第一篇：微生物與生化藥學(xué)專業(yè)

微生物與生化藥學(xué)專業(yè)

2009年碩士研究生入學(xué)復(fù)試具體實(shí)施辦法

生物與制藥工程學(xué)院“微生物與生化藥學(xué)”專業(yè)2009年碩士研究生入學(xué)復(fù)試辦法按《武漢工業(yè)學(xué)院2009年碩士研究生復(fù)試辦法》執(zhí)行，具體實(shí)施辦法如下：

一、復(fù)試內(nèi)容

1、綜合面試：包含外語(yǔ)聽(tīng)說(shuō)能力測(cè)試、專業(yè)知識(shí)考核和面試及實(shí)踐環(huán)節(jié)測(cè)試等復(fù)試內(nèi)容。

（1）外語(yǔ)聽(tīng)說(shuō)能力測(cè)試：主要包括專業(yè)外語(yǔ)和日常用語(yǔ)兩方面的考核，采取口試形式，滿分為100分。

（2）專業(yè)知識(shí)考核：滿分為100分。重點(diǎn)考查考生對(duì)專業(yè)理論與技能及相關(guān)知識(shí)的掌握是否扎實(shí)、深厚和寬廣，是否具備本專業(yè)研究生入學(xué)的基本要求。考核設(shè)天然藥物資源利用、藥物設(shè)計(jì)與合成、藥物的微生物轉(zhuǎn)化和提取、微生物與生化藥物四個(gè)方向的問(wèn)題。

（3）面試及實(shí)踐環(huán)節(jié)測(cè)試：采取口試形式，滿分為100分。主要考查政治思想品德、專業(yè)綜合知識(shí)、實(shí)踐動(dòng)手能力、科學(xué)思維、創(chuàng)新能力和反應(yīng)的能力等。

（4）計(jì)分方法：總分＝外語(yǔ)聽(tīng)說(shuō)能力測(cè)試成績(jī)×20%＋專業(yè)知識(shí)考核成績(jī)×40%＋面試及實(shí)踐環(huán)節(jié)測(cè)試成績(jī)×40%。

說(shuō)明：考生復(fù)試程序?yàn)椋菏紫冗M(jìn)行專業(yè)知識(shí)考核的考試，然后進(jìn)行逐個(gè)面試。面試部分先進(jìn)行英文自我介紹，導(dǎo)師提問(wèn)，最后進(jìn)行實(shí)踐環(huán)節(jié)測(cè)試。

2、同等學(xué)歷加試

同等學(xué)歷加試科目：生物工程專業(yè)加試“生物工藝原理”和“分子生物學(xué)”；

制藥工程專業(yè)加試“藥劑學(xué)”和“藥理學(xué)”。均采取筆試形式，滿分為100分，答題時(shí)間為120分鐘。

二、復(fù)試時(shí)間及地點(diǎn)

1、綜合面試：4月13日上午9:00進(jìn)行專業(yè)知識(shí)及綜合面試。地點(diǎn)為生工學(xué)院會(huì)議室。

2、同等學(xué)歷加試： 4月14日上午9:00－11:00，藥理學(xué)、生物工藝原理；下午2：00～4：00，藥劑學(xué)、分子生物學(xué)，地點(diǎn)為生工學(xué)院會(huì)議室。

三、復(fù)試次序

考生的個(gè)人復(fù)試次序按研究生處提供的名單次序進(jìn)行。考生在參加復(fù)試時(shí)，應(yīng)提供復(fù)試通知書(shū)、畢業(yè)證書(shū)（應(yīng)屆生帶學(xué)生證）、個(gè)人身份證和準(zhǔn)考證。

四、分次復(fù)試安排

4月13日以后調(diào)劑我碩士點(diǎn)的考生采用分階段復(fù)試方式，靈活復(fù)試時(shí)間，一考生到校時(shí)間為主。

五、復(fù)試小組

組長(zhǎng)：陳平

成員：劉志國(guó)陶興無(wú)趙靜國(guó)繆禮鴻鐘方旭劉軍閆達(dá)中張紅菱

記錄員：王繼剛

聯(lián)系電話：027－83956793聯(lián)系人：王老師

武漢工業(yè)學(xué)院生物與制藥工程學(xué)院

2009.04.10

第二篇：2013微生物與生化藥學(xué)復(fù)試

復(fù)試分為三部分：

分科面試、英語(yǔ)筆試、專業(yè)課筆試分科面試

考試內(nèi)容比較隨機(jī)，2012年考試內(nèi)容有：

①考看視頻回答問(wèn)題：視頻為配制培養(yǎng)基、使用滅菌鍋。要回答的問(wèn)題好像是操作注意事項(xiàng)，和不同菌種使用的培養(yǎng)基，比如培養(yǎng)放線菌使用的培養(yǎng)基等。

② 實(shí)驗(yàn)操作部分：顯微鏡的使用和斜面劃線接種，兩個(gè)任選一，抽簽方式。③專業(yè)英語(yǔ)筆試：20min，20個(gè)選擇題，有關(guān)生物方面的專業(yè)詞匯，還有個(gè)詞條提示。

④面試：英語(yǔ)口試（自我介紹），與老師交流，老師提問(wèn)問(wèn)題

注：聽(tīng)說(shuō)2013年的入學(xué)面試與2012年不同，沒(méi)有①和②，而是換成看圖片辨認(rèn)儀器；還有專外筆試換成翻譯文獻(xiàn)，是去年獲得諾貝爾獎(jiǎng)的文章，有關(guān)G蛋白歐聯(lián)受體，30min，翻譯幾段，涉及專業(yè)詞匯。面試部分，面試部分比較靈活，題型隨機(jī)，我覺(jué)得事先準(zhǔn)備個(gè)英文自我介紹比較好，不一定怎么考。英語(yǔ)筆試（為四六級(jí)考試形式，有聽(tīng)力，閱讀比較簡(jiǎn)單，我感覺(jué)聽(tīng)力的語(yǔ)速介于四六級(jí)之間，我們考試那年的考試形式與四六級(jí)不太一樣，不是邊聽(tīng)變涂卡，而是一下聽(tīng)完，然后再涂卡，可能每年都會(huì)有點(diǎn)不一樣，這個(gè)需要練習(xí)一下）專業(yè)課筆試：包含三科，即分離純化，生物技術(shù)制藥，發(fā)酵工藝學(xué)原理 ①分離純化，我復(fù)習(xí)的是課本，不是所有的章節(jié)都考到了，記得我們那年考題里有些什么大分子和小分子的分離純化方法的簡(jiǎn)答題，有些關(guān)于分離純化的名詞解釋

②發(fā)酵工藝學(xué)原理，看的是課件，不記得考過(guò)什么了

③生物技術(shù)制藥，看的是課本與課件，課件看的稍多些，這科的重點(diǎn)是基因工程部分，好像還有些關(guān)于抗體的東西。

可以在學(xué)校復(fù)印社買到以上三門課的復(fù)習(xí)資料，如課件，期末試題，或者有人總結(jié)的筆記資料等，也有些重復(fù)的題，但是好像每年考的都不一樣。另外可以看一些關(guān)于微生物的復(fù)習(xí)材料。

第三篇：天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研真題

天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研真題-考研資料-筆記講義-考研經(jīng)驗(yàn)談

天津考研網(wǎng)獨(dú)家推出天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研資料、真題解析班等輔導(dǎo)資料，幫助考生在考研復(fù)習(xí)中能夠理清做題思路，出題方向及復(fù)習(xí)重點(diǎn)。以下為相關(guān)資料的介紹。

天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研資料格式為A4紙打印版+手寫(xiě)版多種資料形式數(shù)百頁(yè)，清晰易復(fù)習(xí)，由多屆優(yōu)秀考生研究生團(tuán)隊(duì)執(zhí)筆，集合多方力量歷時(shí)3年積淀精制而成，填補(bǔ)了此專業(yè)原創(chuàng)資料空白的局面，天津考研網(wǎng)已于編寫(xiě)者簽訂資料保真轉(zhuǎn)讓協(xié)議，各位研友可放心使用參考！特別提示：本站盡力保證資料的有用性，但由于個(gè)人復(fù)習(xí)態(tài)度進(jìn)度不同，故請(qǐng)酌情參考本資料！

由于天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考的是藥學(xué)綜合，考試時(shí)為四選二科目（普通生物化學(xué)、基礎(chǔ)有機(jī)化學(xué)、基礎(chǔ)生物學(xué)、基礎(chǔ)分析化學(xué)四部分考題中任選兩部分參加以下資料），請(qǐng)根據(jù)自身報(bào)考情況選擇兩科

第一部分天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)核心原創(chuàng)資料（請(qǐng)按科目選擇4選2）：

天津大學(xué)藥學(xué)院微生物與生化藥學(xué)研究生入學(xué)考試初試四選二科目中，每?jī)煽苾H參考書(shū)目就有很多本，但是并不是都必須要看的，這些科目中可以說(shuō)知識(shí)點(diǎn)繁雜，且聯(lián)系也并不是很緊密，如何對(duì)其取舍？對(duì)于知識(shí)點(diǎn)應(yīng)掌握到何種程度？對(duì)于考試又應(yīng)怎樣從宏觀上去把握？初試復(fù)試又應(yīng)該怎樣去安排復(fù)習(xí)進(jìn)度，最需要關(guān)注哪些問(wèn)題？等等一系列問(wèn)題，相信本資料都會(huì)給出您滿意的答案！

天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研資料為您提供了以下信息，讓您的復(fù)習(xí)事半功倍：

1、縮小指定書(shū)目范圍，并推薦了一些難易程度與真題相近的復(fù)習(xí)資料，對(duì)于備考中的一系列細(xì)節(jié)問(wèn)題：包括復(fù)習(xí)時(shí)間安排、資料獲取等關(guān)鍵問(wèn)題進(jìn)行解答。

2、非常詳細(xì)全面地為大家講解每個(gè)章節(jié)的重點(diǎn)，明確指出知識(shí)點(diǎn)所應(yīng)掌握的程度：包括重點(diǎn)記憶、記憶、掌握、理解、了解。針對(duì)可能命題知識(shí)點(diǎn)以及命題形式給出總結(jié)與預(yù)測(cè)。

3、對(duì)于學(xué)院內(nèi)部的情況給予介紹，包括老師的最新研究方向、出題老師的相關(guān)任命情況等。這些信息對(duì)于考生全面了解院校，進(jìn)行相關(guān)選擇具有重要意義。

4、詳細(xì)解析天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研歷年真題，按照考試題型進(jìn)行介紹，對(duì)于考生全面?zhèn)淇甲龅叫闹杏袛?shù)，并對(duì)以后真題命題進(jìn)行預(yù)測(cè)。

5、講解答題技巧，因?yàn)樘齑笏帉W(xué)院藥學(xué)綜合300分，考試時(shí)間僅有3個(gè)小時(shí)，如何能在這三個(gè)小時(shí)中發(fā)揮出自己的最佳水平，如何能盡可能的拿到更多的分?jǐn)?shù)至關(guān)重要。

6、對(duì)復(fù)試進(jìn)行詳細(xì)分析，包括復(fù)試流程、復(fù)試內(nèi)容、復(fù)試如何準(zhǔn)備、復(fù)試的答題技巧。準(zhǔn)備復(fù)試就像是大海撈針，因?yàn)槠浞秶螅瑫r(shí)間緊，本資料為大家縮小復(fù)習(xí)范圍，增強(qiáng)考試信心提出方法，教會(huì)給您在面試中何去何從！

資料目錄：

一、天津大學(xué)藥學(xué)院簡(jiǎn)介：對(duì)天津大學(xué)藥學(xué)院建院歷史、學(xué)院基礎(chǔ)設(shè)施、師資隊(duì)伍、招生政策情況、就業(yè)前景、辦學(xué)方法與特色等方面給出客觀中肯的評(píng)價(jià)，有助于考生更加合理地選擇自己的目標(biāo)院校與方向。

二、藥學(xué)院導(dǎo)師情況簡(jiǎn)介：從藥物分析、藥物化學(xué)、藥劑學(xué)、藥理學(xué)、生藥學(xué)、微生物等分方向介紹導(dǎo)師目前的主要科研課題與成果。

三、獲取信息的相關(guān)途徑

四、天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研備考之有機(jī)化學(xué)

1、備考前準(zhǔn)備：資料的選擇途徑與獲取方法、考研大致時(shí)間安排、考研心理調(diào)試、租房注意、研友。

2、近年考研真題解析：重點(diǎn)對(duì)于從07年之后的真題進(jìn)行分析，總結(jié)其命題規(guī)律，把握出題方向，簡(jiǎn)要點(diǎn)明復(fù)習(xí)重點(diǎn)所在，讓考生對(duì)考試不再陌生，心理上占據(jù)優(yōu)勢(shì)。本章最后單獨(dú)對(duì)2011年、2012年真題進(jìn)行了解析說(shuō)明

3、復(fù)習(xí)精要：以歷年真題作為主要依托，介紹考試重點(diǎn)與常考易考題型，精析知識(shí)體系，合理安排復(fù)習(xí)進(jìn)度，每天進(jìn)步一點(diǎn)一點(diǎn)，最終收獲一片天！分章節(jié)進(jìn)行知識(shí)點(diǎn)匯總，中間穿插對(duì)于知識(shí)點(diǎn)的分析，預(yù)測(cè)考試出題重點(diǎn)與出題形式。

4、補(bǔ)充說(shuō)明：主要是針對(duì)在完成上述內(nèi)容中無(wú)法插入或是臨時(shí)想到的問(wèn)題，給予補(bǔ)充說(shuō)明。例如：計(jì)劃設(shè)置方法、考前心態(tài)調(diào)整、考場(chǎng)時(shí)間安排等等。講一些自身經(jīng)歷的小故事，希望能夠通過(guò)這些激發(fā)考生的斗志與毅力，同時(shí)更能貼近他們的心聲，感受到考研的精彩與意義！

五、天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研備考之分析化學(xué)：考研資料、歷年考研真題和筆記講義構(gòu)成如有機(jī)化學(xué)部分

六、天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研備考之生物學(xué)：考研參考書(shū)目介紹、知識(shí)點(diǎn)分析、考研真題分析和命題趨勢(shì)，專業(yè)課答題技巧

七、天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研備考之生物化學(xué)：考研參考書(shū)目介紹、知識(shí)點(diǎn)分析、考研真題分析和命題趨勢(shì)，專業(yè)課答題技巧

八、復(fù)試事項(xiàng)

（一）、講解復(fù)試流程與規(guī)則（從2011年起天津大學(xué)藥學(xué)院復(fù)試招生政策已發(fā)生重大變化）。

（二）、舉兩到三個(gè)實(shí)際例子，通過(guò)講故事的方法讓考生真實(shí)體驗(yàn)復(fù)試全過(guò)程。

第二部分天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研其他重要資料（請(qǐng)按科目選擇4選2）：

★基礎(chǔ)生物化學(xué)部分：

1、天津大學(xué)基礎(chǔ)生物化學(xué)03－05年考研試題；天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目349藥學(xué)綜合-基礎(chǔ)生物化學(xué)部分2007-2010年考研真題，原版真題，內(nèi)部渠道獲得（市場(chǎng)獨(dú)家最全，全國(guó)獨(dú)家推出，掌握最新試題動(dòng)向先人一步），眾所周知天大出題重復(fù)率高，一般多年的試題就是一個(gè)小題庫(kù)，所以歷年試題一定要仔細(xì)研究，通過(guò)多年試卷可總結(jié)出出題重點(diǎn)及思路；

2、天津大學(xué)349藥學(xué)綜合-基礎(chǔ)生物化學(xué)部分2007-2010年考研試題參考答案，解決學(xué)生答題后勘誤的困惑，試題保證100%正確率，市面上的答案基本都有錯(cuò)誤，本套答案為簽約團(tuán)隊(duì)獨(dú)家主創(chuàng)，請(qǐng)同學(xué)認(rèn)真分辨市面一些低價(jià)劣質(zhì)的資料，以免耽誤考研；

3、基礎(chǔ)生物化學(xué)本科課件，天津大學(xué)藥學(xué)院本科授課課件、筆記講義，ppt格式，只收集到部分重點(diǎn)章節(jié)，圖文并茂；

4、指定參考書(shū)籍Stryer《Biochemistry》5th.Edition；黃熙泰、于自然主編《現(xiàn)代生物化學(xué)》第二版；

5、天津大學(xué)藥學(xué)綜合2008-2013年考研大綱，打印版，通過(guò)歷年大綱對(duì)比可以更深入了解歷年考試考點(diǎn)及參考書(shū)目變化情況從而預(yù)測(cè)趨勢(shì)，獨(dú)家提供

★有機(jī)化學(xué)部分：

1、天津大學(xué)①基礎(chǔ)化學(xué)（含基礎(chǔ)有機(jī)化學(xué)與分析化學(xué))02—05年考研試題，其中02及05年有詳細(xì)參考答案，同時(shí)按題型精確分析了02-05年考研試題（有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)）之間的關(guān)系、出題思路、出題重點(diǎn)及部分試題介紹，手寫(xiě)版，此為兩個(gè)版本，對(duì)比使用效果更好；②天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目349藥學(xué)綜合-有機(jī)化學(xué)部分2007-2010年原版考研真題，內(nèi)部渠道獲得；③349藥學(xué)綜合-有機(jī)化學(xué)部分2011、2012年考研試題回憶版，眾所周知天大出題重復(fù)率高，一般多年的試題就是一個(gè)小題庫(kù)，所以歷年試題一定要仔細(xì)研究，通過(guò)多年試卷可總結(jié)出出題重點(diǎn)及思路；

2、天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目349藥學(xué)綜合-有機(jī)化學(xué)部分2007-2009年考研試題參考答案，解決學(xué)生答題后勘誤的困惑，試題保證100%正確率，市面上的答案基本都有錯(cuò)誤，本套答案為天津考研網(wǎng)簽約團(tuán)隊(duì)獨(dú)家主創(chuàng)，請(qǐng)同學(xué)認(rèn)真分辨市面一些低價(jià)劣質(zhì)的考研資料，以免耽誤考研；

3、有機(jī)化學(xué)本科課件，天津大學(xué)藥學(xué)院本科授課課件，ppt格式，只收集到部分考研重點(diǎn)章節(jié)，圖文并茂；

4、有機(jī)化學(xué)04年校內(nèi)輔導(dǎo)班筆記講義，04年最后一次校內(nèi)主辦輔導(dǎo)班，絕版筆記，藥學(xué)院老師主講，所用考生當(dāng)年成績(jī)相當(dāng)優(yōu)異，手寫(xiě)版100余頁(yè)，字跡工整，重點(diǎn)突出；

5、有機(jī)化學(xué)輔導(dǎo)班高分考生總結(jié)筆記，由參加04年最后一屆校內(nèi)輔導(dǎo)班的考生總結(jié)而成，手寫(xiě)版，按考題題型總結(jié)，具有重要參考價(jià)值，此資料同04輔導(dǎo)班筆記對(duì)比搭配使用，同時(shí)贈(zèng)送按章節(jié)、反應(yīng)的有機(jī)化學(xué)總結(jié)一份；

6、指定參考書(shū)籍邢其毅等著《基礎(chǔ)有機(jī)化學(xué)》（第二版）教程及配套習(xí)題答案、邢其毅等《基礎(chǔ)有機(jī)化學(xué)習(xí)題解答與解題示例》（電子版）；

7、天津大學(xué)藥學(xué)綜合2008-2013年考研大綱，打印版，通過(guò)歷年大綱對(duì)比可以更深入了解歷年考試考點(diǎn)及參考書(shū)目變化情況從而預(yù)測(cè)趨勢(shì)，獨(dú)家提供

★分析化學(xué)部分：

1、天津大學(xué)①基礎(chǔ)化學(xué)（含基礎(chǔ)有機(jī)化學(xué)與分析化學(xué))02—05年考研試題，其中02及05年有詳細(xì)參考答案，同時(shí)按題型精確分析了02-05年考研試題（有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)）之間的關(guān)系、出題思路、出題重點(diǎn)及部分試題介紹，手寫(xiě)版，此為兩個(gè)版本，對(duì)比使用效果更好；②天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目349藥學(xué)綜合-分析化學(xué)部分2007-2009年原版考研真題，內(nèi)部渠道獲得；③天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目349藥學(xué)綜合-分析化學(xué)部分2011、2012年考研試題回憶版，眾所周知天大出題重復(fù)率高，一般多年的試題就是一個(gè)小題庫(kù)，所以歷年試題一定要仔細(xì)研究，通過(guò)多年試卷可總結(jié)出出題重點(diǎn)及思路；

2、天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目349藥學(xué)綜合-分析化學(xué)部分2007-2009年考研試題參考答案，解決學(xué)生答題后勘誤的困惑，試題保證100%正確率，市面上的答案基本都有錯(cuò)誤，本套答案為簽約團(tuán)隊(duì)獨(dú)家主創(chuàng)，請(qǐng)同學(xué)認(rèn)真分辨市面一些低價(jià)劣質(zhì)的考研資料，以免耽誤考研；

3、分析化學(xué)本科課件，天津大學(xué)藥學(xué)院本科授課課件，圖文并茂，內(nèi)容詳盡，重點(diǎn)突出，ppt格式e-mail發(fā)送，參考書(shū)目為：《藥物分析》劉文英主編，人民衛(wèi)生出版社；《分析化學(xué)》李發(fā)美主編，人民衛(wèi)生出版社；《藥物分析》盛龍生等編寫(xiě)，化學(xué)工業(yè)出版社；Pharmaceutical Analysis:A Textbook for pharmacy students and pharmaceutical Chemists, David G.Watson，Edinburgh；

4、分析化學(xué)高分考生總結(jié)筆記，由天大高分考生精心整理而成，手寫(xiě)版40余頁(yè)，全面涵蓋分析化學(xué)核心知識(shí)點(diǎn)，極具參考價(jià)值；

5、分析化學(xué)本科生課堂重點(diǎn)思考題及解答，天津大學(xué)藥學(xué)院本科生老師授課課堂討論題及參考答案，打印版10余頁(yè)，附有重點(diǎn)勾畫(huà)；

6、天津大學(xué)藥學(xué)綜合2008-2013年考研大綱，打印版，通過(guò)歷年大綱對(duì)比可以更深入了解歷年考試考點(diǎn)及參考書(shū)目變化情況從而預(yù)測(cè)趨勢(shì)，獨(dú)家提供

★基礎(chǔ)生物學(xué)部分：

1、天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目①349藥學(xué)綜合-基礎(chǔ)生物學(xué)部分07-09年原版考研真題，內(nèi)部渠道獲得；②天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目349藥學(xué)綜合-基礎(chǔ)生物學(xué)部分2010、2013年考研真題（回憶版），眾所周知天大出題重復(fù)率高，一般多年的試題就是一個(gè)小題庫(kù)，所以歷年試題一定要仔細(xì)研究，通過(guò)多年試卷可總結(jié)出出題重點(diǎn)及思路；

2、天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目349藥學(xué)綜合-基礎(chǔ)生物學(xué)部分2007-2009年考研試題參考答案，解決學(xué)生答題后勘誤的困惑，試題保證100%正確率，市面上的答案基本都有錯(cuò)誤，本套答案為天津考研網(wǎng)簽約團(tuán)隊(duì)獨(dú)家主創(chuàng)，請(qǐng)同學(xué)認(rèn)真分辨市面一些低價(jià)劣質(zhì)的考研資料，以免耽誤考研；

3、天津大學(xué)藥學(xué)綜合2008-2013年考研大綱，打印版，通過(guò)歷年大綱對(duì)比可以更深入了解歷年考試考點(diǎn)及參考書(shū)目變化情況從而預(yù)測(cè)趨勢(shì)，獨(dú)家提供；

第六部分 考研紅寶卷

天津考研網(wǎng)獨(dú)家品牌《考研紅寶卷》，包含天津大學(xué)天津大學(xué)微生物與生化藥學(xué)考研科目349藥學(xué)綜合的全真模擬預(yù)測(cè)卷3套并含參考答案及解析過(guò)程，與歷年考研真題出題趨勢(shì)、思路、側(cè)重點(diǎn)一脈相承，在天津考研學(xué)子圈中享有極高聲譽(yù)，非常適合在沖刺階段作為全真模擬使用，可以起到摸底測(cè)試、查漏補(bǔ)缺的作用，同時(shí)具有極高的押題性質(zhì)。

第四篇：藥學(xué)微生物學(xué)期末歸納總結(jié)

二、名詞解釋（20分）

1.異染顆粒_____________胞質(zhì)顆粒中含有一種主要成分為RNA和多偏磷酸鹽的顆粒，其嗜堿性強(qiáng)，經(jīng)亞甲藍(lán)染色后著色較深，叫異染顆粒，常見(jiàn)于白喉棒狀桿菌。

2.菌落__________由單個(gè)細(xì)胞在適宜固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)繁殖，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后，在培養(yǎng)基表面形成肉眼可見(jiàn)的微生物群落，稱為菌落。3.條件致病菌____________有些細(xì)菌在人體皮膚與外界相通的腔道內(nèi)寄生、增殖，當(dāng)條件改變或因宿主免疫功能下降時(shí)引起致病。這類細(xì)菌稱為條件致病菌。

4.肥達(dá)試驗(yàn)___________將已知的傷寒沙門菌的O、H抗原和甲乙丙副傷寒沙門菌的H抗原與不同稀釋度的病人血清做凝集試驗(yàn)。通過(guò)檢測(cè)抗體滴度的高低和初期、恢復(fù)期抗體的增長(zhǎng)程度來(lái)診斷傷寒和副傷寒。

5.洶涌發(fā)酵____________產(chǎn)氣莢膜梭菌在牛乳培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，使酪蛋白凝固，同時(shí)產(chǎn)生大量的氣體，將凝固的酪蛋白沖成蜂窩狀，并將封閉的凡士林沖至試管口等現(xiàn)象。

6.卡介苗___________將有毒力的牛型結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)在含膽汁、甘油、馬鈴薯的培養(yǎng)基中，經(jīng)過(guò)上百次的接種，歷經(jīng)13年的傳代培養(yǎng)而獲得的減毒活疫苗。可使人獲得對(duì)結(jié)核病的免疫力。

7.菌群失調(diào)____________正常菌群之間的數(shù)量和組成發(fā)生明顯的改變稱為菌群失調(diào)。多見(jiàn)于長(zhǎng)期使用抗生素。

8.SPA________即葡萄球菌A蛋白。是葡萄球菌細(xì)胞壁的一種表面蛋白。能與人及某些哺乳動(dòng)物的lgG分子的Fc受體發(fā)生非特異性結(jié)合，與吞噬細(xì)胞表面的Fc受體爭(zhēng)奪Fc段，降低了抗體的調(diào)理吞噬作用。起到了協(xié)助細(xì)菌抗吞噬的作用。

9.SSPE________即亞急性硬化性全腦炎。是一種以白質(zhì)和灰質(zhì)損害為主的全腦炎。由缺損型麻疹病毒慢性持續(xù)感染引起的一種罕見(jiàn)的致命性的中樞神經(jīng)系統(tǒng)衰退性疾病。

10.轉(zhuǎn)導(dǎo)______是以溫和噬菌體為載體，將供體菌的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，使受體菌獲得新的遺傳形狀。這樣的方式成為轉(zhuǎn)導(dǎo)。11.HBsAg__________即乙肝表面抗原。存在于Dane顆粒表面、小球型顆粒和管型顆粒中，可大量存在于感染血清中。是HBV感染的重要標(biāo)志。

12.內(nèi)基小體________是狂犬病病毒在易感動(dòng)物或人的中樞神經(jīng)細(xì)胞中增殖時(shí)，可在胞質(zhì)內(nèi)形成圓形或卵圓形的嗜酸性顆粒，稱為包涵體，或內(nèi)基小體。具有診斷價(jià)值。

13.細(xì)菌的L型_______細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖結(jié)構(gòu)在某些理化或生物作用下被破壞或抑制，但在高滲的環(huán)境中仍可存活。稱為細(xì)菌的L型。14.質(zhì)粒__________是細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)為閉合環(huán)狀雙鏈DNA，可攜帶遺傳信息，控制細(xì)菌某些特定的遺傳性狀，并具有獨(dú)立自我復(fù)制能力。

15.半數(shù)致死量________在一定條件下引起50%實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡或感染的最小微生物或毒素的量。

16.基因整合___________在病毒感染宿主細(xì)胞的過(guò)程中，病毒基因組的DNA片段可插入到宿主細(xì)胞的染色體DNA中，這種將病毒基因組與細(xì)胞基因組重組的過(guò)程，稱為基因整合。

三、簡(jiǎn)答題（50分）

1、外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別？ 答：外毒素-大部分來(lái)源于革蘭陽(yáng)性菌，少部分來(lái)源于革蘭陰性菌；大多數(shù)由活菌分泌釋放；其本質(zhì)是蛋白質(zhì)，不耐熱受熱易分解；抗原性強(qiáng)，經(jīng)甲醛處理可獲得脫毒的類毒素；毒性強(qiáng)，對(duì)組織細(xì)胞有選擇性毒性效應(yīng)，引起特殊的臨床表現(xiàn)。

內(nèi)毒素-主要來(lái)源于革蘭陰性菌；大多數(shù)由細(xì)菌裂解后釋放；其本質(zhì)是脂多糖，耐熱受熱不易分解；抗原性弱，經(jīng)甲醛處理不能獲得類毒素；毒性較弱毒性效應(yīng)大致相同，引起發(fā)熱、白細(xì)胞增多、休克等臨床表現(xiàn)。

2、細(xì)菌有哪些特殊結(jié)構(gòu)及其特點(diǎn)？

答：莢膜-不宜染色，具有抗吞噬、粘附、抗有害物質(zhì)損傷等作用。與細(xì)菌致病性有關(guān)。

鞭毛-菌體上附著的細(xì)長(zhǎng)絲狀物，是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，具有特異的抗原性。與細(xì)菌致病性有關(guān)。

菌毛-分為普通菌毛和性菌毛，前者與致病性有關(guān)，后者與遺傳物質(zhì)的傳遞有關(guān)。芽孢-由革蘭陽(yáng)性菌形成，是細(xì)菌的休眠體，有助于鑒別細(xì)菌，抵抗力強(qiáng)。

3、細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生機(jī)制？ 答：1.細(xì)菌產(chǎn)生滅活酶，即鈍化酶的產(chǎn)生

2.作用靶位的改變

3.細(xì)菌細(xì)胞膜通透性改變

4.細(xì)菌主動(dòng)藥物外排機(jī)制

5.細(xì)菌生物被膜的形成。

4、狂犬病的預(yù)防和補(bǔ)救措施？

答：預(yù)防-捕殺野犬，加強(qiáng)家犬管理并注射犬類狂犬疫苗。

補(bǔ)救-1.清洗傷口，用20%肥皂水、0.1%消毒劑或清水清洗傷口，并用酒精消毒。

2.被動(dòng)免疫，在傷口周圍注射高效價(jià)的狂犬病病毒抗血清。

3.主動(dòng)免疫，早期接種疫苗可預(yù)防狂犬病的發(fā)病。

5、破傷風(fēng)梭菌致病的治病條件及產(chǎn)生機(jī)制？

答：在局部傷口形成厭氧微環(huán)境，如傷口窄而深，有泥土或異物感染，大面積創(chuàng)傷，壞死組織多，局部組織出血等，同時(shí)有需氧菌或兼性厭氧菌混合形成厭氧微環(huán)境，有利于破傷風(fēng)梭菌的形成。

機(jī)制：破傷風(fēng)梭菌沒(méi)有侵襲力，只在局部繁殖，產(chǎn)生痙攣毒素。該毒素經(jīng)末梢神經(jīng)、血液及淋巴液進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，并通過(guò)重鏈與腦組織細(xì)胞表面受體結(jié)合，通過(guò)輕鏈進(jìn)入細(xì)胞發(fā)揮毒素作用。從而破壞了正常的抑制調(diào)節(jié)作用，導(dǎo)致中樞超常反射，出現(xiàn)破傷風(fēng)特有的角弓反張、牙關(guān)緊閉等癥狀。

6、生物學(xué)標(biāo)本采集的原則？

答：早期采集-采集盡量在病程早期及使用抗菌藥物之前。

無(wú)菌采集-采集過(guò)程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，避免標(biāo)本污染。

一對(duì)一采集-不同細(xì)菌用不同方法采集，如厭氧菌、L型細(xì)菌。

針對(duì)性采集-采集有代表性的標(biāo)本，相同疾病在不同時(shí)期標(biāo)本不同。

采集標(biāo)記-采集后做好標(biāo)記，保證各環(huán)節(jié)準(zhǔn)確無(wú)誤。

采集新鮮-標(biāo)本必須新鮮，采集后盡快送檢。

7、正常菌群的生理作用？

答：生物拮抗作用-阻止病原菌侵入機(jī)體。

營(yíng)養(yǎng)作用-正常菌群參與宿主的物質(zhì)代謝、營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)化。免疫作用-正常菌群作為抗原刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答。抗衰老作用-保護(hù)組織細(xì)胞免受損傷。抗腫瘤作用-抑制腫瘤的細(xì)胞的無(wú)限增殖。

8、醫(yī)院內(nèi)感染的預(yù)防和控制？

答：合理使用抗生素、避免侵襲性操作、保護(hù)易感人群、縮短住院時(shí)間、嚴(yán)格執(zhí)行病毒隔離措施、重視檢測(cè)工作、污物處理。

9、全身感染的常見(jiàn)類型？

答：菌血癥-如細(xì)菌進(jìn)入細(xì)胞短暫停留，不產(chǎn)生毒素，傷寒桿菌引起的感染；

敗血癥-如細(xì)菌在表面繁殖產(chǎn)生毒素，腦膜炎球菌引起的全身性中毒；

毒血癥-如細(xì)菌在表面繁殖，毒素進(jìn)入血液，白喉棒狀桿菌產(chǎn)生外毒素引起的病變； 膿毒血癥-如細(xì)菌侵入細(xì)胞，釋放毒素。金葡菌引起的肝膿腫。內(nèi)毒素血癥-內(nèi)毒素進(jìn)入血液引起的疾病，小兒痢疾。

10、細(xì)菌外毒素有哪些毒性作用？

答：細(xì)胞毒素作用-如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生的白喉毒素，可抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成，導(dǎo)致靶細(xì)胞壞死，心肌損傷，腎上腺出血。

神經(jīng)毒素作用-如破傷風(fēng)桿菌產(chǎn)生的痙攣毒素，阻斷神經(jīng)元之間遞質(zhì)的傳遞，引起骨骼肌強(qiáng)直性痙攣。

腸毒素作用-如金葡菌產(chǎn)生的腸毒素，引起以嘔吐為主的食物中毒。

11、細(xì)菌合成代謝產(chǎn)物的種類及意義？ 答：與致病性有關(guān)的產(chǎn)物：侵襲性酶、熱原質(zhì)、毒素；

與檢驗(yàn)細(xì)菌（鑒定與分型）的產(chǎn)物：細(xì)菌素、色素； 用于臨床治療的產(chǎn)物：抗生素、維生素。

12、簡(jiǎn)述病毒的基本特征？

答：體積微小，以nm計(jì)算，能通過(guò)慮菌器，需用電鏡觀察；

非細(xì)胞結(jié)構(gòu)，其主要有核心和蛋白衣殼組成； 只含一種核酸，DNA或RNA； 嚴(yán)格的易感活細(xì)胞內(nèi)寄生； 耐冷不耐熱，對(duì)抗生素不敏感。

13、大腸桿菌的主要類型及致病特點(diǎn)？

答：ETEC-腸產(chǎn)毒，引起嬰兒和旅游者嚴(yán)重腹瀉的主要病原菌。

EIEC-侵襲型，引起兒童成人腹痛、發(fā)熱、膿血便的主要病原菌。

EPEC-致病型，引起嬰幼兒腹瀉的主要病原菌。

EHEC-出血型，引起腹瀉和血樣便，污染食品是其主要傳染源。

EAEC-集聚型，引起嬰幼兒持續(xù)性腹瀉、脫水的主要病原菌。

14、乙肝抗原抗體的檢測(cè)有何醫(yī)學(xué)意義？

答：有助于診斷；有助于判斷疾病的預(yù)后；篩選病原；流行病學(xué)調(diào)查；檢測(cè)注射疫苗的效果。

15、細(xì)菌感染的傳播方式？

答：呼吸道傳播；消化道傳播；血液傳播；蟲(chóng)媒傳播；性傳播；皮膚傳播；接觸傳播。

16、簡(jiǎn)述致病菌的三大致病條件？

答：菌群失調(diào)；宿主免疫功能下降；正常菌群的寄居部位發(fā)生改變。

第五篇：微生物鑒定的生理生化反應(yīng)匯總

微生物鑒定的生理生化反應(yīng)

各種細(xì)菌具有各自獨(dú)特的酶系統(tǒng)，因而對(duì)底物的分解能力不同，其代謝產(chǎn)物也不同。用生物化學(xué)方法測(cè)定這些代謝產(chǎn)物，可用來(lái)區(qū)別和鑒定細(xì)菌的種類。利用生物化學(xué)方法來(lái)鑒別不同細(xì)菌，稱為細(xì)菌的生物化學(xué)試驗(yàn)或稱生化反應(yīng)。生物化學(xué)試驗(yàn)的方法很多，主要有以下幾類。

一、碳水化合物的代謝試驗(yàn) 1．糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗(yàn)

（1）原理：不同種類細(xì)菌含有發(fā)酵不同糖（醇、苷）類的酶，因而對(duì)各種糖（醇、苷）類的代謝能力也有所不同，即使能分解某種糖（醇、苷）類，其代謝產(chǎn)物可因菌種而異。檢查細(xì)菌對(duì)培養(yǎng)基中所含糖（醇、苷）降解后產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣的能力，可用以鑒定細(xì)菌種類。

(2)方法：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中（如酚紅肉湯基礎(chǔ)培養(yǎng)基pH7.4）加入0.5~1.0％（w/v）的特定糖（醇、苷）類。所使用的糖（醇、苷）類有很多種，根據(jù)不同需要可選擇單糖、多糖或低聚糖、多元醇和環(huán)醇等，見(jiàn)表6-4-1。將待鑒定的純培養(yǎng)細(xì)菌接種入試驗(yàn)培養(yǎng)基中，置35℃孵育箱內(nèi)孵育數(shù)小時(shí)到兩周（視方法及菌種而定）后，觀察結(jié)果。若用微量發(fā)酵管，或要求培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，應(yīng)注意保持其周圍的濕度，以免培養(yǎng)基干燥。

(3)結(jié)果：能分解糖（醇、苷）產(chǎn)酸的細(xì)菌，培養(yǎng)基中的指示劑呈酸性反應(yīng)（如酚紅變?yōu)辄S色），產(chǎn)氣的細(xì)菌可在小倒管（Durham小管）中產(chǎn)生氣泡，固體培養(yǎng)基則產(chǎn)生裂隙。不分解糖則無(wú)變化。

(4)應(yīng)用：糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗(yàn)，是鑒定細(xì)菌的生化反應(yīng)試驗(yàn)中最主要的試驗(yàn)，不同細(xì)菌可發(fā)酵 不同的糖（醇、苷）類，如沙門菌可發(fā)酵葡萄糖，但不能發(fā)酵乳糖，大腸埃希菌則可發(fā)酵葡萄糖和乳糖。即便是兩種細(xì)菌均可發(fā)酵同一種糖類，其發(fā)酵結(jié)果也不盡相同，如志賀菌和大腸埃希菌均可發(fā)酵葡萄糖，但前者僅產(chǎn)酸，而后者則產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，故可利用此試驗(yàn)鑒別細(xì)菌。

表6-4-1 常用于細(xì)菌糖發(fā)酵試驗(yàn)的糖、醇類

單糖 四碳糖：赤蘚糖 , 五碳糖：核糖 核酮糖 木糖

阿拉伯糖, 六碳糖：葡萄糖 果糖 半乳糖 甘露糖

雙糖 蔗糖（葡萄糖＋果糖）乳糖（葡萄糖＋半乳糖）麥芽糖（兩分子葡萄糖）三糖 棉子糖（葡萄糖＋果糖＋半乳糖）多糖 菊糖（多分子果糖）淀粉

醇類 側(cè)金盞花醇 衛(wèi)茅醇 甘露醇 山梨醇 非糖類 肌醇

2．葡萄糖代謝類型鑒別試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌在分解葡萄糖的過(guò)程中，必須有分子氧參加的，稱為氧化型；能進(jìn)行無(wú)氧降解的為發(fā)酵型；不分解葡萄糖的細(xì)菌為產(chǎn)堿型。發(fā)酵型細(xì)菌無(wú)論在有氧或無(wú)氧環(huán)境中都能分解葡萄糖，而氧化型細(xì)菌在無(wú)氧環(huán)境中則不能分解葡萄糖。本試驗(yàn)又稱氧化發(fā)酵（O/F或Hugh－Leifson，HL）試驗(yàn)，可用于區(qū)別細(xì)菌的代謝類型。

(2)方法：挑取少許純培養(yǎng)物（不要從選擇性平板中挑取）接種2支HL培養(yǎng)管中，在其中一管加入高度至少為0.5cm的無(wú)菌液體石蠟以隔絕空氣（作為密封管），另一管不加（作為開(kāi)放管）。置35℃孵箱孵育48h以上。

(3)結(jié)果： 兩管培養(yǎng)基均不產(chǎn)酸（顏色不變）為陰性；兩管都產(chǎn)酸（變黃）為發(fā)酵型；加液體石蠟管不產(chǎn)酸，不加液體石蠟管產(chǎn)酸為氧化型。(4)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科與其它非發(fā)酵菌的鑒別。腸桿菌科、弧菌科細(xì)菌為發(fā)酵型，非發(fā)酵菌為氧化型或產(chǎn)堿型。也可用于鑒別葡萄球菌（發(fā)酵型）與微球菌（氧化型）。3．甲基紅（MR）試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌在糖代謝過(guò)程中，分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步被分解為甲酸、乙酸和琥珀酸等，使培養(yǎng)基pH下降至4.5以下時(shí)，加入甲基紅指示劑呈紅色。如細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為其它物質(zhì)（如醇、醛、酮、氣體和水），培養(yǎng)基pH在 5.4以上，加入甲基紅指示劑呈桔黃色。

(2)方法：將待試菌接種于葡萄糖磷酸鹽蛋白胨水中，35℃孵育48h~96h后，于5ml培養(yǎng)基中滴加5~6滴甲基紅指示劑，立即觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果判定：呈現(xiàn)紅色者為陽(yáng)性，桔黃色為陰性，桔紅色為弱陽(yáng)性。

(4)應(yīng)用：常用于腸桿菌科內(nèi)某些種屬的鑒別，如大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌，前者為陽(yáng)性，后者為陰性。腸桿菌屬和哈夫尼亞菌屬為陰性，而沙門菌屬、志賀菌屬、枸櫞酸桿菌屬和變形桿菌屬等為陽(yáng)性。

4．β－半乳糖苷酶試驗(yàn)（ONPG試驗(yàn)）

(1)原理：乳糖發(fā)酵過(guò)程中需要乳糖通透酶和β－半乳糖苷酶才能快速分解。有些細(xì)菌只有半乳糖苷酶，因而只能遲緩發(fā)酵乳糖，所有乳糖快速發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的細(xì)菌均可快速水解鄰硝基酚-β-D-半乳糖苷（O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG）而生成黃色的鄰硝基酚。用于枸櫞酸菌屬、亞利桑那菌屬與沙門菌屬的鑒別。

(2)方法：將待試菌接種于ONPG肉湯中，35℃水浴或孵箱孵育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：呈現(xiàn)亮黃色為陽(yáng)性，無(wú)色為陰性。

(4)應(yīng)用：可用于遲緩發(fā)酵乳糖細(xì)菌的快速鑒定，本法對(duì)于迅速及遲緩分解乳糖的細(xì)菌均可短時(shí)間內(nèi)呈現(xiàn)陽(yáng)性。埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬、哈夫尼亞菌屬、沙雷菌屬和腸桿菌屬等均為試驗(yàn)陽(yáng)性，而沙門菌屬、變形桿菌屬和普羅威登斯菌屬等為陰性。

5．VP試驗(yàn)

(1)原理：測(cè)定細(xì)菌產(chǎn)生乙酰甲基甲醇的能力。某些細(xì)菌如產(chǎn)氣腸桿菌，分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步脫羧形成乙酰甲基甲醇。在堿性條件下，乙酰甲基甲醇被氧化成二乙酰，進(jìn)而與培養(yǎng)基中的精氨酸等含胍基的物質(zhì)結(jié)合形成紅色化合物。即V-P試驗(yàn)陽(yáng)性。(2)方法：將待檢菌接種于葡萄糖磷酸鹽蛋白胨水中，35℃孵育24~48h，加入50g/Lα－萘酚（95％乙醇溶液）0.6ml，輕輕振搖試管，然后加0.2ml 400g/L KOH，輕輕振搖試管30s至1min，然后靜置觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：紅色者為陽(yáng)性，黃色或類似銅色為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌的鑒別。本試驗(yàn)常與MR試驗(yàn)一起使用，一般情況下，前者為陽(yáng)性的細(xì)菌，后者常為陰性，反之亦然。但腸桿菌科細(xì)菌不一定都這樣規(guī)律，如蜂房哈夫尼亞菌和奇異變形桿菌的VP試驗(yàn)和MR試驗(yàn)常同為陽(yáng)性。6．膽汁七葉苷水解試驗(yàn)

（1）原理：在10%~40％膽汁存在下，測(cè)定細(xì)菌水解七葉苷的能力。七葉苷被細(xì)菌分解生成的七葉素，七葉素與培養(yǎng)基中的枸櫞酸鐵的二價(jià)鐵離子發(fā)生反應(yīng)形成黑色化合物。

(2)方法：將被檢菌接種于膽汁七葉苷培養(yǎng)基中，35℃孵育18~24h后，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：培養(yǎng)基完全變黑為陽(yáng)性，不變黑為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于鑒別D群鏈球菌與其它鏈球菌的區(qū)別，以及腸桿菌科的某些種、某些厭氧菌（如脆弱擬桿菌等）的初步鑒別。D群鏈球菌本試驗(yàn)為陽(yáng)性。7．淀粉水解試驗(yàn)

(1)原理：產(chǎn)生淀粉酶的細(xì)菌能將淀粉水解為糖類，在培養(yǎng)基上滴加碘液時(shí)，可在菌落周圍出現(xiàn)透明區(qū)。

(2)方法：將被檢菌劃線接種于淀粉瓊脂平板或試管中，35℃孵育18~24h，加入革蘭碘液數(shù)滴，立即觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：陽(yáng)性反應(yīng)，菌落周圍有無(wú)色透明區(qū)，其它地方藍(lán)色；陰性反應(yīng)，培養(yǎng)基全部為藍(lán)色。

(4)應(yīng)用：用于白喉棒狀桿菌生物型的分型，重型淀粉水解試驗(yàn)陽(yáng)性，輕、中型陰性；芽胞桿菌屬菌種和厭氧菌某些種的鑒定。8．甘油復(fù)紅試驗(yàn)

(1)原理：甘油可被細(xì)菌分解生成丙酮酸，丙酮酸脫去羧基為乙醛，乙醛與無(wú)色的復(fù)紅生成醌式化合物，呈深紫紅色。

(2)方法：取被檢菌接種于甘油復(fù)紅肉湯培養(yǎng)基中，于35℃孵育，觀察2~8d。應(yīng)同時(shí)做陰性對(duì)照。

(3)結(jié)果：紫紅色為陽(yáng)性，與對(duì)照管顏色相同為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于沙門菌屬內(nèi)各菌種間的鑒別。傷寒沙門菌、甲（丙）型副傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、孔道夫沙門菌和仙臺(tái)沙門菌本試驗(yàn)為陰性，乙型副傷寒沙門菌結(jié)果不定，其它不常見(jiàn)沙門菌多數(shù)為陽(yáng)性。9．葡萄糖酸氧化試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌可氧化葡萄糖酸鉀，生成α-酮基葡萄糖酸。α-酮基葡萄糖酸是一種還原性物質(zhì)，可與班氏試劑起反應(yīng)，出現(xiàn)棕色或磚紅色的氧化亞銅沉淀。

(2)方法：將待檢菌接種于葡萄糖酸鹽培養(yǎng)基中(1ml)，置35℃孵育48h,加入班氏試劑1ml，于水浴中煮沸10min并迅速冷卻，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：出現(xiàn)黃到磚紅色沉淀為陽(yáng)性。不變或仍為藍(lán)色為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于假單胞菌的鑒定和腸桿菌科菌分群。

二、氨基酸和蛋白質(zhì)的代謝試驗(yàn) 1．硫化氫試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌能分解含硫氨基酸生成硫化氫，與亞鐵離子或鉛離子結(jié)合形成黑色沉淀物。

(2)方法：將待檢菌接種于含硫化物及亞鐵離子的培養(yǎng)基或克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）中，35℃孵育18~24h，觀察有無(wú)黑色沉淀出現(xiàn)。或用醋酸鉛紙條，懸掛于KIA管中（白色濾紙，根據(jù)試管大小裁剪適當(dāng)，在熱的50g/L醋酸鉛飽和水溶液中浸泡，然后于50~60℃烘干，121℃15min高壓滅菌備用）。醋酸鉛是最敏感的方法。(3)結(jié)果：有黑色沉淀物為陽(yáng)性。

(4)應(yīng)用：主要用于鑒別腸桿菌科細(xì)菌，如沙門菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬、愛(ài)德華菌屬等為陽(yáng)性，其它菌屬大多為陰性。但沙門菌屬中亦有部分硫化氫陰性菌株，如甲型副傷寒、仙臺(tái)、豬霍亂沙門菌等。2．明膠液化試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌分泌的胞外蛋白水解酶（明膠酶）能分解明膠，使明膠失去凝固能力而液化。(2)方法：將待檢菌接種于明膠培養(yǎng)基中，35℃孵育24h到7d或更長(zhǎng)時(shí)間，每24h取出放入4℃冰箱約2h后，觀察有無(wú)凝固。

(3)結(jié)果：如無(wú)凝固，則表示明膠已被水解，液化試驗(yàn)陽(yáng)性。如凝固，則繼續(xù)培養(yǎng)。

(3)應(yīng)用：奇異變形桿菌、普通變形桿菌、沙雷菌屬和陰溝腸桿菌等到能液化明膠，腸桿菌科中的其它細(xì)菌很少液化明膠。有些厭氧菌如產(chǎn)氣莢膜梭菌、脆弱類桿菌等也能液化明膠。另外，許多假單胞菌也能產(chǎn)生明膠酶而使明膠液化。3．吲哚試驗(yàn)（靛基質(zhì)試驗(yàn)）(1)原理：某些細(xì)菌有色氨酸酶，能分解色氨酸產(chǎn)生吲哚，吲哚與對(duì)二甲氨基苯甲醛形成紅色的玫瑰吲哚。

(2)方法：將待檢菌接種于富含色氨酸的蛋白胨水培養(yǎng)基中，35℃孵育24~48h，加入靛基質(zhì)試劑，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：紅色為陽(yáng)性，無(wú)色為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科細(xì)菌的鑒定，如大腸埃希菌與產(chǎn)氣腸桿菌，肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌等的鑒別。4．苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)

(1)原理：測(cè)定細(xì)菌是否產(chǎn)生苯丙氨酸脫氨酶。細(xì)菌產(chǎn)生的苯丙氨酸脫氨酶使苯丙氨酸脫氨后生成苯丙酮酸，加入三氯化鐵試劑后產(chǎn)生綠色反應(yīng)。若延長(zhǎng)時(shí)間，會(huì)引起退色。

(2)方法：將待檢菌大量接種入苯丙氨酸培養(yǎng)基中，35℃孵育18~24h，滴加100g/L三氯化鐵試劑4~5滴，立即觀察菌落生長(zhǎng)處有無(wú)綠色出現(xiàn)。(3)結(jié)果：有綠色出現(xiàn)為陽(yáng)性。

(4)應(yīng)用：變形桿菌屬、普羅威登菌屬、摩根菌屬均為陽(yáng)性，腸桿菌科其它細(xì)菌均為陰性。5．氨基酸脫羧酶試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌可產(chǎn)生氨基酸脫羧酶使氨基酸脫羧生成胺和二氧化碳。由于胺的生成使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，可用指示劑指示出來(lái)。

(2)方法：將待檢菌分別接種于1支氨基酸（賴氨酸，鳥(niǎo)氨酸或精氨酸）脫羧酶試驗(yàn)管和1支氨基酸脫羧酶對(duì)照管（無(wú)氨基酸），各覆蓋至少0.5cm高度的無(wú)菌石蠟油，35℃孵育1~4d，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：若為溴甲酚紫指示劑，則試驗(yàn)管紫色為陽(yáng)性，黃色為陰性，對(duì)照管應(yīng)為黃色。(4)應(yīng)用：主要用于某些細(xì)菌種間的鑒別，如賴氨酸用于產(chǎn)氣腸桿菌（陽(yáng)性）與陰溝腸桿菌（陰性）；鳥(niǎo)氨酸用于陰溝腸桿菌（陽(yáng)性）和克雷伯菌（陰性）；精氨酸用于陰溝腸桿菌（陽(yáng)性）和產(chǎn)氣腸桿菌（陰性）等。6．精氨酸雙水解酶試驗(yàn)

(1)原理：精氨酸經(jīng)兩次水解后,生成鳥(niǎo)氨酸、氨及二氧化碳。鳥(niǎo)氨酸又在脫羧酶的作用下生成腐胺。氨及腐胺均為堿性物質(zhì)，故可使培養(yǎng)基變堿，用指示劑指示出來(lái)。(1)方法：將待檢菌接種于試驗(yàn)培養(yǎng)上，置35℃孵箱孵育1~4d，觀察結(jié)果。

(2)結(jié)果：溴甲酚紫指示劑呈紫色為陽(yáng)性，酚紅指示劑呈紅色為陽(yáng)性。黃色為陰性。(3)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科及假單胞菌屬的鑒定。7．尿素酶試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶，分解尿素產(chǎn)生大量的氨，使培養(yǎng)基變堿。(2)方法：將待檢菌接種于含有尿素的培養(yǎng)基中，35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：紅色為陽(yáng)性，不變?yōu)殛幮浴?/p>

(4)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科變形桿菌屬、普羅威登菌屬、克雷伯菌屬及假單胞菌屬的鑒定。

8．霍亂紅試驗(yàn)

(1)原理：霍亂弧菌分解色氨酸生成吲哚，并能使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，當(dāng)加入硫酸后生成亞硝酸吲哚，呈紅色反應(yīng)。

(2)方法：將待檢菌接種于蛋白胨水中，置35℃孵育24h，加入濃硫酸數(shù)滴，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：呈紅色者為陽(yáng)性。

(4)應(yīng)用：霍亂弧菌呈陽(yáng)性反應(yīng)，但本試驗(yàn)并非霍亂弧菌所特有。凡能產(chǎn)生吲哚并還原硝酸鹽為亞硝酸鹽的細(xì)菌，均可呈現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)。

三、碳源和氮源利用試驗(yàn) 1．枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源，而在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，并分解枸櫞酸鹽生成碳酸鈉，使培養(yǎng)基變堿性。

(2)方法：將待檢菌接種于枸櫞酸鹽培養(yǎng)基上，置35℃孵育1~4d，逐日觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：若用溴麝香草酚蘭指示劑，斜面出現(xiàn)菌落或菌苔，培養(yǎng)基變藍(lán)色為陽(yáng)性；無(wú)菌落生長(zhǎng)，培養(yǎng)基綠色為陰性。

(4)應(yīng)用：可用此試驗(yàn)作細(xì)菌種屬間鑒定。埃希菌屬、志賀菌屬、愛(ài)德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性，沙門菌屬、克雷伯菌屬通常陽(yáng)性，粘質(zhì)和液化沙雷菌和某些變形桿菌及枸櫞酸桿菌陽(yáng)性。此外，銅綠假單胞菌、洋蔥伯克霍爾德菌和嗜水氣單胞菌也能利用枸櫞酸鹽。

2．丙二酸鹽利用試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌能利用丙二酸鹽作為唯一碳源，丙二酸鹽被分解生成碳酸鈉，使培養(yǎng)基變堿。

(2)方法：將待檢菌接種于丙二酸鹽培養(yǎng)基中，置35℃孵育24~48h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：培養(yǎng)基由綠色變?yōu)樗{(lán)色為陽(yáng)性。顏色無(wú)變化為陰性。

(4)應(yīng)用：腸桿菌科中亞利桑那菌和克雷伯菌屬為陽(yáng)性，枸櫞酸桿菌屬、腸桿菌屬和哈夫尼亞菌屬有不同生物型反應(yīng)，其它各菌屬均為陰性。

3．醋酸鈉利用試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌利用銨鹽作為唯一氮源，同時(shí)，利用醋酸鹽作為唯一碳源時(shí)，可在醋酸鹽培養(yǎng)上生長(zhǎng)，分解醋酸鹽生成碳酸鈉，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性。

(2)方法：將被檢菌接種于醋酸鹽培養(yǎng)基中，置35℃孵育2~7d，逐日觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：培養(yǎng)基上有細(xì)菌生長(zhǎng)，并變?yōu)樗{(lán)色為陽(yáng)性。

(4)應(yīng)用：主要用于大腸埃希菌和志賀菌屬的鑒別，前者為陽(yáng)性，而后者為陰性。4．馬尿酸鈉水解試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌可具有馬尿酸水解酶，可使馬尿酸水解為苯甲酸和甘氨酸，苯甲酸與三氯化鐵試劑結(jié)合，形成苯甲酸鐵沉淀。

(2)方法：將待檢菌接種于馬尿酸鈉培養(yǎng)基中，置35℃孵育48h，離心沉淀，取上清液0.8ml，加入三氯化鐵試劑0.2ml，立即混勻，經(jīng)10~15min觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：出現(xiàn)恒定之沉淀物為陽(yáng)性。(5)應(yīng)用：主要用于B群鏈球菌的鑒定。

5、乙酰胺利用試驗(yàn)

(1)原理：許多非發(fā)酵菌產(chǎn)生一種脫酰胺酶，可使乙酰胺經(jīng)脫酰胺作用釋放氨，使培養(yǎng)基變堿。

(2)方法：將被檢菌接種于乙酰胺培養(yǎng)基中，置35℃孵育24~48h，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：培養(yǎng)基由綠色變?yōu)樗{(lán)色為陽(yáng)性。如不生長(zhǎng)，或稍有生長(zhǎng)，但培養(yǎng)基顏色不變?yōu)殛幮浴?/p>

(4)應(yīng)用：主要用于非發(fā)酵菌的鑒定。銅綠假單胞菌、去硝化產(chǎn)堿桿菌、食酸假單胞菌為陽(yáng)性，其它非發(fā)酵菌大多數(shù)為陰性。

四、酶類試驗(yàn) 1.氧化酶試驗(yàn)

(1)原理：氧化酶又稱細(xì)胞色素氧化酶，是細(xì)胞色素氧化酶系統(tǒng)中的最終呼吸酶。此酶并不直接與氧化酶試劑起反應(yīng)，而是先使細(xì)胞色素C氧化，然后此氧化型細(xì)胞色素C再使對(duì)苯二胺氧化，產(chǎn)生顏色反應(yīng)。因此，本試驗(yàn)結(jié)果與細(xì)胞色素C的存在有關(guān)。

(2)方法：取潔凈濾紙條，沾取菌落少許，加氧化酶試劑（10g/L鹽酸四甲基對(duì)苯二胺水溶液或10g/L鹽酸二甲基對(duì)苯二胺水溶液）1滴，1min內(nèi)觀察結(jié)果。也可將試劑滴加到菌落上進(jìn)行試驗(yàn)。

(3)結(jié)果：陽(yáng)性者立即變粉紅色，5~10s內(nèi)呈深紫色。無(wú)色為陰性。

(4)應(yīng)用：用于奈瑟菌屬的菌種鑒定，該屬細(xì)菌均陽(yáng)性。此外，也用于假單胞菌屬與腸桿菌科細(xì)菌的區(qū)別，前者陽(yáng)性，而后者陰性。莫拉菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬等均為陽(yáng)性。

注意事項(xiàng)： ①試驗(yàn)時(shí)應(yīng)避免接觸含鐵物質(zhì)，以免出現(xiàn)假陽(yáng)性。②10g/L鹽酸四甲基對(duì)苯二胺或10g/L鹽酸四甲基對(duì)苯二胺水溶液為無(wú)色溶液，在空氣中易被氧化而失效，故應(yīng)經(jīng)常更換新試劑，并盛于棕色瓶中，若試劑已變成深藍(lán)色，應(yīng)棄去不用。

2．觸酶試驗(yàn)

(1)原理：觸酶又稱過(guò)氧化氫酶，具有過(guò)氧化氫酶的細(xì)菌，能催化過(guò)氧化氫成為水和原子態(tài)氧，繼而形成氧分子，出現(xiàn)氣泡。

(2)方法：取潔凈玻片1張，用接種環(huán)挑取細(xì)菌，加3％H2O2 1滴，立即觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：若立即出現(xiàn)大量氣泡為陽(yáng)性。無(wú)氣泡為陰性。

(4)應(yīng)用：大多需氧和兼性厭氧菌均產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶，但鏈球菌科陰性，故常用此試驗(yàn)來(lái)鑒定。此外，金氏桿菌屬的細(xì)菌也為陰性。分枝桿菌的鑒別則用耐熱觸酶試驗(yàn)，結(jié)核分枝桿菌為陰性，戈氏分枝桿菌和地分枝桿菌為陽(yáng)性。

注意事項(xiàng)：①3％H2O2溶液要新鮮配制。②不宜用血瓊脂平板上生長(zhǎng)的菌落，因紅細(xì)胞含有觸酶，可致假陽(yáng)性反應(yīng)，③取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)菌。3．凝固酶試驗(yàn)

(1)原理：凝固酶試驗(yàn)是鑒定葡萄球菌致病性的重要試驗(yàn)。致病性葡萄球菌可產(chǎn)生兩種凝固酶，一種是與細(xì)胞壁結(jié)合的凝聚因子，稱結(jié)合凝固酶，它直接作用于血漿中纖維蛋白原，使發(fā)生沉淀，包圍于細(xì)菌外面而凝聚成塊，玻片法陽(yáng)性結(jié)果是由此凝聚因子所致；另一種凝固酶是分泌至菌體外，稱為游離凝固酶，它能使凝血酶原變成凝血酶類產(chǎn)物，使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白，從而使血漿凝固。試管法可同時(shí)測(cè)定結(jié)合型和游離型凝固酶。(2)方法: ①玻片法：在一張潔凈玻片中央加1滴生理鹽水，用接種環(huán)取待檢培養(yǎng)物與其混合（設(shè)陽(yáng)性和陰性對(duì)照）制成菌懸液，若經(jīng)10~20s內(nèi)無(wú)自凝現(xiàn)象發(fā)生，則加入人或兔新鮮血漿1環(huán)，與菌懸液混合，觀察結(jié)果。②試管法：于試管內(nèi)加1﹕4稀釋的兔或人血漿0.5ml，再加1~2個(gè)待試菌菌落，置37℃水浴，每30min觀察1次結(jié)果。

(3)結(jié)果：①玻片法：5~10s內(nèi)出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性。②試管法：如有凝塊或整管凝集出現(xiàn)為陽(yáng)性。2h后無(wú)上述現(xiàn)象出現(xiàn)，則放置過(guò)夜后再觀察。

(4)應(yīng)用：本試驗(yàn)僅用于致病性葡萄球的鑒定。

注意事項(xiàng)：①玻片法為篩選試驗(yàn)，陽(yáng)性、陰性均需進(jìn)行試管法測(cè)定。②血漿必須新鮮。③應(yīng)使用肝素而非枸櫞酸鹽作抗凝劑抗凝的血漿。④本試驗(yàn)也可用市購(gòu)的膠乳凝集試驗(yàn)試劑盒測(cè)定。

4．DNA酶試驗(yàn)

(1)原理： 某些細(xì)菌能產(chǎn)生DNA酶，水解外源性DNA使之成為寡核苷酸。DNA可被酸沉淀，而寡核苷酸則不會(huì)。故在DNA瓊脂平板上加鹽酸后，可在菌落周圍形成透明區(qū)。

(2)方法：在DNA瓊脂平板上點(diǎn)種待檢菌，35℃孵育18~24h，用1 mol/L鹽酸傾注平板，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：如菌落周圍有透明區(qū)者為陽(yáng)性，無(wú)透明區(qū)為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科及葡萄球菌屬某些菌種的鑒定。沙雷菌、變形桿菌和金黃色葡萄球菌DNA酶均陽(yáng)性。

5．膽汁溶菌試驗(yàn)

(1)原理：膽汁或去氧膽酸鈉能導(dǎo)致某些細(xì)菌溶解，一方面是由于膽汁或去氧膽酸鈉降低了細(xì)菌細(xì)胞膜上的表面張力，使細(xì)菌的細(xì)胞膜破損或使菌體裂解。另一方面可能與激活細(xì)菌體內(nèi)的自溶酶有關(guān)。

(2)方法：①試管法：用純培養(yǎng)物制備1ml生理鹽水濃菌懸液，pH調(diào)至7.0，分裝兩支試管，各0.5ml。其中一管加0.5ml 100g/L去氧膽酸鈉為試驗(yàn)管，另一管加0.5ml生理鹽水作對(duì)照。35℃孵育每小時(shí)觀察1次結(jié)果。②平板法：在血平板上選取單個(gè)可疑菌落，作好標(biāo)記，直接在菌落上加1接種環(huán)20g/L去氧膽酸鈉（pH7.0），置35℃孵育30min（平板不要翻轉(zhuǎn)）觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：①試管法：在3h內(nèi)液體透明為陽(yáng)性。②平板法：如菌落消失，僅留下溶血區(qū)為陽(yáng)性，菌落不消失為陰性。

(4)應(yīng)用：用于肺炎鏈球菌的鑒定。6．硝酸鹽還原試驗(yàn)

(1)原理：硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個(gè)過(guò)程，其一是在合成代謝過(guò)程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉(zhuǎn)化為氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其它含氮化合物；另一是在分解代謝過(guò)程中，硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體。硝酸鹽還原過(guò)程可因細(xì)菌不同而異。有的細(xì)菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，如大腸埃希菌等；有的細(xì)菌可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨；有的細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮，如沙雷菌屬；有的細(xì)菌還可以將其還原產(chǎn)物在合成性代謝中完全利用。硝酸鹽或亞硝酸鹽如果還原生成氣體的終末產(chǎn)物如氮或氧化氮，則稱為脫硝化或脫氮化作用。某些細(xì)菌能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽與醋酸作用，生成亞硝酸，亞硝酸與試劑中的對(duì)氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者與α-萘胺結(jié)合生成N-α萘胺偶苯磺酸。

(2)方法：將待檢菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基（內(nèi)含小倒管）中，35℃孵育1~4d。將甲、乙等量混合液（用時(shí)混合）0.1ml加于試管內(nèi)，立即或10min內(nèi)觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性反應(yīng)。如欲觀察有無(wú)氮?dú)猱a(chǎn)生，可于培養(yǎng)基管內(nèi)加1只小倒管，有氣泡產(chǎn)生，則表示有氮?dú)馍伞Ｈ缬麢z查培養(yǎng)基中硝酸鹽是否被分解，可取鋅粉少許加入培養(yǎng)基內(nèi)，如出現(xiàn)紅色表明硝酸鹽仍存在；若不出現(xiàn)紅色，表示硝酸鹽已被分解。

(4)應(yīng)用：本試驗(yàn)廣泛用于細(xì)菌鑒定。腸桿菌科細(xì)菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽；假單胞菌屬中有的細(xì)菌能產(chǎn)生氮?dú)猓玢~綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌、斯氏假單胞菌，有的則能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，如鼻疽假單胞菌等；厭氧菌如韋榮菌也能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽。7．卵磷脂酶試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌產(chǎn)生的卵磷脂酶，經(jīng)鈣離子作用，能迅速分解卵黃或血清中的卵磷脂形成混濁沉淀狀的甘油酯和水溶性磷酸膽堿。

(2)方法：取待檢菌劃線接種或點(diǎn)種在卵黃瓊脂平板上，置35℃孵育3~6h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：3h后在菌落周圍形成乳白色混濁，即為卵磷脂酶試驗(yàn)陽(yáng)性，6h后該混濁圈可擴(kuò)大到直徑5~6mm。(4)應(yīng)用：該試驗(yàn)主要用于厭氧的鑒定。產(chǎn)氣莢膜梭菌和諾維梭菌為陽(yáng)性，其他梭菌為陰性。蠟樣芽孢桿菌亦為陽(yáng)性。8．磷酸酶試驗(yàn)

(1)原理：磷酸酶是磷酸脂的水解酶，可使單磷脂水解，其反應(yīng)可根據(jù)反應(yīng)基質(zhì)不同而異，如用磷酸酚酞為基質(zhì)，經(jīng)磷酸酶水解后可釋放酚酞，在堿性環(huán)境中呈紅色。

(2)方法：取待檢菌接種于磷酸酚酞瓊脂平板上，置35℃孵育18~24h，于平皿蓋內(nèi)加1滴濃氨水，熏蒸片刻，觀察結(jié)果。亦可用液體培養(yǎng)基，經(jīng)孵育后，向管內(nèi)加400g/L氫氧化鈉溶液1滴，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：菌落變?yōu)榧t色者為陽(yáng)性。

(4)應(yīng)用：主要用于致病性葡萄球菌與非致病性葡萄球菌的鑒別，前者為陽(yáng)性，后者為陰性。

9．脂酶試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌產(chǎn)生的脂酶可分解脂肪為游離脂肪酸。在培養(yǎng)基中加入維多利亞藍(lán)可與脂肪結(jié)合成為無(wú)色化合物，如果脂肪被分解，則維多利亞藍(lán)釋出，呈藍(lán)色。

(2)方法：將待檢菌接種于含維多利亞藍(lán)的脂酶培養(yǎng)基中，置35℃孵育24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：培養(yǎng)基變?yōu)樯钏{(lán)色者為陽(yáng)性，否則可呈無(wú)色或粉紅色。

(4)應(yīng)用：主要用于厭氧菌鑒定。在擬桿菌中產(chǎn)黑色素?cái)M桿菌中間亞種產(chǎn)生脂酶，其它擬桿菌陰性；在梭菌屬中諾維梭菌和產(chǎn)芽胞梭菌也產(chǎn)生此酶，其它梭菌為陰性。10．CAMP試驗(yàn)

(1)原理：B群鏈球菌（無(wú)乳鏈球菌）產(chǎn)生一種“CAMP”因子，此種物質(zhì)能促進(jìn)葡萄球菌的β-溶血素的活性。因此，可在兩種細(xì)菌的交界處溶血力增強(qiáng)，出現(xiàn)箭頭型透明溶血區(qū)。

(2)方法：在羊血或馬血瓊脂平板上，先以β-溶血的金黃色葡萄球菌劃一橫線接種。再將待檢菌與前一劃線作垂直接種，兩者應(yīng)相距1cm，于35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。每次試驗(yàn)應(yīng)做陰陽(yáng)性對(duì)照。

(3)結(jié)果：兩種細(xì)菌劃線交接處出現(xiàn)箭頭型溶血區(qū)為陽(yáng)性。

(4)應(yīng)用：主要用于B群鏈球菌（陽(yáng)性）的鑒定，其他鏈球菌均為陰性。11．石蕊牛乳試驗(yàn)

(1)原理：由于牛乳內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì)和糖類，各種細(xì)菌對(duì)這些物質(zhì)的分解能力不同，故可有數(shù)種不同反應(yīng)，用以鑒別細(xì)菌。(2)將待檢菌接種于石蕊牛乳培養(yǎng)基中，若為芽胞梭菌，要在培養(yǎng)基中加入無(wú)菌鐵末，置35℃孵育18~24h，必要時(shí)可延長(zhǎng)至14d。觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：①產(chǎn)酸：發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，使指示劑變?yōu)榉奂t色。②產(chǎn)氣：發(fā)酵乳糖而同時(shí)產(chǎn)氣，可沖開(kāi)上面的凡士林。③凝固：因產(chǎn)酸太多而使牛乳中的酪蛋白凝固。④胨化：將凝固的酪蛋白繼續(xù)水解為胨，培養(yǎng)基上層液體變清，底部可留有未被完全胨化的酪蛋白。⑤產(chǎn)堿：乳糖未發(fā)酵，因分解含氮物質(zhì)，生成胺及氨，培養(yǎng)基變堿，指示劑變?yōu)樗{(lán)色。(4)應(yīng)用：主要用于梭菌、鏈球菌和丙酸桿菌的鑒定。

五、抑菌試驗(yàn)

1．Optochin敏感試驗(yàn)

(1)原理：Optochin(奧普托欣)是鹽酸乙基氫化羥基奎寧的商品名。對(duì)肺炎鏈球菌有特異抑制作用，其作用機(jī)制可能是干擾葉酸生物合成作用，而對(duì)其它鏈球菌則無(wú)此作用。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌的肉湯培養(yǎng)物均勻涂布于血瓊脂平板上，貼上一張含5μg奧普托欣紙片，置燭缸或二氧化碳孵箱，35℃ 孵育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：抑菌圈直徑大于14mm為敏感，小于或等于 14mm為陰性。(4)應(yīng)用：主要用于肺炎鏈球菌（敏感）與其它鏈球菌（耐藥）的鑒別。2．桿菌肽敏感試驗(yàn)

(1)原理：A群鏈球菌對(duì)桿菌肽幾乎是100%敏感，而其它群鏈球菌對(duì)桿菌肽通常耐藥。故此試驗(yàn)可對(duì)鏈球菌進(jìn)行鑒別。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌的肉湯培養(yǎng)物均勻涂布于血瓊脂平板上，稍干后貼一張含0.04U的桿菌肽紙片，置35℃ 孵育18~24h，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：抑菌圈直徑大于10mm為敏感，小于10mm為耐藥。(4)應(yīng)用：主要用于A群與非A群鏈球菌的鑒別。從臨床分離的菌株中有5%~15%非 A群鏈球菌也對(duì)桿菌肽敏感，如6%的B群鏈球菌、7.5%的C群鏈球菌和G群鏈球菌等。3．新生霉素敏感試驗(yàn)

(1)原理：金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌可被低濃度新生霉素所抑制，表現(xiàn)為敏感，而腐生葡萄球菌則表現(xiàn)為耐藥。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌菌懸液均勻涂布于M-H瓊脂平板或血平板上，在平板中央貼含5μg/片新生霉素診斷紙片一張，置35℃孵育16~18h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：抑菌圈直徑大于16mm為敏感，小于或等于16mm為耐藥。(4)應(yīng)用：主要用于葡萄球菌某些種的鑒定。4．O/129試驗(yàn)

(1)原理：O/129（2，4二氨基-6，7-二異丙基喋啶）能抑制弧菌屬、發(fā)光桿菌屬和鄰單胞菌屬細(xì)菌生長(zhǎng)，而氣單胞菌屬和假單胞菌屬細(xì)菌則耐藥。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌菌懸液均勻涂布于堿性瓊脂平板上，將10μg/片及150μg/片的O/129診斷紙片貼于平板上，置35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：出現(xiàn)抑菌圈者表示敏感，無(wú)抑菌圈者為耐藥。

(4)應(yīng)用：主要用于弧菌屬、鄰單胞菌屬與氣單胞菌屬的鑒別，弧菌屬和鄰單胞菌屬菌為敏感，氣單胞菌屬菌為耐藥。其它菌屬有發(fā)光桿菌屬為敏感，假單胞菌屬為耐藥。5．氰化鉀試驗(yàn)

(1)原理：氰化鉀可抑制某些細(xì)菌的呼吸酶系統(tǒng)。細(xì)胞色素、細(xì)胞色素氧化酶、過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶均以鐵卟啉作為輔基，氰化鉀與鐵卟啉結(jié)合，使這些酶失去活性，使細(xì)菌生長(zhǎng)受到抑制。(2)方法：將待檢菌接種于氰化鉀培養(yǎng)基中，同時(shí)接種一支不含氰化鉀的對(duì)照培養(yǎng)基，置35℃孵育24~48h，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：細(xì)菌在氰化鉀培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的（不受抑制）為陽(yáng)性，不生長(zhǎng)（抑制）為陰性。(4)應(yīng)用：腸桿菌科中的沙門菌屬、志賀菌屬和埃希菌屬細(xì)菌的生長(zhǎng)受到抑制，而其它各菌屬的細(xì)菌均可生長(zhǎng)。

六、其它試驗(yàn)

1．克氏雙糖鐵或三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基試驗(yàn)

(1)原理：克氏雙糖鐵(KIA)或三糖鐵瓊脂(TSI)培養(yǎng)基制成高層和短的斜面，其中葡萄糖含量?jī)H為乳糖或蔗糖的十分之一，若細(xì)菌只分解葡萄糖而不分解乳糖和蔗糖，分解葡萄糖產(chǎn)酸使pH降低，因此斜面和底層均先呈黃色，但因葡萄糖量較少，所生成的少量酸可因接觸空氣而氧化，并因細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖利用含氮物質(zhì)生成堿性化合物，使斜面部分又變成紅色；底層由于處于缺氧狀態(tài)，細(xì)菌分解葡萄糖所生成的酸類一時(shí)不被氧化而仍保持黃色。細(xì)菌分解葡萄糖、乳糖或蔗糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，使斜面與底層均呈黃色，且有氣泡。細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫時(shí)與培養(yǎng)基中的硫酸亞鐵作用，形成黑色的硫化鐵。

(2)方法：用接種針挑取待檢菌的菌落，先穿刺接種到KIA或TSI深層，距管底3~5mm為止，再?gòu)脑吠嘶兀谛泵嫔献韵露蟿澗€，置35℃孵 育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：常見(jiàn)的KIA反應(yīng)有如下幾種： ①斜面堿性/底層堿性：不發(fā)酵碳水化合物，系不發(fā)酵菌的特征。如銅綠假單胞菌。②斜面堿性/底層酸性：葡萄糖發(fā)酵、乳糖（和TSI中的蔗糖）不發(fā)酵，是不發(fā)酵乳糖菌的特征，如志賀菌。③斜面堿性/底層酸性（黑色）：葡萄糖發(fā)酵、乳糖不發(fā)酵并產(chǎn)生硫化氫，是產(chǎn)生硫化氫不發(fā)酵乳糖菌的特征。如沙門菌、亞利桑那菌、枸櫞酸桿菌和變形桿菌等。④斜面酸性/底層酸性：葡萄糖和乳糖（和TSI中的蔗糖）發(fā)酵，是發(fā)酵乳糖的大腸菌群的特征，如大腸埃希菌、克雷伯菌屬和腸桿菌屬。

(4)應(yīng)用：鑒別腸道桿菌用。KIA或TSI對(duì)初分離出的、可疑為革蘭陰性桿菌鑒定特別有用。其反應(yīng)模式是許多桿菌鑒定表的組成部分，也可作為觀察其他培養(yǎng)基反應(yīng)的有價(jià)值的質(zhì)控依據(jù)。

2．氫氧化鉀拉絲試驗(yàn)

(1)原理：革蘭陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁在稀堿溶液中易于破裂，釋放出未斷裂的DNA螺旋，使氫氧化鉀菌懸液呈現(xiàn)粘性，可用接種環(huán)攪拌后拉出粘絲來(lái)，而革蘭陽(yáng)性細(xì)菌在稀堿溶液中沒(méi)有上述變化。

(2)方法：取1滴40g/L氫氧化鉀水溶液（應(yīng)新鮮配制）于潔凈玻片上，取新鮮菌落少許，與氫氧化鉀水溶液攪拌混勻，并每隔幾秒鐘上提接種環(huán)，觀察能否拉出粘絲。(3)結(jié)果：用接種環(huán)拉出粘絲者為陽(yáng)性，仍為混懸液者為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于革蘭陰性菌與易脫色的革蘭陽(yáng)性菌的鑒別。大多數(shù)革蘭陰性菌于5~10s內(nèi)出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，有的則需30~45s，假單胞菌、無(wú)色桿菌、黃桿菌、產(chǎn)堿桿菌、莫拉菌等大多數(shù)在10s內(nèi)呈陽(yáng)性，不動(dòng)桿菌、莫拉菌反應(yīng)較慢，大多數(shù)菌株在60s內(nèi)出現(xiàn)陽(yáng)性，而革蘭陽(yáng)性菌在60s以后仍為陰性。