第一篇:微生物實驗個人總結(jié)
微生物實驗總結(jié)
這個學(xué)期操作了四個微生物實驗,以及一個自主設(shè)計性實驗。通過前階段對四個實驗的操作和認知的基礎(chǔ)上,展開第五個實驗的自主設(shè)計。實驗分別是菌落總數(shù)測定,霉菌和酵母的檢查和計數(shù),乳酸菌的檢驗,微生物藥敏試驗以及探討環(huán)境因素對微生物生長的影響。
這學(xué)期的微生物實驗是在上學(xué)期微生物實驗的基礎(chǔ)上的累積和擴展延伸:以培養(yǎng)基的制備與滅菌,玻璃器皿的洗滌、包扎和滅菌,微生物接種技術(shù)和細菌的革蘭氏染色為技術(shù)基礎(chǔ)進行的,以加強學(xué)生基礎(chǔ)理論知識和基本技能的培養(yǎng)為目的。
下面我來談?wù)勎以趯嶒炛械男牡皿w會。
第一個實驗是菌落總數(shù)測定。讓我重新認識了一下這個名詞:菌落形成單位,我現(xiàn)在的理解就是:1ml或者1g待測樣品中菌落的個數(shù),一定要注意的是單位是CFU/ml或CFU/g。還有就是要掌握好對高壓蒸汽滅菌鍋的操作。實驗之前要充分做好預(yù)習(xí)工作,以便實驗的進行。由于是測定微生物實驗,就要尤其小心其他雜菌的混入影響實驗結(jié)果。因此要做好實驗儀器和各種試劑的滅菌,有培養(yǎng)皿,試管,移液槍頭(裝在盒子中),按要求配置好的瓊脂培養(yǎng)基和生理鹽水,按各自要求用紗布和報紙包扎好,送入高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌。玻璃儀器在包扎前要進行清洗,并烘干,以免水分沾濕報紙。滅完菌后取出物品進入超凈工作臺,超近工作臺的紫外燈在進入20分鐘前開啟,并在進入時關(guān)閉,以免影響人體。要對臺面進行消毒處理,用酒精擦拭。可以在等待瓊脂培養(yǎng)基冷卻到50攝氏度左右前對待測樣品進行10倍系列稀釋至需要的濃度。要注意的是一定要標(biāo)記好濃度或者按順序排列在試管架上以免弄混,同一個試管里吸取樣品才能用同一個槍頭進行移液。再進行平板接種。待瓊脂培養(yǎng)基冷卻好后,用右手打開紗布并將錐形瓶拿住,將瓶口靠近酒精燈再進行滅菌,左手拿培養(yǎng)皿用大拇指和食指稍微打開培養(yǎng)皿蓋,將瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中心內(nèi),不用倒很多,使瓊脂培養(yǎng)基沒過培養(yǎng)皿表面即可。培養(yǎng)皿一定是平拿在手上的,倒好后輕輕蓋上培養(yǎng)皿蓋,緩慢地平方在超凈工作臺臺面邊緣處,再推至中間。再用移液槍取1ml樣品快速打入培養(yǎng)皿中央,蓋上培養(yǎng)皿蓋,然后用手輕輕搖晃,千外不要太大力。然后貼上標(biāo)簽記號,靜置。如此依次操作下去。靜置一段時間待培養(yǎng)基凝固后倒置放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一段時間再取出進行觀察計數(shù)。
我們組的實驗結(jié)果不甚理想,培養(yǎng)皿中的微生物都是連成一片的,或者是培養(yǎng)皿壁上也都長著,主要是由于待測樣品打入培養(yǎng)皿后,搖晃不均勻或者太大力了,以至于菌液沒分散開來或是跑到培養(yǎng)皿壁上去了。第一個實驗的操作室下面四個實驗的操作基礎(chǔ)。基本操作步驟都是相似的,只是待測微生物不同和根據(jù)不同微生物要配置不同的瓊脂培養(yǎng)基。
第二個實驗是霉菌和酵母的檢查和計數(shù)。用到的培養(yǎng)基是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基和孟加拉紅培養(yǎng)基,都是用于培養(yǎng)霉菌和酵母的。要注意的地方與第一個實驗一樣是滅菌和避免引入雜菌,還有就是,混勻菌液時要慢慢地、輕輕地移動培養(yǎng)皿。這個實驗有兩個菌要觀察,不過由于兩個菌的菌落形態(tài)差異比較大,所以還是比較簡單就能識別的:
孟加拉紅培養(yǎng)基中,菌落的紅色比培養(yǎng)基的紅色顏色更重,菌落顏色是大紅色,培養(yǎng)基顏色是粉紅色。在孟加拉紅培養(yǎng)基表面的酵母菌菌落是圓形,邊緣整齊,表面比較光滑濕潤,形態(tài)較小。位于孟加拉紅培養(yǎng)基內(nèi)的菌落則是三角形和四角形,還有多角形。邊緣都是整齊的,不像霉菌菌落的邊緣有菌絲。霉菌形成的菌落較稀松,多成絨毛狀,絮狀,形態(tài)與酵母相比較大。
第三個實驗是乳酸菌的檢驗。用到的培養(yǎng)基是MRS培養(yǎng)基、莫匹羅星鋰鹽改良 MRS 培養(yǎng)基和MC 培養(yǎng)基,MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)的是乳酸菌,莫匹羅星鋰鹽改良 MRS 培養(yǎng)基培養(yǎng)的是雙歧桿菌,MC 培養(yǎng)基培養(yǎng)的是嗜熱鏈球菌。乳酸菌總數(shù)結(jié)果減去雙歧桿菌與嗜熱鏈球菌計數(shù)結(jié)果之和即得乳桿菌計數(shù)。
要注意的是該實驗用的是平板涂布法接種,是待培養(yǎng)基凝固后吸取1ml酸奶樣品稀釋勻液,用無菌涂布棒涂抹均勻。倒置培養(yǎng)一段時間,觀察菌落形態(tài)及計數(shù)菌落。由于乳酸菌和雙歧桿菌都是需要厭氧培養(yǎng)的,所以要求從樣品稀釋到平板涂布要求在15分鐘內(nèi)完成。
第四個實驗是微生物藥敏試驗。本實驗主要用了2種方法:紙片擴散法和牛津杯法。紙片擴散法是將含有定量抗菌藥物的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上,紙片中的藥物在瓊脂中擴散,隨著擴散距離的增加,抗菌藥物的濃度呈對數(shù)減少,從而在紙片的周圍形成濃度梯度。同時,紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的菌株不能生長,而抑菌范圍外的菌株則可以生長,從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈,不同的抑菌藥物的抑菌圈直徑因受藥物在瓊脂中擴散速度的影響而可能不同,抑菌圈的大小可以反映測試菌對藥物的敏感程度,并與該藥物對測試菌的最小抑菌濃度(MIC)呈負相關(guān)。牛津杯法加的是試劑,卡那霉素試劑和醫(yī)用酒精,查看它們對細菌的抑菌效果。
要注意2種方法都需要空白對照試驗實驗,前者為不加任何東西的滅菌小圓濾紙片,后者為無菌水。用的也是平板涂布法接種。1法:鑷子在夾有抗菌物質(zhì)的紙片和不加任何東西的滅菌小圓濾紙片時都要進行酒精燈滅菌,以免影響實驗準確度。2法:在涂布好的培養(yǎng)基表面用鑷子輕輕置滅好菌的牛津杯。注意不用按壓的,不然擠壓會致培養(yǎng)基表面破裂,會影響實驗結(jié)果。待培養(yǎng)好后取出觀察并測量抑菌圈直徑,結(jié)果單位用毫米計。
第五個實驗是自主設(shè)計實驗環(huán)境因素對微生物生長的影響。選取3個環(huán)境因素物理、化學(xué)和生物因素均可進行設(shè)計。根據(jù)前四個實驗的基礎(chǔ),通過小組探討和交流設(shè)計出實驗方案。并加以驗證。通過自主設(shè)計實驗可以結(jié)合小組的智慧,加強團隊協(xié)作精神和創(chuàng)新思維,通過實驗可以驗證理論,增加感性認識,培養(yǎng)獨立工作能力和思考能力,并使具有過硬的專業(yè)技術(shù)水平。
通過這次的實驗,我明白了任何事情丟不是一蹴而就的,而是一個慢慢積累的過程。雖然實驗結(jié)果不是很理想,但是我參與了過程,通過小組討論我們也分析了失敗的原因,找到了解決的方法,避免了下一次失誤。并且從中理解了團隊討論和合作的重要性。以上即是我的全部感想。
第二篇:微生物實驗總結(jié)
微生物實驗總結(jié)
姓名:趙葉鋒班級:食品科學(xué)113學(xué)號:2011013522
大三的第二學(xué)期塊結(jié)束了,這個學(xué)期操作了四個微生物實驗,以及一個自主設(shè)計性實驗。通過前階段對四個實驗的操作和認知的基礎(chǔ)上,展開第五個實驗的自主設(shè)計。實驗分別是菌落總數(shù)測定,霉菌和酵母的檢查和計數(shù),乳酸菌的檢驗,微生物藥敏試驗以及探討環(huán)境因素對微生物生長的影響。
這學(xué)期的微生物實驗是在上學(xué)期微生物實驗的基礎(chǔ)上的累積和擴展延伸:以培養(yǎng)基的制備與滅菌,玻璃器皿的洗滌、包扎和滅菌,微生物接種技術(shù)和細菌的革蘭氏染色為技術(shù)基礎(chǔ)進行的,以加強學(xué)生基礎(chǔ)理論知識和基本技能的培養(yǎng)為目的。
下面我來談?wù)勎以趯嶒炛械男牡皿w會。
第一個實驗是菌落總數(shù)測定。讓我重新認識了一下這個名詞:菌落形成單位,我現(xiàn)在的理解就是:1ml或者1g待測樣品中菌落的個數(shù),一定要注意的是單位是CFU/ml或CFU/g。還有就是要掌握好對高壓蒸汽滅菌鍋的操作。實驗之前要充分做好預(yù)習(xí)工作,以便實驗的進行。由于是測定微生物實驗,就要尤其小心其他雜菌的混入影響實驗結(jié)果。因此要做好實驗儀器和各種試劑的滅菌,有培養(yǎng)皿,試管,移液槍頭(裝在盒子中),按要求配置好的瓊脂培養(yǎng)基和生理鹽水,按各自要求用紗布和報紙包扎好,送入高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌。玻璃儀器在包扎前要進行清洗,并烘干,以免水分沾濕報紙。滅完菌后取出物品進入超凈工作臺,超近工作臺的紫外燈在進入20分鐘前開啟,并在進入時關(guān)閉,以免影響人體。要對臺面進行消毒處理,用酒精擦拭。可以在等待瓊脂培養(yǎng)基冷卻到50攝氏度左右前對待測樣品進行10倍系列稀釋至需要的濃度。要注意的是一定要標(biāo)記好濃度或者按順序排列在試管架上以免弄混,同一個試管里吸取樣品才能用同一個槍頭進行移液。再進行平板接種。待瓊脂培養(yǎng)基冷卻好后,用右手打開紗布并將錐形瓶拿住,將瓶口靠近酒精燈再進行滅菌,左手拿培養(yǎng)皿用大拇指和食指稍微打開培養(yǎng)皿蓋,將瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中心內(nèi),不用倒很多,使瓊脂培養(yǎng)基沒過培養(yǎng)皿表面即可。培養(yǎng)皿一定是平拿在手上的,倒好后輕輕蓋上培養(yǎng)皿蓋,緩慢地平方在超凈工作臺臺面邊緣處,再推至中間。再用移液槍取1ml樣品快速打入培養(yǎng)皿中央,蓋上培養(yǎng)皿蓋,然后用手輕輕搖晃,千外不要太大力。然后貼上標(biāo)簽記號,靜置。如此依次操作下去。靜置一段時間待培養(yǎng)基凝固后倒置放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一段時間再取出進行觀察計數(shù)。
我們組的實驗結(jié)果不甚理想,培養(yǎng)皿中的微生物都是連成一片的,或者是培養(yǎng)皿壁上也都長著,主要是由于待測樣品打入培養(yǎng)皿后,搖晃不均勻或者太大力了,以至于菌液沒分散開來或是跑到培養(yǎng)皿壁上去了。
第五個實驗是自主設(shè)計實驗環(huán)境因素對微生物生長的影響。選取3個環(huán)境因素物理、化學(xué)和生物因素均可進行設(shè)計。根據(jù)前四個實驗的基礎(chǔ),通過小組探討和交流設(shè)計出實驗方案。并加以驗證。通過自主設(shè)計實驗可以結(jié)合小組的智慧,加強團隊協(xié)作精神和創(chuàng)新思維,通過實驗可以驗證理論,增加感性認識,培養(yǎng)獨立工作能力和思考能力,并使具有過硬的專業(yè)技術(shù)水平。
通過這次的實驗,我明白了任何事情丟不是一蹴而就的,而是一個慢慢積累的過程。雖然實驗結(jié)果不是很理想,但是我參與了過程,通過小組討論我們也分析了失敗的原因,找到了解決的方法,避免了下一次失誤。并且從中理解了團隊討論和合作的重要性。以上即是我的全部感想。
第三篇:微生物實驗總結(jié)
食品衛(wèi)生綜合檢驗試驗總結(jié)
食品質(zhì)量091金秀建2009016521
為期五天(2012年6月11日-15日)的食品衛(wèi)生綜合檢測實驗已經(jīng)告一段落了,在這一周的微生物實驗主要包括牛奶中大腸菌群的計數(shù)、雞蛋中沙門氏菌的檢驗和牛奶中金黃色葡萄球菌的檢驗三個實驗,經(jīng)過三個綜合實驗的課程,能讓我更能理解試驗時要掌握的細節(jié),也要保持頭腦的時刻清醒。同時讓我對這三種微生物有了更進一步的認識,同時讓我也對實驗也更加熟悉了。
首先我們做的是大腸菌群的計數(shù),它是采用MPN(最大可能數(shù)法)的計數(shù)來測定的。大腸菌群的特性為:在37℃,24小時內(nèi)能發(fā)酵乳糖,產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,好氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌,一般認為該菌群細菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。其檢測原理為細菌在樣品內(nèi)的分布是隨機的,所以檢測細菌時,可按概率理論計算菌數(shù)。大腸菌群MPN計數(shù)的檢驗程序為樣品的稀釋、初發(fā)酵試驗、復(fù)發(fā)酵試驗和最后的大腸菌群最可能數(shù)(MPN)的報告。那么在第一天的上午,老師基本給我們講了實驗的原理和步驟,以及一些需要注意的地方,我們便開始計算自己需要配制的實驗試劑的量,并且稱取試劑的量和清洗所要用的實驗器皿,首先配置的是生理鹽水和LST肉湯,并且把生理鹽水和LST肉湯分裝到試管內(nèi),蓋好蓋子包扎好進行滅菌,滅完菌也就到了吃飯時間,等下午來接種培養(yǎng)了。
牛奶樣品與生理鹽水以1:9的比例進行混合,搖勻后做10倍系列的稀釋,做了3個稀釋度。隨后將三個稀釋度的樣品勻液以每個稀釋度3支試管接種到內(nèi)裝小導(dǎo)管的含LST肉湯的試管中,最后放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。在經(jīng)過24h的培養(yǎng)后,所有的試管內(nèi)均產(chǎn)生氣體,而后我們要將培養(yǎng)后的有菌落的LST肉湯接種到BGLB肉湯試管中進行培養(yǎng)24-48h,觀察后發(fā)現(xiàn)所有的BGLB管都產(chǎn)氣,顏色也有原來的綠色變成暗黃色,證明也產(chǎn)生了酸,所以記為所有產(chǎn)氣管為大腸菌群陽性管。最后查MPN表可得出每毫升樣品中大腸菌群的MPN為大于等于1100ml/MPN。
我們小組在做大腸菌群測定還是很順利的,中途沒有出現(xiàn)什么錯誤,實驗很順利,小組成員的配合和分工也都很好。
第二個實驗是雞蛋中的沙門氏菌的檢測,他的特性是:沙門氏菌需氧或兼性
厭氧,10-42℃都可生長,最適溫度為37℃,大部分可發(fā)酵葡萄糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,是革蘭氏陰性的無芽孢桿菌。在營養(yǎng)瓊脂平板上生長產(chǎn)生光滑,濕潤,半透明,邊緣整齊的菌落。在血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán),形成大小中等的灰白色菌落。實驗過程可分為前增菌、選擇性增菌、選擇性平板分離、生物化學(xué)篩選四個階段。
實驗首先配制BPW溶液,進行分裝和高壓滅菌,在無菌條件下,移取5ml雞蛋液樣品于盛有45mlBPW的組織培養(yǎng)瓶中,混勻,放置于36℃±1℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h±2h,觀察生長現(xiàn)象。接下來的增菌階段,需要配制TTB增菌液和SC增菌液,移取1ml的前增菌液接種到10mlTTB增菌液內(nèi),在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h~24h,SC增菌液過程與TTB一樣。接下來需要制備BS平板和HE平板,等平板凝固后便可以開始接種了,是采用平板分多區(qū)劃線的方法,然后放在37度溫箱培養(yǎng)18~24h。最后要進行生化實驗,要先配制三糖鐵瓊脂,從培養(yǎng)皿的平板上挑取可疑菌落,接種到三糖鐵瓊脂,先與底層穿刺,再在斜面劃線。同時把菌落接種到各種生化試劑里,封口后一起放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)18h。取出培養(yǎng)皿和生化小試管觀察結(jié)果,記錄。
第三個實驗是金黃色葡萄球菌的檢驗,它的特性一般是無芽孢,鞭毛。大多數(shù)無莢膜,革蘭氏染色陽性,它培養(yǎng)的營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上就能生長良好,需氧或兼性厭氧。在血平板上培養(yǎng)會使紅細胞破裂,形成透明的溶血環(huán)。在顯微鏡下可以看到是紫色的,排列成葡萄狀的圓形的菌。
首先是樣品的處理,稱取22g7.5%氯化鈉肉湯溶解于250ml水中,在每個均質(zhì)瓶內(nèi)移取45ml,同時制取Baird-Parker培養(yǎng)基,高壓滅菌后吸取牛奶樣品5ml到均質(zhì)瓶內(nèi)。放入恒溫箱培養(yǎng)18-24h。然后用接種環(huán)取培養(yǎng)物分別劃線接種到Baird-Parker平板和血平板上,培養(yǎng)18-24h,Baird-Parker平板有可能需要培養(yǎng)45-48h。最后進行血漿凝固酶試驗,挑取BP平板或血平板上可疑菌落1個或以上,分別接種到5ml左右BHI肉湯中,36±1℃培養(yǎng)18-24h。取新鮮兔血漿0.5ml,加入BHI培養(yǎng)物0.2-0.3ml,振蕩搖勻,置36±1℃溫箱培養(yǎng),半小時觀察一次,6小時觀察,直至出現(xiàn)凝固,判為陽性結(jié)果。也有小組6h后也沒凝固的,則判為陰性。最后進行革蘭氏染色實驗,觀察細菌的形態(tài)特征。最后記錄結(jié)果。
三個實驗雖然不多,但是三個實驗的跨度剛好是一個星期,所以我們實驗剛
好可以做完,實驗從剛開始的懵懂到慢慢的熟悉,到最后的成功,少不了的是小組合作和老師的幫助。經(jīng)過三個微生物的實驗,讓我對微生物實驗的過程。不過對于微生物的實驗一定要細心,一個是它需要的時間很長,要滅菌和培養(yǎng),如果做錯都得重新再來,并且實驗過程中不能被污染,否則會對實驗結(jié)果造成一定的污染或完全不可用。對實驗流程一定要熟悉,現(xiàn)象一定要觀察仔細,因為類似的菌類有很多,其生產(chǎn)的習(xí)性也類似,若不觀察仔細,就會有結(jié)果的偏差。我們小組的實驗都很順利,中途雖有一點點過失,但對實驗的進度和結(jié)果沒有什么大的影響,實驗結(jié)果也是讓我們蠻有成就感的,感謝小組的配合。操作不像理論,只有多次練習(xí)才有體會,在今后的實驗中,我會更加努力。
第四篇:微生物實驗標(biāo)本復(fù)習(xí)總結(jié)
微生物實驗標(biāo)本復(fù)習(xí)總結(jié)(王莉莉口述+教授整理版)
分類 球菌
標(biāo)本名稱 葡萄球菌
屬 鏈球菌屬 肺炎 鏈球菌
腦膜炎 球菌
淋病 奈瑟菌 革蘭染色陰性桿菌
弧菌屬
弧菌屬
泌尿生殖道分泌物 糞便/ 血標(biāo)本/c.s.f 米泔水樣糞便、嘔吐
物
分枝桿菌屬
抗酸 陽性菌
G G
標(biāo)本來源 血標(biāo)本/ 膿汁標(biāo)本/c.s.f 同上 鐵銹色 痰液 c.s.f
G 染色方法
G
鏡下描述(參考)革蘭陽性,球形,呈葡萄串狀排列 革蘭陽性,球形或卵圓形,呈鏈狀排列 革蘭陽性雙球菌,菌體呈矛頭狀,寬端相對,尖端向外 革蘭陰性雙球菌,腎形或豆形,排列成單個、成雙或4個相聯(lián) 革蘭陰性雙球菌,成雙排列;有莢膜(致病菌株可見菌毛)革蘭陰性,菌體兩端鈍圓,散在排列 革蘭陰性,菌體只有一個彎曲,呈逗點狀,散在排列
90%開放性肺
結(jié)核/結(jié)核性腦
膜炎
無 流行性腦脊髓膜炎(流腦)
淋病 醫(yī)學(xué)意義 敗血癥/化膿性感染/化膿性腦
膜炎 同上 大葉性肺炎
G G
腸桿菌科
G
無/敗血癥 /化膿性腦膜炎
霍亂
痰標(biāo)本/c.s.f 抗酸染色 桿菌,被染成紅色,細長、直或彎曲、有時著色不均,呈顆粒
狀排列
窄而深傷口、壞死組
織
G
革蘭陽性細長桿菌;無莢膜,芽胞圓形、比菌體粗、位于菌體頂端,使細菌呈鼓槌
G
狀
革蘭陽性粗大桿菌;可見明顯莢膜,芽胞橢圓形、位于次極端、不比菌體粗
食物、嘔吐
物、糞便
G
革蘭陽性粗大桿菌,單獨或成雙排列,有時可見短鏈;無莢膜,芽胞橢圓形、位于次極端、粗于菌體,使細菌呈湯匙狀或網(wǎng)球
拍狀
厭氧性 細菌 破傷風(fēng) 梭菌
產(chǎn)氣莢膜梭菌
壞死組織 氣性壞疽
肉毒梭菌 無
分類 螺旋體
標(biāo)本名稱 鉤端 螺旋體
標(biāo)本來源 血標(biāo)本/ 尿標(biāo)本
染色方法 鍍銀
鏡下描述(參考)菌體呈棕色或黑色,菌體粗大,細密的螺旋看不清楚,菌體的一端或兩端彎曲成鉤狀 菌體呈棕黑色,周圍組織呈黃色,菌體粗大,螺旋較細密而規(guī)則
棉蘭
可見體積較小,只有一個細胞,呈圓形、卵圓形、梨形或棍棒形的G
小分生孢子
革蘭陽性,菌體較大,圓形;可見芽生孢子及假菌絲,出芽細胞呈卵圓形,比葡萄球菌大2-5
倍
墨汁負染 菌體呈圓形,大小不等;
外被莢膜,透明發(fā)亮,可見芽生孢子,無假菌絲
教授注:
1.為便于分類,特意將標(biāo)本名稱前置; 2.鏡下描述僅供參考;
3.“/”符號前后標(biāo)本來源與醫(yī)學(xué)意義呈一一對應(yīng)關(guān)系,注意分辨; 4.G---革蘭染色;c.s.f-----腦脊液;
正常菌群 或條件致病菌
廯病 醫(yī)學(xué)意義 鉤體病
梅毒 螺旋體
硬下疳滲出液 皮膚、指(趾)甲
鍍銀 梅毒
真菌 皮膚廯 真菌
白假絲 酵母菌
刮屑、試子或膿、痰標(biāo)本
新生 隱球菌
c.s.f
隱球菌性 腦膜炎
祝大家考試順利!
第五篇:微生物,真菌實驗(范文模版)
青 島 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué)
獸醫(yī)微生物學(xué)課程論文
題 目:姓 名:學(xué) 院:專 業(yè):班 級:學(xué) 號:指導(dǎo)教師:
病原真菌的分離鑒定
動物科技學(xué)院 動物醫(yī)學(xué)
2014年月 13 日
病原真菌的分離鑒定
動醫(yī)1205
李春成20121450 摘要:制作固體培養(yǎng)基,將A、B、D三種真菌接種到培養(yǎng)基和蓋玻片上進行3-5d的培養(yǎng)(溫度為28℃,觀察真菌在固體培養(yǎng)基上的生長表現(xiàn),在顯微鏡下觀察小培養(yǎng)中的真菌形態(tài),用美藍染色液染酵母菌,進一步觀察其形態(tài)。關(guān)鍵詞:真菌;分離;形態(tài);接種 引言:
真菌在自然界分布廣、數(shù)量大、種類多。有些真菌可引起人和畜禽疾病,有些霉菌還產(chǎn)生毒素,直接或間接的危害人類和動物健康。了解真菌的培養(yǎng)方法,認識其形態(tài)十分重要。
真菌中的酵母菌是單細胞微生物,細胞核和細胞質(zhì)有明顯的分化,個體直徑比真菌大10倍左右,多為圓形或卵圓形。酵母菌無性繁殖主要是出芽生殖,在特殊的情況下能形成假菌絲,有性繁殖是通過結(jié)合產(chǎn)生子囊孢子。用美藍染色液制成水浸片,不僅可以觀察其外形,還可以區(qū)分死活細胞。
霉菌的營養(yǎng)體是分支的絲狀體,分為基內(nèi)菌絲和氣生菌絲,氣生菌絲又分化出繁殖菌絲,不同霉菌的繁殖菌絲可以形成不同的孢子。
霉菌的菌絲較大,細胞易收縮變形,且孢子容易飛散,所以指標(biāo)本是常用乳酸石炭酸棉藍染色液。此染色液制成霉菌標(biāo)本片的特點是:細胞不變形,具有殺菌防腐作用,且不易干燥,能保持較長的時間,溶液本身呈藍色,有一定的染色效果。
利用培養(yǎng)在玻璃紙上的霉菌作為觀察材料,可以得到清晰、完整、保持自然狀態(tài)的霉菌形態(tài)。
制作霉菌封閉標(biāo)本,一般用石炭酸棉染色液封片,其中含有甘油,不易干燥,石炭酸有防腐作用,棉藍有一定的染色作用,便于觀察。1材料和方法 1.1材料
待鑒定的三種真菌A、B、D
1.1.1培養(yǎng)基 PDA培養(yǎng)基 1.1.2儀器
懸液、載玻片、蓋玻片、無菌培養(yǎng)皿、濕盒,1mL無菌注射器、生理鹽水、酒精燈等 1.2方法
1.2.1劃線分離:將接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌冷卻后,取待測的真菌,按照細菌的平板劃線分離法進行平板劃線,即用接種環(huán)從待測培養(yǎng)基上蘸取菌種在平板上劃1/5-1/4,劃畢灼燒滅菌接種環(huán),待冷卻后,于第二段處再做劃線,且從第一段處引線,劃畢,灼燒滅菌接種環(huán)。冷卻后,于第三段再做劃線,且從第二段處引線,劃畢,灼燒滅菌接種環(huán)。冷卻后,于第四段再做劃線,且從第三段處引線,劃畢,灼燒滅菌接種環(huán)。
1.2.2小培養(yǎng):用注射器吸取液體培養(yǎng)基于載玻片上,將接種環(huán)在火焰下滅菌,挑取待檢菌放于液體培養(yǎng)基上,待液體培養(yǎng)基將要凝固,但仍有部分呈液體狀時,蓋上蓋玻片,標(biāo)記好菌種。
1.2.3酵母菌水浸片的制備:先取干凈的載玻片滴上生理鹽水1-2滴,將接種環(huán)在火焰下滅菌,挑取酵母菌少許,均勻涂在液滴中,再將美藍染色液滴于載玻片上,染色2-3min后加蓋玻片。(注意切勿產(chǎn)生氣泡)然后低倍鏡和高倍鏡觀察其細胞形態(tài)、芽殖方式。2.結(jié)果與分析 2.1觀察三個培養(yǎng)基:A菌在固體培養(yǎng)基上菌落呈油脂狀,表面光滑、濕潤、粘稠,顏色呈黃色。B菌在固體培養(yǎng)基上菌落為氈狀,顏色是綠色,具有典型的放射狀皺紋。D菌在固體培養(yǎng)基上菌落密集,最初呈白色,孢子呈黑色。
2.2實驗現(xiàn)象
2.2.1小培養(yǎng)形態(tài)鑒定現(xiàn)象
前三圖均在40X下觀察)
A菌體呈圓形、卵形或橢圓形,內(nèi)有細胞核、液泡和顆粒體物質(zhì)。光鏡下可見細胞質(zhì)所在范圍及細胞壁的影子,高倍鏡中可現(xiàn)細胞核。B菌菌絲呈無色,有分隔,其分生孢子梗經(jīng)過多次分支,產(chǎn)生幾輪對稱或不對稱的小梗,形如掃帚,稱為掃帚體。D菌菌絲無隔,有匍匐菌絲和假根,假根著生處有直立向上孢子囊梗,其頂端彭大成孢子囊,孢子囊底部有半球形囊軸。
2.2.2美蘭染色現(xiàn)象
顯微鏡下看到的是單細胞, 不形成菌落的真菌,無色細胞為活酵母菌細胞,藍色細胞為已死的酵母菌細胞。
3.討論
本次試驗做的還可以,試驗結(jié)果都能看到,現(xiàn)象比較明顯,不過,顯微鏡聚焦不是很好,看的不是很清楚,現(xiàn)象也不太明顯,在做小培養(yǎng)時充分發(fā)揮了團隊合作精神,使得試驗做的很快(因為做小培養(yǎng)時,液體培養(yǎng)基溫度不那么高了,凝固時間很快),做美蘭染色時,也很注意沒有弄進氣泡,不影響觀察。4.結(jié)果
經(jīng)以上試驗可得出,A為酵母菌;B為青霉菌;D為根霉菌。
4.參考文獻
獸醫(yī)微生物實驗教程
胡貴學(xué)
2006