第一篇:流感病毒采集規范
附件5:流感監測實驗技術操作規范
一、流感監測臨床標本的采集、運送、處理及流感病毒株的運輸
(一)、流感臨床標本的采集
病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標本的質量,及其保存運輸等環節。多數標本取自患者上呼吸道鼻咽腔,其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織。標本采集后應立即放入適當的采樣液中低溫保存。
采樣液常用的采樣液有以下五種:普通肉湯、pH7.4~7.6的Hank's、Eagle's、水解乳蛋白液或不加抗菌素的生理鹽水(漱喉液)。為防止采樣液生長細菌和真菌,在采樣液中需加入抗菌素,加入慶大霉素,其終濃度為0.1mg/ml,和抗真菌藥物,其終濃度為2mg/ml。加入抗菌素以后重新調節pH值為7.4,配制好以后,分裝每個采樣管4ml,-20℃凍存。采樣方法有以下幾種:
1)鼻拭子:將帶有聚丙烯纖維頭的拭子輕輕插入鼻道內鼻腭處,停留片刻后緩慢轉動退出。以另一拭子拭另側鼻孔。將拭子頭浸入采樣液中,尾部棄去。
2)咽拭子:用帶有聚丙烯纖維頭的拭子擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁,同樣將拭子頭浸入采樣液中,尾部棄去。注:亦可將鼻、咽拭子收集于同一采樣管中,以便提高分離率,減少工作量。
3)鼻咽抽取物:用與負壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。先將收集器頭部插入鼻腔,接通負壓,旋轉收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液,并用采樣液5ml涮洗收集器3次。4)漱口液:用10 ml生理鹽水漱喉。漱時讓患者頭部微后仰,發“噢”聲,讓生理鹽水在咽部轉動。然后,用平皿或燒杯收集洗液
5)鼻洗液:患者取坐姿,頭微后仰,用移液管將5 ml生理鹽水注入一側鼻孔,囑患者同時發K音以關閉咽腔。然后讓患者低頭使生理鹽水流出,用平皿或燒杯收集洗液。重復此過程洗兩側鼻孔。
(二)、臨床標本運送
新鮮的臨床采集標本應在4℃條件下24小時內運送至全國流感監測網絡實驗室。未能24小時內送至實驗室的,應置-70℃或以下保存。標本送至實驗室后,病毒分離標本應盡快進行接種分離,24小時內能進行接種的可置于4℃保存,如未能接種應置-70℃或以下保存。
凍存的臨床采集標本應在凍存的條件下,低溫送至實驗室。凍存的標本送到實驗室后,24小時內能進行病毒分離的,可以放置4℃保存。如未能分離的標本應置-70℃或以下保存。
臨床標本采集管建議使用帶螺口的塑料管。
(三)、臨床標本處理
臨床采集標本送至實驗室后,須經處理后再進行病毒的分離接種。含聚丙烯纖維的拭子的采集標本,先將含聚丙烯纖維的拭子在管壁反復擠壓后取出。鼻腔或咽部洗液的標本,充分振蕩標本管,將粘液打碎。置4℃待其自然沉淀5~10分鐘,取上清5 ml。上清液可直接接種或低溫保存。
鼻咽漱液或抽取液:用干凈滅菌過的毛細吸管,在無菌條件下反復吹打收集的溶液,以便打碎粘液,同樣置4℃待其自然沉淀5~10分鐘,取上清5 ml。上清液可直接接種或低溫保存。
注:如采樣液中尚未加抗菌素,應在接種前補加,用量同上前,混勻后置4℃ 過夜或室溫作用數小時后可接種。
臨床標本處理后,將原始標本分為三份,一份(40%)用于雞胚接種,一份(30%)用于MDCK細胞接種,一份(30%)保存待復核用。對于病毒分離陽性的標本-70℃保存6個月,在收到國家流感中心復核鑒定報告后,按照生物安全有關規定處理;病毒分離陰性的標本隨時按生物安全的有關規定處理。
(四)、血清標本的采集與處理
血清標本多用于流感暴發時的血清學核實診斷及人禽流感待查病例的診斷。血清標本采集應該包括急性期和恢復期雙份血清。急性期血樣應盡早采集,可在采集病毒分離標本時同時采集,但不能晚于發病后7天。恢復期血樣則在發病后2~4周采集。一般采集空腹血。單份血清不能用作診斷。
取一根至少能裝3 ml以上,干凈和滅過菌的血清管做好標記,并進行登記,登記的內容包括:醫院名稱,患者姓名,性別,急性期(Acute,A)或是恢復期(Convalescence,C),采樣日期(年,月,日)。
1. 從患者手臂靜脈采2 ml血,放入準備好的上述血清管中。2. 然后置室溫數小時待血完全凝固。
3. 1500~2000rpm離心10分鐘,收集血清于1.5 ml 無菌管中,做好標記。
4. 血清可置4℃存放一周,存放超過一周需置-20℃或以下保存。
(五)、流感病毒株的運輸
需送國家流感中心實驗室檢測的病毒分離物,填寫“流感/人禽流感毒株送檢單”,在凍存后,在低溫條件下,送至中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所流感中心進行復核,運輸時遵守國家生物安全的有關規定。
1.流感毒株的送檢要求
(1)自國家級流感樣病例監測哨點醫院采樣,所分離到的全部毒株。
(2)自其它流感樣病例監測哨點醫院采樣,所分離到的流感病毒,單向血凝抑制效價與國家流感中心提供的標準參照血清相比,有4倍或4倍以上差異的毒株。
(3)自其它流感樣病例監測哨點醫院采樣,所分離到的流感病毒,HA<8,且網絡實驗室不具備RT-PCR鑒定能力。
(4)暴發時采樣分離到的所有流感毒株。
(5)HA陽性,用國家流感中心提供的標準參照血清進行HI試驗,4種血清的HI效價均≤20的毒株。
(6)所送檢的毒株要求每份3ml,并且無細菌污染。(7)全國流感監測網絡實驗室直接將毒株送至國家流感中心,填寫“流感/人禽流感毒株送檢單”。監測網絡實驗室中的市級實驗室送檢毒株時,應同時送省級疾控中心實驗室備份。
(8)送檢毒株在HI試驗完成后,每兩周送至國家流感中心。(9)HA陽性,用國家流感中心提供的標準參照血清進行HI試驗,4種血清的HI效價均≤20的毒株,應在HI試驗完成后24小時內送至國家流感中心。
2.寄送流感中心的流感毒株標本的包裝、運輸
(1)病毒標本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料管里,擰緊。蓋上蓋子后不應有泄漏,推薦使用螺口細胞保存管保存和運輸流感病毒標本。
(2)將密閉后的病毒標本放入大小適合的塑料袋內密封。(3)直接在塑料管上用油性記號筆寫明病毒的名稱,同時也將病毒標本有關信息填在“流感/人禽流感毒株送檢單”內,送檢單應單獨放在防水的袋子里。
(4)將裝標本的密封袋放入專用運輸箱內(或疫苗冷藏包),放入冰排,然后以柔軟物質填充,內襯具吸水和緩沖能力的材料。
(5)標本運輸:異地運輸可以采用郵寄或快遞的方法 國家流感中心聯系方式為:
中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所國家流感中心 地址:北京市宣武區迎新街100號 聯系電話: 010-63580764 傳真: 010-635580764
(六)、標本的接收 送檢的標本(毒株)送到實驗室后,由專人在生物安全柜內打開標本的包裝。記錄收到日期、送檢實驗室名稱、核對并記錄送檢標本(毒株)標編號是否與送檢單相同。收到的毒株后,國家流感中心給送檢單位及時反饋。
附件3.人豬流感(H1N1)病例標本采集和實驗室檢測指南
(暫行)
豬流行性感冒(H1N1病毒)病毒的檢測
所有豬流行性感冒(H1N1病毒)疑似病例應該采集上呼吸道標本來檢測豬流行性感冒(H1N1病毒)的病毒。
推薦采集的呼吸道標本:
疾病發病后應盡快采集如下標本:鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔沖洗液/吸取物。如果不能收集這些標本,可合并鼻拭子與口咽拭子。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。標本應置于無菌病毒運輸液(VTM),并立即用冰塊或冰排保存或置于4 ℃(冰箱),并馬上運送至實驗室。臨床樣品收集人員及實驗室人員的感染控制指導請見相關文件。
拭子
理想的情況下,標本應使用頭部為合成纖維的拭子(例如,聚酯纖維),用鋁或塑料做桿。不推薦棉拭子和木桿。不能用海藻酸鈣做的拭子收集標本。標本采集管應包含3毫升病毒運輸液(例如,含有蛋白質穩定劑,阻止細菌和真菌生長的抗生素,緩沖液)。
臨床標本儲存
所有呼吸道標本應保存在4℃,并盡快放置在-70℃。如果沒有-70℃度冰箱,標本應保存在4℃,但不應超過4天。
臨床標本運輸
臨床標本應按照A類包裝要求運送,并用干冰運輸。
所有標本應標示清楚。疑似病例標本運送應包含的信息請參照禽流感標本運輸。
檢測程序
呼吸道標本應首先應用real time RT-PCR方法檢測A型流感病毒的M基因、Swine(H1N1)的HA基因和NP基因,以及質控對照RNP基因。同時,接種MDCK細胞或SPF雞胚進行病毒分離,并測定病毒的全基因組序列。
推薦的檢測方法
用Real-time RT-PCR方法檢測豬流行性感冒(H1N1病毒)病毒。
其他檢測方法 快速流感抗原檢測
一些商用快速檢測可以區分A和B型流感病毒。快速檢測實驗A型流感陽性的病例符合可能病例的標準(見上文)。這些實驗對檢測人感染豬流行性感冒(H1N1病毒)病毒臨床標本的敏感性和特異性未知,而且檢測季節性流感病毒的靈敏度不佳。因此,快速檢測陰性結果可能是假陰性,不能作為豬流感感染的最后診斷。
免疫熒光法(或裝配的IFA)
免疫熒光試驗可以區分A和B型流感病毒。檢測A型流感陽性的病例符合可能病例的標準(見上文)。免疫熒光試驗的結果取決于臨床標本的質量,操作技能,對檢測人感染豬流行性感冒(H1N1病毒)病毒臨床標本的敏感性和特異性未知。因此,免疫熒光試驗陰性結果可能是假陰性,不能作為豬流感感染的最后診斷。病毒培養
可用MDCK細胞和SPF雞胚分離豬流感(H1N1病毒)病毒可以診斷感染,但無法為臨床診斷及時提供結果。病毒分離陰性并不能排除感染豬流感(H1N1病毒)病毒。
第二篇:細菌標本采集規范
臨床微生物學標本采取和處理的規范化要求
正確的采取、處理與運送用于細菌培養的標本是臨床細菌檢驗成功的關鍵。標本采取與處理的規范化是準確、及時地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎;而標本采取與處理不當將嚴重影響檢驗結果,給臨床以誤導,延誤對患者的正確治療。為此,我們提出初步的參考意見,并希望在實踐中不斷完善。
一、血液細菌培養標本的采集和處理
臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血液感染的患者,需做血液細菌培養以明確病原。
1.采血時機:在患者發熱期間越早越好,最好在抗菌治療前,以正在發冷發熱時或發冷發熱前半小時為宜。
2.采血次數及間隔:在急性發熱性疾病如腦膜炎、細菌性肺炎,需馬上做抗菌治療;或急性骨髓炎、化膿性關節炎等要緊急手術的患者,應立即從兩臂分別取2份標本。對感染性心內膜炎患者,建議在24h內取血3次,每次間隔不少于30 min;必要時次日再做血培養2次。對發熱原因不明者兩次抽血間隔60 min;必要時于24~48h后再抽血2次。因為1次血培養不足以說明問題,可能會遺漏陽性結果。
3.采血部位:多次采血應在不同部位的血管穿刺以排除皮膚菌叢污染的可能。要避免從血管插管內取血,因插管常被污染,其培養結果不能反映真實情況。在不同部位取血,2次分離出同樣菌種才是確定病原菌的有力證據。
4.采血量:采血量與血培養的檢出率相關,所以采血量一定要足夠。成人一般為10ml,新生兒與嬰幼兒為1~2 ml。
二、下呼吸道分泌物(痰培養)的標本采取和處理
下呼吸道分泌物(痰)的細菌學檢查對病原學診斷起著重要作用,但痰標本的質量往往難以保證,造成病原學診斷和實際引起感染的病原菌脫節,直接影響抗菌藥物的應用、甚至耐藥菌的出現或流行。痰標本的細菌學檢驗地帶網檢查應注意如下幾個問題。
1.標本的采取:自然咳痰:要求患者清晨留取,留取標本前用清水漱口3次,之后用力咳出。咳痰較困難者可用霧化蒸氣吸入以利痰液咳出。幼兒可用手指輕叩胸骨柄上方以誘發咳痰。
2.氣管穿刺法:僅用于昏迷患者,由臨床醫師 進行操作。
3.纖維支氣管鏡抽吸:通常用于在給患者行纖維支氣管鏡檢查時順便抽取。
4.胃液抽取法:多用于可疑患有肺結核的患者在有可能將痰液咽下的情況時采用。
5.標本的運送:標本采集后應立即送檢,以避免雜菌過度生長。
三、尿液細菌培養標本的采集和處理
尿液的細菌培養檢查對于膀胱和腎臟感染的及早發現和病原學診斷很有價值。對于尿道、前列腺以及內、外生殖器炎癥的診斷也有一定價值。
1.標本收集時間:需在應用抗菌藥物之前或停用抗菌藥5 d之后留取尿液標本;尿液在膀胱內應停留6~8h以上,使細菌有足夠時間繁殖。
2.標本收集方法:
(1)清潔排尿法:女患者以手指將陰唇分開,用肥皂水或碘伏清洗外陰,然后以清水沖洗尿道口周圍,擦干并排出前段尿液后,用無菌容器接取中段尿;男患者應翻轉包皮沖洗,用碘伏消毒尿道口;嬰兒消毒其陰部后,將無菌小瓶直接對準尿道口排尿后立即送檢。
(2)膀胱穿刺法:為避免尿道正常菌群的污染,收集尿液最好的方法是膀胱穿刺。尤其做厭氧菌檢查時必須采用膀胱穿刺法。穿刺時膀胱應充盈,皮膚嚴格消毒后用裝有19或20號針頭的注射器在恥檢驗地帶網骨聯合距臍1/3處穿刺。膀胱穿刺的適應癥有:①有尿道感染的臨床癥狀,但中段尿培養細菌數很低,而又難以確定感染源者。②嬰幼兒、新生兒、不能用導管者。③懷疑有厭氧菌感染時。
(3)腎盂尿采集法:若取左右兩側腎盂尿,應請泌尿科醫生采取,左右側的標本要標記明確,以免出現錯誤。
(4)對用封閉式引流裝置的留置導尿患者留取尿液標本培養時,用適當的消毒劑嚴格消毒引流管和導尿管連接處的管壁,用裝有21號針頭的注射器穿刺導尿管壁吸取尿液。不可打開導尿管和引流管連接處收集標本,培養用的尿液標本也不能從引流袋中留取。(5)膀胱鏡檢查、輸尿管插管或逆行腎盂造影時,收集的尿液可用來做細菌培養。
(6)做病毒學檢測時用容器收集清潔的標本即可,不需特殊方法收集。標本中加入抗生素可抑制細菌的過度生長,且標本需冷藏。
2.標本的運送和保存:用無菌帶螺帽的容器盛標本,標本應在1 h之內送檢,超過2 h者應重送,否則易致假陽性結果。
四、糞便標本微生物學檢查的質量要求
1.標本采集:糞便標本應在發病早期并且盡量在用抗生素治療前采集,直接用棉拭子,也可用直腸拭子,置小瓶中送檢。
2.顯微鏡檢查:糞便直接涂片革蘭染色,可作為艱難梭菌、弧菌、彎曲菌、葡萄球菌、白色念珠菌等初步篩查,鹽水滴片用作腸道寄生蟲檢查。
3.標本保存和運送:標本置密封好的小瓶中,記錄姓名、日期、標本號、及時送檢,一般不長于2小時。
五、生殖道標本的采集和處理 1.男性標本:
(1)如疑為急性淋病奈瑟菌或其他化膿性細菌感染應在清洗龜頭部后,以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒劑消毒后,擠出分泌物立即以無菌棉拭子采取,立即送檢,或以專用的細拭子插入尿道口1~2cm,旋轉采取。
(2)如疑為前列腺炎、精囊炎或慢性淋病奈瑟菌感染應由醫師按摩前列腺,以無菌手續自尿道口采取前列腺液送檢。
2.女性標本:
(1)成年婦女自宮頸采取標本,應在擴陰器的支持下,選取有炎癥或分泌物部位,先以無菌棉拭子拭去表淺層分泌物,再用另一拭子取分泌物送檢。如做厭氧或真菌培養應另外采取標本。
(2)如未成年幼女疑患性傳播疾病時,不應使用擴陰器,應以無菌拭子在陰道口處采取分泌物送檢。
六、胸腹水、腦脊液標本的采集
均由醫師以無菌手續穿刺取得,必須應用帶蓋的無菌容器,立即送檢。
七、對不合格標本的處理
微生物室對于下列標本收集不符合規定的標本將予拒收,并通知臨床,按標本要求復送:
1.申請單項目與標本不符。
2.申請單姓名、科別、床號與標本的標簽不符。3.標本已有明顯的污染跡象(如開塞)。
4.標本量過少或已明顯干燥。
第三篇:甲型H1N1流感病毒實驗活動管理工作規范
甲型H1N1流感病毒實驗活動管理工作規范
為做好我省甲型H1N1流感防控工作,確保我省甲型H1N1流感病毒實驗室檢測質量與生物安全,特制定本規范。本規范是從事甲型H1N1流感檢測實驗室的最低要求,是對申請開展甲型H1N1病毒實驗活動的實驗室進行審批的技術依據。
一、工作原則
㈠甲型H1N1流感病毒的生物學特性和變異趨勢尚不完全明確,且傳染性較強,甲型H1N1流感病毒目前暫時按照病原微生物危害程度分類中的二類進行管理。必要時,將依據甲型H1N1流感疫情的發展和病毒毒力變異情況,以及動態風險評估結果,適時調整其危害分類等級。
㈡從事甲型H1N1流感檢測實驗室必須經過省衛生廳組織的生物安全論證,合格后方可開展甲型H1N1流感病毒檢測工作。
㈢從事甲型H1N1流感檢測實驗室所在單位要加強實驗室生物安全組織領導,建立健全實驗室生物安全管理體系,明確生物安全管理責任。
㈣未經培養的臨床樣本檢測在生物安全二級實驗室進行。㈤需要開展甲型H1N1流感病毒分離工作的單位,必須在帶負壓的生物安全二級以上實驗室進行,通過省衛生廳組織的生物安全論證后方可開展。
㈥臨床檢測樣本檢測結果為甲型H1N1陽性的,實驗室要按照有關規定,及時通知患者就診醫院,由患者就診醫院進行疫情報告。其陽性樣本及時送當地疾病預防控制中心國家級流感監測網絡實驗室進行病原分離工作。
二、管理制度
㈠根據各實驗室具體情況和特點,建立甲型H1N1流感病毒實驗室生物安全風險評估制度。
㈡建立并健全甲型H1N1流感病毒相關的體系文件,包括程序文件、標準操作程序(SOP)和記錄等文件。
㈢建立并健全甲型H1N1流感病毒及樣本使用審批制度。㈣建立并健全甲型H1N1流感實驗室意外事故的應急處理預案。㈤實驗室所在的機構應設立生物安全委員會,負責咨詢、指導、評估、監督實驗室的生物安全相關事宜。實驗室負責人必須是所在機構生物安全委員會成員。
㈥建立并健全嚴格的實驗室準入制度,實驗室入口處應標明所從事的生物因子、負責人和緊急聯系電話。
㈦實驗室指定專人負責工作人員的健康及感染監測工作,開展工作人員崗前及定期健康體檢、保留本底血清并要求進行預防接種,建立個人健康檔案。
㈧建立實驗室設施、設備的定期維護制度,并設專人負責管理。㈨建立正確的生物安全標示使用制度。㈩建立嚴格的毒種及樣本的保存和銷毀制度。
(十一)建立嚴格的實驗室廢物處理管理制度。
三、人員要求
㈠實驗室應具有確保工作正常運行的相應數量的管理、技術、安保、設施維護等工作人員。
㈡工作人員應具有較強的責任心,健康狀況良好,接受必要的健康監測。
㈢從事甲型H1N1流感病毒實驗室活動人員須經實驗室生物安全管理和專業知識培訓,培訓合格后,持證上崗。工作人員須具備全面的實驗室生物安全管理知識和流感專業知識,具備一定流感病毒實驗工作經驗,熟悉流感實驗活動的各項制度和流程。
㈣工作人員應經過嚴格審批和登記后方可進入實驗室。當實驗活動進行時,要限制該實驗室工作人員的出入。
㈤實驗室管理層應按工作的復雜程度定期評價員工的表現,至少每12個月一次。
㈥實驗室工作人員必須在身體狀況良好的情況下,才能進入實驗室進行工作。出現下列情況,不應進入上述區域。
1、身體出現開放性損傷;
2、患發熱性疾病;
3、感冒、上呼吸道感染或其他導致抵抗力下降的情況;
4、妊娠期間;
5、已經在實驗室連續工作4小時以上或其他原因造成的疲勞狀態。6、16歲以下兒童不應被授權進入實驗室工作區。
四、甲型H1N1流感實驗室布局及操作
㈠疑似或確診甲型H1N1流感病例的未經培養的感染性材料的操作實驗室布局
1、實驗室入口處應標明所從事的生物因子、負責人、緊急聯系電話。
2、實驗室主入口的門、放置生物安全柜實驗室的門應可自動關閉。
3、大量的備用物品應存儲在實驗室工作區域外。
4、實驗室工作區域外應具備存放個人衣物的條件。
5、至少應在實驗室工作區配備簡易洗眼裝置。
6、實驗室所在的建筑內應配備高壓蒸汽滅菌器或其它適當的消毒設備。
7、實驗室工作區應配備生物安全柜。
8、生物安全柜的排風應通過獨立于建筑物公共通風系統的管道排出。
9、在風險評估和確保 HEPA 功能正常的基礎上,生物安全柜的排風可以在室內循環;但實驗室應具備通風換氣的條件。
10、有可靠的電力供應和應急照明。㈡核酸檢測操作
1、除滿足四㈠所要求的條件外,從事甲型H1N1流感RT-PCR核酸檢測應具有四個獨立物理分區,分別為試劑準備區、標本制備區、擴增區和產物分析區,每個區均具有獨立的緩沖間,并保證風向從外到內的定向氣流。
2、從事Real-Time RT-PCR核酸檢測應具有三個獨立物理分區,分別為試劑準備區、標本制備區和擴增、產物分析區,每個區均具有獨立的緩沖間,并保證風向從緩沖間往試驗區定向氣流。㈢甲型H1N1流感病毒分離培養的操作
甲型H1N1流感病毒分離培養的操作除滿足四㈠所要求的條件外,實驗室應有可控的通風系統,確保實驗室由外向內的定向氣流。實驗室排風不可再循環至建筑物其他區域。當實驗室內的氣體要排放到室外時,必須能快速從排氣管道及所在建筑物派出,氣體可通過HEPA過濾排放。
㈣實驗室生物安全
1、工作人員應穿戴個人防護設備,包括一次性手套、反穿衣、隔離衣、連體衣、帽子、鞋套或專用鞋子,眼部保護裝備。其中工作人員須佩戴生物防護型N95(1860)口罩,應經過培訓且每個人須通過密合度測試。
2、對標本進行核酸檢測時,標本接收分裝、核酸操作、PCR反應體系配制、電泳操作應當在不同房間進行。不同房間的移液器和槍頭不應混用,標本分裝和PCR反應體系配制的區域不應接觸到核酸,并有單獨的實驗防護用品。
3、所有感染性或潛在感染性材料的操作應在年檢合格的生物安全柜中進行。
4、應使用帶有密封離心杯或轉子的離心機,并且在生物安全柜中打開離心杯或轉子。
五、甲型H1N1流感實驗室儀器設備配置
1、核酸檢測
甲型H1N1流感實驗室須配置以下儀器才能開展甲型H1N1流感核酸檢測工作:Ⅱ級生物安全柜、PCR儀、Real-time PCR儀、臺式高速低溫離心機、凝膠成像儀、混勻器、高壓鍋、電泳儀及-30℃冰箱各一臺,同時需配置不同刻度的100~1000?l、20~200?l和2~20?l移液器各二。如果只進行Real-time PCR檢測,可不需要PCR儀、凝膠成像儀、電泳儀。
2、病毒培養
甲型H1N1流感實驗室須配置以下儀器才能開展甲型H1N1流感病毒分離工作:Ⅱ級生物安全柜、CO2培養箱、-70℃冰箱、離心機(高速)、倒置顯微鏡、高壓鍋和普通冰箱各一臺,同時需配置不同刻度的100~1000?l、20~200?l和2~20?l移液器各兩個。
六、消毒及廢物處理
㈠儲備有效滅活甲型H1N1流感病毒消毒劑,如含氯消毒劑、酒精、過氧化物、四價的氨化合物。
㈡確保使用合格的消毒劑。
㈢實驗室產生的廢物應按照《醫療廢物管理條例》、《醫療衛生機構醫療廢物管理辦法》的規定進行處理。
七、運輸
嚴格按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規定》的要求,開展甲型H1N1流感病毒及樣本運輸工作。
㈠甲型H1N1流感樣本可按照B類感染性物質
(UN3733)包裝運輸;甲型H1N1流感病毒培養物須按照A類感染性物質(UN2814)包裝運輸。㈡標本運輸須通過省衛生廳批準并備案。
㈢實驗室應儲備充足的符合上述要求的包裝材料。㈣運輸工作人員須經過相關生物安全知識培訓。
㈤陸路運輸應有專車,護送人員不少于兩人,同時應具備有必要的個人防護裝備及消毒用品。
第四篇:臨床檢驗標本采集規范
臨床檢驗標本采集規范
一
血常規檢驗標本 用EDTA-2K(EDTA-K22H2O)1.5~2.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝管、紫色帽)采血。
.2 注意事項:
A 按抗凝管刻度準確采血至2ml。
B 采血后立即上下顛倒混勻5~10次,不可用強力震蕩,以免造成溶血。C 采血后盡快送檢(為保證結果準確,必須在2h內完成檢測)。
二
紅細胞沉降率(血沉、ESR)檢驗標本 靜脈采集枸櫞酸鈉(109mmol/L,即32.06g/L)抗凝血(枸櫞酸鈉抗凝管、黑色帽)。2 注意事項:
A 單獨采1管血,按抗凝管刻度準確采血至2ml(抗凝劑:全血=0.4:1.6)。B 采血后立即上下顛倒混勻5~10次,不可用強力震蕩。C 采血后盡快送檢(為保證結果準確,必須在2h內完成檢測)。
三
凝血檢測(PT、APTT、Fbg、TT、D2-聚體)標本 靜脈采集枸櫞酸鈉(109mmol/L,即32.06g/L;抗凝劑:全血=0.2:1.8)抗凝血(枸櫞酸鈉抗凝管、藍色帽)。注意事項:
A 單獨采1管血,按抗凝管刻度準確采血至2ml。B 采血后立即上下顛倒混勻5~10次,不可有凝塊。
C 采血后盡快送檢(為保證結果準確,必須在2h內完成檢測)。D 空腹采血(餐后脂血會影響檢驗結果)。
四
血型與交叉配合標本 用EDTA-2K(EDTA-K22H2O)1.5~2.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝管、藍色帽)采血。
.2 注意事項:
A 按抗凝管刻度采血至2~3ml。最好單獨采血,便于標本保存。B 采血后立即上下顛倒混勻5~10次,不可用強力震蕩,以免造成溶血。
五 血流變檢查標本 用肝素鈉抗凝管(肝素鈉、綠色帽)2 注意事項:
A 按抗凝管刻度采血至4~5ml。
B 采血后立即上下顛倒混勻5~10次,不可用強力震蕩,以免造成溶血。
六
尿液常規檢查標本 住院病人盡量留取晨尿(安靜狀態下留取清晨第一次尿)。2 門急診病人可留取隨機尿,但結果受多種因素影響。尿液采集于潔凈尿杯中,不可使用其它未經洗滌的器皿如藥瓶、試劑瓶等。標本留取后盡快送檢(為保證結果準確,必須在2h內完成檢測)。
七
尿液特殊檢查標本 尿液成分定量檢查應根據檢查目的選擇并在檢驗科領取防腐劑。
A 尿愛迪氏計數或3h計數:甲醛(40%),5ml/L尿液;3h和12h尿沉渣計數的留尿時間分別為(5:30-8:30)和(20:00-次日8:00)。B 尿蛋白或尿糖定量:甲苯,5~20ml/L尿液。
C 尿17-羥、17-酮、腎上腺素、兒茶酚胺和尿鈣等:濃鹽酸,10ml/L尿液。2 尿稀釋濃縮試驗:試驗日正常進餐,上午8點排尿棄去,沒隔2h留尿一次,至晚上8點共六次標本;晚8點至次晨8點為夜尿,收集于一個容器中,分別標記時間后送檢。
八
糞便常規檢查標本 一般應為新鮮的自然排出的糞便3~5g,必要時可肛試子取出,但需注明。2 樣品置于潔凈容器中,最好用帶蓋塑料盒。
3糞便應選取含膿、血、粘液等異常成分進行檢查。做隱血試驗時,應囑病人檢查前3天禁食肉類、含動物血的食物。
九
漿膜腔積液檢查標本 標本一般由臨床醫師無菌穿刺采取。送檢標本量:常規檢查、生化檢查、細胞學檢查各留取2ml;細菌學檢查用無菌管采集標本,結核菌檢查留取10ml。標本采集后必須立即送檢,否則可因標本凝固、細胞變性等導致標本無法檢測或結果不準確。用于細胞學檢查時,可在標本中加適量EDTA抗凝,但還需留1管不加抗凝劑的標本用于觀察積液的凝固性。
十臨床化學檢驗標本 一般生化檢查(肝功、腎功、血脂、血糖、免疫、電解質、心肌酶等)留取不抗凝血(紅色帽、真空負壓管),采血量視檢查項目多少而定,一般為4~5ml。2 糖化血紅蛋白需用EDTA抗凝管,操作規程同血常規標本。3 血鉀檢測標本須立即送檢,2h內完成檢測。4 空腹采血。如為餐后標本,應在申請單上注明。
十一
臨床免疫檢驗及化學發光檢驗標本 一般免疫學檢驗(乙肝病毒、丙肝病毒、HIV、梅毒螺旋體、結核、自身免疫病等)和化學發光檢驗(各種激素、腫瘤標志物等)留取不抗凝血(紅色帽、真空負壓管),采血量視檢查項目多少而定,一般為4~5ml。2 嚴格按生物安全有關規定采血。空腹采血。如為餐后標本,應在申請單上注明。
十二
微生物學檢驗標本 標本采集、運送、驗收和處理注意事項 ① 標本采集
A 申請單標記必須清楚(姓名、性別、年齡、臨床診斷、標本來源、采集時間、檢查項目、抗生素應用情況等),以便實驗室合理選用培養基。B 盡量在抗生素應用前采集標本。C 標本采集應嚴格執行無菌操作。
D 采集標本的容器必須經滅菌處理或使用一次性無菌專用容器。
② 標本運送
A 標本采集后盡快送微生物室。
B 標本采集后在室溫下超過2h未送達實驗室,視為不合格標本。③ 標本驗收
A 實驗室只能接受和處理合格標本。
B 實驗室對不合格標本退回時,須注明原因,并及時與臨床聯系。2 微生物檢驗標本采集和處理
① 尿液標本采集和處理:通常留取晨起第一次尿液,及時送檢,并保證2h內接種;不能及時送檢時,標本應置冰箱保存,并于8h內送檢。懷疑沙門氏菌感染時,應于發病2周左右采集標本;懷疑鉤端螺旋體感染時,應于發病后2周左右采集標本。常用的標本采集方法如下:
A 中段尿采集法:成年男性和女性分別用肥皂水清洗尿道口和外陰部,再用滅菌水
沖洗尿道口,然后排尿棄去前段尿液,于帶蓋的無菌試管中留取中段尿液5~10ml。B 導尿法:用導尿管導取5~10ml尿液于無菌試管中;長期留置導尿管者應更換導尿 管留尿;留置導尿時,用無菌消毒法消毒導尿管外部及導尿管口,用無菌注射器通過導尿管抽取尿液送檢,不可采集尿液收集袋中的尿液送檢。
C 其它方法:膀胱穿刺或腎盂尿采集法須由臨床醫師采集。
② 糞便標本采集和處理
A 采集時間:腹瀉患者處于急性期,盡量在用藥前采集糞便;懷疑傷寒患者在發病兩周以后采集糞便;懷疑霍亂時應立即采集糞便送檢。
B 采集方法:一般患者,取新鮮糞便的黏液、膿血或絮狀物等有意義成分2~3g或1~3ml,盛無菌容器內送檢;難以獲得糞便或排便困難的患者和嬰幼兒,可用直腸試子采集標本,再插入滅菌試管中送檢。③ 痰及下呼吸道標本采集和處理
A 自然咳痰法:晨痰為佳;先嗽口,清潔牙齒和口腔;再用力咳出呼吸道深部的痰;痰量不得少于1ml;咳痰困難者可先做霧化處理。
B 小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將試子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在試子上送檢。
C 支氣管鏡、支氣管穿刺、支氣管肺泡灌洗等采集法:由臨床醫師實施。④ 血液及骨髓培養標本
A 抗生素治療前,嚴格無菌靜脈采血8~10ml(兒童1~4ml);骨髓1~2ml。B 無菌注入專用培養瓶中送檢。
C 如已用抗生素不能停用時,可在48h內分別于下次抗生素使用前,多次采集血液標本送檢。
D 疑為心內膜炎時,為提高陽性檢出率,可酌情不同部位、不同時間多次采血送檢。⑤ 腦脊液培養標本
A 懷疑腦膜炎時應立即采集腦脊液,最好在抗生素使用前采集。B 無菌腰穿采集腦脊液1~2ml,立即送檢。⑥ 穿刺液培養標本
A 包括胸水、腹水、心包液、關節液、鞘膜液等。B 在抗生素使用前采集或在停用抗生素2~3天后采集。C 無菌穿刺采集,標本量不少于1ml。
D 為防標本凝固,可在無菌盛器中加入適量滅菌肝素。⑦ 胃液及膽汁培養
A 采集方法:抽取空腹胃液5ml,置無菌管內送檢;膽汁培養標本由十二指腸引流法或膽囊穿刺法或手術中留取膽汁5ml,置無菌管內送檢。B 標本采集后必須立即送檢。⑧ 膿汁和病灶分泌物培養
A 標本采集前,先對病灶周圍消毒,然后用無菌方法采取膿汁或病灶分泌物或組織。B 標本采集后立即置無菌管內送檢。⑨ 眼、耳、鼻、咽試子分泌物培養標本 A 用無菌試子常規采集標本。
B 標本采集過程中應注意避免被粘膜上的正常菌群污染。C 標本采集后連同試子一起置無菌管內送檢。⑩ 泌尿生殖道培養標本
A 尿道分泌物:清洗尿道后采取尿道溢出的膿性分泌物,或用無菌試子插入尿道2~4cm處輕輕轉動后取出,置無菌試管中立即送檢。
B 陰道、宮頸分泌物:通過陰道擴張器,用滅菌試子采取陰道口或宮頸管1~2cm處分泌物,置無菌試管中送檢。
C 前列腺液:清洗尿道、沖洗膀胱后用前列腺按摩法采集前列腺液于無菌試管中,立即送檢。
D 精液:受檢者應5天以上未派精,清洗尿道后用手淫或體外排精法,射精于無菌試管中立即送檢。
E 潰瘍分泌物:滅菌生理鹽水清洗患處,用無菌試子取其邊緣或基底部的分泌物,置無菌試管中立即送檢。⑾
燒傷感染培養標本
燒傷12h后用無菌棉試子采集標本;要注意從多個創面取樣;燒傷嚴重感染時易發生敗血癥,創面取樣的同時應采集血樣送做血培養。
⑿
真菌感染培養標本
A 淺部真菌感染標本采集:皮癬者常規消毒皮膚,從皮損邊緣刮取鱗屑,置無菌平皿中送檢;皮膚潰瘍則采集皮損周圍膿汁或組織;毛發則采集其根部折斷處,至少5~6根送檢;指(趾)甲:消毒指(趾)甲并去掉其表面部分,取可疑病變部分,用刀片修成小薄片5~6片,置無菌容器中送檢。B 深部真菌感染標本采集:
血液:無菌采血8~10ml,注入血培養瓶中,立即送檢;如不能立刻送檢時血培養瓶應放室溫,但不可超過8h。
腦脊液:采樣量不少于3ml,分別注入兩支無菌試管中送檢(一支做真菌培養和墨汁染色,一支做普通培養)。
呼吸道及泌尿生殖道標本:采集方法同普通培養。⒀
厭氧菌感染培養標本
A 標本采集:嚴格執行無菌操作,避免標本污染和與空氣接觸;用注射器抽取胸水、腹水、心包液、關節液、膽汁、腦脊液或無菌手術抽取膿液;抽出液體標本后,要盡快排除注射器內的空氣。
B 標本運送:標本采集后不得冰箱儲存,必須盡快(半小時內)送檢;標本運送可采用注射器(已驅氧)或含運送培養基的無氧小瓶或厭氧罐。
第五篇:細菌標本采集規范
臨床微生物學標本采取和處理的規范化要求
正確的采取、處理與運送用于細菌培養的標本是臨床細菌檢驗成功的關鍵。標本采取與處理的規范化是準確、及時地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎;而標本采取與處理不當將嚴重影響檢驗結果,給臨床以誤導,延誤對患者的正確治療。為此,我們提出初步的參考意見,并希望在實踐中不斷完善。
一、血液細菌培養標本的采集和處理
臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血液感染的患者,需做血液細菌培養以明確病原。
1.采集方法:靜脈采血,以無菌操作方法抽取血液后,直接注入血培養瓶中,輕輕顛倒混勻,以防血液凝固。如果同時作需氧和厭氧培養,應先將標本接種到厭氧瓶中,再注入需氧瓶,嚴格防止將空氣注入厭氧瓶中。
2.采血時間以及血培養份數:在患者發熱期間越早越好,最好在抗菌治療前,用藥前24小時內采集2~3次血液標本,可使細菌檢出率高達99%。對間歇性寒戰或發熱的患者,應在寒戰或體溫高峰到來之前0.5~1小時采血,亦可在寒戰或發熱后1小時采集血液標本。特殊感染患者采血培養時應遵循以下原則:(1)可疑急性發熱性菌血癥、敗血癥患者:應在使用抗菌藥物之前,在24小時內從不同部位采集2~3份血液標本培養。
(2)可疑細菌性心內膜炎患者、感染性心內膜炎患者:在1~2小時內采集3份血標本培養,如果24小時后陰性,再采集兩份血標本培養。
(3)不明原因發熱患者:先采集2~3份血標本,抽血間隔60 min,24~36小時后體溫升高之前,再采集2份血標本進行培養。因為1次血培養不足以說明問題,可能會遺漏陽性結果。
(4)可疑菌血癥但血培養持續陰性時;應改變血培養方法,以獲得罕見或苛養的微生物。
(5)在急性發熱性疾病如腦膜炎、細菌性肺炎,需馬上做抗菌治療;或急性骨髓炎、化膿性關節炎等要緊急手術的患者,應立即從兩臂分別取2份標本。3.采血部位:采血部位通常為肘靜脈。疑為亞急性心內膜炎的患者,以肘動脈或股動脈采血為宜。疑為細菌性骨髓炎或傷寒患者,在病灶或髂前(后)上棘處嚴格消毒后抽取骨髓。多次采血應在不同部位的血管穿刺以排除皮膚菌叢污染的可能。要避免從血管插管內取血,因插管常被污染,其培養結果不能反映真實情況。在不同部位取血,2次分離出同樣菌種才是確定病原菌的有力證據。采血時要求嚴格無菌操作,防止皮膚正常菌群污染。
4.采血量:采血量與血培養的檢出率相關,所以采血量一定要足夠。成人一般為8~10ml/瓶,新生兒與嬰幼兒為1~5 ml/瓶,骨髓采血量為1~2ml/瓶。5.標本運送與保存:含血樣的培養瓶應立即送往實驗室;不能及時送檢的標本,應將其放在室溫,切忌冰箱存放,因為某些苛養菌可在低溫環境中死亡,而使培養陽性率下降。
二、下呼吸道分泌物(痰培養)的標本采取和處理
下呼吸道分泌物(痰)的細菌學檢查對病原學診斷起著重要作用,但痰標本的質量往往難以保證,造成病原學診斷和實際引起感染的病原菌脫節,直接影響抗菌藥物的應用、甚至耐藥菌的出現或流行。痰標本的細菌學檢驗地帶網檢查應注意如下幾個問題。
1.標本的采集:痰液標本最好在應用抗菌藥物之前采集,以深咳晨痰最好,主要有自然咳痰法、支氣管鏡采集法、胃內采痰法、小兒采痰法和氣管穿刺法等。
(1)自然咳痰法:為最常用的采集痰液方法。留取標本前,囑咐患者用清水漱口數次,然后將痰吐入無菌帶蓋的痰杯中。對無痰或少痰的患者可采用霧化吸入加溫至45℃的10%NaCl水溶液,使痰液易于排出。對咳痰少的幼兒,可輕壓胸骨上部的氣管,促進痰液的排出。
(2)氣管穿刺法:僅用于昏迷患者,由臨床醫師進行操作,主要用于厭氧培養。
(3)支氣管鏡采集法:用氣管鏡在肺部病灶附近用導管吸引或者用支氣管刷直接取材,患者不易接受,故不常用。
(4)胃內采痰法:無自覺癥狀的肺結核患者(尤其嬰幼兒)不會咳嗽,有時將痰誤咽入胃中,可采集胃內容物做結核分枝桿菌培養。清晨空腹時將胃管插入患者胃內抽取胃液送檢。
(5)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,用棉拭子深入咽部,小兒收到刺激咳嗽時,可咳出肺部或氣管分泌物粘在拭子上。
2.標本的運送與保存:痰液標本采集后應立即送檢,以防止某些細菌在外環境中死亡。做結核分枝桿菌和真菌培養的標本不能及時送檢時,可放4℃保存,以免雜菌生長。
三、尿液細菌培養標本的采集和處理 尿液的細菌培養檢查對于膀胱和腎臟感染的及早發現和病原學診斷很有價值。對于尿道、前列腺以及內、外生殖器炎癥的診斷也有一定價值。
1.標本收集時間:需在應用抗菌藥物之前或停用抗菌藥5 d之后留取尿液標本;尿液在膀胱內應停留6~8h以上,使細菌有足夠時間繁殖。最好留取早晨清潔中段尿標本。2.標本收集方法:
(1)清潔排尿法:女患者首先用肥皂水或碘伏清洗會陰部及尿道口,再用清水沖洗,擦干并排出前段尿液后,用無菌容器接取中段尿10~20ml;男患者應翻轉包皮沖洗,用碘伏消毒尿道口;嬰兒消毒其陰部后,將無菌小瓶直接對準尿道口接取尿液;均加蓋立即送檢。
(2)膀胱穿刺法:為避免尿道正常菌群的污染,收集尿液最好的方法是膀胱穿刺。尤其做厭氧菌檢查時必須采用膀胱穿刺法。穿刺時膀胱應充盈,皮膚嚴格消毒后用裝有19或20號針頭的注射器在恥檢驗地帶網骨聯合距臍1/3處穿刺。膀胱穿刺的適應癥有:①有尿道感染的臨床癥狀,但中段尿培養細菌數很低,而又難以確定感染源者。②嬰幼兒、新生兒、不能用導管者。③懷疑有厭氧菌感染時。(3)腎盂尿采集法:若取左右兩側腎盂尿,應請泌尿科醫生采取,左右側的標本要標記明確,以免出現錯誤。
(4)對用封閉式引流裝置的留置導尿患者留取尿液標本培養時,用適當的消毒劑嚴格消毒引流管和導尿管連接處的管壁,用裝有21號針頭的注射器穿刺導尿管壁吸取尿液。不可打開導尿管和引流管連接處收集標本,培養用的尿液標本也不能從引流袋中留取。
(5)膀胱鏡檢查、輸尿管插管或逆行腎盂造影時,收集的尿液可用來做細菌培養。(6)做病毒學檢測時用容器收集清潔的標本即可,不需特殊方法收集。標本中加入抗生素可抑制細菌的過度生長,且標本需冷藏。
3.標本的運送和保存:尿液標本采集后應立即送檢、及時接種,室溫下保存時間不能超過2小時,4℃冷藏時間不能超過8小時,否則尿液細菌迅速繁殖,使尿中細菌計數不準確。但疑為淋病奈瑟菌感染患者的標本不能冷藏保存。
四、糞便標本微生物學檢查的質量要求
1.采集方法:糞便標本多采用自認排便法,特殊情況下可采用直腸拭子法。(1)自然排便法:患者用藥前自然排便后,采集有膿血、黏液部分糞便2~3克;外觀無異常的糞便應從糞便不同部位取材;液體糞便取絮狀物,盛于無菌容器或保存液中送檢。(2)直腸拭子法:對于不易獲得糞便或排便困難的患者,可采用直腸拭子法采集。將拭子前端用無菌甘油或鹽水濕潤,然后插入肛門約4~5cm(幼兒2~3cm)處,輕輕在直腸內旋轉,擦去直腸表面黏液后取出,盛入無菌試管或保存液中送檢。
2.標本保存和運送:糞便標本應立即送檢;如不能立即送檢,放入Cary-Blair運送培養基或pH7.0的磷酸鹽甘油(0.033mol/L PBS與等體積的甘油混合)中運送和保存。標本置密封好的小瓶中,記錄姓名、日期、標本號、及時送檢,一般不長于2小時。
五、生殖道標本的采集和處理 1.男性標本:
(1)如疑為急性淋病奈瑟菌或其他化膿性細菌感染應在清洗龜頭部后,以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒劑消毒后,擠出分泌物立即以無菌棉拭子采取放入無菌試管中,立即送檢,或以專用的細拭子插入尿道口2~3cm,旋轉采取。(2)如疑為前列腺炎、精囊炎或慢性淋病奈瑟菌感染應由醫師按摩前列腺,以無菌手續自尿道口采取前列腺液送檢。2.女性標本:
(1)成年婦女自宮頸采取標本,應在擴陰器的支持下,選取有炎癥或分泌物部位,先以無菌棉拭子拭去表淺層分泌物,再用另一拭子取分泌物放入無菌試管中立即送檢。如做厭氧或真菌培養應另外采取標本。
(2)如未成年幼女疑患性傳播疾病時,不應使用擴陰器,應以無菌拭子在陰道口處采取分泌物放入無菌試管中立即送檢。
六、胸腹水、腦脊液標本的采集
1.采集方法:(1)腦脊液多由臨床醫生采集,通過腰穿法無菌操作采集腦脊液3~5ml,盛于無菌試管或培養瓶中。
(2)胸腹水均由醫師以無菌手續穿刺取3~5ml,必須應用帶蓋的無菌容器,立即送檢。
2.標本運送與保存:收集到的腦脊液標本應立即送檢,15分鐘內送到實驗室,同時注意保溫,不可置于冰箱保存,否則會使一些細菌死亡(如腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌),影響細菌的檢出率。
七、對不合格標本的處理
微生物室對于下列標本收集不符合規定的標本將予拒收,并通知臨床,按標本要求復送:
1.申請單項目與標本不符。
2.申請單姓名、科別、床號與標本的標簽不符。3.標本已有明顯的污染跡象(如開塞)。4.標本量過少或已明顯干燥。
5.尿培養應留樣于無菌試管或帶蓋無菌杯中。(不合格標本大部分是因為留在尿常規杯中)。尿培養標本不合格者,多以污染而致三種以上雜菌生長居多。特別需杜絕的是一些患者見無菌容器太小直接留取中段尿有難度,于是把小便拉在痰盂等大容器中,再把小便倒在無菌容器中送檢。
6.痰培養應留樣于帶蓋無菌痰杯中。(不合格標本大部分是因為留在尿常規杯中)。痰培養標本不合格者,多以口水居多或口腔污染嚴重。挑取痰標本直接涂片鏡檢,WBC<10/LP,上皮細胞>25/LP不適合做細菌培養。
7.大便培養標本不合格者,多以送檢時間過長導致標本干燥無法培養,故大便標本須及時送檢(1小時內,最好在上班時間直接送細菌室檢驗)。