須放37℃10min，以使形成的水霧干燥。此培養基適合于快速生長的細菌，生長緩慢的細菌或厭氧菌，不宜采用K-B技術及其解釋標準。

（2）接種用的菌液濃度必須標準化，以細菌在平板上的生長恰呈融合狀態為標準，接種后應及時貼含藥紙片和放入35℃（或37℃）培養。

（3）培養的溫度要恒定，時間為16～18h，結果不宜判讀過早。因培養過久，細菌能恢復生長，使抑菌環變小。培養時不應增加CO2，以防某些抗菌藥物形成的抑菌圈大小發生改變及影響培養基的pH值。

第三篇：微生物歷年習題

2006——2010年微生物試題整理（微生物實驗切片，圖文皆有，大家寫實驗報告可以參照）

【試題】2010-6-20/山東大學/口腔醫學院{五年制）、公衛、臨五/2008級/微生物

名詞解釋：3分×10個

1，非細胞型微生物

2，溶原性轉換

3，敗血癥

4，BCG

5，衣原體

6，刺突

7，IFN

8，潛伏感染

9，HBeAg

10，HIVgp120

簡答題：共50分

1，比較革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌細胞壁的不同

2，簡述外毒素的特征

3，簡述霍亂腸毒素的致病機制

4，簡述病毒感染的致病機制

5，簡述流感病毒分型依據及抗原變異的形成6，簡述HIV的復制過程

【試題】2009-12-26/山東大學/藥學院/2007級/微生物

一、名詞解釋九個每個三分

細菌L型、熱原質、消毒、SPA、Cholera Toxin、感染性核酸、IFN、gp120、prion

三、簡答

1.外毒素與內毒素區別

2.病毒對宿主細胞致病作用

3.乙肝傳染源、傳染途徑、致病機制

4.結核菌素試驗原理 結果判斷 意義

【試題】2009-12-26/山東大學/醫學院/臨床七年制/07級/醫學微生物學/A卷

名解

adsorption

antigenic drift

BCG

Mycoplasma

bacteria L form

normal flora

slow virus infection

HBeAg

大題（36分）

1.virulence factors of G+bacteria(10)

2.What is IFN refer to ? mechanism? properties of anti-virus effect?(8)

3.pathogenicity of Staphylococci aureus?（8）

4.what is gp120?co-receptor of HIV?HIV infective sources and transmission route?(10)

【試題】2009-01-04 /山東大學/藥學院/2006級/ 藥學/微生物試題

名解9個

LPS肥達實驗 病毒體 垂直傳播 轉化潛伏感染 BCG消毒 HBsAg

問答4個

細菌的致病機制

葡萄球菌的致病物質和所致疾病

IFN是什么？其抗病毒的特點？

腸道病毒的共同特征

【試題】2009-01-04/山東大學/醫學院/2006級/臨床口腔藥學七年制/醫學微生物學/微生物 名解8*3‘

pyrogen

transformation

defective virus

CPE

SPA

chlamydia

prion

HBsAg

簡答

1，細菌特殊結構的作用

2，什么是重配，以流感為例說明其可能出現的結果及臨床價值

3，描述A群鏈球菌的致病因素及可導致的疾病

4，HIV的致病機制

對這次考試的總結：細菌對氧的情況一道沒考很詭異啊

總論細菌病毒真菌的選擇題比例是10：13：16：1

細菌病毒部分致病考的比較多

選擇題都是那本書上的沒講的菌或毒基本不考，貌似有一兩個選擇吧

病毒注意大重點還是肝炎和HIV，小重點容易忽略的是蟲媒和腸道的共

同特點，注意先天和性傳播

【試題】2008—01—07/山東大學/醫學院/05級/七年制/醫學微生物（英文原版）

名詞解釋

1．bacterial L form

2．Sterilization

3．slow virus infection

4．virion

5．Mycoplasm

6．SPA

7．antigenic shift

8．HIV gp120

簡答題：

1.Please compare the characteristic of bacterial exotoxins with endotoxins.9/

2.What kind of viral vaccine are in common used at present ? Please try to give an example for each kind and explain their characteristics.9/

3.How dose IFN exert its antivirus function? What characteristics dose this function have ? 8/

【試題】2008-01-07/山東大學/藥學院/05級/藥學/微生物

一、名詞解釋 細菌L型 CPE抗原性轉變 支原體 朊粒 毒性噬菌體 BCG頓挫感染

二、簡答

1、細菌的致病機制

2、細菌耐藥性的遺傳機制

3、IFN的定義？生物學活性。

4、血清中能檢出與HBV相關成分有哪些？其意義何在？

5、霍亂弧菌的致病機制。

【試題】2007-01/山東大學/藥學專業/微生物試題

名解：

菌群失調癥

類毒素

AVP

SPA

外斐反應

抗原性轉變

Dane顆粒

簡答：

什么是正常菌群？簡述正常菌群對機體的生理作用

簡述病毒感染的致病機制（包括細胞水平的感染、機體水平的感染）

簡述A群鏈球菌的致病物質和所致疾病

試述結核菌素試驗原理、結果判斷及意義

何謂人畜共患病？哪些原核細胞型微生物可引起人畜共患病？

試述乙肝病毒的抗原組成及意義

試述HIV的傳播途徑及致病機制

何謂Prion？可導致人和動物哪些疾病？

何謂質粒？簡述其特征

【試題】2007-01-16/山東大學/醫學院/2004級/七年制/微生物

一.名解：1.pyrogen;2.defective virus:3.prion:4.lysogenic phage:5.transformation:

6.DPT:7.HBsAg:8.chlamydia:9.opportunistic pathogen:

二，大題：

1。鏈球菌的致病物質和疾病。

2。BCG的定義、應用、檢測。

3。IFN的定義、特點。

4。重配定義，以流感病毒說明。

5。HBcAg,gp120,HA的功能或臨床意義。

【試題】2006-06-21/山東大學/醫學院/2003級/六年制/微生物

名詞3*10：LPS，SPA，滅菌，基因工程疫苗，朊粒，AVP，前噬菌體，基因重配，選擇都是白皮書上的，比較簡單，問答7*5：

1.質粒是什么，有何特點

2.潛伏感染，并以HSV-1為例，描述其特點

3.正常菌落的作用和解剖位置

4.結核分枝桿菌的傳播途徑和致病因子

5.HBV基因組及其編碼的蛋白

第四篇：微生物檢測課后習題

緒論：

1.食品的衛生標準內容包括那些？感官指標、理化指標、微生物指標

2.對食品進行微生物檢驗具有何意義？是衡量食品衛生質量的終于指標，也是判斷被檢食品是否能食用的科學依據；可以判斷食品加工環境及食品衛生的情況，為衛生管理工作提供科學依據；可以有效地防止人畜共患病的發生；保證產品質量，避免不必要的損失

3.食品微生物檢驗的范圍包括那些？生產環境的檢驗；原輔料的檢驗；食品加工、儲藏、銷售等環節的檢驗；食品的檢驗

4.食品衛生標準中的微生物指標有那些？菌落總數；大腸菌群；致病菌；霉菌及其毒素；其他指標 菌落總數概念和測定意義

1.什么是菌落總數？是指食品檢驗經過處理，在一定條件下培養后，所得1mL（g）或1cm2面積檢樣中所含菌落的總數

2.測定食品、飲料等產品的菌落總數有什么意義？（1）判定食品被細菌污染的程度及衛生質量（2）預測食品存用的期限長短（3）了解細菌在食品中的繁殖動態

3.畫出平板傾注法測定菌落總數的示意圖：步驟:檢樣—稀釋處理—選擇3個適宜稀釋度—倒平板—培養—菌落計數—報告結果

4.在測定菌落總數時，如何選擇菌落進行計數？(1)選取菌落數在30-300之間的平板,若有兩個稀釋度均在30-300之間時,比值小于或等于2取平均數,比值大于2則取稀釋度較低平板菌落數(2)如均大于300，則取最高稀釋度的平均菌落數乘以稀釋倍數報告(3)如均小于30,則以最低稀釋度的平均菌落數乘稀釋倍數報告(4)如菌落數有的大于300,有的又小于30,不再30-300之間,以最接近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數報告(5)如所有稀釋度均無菌落生長,則應按小于1乘以最低稀釋倍數報告

5.在菌落總數的檢驗中，要注意哪些事項？(1)對照平板出現幾個菌落時,要追加對照平板(2)吸管進出瓶子或試管時,吸管口不得觸及瓶口、管口的外圍部分（3）吸管插入試樣液內的深度不得小于2.5cm，調整時要使管尖與容器內壁緊貼（4）進行稀釋時，吸管口不得與稀釋液接觸（5）檢驗從開始稀釋到傾注最后一個平皿所用時間不宜超過20min（6）稀釋倍數越高菌落數越少，如出現逆反現象，不可作為檢樣計數報告的依據。

6.在菌落總數的檢驗中，如何根據樣品的特性選擇培養溫度和時間？普通食品37℃48h倒放平板；清涼飲料、調味品、糕點、酒類：37℃24h；水產品：30℃48h 大腸菌群測定

1.什么是大腸菌群？大腸菌群由那些微生物組成？指一群需氧及兼性厭氧，在37℃能分解乳糖，產酸產氣的革蘭氏染色陰性無芽孢桿菌；組成：大腸埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、產氣克雷伯氏菌屬、陰溝腸桿菌

2.測定食品、飲料等產品的大腸菌群數有什么意義？（1）判斷食品是否受到糞便的污染（2）有利于控制腸道傳染病的發生和流行（3）有利于控制食品在生產加工、運輸、保存等過程中的衛生狀況

3.大腸菌群具有那些生物學特性？形態與染色：革蘭氏陰性，無芽孢桿菌，發酵乳糖產酸產氣；培養特性：在EMB瓊脂平板上的典型菌落：呈深紫黑色或中心深紫黑色，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，常有金屬光澤

4.在大腸菌群數的檢驗中，要注意哪些事項？（1）抑菌劑（2）菌落特征（3）產氣量（4）MPN檢索表

5.在水的大腸菌群數檢驗中，如何進行水樣的采集？自來水（未含氟）：龍頭火燒滅菌，暢流5-10秒后取樣；地面水源水，江湖河，水庫，水池等浸入水下20cm下取樣，水井50cm下取樣；漂白粉處理的水樣：自來水，游泳池水，應在瓶內加入0.03g硫代硫酸鈉/500,或2ml1.5%硫代硫酸鈉液/500ml,除氯;運送:2小時內送檢.6-10℃<6h立即檢驗;檢驗前將水樣震蕩5-10min 病原性球菌檢測

1.金黃色葡萄球菌可產生哪些毒素和酶?溶血毒素；殺白細胞素；血漿凝固酶；脫氧核糖核酸酶；腸毒素；溶纖維蛋白酶；透明質酸酶

2.金黃色葡萄球菌在B-P平板上的菌落特征如何?說明其原理？特征：圓形，光滑凸起，濕潤，成灰色至黑色，邊緣色淡周圍為渾濁帶，在其外層有一透明帶；原理：氯化鋰、甘氨酸：抑制非致病性葡萄球菌的生長；丙酮酸鈉：促進葡萄球菌生長；亞碲酸鉀：抑制G-桿菌生長，可被金黃色葡萄球菌還原為碲鹽呈黑色。

3.金黃色葡萄球菌在血平板上的菌落特征如何?菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有透明溶血圈（β型）

4.確認葡萄球菌為金黃色葡萄球菌的依據至少應該包括那幾個試驗? 5.金黃色葡萄球菌的形態與染色、培養特征如何？形態與染色：革蘭氏陽性球形菌，排列呈葡萄狀。無芽孢、鞭毛，大多數無莢膜，可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖，產酸不產氣；培養特征：需氧或兼性厭氧，最適生長溫度37℃、PH7.4；對營養要求不高，在普通培養基中生長良好，加少量葡萄糖或血液生長更旺盛；耐鹽性強，在含NaCL7.5-15%培養基中能生長；在肉湯中是渾濁生長，時間過長，有少量沉淀；在普通培養基上生長，可形成圓形凸起，表面光滑，邊緣整齊，不透明，直徑1—2mm的菌落能產生黃色色素；血瓊脂平板：菌落大、產生完全溶血圈；BP平板：灰色到黑色邊緣淡，菌落周圍有一渾濁帶，在其外有一透明帶

食品中溶血性鏈球菌的檢驗

1.鏈球菌的溶血現象有那幾個類型，各類型的溶血特征如何？甲型α-溶血性鏈球菌（菌落周圍有1-2mm寬的草綠色溶血環，也稱甲型溶血，這類鏈球菌多為條件致病菌。）、乙型β-溶血性鏈球菌（菌落周圍形成一個2-4mm寬、界限分明、完全透明的無色溶血環，也稱乙型溶血，該菌的致病力強，常引起人類和動物的多種疾病，與人類疾病有關的血清型90%屬于A族鏈球菌）、丙型γ-鏈球菌（不產生溶血素，菌落周圍無溶血環，也稱為丙型或不溶血性鏈球菌，該菌無致病性，常存在于乳類和糞便中，偶爾也引起感染。）

2.溶血性鏈球菌在血平板和葡萄糖肉湯中生長有何特征？在血平板上形成灰白色，半透明、表面光滑、有乳光圓形突起的細小菌落，直徑0.5-0.75mm，針尖大小，菌落周圍出現溶血環；在葡萄糖肉湯中：

3.溶血性鏈球菌能產生什么毒素和酶？溶血毒素、致熱外毒素、透明質酸酶、鏈激酶、鏈道酶、殺白細胞素

4.寫出鏈球菌的檢驗程序，并說明鏈激酶的反應原理。檢驗程序：固體檢驗—樣品處理—增菌培養—分離培養—純化培養—生化鑒定—報告；原理： 腸道致病菌

1.腸道致病菌具有那些生物性特性？均為革蘭氏陰性桿菌，中等大小，無芽孢，多數具有周鞭毛能運動；需氧或兼性厭氧，菌落中等大小，表面光滑，液體培養基渾濁生長；腸道致病菌一般不分解乳糖，而非致病菌多能分解乳糖、葡萄糖產酸或產酸產氣；可還原硝酸鹽為亞硝酸鹽

2.腸道致病菌具有那些抗原？又稱為什么？有什么特點？O抗原：也稱菌體抗原，細胞壁脂多糖，耐熱100℃不被破壞

H抗原：也稱鞭毛抗原，鞭毛蛋白，不耐熱，60℃30’可破壞

K抗原:也稱表面抗原(莢膜抗原),多糖,具有阻抑O抗原發生凝集的現象,加熱60℃30’可消除抑阻作用 菌毛抗原: 3.寫出腸道致病菌檢驗的基本程序？檢樣—處理—增菌培養—分離培養—生化實驗—血清學鑒定—報告 沙門氏菌

1．典型沙門氏菌的五項生化試驗結果如何？

2.沙門氏菌的形態特征，培養特性是什么？形態特征：革蘭氏染色陰性，無莢膜，無芽孢，多數有鞭毛，有動力，短小桿菌；培養特性：需氧或兼性厭氧，最適溫37，PH7.2-7.4；對營養要求不高，在普通培養基上生長良好，37，24h能形成菌落中等大小，直徑2-3mm，圓形或卵圓形，表面光滑濕潤，無色半透明，邊緣整齊的菌落；在液體培養基中，呈均勻渾濁性生長，無菌膜。3.沙門氏菌檢驗時為什么要進行前增菌和增菌？

4.沙門氏菌有哪些抗原？各有何特點？O、H抗原如何表示，A-F群沙門氏菌中，代表每群O特異性抗原的獨特因子是什么？O抗原（主要抗原OA~OZ，O51~63，O65~67）、H抗原、表面抗原（K抗原）、菌毛抗原。

5.沙門氏菌哪幾個菌型具有Vi抗原，Vi抗原對O抗原血清連實驗有何影響，對含Vi抗原菌，如何做O抗原血清學實驗？含有Vi 抗原的沙門氏菌：傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌、都柏林沙門氏菌。Vi抗原位于菌體的最表層，包圍了O抗原，可阻礙O抗原的血清學凝集試驗。破壞Vi抗原：60℃30秒，100℃5秒，石炭酸處理或人工培養后消失。

6.沙門氏菌在SS平板，TSI培養基上生長的現象如何，說明其原理

7.分離純化后怎樣選用最少的生化試驗方法初步鑒定檢驗菌是否是沙門氏菌屬的細菌

8.如何進行沙門氏菌的血清學試驗 志賀氏菌 1.志賀氏菌分幾個群各稱為什么？抗原結構如何？K抗原對O抗原試驗有何影響？A群痢疾志賀氏菌、B群福氏志賀氏菌、C群鮑氏志賀氏菌、D群宋內氏志賀氏菌；抗原結構：ABCD均是O抗原；A群、C群具有K抗原；影響：K抗原可阻礙O抗原的血清學凝集實驗，煮沸處理即可。

2.寫出志賀氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌在SS、EMB平板上生長的菌落特征？志賀氏菌：無色透明，不發酵乳糖，中等大小，光滑圓形菌落；沙門氏菌：SS圓形或卵圓形，表面光滑濕潤，無色半透明，邊緣整齊的菌落；大腸桿菌：EMB呈深紫黑色或中心深紫色，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，常有金屬光澤

3.志賀氏菌在三糖鐵培養基上生長結果如何？斜面產堿仍為紅色或粉紅色；底層產酸不產氣，變黃色；不產硫化氫，不出現黑色。

4.在志賀氏菌中，接種三糖尿病鐵培養基和葡萄糖半固體培養基后，那些培養物可認為不屬于本菌生長現象的范圍而可棄去？在TSI表面上呈現蔓延生長的培養物；在18h-24h發酵乳糖、蔗糖的培養物；不分解葡萄糖，只在半固體培養基表面生長的培養物；產氣的培養物；有動力的培養物；產硫化氫的培養物。5.如何用生化反應來區分志賀氏菌各群？用4中志賀氏菌多價血清檢查，如果呈現凝集，則用A1，A2、B群多價和D群血清分別試驗；如是B群，則喲個群和型因子血清分別檢查；4中志賀氏菌多價血清不凝集的菌株用鮑氏多價1、2、3分別檢查，并進一步用1-15各型因子血清檢查。如果鮑氏多價血清不凝集，可用痢疾志賀氏菌3-12型多價血清及各型因子血清檢查。

6.寫出沙門氏菌、志賀氏菌的檢驗程序及其所用培養基。沙門氏菌：檢驗—增菌（前增菌）--分離培養—生化實驗初步鑒定—血清學反映最后鑒定—報告；培養基：BS瓊脂平板和XLD瓊脂平板；志賀氏菌：檢驗—樣品處理—增菌培養—SS、EMB平板分離培養—初步生化鑒定—最后血清學鑒定—報告。培養基：強選擇性（SS或HE）、弱選擇性（EMB或麥康凱）副溶血性弧菌

1.副溶血性弧菌的形態與染色有和特點？革蘭氏陰性無芽孢多形態桿菌，單端鞭毛、兩端濃染。桿狀、棒狀、甚至球狀、絲狀等；需氧或兼性厭氧，生長最好；在2~3%NaCL培養基中生長最好,無鹽或食鹽>10%不能生長;最適溫度36℃,PH7.5-7.8;在專用選擇性平板上,菌落呈圓形凸起,渾濁不透明,表面光滑,較濕潤,邊緣不整齊;血平板:可見溶血環

2.副溶血性弧菌的生化特性中最有特點的是那個項目，如何利用這個項目，診斷某細菌是否是副溶血性弧菌？

3.副溶血性弧菌在TSI，Nacl蔗糖，嗜鹽選擇性平板上培養特征如何？Nacl蔗糖平板：圓形，半透明或不透明，無粘性，綠藍色；嗜鹽性平板：圓整或不齊，隆起混濁，無粘性，無色，濕潤。鏡檢：兩端濃染 蠟樣芽孢桿菌

1.引起蠟樣芽孢桿菌事物中毒的常見食物有那些？什么條件下可引起蠟樣芽孢桿菌食中毒？乳類、肉類、米飯、淀粉類、甜點心、涼拌蔬菜，水果，色拉 2.蠟樣芽孢桿菌的形態與染色特性如何？革蘭氏陽性大桿菌，芽孢不突出菌體，菌體兩端較平整，多數呈鏈狀排列，周身鞭毛，有動力

3.蠟樣芽孢桿菌在普通營養瓊脂和甘露醇卵黃多粘菌瓊脂平板上生長的菌落特征如何？普通：菌落灰白色，不透明，邊緣不整齊，表面粗糙，呈毛玻璃狀或白蠟狀；甘露醇卵黃多粘菌素平板：菌落呈粉紅色，具有白色渾濁環。血平板：菌落呈淺灰色，不透明，似白色毛玻璃狀，有溶血環。4.寫出蠟樣芽孢桿菌檢驗的基本程序？檢驗—稀釋處理—平板分離—證實實驗—培養特性觀察—生化實驗—報告結果 霉菌、酵母菌數測定

列表說明霉菌、酵母菌數的測定與菌落總數的測定有什么不同的地方和相同的地方？

檢驗程序：檢驗—處理—稀釋—平板分離培養—菌落計數—報告 罐頭類

1.罐頭食品的商業無菌檢驗中，保溫的目的是什么？目的：觀察是否胖聽或泄漏 2.在罐頭食品的商業無菌檢驗中，開罐前要做好那些準備工作？用75%酒精稀球擦試無代號端，并點燃滅菌（胖聽不能燒），然后開罐，但不能傷及卷邊結構。3.如何判斷罐頭為商業無菌？該批罐頭食品經審查生產記錄，屬于正常，抽取樣品經保溫試驗未見胖聽或泄漏，保溫后開罐，經感官檢查PH測定，涂片鏡檢，或接種培養，確證無M增殖現象。

第五篇：微生物的營養 講課稿

第四章

微生物的營養

前幾節課，我們把微生物它的形態、結構還有功能作為一個很大的部分已經講完了。那從這節課開始，我們會講到微生物的一些生理過程，包括微生物的營養，微生物的代謝以及微生物的生長這幾大生理過程。那我們今天主要講第四章微生物的營養。在這一章里面，我們將會講到微生物對營養的需求，也就是說微生物要吃什么物質才能進行它的生長、繁殖、代謝等等這些活動。這些營養給它準備了，它怎樣去做獲得這些營養。形象地說就是我們如何給它做飯來讓它吸收這些營養，也就是我們第二節要講到的培養微生物所需要的培養基。第三節呢，你有了這些營養物質，也給它做好了，它怎么去吃這些營養，怎樣去轉化到它自身的細胞內，去吸收這些營養，在生長過程中還會產生一些代謝產物，它如何排出體外，這就是我們第三節要講的營養物質是如何進入細胞的。這一章，我們主要是講第三部分。

首先，我們來看兩個概念，什么是營養物質呢？ 營養物質（nutrient）：那些能夠滿足微生物機體生長、繁殖和完成各種生理活動所需的物質。什么是營養呢？

雖然只差兩個字，但它們是截然不同的兩個概念。營養（nutrition）：微生物獲得、吸收和利用營養物質的過程。

所以，可以說營養物質是微生物生存的物質基礎，沒有這些營養物質，微生物無法生存，就更談不上它的一些生理活動了；而營養是生物維持和延續其生命形式的一種生理過程。這兩個，一個是基礎，一個是生理過程。

接下來，我們看一下第一節，微生物的營養要求。我們先看一下微生物的化學組成，為什么要先看一下微生物的化學組成呢，因為它能反應出微生物對一些營養物質的需求。那我們來看，對于微生物細胞來說，水是占比重最大的，占了70%-90%這個比例。另外一部分，就是它的干物質，干物質里面又包括有機物和無機物（鹽）。有機物里面又包括像是蛋白質、糖、脂、核酸、維生素等及其降解產物。那無機鹽主要是由這些化學元素所組成，這里面有大量的元素，還有微量元素。大量的主要元素是碳氫氧氮等，微量元素是鋅錳鈉氯等。所以，我們從微生物的這些化學組成就能看出微生物所需要的這些營養物質。現在，我們分別講一下微生物所需要的營養物質及其在體內的一些生理功能。我們可以根據這些營養物質它們在機體中的生理作用不同進行劃分。一般來說，微生物所需要的營養物質包括六大元素。第一大元素，就是碳源。第二大元素，就是氮源。第三是能源，另外一種是生長因子，第五種是無機鹽，我們把水作為第六大元素。所以，微生物所需要的營養物質包括這六大元素，我們分別來看一下。

1、碳源（carbon source）

定義：凡能提供微生物營養所需碳元素的營養源。也就是說這種物質能夠滿足微生物對碳源的這種需要。不同種類的微生物對碳源的需要是不一樣的，微生物所需要的碳源范圍是非常廣的。對于自養微生物，它需要的碳源是二氧化碳，作為它唯一或最主要碳源。另外，像碳酸氫鈉也可以作為自養微生物的碳源，絕大多數自養微生物都是把二氧化碳作為唯一碳源。對于異樣微生物來講，它所需要的碳源范圍就更多。自然界所有有機物如：糖類、蛋白質、脂類、烴類、天然或人工合成有毒的有機物等皆可作相應微生物的碳源。所以它包含范圍是非常廣的。所以我們可以用異樣微生物來對一些有毒物質進行處理，在實際的生存生活中是非常有用的。不同的微生物對碳源的喜好是不一樣的。Glc是一般異養微生物最喜愛利用的碳源。像葡萄糖對微生物來說，是最為喜愛的。若給微生物加入葡萄糖，它是最容易吸收的。對單糖的吸收要好于多糖，對多糖的吸收，要先分解然后才能吸收。微生物利用的碳源的范圍，我們稱作碳源譜。像微生物如果碳源譜非常廣，則說明這種微生物利用的碳源種類非常多。舉個例子，像Pseudomonas spp 可利用90種以上碳源，所以它的碳源就非常廣。還有一種叫甲烷氧化菌，它利用的碳源就比較窄，它就只能利用甲烷或者甲醇這一類作為它的碳源，所以說不同的微生物它所利用的碳源的種類是不一樣的。微生物碳源譜的寬或窄主要取決于其體內酶體系的差異。

2、氮源（nitrogcn sourcc）

定義：凡能提供微生物營養所需氮元素的營養源。

氮源又包括無機氮源和有機氮源。無機氮又包括氣態氮、銨鹽、硝酸鹽、碳化物等。有機氮包括種類比較多，包括蛋白胨、牛肉浸膏、酵母粉、豆粉餅、魚粉、玉米漿等。有機氮源這一部分我們在后面的培養基那一部分還會重點講到。微生物對氮源的利用都是偏向于有機氮源，一般優先利用有機氮源。對氮源利用有選擇性，優先利用有機氮，有機氮源物質同時也可提供碳源。

3、能源（energy source）

定義：能為微生物生命活動提供最初能量來源的物質。這些物質可以是化學物質，還有一種可以是光能。對于化能異養微生物來說能量來源是有機物（同碳源），對于化能自養微生物來說能量來源是無機物（不同于碳源），主要是還原態的無機物，這里面包括硫化氫、氫、二價鐵等。對于光能自養和光能異養微生物來說，它們的能量來源是光能。有的營養物質既可以作為碳源，又可以作為氮源或者能源，這不是截然不同的，有的物質是可以作為多種營養物質的。

4、無機鹽（inorganic salt）

定義：以鹽的形式提供主要元素與微量元素。

無機鹽是微生物在成長過程里所需要的元素與微量元素的鹽的形式，它是必不可少的，這些無機鹽它的功能主要是維持細胞滲透壓、調節ph、作酶的輔基、激活劑。我們根據微生物對這些無機鹽需要量的大小做一個劃分，分為大量元素和微量元素。鈉鎂鈣這一類在10的-3次到10的-4次 mol/L，稱大量元素；銅鋅錳這一類在10的-6次到10的-8次

mol/L，稱微量元素。

5、生長因子（growth factor）

定義：微生物生長所必需，其需要量很少，微生物自身不能合成或合成量不足，難以滿足微生物生長需要，只有在培養基加入才能使其生長的有機化合物。狹義生長因子：維生素

廣義生長因子：還有氨基酸、嘌呤、嘧啶、脂肪酸等

腸膜狀明串珠菌需要17種氨基酸作生長因子，所以它的培養需要給它加足了生長因子才能生長。某些人體寄生菌以血清作生長因子。生長因子的來源一般是酵母膏、玉米漿、麥芽汁等，還有復合維生素。所以在培養微生物時，我們加入酵母膏，不僅加入了氮源，也加入了生長因子。

6、水

再一類是水，可以說是非常重要的，萬物離不開水，它不僅提供了微生物生長所需要的膠態的這樣一個環境，而且是物質代謝的一個原料。