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實驗動物標準化和動物實驗規范化的內容和意義

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第一篇:實驗動物標準化和動物實驗規范化的內容和意義

實驗動物標準化和動物實驗規范化的內容和意義

動物實驗是醫學研究常用的方法和手段,在人類疾病的調查和防治研究等諸多方面發揮 著巨大作用,實驗動物質量的標準化與否直接影響著科學研究水平的高低,實驗動物水平應 當與科學研究的水平相匹配。目前,人們愈來愈重視實驗動物的標準化問題 實驗動物的標準化是指對實驗動物從微生物質量和遺傳學質量進行控制,按微生物學控 制標準,即根據微生物的凈化程度及攜帶的寄生蟲狀況,將實驗動物分為四級:一級,普通 動物;二級,清潔動物;三級,無特定病原體(SPF)動物;四級,無菌動物。按遺傳學控 制標準即基因的純合程度,實驗動物分為近交系、遠交系和雜交群。由于實驗動物在不同種 類、不同品系之間遺傳特性存在差異,其實驗反應也存在差異,這些差異必然對實驗結果產 生影響。同時,還要對實驗動物生產過程中的環境和營養進行控制,按微生物控制程度分類,實驗動物的環境可分為開放系統、屏障系統和隔離系統;動物飼料中蛋白質、脂肪、鈣、磷、氨基酸、維生素等各類營養物質含量應符合各種實驗動物品種品系的生理需要,含有的有害 物質及污染物質不能超過最大安全限量標準,清潔級及清潔以上級動物的飼料應作滅菌處 理。只有實現實驗動物的標準化,研究者才可根據課題研究的目的和要求選擇適當等級的動 物,在相應等級的實驗條件下完成的實驗研究,才能證明實

驗結果是可信的、科學的。動物實驗是醫學生物學必需的是實驗手段之一,使用標準的實驗動物并在標準的環境條 件下進行實驗是保證醫學生物學研究質量的重要條件。動物實驗規范化首先要求研究者在實 驗動物的選擇時注意以下幾點: 1.醫學研究目的在于探索人類疾病的發病機制,尋找預防及治療方法。通過動物實驗,對人 類的疾病、病理生理進行推斷和探索。實驗動物和人類的生活環境不同,生物學特性存在許 多相同和相異之處,選擇時應充分了解各種動物的生物學特性,與人類之間特性進行比較,充分利用相似之處做出恰當的選擇。在可能的情況下,盡量選擇結構、功能、代謝及疾病特 征方面與人類相近的動物。2.選用解剖生理特點符合實驗目的要求的實驗動物是保證試驗成功地關鍵。3.注意人與動物對同一刺激的反應差異,選用具有明顯反應的動物。各實驗動物在基因型、組織型、代謝型、易感性等方面存在著差別。不同種動物對同一因素反應雖然有相似性,但 也會出現特殊的反應,有共同性亦有特殊性。實驗中應選用對實驗因素最敏感的動物作為實 驗對象。4.根據課題研究的目的、內容、水平、技術條件、實驗方法等選用相適應的標準化動物。5.根據各微生物等級動物特點、應用范圍和課題水平,選擇相匹配的微生物級別動物。動物 級別還要與實驗條件、實驗技術、方法、試劑等相匹配。6.充分查閱與本課題相關的實驗動物與動物實驗兩方面的文

獻,了解本領域、本項目以往的 研究結果和使用動物情況,要充分利用前人的成果,避免重復,進行必要的預實驗,確定深 入研究計劃。應強化查閱文獻和加強與實驗動物工作者交流,充分有效地利用既有研究成果,從而使實驗動物選擇及應用更有效、更準確,更好地使實驗動物科學為自身課題服務。使研 究更簡潔,有效,更具有特色和創新。7.注意經濟性原則,在不影響實驗質量的前提下選擇易獲得、經濟、易飼養管理的動物,盡 量作到方法簡便降低成本。同時,動物實驗的規范化還應注意有關國際規范的落實和執行,如遵照國際上公認的動 物實驗室操作規范和標準操作程序,即要求實驗動物選擇和應用、實驗室條件、工作人員素 質、技術水平和操作方法都標準化。只有這樣,實驗結果準確性、規律性、重復性才能得到 保證。

第二篇:動物生理學實驗內容

三.實驗內容

實驗一 生理學實驗的基本操作技術 1.目的要求

1.1 掌握生理學實驗的基本操作技術。1.2 了解生理學實驗的常用儀器。2.實驗器材

手術器械、刺激器、四通道生理記錄儀、換能器等。3.實驗內容

了解生理學實驗中常用的手術器械及其用途,學習活體解剖技術;了解生理學實驗的常用儀器(刺激系統、探測系統、生理信號的顯示采集與處理系統)及其用途。

實驗二 坐骨神經——腓腸肌標本的制備 1.目的要求

1.1掌握蛙類動物雙毀髓的實驗方法。

1.2 掌握坐骨神經——腓腸肌標本的制備方法。2.動物與器材 蟾蜍、常用手術器械。3.實驗內容

學習蛙類動物雙毀髓的實驗方法,制備有興奮性的坐骨神經——腓腸肌標本并檢測其興奮性。

實驗三 刺激強度與肌肉收縮的關系 1.目的要求

1.1 初步掌握神經——肌肉實驗的電刺激方法及肌肉收縮的記錄方法。1.2 初步掌握刺激器、四通道生理記錄儀、換能器的使用方法。2.動物與器材

蟾蜍、手術器械、刺激器、四通道生理記錄儀、換能器。3.實驗內容

觀察刺激強度與肌肉收縮反應的關系并分析,學習刺激器、四通道生理記錄儀、換能器的使用方法。

實驗四 骨骼肌收縮的總和與強直收縮 1.目的要求

1.1 掌握神經——肌肉實驗的電刺激方法及肌肉收縮的記錄方法。1.2 掌握刺激器、四通道生理記錄儀、換能器的使用方法。2.動物與器材

蟾蜍、手術器械、刺激器、四通道生理記錄儀、換能器。3.實驗內容

觀察刺激頻率與肌肉收縮反應的關系并分析,學習刺激器、四通道生理記錄儀、換能器的使用方法。實驗五 血紅蛋白含量的測定 1.目的要求

掌握測定血紅蛋白含量的基本方法——比色法。2.實驗器材

采血針、血紅蛋白計、0.1mol/L鹽酸溶液、一次性20μl定量毛細采血管、滴管、玻璃棒、75%酒精棉、蒸餾水。

3.實驗內容

用比色法測定人體血紅蛋白含量。

實驗六 血細胞的計數 1.目的要求

學習紅細胞、白細胞的人工計數方法。2.實驗器材

采血針、紅白細胞稀釋液、一次性20μl定量毛細采血管、滴管、玻璃棒、75%酒精棉、顯微鏡等。3.實驗內容

人工計數人體血液中的紅細胞數和白細胞數。

實驗七 ABO血型的鑒定 1.目的要求

學習ABO血型的鑒定。2.實驗器材

采血針、標準血清、雙凹玻片、滴管、玻璃棒、75%酒精棉等。3.實驗內容

觀察紅細胞凝集現象,掌握ABO血型鑒定的原理,復習輸血的一般原則。

實驗八 蛙類心搏過程的觀察與心搏起源 1.目的要求

1.1 學習暴露蛙類心臟的方法,熟悉心臟的結構。1.2 學習在體蛙類心臟活動的記錄方法。2.動物與器材

蟾蜍、刺激器、四通道生理記錄儀、換能器等。3.實驗內容

采用斯氏結扎法結扎蛙類心臟,觀察心臟各部位節律性活動的時相及頻率;記錄心搏曲線,根據各部位節律性活動的時相及頻率和心搏曲線分析蛙類心臟的心搏起源。

實驗九 蛙類心室肌的期外收縮與代償間歇 1.目的要求

1.1 了解心肌的生理特性。1.2 通過實驗闡述心肌產生期外收縮的條件與代償間歇出現的原理。2.動物與器材

蟾蜍、刺激器、四通道生理記錄儀、換能器等。3.實驗內容

觀察心室在收縮活動的不同時期對額外刺激的反應,分析心肌興奮性的變化及代償間歇的發生原理。

實驗十 動脈血壓的直接測定及血壓調節 1. 目的要求

學習直接測定家兔動脈血壓的急性實驗方法。2.動物與器材

家兔、四通道生理記錄儀、換能器、手術器械、刺激器等。3.實驗內容

觀察交感神經、迷走神經、減壓神經對動脈血壓的影響并分析,觀察腎上腺素、乙酰膽堿等因素對動脈血壓的影響并分析。

實驗十一 人體動脈血壓的測定 1.目的要求

學習并掌握間接測量人體血壓的原理和方法。2.實驗器材 血壓計、聽診器。3.實驗內容

間接測量人體血壓并觀察運動、姿勢、外界環境、情緒等因素對動脈血壓的影響。

實驗十二 人的心音聽診 1.目的要求

學習心音聽診的方法。2.實驗器材 聽診器。3.實驗內容

學習心音聽診的方法,識別第一心音與第二心音。

實驗十三 人體心電圖描記 1.目的要求

學習心電圖的描記和心電圖波形的測量方法。2.實驗器材

心電圖機、電極夾、導電糊。3.實驗內容

描記人體心電圖,了解人體正常心電圖各波的波形及其生理意義。

實驗十四 呼吸通氣量的測定 1.目的要求

掌握呼吸通氣量的測定方法。2.實驗器材

單筒肺量計、記錄紙、橡皮接口、鼻夾、75%酒精、酒精棉球。3.實驗內容

測量潮氣量、補吸氣量、補呼氣量、肺活量。

實驗十五 家兔呼吸運動的調節 1.目的要求

學習測定家兔呼吸運動的方法 2.動物與器材

家兔、恒溫手術臺、刺激器、四通道生理記錄儀等。3.實驗內容

觀察并分析肺牽張反射;觀察并分析增加無效腔、CO2、缺氧等因素對呼吸運動的影響。

實驗十六 尿生成的調節 1.目的要求

掌握輸尿管插管技術,學習哺乳動物尿液生成的調節因素。2.動物與器材

家兔、手術器械、恒溫手術臺等。3.實驗內容

觀察并分析生理鹽水、腎上腺素、葡萄糖、抗利尿激素等因素對家兔尿量的影響。

實驗十七 視野的測定 1.目的要求

掌握視野計的使用方法和視野檢查方法。2.實驗器材

視野計、視標(白色、紅色、綠色)、視野圖紙、鉛筆。3.實驗內容

用不同顏色的視標測定自己的視野,并分析不同顏色視標下視野范圍大小不同的原因。

實驗十八 盲點的測定 1.目的要求

學習盲點的測定方法。2.實驗器材

白紙、鉛筆、視標(白)、尺子、遮眼板。3.實驗內容

測定自己的盲點,證明盲點的存在,分析盲點產生的原因并計算盲點所在的位置和范圍。

第三篇:實驗動物倫理學

投英國一偏SCI文章,對方要求實驗動物的倫理證明,如下:There is no indication in the manuscript that ethical approval had been obtained from a recognized body for the approval of animal experiments.If the experiment was not ethically approved the work cannot be published.請問我該怎么辦?

對方只是說你在文章中沒有indication實驗動物倫理證明,沒有問你要證明的原件,你只需要indication一下即可rocedures involving animals and their care were conducted in

conformity with NIH guidelines(NIH Pub.No.85-23, revised 1996)and was approved by Animal Care and Use Committee of the XXX University..如題!我投的文章返修,涉及動物試驗倫理問題,不知該如何做答,因為我們這里并沒有相關的動物倫理委員會,如果沒有,該如何答!多謝!

reviewer的意見:

Quote the agreement of Local Ethics Committee of the Institution on

Laboratory Animal Care in Methods.請各位師兄師姐指教,多謝!

在你們當地醫學院或醫學研究所應該有動物飼養中心吧,寫上他們的實驗動物應用倫理法就可以,你的實驗動物來源地方就應該有自己的規則。

例:我用的大連醫科大學動物中心的小鼠,文章就這樣寫的:

All experimental procedures were conducted in conformity with institutional guidelines for the care and use of laboratory animals in Dalian Medical University, Dalian, China, and conformed to the National Institutes of Health Guide for Care and Use of Laboratory Animals(Publication No.85-23, revised 1985).All animal work was performed according to the ****** of Health guidelines, and protocols were approved by the University of ****** Institutional Animal Care and Use Committee

第四篇:《動物病理學》實驗

實驗一 實驗性空氣栓塞

一、實驗目的

了解空氣栓塞對機體的影響

二、實驗材料

家兔,20ml注射器及針頭,解剖刀,剪,鑷子,面盒,浸有二甲苯的棉球若干等

三、實驗內容:

1.先觀察家兔的一般狀況:活動狀態、呼吸頻率、嘴唇顏色及瞳孔大小等。2.用浸有二甲苯的棉球涂擦一側耳廓,使局部血管擴張,便于穿刺注射。3.用注射器經耳緣靜脈注入空氣10~15ml,記錄時間,并注意觀察家兔的表現。

4.待家兔死之后剖創胸并剪開心包,觀察左、右心有無泡沫狀血液,在胸腔內注入水使之淹沒心臟,先后剪開左、右心室,觀察有無空氣泡逸出。實驗結果(報告的主要部分):

1.注射空氣后家兔的表現:開始活動增多,呼吸頻率加快→繼而活動減弱,嘴唇發紺→接著全身抽搐→死亡。

2.剖胸后心腔內的改變:右心房內有泡沫狀血液,剪開右心房后有氣泡逸出。

討論與結論(運用所學知識對實驗結果進行分析和解釋,對實驗結果中所能驗證的概念、理論,作出簡明的概括和總結):

注射的空氣進入耳緣靜脈以后,迅速到達右心,由于心臟的收縮和舒張,從而將空氣和血液攪拌成大量的泡沫血,當心肌收縮時可阻塞肺動脈出口導致猝死(使血液不能到達肺部進行氣體交換,從而使機體缺氧→活動增多(煩燥),呼吸加深加快予以代償→由于是泡沫血→缺氧繼續存在→活動減弱,嘴唇發紺,最終致死。

實驗二 脫水

一、實驗目的

通過不同濃度食鹽溶液引起紅細胞形態變化實驗,推理說明機體脫水對細胞的影響。

二、實驗器具與試劑

三、實驗材料

抗凝血、帶凹載玻片、滴管、10%、0.9%、0.1%氯化鈉溶液、顯微鏡

四、實驗內容:

1、將三種濃度氯化鈉溶液分別滴入3塊玻片的凹內,數滴即可,勿太多,以防溢出。

2、分別向各玻片凹內不同濃度氯化鈉溶液中滴入抗凝血1滴。3、片刻后,輪流將載玻片置于低倍鏡下,觀察細胞狀態,直至出現變化為止,然后在高倍鏡下觀察紅細胞的變化。

實驗報告:記錄不同濃度氯化鈉溶液引起紅細胞變化的結果,并分析其原因。

實驗三 尸體剖檢診斷技術

一、實驗目的

了解并掌握動物了尸體剖檢方法,包括剖檢的準備工作、常見動物動物的剖檢術式、各器官及其病理變化的檢查方法、病理材料的采集、包裝和保存方法、病理剖檢記錄和剖檢報告的方法等;培養綜合分析病理變化的能力,為臨床應用打好基礎。

二、實驗材料 1、動物 雞、兔

2、器械 剝皮刀、解剖刀、手術刀、腸剪、骨鉗、板鋸、骨斧、鑷子、手術剪、卷尺、磨刀石、注射器、針頭、瓷盤(盆或缸)等采集病料常用器具。

3、藥品 0.1%新潔爾滅溶液、3%來蘇兒溶液、3%碘酊、70%-75%酒精、10%福爾馬林溶液或95%酒精、藥棉、紗布等。

三、實驗內容:

一、兔子的剖檢

1、檢驗前準備 先用手術刀或剪子沿下頜骨與第1頸椎處切斷頸動脈,放血3-4分鐘,將兔致死,用水沖洗兔體被毛,然后用刀在頸部、前肢腕關節及后肢跗關節上方1厘米處皮膚作環形切口,再沿兩后肢內側,繞過肛門挑切開皮膚并斷尾,再由助手倒提并分開兔兩后肢,一人用雙手自陰部上方翻轉皮膚,采用脫襪式方式把皮自陰部拉頭部,剝去皮,斷頭,截肢。然后放在盤中開膛。自恥骨開始,沿腹中線用小刀切開腹壁,取出胃、腸、脾,取出心、肺、肝,置于盤中,進行同步檢驗。

2、內臟的檢驗 依次對胃、腸、脾、心、肺、肝進行感官檢查,注意其大小、色澤,有無病變,尤其是蚓突和圓小囊漿膜下是否有灰白色小結節,經檢驗兔偽結核病。兔蚓突為盲腸的游離端,比較細,壁厚而內管狹窄,長約10厘米,表面光滑,顏色較淡。圓小囊在回腸與盲腸連接處,由腸管膨大形成的厚壁球囊。

3、胴體的檢驗 檢驗者左手握有齒鑷子,鉗住左側腹壁肌肉,右手持剪刀撐開右側腹壁,體腔,再檢查體表,注意胴體放血程度,有無出血、黃疸、膿腫等變化,如發現頸部,液淺和腹股溝淋巴結腫大,呈深紅色并有壞死灶,應考慮野兔熱和壞死桿菌病。

二、雞的剖檢 1.胴體檢查

(1)檢查放血程度 檢查胴體體表的顏色和皮下血管(如翅下血管、胸部與鼠蹊部血管)的充盈程度判定放血是否良好。放血良好的健康光禽,皮膚為白色或淡黃色,有光澤,看不到皮下的血管,肌肉切面顏色均勻,切斷面無血滴滲出。放血不良的光禽,皮膚呈紅色,表層血管充血,皮下血管顯露,一切斷口有血液流出,肌肉顏色不均勻。

(2)檢查頭部和肛門 觀察雞冠和肉髯,注意有無腫脹、結痂(雞痘)和異常變化,雞冠和肉髯呈青紫色或黑色,應注意檢查新城疫或禽流感;觀察眼球是否下陷,注意虹膜的色澤、瞳孔的形狀、大小以及有無鋸齒狀的白膜或白環(眼型馬立克氏病),眼睛和眼眶周圍有無腫脹,眼瞼內有無干酪樣物質(雞傳染性鼻炎、眼型雞痘);觀察鼻孔和口腔的清潔度,注意有無黏性分泌物或干酪性假膜(雞傳染性鼻炎、雞痘);觀察咽喉和氣管有無充血和出血,有無纖維蛋白性或干酪性滲出物(雞傳染性喉氣管炎、雞痘);觀察肛門的清潔度,注意是否緊閉,有無炎癥。

(3)檢查體表 觀察皮膚的色澤,注意皮膚上有無結節、結痂和疤(雞痘、馬立克氏病);看胴體有無外傷、水腫、化膿及關節腫大等病變。將白條雞仰臥放在搪瓷盤中,由胸骨柄到肛門,沿腹中線切開腹壁,并繞肛門一周,在胸前口頸基部切開皮膚,剝離嗉囊,名捕自腹壁開口并取出胃、腸、脾、嗉囊和心、肝等臟器,放在搪瓷盤中待檢。2.內臟檢查

(1)肝臟 觀察其色澤、形狀和大小,是否有腫大,有無黃白色斑紋和結節(雞馬立克氏病、雞白血病、雞結核病),有無壞死小斑點(禽霍亂等),膽囊有無變化,是否完整。

(2)脾臟 觀察是否有充血、腫大、變色和灰白色結節(注意雞結核病)。(3)心臟 注意心包膜是否粗糙,心包腔是否有積液,心臟是否有出血及贅生物等。

(4)胃 剖檢肌胃,剝去角質層,觀察有無出血;剪開腺胃,刮去胃內容物,觀察腺胃乳頭是否腫大,有無出血和潰瘍(注意雞新城疫、禽流感)。(5)腸 視檢整個腸管漿膜及腸系膜有無充血、出血、結節,特別注意小腸和盲腸。

(6)卵巢 觀察卵巢有無變形、變色、變硬等現象(注意卵黃性腹膜炎),注意卵巢的完整性。

用手術刀鈍性剝離腎臟,暴露腰薦神經叢,檢查其有無病變,也可自大腿內側肌肉縫剝離坐骨神經檢查。注意神經干的粗細和色澤。檢查全凈膛光禽體腔內是否有炎性滲出物、贅生物及寄生蟲等異常變化。

三、病料的采取

1.剖檢前檢查 凡發現患畜(包括馬、牛、羊及豬等)急性死亡時,必須先用顯微鏡檢查其末梢血液抹片中是否有炭疽桿菌存在。如懷疑是炭疽,則不可隨意剖檢,只有在確定不是炭疽時方可進行剖檢。

2.取材時間 內臟病料的采取,須于死亡后立即進行,最好不超過6h,否則時間過長,由腸內侵入其他細菌,易使尸體腐敗,影響病原微生物的檢出。

3.器械的消毒 刀、剪、鑷子、注射器、針頭等煮沸消毒30min。器皿(玻璃制品、陶制品等)可用高壓滅菌或-干烤滅菌。軟木塞、橡皮塞置于0.5%石炭酸水溶液中煮沸10min。采取一種病料,使用一套器械和容器,不可混用。

4.病料采取 應根據不同的傳染病,相應地采取該病常侵害的臟器或內容物。如敗血性傳染病可采取心、肝、脾、肺、腎、淋巴結、胃、腸等;腸毒血癥采取小腸及其內容物;有神經癥狀的傳染病采取腦、脊髓等。如無法估計是哪種傳染病,可進行全面采取。檢查血清抗體時,采取血液,凝固后析出血清,將血清裝入滅菌小瓶送檢。為了避免雜菌污染,病變檢查應待病料采取完畢后再進行。各種組織及液體的病料采取方法如下。(1)膿汁 用滅菌注射器或吸管抽取或吸出膿腫深部的膿汁,置于滅菌試管中。若為開口的化膿灶或鼻腔時,則用無菌棉簽浸蘸后,放在滅菌試管中。(2)淋巴結及內臟 將淋巴結、肺、肝、脾及腎等有病變的部位各采取1~2cm3的小方塊,分別置于滅菌試管或平皿中。若為供病理組織切片的材料,應將典型病變部分及相連的健康組織一并切取,組織塊的大小每邊約2cm左右,同時要避免使用金屬容器,尤其是當病料供色素檢查時(如馬傳貧、馬腦炎及焦蟲病等),更應注意。(3)血液

血清:以無菌操作吸取血液l0ml,置于滅菌試管中,待血液凝固(經1~2天)析出血清后,吸出血清置于另一滅菌試管內,如供血清學反應時,可于每毫升中加入5%石炭酸水溶液1~2滴。

全血:采取10ml全血,立即注入盛有5%檸檬酸鈉lml的滅菌試管中,搓轉混合片刻后即可。

心血:心血通常在右心房處采取,先用燒紅的鐵片或刀片烙燙心肌表面,然后用滅菌的尖刃外科刀自烙燙處刺一小孔,再用滅菌吸管或注射器吸出血液,盛于滅菌試管中。

(4)乳汁 乳房先用消毒藥水洗凈(取乳者的手亦應事先消毒),并把乳房附近的毛刷濕,最初所擠的3—4股乳汁棄去,然后再采集l0ml左右乳汁于滅菌試管中。若僅供顯微鏡直接染色檢查,則可于其中加入0.5%的福爾馬林液。

(5)膽汁 先用燒紅的刀片或鐵片烙燙膽囊表面,再用滅菌吸管或注射器刺人膽囊內吸取膽汁,盛于滅菌試管中。

(6)腸 用燒紅刀片或鐵片將欲采取的腸表面烙燙后穿一小孔,持滅菌棉簽插入腸內,以便采取腸管粘膜或其內容物;亦可用線扎緊一段腸道(約6cm)兩端,然后將兩端切斷,置于滅菌器皿內。

(7)皮膚 取大小約10cmXl0cm的皮膚一塊,保存于30%甘油緩沖溶液中,或10%飽和鹽水溶液中,或10%福爾馬林液中。

(8)胎兒 將流產后的整個胎兒,用塑料薄膜、油布或數層不透水的油紙包緊,裝入木箱內,立即送往實驗室。

(9)小家畜及家禽 將整個尸體包入不透水塑料薄膜、油紙或油布中,裝入木箱內,送往實驗室。

(10)骨頭 需要完整的骨頭標本時,應將附著的肌肉和韌帶等全部除去,表面撤上食鹽,然后包于浸過5%石炭酸水或0.1%升汞液的紗布或麻布中,裝于木箱內送到實驗室。

(11)腦、脊髓 如采取腦、脊髓作病毒檢查,可將腦、脊髓浸入50%甘油鹽水液中或將整個頭部割下,包人浸過0.1%升汞液的紗布或油布中,裝入木箱或鐵桶中送檢。

供顯微鏡檢查用的膿汁、血液及粘液;可用載玻片作成抹片;組織塊可作成觸片,然后在兩塊玻片之間靠近兩端邊沿處各墊一根火柴棍或牙簽十以免抹片或觸片上的病料互相接觸。如玻片有多張,可按上法依次墊火柴棍或牙簽重疊起來,最上面的一張玻片上的涂、抹面應朝下,最后用細線包扎,玻片上應注明口碼,并另附說明。

四、病料的保存

病料采取后,如不能立即檢驗,或需送往有關單位檢驗,應當加入適量的保存劑,使病料盡量保持新鮮狀態。

1.細菌檢驗材料的保存 將采取的臟器組織塊,保存于飽和的氯化鈉溶液或30%甘油緩沖鹽水溶液中,容器加塞封固。如系液體,可裝在封閉的毛細玻管或試管運送。

飽和氯化鈉溶液的配制法是:蒸餾水l00ml,氯化鈉38~39g,充分攪拌溶解后,用數層紗布過濾,高壓滅菌后備用。

30%甘油緩沖鹽水溶液的配制法是:中性甘油30ml,氯化鈉牛5g,堿性磷酸鈉l 0g,加蒸餾水至l00ml,混合后高,壓滅菌備用。

2.病毒檢驗材料的保存 將采取的臟器組織塊,保存于50%甘油緩沖鹽水溶液或雞蛋生理鹽水中,容器加塞封固。

50%甘油緩沖鹽水溶液的配制法是:氯化鈉2.5g,酸性磷酸鈉0.46g,堿性磷酸鈉10.74g,溶于l00ml中性蒸餾水中,加純中性甘油150ml,中性蒸餾水50ml,混合分裝后,高壓滅菌備用。

雞蛋生理鹽水的配制法是:先將新鮮的雞蛋表面用碘酒消毒,然后打開將內容物傾入滅菌容器內,按全蛋9份加入滅菌生理鹽水1份,搖勻后用滅菌紗布過濾,再加熱至56~58℃,持續30min,第2天及第3天按上法再加熱一次,即可應用。

3.病理組織學檢驗材料的保存 將采取的臟器組織塊放人10%福爾馬林溶液或95%酒精中固定;固定液的用量應為送檢病料的10倍以上。如用10%福爾馬林溶液固定,應在24h后換新鮮溶液一次。嚴寒季節為防病料凍結,可將上述固定好的組織塊取出,保存于甘油和10%福爾馬林等量混合液中。

五、病料的運送

裝病料的容器要一一標號,詳細記錄,并附病料送檢單。病料包裝容器要牢固,做到安全穩妥,對于危險材料、怕熱或怕凍的材料要分別采取措施。一般病原學檢驗的材料怕熱,應放入加有冰塊的保溫瓶或冷藏箱內送檢,如無冰塊,可在保溫瓶內放入氯化銨450~500g,加水1500m1,上層放病料,這樣能使保溫瓶內保持0℃達24h。供病理學檢驗的材料放在10%福爾馬林溶液中,不必冷藏。包裝好的病料要盡快運送,長途以空運為宜。實驗報告 作尸體剖檢報告一份

實驗四

大體標本制作

一、實驗目的

通過本實驗,掌握病理標本的制作方法,了解標本制作的原理,為學習、科研和臨床病理診斷 提供依據。

二、實驗材料

脫脂棉、膠布、石蠟、毛筆、醋酸鉀、甘油、蒸餾水、麝香草酚、10%福爾馬林、95%酒精、標本瓶(小的)

三、實驗內容:

一、取材→固定→加工處理→處理,瓶送與保存。

取材:取材時必須仔細,防止擠壓,標本應帶有明顯的病變或變化,并可適當的修理,使其便于裝瓶和觀察,體積較小的器官,可將整個留用。必須保持原組織器官的結構完整性。

固定:固定的目的在于使器官組織不腐敗變質,其體積,形態,結構不變,顏色也能長期保存。固定標本的容器應比較寬大,固定液應充足, 其體積至少為標本的5倍。固定標本時,容器底部墊以脫脂棉,漂浮的標本,其上面覆蓋浸濕固定液的紗布或脫脂棉,同一容器中不宜同時固定幾件標本。胃腸或囊狀器官的粘膜病變留作標本時,應剪開展于硬紙上。如需整體固定,保存膽囊或膀胱,可其中填入(注入)固定液或填充脫脂棉。固定標本時間因標本厚度,組織結構不同而異,胃腸壁需固定1~3天,子宮約 3~5天,1~2cm厚的實質器官需5~8天,固定時間不宜過長,否則回色不良,最常用的固定液為甲醛。固定后的標本需經加工處理才能裝瓶保存。普通標本制作比較簡單,原色標本的制作大多還要進行回色,一般通過酒精回色, 回色時間取決于顏色顯現的程度。當顏色顯現最鮮艷時即可停止。回色時間一般為1~2h ,回色前標本應在流水中沖洗12~24h。裝瓶與保存:這是最后一個步驟,標本應放入大小適當的清結標本瓶(或缸)中,標本裝瓶后,注入保存液。原色保存液為甘油,醋酸鉀(鈉),最后加蓋封口,貼標簽。原色標本要放在暗處或柜中,應避免陽光照射引起的褪色。

封標本瓶(或缸)口的方法很多: 1.膠布封貼瓶口后,其上再涂一層石蠟。石蠟先溶化, 用毛筆蘸取并迅速涂于膠布表面和邊緣。

2.用萬能膠(環氧樹脂)或白乳膠(聚醋酸乙烯)封口,先將封口膠涂于瓶和蓋的磨砂口上,蓋緊后其上用較重物品壓1~2天。

3.蜂蠟松香封口:將6:4的蜂蠟和松香隔水溶化,用毛筆蘸取并涂于瓶口, 然后將瓶蓋在火上烘熱在瓶口均勻壓緊。冷卻后用小刀烤熱再將瓶口與瓶蓋間的縫隙燙干。

二.普通標本制作法: 首先取材,固定于10%福爾馬林溶液(即甲醛用水稀釋10倍)中,固定時間可適當加長,一般為1~2周或更長,流水 沖洗12~24h 后,吸去標本表面的水分,裝瓶,用留水或清水配制10%福爾馬林溶液中保存。最好中性福爾馬林溶液(在1000ml10%福爾馬林液中,加入磷酸氫二鈉6.5克,和磷酸二氫鈉4克)。

三.原色標本制作法: 原色標本制作方法有多種,現將常用方法介紹如下: 第一種方法: 固定液:10%福爾馬林

回色液:95%酒精

保存液:醋酸鉀: 300克 甘油: 500克

蒸餾水: 1000ml 麝香草酚: 0.5克

固定4~6天,流水沖洗 20~30h ,回色后用紗布沾去標本表面上的酒精 ,裝入保存液瓶中封存。

第二種方法:(豈氏法)固定液:福爾馬林 100ml 醋酸鉀 15克

硫酸鉀 15克

蒸餾水 500ml 回色液: 95%酒精

保存液:蒸餾水 900ml 甘油 300ml 醋酸鉀 200克

麝香草酸 2克

固定1~2周,沖洗 12~24h ,回色約1~2h , 用蒸餾水洗去標本表面上的酒精,放入保存液中封存。

由于實驗室沒有大體標本和組織切片,以下實驗通過網上查找了部分圖片讓學生觀看.實驗五 局部血液循環障礙

一、實驗目的

通過實訓掌握并能識別常見組織器官血液循環障礙的眼觀和鏡檢病理變化.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 充血 一.大體標本

1.肺淤血:多見于左心機能不全。靜脈回流受阻,肺體積增大,被膜緊張,色紫紅,質地較堅實,切面流出多量暗紅色血液。淤血較久時,則易發生肺水腫,此時肺切面流出多量帶泡沫的血樣液體。肺間質增寬,富含水分。肺組織塊投入水中如載重舟。

思考題:用生理學知識分析肺淤血繼發水腫的原因。

2.肝淤血:常見于右心衰竭。淤血時體積增大,邊緣鈍圓,色暗紫紅色,切面流出多量暗紫紅色血液,淤血較久時,小葉中央部充血呈暗紅色,小葉邊緣則腫脹或脂變呈黃褐色,形成暗紅色與黃褐色相間的斑紋,類似中藥檳榔的斷面故稱“檳榔肝”。

腸淤血:腸壁靜脈擴張增粗,充滿暗紅色血液,形似樹枝狀。二.切片標本 1.慢性肝淤血

低倍鏡下,肝小葉中央部的竇狀隙和中央靜脈擴張,充滿紅細胞,肝索受壓萎縮甚至消失,小葉周邊部肝索排列紊亂;高倍鏡下,小葉周邊部肝細胞體積增大,胞漿內有大小不等的近圓形空泡(脂肪變性)。2.慢性肺淤血

低倍鏡下,肺內小靜脈、肺泡壁毛細血管顯著擴張,充滿紅細胞。肺泡及間質內見有淡粉紅色的漿液、數量不等的紅細胞和有核細胞成分。高倍鏡下見肺泡內的細胞成分主要是巨噬細胞,胞漿內吞噬有黃褐色含鐵血黃素顆粒的巨噬細胞即“心衰細胞”。3.腎小球動脈充血

低倍鏡下找到腎小球皮質部后,轉換高倍鏡觀察,可見腎小球毛細血管擴張,充滿紅細胞,致腎小球體積膨大,腎球囊狹窄。腎小管間毛細血管也擴張充血。

出血 一.大體標本

1.豬腎點狀出血:腎表面及切面上有多數針尖至菜籽大小的出血小點。此標本取至豬瘟病。

2.心內膜斑狀出血:心室內膜下出現黑紅色斑點,稱淤斑。

3.馬肝被膜下血腫:肝被膜下與實質之間有大的凝固血塊,周圍結締組織增生形成包裹。血腫周圍實質受壓貧血,呈淡黃褐色。

4.血管破裂性出血:乳牛產后子宮中動脈破裂出血,患畜死于失血過多。此標本示血管破裂處。

5.線狀出血:腸粘膜皺壁的頂端出血,呈暗紅色的線條,稱線狀出血。6.出血性子宮炎:子宮內膜彌漫性出血,呈暗紫紅色。二.切片標本 1.豬脾出血

鏡下可見脾竇擴張,充滿紅細胞。脾索及白髓內均有大量紅細胞出現。思考題:出血的概念。2.鼠肺出血

肺膿腫的另一端,肺泡腔內充滿大量紅細胞。

血栓形成 一.大體標本

1.牛肺靜脈紅色血栓:肺內擴張的靜脈內有一血塊,其中心紅色,邊緣淡黃,(這是因形成時間較久,邊緣血紅蛋白崩解之故)因發生血栓軟化,血管與血栓界線不清。

2.豬心瓣膜上白色血栓:二尖瓣向血流面有一干燥灰白贅生物附著,表面粗糙不平,呈花椰菜樣外觀。瓣膜變形、缺損。此標本取自慢性豬丹毒患豬。

4.動脈內白色血栓:馬前腸系膜動脈根部管腔擴大,管壁肥厚,內膜粗糙不平,內膜上附著干燥灰白片狀血栓物質。通過此標本理解血栓形成的條件。

5.肝內混合血栓:肝內擴張的血管內有一血栓,部分灰白(白色血栓),部分暗紅(紅色血栓)。此標本為牛肝硬變。二.切片標本 1.羊脾混合血栓

低倍鏡下見脾臟充血出血,在一至二個極度擴張的脾竇內見有血栓物質。血栓由粉紅色索狀物和大量紅細胞構成。高倍鏡下,粉紅色血小板條索間見有少量粒細胞。血栓邊緣可見成纖維細胞增生。2.肺微血栓形成

鏡下見肺內間質及肺泡隔上小血管及毛細血管擴張充血,多數血管中見有交織成網狀的纖維素,其中網羅有紅細胞。此為全身彌漫性血管內凝血(DIC)的表現。

思考題:血栓與死后血凝塊如何區別? 梗死 一.大體標本

1.馬腎貧血性梗死:梗死區呈灰黃色或灰白色,略向表面突起,干燥,質地脆弱,切面呈錐形,錐尖指向腎門部。梗死區與周圍組織交界和有紅色充血反應帶。

2.豬脾出血性梗死:脾臟邊緣部有高梁仔至黃豆大小黑紅色突起。(質略硬,切面略呈楔形,結構模糊不清)。此標本取自豬瘟。

思考題:從組織學結構分析,脾臟梗死應屬貧血性梗死,請分析豬瘟時,脾臟出現出血性梗死的可能原因。

3.肝出血性梗死:肝表面見有大小不等,形狀不規則的暗紅色斑塊,切面不規則。

思考題:用組織解剖學知識解釋不同器官的梗死灶具有不同形狀的原因。二.切片標本 1.羊脾出血性梗死

低倍鏡下見脾臟紅白髓界線不清,組織結構被破壞,小血管和血竇擴張充血,大量紅細胞堆積于組織內,在一極度擴張的血管內見有一混合血栓。高倍鏡下見脾臟淋巴細胞顯著減少,大量紅細胞之間散在有細胞核碎片。思考題:梗死與壞死的關系。

實驗六 水腫

一、實驗目的

通過實訓掌握并能識別常見組織器官水腫的眼觀和鏡檢病理變化.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 一.大體標本

1.皮下水腫:皮下疏松結締組織層增寬,有灰白色半透明物質聚集。2.肺水腫:肺體積增大,被膜緊張,重量增加,切塊投入水中如載重舟;切面流出大量血色泡沫狀液體;肺間質增寬,其間聚集白色膠凍樣水腫液。3.胃粘膜水腫:切面見胃粘膜下有灰白色膠凍樣漿液浸潤。

4.網膜脂肪膠樣水腫:網膜脂肪消失,由膠凍樣水腫液填充,網膜呈半透明。多見于全身營養不良,網膜脂肪被大量消耗時。

5.腎盂積水:此標本由于膀胱內腫瘤堵塞泌尿道,使尿液淤積于腎盂。眼觀見腎盂、腎盞擴張,呈大小不等的空腔,腎實質萎縮。二.切片標本 肺間質水腫

肺胞壁毛細血管擴張充血,肺泡腔內充滿淡粉紅色漿液和數量不等的細胞成分;間質擴張,膠原纖維解離、斷裂,漂浮于水腫液中,淋巴管擴張充滿大量淋巴液。

實驗七 細胞和組織的損傷

一、實驗目的

通過實訓掌握并能識別常見組織器官萎縮、變性和壞死的眼觀和鏡檢病理變化.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 萎縮 一.大體標本

1.脂肪的漿液性萎縮:機體營養不足時可發生全身性萎縮,脂肪組織的萎縮最早發生,脂肪組織消耗竭盡,為多量的漿液浸潤,呈灰白色半透明膠凍樣,故又稱脂肪組織的膠樣萎縮。標本有網膜和黃骨髓。

2.脾萎縮:脾臟體積縮小,重量減輕,質地變硬,邊緣銳薄;被膜皺縮增厚,呈灰白色。切面見脾小梁明顯,脾髓顯著減少呈紅褐色。3.壓迫性萎縮:

(1).肝:肝表面突起雞蛋大小充滿透明液體的白色囊泡,此即細頸囊尾蚴,是大泡帶狀絳蟲的幼蟲。囊泡周圍的肝實質因受壓萎縮。

(2).腎:腎體積增大,表面高低不平。切面見皮質和髓質界線不清,腎盞擴張,腎實質萎縮,厚薄不均。此標本為腎盂積水。

(3).腦:此標本為先天性腦積水。左右大腦半球因積水壓迫而未發育,尤以右大腦半球明顯。

(4).神經性萎縮:雞腹腔內有一雞蛋大小的血腫,因血腫壓迫腰薦神經,使其支配的一側腿部肌肉發生營養不良性萎縮。

(5).睪丸萎縮:一側睪丸體積顯著減小,質地變硬,被膜增厚,呈灰白色。另一側睪丸代謝性肥大。三.切片標本 1.肝壓迫性萎縮

肝臟的轉移平滑肌肉瘤壓迫肝臟引起肝細胞萎縮。鏡下見平滑肌肉瘤細胞周圍肝細胞索受壓變窄,肝細胞縮小,胞漿深染。2.橫紋肌萎縮

鏡下見肌纖維變細,肌漿減少,橫紋不明顯,胞核密集。間質增寬,結締組織增生。3.腎壓迫性萎縮

鏡下見腎皮質變薄,腎小管上皮細胞變薄。腎小球萎縮及玻璃樣變,少數腎小球代償性肥大。

變性 一.大體標本

1.豬腎腫脹:體積增大,被膜緊張,邊緣鈍圓,顏色蒼白渾濁呈水煮樣外觀。切面,皮髓質界線不清,質脆易碎。

2.豬皮膚水泡:豬蹄部皮膚上見有黃豆至蠶豆大的淺紅色潰瘍灶,此為皮膚上水泡破裂后所形成。此為豬水泡病的標本,通過此標本可了解細胞腫脹的發展。

3.豬肝脂肪變性:肝體積增大,質軟易碎,呈黃褐色、灰褐色或土黃色。肝脂變可發生在小葉中心或小葉周邊。若小葉周邊脂肪化,小葉中心區淤血,則形成紅黃相間的外觀,稱檳榔肝。

4.馬肝脂肪變性:肝臟體積腫大,質地松軟脆弱,整個肝臟呈灰黃色或黃色;切面結構模糊,觸之有油膩感,因脂變程度有差異,色彩不均勻。5.雞脂肝癥:雞肝體積腫大,呈土黃色,質地松軟易脆,組織中見有血凝塊。雞脂肝癥由嗜脂因子缺乏引起,導致肝彌漫脂化,患雞常因肝破裂出血死亡。

6.豬肺脂肪浸潤:肺小葉間質中多量脂肪浸潤,肺表面呈黃白網狀花紋。7.雞心脂肪浸潤:心外膜見多量淡黃色的脂肪組織圍繞。故稱脂肪心。思考題:脂肪變性與脂肪浸潤的區別。

8.結締組織透明變性:肝表面見有多量粟粒至高梁籽大的堅硬、灰白色、半透明小結節。此標本取自馬肝沙粒癥,肉眼所見結節為馬圓形線蟲的幼蟲及外圍透明變性的結締組織構成。

9.牛肝淀粉樣變性:肝體積增大,被膜緊張,邊緣鈍圓,質軟易脆,色灰褐。

牛肺粘液樣變性:肺內有兒頭大小的灰白色涼粉樣物質蓄積。二.切片標本 1.羊肝顆粒變性

低倍鏡下病灶區,胞漿嗜伊紅著紅色加深,肝細胞索之間的竇狀隙縮小甚至閉鎖。高倍鏡下見肝細胞腫脹,胞漿內充滿均勻的粉紅色顆粒,局部區域肝細胞腫大更明顯,胞漿內顆粒粗大稀疏。胞核無明顯變化。2.豬肝水泡變性及顆粒變性

低倍鏡下見肝細胞索排列紊亂,紅色著染不均,肝竇貧血,狹窄閉鎖。高倍鏡下見某些肝細胞內充滿多量微細顆粒,一些肝細胞體積顯著增大,胞漿淡染,清亮,其間有殘留的胞漿基質。胞核腫大淡染。3.腎小管脂肪變性

在腎皮質部腎曲小管上皮細胞中可見大小不等的近圓形空泡。4.馬肝脂肪變性 低倍鏡下,肝索排列紊亂,肝竇狹窄或閉鎖;肝組織內出現大小不等的空泡。高倍鏡下,見肝細胞內有大小不等的近圓形空泡,病變嚴重者,整個胞漿為脂滴占據,胞核被擠于一側,呈半月形。5.脂肪變性特殊染色

鏡下見細胞內空泡被鋨酸染成黑色。在普通石蠟切片中,脂滴被有機溶劑溶解呈空泡狀,與水泡變性的空泡不易區別,常用冰凍切片做特殊染色做鑒別診斷。

思考題:脂肪變性與細胞腫脹如何鑒別診斷? 6.結締組織透明變性

此標本為馬圓形線蟲幼蟲外圍的結締組織透明變性。鏡下可見數個大小不等的幼蟲結節,結節中心為紅染,均質無結構物質,散見有藍色粉未狀鈣化物沉著,此為死亡的幼蟲;蟲體外圍有粉紅染,均質透明玻璃樣外觀的物質環繞,其中有少數殘存細胞核,此為蟲體外結締組織透明變性。7.腎小球透明變性

此切片組織取自腎盂積水。低倍鏡下見腎皮質萎縮,腎小管減少導致腎小球相對集中。高倍鏡下見,腎小球的正常組織結構完全喪失,整個腎小球著染伊紅呈淡紅色均質無結構狀態,少量未消失的細胞核濃縮。8.肝淀粉樣變

鏡下見肝細胞索排列紊亂,肝細胞萎縮,變形,胞核濃縮或消失。在肝索和肝竇之間沉著有均質狀的淡紅色物質,此為淀粉樣物質。新鮮標本制作的切片用碘反應時,此物質呈紅褐色,再加稀硫酸溶液,則變為藍色或紫色,此反應與淀粉遇碘時的反應相似,故稱淀粉樣物質。

壞死 一.大體標本

1.馬腎貧血性梗死:梗死區干燥、堅實、呈灰白色或灰黃色,略向表面突起,切面形成三角椎形,椎尖向腎門,椎底朝表面,梗死區結構模糊,周圍出現充血出血的炎癥反應帶。

2.肌肉蠟樣壞死:此標本取自羔羊和牛的硒缺乏癥,壞死肌肉渾濁腫脹,干燥堅實,呈灰黃色或灰白色,形似石蠟。

3.結核干酪樣壞死:此標本為牛淋巴結結核。眼觀淋巴結體積增大,表面有大小不等的圓形或類圓形結節,切面見皮質和髓質中有白色或灰白色的干酪樣或豆腐渣樣的壞死物質,質地松軟易碎。

4.腹腔脂肪壞死:在黃色有光澤的脂肪組織中出現多個白色不透明、硬固,無光澤的斑塊和結節,此為脂肪組織壞死后皂化而形成

5.腦液化性壞死:在丙側腦的矢狀切面上見有黃白色乳汁狀的液化壞死灶,壞死組織開始被吸收故顯有不規則空隙。

6.牛耳尾干性壞疽:牛耳、尾的皮膚組織壞死后,由于水分被蒸發,被毛脫落變成干固皺縮棕黑色,壞死組織與周圍組織分界明顯,以后可因腐離脫落。

7.肺濕性壞疽:肺壞死處濕潤,呈污灰、灰綠或暗褐色,壞死組織有腐敗臭味。

8.肌肉氣性壞疽:此標本取自馬惡性水腫的臀部肌肉。肌肉呈棕黑色,觸之有捻發音。二.切片標本 1.壞死組織細胞核變化

先用低倍鏡找到肝臟的壞死灶,再用高倍鏡仔細觀察壞死細胞胞核的如下三種變化: 核溶解:多發生于細胞腫脹的情況下,胞核首先腫大,核染色質溶解,染色變淡,進而僅見核的輪廓,最后完全消失。通過此切片可體會核溶解的全過程。

核濃縮:細胞核體積縮小,染色質濃縮,染色加深呈深藍色。

核碎裂:染色持集聚集變為小的著色深的不均勻的顆粒狀物,散布于核內或靠近核膜,隨核膜破裂而分散有胞漿中,呈現大小不等的碎塊狀。2.肌肉蠟樣壞死

壞死的肌肉纖維腫脹、斷裂、橫紋消失,胞漿均質紅染或崩解成顆粒狀,胞核消失。間質水腫增寬,可見成纖維細胞增生和單核細胞、漿細胞等浸潤。

3.結核結節干酪樣壞死

病灶處原有的組織結構崩解消失,成為均質、紅染、顆粒狀的無結構物質,有的病灶中心已發生鈣化,外周有結締組織包裹。

實驗八 炎癥

一、實驗目的

1.識別各類型炎癥的眼觀和組織學病理變化.2.識別各種炎性細胞的組織學形態.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 炎癥滲出物 切片標本 1.漿液

此切片為漿液性肺炎,鏡下見肺泡腔及支氣管內充有粉紅色均勻一致的蛋白性滲出液。2.纖維素

此切片為大葉性肺炎。在肺泡腔中見有粉紅色絲狀物質,交織成絲網狀,其間有細胞成分。

3.各種炎癥細胞的形態觀察(1).中性白細胞

多見于急性炎癥早期或化膿性炎癥,具有活躍的運動和吞噬能力,主要吞噬細菌、死組織碎片抗原抗體復合。胞漿內含有豐富的嗜中性顆粒,H.E染成淡粉紅色,細胞幼年時核呈桿狀,成熟后分成2-5葉,故又稱為多形核白細胞。此切片為肌肉蜂窩織炎。(2).嗜酸性白細胞

主要由骨髓產生,多見于寄生蟲病及某些變態反應性疾病的炎癥灶中,運動能力較弱,有一定吞噬作用,能吞噬抗原抗體復合。細胞核一般分為兩葉,胞漿豐富,內含有粗大的強嗜酸性顆粒。此切片為豬食鹽中毒的嗜酸性粒細胞性腦膜腦炎。(3).淋巴細胞

運動能力較弱,沒有吞噬作用,多見于急性炎癥后期及慢性炎癥。細胞體積較小;核較大,圓形,深染;胞漿極少,嗜堿性,在組織切片中不易看見。(4).漿細胞

漿細胞是由B細胞受抗原刺激后演變而來的,主要見于慢性炎癥。漿細胞具有合成免疫球蛋白的能力。細胞呈球形或卵圓形,較淋巴細胞略大。胞漿豐富,略嗜堿性,核圓形,常偏于細胞一側,核染色質致密呈輻射狀排列。(5).單核細胞

病灶中的單核細胞主要由血管滲出,也可是組織原性的。主要見于急性炎癥的后期、慢性炎癥、非化膿性炎癥、病毒病、原蟲感染等,能吞噬細菌、組織碎片等較大異物,處理抗原后將抗原信息遞呈給免疫活性細胞。單核細胞胞體大,胞漿豐富,H.E染成粉紅色,核呈卵圓形、腎形或馬蹄形,染色質顆粒纖維而疏松,著色較淺。(6).多核巨細胞

多核巨細胞由多個巨噬細胞融合而成,具有強大的吞噬能力。細胞體積大,胞漿豐富,呈淡紅色,胞核形態學特點與巨噬細胞相似,但數量較多,從數個到數十個不等。傳染性肉芽腫時核排列在細胞周邊,或聚于一側,稱朗罕氏巨細胞;異物肉芽腫時胞核不規則地分布在胞漿中,稱異物巨細胞。炎癥類型 變質性炎癥 一.大體標本:

1.急性變質性腎炎:腎腫大,渾濁,質脆,表面散在有小點出血。在眼觀上與單純的變性或出血不易區別,應做組織學確診。

2.變質性肝炎:肝臟體積腫大,暗紅,表面和切面散在有針尖大至粟粒大的黃白色或灰白色壞死灶。二.切片標本 變質性肝炎

低倍鏡下可見肝組織內有大小不等的壞死灶,肝竇擴張充血。高倍鏡下,見壞死灶內肝組織結構崩解成一片紅染無結構物質,上面散見藍染的細胞核碎片,在壞死灶和周圍肝竇內見有少量單核細胞和嗜中性白細胞等浸潤,肝細胞腫脹及脂肪變性。滲出性炎癥 一.大體標本

1.牛皮膚漿液性炎:標本有口蹄疫患牛的舌、瘤胃。在舌側面,瘤胃肉柱上可見有大小不等的水泡,呈灰白色突起,部分水泡破裂后形成圓形潰瘍,表面覆有黑褐色結痂。

2.豬皮膚漿液性炎:豬發生水泡病時常在蹄叉部和嘴、鼻部皮膚發生漿液性炎,形成突出于皮膚表面的水泡,內含有淡黃色渾濁的液體,水泡破裂后形成爛斑。

3.漿液性肺炎:肺體積腫大,顏色紫紅或灰紅色,質地變硬、易碎。切面流出多量帶血的漿液。支氣管潮紅充血,間質增寬,水腫。

4.急性卡他性胃炎:胃粘膜潮紅,腫脹,常伴有小點出血,粘膜表面覆有大量灰白半透明的粘液性滲出物。

5.浮膜性腸炎:豬大腸粘膜上有多量黃白色纖維素膜,易于剝落,剝落后見粘膜完整,有充血、腫脹等炎癥變化。

6.固膜性腸炎:豬大腸粘膜上有多處突起于表面粗糙的痂樣物,呈黃白色或灰黃色。結痂為滲出的纖維素與壞死組織的混雜物,因壞死常波及深層組織,故難以剝離,若強行剝離,則形成出血的潰瘍面。因膜性腸炎常見于仔豬副傷寒和豬瘟。

7.纖維素性心包炎:此標本為牛創傷性心包炎。滲出的纖維蛋白附著在心外膜上,由于心臟病搏動,纖維蛋白形成無數的絨毛狀物覆蓋于心臟表面,故稱“絨毛心”。

8.化膿性肺炎:肺體積增大,質度較硬,切面上見有黃白、渾濁、大小不等的化膿灶。加壓時,由病灶實質和氣管中流出黃白渾濁的斑點,即為膿汁。

9.化膿性淋巴結炎:淋巴結體積腫大,切面見淋巴結的正常結構完全消失,被膜增厚,其內充滿黃白色豆腐樣物質,淋巴組織被膿汁完全取代。10.出血性淋巴結炎:此標本取自豬瘟。淋巴結體積顯著腫大,表面呈暗紅色,切面呈紅白相間的大理石樣外觀。

11.出血性腸炎:粘膜腫脹、呈暗紫紅色,有點狀或圓形出血斑塊。12.豬出血性子宮內膜炎:子宮內膜彌漫性出血,粘膜腫脹,呈紫紅色。二.切片標本 1.漿液性肺炎

肺泡腔內充有粉紅色的滲出液,其中混有少數脫落的肺泡上皮細胞及嗜中性白細胞、單核細胞、淋巴細胞等細胞成分。肺胞壁增厚,毛細胞血管充血,肺泡壁上有少數中性白細胞和淋巴細胞浸潤。支氣管內含有紅染炎性滲出液,小葉間質增寬,間質及淋巴管內有大量淡紅色漿液,其間浸潤有少量中性白細胞。間質膠原纖維腫脹,斷裂。2.固膜性腸炎

鏡下見病變部粘膜及粘膜下層壞死,正常結構消失,呈均質紅染無結構狀態。壞死組織中混有淡紅色絲網狀纖維素,周圍組織浸潤有多量巨噬細胞、淋巴細胞及少量中性白細胞;粘膜、粘膜下層及肌層血管充血、組織水腫。3.肌肉蜂窩織炎

肌間結締組織顯著增寬,結構疏松,其間浸潤有多量中性白細胞、淋巴細胞及巨噬細胞。肌纖維斷裂,橫紋消失,核濃縮或溶解消失,肌間血管充血、出血。4.化膿性腦炎

由化膿性細胞引起。在腦實質內見有一初期化膿灶,其中浸潤有大量中性白細胞,大部分已變性壞死(膿球)。膿腫灶周圍小膠質細胞增多,神經細胞變性壞死。腦膜增厚,水腫、充血,其中也有大量中性白細胞浸潤。增生性炎癥 一.大體標本

1.血吸蟲性結腸炎:腸壁顯著增厚,粘膜皺壁粗大,表面呈顆粒狀。此為腸粘膜及結締組織增生所致。

2.副結核性小腸炎:標本取自綿羊副結核病。小腸壁增厚,粘膜皺壁粗大形成腦回樣外觀。

3.寄生蟲性膽道炎:因膽道內肝片吸蟲寄生,引起膽道慢性炎癥。肉眼可見膽管壁及周圍結締組織增厚,表面呈灰白色粗大條紋,斷面呈灰白色圓管狀。

4.結核性肉芽腫:見大小不等的增生結節,呈灰白色,切面呈灰白色或灰黃色干酪樣外觀。二.切片標本 1.羊增生性腎小球腎炎

鏡下腎小球體積增大充滿腎小囊。血管內皮、間質細胞增生,其間有少量中性白細胞浸潤,細胞核增多呈富核現象。腎小管上皮細胞輕度變性。2.結核性傳染性肉芽腫

鏡下見結核性肉芽腫的中心為紅染無結構的壞死物質;周圍有大量的上皮樣細胞、巨噬細胞和朗罕氏巨細胞;再外圍為大量增生的成纖維細胞和新生的毛細血管組成的普通肉芽組織,其中浸潤有大量淋巴細胞。3.雞皮膚異物肉芽腫

真皮內有大量角質蛋白形成的包涵囊腫,角蛋白組織接觸誘發上皮樣細胞與多核巨細胞增生,形成肉芽腫性炎癥。

實驗十 腫瘤

一、實驗目的

1.掌握良性腫瘤與惡性腫瘤的形態結構區別要點.2.掌握動物常見腫瘤評理變化的主要特征.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 腫瘤的生物學特性

一.腫瘤的外形、質度、顏色、大小

1.外形:腫瘤的外形是多樣的,這與腫瘤的發生部位、組織來源、生長方式有一定關系。生長在皮膚和粘膜表面的腫瘤常向表面突起,呈結節狀、息肉狀或乳頭狀。如膽管腺瘤呈絨毛狀,地方性血尿膀胱上的腫瘤呈乳頭狀或菜花狀。惡性腫瘤表面常有出血和壞死,如羊耳皮膚鱗癌標本。深層組織的腫瘤常呈結節狀、分枝狀或囊狀,如脂肪瘤、纖維瘤、平滑肌瘤、惡性黑色素瘤等呈結節狀。若腫瘤細胞在器官組織內呈浸潤性生長,則不形成明顯的腫塊,但使該組織器官彌漫性腫大,如雞淋巴白血病的“大肝病”,神經纖維瘤形成的粗大條索狀。有的腫瘤呈囊狀,如鴨卵巢囊腺瘤。2.硬度:腫瘤的硬度與腫瘤組織的種類及實質和間質的比例有關。如粘液瘤、脂肪瘤柔軟;纖維瘤、軟骨瘤則較硬。

3.色澤:腫瘤的色澤與腫瘤的組織種類、色素、有無出血有關。如黑色素瘤呈深黑色,脂肪瘤呈黃色,纖維瘤呈灰白色,淋巴瘤呈淡紅色。4.大小:腫瘤的大小不一致。小的在顯微鏡下才能看到,大的可長到很大,如標本子宮平滑肌瘤有數公斤。二.腫瘤的生長方式 1.膨脹性生長:是多數良性腫瘤的生長方式。如標本脂肪瘤呈結節狀,周圍有完整包膜,與鄰近組織的界線清楚。

2.浸潤性生長:是大多數惡性腫瘤的生長方式。如馬皮下纖維肉瘤,腫瘤組織向皮下附近組織浸潤生長,因而此腫瘤無包膜,與鄰近組織無明顯界線。

3.外生性生長:是體表、體腔表面或自然管道表面腫瘤的生長方式。如食道乳頭瘤,腫瘤由食道內向管腔內生長,呈乳頭狀結構。三.腫瘤的轉移(一).淋巴道轉移

1.黃牛惡性間皮瘤淋巴結:此淋巴結為肺門淋巴結,惡性間皮瘤細胞經淋巴液進入肺門淋巴結,引起該淋巴結形成續發性間皮瘤,外觀體積腫大,切面呈灰白色。

2.乳腺癌淋巴轉移組織切片:可見淋馬結的被膜淋巴管擴張,內有腫瘤細胞栓子。(二).血源性轉移

馬惡性黑色素瘤全身血液性轉移:原發瘤常位于尾根部皮下,晚期經血源向遠處器官轉移,可見肝、心、肺、網膜、淋巴結、肌肉等器官形成轉移瘤。

(三).種植性轉移

黃牛惡性間質瘤:因種植性轉移,在肉膜上可見無數的腫瘤結節。四.腫瘤的組織結構

主要觀察腫瘤組織結構的異型性、腫瘤細胞的異型性,良性腫瘤分化程度高,異型性小,惡性腫瘤則相反。1.皮膚乳頭瘤 皮膚乳頭瘤是來源于鱗狀上皮,向皮膚表面呈樹枝狀生長的良性腫瘤。鏡下見縱切為手指樣突起,橫切則呈圓形。低倍鏡下,每一個乳頭的表面,覆蓋鱗狀上皮細胞即腫瘤的實質,其細胞增生旺盛,層次明顯增多,角化層也顯著增厚及不全角化。指狀突起的中心為血管及結締組織構成,此即腫瘤間質。高倍鏡下見腫瘤細胞體積較大,為多邊形,核漿比例正常,不見核分裂,有正常鱗狀上皮的層次(角化層、顆粒層、棘層和基底層),腫瘤間質中見有少數淋巴細胞浸潤,其間缺乏毛發和遙體。因細胞形態和組織結構與正常的皮膚上皮異型性很小,故為良性腫瘤。2.膀胱鱗癌

鏡下見膀胱粘膜由移行上皮化生為鱗狀上皮并發生癌變。鏡下見癌變的鱗狀上皮向深層組織浸潤生長,被結締組織間質分割成不規則的巢狀或條索狀細胞團塊,此即為癌巢。癌巢內細胞多面形,相互嵌合,有的癌巢中心可見細胞角化(癌珠),根據以上特點,腫瘤來自鱗狀上皮組織。癌巢內細胞形態差異較大,體積大小不等,甚至出現瘤巨細胞,核漿比例上升,核大小、形態不一致,可見大核、雙核甚至多核,核深染,染色質呈粗顆粒狀,核仁肥大。病理性核分裂相多見,可見不對稱雙極核分裂、三極核分裂、星形或環形核分裂。腫瘤組織內明顯壞死及出血。此腫瘤沒有正常復層鱗狀上皮的層次結構,細胞異型性大,核分裂相多見,組織內出血壞死,均為惡性腫瘤的特征。3.纖維肉瘤

纖維肉瘤是惡性間葉性腫瘤中最常見的一種。鏡下見瘤組織內細胞多,纖維成分少。瘤細胞大小不等,呈橢圓形或胖梭形,核肥大深染,核分裂像多,并見有多核巨細胞。腫瘤間質較少,與實質無明顯分界,間質內毛細血管較豐富。通過此切片進一步體會惡性腫瘤細胞形態和結構的異型性。五.常見腫瘤 1.豬淋巴結黑色素肉瘤

此為惡性黑色素瘤轉移到淋巴結的轉移瘤。鏡下見淋巴絕大部分正常組織消失,由腫瘤細胞所取代。瘤細胞松散,呈不規則的片塊或條索狀,間質疏松。瘤細胞大小不等,形態多樣,呈短梭形、多角形、橢圓形或不規則形。核大,圓形,橢圓形或不規則形,深染,易見核分裂,胞漿內有數量不等的棕黑色的黑色素顆粒,密集時把核遮蓋。2.淋巴細胞肉瘤

牛肩前淋巴結切片。在低倍鏡下見淋巴細胞結構完全消失,為排列松散、形態異常的淋巴瘤細胞代替,被膜上亦有腫瘤細胞浸潤。在高倍鏡下見細胞呈圓形,胞漿少,核大圓形,染色較深;細胞大小不一,胞漿染色深淺不一致,病理性核分裂像多見。3.雞卵巢腺癌

鏡下見癌細胞排列成大小不等的巢狀,癌細胞成立方、柱狀或多邊形,核深染,胞漿空泡狀,癌巢中心常見充有蛋白液的腔隙,周圍細胞多層不規則排列,少數呈單層腺管結構。癌巢間有不均勻分布的結締組織及豐富的平滑肌纖維。癌實質明顯侵犯漿膜。4.牛肺癌

先用低倍鏡找到病變處,其特點是很多細胞聚集成團,外有多少不等的結締組織包繞,形成大小不等的巢狀結構,癌巢細胞排列成實心團塊,或有裂隙,中心常有壞死。高倍鏡下,癌細胞形態大小不一致,胞核大而深染,可見核分裂像;胞漿少而淡染。癌組織鄰近的肺組織,肺泡腔受壓縮小,肺泡壁充血。5.平滑肌肉瘤 鏡下見癌細胞豐富呈梭形,縱橫交錯呈紡織狀或漩渦狀,核大而深染,橢圓形,兩端鈍圓,核分裂像多見,胞漿紅染。在癌細胞之間有多少不等的纖維組織。

實驗十一

心臟病理

一、實驗目的

通過實訓掌握和識別心包炎、心肌炎和心內膜炎眼觀和鏡檢的病理變化特征.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 一.大體標本

1.豬丹毒潰瘍性心內膜炎:豬心臟二尖瓣瓣膜潰爛缺損,其向血液面形成大量灰白色的血栓物質,其炎癥實質為固膜性炎。瓣膜附近的心內膜上,見有小的黃色壞死斑。

2.牛創傷性心包炎:心臟因機能加強而顯著肥大,心外膜增厚,表面附著多少不等的纖維素,呈“絨毛心”外觀。當纖維素被機化后,常引起心包膜和心外膜之間粘連。

3.寄生蟲性動脈瘤:馬的普通戴氏線蟲幼蟲常寄生于前腸系膜動脈部的血管內膜下,便該處動脈擴張,胡桃大,切開時見管壁增厚,管腔擴張,內膜粗糙不平,附著紅色或灰白色血栓物質及蟲體。

4.牛寄生蟲性主動脈硬化:牛圓形盤尾絲蟲侵犯主動脈,致管壁壞死、鈣化,血管壁增厚,變硬,切割有石感。血管內膜粗糙,凹凸不平。5.羔羊白肌病的心肌變性、壞死及鈣化:心外膜下心肌變淡,渾濁淡黃色或灰黃色,質地脆弱,以心內膜下特別是右心內膜下、乳頭肌及瓣膜附近的心肌最為顯著,在心內膜下尚可見乳白色鈣化斑點。二.切片標本 1.潰瘍性心內膜炎 心瓣膜增厚,瓣膜一側表面覆蓋多量紅染物質,其中見有藍染的細菌叢,這是瓣膜上附著的血栓,血栓下心內膜細胞消失,肉芽組織增生,其中有巨噬細胞、中性粒細胞、淋巴細胞浸潤。2.羔羊白肌病心肌壞死及鈣化

鏡下見鄰近心內膜一側的心肌纖維凝固性壞死灶,壞死灶及周圍間質深積深藍染的鈣鹽。壞死灶內多量成纖維細胞增生,并見有單核細胞浸潤。3.急性心肌炎

標本為羊鏈球菌病。心肌間質水腫、增寬,有彌漫性中性粒細胞浸潤。受累心肌發生顆粒變性、水泡變性,并見有灶性壞死。4.牛鏈球菌心內膜炎

牛右心三尖瓣上有血栓團塊,其中混有多數藍色細菌團塊及白細胞核碎屑。

實驗十二

淋巴結和脾臟病理

一、實驗目的

通過實訓掌握和識別淋巴結炎和脾炎的眼觀和鏡檢的病理變化特征.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 一.大體標本

1.淋巴結炎是一種極為常見的病理變化,見于局部感染及全身敗血癥時,根據炎癥性質不同,分為幾種:

2.單純性淋巴結炎:多見于某些急性傳染病的初期及局部組織器官的急性炎癥。淋巴結體積增大,質地柔軟,切面濕潤多汁,微突起,色潮紅,有時有不顯著的小點出血,淋巴濾泡明顯,呈顆粒狀突起。

3.出血性淋巴結炎:見于某些急性傳染病,如豬瘟、炭疽等。肉眼見淋巴結輕度腫大,彌漫性暗紅或黑紅色。切面濕潤,暗紅色與灰白色相間,呈大理石樣外觀。

4.化膿性淋巴結炎:見于局部化膿菌感染或全身膿毒敗血癥時,肉眼見淋巴結腫大,有黃色化膿灶,切面可見膿汁流出。

5.增生性淋巴結炎:常見于結核、副結核、鼻疽、布氏桿菌癥等慢性傳染病。豬支原體肺炎的肺門淋巴結最為典型,肉眼見肺門淋巴結高度腫大,灰白色,切面灰白色、濕潤。

6.急性脾腫大:脾臟顯著腫大,暗紅或紫紅,邊緣鈍圓,質地柔軟,切面突出,結構模糊,紅白髓界線不清,脾髓易被刀背刮落。二.切片標本 1.急性淋巴結炎 鏡下見淋巴結被膜及實質的小血管和毛細血管明顯充血、出血,淋巴竇擴張,充有漿液及大量的中性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞,并見有少量紅細胞。淋巴細胞增生不明顯。2.慢性增生性淋巴結炎

低倍鏡下見淋巴組織大量彌漫增生,皮質區擴大,淋巴小結反應中心明顯,皮質竇狹窄,髓索增粗,髓質竇中有多量細胞。血管充血不明顯。高倍鏡下見皮髓質中大量淋巴細胞增生,髓索中有多量漿細胞,淋巴竇內充滿單核細胞和淋巴細胞。3.急性脾炎

鏡下見脾小體顯著減少,殘存的脾小體與紅髓界限不清。紅髓充血,其中有大量含鐵血黃素沉著,脾竇、脾索界限不清,小梁平滑肌稀疏、變性。紅髓和白髓中均有大量巨噬細胞、中性粒細胞浸潤,并可見少數出血性壞死灶。4.慢性脾炎

鏡下見脾臟的正常組織結構消失,成纖維細胞和平滑肌細胞大量增生,在增生組織間浸潤有嗜酸性粒細胞及淋巴細胞。

實驗十三 呼吸器官病理

一、實驗目的

通過實訓掌握和識別常見肺炎、肺氣腫和肺萎陷的病理形態特征.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 一.大體標本

1.纖維素性肺炎:標本為傳染性胸膜性肺炎的紅色及灰色肝變期。肉眼見肺體積增大,硬度增加,色暗紅,切面較干燥,呈顆粒狀;切塊在水中下沉。肺小葉間質增寬,灰白色,其中可見擴張淋巴管的斷面,肺膜顯著增厚,灰白色,表面粗糙,有附著的纖維素。

2.支氣管肺炎:亦稱小葉性肺炎,由多種致病微生物引起。初期常表現為小葉性,以后可發展成大葉性。按其炎癥性質可表現為漿液性炎、卡他性炎、化膿性炎及壞疽性炎。

3.漿液性炎癥:病變部體積增大,灰紅色,質堅實,切面平整,有大量微渾濁帶泡沫的漿液性液體流出,切塊在水中半沉浮。支氣管粘膜紅腫,有多量粘液,間質增寬,水腫。

4.卡他性炎癥:病變部體積增大,灰紅色或灰白色,質度堅實,易碎。切面平整濕潤,流出多量灰白色渾濁液體,切塊在水中下沉,支氣管粘膜紅腫,有多量灰白渾濁粘性液體。間質增寬,灰白,多汁。

5.化膿性炎癥:且表面、切面見有黃色斑點,加壓時可排出粘稠膿液,有時形成大小不等膿腫,并有灰白色膿膜形成,膿液排出后形成空泡。6.壞疽性炎癥:肺組織發生壞死和腐敗分解,病灶污穢,黃褐或灰紅色,外觀如粥狀。當病灶與支氣管相通,腐敗分解物排出后,可形成空洞,穿通肺膜時,可造成氣胸及膿胸。

7.間質性肺炎:病變部呈黃白色,質地稍變實,表現為結節性、小葉性或大葉性。

牛慢性肺泡氣腫:肺體積顯著增大,顏色蒼白,實質內可見針頭至豌豆大小的空泡,切割時發出特殊的爆裂間。切面平滑、干燥、呈海綿狀或蜂窩狀,切塊在水中上浮三分之二以上。

8.牛肺間質氣腫:標本為甘薯黑斑病中毒肺,肺體積增大,間質擴張,其中見串珠狀排列的小氣泡,氣泡黃豆至核桃或雞蛋大,有時可達拳頭至小兒頭大,肺膜光滑透明,易破裂。二.切片標本

1.纖維素性肺炎紅色肝變期

鏡下見肺泡壁明顯增厚,毛細血管擴張充血,并有一定數量的中性白細胞和少量巨噬細胞浸潤。肺泡腔內充滿粉紅染絲網狀的纖維素,并可見纖維素穿過肺泡孔與相鄰肺泡內的纖維素網連接,肺泡腔內含有大量脫落的肺泡上皮細胞;細支氣管腔內也含有大量纖維素和脫落的支氣管上皮細胞。小葉間質增寬,有大量纖維素滲出,膠原纖維腫脹、溶解,間質內浸泣有大量崩解的中性粒細胞,淋巴管擴張充滿炎性滲出物。2.化膿性支氣管肺炎

鏡下見部分肺泡腔內充滿紅色滲出液,其中有漏出的紅細胞、脫落的肺泡上皮細胞和中性粒細胞;肺泡壁毛細血管充血或受壓貧血。支氣管腔內有粉紅色漿液、脫落的支氣管上皮細胞和大量的中性粒細胞,支氣管壁水腫增寬,支氣管周圍血管充血。病灶周圍肺組織充血。3.間質性肺炎(綿羊梅迪病)

小支氣管、細支氣管粘膜下層中有大量單核細胞、淋巴細胞灶狀聚集,肺泡壁上有大量單核細胞、淋巴細胞浸潤使肺泡壁增厚,甚至形成結節狀。病灶內大部分肺泡內含有粉紅色漿液、中性粒細胞、單核細胞和淋巴細胞,部分肺泡擴張,甚至破裂。

實驗十四 消化器官病理

一、實驗目的

通過實訓掌握和識別胃腸炎炎和肝臟的常見病理變化特征.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 一.大體標本

1.雞球蟲病出血性腸炎:腸壁增厚,質地較硬,粘膜腫脹,廣泛出血量暗黑色。

2.纖維素性出血性腸炎:甩壁充血、水腫,出血明顯,有大量纖維素附著在粘膜面形成污綠色假膜。

3.副結核慢性增生性腸炎:腸壁增厚,粘膜肥厚折疊成腦回樣,不易展平。4.腸穿孔:由直腸檢查時引起馬直腸破裂,裂口哆開,邊緣不整齊。5.胃潰瘍:可由微生物、寄生蟲或營養因素引起。此標本為豬胃底部潰瘍,潰瘍大小和形狀不一致,表面覆蓋污灰色壞死物質,潰瘍灶邊緣腫脹肥厚。6.肝硬變:主要特征為肝小葉間結締組織增生呈灰白色網格,小葉輪廓明顯。肝臟質地變硬,切開時有抵抗感,體積縮小變形,表面呈顆粒狀或結節狀。肝常染膽色素,色彩斑駁。有的硬變肝臟體積增大,表面平滑,結締組織彌漫增生,小葉結節不明顯。肝片吸蟲引起的肝硬變可見膽道增粗。二.切片標本 1.肝硬化

鏡下見纖維結締組織大量增生,分割肝小葉,使肝小葉成大小不等的圓形小島,稱假肝小葉。假肝小葉無中央靜脈、中央靜脈偏于一側或有兩個中央靜脈。假小葉內肝索排列紊亂,肝細胞腫脹、脂變甚至壞死。假小葉周圍增生的結締組織中有淋巴細胞和單核細胞,可見新生的小膽管,其上皮細胞核染色稍深,還可見肝細胞團塊或殘存肝細胞再生形成的結節,即假膽管。2.肝壞死

鏡下見肝小葉中凝固性壞死灶,其中充滿大量紅細胞、少量中性粒細胞和單核細胞,壞死灶周邊殘留的肝細胞腫脹和脂變。3.胃潰瘍

鏡下見潰瘍灶表面由少數炎性滲出物,其下為壞死的胃腺上皮組織,固有膜充血、出血,有中性粒細胞和巨噬細胞浸潤。4.急性出血性壞死性腸炎

腸粘膜表面深淺不一的壞死,甚至深達整個粘膜層。壞死灶表面有大量紅細胞和纖維素滲出,壞死灶內有大量中性粒細胞和單核細胞浸潤,壞死灶內血管輪廓尚存,其內有纖維素性血栓。粘膜下層和肌層水腫,炎性細胞浸潤。

5.急性卡他性胃炎

胃粘膜表面覆有粘液,粘膜上皮變性、脫落,粘膜層血管充血,淋巴細胞、巨噬細胞及中性粒細胞浸潤。

實驗十五 泌尿生殖器官病理

一、實驗目的

通過實訓掌握和識別各型腎炎、卵巢囊腫、子宮內膜炎、乳腺炎病理變化特征.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 一.大體標本

1.急性滲出性腎小球性腎炎:腎臟體積腫大,黃褐色,質地脆弱。被膜容易剝離,切面皮質增厚,在紅褐色背景上有無數呈放射狀的灰黃色條紋。2.急性腎小球腎炎:豬腎體積腫大,顏色蒼白,切面濕潤,皮質增寬,皮髓質分界明顯。

3.牛間質性腎炎:腎體積腫大、柔軟,顏色蒼白,被膜容易剝離。切面蒼白濕潤,皮髓界限模糊,腎實質較堅實。此為間質性腎炎的亞急性階段。4.皺縮腎(慢性腎小球性腎炎):是急性腎為的轉歸。眼觀腎體積縮小,顏色蒼白,質地堅實,表面不平呈顆粒狀,被膜難以剝離。切面蒼白,皮質變窄,皮髓界限不清,有時可見灰白色條索貫穿皮質與髓質。5.乳牛腎盂腎炎:是一種化膿性腎炎,常由尿路感染引起。眼觀腎體積顯著腫大,皮質柔軟,表面見淡黃色化膿灶。切面腎盂擴張,各有污濁膿液,部分乳頭化膿壞死,髓質部尚可見,皮質中亦可見到黃色膿腫灶,周圍有紅色炎性反應帶。

另一標本,腎高度腫大,被膜難剝離,表面有隆起的黃色化膿灶,切面皮質及髓質內有多個黃色化膿灶,由于結締組織增生顯著,腎蒼白,質堅實,腎盂及輸尿管擴張積液。6.腎盂積水:腎盂和腎盞擴張,同時腎實質萎縮,腎錐體的尖端變寬,形成囊狀擴張,常見于泌尿道阻塞。

7.腎囊腫:多見于豬,亦可見于牛和兔,分先天性及后天性囊腫,一般屬前者。眼觀腎皮質部有單發或多發性囊腫,小的黃豆大或豌豆大,大的的核桃甚至雞蛋大。囊壁薄而透明,內壁光滑,內含透明淡黃或略淡紅色的清亮液體。

8.出血性子宮內膜炎:漿膜無明顯變化,切開子宮,見子宮內膜彌漫性出血,呈紫紅色,粘膜變性、壞死,上皮脫落。

9.慢性化膿性子宮內膜炎(子宮積膿):子宮腔內蓄積大量膿液,子宮腔擴張,子宮體增大。切開子宮后,見膿液呈黃白干酪樣,子宮粘膜面粗糙,污穢無光,子宮壁增厚或變薄。

10.卵巢囊腫:此標本為卵泡性囊腫,卵巢內有多個大小不等的囊腫,內含清亮液體,囊壁較厚。二.切片標本

1.急性滲出性腎小球腎炎

鏡下見腎小囊擴張,充滿淡紅色的漿液和絲網狀纖維素,其中混有中性粒細胞和脫落的壁細胞,一些腎小囊中有漏出的紅細胞和滲出的單核細胞。腎小球細胞成分增多,毛細胞血管閉鎖貧血。腎小管上皮細胞顆粒變性,管腔內充滿蛋白液。腎小管間毛細血管充血或出血。

2.急性增生性腎小球腎炎鏡下見腎小于體積增大,充滿腎囊腔,腎小球血管叢內細胞增多,呈富核現象,動脈毛細血管受壓貧血。增多的細胞主要是血管內皮細胞和間質細胞,及浸潤的少量中性粒細胞和淋巴細胞。3.慢性腎小球腎炎鏡下見腎小球毛細血管增厚明顯,管腔逐漸狹小,最后完全閉塞,腎小球逐漸被結締組織取代,發生玻璃樣變,最后整個腎小球呈粉紅染無結構團塊,從而使出球小動脈供血的腎小管萎縮、消失。間質纖維組織增生,并有多量淋巴細胞浸潤,增生的纖維組織收縮使病變的腎小球互相靠攏,殘存的腎單位代償性肥大。腎小管擴張,上皮細胞由立方形變為扁平。中小動脈壁增厚,要發生玻璃樣變,管腔狹窄。4.慢性腎盂腎炎

鏡下見腎髓質部有數個膿腫灶,周圍有結締組織增生形成包裹,其中浸潤有大量淋巴細胞、漿細胞及單核細胞。有一些集合管和腎小管內均見膿細胞團塊。5.間質性腎炎

鏡下見腎小球周圍及腎小管間結締組織內有大量成纖維細胞增生,其間有大量淋巴細胞、單核細胞和少量單核細胞、漿細胞浸潤。6.中毒性腎病

鏡下見近曲小管廣泛凝固性壞死。壞死灶周圍腎小管管腔內有蛋白液和細胞管型。

實驗十六

神經器官病理

一、實驗目的

通過實訓掌握和識別非化膿性腦炎的病理組織學特征和雛雞腦軟化的特點.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容: 一.大體標本

對各型腦炎一般肉眼難以判別,在重癥時可見蛛網膜及軟膜水腫增厚,微渾濁,其血管因充血而顯露,有時可見暗紅色出血點,腦回增厚,略扁平,腦溝狹窄。腦實質松軟,切面潮紅濕潤,并有血液從血管端流出。在剝開顱腔及切開實質時,可見蛛網膜下腔及腦室內有多量渾濁液體。二.切片標本

1.急性非化膿性淋巴細胞性腦炎

血管管套:腦內血管明顯擴張充血,血管周圍間隙增寬,水腫。在小血管周圍有大量淋巴細胞和單核細胞浸潤形成管套。血管內皮細胞有腫脹、脫落現象。

神經細胞變性壞死:神經元細胞腫脹、蒼白,細胞核偏位,尼氏體溶解。一些神經元表現為嗜伊紅深染,核固縮或消失。

神經膠質細胞增生:在變性、壞死的神經細胞周圍常有少突膠質細胞增生圍繞呈衛星現象,小膠質細胞進入壞死的神經細胞內呈嗜神經元現象。在腦實質的其他部位,可見小膠質細胞結節性或彌散性增生。

腦膜增厚水腫、血管擴張充血出血,部分血管內有血栓形成,腦膜上浸潤有大量單核細胞和淋巴細胞,變化以腦溝處最明顯。2.急性非化膿性嗜酸性粒細胞性腦炎

腦膜增厚,血管充血,血管壁及周圍有許多幼稚性嗜酸性粒細胞和少量淋巴細胞浸潤。腦實質血管數量增多,內皮腫脹變圓或脫落。血管擴張充血,周間隙增寬,浸潤多量嗜酸粒細胞,圍繞血管形成管套。灰質內見有散在的微小海綿狀空腔化區。神經細胞變性,小膠質細胞呈彌漫或結節狀增生。3.化膿性腦膜腦炎

腦膜特別是腦溝處腦膜增厚,內有大量中性粒細胞及少量單核細胞、淋巴細胞浸潤,纖維素滲出,血管擴張充血;可見血管壁纖維素樣壞死及管內血栓形成。在腦膜上與腦室附近的腦組織內小血管周圍有少量中性粒細胞浸潤,血管周間隙水腫增寬。4.化膿性腦炎

鏡下見腦灰質內形成化膿灶。

實驗十七 營養代謝病病理

一、實驗目的

通過實訓掌握和識別常見營養代謝病病理特征.二、實驗材料

大體標本、切片標本、光學顯微鏡、香柏油、二甲苯、鏡頭紙、圖畫本等

三、實驗內容:

一、大體標本

1.橫紋肌變性壞死及結締組織增生(白肌病)

病變多發生于臂、肩胛、胸、背部肌肉及膈肌與腰肌,肉眼見病變肌肉顏色蒼白變淡,結構模糊,渾濁蠟樣,質度脆弱,有些地方因肌肉結締組織增生,而出現縱行灰白色條紋。除變性,壞死外,有時可見肌肉出血,在病變都出現暗紅色斑塊,背腰肌肉最顯。2.骨軟化與佝僂病

(1).馬軟骨癥頭骨:馬骨軟癥時,頭骨變化特別明顯,由于骨質被破壞,骨樣組織增生,因而骨腫脹松軟。外觀見面骨腫大,下頜骨質增厚,臼齒深埋,骨質易于折斷或刺破.干制標本由于結締紡織已被除去,因而呈現多孔疏松結構。

(2).豬骨軟癥頭骨:頭骨扁平,骨腫大,增厚,質度軟弱,淡紅色;骨質易被刀針等銳器切割或穿透,由于骨質腫大,柔軟,尚可見頭部腫大,鼻道狹窄及臼齒深埋現象。

(3).仔豬佝僂癥:可見長骨短而粗,蘑菇樣,骨板增寬不規則,并見出血,骨彎曲易切割,肋骨與肋軟骨交界處腫大成肋骨串珠。3.仔豬缺鋅病

病變主要見于前后肢、頭部、耳和尾部皮膚,病變皮膚因角化不全,顯著增厚,起皺、粗糙、呈現裂縫與凹凸不平的褐色厚痂。

二、切片標本 1.骨軟癥(頭骨)

骨組織大部分被破壞、吸收或消失。殘留骨質鈣鹽減少,呈蘭色條索或塊狀,其余大片淡紅區域為增生的骨樣組織。在淡蘭色的骨質殘片中可見骨細胞萎縮、消失,僅留下空囊。而染成蘭色的鈣鹽僅在于骨殘片的中央,其邊緣鈣鹽已完全消失而成類骨組織,殘留骨質的邊緣,可見兩種細胞:胞漿紫紅、核集中一側或中央。形態不規則的多核破骨細胞和較大而多角形的成骨細跑。表明骨的破壞與再生相互交錯進行。殘留骨質以外的地方為堆積的骨樣組織,、其中有大量的成骨細胞。2.佝僂病(長骨)

軟骨細胞肥大區沒有鈣鹽沉著,也沒有血管從干骺端侵入此區,缺少這兩個條件時,軟骨細胞吸收延遲而大量堆積,正常的柱狀排列消失,新形成的骨樣組織不能鈣化而堆積起來,骺板軟骨明顯增厚。3.化膿性肌炎

肌層有彌散性中性白細胞浸潤和多發性小膿腫形成,肌纖維變性、腫脹,局灶性壞死和溶解。中性粒細胞彌散性浸潤于壞死灶和膿腫處有大量淡紅色的蛋白網絲形成,血管壁纖維素樣壞死。4.白肌病(雛雞)

肌纖維腫脹,橫紋與縱紋消失,肌纖維內出現透明變性或空泡變性;嚴重時見一些肌纖維呈紅染均質狀,或肌漿破裂,濃縮成團塊狀的凝固性壞死,胞核固縮、破碎或消失.另一些肌段,肌纖維可呈壞死溶解為空泡網架,在壞死肌段內可見巨噬細胞、假嗜伊紅白細胞浸潤和成肌細胞、成纖維細胞出現。肌纖維間血管充血、水腫。

第五篇:實驗動物總結

非多選:

? 實驗動物:指經人工飼養、繁育,對其攜帶的微生物及寄生蟲實行控制、遺傳背景明確或來源清楚,應用于科

學研究、教學、生產和鑒定以及其它科學實驗的動物。亦稱狹義的實驗動物

? 實驗用動物:泛指所有應用于科學實驗的動物,包括實驗動物、野生動物、經濟動物和觀賞動物。也稱廣義的實驗動物.實驗動物科學誕生于20世紀50年代。國際實驗動物科學協會的簡稱為ICLAS,其網址為 中國實驗動物信息網:

? 我國《實驗動物質量管理法》頒布于1997年,由科技部聯合技術監督局等單位共同頒布。《實驗動物管理條例》

是1988年經國務院批準頒布的。世界最大的實驗大、小鼠商品化生產、銷售公司:美國查士利華實驗室 ? 1961年,ICLA與WHO合作,于1979年改名為ICLAS

? 20世紀40年代,美、日、法等過相繼成立了實驗動物學會或類似組織

? 我國已建立嚙齒類動物的種子中心(上海和北京)。國家實驗動物質量檢測中心掛靠在中國醫科院實驗動物所 ? GLP(良好實驗室操作規范)是用于新藥臨床前安全性評價的法規

? 《實驗動物管理條例》規定,實驗動物繁育和動物實驗不能在同一區域。

? 實驗動物許可證的有效期為5年,生產許可證的申請必須種子來源可靠,有健全的質量管理制度,環境符合國

家標準。許可證的發放向科技部門申請,由科技部門組織專家評審,合格后發放許可證。包括生產和使用許可證兩種。國家種子中心、實驗動物質量檢測機構的主要任務(p82)

?近交系:連續20代或20代以上近親交配所培育而成的品系。如BALB/C,C57BL/6J,DBA,C3H,A/He等(常以F

加數字表示近交代數)。

? 封閉群:以非近親繁殖方式,不從外部引入新個體的前提下至少連續繁殖4代以上。引種數目不少于25對。

如KM,SD, Wistar等。雜交群:不同品系或種群間雜交產生的后代

?近交系小鼠常選用10個染色體上的13個生化位點作為純度檢測的方法,而大鼠一般選用9個位點;皮膚移植

一般用同系異體移植。同源突變系:兩近交系除指明位點外其他基因完全相同

? 重組近交系:兩近交系雜交后再連續20代近交而成(以Χ表示)

? 同源導入近交系:通過雜交-互交或回交等方式將一基因導入到近交系中

? 遺傳污染:管理疏忽,本品系與其他品系動物交配

? 遺傳漂變:飼養過程中可能發生的隨機改變,多由于殘留雜合基因的分離

? 突變:基因組中某個核苷酸堿基的置換、缺失或插入引起等位基因的改變。近交系數:表示近交程度 ? 普通動物:不攜帶規定的人畜共患病原和烈性傳染病病原

? 清潔動物:除普通動物應排除的病原外,不攜帶對動物危害大和對科研干擾大的病原

? 無特定病原體動物:除清潔動物應排除的病原外,不攜帶潛在感染和條件致病、對科學實驗干擾大的病原 ? 無菌動物:不可檢出一切生命體

? 普通級兔應排除兔出血癥病毒、普通豚鼠應排除淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒、普通猴應排除猴B病毒 ? 實驗動物按遺傳控制可分為:近交系、封閉群、雜交群和突變系

? 實驗動物按微生物控制可分為:普通動物、清潔動物、無特定病原體(SPF)和無菌動物

? 3R指的是:減少(Reduction)、替代(Replacement)、優化(Refinement).? 動物福利除了生理福利外,還包括心理福利、衛生福利、行為福利、環境福利

? 普通級、清潔級和SPF級動物微生物和寄生蟲的檢測頻率均為每三個月檢測一次。無菌動物為每年至少檢測一

次.取樣數量:群體〈100,取樣〉5只;群體大小為100-500,取樣〉10;群體〉500,取樣〉20只;無菌動物每個隔離器取樣2只

? 2000年6月,人類基因組計劃完成。小鼠是繼人之后第二個完成基因測序的哺乳動物。小鼠與人類功能基因的同源性高達90%以上,是最為理想的模式動物,并作為基因改造的材料

? 動物實驗可用R=(A+B+C)×D+E公式表示,其中R表示動物實驗中實驗動物的總反應; A表示動物種間的共同

反應; B表示動物的品種品系特有反應; C表示動物的個體反應; D表示環境因素; E表示實驗誤差。(1959年由Russell和Bruch提出動物的表現型受周圍環境的影響而出現不同的演出型)

? 光照對動物的是個強烈的刺激因素,起定時器的作用

? 屏障設施內,粗效空氣過濾器設置在取風口;中效過濾器設置在正壓處;高效過濾器設置在系統末端

? 生物安全柜為活病原微生物的動物實驗設施;動植物確實存在或潛在危害的,該實驗需在感染性動物實驗設施

內進行

? 普通環境飼養普通級動物;屏障環境飼養清潔級或SPF級動物;隔離環境飼養無菌動物

? 實驗動物環境指標中,只有氨氣濃度是動態檢測指標;屏障環境的空氣潔凈度指標為10000級

? 國標中,生產型和使用型屏障系統大小鼠溫度為20-26℃;相對濕度為40%-70%;換氣次數為10-20次/h;氣流速

度為0.1-0.2m/s;壓強梯度為20-50Pa

? 國標中,使用型屏障系統工作照度為150-300lx;動物照度為15-20lx

? 實驗動物環境檢測標準規定,普通犬兔繁育生產設施內(生產型)溫度為16-28℃;濕度為40-70%;換氣次數為

8-10次/h;氣流速度0.1-0.2m/s;工作照度為150-300lx;動物照度100-200lx;(使用型)溫度為16-26℃;濕度為40-70%;換氣次數為8-10次/h;氣流速度0.1-0.2m/s;工作照度為150-300lx;動物照度100-200lx

? 籠器具產品抽檢數量,籠箱及引水瓶為10-15只/次/批;網蓋和籠架為3-5只/次/批

? 動物適宜的溫度為21-27 ℃,(相對)濕度為40-70%

? 國標中規定,實驗動物室氨濃度應小于14mg/m3;噪音低于60db;

? 實驗動物設施的空調系統按空氣處理設備的設置不同一般分為集中式、局部式和半集中式。集中式即集中冷源,并將全部空氣處理設備集中在同一機房內,處理過空氣經風道、風口送至屏障設施內。

? 空氣亂流利用稀釋作用是室內產生的灰塵均勻擴散而被“沖淡”,一般采用上送下回的形式,使氣流自上而下

與塵埃重力沉降方向一致。空氣亂流是流向單一,并具有一定的、均勻的斷面速度的氣流組織形式。

? 豚鼠和獼猴體內不能合成維生素C,須從飼料中獲得

? 大小鼠、兔目前常用的是顆粒飼料;貯存的顆粒飼料的含水率應低于11%。飼料滅菌的最佳方式是輻照 ? 必須氨基酸只能從飼料中提供,而非必須氨基酸體內能合成,無須從飼料中供給。

? 碳水化合物是體內能量的主要來源,其中粗纖維可促進胃腸蠕動;無氮浸出物可提供熱能并可轉化成脂肪 ? 飼料中脂肪有真脂肪(由脂肪酸和甘油組成)和類脂肪(由脂肪酸和甘油及其他含氮物質組成)

? 飼料抽樣數量為0.5Kg/次/批

? 維生素A維持上皮的形態與功能;維生素D參與鈣磷調節;維生素E與生殖泌乳有關

? 大小鼠飼料水分≤10%;豚鼠維持料蛋白≥17%,繁殖料蛋白≥20%;兔維持飼料粗蛋白≥ 14%,繁殖料粗蛋白

≥ 17%;犬維持飼料粗蛋白 ≥ 20%,繁殖料粗蛋白≥ 24%

一.小鼠:屬于嚙齒目,初生為紅色,12-13天睜眼,妊娠期19-21天,哺乳期為20-22天,雌性有5對乳頭,成年體重為18-40克,一般生育期為1年,壽命為1-2年.體溫為36.5 ℃,KM鼠每胎產8-15只,維生素A過量可致繁殖紊亂

二.大鼠:嚙齒目,新生為紅色,約5-6克;8-10天長牙;14-17天睜眼;妊娠期哺乳期均為21天;為常年多發情動物;成年體重為250-450克;壽命為2-3年;封閉群平均產仔數為8只;尾是散熱器官;無膽囊;體溫37.5℃。近交系大鼠:ACI,F344,SHR,BN,AGUS;封閉群:Long-Evans, Brown-Norway(飼養類),SD, Wistar

三.豚鼠:嚙齒目,草食動物,妊娠期為68天,哺乳期21天,剛出生就有視力,初生體重75-100克,有1對乳頭,每胎產3-4只,一般壽命為6年;體內缺少合成維生素C的酶(猴),免疫學研究首選動物,是最早獲得無菌動物的實驗動物。無尾巴

四.地鼠:嚙齒目, 有冬眠和假妊娠現象,妊娠期16天,是哺乳動物中妊娠期最短的動物;哺乳期21天;有頰囊,可貯存食物;為全年多發情動物;壽命2-2.5年。中國地鼠無膽囊, 有5對乳腺;金黃地鼠有乳腺6-7對。

五.兔:兔形目;有圓小囊;是眼科研究首選動物;妊娠期32天,哺乳期42天;為刺激性排卵動物(貓);有季節性換毛現象;有乳腺4對;其胸腔構造與其他動物不同;有食糞癖;也有假妊娠現象;對缺鈣耐受力強;壽命8年左右;體溫為39.2℃

六.犬:食肉目,紅綠色盲,幾乎沒汗腺,春秋季單發情動物,妊娠期60天,哺乳期60天,性周期180天,對脂肪耐受強.對嘔吐敏感,成年正常體溫是38℃,易建立條件反射

七.貓:除夏季外均可發情,屬季節性多發情動物;善攀登和跳躍;妊娠期63天,哺乳期60天;有4對乳頭;可根據光線的強弱靈敏的調節瞳孔;喜孤獨自由的生活;飼料中重點補充維生素.八.猴:有頰囊;有月經周期,與人的生殖生理非常接近;妊娠期165天左右,哺乳期6個月以上;對嘔吐反應靈敏;主要組織相容性抗原(RhLA)與人的HLA相似;能用手操縱工具;是脊髓灰質炎疫苗研究鑒定的動物

九.小型豬:偶蹄目;常年多發情;妊娠期114,哺乳期1個月;是皮膚燒傷實驗研究的首選動物;平均體溫為38℃

十.沙鼠: 嚙齒目,大小介于大、小鼠之間,成年重78克;常年多發情;性成熟10-12月;平均壽命2-4年;有自發性癲癇病;可建立腦缺血模型;應激時腎上腺釋放糖皮質激素和黃體酮

十一.其它:牛羊屬于偶蹄目,草食性多胃動物。馬屬于奇蹄目.鼠兔與家兔體形相似,是草食動物;有換毛現象;

? 動物標記中染色法最簡單、適用于小動物短期實驗;常用染色液:苦味酸、硝酸銀、品紅;染色編號方法:先

左后右,先上后下,單一顏色可標記1-10號;烙印常用溶于酒精的黑墨染色;還有耳緣剪孔法

? 局部麻醉常用浸潤麻醉。大小鼠豚鼠肌肉注射部位:大腿外側面。腹腔注射常選擇在腹白線兩側

? 大小鼠尿液采集適宜用代謝籠,采集未污染尿液則應采用導尿法;大小鼠大量采血常采用股動脈采血

? 犬、貓的皮下注射一般在大腿外側,靜脈注射不超過10ml

? 小鼠(20g)一般灌胃不超過0.8ml、腹腔注射不超過1.0ml、靜脈注射不超過0.8ml

? 大鼠一般灌胃不超過5ml、腹腔注射不超過4ml、靜脈注射不超過4ml

? 靜脈注射兔:耳緣靜脈,最大容量10ml;猴:皮下淺層靜脈(小隱、股、頭靜脈),最大容量20ml;犬最大容

量100ml。肌肉注射最大給藥量猴:3ml;犬:4ml。兔少量多次采血一般為耳緣靜脈采血

? 動物實驗中,去除被毛的方法有拔毛法、剪毛法、剃毛法和脫毛法;小動物一般采用剪毛法、大動物采用剃毛

? 吸入麻醉常用乙醚、氯仿;腹腔和靜脈麻醉一般持續時間長,過程平穩,常用巴比妥類、氯氨酮、水合氯醛、氨基甲酸等;全身麻醉時一般禁食不少于8小時

? 化學藥物致死最好采用CO2、KCl;家兔處死常用空氣栓塞法

動物模型按產生原因分為:

? 自發性模型:應用價值高,與人類相應疾病相似程度高,但來源困難,種類有限

? 誘發性模型:來源多,條件易控制、但相似程度稍差;誘發性腫瘤模型分為原位和異位誘發

? 抗疾病模型:特定疾病不在某動物身上發生

? 生物醫學模型:某些動物特殊的生理結構如兔的胸腔結構

? 按中醫分類:陰虛、陽虛、氣虛、血虛、腎虛、厥脫癥

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? 裸鼠為先天性無胸腺,常用于人體腫瘤移植研究 CBA/CIH為先天性B淋巴細胞功能缺陷。Beige小鼠為先天性NK細胞功能缺陷 SHR為自發性高血壓大鼠,適合篩選抗高血壓藥物 一般幼齡動物對實驗因素較為敏感,慢性實驗因周期長而通常選用幼齡動物。一般實驗都選用成年動物 清潔動物是國內科研標準動物,而SPF動物是國際公認的標準動物 一般來說,淡水中生活的動物尿液是低滲的,海水中生活的動物尿液是等滲的,陸地上生活的動物尿液是高滲的,特別是沙漠中生活的動物,這種傾向性更明顯 豬:皮膚結構與人相似、適合做燒傷實驗、人燒傷后的敷蓋物以及皮膚病的研究;冠狀動脈循環與人類似,食用高膽固醇食物易出現動脈粥樣硬化典型病灶 貓:刺激性排卵;適合做神經節傳導阻滯影響的藥物實驗及觀察藥物對循環系統的作用等實驗犬 :是紅綠色盲,不能以紅綠作為條件刺激物來進行條件反射實驗;有嘔吐反射;長期毒性實驗中大動物實驗常選;易于調教,短期訓練即可較好配合實驗,適合慢性實驗;適宜實驗外科學研究;可用壓迫膀胱法集尿 豚鼠:不能合成維生素C;對人型結核桿菌高度易感,是結核病研究首選動物;也是鎮咳藥篩選試驗的首選動物;氣管平滑肌對致痙劑和藥物最敏感,常作為支氣管擴張藥物研究選用動物; 家兔:減壓神經獨立分支,適合觀察減壓神經對心臟影響試驗;適宜做發熱和檢查致熱源研究;刺激性排卵;常用于制備抗血清;家兔的胸腔中央有一層很薄的縱膈膜將胸腔分為左右兩部,互不相通,兩肺被肋胸膜隔開,心臟又有心包胸膜隔開;也是心血管疾病研究的較好模型;不宜做利尿或抗利尿藥物研究;沒嘔吐反射;食用高膽固醇高脂肪飼料后易形成動脈粥樣硬化及高脂血癥模型 大鼠:無膽囊,適合做膽管插管收集膽汁,進行消化功能的研究;常選做長期毒性實驗 地鼠:中國地鼠易產生真性糖尿病;小鼠:適合于各類唇裂、腭裂研究。青蛙和蟾蜍:反射弧實驗 獲得遺傳工程的基本技術手段:顯微注射轉基因、基因定位突變技術、基因化學誘變技術。其中顯微注射法是將外源目的基因注射到受精卵雄原核內 模式生物:果蠅、線蟲、小鼠、斑馬魚、酵母,其中小鼠是研究人類基因功能的理想動物 基因敲除動物中研究最多最深入的是基因敲除小鼠。小鼠是繼人之后第二個完成基因組測序的動物 病毒:自然界最小微生物;在PH為7時較穩定;對干燥的抵抗力與病毒的種類及干燥的方法有關;多數能保存于50%的甘油中,確診病毒可通過檢查包涵體等方法來確定。細菌:有球狀、桿狀和螺旋狀;有細胞壁;水是主要成分,固形物主要由C、H、O、N組成,占總重量的75-80%;比重一般大于1;PH值可影響其代謝活動;高溫是有效的滅菌方法 實驗動物的傳染病發展過程分為:潛伏期、前驅期、明顯期(發病期)和轉歸期 傳染源、傳播途徑和易感動物,稱為傳染鎖鏈。各類動物應分室飼養,以防交叉感染 飼養和獸醫人員應每年進行健康檢查。實驗動物的隔離措施主要用于新引入的動物 隔離是為了控制傳染源,隔離場所應離開動物繁殖區。檢疫的目的是檢查有無潛在性疾病的存在 新引進的動物應有供應商的的實驗動物質量合格證書。新引進的靈長類動物要特別防止B型皰疹病毒 新引進的犬必須有犬瘟熱、傳染性肝炎、犬細小病毒等免疫證明 滅菌方法有熱滅菌法、冷滅菌法和Co60輻照滅菌法,消毒不能殺死細菌的芽孢,比滅菌的范圍窄 濕熱高壓滅菌:121℃,15min,干熱高壓滅菌:160 ℃,45min,預真空高壓滅菌: 121℃,3min,低壓蒸汽加甲醛滅菌法:70-80℃,2h熏蒸消毒法一般為:15ml/m3福爾馬林加7.5克高錳酸鉀,熏蒸時室溫應保持25 ℃,熏蒸后須靜置24-48h,后在通風2-3天。80℃熱消毒藥水清洗是良好的消毒方法 實驗動物飼養或實驗室進行噴霧消毒后關閉門窗,保持2-3h;門窗、墻壁等用中性洗滌液洗刷,必要時可用2%的熱燒堿水洗滌,在高壓水沖洗 鼠痘:又稱脫腳病,可經皮膚傷口浸入機體,小鼠感染后肝、脾明顯腫大,康復后也會通過糞便長期排毒,從而污染環境能夠使病毒廣泛傳播。淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎:只有持續感染 的小鼠和急性感染的金黃地鼠才會傳播病毒;感染該病毒的小鼠,大腦型最為表現為后肢強直性伸展;小鼠感染并康復后終生含高滴度的病毒,可經唾液、鼻分泌物及尿液向外排毒,同時該小鼠可成為無癥狀的帶毒者,并通過子宮和乳汁傳給后代,其后代可成為終生帶毒者;人感染主要表現為流感癥狀和腦膜炎 仙臺病毒:動物感染后肺部病變明顯,鼠肺呈楊梅色,易與浸潤性肺癌相混淆;動物體液免疫和細胞免疫功能普遍下降,妊娠大鼠會出現胚胎死亡;診斷主要通過免疫學方法,可采用過濾帽籠盒及剖宮產方法使動物免受感染 流行性出血熱:自然宿主為小型嚙齒類動物,污染塵埃飛沫形成氣溶膠吸入感染是其最主要傳播途徑;兔病毒性出血熱在自然條件下空氣傳播是主要傳播方式,其主要預防方式為定期注射組織滅活疫苗 肝炎病毒:鼠肝炎多數呈亞臨床或隱形感染,可改變各種免疫參數,ELISA及免疫熒光法可作為特異性診斷;癥狀可見尿色變深等;嗜神經型常引起中樞神經系統壞死;犬病毒性肝炎傳染方式很多,但不能通過呼吸道傳播 犬瘟熱:可通過 消化道、呼吸道傳播;主要表現雙相熱型,即先升高,持續兩天后降至正常維持2-3天后再

升高;我國廣泛使用的疫苗是雞胚細胞培養弱毒疫苗

? 犬細小病毒:表現為急性出血性腸炎和非化膿性心肌炎,3-4周齡仔犬多呈急性心肌炎癥狀,病死率高達

80-100%;主要通過直接接觸或污染飼料由消化道傳播;腸炎型感染后出現腹瀉,糞便呈灰黃色液體,最后因心衰和酸中毒而死

? 狂犬病:流行呈連鎖性特征,病犬終因局部或全身麻痹而死;犬一旦發病即撲殺,并對周圍環境徹底消毒 ? B病毒:恒河猴是自然宿主,幼猴感染后可能由于母源抗體免疫而呈現亞臨床癥狀;可引起人致死性腦感染 ? 沙門氏菌:人畜共患病,實驗動物中常見感染為鼠傷寒和腸炎沙門氏菌病;患病動物和帶菌者是主要傳染源 ? 布氏桿菌:可致動物流產。多殺性巴氏桿菌:可使動物發生出血性敗血癥

? 支原體:幼齡動物易感,常定居于動物呼吸道和生殖道;環境中氨濃度過高可促進其生長,繼而促進肺炎和中

耳炎的發生。志賀氏菌:實驗動物中主要危害獼猴,對人可引起細菌性痢疾

? 真菌生長最適溫度為37℃,實驗動物皮膚真菌感染的傳播方式主要為接觸感染,一旦感染后,實驗動物須全群

淘汰,環境徹底消毒。寄生蟲成蟲寄生的宿主為終末宿主。實驗動物感染弓形蟲后常出現流產或死胎現象 ? 兔球蟲病主要以腸道傳播,3月齡的家兔最易感,可感染人的球蟲叫等孢子球蟲

? 血液寄生蟲主要通過節肢動物作為媒介傳播。寄生蟲感染動物后,常引起血液中嗜酸性粒細胞增多。

多選題

? ICLAS的目標、實驗動物科學及實驗動物醫學、比較醫學的研究內容、實驗用動物范疇、實驗動物生產的趨勢、功能基因組學的作用、動物福利的內容與要素、從業人員的范疇與要求、比較醫學研究目的、種子中心的條件、主要任務、國內實驗動物領域的網站、國家實驗動物質量控制標準、有關許可證說法不正確的——全選 ? 保種在2000種以上的單位:Jackson實驗室、NIH。21世紀動物實驗將形成開放性、區域性的服務網絡 ? 3R是指:減少、替代、優化。實驗動物按遺傳控制分為:近交系、封閉群、雜交群、突變系

? 實驗動物按微生物控制分為:普通、清潔、SPF、無菌動物。實驗動物許可證包括:生產和使用許可證 ? 我國實驗動物質量保證體系包括:國家和地方的質量檢測中心、國家種子中心、有關法令規章

? 由科技部頒發的有關實驗動物的管理法規:除《北京市實驗動物管理條例》

? 動物的外貌特征、毛色、品系名稱、生活習性、生物學特性、飼養管理注意、應用領域、近交系或封閉群動物、晝伏夜出動物、常年多發情動物、小鼠的發情周期所分階段、中國地鼠的近交系品系、判斷獼猴是否懷孕的方法、長爪沙鼠的別名、動物有什么樣的特性、爬行類的食性、鼠類的哺乳期均為21天——全選

? 關于魚的生物學特性的說法、魚在腫瘤學研究的說法、蛙的應用、馬的研究應用、馬在遺傳病研究的應用——

全選。所有鼠類均屬于哺乳綱、嚙齒目。判斷雌性大小鼠交配過的方法:陰道涂片和陰道栓塞檢查

? 雌性大小鼠只有在發情前期與發情期才接受交配行為。不能合成維生素C的是豚鼠與獼猴

? 沒膽囊的動物:大鼠、中國地鼠。冬眠的動物:金黃地鼠、青蛙、旱獺、蟾蜍

? 青蛙、蟾蜍的生產過程有變態現象。不適宜作為實驗用的豚鼠:除英國種外

? 家兔屬哺乳綱、兔形目。金黃地鼠的應用:除不能用作糖尿病研究外。刺激性排卵的動物:家兔、貓 ? 有換毛現象的動物:兔、貓、鼠兔、犬。有假妊娠現象的動物:地鼠、兔

? 草食性動物:豚鼠、兔、鼠兔、長爪沙鼠。家兔靠耳、呼吸來散熱。犬與貓、都屬于哺乳綱、食肉目

? 犬的發情季節:春、秋,屬于季節性發情;貓的發情季節:春、秋、冬,也屬于季節性發情;除犬、貓外其他

動物都是常年多發情。獼猴屬哺乳綱、靈長目。有頰囊的動物:獼猴、地鼠

? 長爪沙鼠屬于:哺乳綱、嚙齒目、倉鼠科。鼠兔的換毛季節一般在冬、夏季

? 旱獺屬于哺乳綱、嚙齒目、松鼠科。靠呼吸散熱的動物:犬、雞。豚鼠的別名:除黃耗子

? 群居性好的動物:除兔。樹鼩屬哺乳綱、靈長目,幼年樹鼩對輪狀病毒不敏感

? 可用作人脫發研究的動物:樹鼩、稀毛小鼠、裸鼠。雞屬于鳥綱、雞形目;鴿屬鳥綱、鴿形目

? 貓與鴿的視覺很敏銳。魚在水中通過皮膚、鰓或肺進行氣體交換

? 牛、羊是草食性多胃動物,也是反芻動物,馬、兔則是草食性單胃動物。牛、羊、豬都是偶蹄目,馬屬奇蹄目 ? 變溫動物:魚、蛇。實驗動物病毒的分類、確診病毒的方法、傳染性疾病的危害、傳染病流行強度的形式、主

要消毒方式、寄生蟲引起的人畜共患病、寄生蟲檢測方法、水平傳播方式、垂直傳播的疾病——全選

? 病毒性疾病:流行特點除B病毒(3)外,其余全選;對實驗的影響——全選;臨床癥狀中除淋巴細胞性腦膜

炎、鼠肝炎、狂犬以及B病毒(3)外其余全選。

? 病毒:對酸堿的抵抗力差別大,對堿更敏感;對一般抗生素不敏感(錯的選項)

? 細菌分為螺旋菌、桿菌以及球菌;其生長需要氧氣、二氧化碳氣體。傳染鎖鏈:傳染源、傳播途徑以及易感動

60物。垂直傳播途徑:經胎盤、卵及產道傳播。主要滅菌方式:熱、冷、Co輻照。小鼠淋巴細胞性脈絡從腦膜

炎主要癥狀:沒有皮膚型;人感染的癥狀:流感樣、腦膜炎

? 鼠肝炎的臨床癥狀:除嗜肺型肝炎病毒可引起肝壞死。犬瘟熱常用的免疫接種部位:皮下、肌肉

? 犬細小病毒的實驗室診斷:電鏡與免疫電鏡觀察、血凝和血凝抑制試驗。狂犬病的臨床表現:除極度喜飲水 ? 預防狂犬病措施:接種、一旦發病即報告病情及撲殺動物,消毒環境

? 犬病毒性肝炎分為:犬肝炎型、犬呼吸道型;其傳播途徑:消化道、外寄生蟲為媒介;檢測其抗體的方法:除

熒光法;其危害:不危及實驗人員,并不對所有溫血動物致病(犬發病或死,改變酶系統及免疫反應)? 猴B病毒流行特點:除不同性別感染有差別;其臨床癥狀:除多數猴臨床癥狀明顯

? 細菌性疾病:流行特點中布氏桿菌、沙門菌以及支原體——全選;臨床癥狀——全選;對實驗的影響除支原體

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

?(3)外全選;預防措施中結核、支氣管敗血波氏桿菌——全選 泰澤氏病流行特點:除與氣候、飼料因素等無關。巴氏桿菌病臨床癥狀:除神經性疾病 支原體病病原體特征:除營養要求不高。支原體感染動物的影響:除動物大量死亡 肺炎克雷伯桿菌流行特點:除人 不可感染。志賀氏菌病流行特點:除呈散在或地方流行 支氣管敗血波氏桿菌病的病原菌:除支氣管波氏桿菌 棒狀桿菌病的流行特點:除各品種間無差異;其預防措施:除對動物定期預防接種 沙門菌常見感染:鼠傷寒、腸炎沙門菌。實驗動物易感的支原體:除生殖支原體 隔離措施主要用于:除將要死亡的動物。感染性設施的SOP包括——全選 雞胚不能生產的疫苗:豬瘟、豬丹毒。真菌按形態學特點分為:絲狀及酵母狀真菌 致病性真菌中常見:淺部與深部真菌。真菌對機體的影響主要通過:直接影響和污染食物或飼料間接影響 寄生蟲按對宿主的選擇性分為:單宿主和多宿主;按對宿主及部位的適應性分為:固需和兼性寄生蟲;按寄生時間分為:暫時和永久寄生蟲;按寄生部位分為:體內和體外寄生蟲 寄生蟲的成蟲和幼蟲寄生的宿主分別成為:終末宿主和中間宿主。寄生蟲感染的來源:中間宿主,墊料、水和飼料,傳播媒介。對寄生蟲的預防措施:驅蟲、環境衛生及嚴格的管理制度。實驗動物真菌性疾病:皮膚真菌感染、組織胞漿菌感染 實驗動物感染的真菌主要有:須發癬、小孢子菌。組織胞漿菌的實驗室確診:熒光抗體查咽喉分泌物、分離培養鑒定病原體。蠕蟲病的診斷:生前、死后診斷,死后診斷的手段:全身性蠕蟲剖解、個別臟器剖解 實驗動物血液寄生蟲主要伊氏錐蟲、焦蟲、住白細胞蟲。實驗動物糞原蟲檢測主要是對秋蟲卵囊及結腸小袋蟲的檢查。實驗動物中,小鼠、地鼠對弓形蟲最敏感;弓形蟲診斷:病原學、血清學;治療:磺胺類藥物與抗菌增效劑合用效果好。兔球蟲分為:腸球蟲、肝球蟲; 常見體外寄生蟲:螨、虱、蚤等;實驗動物感染后會引起:貧血、繁殖力下降 健康動物通過:接觸患病動物或帶有螨蟲的用具而感染螨蟲;感染后的癥狀除皮膚發炎外還有劇癢、脫毛 癢螨寄生于:皮膚表面和外耳道;疥螨寄生于:皮下、腹股溝及被毛深部 血液寄生蟲易感動物:犬、貓;實驗動物常見血液寄生蟲有:鉤蟲、絲蟲 對寄生蟲的防控,消除傳染源、切斷傳染途徑是行之有效的方法 大小鼠血液采集方法、猴采血方法、動物安樂死原則、實驗用藥的影響因素、對照的方法、動物實驗中注射方式、影響實驗結果的環境因素、動物晝夜變化的指標、裸鼠的特征、一般藥理研究選用的動物、一般生殖毒性觀察的內容、長期毒性的目的、影響實驗結果的動物因素、環境因素——全選 染色法錯誤的是:除單一顏色可標記1-10;染色常用的染色液:除10%的氨基黑溶液 常用編號方法:除拔毛法。去除被毛方法:除烙印法。注射用麻醉藥:除安定。豚鼠靜脈注射部位:除尾靜脈 豬靜脈注射:耳靜脈、頸靜脈。大小鼠、豚鼠皮下注射:頸后肩胛間、腹部兩側 家兔皮下注射:背部、耳根部。家兔肌肉注射:除前肢肌肉。剪尾采血正確的:除大鼠每次可采2ml 眼眶后靜脈叢采血:除垂直從眼內角刺入。犬常用采血方法:頭靜脈、小隱靜脈。集尿方法:除 膀胱穿刺 處死動物常用:除擊打烙印法。腫瘤研究選擇動物注意:除年齡、體重和性別 動物尿液:草食性:堿性、粘度高;肉食性:酸性、特殊臭味;高滲:陸地、沙漠生活的動物 犬不適合眼和血管刺激試驗。適合進行外周循環觀察的動物及部位:除大鼠耳廓 嗎啡對小鼠、貓產生中樞興奮,其他動物為抑制。藥代動力學測定選用動物:犬、猴。藥物分布:小鼠、大鼠 一般藥理研究觀察循環和呼吸不宜用:小鼠、兔。促智藥一般用:成年大小鼠 麻醉劑:的卡因、氯胺酮、水合氯醛;復蘇與搶救藥:美解眠、戊四氮、碳酸氫鈉、腎上腺素 鎮痛藥:成年雄性大小鼠。無嘔吐反射:兔、大小鼠、豚鼠。利尿藥或抗利尿藥研究:大鼠、犬 藥物對循環系統作用機制分析:貓、猴。生殖毒性包括:除哺乳期毒性 致畸敏感期毒性觀察:除雌性交配能力。圍產期毒性觀察:除胎仔的外觀、骨骼畸形。皮膚病研究:除青蛙 動物模型意義、設計原則、誘發模型的種類、影響模型質量的因素、裸大鼠用于腫瘤移植研究的優勢——全選 T淋巴細胞功能缺陷:裸大鼠、裸小鼠。動物腫瘤誘發方式:原位、異位誘發 獲得遺傳工程動物的技術手段、轉基因動物的應用——全選。已完成測序的哺乳動物:小鼠、人 實驗動物微生物質量控制的目的、無菌動物的特征——全選

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