第一篇：美國藥典對正文修訂的雜質檢查新要求

美國藥典對正文修訂的雜質檢查新要求

最近，美國藥典對申報正文修訂時的雜質檢查有新的要求，非復雜有效成分、生物制品和生物技術制品、輔料、疫苗的正文修訂申報指導原則（USP guideline for submitting requests for revision to the USP-NF）正在征求意見。現將其中非復雜有效成分正文修訂中的雜質部分簡述如下：

正文有關內容修訂所用術語可參考文件ICH Q3A（R）。其中指定雜質包括已知雜質（identified impurity）和未知雜質(unidentified impurity)。

原料藥中的雜質

原料藥中的雜質檢查，對指定雜質（specified impurities）應規定限量，并且對所有非指定雜質（unspecified impurities）的限量定為0.10%(The impurity test of a drug substance monograph is intended to limit all specified impurities, with a further limit of 0.10% for all unspecified impurities)。新的正文要求用表1中的命名。

表1雜質檢查

雜質類型 Q3A雜質分類 USP傳統檢查 新的USP檢查

有機 起始原料 普通雜質色譜純度有關物質——的限度 指定雜質

副產物

中間體

降解產物 指定和未指定雜質

試劑，配位體，催化劑 指定雜質

無機 試劑，配位體，催化劑 無 指定雜質

重金屬和其他殘留金屬 重金屬——的限度 重金屬

無機鹽 熾灼殘渣 熾灼殘渣

殘留溶劑 有機揮發性雜質——的限度 有機揮發性雜質

USP正文原料藥僅檢查實際存在的雜質，不檢查理論存在的。如果采用不同的合成工藝，由此產生不同的雜質，則需要用不同的雜質檢查方法，并在包裝中標明可行的檢查方法。如果雜質的毒性已經FDA評價過，則在修訂報告中應包括毒性數據。

有機雜質常用液相和氣相法檢查，對雜質鑒別和定量，最好用外標法，而不用內標法，用內標法可能混入其他雜質。

有機雜質的定量應與藥品的對照品或雜質對照品比對，對檢出的雜質進行定量時，用USP指定雜質對照品。

在修訂報告中，應列出全部規定雜質的名稱，相對保留時間，相對響應因子，限度，定量限，檢測限和結構。修訂報告中還應寫明系統適用性，以保證色譜系統的效能。

有機雜質的檢查方法，應包括全部分析參數，如分析柱，流動相流速，流動相梯度或溫度梯度，檢測器類型，以及其他（如波長，陰極和陽極電壓等），注樣體積，樣品濃度，樣品的制備，對照品的應用，并應符合方法驗證的要求。在修訂報告中應附標準溶液和供試溶液的色譜圖（通常3批），用加入法或原料來確定產品中存在的起始原料，副產物和中間體，用強制降解（forced degradation）溶液確定潛在的降解產物（potential degradants）。

限度判斷應符合ICH Q3A的要求，對指定雜質，非指定雜質和總雜質，規定限度，限度應適合貨架效期全過程。

無機雜質，采用幾種不同方法測定。

重金屬和其他殘留金屬，已有重金屬檢查通法<231>。修訂報告中應包括所用的方法，限度，驗證數據。檢查方法的驗證應包括檢測限和專屬性。如果用的方法不同于<231>，則應完整敘述，分析的方法學，樣品的制備，操作，限度和驗證。

其他殘留金屬，檢查通法有：鋁<206>，鐵<241>，鉛<251>，汞<261>，硒<291>，鋅的測定法<591>。修訂報告中應寫明驗證數據，以表明方法具有一定的選擇性和定量限，保證限度的檢出。也可用其他方法，如原子吸收法等，但應有充分理由和方法驗證。

無機鹽，一般用熾灼殘渣<281>限度檢查，應測定具代表性的3批。一般為定性或半定量，不要求定量。

殘留溶劑，按ICH檢查1，2，3類。詳見有機揮發性雜質<467>，如果方法和限度不同于<467>，則應經驗證。

制劑中的雜質

制劑正文中雜質檢查，僅對在貨架效期內增加的指定雜質制訂限度，對全部非指定雜質，其限度按ICH Q3A（R）的要求。即不得過0.10%。

用穩定性試驗認定雜質。新制劑的雜質，USP按表1進行命名，重點為降解產物。不同組方產生不同雜質時，應采用不同方法檢查，在修訂報告中應寫明將在產品標記上的該檢查方法。

有機雜質，常用液相或氣相色譜法，有的輔料在色譜上會誤為雜質，所以在修訂報告中應有用輔料配方的色譜，加主成分和不加主成分的，還有空白溶液的色譜圖。

修訂報告中應列出全部依據穩定性試驗認定的確實在貨架效期會增多的指定雜質，列出名稱，相對保留時間，相對響應因子，限度，定量限，檢測限。應提供系統適用性，以保證色譜系

統有效。還應提供相關信息，如：柱，流動相流速，流動相梯度，溫度梯度，檢測器類型及相關設定（如波長，電極電壓等），注樣量，溶液的濃度，樣品的制備，對照品的應用，對照溶液色譜和樣品溶液（3批）的色譜圖，強制降解的色譜圖以顯示潛在的降解產物。

第二篇：藥物分析——雜質檢查(含答案)

一、單項選擇題

1、藥物的雜質限量是指

A.雜質的檢查量B.雜質的最小允許量C.雜質的最大允許量

D.雜質的合適含量E.雜質的存在量

2、藥物氯化物檢查，適宜的比濁濃度范圍是

A.50～80μgCl－/50mlB.10～50μgCl－/50mlC.0.5～0.8mgCl－/50ml

D.0.1～0.5μgCl－/50mlE.5～8μgCl－/50ml3、干燥失重主要是檢查藥物中

A.遇硫酸呈色的有機雜質B.水分及其他揮發性物質C.表面水

D.結晶水E.微量不溶性雜質

4.若熾灼殘渣留作重金屬檢查，則熾灼溫度應在A.400～500℃B.350～450℃C.500～600℃

D.700～800℃E.650～750℃

5、檢查含2～5μg重金屬雜質須采用《中國藥典》重金屬檢查法中哪一種方法

A.第一法B.第二法C.第三法D.第四法E.硫代乙酰胺法

6、藥物的中金屬檢查中（第一法），溶液的酸堿度通常是

A、強酸性B、弱酸性C、中性D、弱堿性E、強堿性

7、藥物雜質限量檢查的結果是1.0ppm，表示

A、藥物中雜質的重量是1.0ppm

B、在檢查中用了1.0g供試品，檢出了1.0g雜質

C、藥物所含雜質的重量是藥物本身重量的百分之一

D、藥物所含雜質的重量是藥物本身重量的萬分之一

E、藥物所含雜質的重量是藥物本身重量的百萬分之一

8、藥物中氯化物檢查的意義

A、考察對有效物質的影響

B、考察對藥物療效有不利影響的雜質

C、考察對人體健康有害的物質

D、可以考核生產工藝是否正常和反映藥物的純度水平

E、考察可能引起制劑不穩定性的因素

9、砷鹽檢查中，為了除區供試品中可能含有的微量硫化物的影響，在導氣管中需填裝蘸有下列溶液的藥棉

A、硝酸鉛 B、硝酸鉛加硝酸鈉 C、醋酸鉛D、醋酸鉛加醋酸鈉 E、醋酸鉛加氯化鈉

10、檢查藥物中硫酸鹽雜質，適宜的比濁濃度范圍為50ml溶液中含

A、1~5mgSO42-B、0.2~0.5mgSO42-C、10~20μgSO42-

D、0.5~0.8mgSO42-E、0.1~0.5mgSO42-

11、Ag（DDC）法檢查砷鹽，最后生成的紅色物質是

A、As（DDC）3B、DDCC、膠態砷D、吡啶·HDDCE、膠態銀

12、微孔濾膜法是用來檢查

A、鐵鹽 B、砷鹽 C、重金屬 D、硫化物 E、氰化物

13、檢查維生素C中重金屬：取樣2.0g，規定含重金屬不得過百萬分之十，應吸取標準鉛溶液（每1ml=0.01mg的Pb）多少ml

A、0.2ml B、0.4ml C、2.0ml D、1.0ml E、20ml14、檢查某藥物中的砷鹽：取標準砷溶液2.0ml（每1ml相當于1μg的As），砷鹽限量為0.0001%，應取供試品的量為

A、0.02g B、2.0g C、0.020g D、1.0g E、0.10g15、硫代乙酰胺法檢查重金屬，溶液最佳pH值是

A、1.5 B、3.5 C、2.5 D、＞7 E、10.016、在鐵鹽檢查中，加過硫酸銨的作用是

A、防止Fe3+水解 B、使Fe2+→ Fe3+ C、使Fe3+→Fe2+

D、防止干擾 E、除去Fe2+的影響17、2000年版中國藥典規定了幾種重金屬檢查方法

A、3種 B、1種 C、5種 D、2種 E、4種

18、取某藥1.0g，加水50ml溶解后，取25ml依法檢查氯化物，規定氯化物不得過0.01%，應取標準氯化鈉溶液（10μg/ml）多少ml

A、5.00ml B、5ml C、0.5ml D、0.50ml E、2.0ml19、磷酸可待因中檢查嗎啡，取本品0.20g，依法操作，所顯顏色與嗎啡對照液（2.0mg/100ml）5.0ml用同一方法制成的對照液比較，不得更深，嗎啡限量為

A、0.10% B、0.20% C、0.05% D、0.25% E、0.005%

20、易炭化物是指

A、藥物中存在的有色雜質

B、藥物中遇H2SO4易炭化或易氧化而呈色的微量有機雜質

C、藥物中遇H2SO4易炭化或易氧化而呈色的微量無機雜質

D、有機氧化物E、有色絡合物

21、對熱穩定的藥物干燥失重測定時采用

A、恒壓恒重干燥法 B、恒壓恒溫干燥法 C、減壓恒溫干燥法

D、減壓常溫干燥法 E、常壓恒溫干燥法

22、檢查高錳酸鉀中氯化物時，可加什么試劑使其褪色后，再依法檢查

A、草酸 B、雙氧水 C、乙醇 D、乙醚 E、乙醛

23、檢查維生素B1中重金屬，規定重金屬量不得超過百萬分之十五，若取樣1g，應吸取標準鉛溶液（0.01mgPb/ml）多少ml

A、0.5ml B、2ml C、1.5ml D、3ml E、1ml

二、配伍選擇題（備選答案在前，試題在后。每組題均對應同一組被選答案，每題只有一個正確答案。每個被選答案可重復選用，也可不用。）

[1—4]

A、2ml B、1~2ml C、5~8ml D、1ml E、1~5ml1、制備標準砷斑應取標準砷溶液

2、鐵鹽檢查適宜的濃度范圍是相當于標準鐵溶液

3、重金屬檢查適宜的濃度范圍是相當于標準鉛溶液

4、硫酸鹽檢查適宜的濃度范圍是相當于標準硫酸鉀溶液

[5—7]

A、氯化物 B、砷鹽 C、鐵鹽 D、硫酸鹽 E、重金屬

5、在鹽酸性溶液中與氯化鋇生成渾濁

6、在鹽酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色

7、Ag（DDC）法檢查

[8—11]

A、重鉻酸鉀、硫酸酮、氯化鈷混合溶液 B、亞硝酸鈉、硫酸酮、氯化鈷混合溶液

C、澄清度標準液 D、濁度標準液

E、稀焦糖溶液

8、澄清度檢查采用的標準液是

9、溶液顏色檢查采用的標準液是

10、重金屬檢查中若供試品有色，可采用什么溶液調色

11、易炭化物檢查中采用的標準比色液是

[12—13]

A、鐵鹽、硫酸鹽、重金屬、水分 B、水分、殘留有機溶劑、異構體

C、副產物、中間體、原料 D、澄清度、砷鹽、水解產物

E、干燥失重、降解物

12、一般雜質

13、特殊雜質

[14—16]

A、信號雜質、有害雜質 B、生產中雜質、存儲中雜質

C、化學雜質、生物雜質 D、一般雜質、特殊雜質

E、有機雜質、無機雜質

14、按雜質來源分

15、按雜質結構分

16、按雜質性質分

[17—20]

A、在磷酸溶液中反應 B、在稀硝酸溶液中反應 C、在稀鹽酸溶液中反應

D、在稀硫酸溶液中反應 E、在醋酸鹽緩沖液中反應

17、鐵鹽檢查

18、硫酸鹽檢查

19、重金屬檢查（1、2法）

20、氯化物檢查

[21—23]

A、使砷斑梯度明顯 B、使As5+→As3+ C、使As3+→As5+

D、防止光線對砷斑的影響 E、除去H2S干擾

在砷鹽檢查中

21、KI的作用

22、SnCl2作用

23、醋酸鉛棉花的作用

[24—25]

A、用含有醋酸的水洗凈濾紙后過濾樣品

B、用含有硝酸的水洗凈濾紙后過濾樣品

C、用含有鹽酸的水洗凈濾紙后過濾樣品

D、用干燥垂熔漏斗過濾樣品

E、用蒸餾水洗凈濾紙后過濾樣品

24、氯化物檢查時，若溶液渾濁，可采取

25、硫酸鹽檢查時，若溶液渾濁，可采取

[26—28]

A、分光光度法 B、頂空進樣法 C、檢查藥物中非揮發性無機雜質

D、微孔濾膜法 E、需在反應液中加稀鹽酸和過硫酸銨

26、熾灼殘渣

27、重金屬檢查

28、有機溶劑殘留量測定

三、多項選擇題

1、以標準液濃度為（C），體積為（V），取樣量為（S），雜質限量為（L），列出計算公式

A、L=（V×C）/SB、V=（L×S）/CC、V=S×C/L

D、S=（C×V）/LE、L=V/C×S2、藥物雜質中的有害雜質是

A、氯化物B、砷鹽C、硫酸鹽D、氰化物E、重金屬

3、藥物中雜質來源于

A、中間體、副產物、原料 B、生產所用器皿 C、藥物氧化、分解產物

D、異構體 E、試劑、催化劑等

4、氯化物檢查中加HNO3的目的是

A、防止AgCl水解 B、消除CO32—、PO43—干擾 C、產生較好乳濁

D、加速AgCl↓形成 E、避免形成Ag2O↓

5、雜質限量常用的表示方法有

A、mol/LB、百分之幾C、%D、百萬分之幾E、μg6、中國藥典古蔡法與Ag—DDC法檢查砷鹽的區別是

A、顯色劑不同 B、結果比較方式不同 C、反應瓶中加入的試劑不同

D、導氣管形狀不同 E、Ag—DDC法中不用加醋酸鉛棉花

7、藥物中雜質檢查

A、是保證人們用藥安全 B、可考核生產工藝和企業管理是否正常

C、是保證藥物質量的一個重要方面 D、可考察藥物純度的一個重要方面

E、通常采用限度檢查

8、在雜質檢查中，若藥物有色影響檢查，可采用

A、內消色法處理 B、采用空白對照法 C、將樣品過濾后測定

D、用標準比色液比較 E、外消色法處理

9、藥物在生產過程中易引入的雜質是

A、中間體、副產物 B、氧化物、潮解物、聚合物

C、降解物、水解物 D、分解物、霉變物

E、原料、殘留溶劑、重金屬

一、CABCDBEDCEECCBBBEACBECC

二、[1—4]AEBE [5—7]DCE [8—11]DAEA [12—13]AC [14—16]DEA

[17—20]CCEB [21—23]BBE [24—25]BC [26—28]CDB

三、1、ABD

2、BDE3、ABCDE4、BCDE

5、BCD

6、ABD

7、ABCDE8、AE

9、AE

第三篇：藥物的雜質檢查習題

藥 物 的 雜 質 檢 查習題

一、單選題：

1、藥物純度符合要求是指E

A、含量符合藥典的規定；B、藥物符合分析純的規定；C、不存在雜質；

D、對患者無不良作用；E、藥物中的雜質不超過限量規定

2、在藥物的重金屬檢查中，溶液的酸堿性通常是B

A、強酸性；B、弱酸性；C、中性

D、弱堿性；E、強堿性

3、藥物中氯化物雜質檢查的原理是：利用酸性溶液中雜質與硝酸銀試液生成氯化銀渾濁。所用的酸是B

A、硫酸；B、硝酸；C、鹽酸

D、醋酸；E、磷酸

二、多選題：

1、在藥物的一般雜質檢查中必須嚴格控制限量的是ABCDECD

A、氯化物；B、鐵鹽；C、砷鹽

D、以鉛為代表的重金屬； E、硫酸鹽

2、古蔡法檢查砷鹽時，酸性氯化亞錫的作用是ACD

A、使正五價的砷轉化成正三價B、除去硫化氫

C、使生成的碘轉化成碘離子D、形成鋅-錫齊

E、除去其他雜質(解釋：碘離子與錫離子形成配位化合物）

3、用TLC法檢查藥物中雜質時，通常有以下幾種方法ACD

A、雜質對照品法B、高低濃度對比法

C、選用與供試品相同的藥物標準品作對照

D、以供試品稀釋液為對照

E、選用可能存在的某種雜質的代用品為對照

三、配對選擇題：

1、葡萄糖中糊精檢查B2、咖啡因中其他生物堿檢查E3、氯化鈉中碘化物、溴化物的檢查C4、乙醇中雜醇油檢查A5、異丙腎上腺素中酮體的檢查D

A、臭味及揮發性差異B、溶解行為差異

C、氧化還原性差異D、對光選擇吸收性質的差異

E、雜質與一定試劑產生沉淀

6、在酸性溶液中與氯化鋇生成渾濁D7、在酸性溶液中與硫氰酸鹽生成紅色C8、在實驗條件下與硫代乙酰胺形成有色混懸溶液E9、Ag-DDC法B10、古蔡法B

A、氯化物B、砷鹽C、鐵鹽D、硫酸鹽

E、重金屬

11、氯化鈉中鐵鹽檢查E12、磺胺嘧啶中重金屬檢查D13、氯化鈉中硫酸鹽檢查B14、葡萄糖中重金屬檢查C15、葡萄糖中氯化物檢查A

上述檢查需加入的試劑：

A、硝酸銀試液B、氯化鋇試液

C、硫代乙酰胺試液D、硫化鈉試液

E、硫氰酸銨試液

16、鐵鹽的檢查BC17、酸性條件下，用醋酸鉛試紙檢查藥物中所含微量硫化物CB18、TLC法檢查有關雜質A19、硫酸阿托品中莨菪堿的檢查E20、用碘化汞鉀試液，檢查咖啡因中其他生物堿B

A、吸附或分配性質的差異B、雜質與一定試劑產生沉淀

C、雜質與一定試劑產生顏色反應D、雜質與一定試劑反應產生氣體 E、旋光性質的差異

問答題

1、某藥物進行中間體雜質檢查：取該藥，加稀鹽酸制成每毫升含2mg的溶液，置1cm比色池中，于310nm處測定（雜質有吸收，藥物無吸收）吸光度，不得超過0.05。另取中間體對照品，用相同溶劑配成每毫升含10μg的溶液。在相同條件下測得吸收度為0.435，試問該中間體雜質的限量是多少？

2、氯化鈉注射液（0.9%）中重金屬檢查：取相當于氯化鈉0.45g的注射液，蒸發至約20ml，放冷，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml和水適量使成25ml，依法檢查，含重金屬不得過千萬分之三。

回答：（1）應取標準鉛溶液多少毫升？

（2）如以氯化鈉計，重金屬的限量是多少？

標準答案

一、單選題：0.2×11、E2、B3、B

二、多選題：0.2×11、C、D2、A、C、D3、A、C、D

三、配對：0.2×11、B2、E3、C4、A5、D6、D7、C8、E9、B10、B11、E12、D13、B14、C15、A16、C17、B18、A19、E20、B

四、問答題1、2’E1cm?1%AC?0.435?435 0.001

AC?1%E1cm?0.05435

0.?0.01?100%?0.057% 0.002雜質量限量??100%?供試品量

答：雜質限量為0.057%。

2、2’50?3?10?15?10g?7?6

每1ml相當于10μg的鉛，故：取1.5ml

以NaCl計，限量?15?0.45?6?100%?0.0033%0.8’

第四篇：藥物的雜質檢查

人民衛生出版社 藥物分析

第三章 藥物的雜質檢查 第一節 概述

目的要求：

1、掌握雜質的定義、雜質限量的檢查與計算

2、熟悉雜質的來源與分類

3、了解藥物純度與化學純度的區別

重點與難點：雜質限量的檢查與計算

教學課時：1課時

純度:藥物的純凈程度

雜質:藥物中存在的無治療作用或影響藥物的穩定性和療效，甚至對人體健康有害的物質。

一、藥物純度與試劑純度

共同點——均規定所含雜質的種類和限量.不同點

①藥物純度從用藥安全、有效和對藥物穩定性等方面考慮,只有合格品和不合格品.②試劑純度是從雜質可能引起的化學變化對使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的加以規定,它不考慮雜質對生物體的生理作用及毒副作用.注意：化學試劑不能代替藥品！

化學試劑——一般分為4個等級（基準試劑、優級純或特種試劑(光譜純、色譜純、農藥殘留檢測級)、分析純和化學純〕

二、雜質的來源與種類

1、雜質的來源

生產過程中引入：合成過程中，原料不純或反應不完全，中間體、副產物在精制中未除盡

儲藏過程中引入:在溫度、濕度、日光、空氣等外界條件影響下，或因微生物的作用，引起藥物發生水解、氧化、分解、異構化、晶型轉變、聚合、潮解和發霉等變化

2、雜質的種類：

按來源分類：一般雜質和特殊雜質

按毒性分類：毒性雜質和信號雜質

按理化性質分類：有機雜質、無機雜質及殘留溶劑

三、雜質的限量

雜質的限量(Limit Test)：藥物中所含雜質的最大允許量。

通常用百分之幾或百萬分之幾(parts per million, ppm)來表示 雜質限量（%）=雜質最大允許量×100% 供試品量

雜質限量的控制方法一般分為兩種：一種為限量檢查法，另一種是對雜質進行定量測定。

進行限量檢查時，多數采用對照法，此外還可以采用靈敏度法和比較法

對照法是指取一定量的被檢雜質標準溶液和一定量的供試品溶液，在相同條件下處理，比較反應結果，以確定雜質含量是否超過限量。雜質限量（%）=標準溶液的濃度?標準溶液的體積?100% 供試品量

或 L(%)=C?V?100%注意單位的統一 S

采用該法須注意平行原則，即供試溶液和對照溶液應在完全相同的條件下反應，如加入的試劑、反應的溫度、放置的時間等均應相同。例、磷酸可待因中嗎啡的檢查

取本品0.10 g,加鹽酸溶液(9-1000)使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試液2ml，放置15min，加氨試液3ml，所顯顏色與嗎啡試液[取無水嗎啡2.0mg，加鹽酸溶液(9-1000)使溶解成100ml] 5.0ml用同一方法制成的對照液比較，不得更深。問限量是多少？

2?10?3?5.0C?VL???100%?0.1%S0.10

小結：

1、藥物純度：藥物的純凈程度。

2、雜質的來源與種類

來源：生產和貯存

種類：一般雜質和特殊雜質

3、雜質的限量檢查

雜質的限量：藥物中允許含雜質的最大量;計算：

作業：腎上腺素上酮體的檢查

取本品0.2g,置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9-2000)溶解并稀釋至刻度，搖勻，在310nm處測定吸光度不得超過0.05，酮體的百分吸收系數為435，求酮體的限量

第五篇：實驗一葡萄糖一般雜質檢查

實驗一:葡萄糖一般雜質檢查

驗一：葡萄糖一般雜質檢查

一、教學目的： 1．掌握葡萄糖中氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽等限量的檢方法、原理、反應條件及計算。2．熟悉納氏比色管、驗砷瓶、量筒、天平等使用方法。3．了解藥物一般雜質檢查項目的意義。

二、實驗內容： 1．氯化物的限量檢查 取本品0.6g，加水溶解使成25ml，再加稀硝酸10ml，溶液若不澄清、濾過，置50ml納氏比色管中，加水使成40ml，加硝酸銀試液1ml，用水稀釋至50 ml，搖勻在暗處放置5分鐘，如發生混濁，與標準氯化鈉6 ml同法操作所制的對照液比較，不得更深（0.01）。

2．硫酸鹽的限量檢查 取本品2g，加水溶解使成40ml，溶液若不澄清、濾過，置50ml納氏比色管中，加稀HCl2ml，搖勻，加25氯化鋇溶液5ml，用水稀釋成50 ml，搖勻，放置10分鐘，如發生混濁，與標準硫酸鉀溶液2 ml同法操作所制的對照液比較，不得更深（0.01）。

3．重金屬的限量檢查 取本品4g，加水23 ml溶解，再加稀醋酸2ml，加硫化氫試液10ml，搖勻在暗處放置10分鐘，與標準鉛溶液2 ml同法操作所制的對照液比較，不得更深（5ppm）。

4．鐵鹽的限量檢查 取本品2g，加水20 ml溶解，再加硝酸3滴，緩緩煮沸5分鐘，用水稀釋至45 ml，加硫氰酸銨溶液（3→100）3 ml搖勻，如顯色，與標準鐵溶液2 ml同法操作所制的對照液比較，不得更深（0.001）。5．砷鹽的限量檢查 演示。思考題 1．在進行氯化物檢查、硫酸鹽或重金屬檢查時，遇到有顏色的樣品如何處理？ 2．重金屬檢查有幾種方法？本實驗采用何種方法？該法的最適pH為多少？ 3．何謂“限度檢查”？雜質限度應如何計算？ 實驗二 特殊雜質檢查

一、目的要求： 熟悉阿斯匹林、鹽酸普魯卡因中的一些特殊雜質的檢查原理及操作方法。

二、提要 1.特殊雜質是指藥物本身特有的根據其生產主藝、自身牲質，而產生的雜質其檢查方法在藥典中列在各藥品的檢查項下。2.特殊雜質的檢查方法是根據藥物與雜質在理化性質及生物活性上的差異，選擇靈敏變高，專屬性強的方法做為檢查方法 如根據其對光的選擇性差異，可選用比色法〈目視、可見、紫外及原子吸收分光光度法，根據理化學性質上的差異可選薄層層折法，氣相色譜法，高壓液相法等。

3.乙酰水楊酸中游離水楊酸（生產中未反應完全或貯存中水解產生的的檢查，采用目視比色法。4.鹽酸普魯卡因發生如下分解反應 普魯卡因 對氨基苯甲酸 利用鹽酸普魯卡因和對氨基苯甲酸在硅膠G簿極上吸附行為不同經層析而達到分離的目的。以一定限量的對氨基苯甲酸對照品為標準進行雜質限量，利用對二甲氨基苯甲醛進行顯色。

三、實驗內容：

1.乙酰水楊酸中游離水楊酸檢查 取本品0.lg加乙醇1ml溶解后，加冷水至50ml 立即加新制的硫酸鐵銨溶液1ml 搖勻30秒鐘內如顯色與對照液〈精密稱取取水楊酸0.1g 加水溶解后，加冰醋酸1ml 搖勻再加水使成1000 ml搖勻，〉精密量取1 ml，加乙醇1ml，加冷水至50ml 立即加新制的硫酸鐵銨溶液1 ml 搖勻，比較不得更深。

2、鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查 標準對氨基苯甲酸的制備：精密稱對氨基苯甲酸對照品，加乙醇制成每ml含30ug 的溶液。供試液的制備：精密量取鹽酸普魯卡因注射液加乙醇制成每ml含

2.5mg的鹽酸普魯卡因溶液。2 薄板的制備：取層析用硅膠G粉約2.5g，加適量水〈約按1:2；1:3〉調勻，研磨、鋪在平滑玻璃板上〈一般厚度0.20.3mm陰干105C 加熱活化1小時取出放入密閉干燥器內備用 點樣：在制好的薄板上距下端邊2.5cm處用微量注射器分別吸取對照液和在試液各lOul分別點樣兩點間一般距離1.52.0cm，距邊緣一側1.52.5cm。展開：用丙酮:0.8鹽酸〈91混合液作展開劑1015 ml 展開劑于層析槽中將點好樣的薄板放入飽和5分鐘用傾斜上行法展開展開長度為1015cm 取出后風干。顯色：用噴霧器嘖射顯色劑對二-甲氨基苯醛溶被使其顯色〈2對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液looml加5ml冰醋酸〉。供試溶液如顯與對照品相應的雜質斑點與對照品溶液的主斑點比較不得更深。

四、注意事項 1·游離水楊酸檢查中樣品管應盡量干燥，不得帶λ過多的水否則樣品加醇后不易溶解。2.薄板所用的玻璃必須仔細清洗不附著油污，否則易引起薄層的剝落。3·用石膏作粘合劑時此法的關鍵是控制開始凝固的時間過早倒于玻板上則易流過遲則太粘不能成均勻薄層。

4·如在空氣中點樣一般不超過10分鐘所點圓點直徑應小于3mm并應分次點以免使圓點擴大，直徑太大，所有圓點在統一水平線上面積也應盡可能一致。思考題: 1.乙酰水楊酸中游離水楊酸檢查中為何要在30秒鐘內比色 2.鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸雜質限量是多少 3.TLC雜質檢查有兒種類型 4.舉例哪一種雜質檢查是通過反應靈敏度來控制的 實驗

三 鹽酸普魯卡因注射液的含量測定（重氮化法）

一、教學目的： 1．掌握重氮化的反應原理，操作條件及注意事項。2．熟悉注射液含量的測定基本方法和計算。3．熟悉外指示劑法。

二、實驗內容： 鹽酸普魯卡因含有芳伯氨基，在酸性條件下與亞硝酸鈉發生重氮化反應。外指示劑法： 精密量取本品適量（約相當于鹽酸普魯卡因0.1g）加水40ml與（1→2）鹽酸液15ml，而后置電磁攪拌器上，攪拌使混合均勻，再加溴化鉀2g，插入鉑電極后，將滴定管插入液面下約2/3處，在15～20℃用0.05mol/L亞硝酸鈉在攪拌下迅速滴定。，在近終點時將滴定管的尖端提出液面上用少量水將尖端洗滌，洗液并入溶液中，繼續緩慢滴定，至用細玻棒蘸取溶液少許，劃過涂有含鋅碘化鉀淀粉糊的瓷板上，即顯蘭色條痕時，停止滴定，3分鐘后再蘸取少量劃過一次，如仍顯蘭色條痕時，即為終點。1ml亞硝酸鈉液（0.05mol/L）相當于13.64mgC13H20N2O2.HCl 思考題：

1、加入KBr的目的？

2、重氮化法的影響因素是什么？

3、開始滴定時，滴定管為什么要插入液面，不插入是否可以？

4、寫出標示量的計算公式。指導思想：為提高對理論知識的深入理解和綜合利用的能力，提高理論與實驗結合的能力，提高自學能力，適應將來實際參加工作能力，安排一定的設計性試驗，同學根據所學有關專業知識并查閱相關文獻，自己設計藥品質控標準的一些實驗方法，及應準備用的儀器、試藥、試劑。教師課堂給與點評，并指導同學按正確方法完成實驗。本實驗為設計性實驗，使同學自己根據所學知識設計實驗方案，然后進行實驗操作，完成用紫外分光光度法測定異煙肼片劑含量

1、同學根據所學有關專業知識按照中國藥典的格式自己設計用紫外分光光度法測定異煙肼片劑含量實驗方案和操作方法（設計兩種方法）及應準備用的儀器、試藥、試劑。

2、寫出預習報告。包括實驗目的，原理，實驗應用的儀器、試藥試劑，操作步驟，計算公式，及實驗操作中應注意的問題。然后經教師指導進行實驗，寫出實驗報告。

3、異煙肼片標示量（或規格）：50mg，或100mg ：中國藥典（2000，1995，1990年版；）教科書，有關藥學專業期刊文獻 原試驗四 氟尿嘧啶的含量測定 氧瓶燃燒法

一、目的要求： 學習氧瓶燃燒法的原理及操作技術。

二、實驗內容： 1.燃燒瓶的使用 燃燒瓶系取500ml碘瓶一個，在瓶塞底部熔封一根鉑絲，下端彎成夾狀或螺旋狀，長度約為瓶身長度的2/3。將稱取的供試品置于無灰濾紙的中心，按虛線折成后，固定于鉑絲下端的彎曲處，使尾部露出，另在燃燒瓶中加適量吸收液，并將瓶頸用水潤濕，小心急速通入氧氣12分鐘（通氣管應接近液面，使瓶內空氣盡量排盡），立即蓋住瓶口，移至防護設備中，點燃包有供試品的濾紙的尾部，迅速放入燃燒瓶，按緊瓶塞，用水封口，等燃燒完畢后（應無黑色碎片），充分震搖，使生成的煙霧完全吸入吸收液中。然后按規定方法進行測定。2.樣品測定 取本品15mg精密稱定，用氧瓶燃燒法進行破壞，以水20ml為吸收液，待生成的煙霧完全吸入吸收液后，移至100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試液。另取105OC干燥1小時的氟化鈉約25mg，精密稱定換算成含氟量（）置100ml量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，搖勻。臨用前，精密量取20ml置另一100ml量瓶中加水稀釋至刻度，搖勻，做對照液。精密量取供試液與對照液各2ml，分置50ml量瓶中，各加茜素氟藍試液10ml搖勻，再各加每100ml中含NaAc 12g，與冰醋酸6ml的溶液3ml，硝酸鈰液試液10ml，加水稀釋至刻度搖勻，在暗處放置1hr，照分光光度法置2cm吸收池中，在610nm波長處測吸收度，并將供試液的吸收度用空白校正，計算即得。注意事項： 1． 檢查氧瓶有無裂紋，氧瓶必須洗凈，無有機物，瓶口濕潤，鉑絲要干燥。注意安全，燃燒時用干布包裹。2． 樣品固定松緊適度，以防燃燒時脫落或燃燒不完全。3． 燃燒瓶中通入氧氣量要適度，少則樣品燃燒不完全，太多則燃燒時易 將瓶塞沖起，一般通入12分鐘為宜。4． 樣品燃燒完

畢應充分振搖至瓶中煙霧消失，為使吸收完全，再放置15分鐘，并用水封口。思考題：

1． 氧瓶燃燒法的成敗關鍵是什么？ 2． 如何做空白？ 3． 氧瓶燃燒法用于測定哪類藥物？

4． 寫出測得結果的F計算公式？ 實驗五 硫酸阿托品注射液的含量測定（酸性染料比色法）

一、目的要求： 掌握酸性染料比色法測定生物堿制劑的基本原理及操作方法。

二、實驗內容： 1． 對照液的制備 精密稱取在120OC干燥至恒重的硫酸阿托品對照品25mg至25ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，至100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml含無水硫酸阿托品50ug）。2． 供試液的制備 精密量取本品適量（約相當硫酸阿托品2．5mg）至50ml量瓶中，加水稀釋至刻度搖勻即得。3． 測定法 精密量取對照液與供試液各2ml，分別置于預先精密加入氯仿10ml的60ml分液漏斗中，各加溴甲酚綠溶液2ml，搖勻提取2分鐘后，靜置分層，分取氯仿層移置1cm吸收池中，以水2ml按同法操作所得的氯仿液作空白，在420nm的波長處分別測定吸收度。

三、注意事項： 1． 本實驗所用分液漏斗必須干燥無水 2． 供試品和對照品平行操作，提取振搖，放置時間等均應一致。3． 用甘油淀粉糊均勻地涂在分液漏斗磨口處。4． 分取氯仿層測定時，初流液應棄去，所取氯仿層必須澄清、透明、不混有水珠。5． 初次振搖，要放氣。

四、思考題 1． 酸性染料比色法測定生物堿的原理是什么？ 2． 如何選擇酸性染料，提取溶劑？ 3． 為何要求標準品與供試品同時操作，振搖和放置時間應一致 4． 寫出標示量百分含量的計算公式？ 實驗六 高效液相色譜法測定血清茶堿濃度

一、目的要求:掌握離效液相色譜法測定血清茶堿樣品制備標準曲線的基本方法及測定前樣品的制備處理基本操作方法。

二、原理:以β-羥乙基茶堿為內標用氯仿/異丙醇95/5.V/V的混合液提取血清樣品中的茶堿將提取液蒸干后用甲醇復溶進行色譜分析用波長254nm檢測分析物的含量。

三、儀器與試劑:（1）.儀器:高效液相色譜儀微量進樣器。（2）.試藥與配制: β-羥乙基茶堿與茶堿標準品乙睛、甲醇、氯仿、異丙醇、無水乙醇均為分析純去離子重蒸水。配制標準茶堿貯備液:濃度為1mg/ml的茶堿乙醇溶液。配制內標乙醇應用液:濃度為0.2mg/ml的β-羥乙基茶堿乙醇液。配制血清茶堿標準應用液:用無藥血清配制茶堿濃度分別為5.010.020.0和40.0μg/m1的血清標準液可先配成40.0μg/ml的茶堿血清標準液.密封于-20℃冰箱保存用時以無藥血清稀釋至所需濃度。配制提取液于95ml氯仿中加入異丙醇5ml。3色譜條件:反相C18色譜柱內填無定型十八烷燒基硅烷流速15ml/mim檢測波長254nm。

四、操作步驟: ①取具塞離心試管七只分別精密加入無藥血清血清標準應用液分別含茶堿濃度為5·010·020·0及

40.oμg/ml質控血清及待測血清各100μl。②分別精密加入內標乙醇應用液10μl。③各試管分別精密加入提取液1·5m1。④將各離心試管置旋渦振蕩轆振蕩半分鐘不要連續振蕩應半分鐘內間斷5-6次防止乳化不易分離。⑤振蕩后離心3分鐘2000轉/分。⑥用尖細吸管吸去上層水相。⑦小心將下層有機相吸取1ml置另一潔凈試管切勿帶入水相。⑧在通風柜內氮氣60℃水浴蒸干。9·用甲醇50μl重溶殘留物用微量進樣器吸取10μl進樣進行色譜分析。5結果計算:分別測量出標準茶堿應用液的茶堿及內標的峰高比或峰麗積比以濃度為橫座標以峰高比或峰面積比為縱座標回歸標準曲線方程或做標準曲線o測量出質控樣品及待測樣品中茶堿及內標的峰高比或峰面積比分別代入標準曲線計算樣品中茶堿的濃度。實驗七 復方乙酰水楊酸片的含量測定 一．目的要求： 掌握復方制劑中各成分的分離及含量測定的基本原理和操作方法。二．提要： 1．復方乙酰水楊酸片的處方 乙酰水楊酸 230g 撲熱息痛 126g 咖啡因 30g 輔料 適量 制成 1000片 2．①乙酰水楊酸采用提取容量法：以氯仿提取后蒸干，溶于中性醇，以氫氧化鈉測定。②咖啡因采用剩余碘量法。以B代表咖啡因，2B4I2定過量2KIH2SO4→2B.HI.I4↓K2SO4 I2過量2Na2S2O3→2NaINa2S4O6 三．實驗內容： 1.取本品20片，精密稱定，研細備用。水浴蒸干氯仿時間不宜過長。

1、乙酰水楊酸得含量測定： 精密量取上述細粉適量（約相當于乙酰水楊酸0.4克）置分液漏斗中加水15 ml搖勻用氯仿振搖提取4次20、10、10、10 ml氯仿液用同一份水10 ml洗滌合并氯仿液，置水

浴上蒸（8）干，殘渣加中性乙醇（對酚酞指示劑呈中性）20 ml溶液中，加酚酞指示劑液3滴用0.1 mol/L氫氧化鈉液滴定，即得（每1ml0.1mol/L氫氧化鈉相當于18.02mgC9H8O4）。

2、咖非因的含量測定： 精密稱取上述細粉適量（約相當于咖啡因50mg）加稀硫酸5 ml，振搖數分鐘使咖非因溶解，用棉花過濾，濾液置50 ml容量瓶中，濾器與濾渣用水洗滌5次，每次3ml。合并濾液與洗液，精密加0.1 mol/L碘液25 ml，用水稀釋至刻度，搖勻，在約25 閉光放置15分鐘，濾過，棄去出濾液，精密量取續濾液25 ml，用0.05 mol/L硫代硫酸鈉液滴定至近終點加淀粉指示劑繼續滴定至蘭色消失并將滴定結果用空白試驗校正即得每1 ml 0.1 mol/L碘液相當于5.306mg的C8H10O2N4.H2O 四．注意事項：

2.片子應盡量研細，不應有所損失。3.撲熱息痛的水解，務必要保持微沸狀態，否則水解不易完全，影響結果。4.過濾咖啡因與碘形成的沉淀時，需用干燥的濾紙，最初的濾液應棄去10至15ml，過少可能影響碘的濃度，過濾時要防止碘液揮發。5.測定乙酰水楊酸時，錐形瓶應干燥，滴定應迅速。

五、思考題：

1、如何配制中性醇？

2、測定咖啡因為何要做空白試驗？如何做？

3、碘濃度不準時對結果有何影響？

4、寫出稱量范圍，計算公式，及標示量計算公式。

5、用硫代硫酸鈉滴定時加淀粉指示劑多少毫升？ 藥物分析實驗講義 藥學院藥物分析教研室 2005、3 取本品10片，精密測定，研細，精密稱取細粉適量（約相當于異煙肼0.1g），置100 ml量瓶中，加水適量，超聲波振蕩5分鐘使溶解并用蒸餾水稀至刻度，搖勻，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液，精密量取續濾液1 ml，置另一100 ml量瓶中，并用蒸餾水稀至刻度，搖勻，于263 nm波長處測定吸收度，按異煙肼（C6H7N3O）的吸收系數（E1cm）為307計算標示量的百分含量。本品含異煙肼（C6H7N3O）應為標示量的95.0—105.0。