第一篇：12月份經驗教訓總結-李新樂

12月份經驗教訓總結

生產部：李新樂

大腸桿菌 E.coli 是基因工程中常用的表達工具，它不像真核基因表達系統那樣可以對表達產物進行翻譯后加工修飾，但是由于其遺傳背景清楚，有多種表達載體、菌株和純化系統，生長快，產量高，成本低，生產規模大和使用安全，操作簡便，周期短，經濟等很多優點，因此仍然是不可被替代的使用最為廣泛的系統。

目標蛋白在大腸桿菌系統中表達的形式有兩種：一種是在細胞內表現為可溶性的蛋白質，一種是在細胞內表現為不溶性的包涵體顆粒，即產物以包涵體的形式存在。

包涵體是外源基因在原核細胞中表達，尤其在大腸桿菌中高效表達時，形成的由膜包裹的高密度、不溶性、無活性蛋白質顆粒，顯微鏡下觀察時為高折射區，與胞質中其他成分區別明顯。包涵體一般含有50%以上的重組蛋白，其余成分為RNA聚合酶，核糖體元件，環狀和缺口質粒DNA，外膜蛋白OmpC、OmpA和OmpF以及脂質、脂多糖、肽聚糖等。一般難溶于水，只溶于變性劑(如鹽酸胍，尿素等)。

包涵體的形成比較復雜，不僅與宿主細胞，表達基因有關，與外界培養環境也有很大關系。關于包涵體的形成，主要有以下幾種論點：

①與胞質內蛋白質生成速率有關，基因表達速度太快，新生多肽無充足的時間進行折疊，從而形成非結晶、無定形的蛋白質的聚集體。動力學模型表明: 活性蛋白的產率取決于蛋白合成、折疊、聚集的速率,在蛋白質高水平表達時，新生肽鏈的聚集速率一旦超過蛋白正確折疊的速率就會導致包涵體的形成；

②局部高濃度的新生肽，加快非專一性沉淀。

③宿主菌的培養條件，如培養基營養成分、溫度、pH值、離子強度等因素，都會影響包涵體的形成。當溫度超過某一種蛋白的變性溫度后，隨著溫度增加，蛋白質凝集量增加，當環境的pH接近某一種蛋白的等電點時，蛋白的凝集也增加，包涵體形成增多。

④蛋白質自身的穩定性。目的基因所表達的重組蛋白，對大腸桿菌來說屬于異體蛋白，大腸桿菌表達體系內不具備某些哺乳動物蛋白(重組蛋白)翻譯后修飾所需的酶類和輔助因子，如折疊酶或分子伴侶等，致使中間產物大量聚集形成包涵體。

⑤重組蛋白的氨基酸組成。研究顯示含硫氨基酸多的重組蛋白形成包涵體的可能性較大。可能是因為宿主細胞還原性環境使表達蛋白中二硫鍵的穩定性下降，出現多余或錯配的二硫鍵。

第二篇：9月份經驗教訓總結—李新樂

9月份經驗教訓總結

生產部：李新樂

九月份在制備gp41項目的菌體時，蛋白表達時形成了包涵體。

在基因工程中，在某些生長條件下，大腸桿菌能積累某種特殊的生物大分子，它們致密地集聚在細胞內，或被膜包裹或形成無膜裸露結構，這種水不溶性的結構稱為包涵體。包涵體的形成主要是因為在重組蛋白的表達過程中缺乏某些蛋白質折疊的輔助因子, 或環境不適, 無法形成正確的次級鍵等。

1、重組蛋白在宿主系統中高水平表達時,無論是用原核表達體系或酵母表達體系甚至高等真核表達體系, 都可形成包涵體。事實上, 內源性的蛋白質, 如果表達水平過高, 也會聚集形成包涵體。因此, 包涵體形成的原因主要是高水平表達的結果, 即合成速度太快, 以至于沒有足夠的時間進行折疊, 二硫鍵不能正確的配對, 過多的蛋白間非特異性結合, 蛋白質無法達到足夠的溶解度等。

2、重組蛋白在大腸桿菌中表達時, 缺乏一些蛋白折疊過程中所需要的酶和輔助因子, 如折疊酶和分子伴侶等, 是包涵體形成的又一原因。

高效表達的重組異源蛋白在大腸桿菌中形成包涵體的影響因素有很多, 其中溫度就是一個很重要的因素，提高溫度有利于包涵體的形成。較高的培養溫度由于加快了蛋白質的合成速度, 增加了無活性蛋白質集聚物的形成速度和疏水作用, 因此促進了包涵體的形成。在制備gp41項目的菌體時，在37度條件下誘導時，形成大量包涵體，再改用16度過夜誘導后就得到了改善，形成可溶性表達。

第三篇：經驗教訓總結

最主要的問題怕而不果斷

雷曼光電 當日放量漲停突破 怕高而沒敢追 形態正好符合我的買點40%到手的利潤沒抓到 當時聽信了股評家說歐洲債務危機沒錢搞光電設備，而光電設備的買家主要是歐洲 可見，股評家的言論不可信。

教訓：短線操作只注重技術研判，尋找短線熱點，大膽追漲，果斷買入，大膽持股 第一個漲停可以大膽追

濮耐股份 當時沒有突破就買了不符合自己的買股標準的股票，買入后沒有耐心而過早賣出，導致虧損。

三五互聯 買入時機比較正確，但賣出應該果斷，創新高但沒放量就該果斷賣出，第二天又漲停，而錯過了

鑫富藥業 漲停板追入，當天上漲有些急促，又不是短期熱點，難免第二天的調整。

該股既非熱點也沒有向上攻擊形態，只是聽股評家說買超跌反彈品種而買入，受了他的影響

短線操作原則:

1.忍不要太心急，不懼調整

2.狠果斷買進 賣出

3.穩堅定持股

4.快

5.細細心分析

6.股價經過急跌后漲停的股票要謹慎，做好買底部經過吸貨后洗盤完畢的股票，除非形

態走勢很完美，買經過蓄勢的股票，準備向上攻擊

7.經過急跌的股票，一定要經過一個吸籌的過程才可能向上攻擊。以后未經過震蕩蓄勢的股票要少買。大黑馬一般都是突破前期高點的股票。

短線真諦在于兩個動作：跳躍和躲避跳躍：隨板塊輪動跳躍，個股只做正在拉升的個股，回避下跌調整的股票

第四篇：總結經驗教訓

總結經驗教訓，應對更嚴峻的安全管理工作 通過學習“群眾路線教育實踐活動”，結合安全工作實際情況，回顧半年來的安全工作，總結起來、分析起來，我們感到自己肩上的擔子很重。

一、安全狀況：

2013年1-7月份全礦共發生各類事故24起。其中死亡事故1起5人，輕傷事故13起21人，瓦斯超限事故10起。

其中：

輕傷事故與去年同期相比下降了32.3%（18起10人），六月份無輕傷事故。

2013年7月份全礦共發生1起輕傷事故：2013年7月13日3時30分掘二區9202隊李漢嶺在場子迎頭片幫砸傷左腿。

今年7月份與去年同期各類事故下降6起，同比下降83.33%。今年7月與去年頂板事故同期都是1起；

今年7月份與去年同期其他事故下降7起，同比下降100%。從最近6月、7月的安全狀況來看，我礦安全形勢較好，如何發揚這樣的成績，這就是擺在安全管理者面前的重要任務。

二、只有總結才能看到不足，才能知道問題出在何方，才能應對嚴峻的安全管理工作。

安全生產是永恒的主題，是一切工作的基礎。回顧過去的安全生產工作，我們清楚地看到，在工作中雖然施工措施寫了很多，但是做到的卻很少，不得不引起警惕。綜一區沖擊地壓就是一個很好的案例，我們必須引以為戒。所以做好安全工作，就要看如 1 何保證安全管理措施到位，如何完善安全生產管理規章制度并有效實施，如何將安全工作的重點放在一線，是我礦當前認真對待的主題，既要完成上級交給的安全生產任務，還要在實際工作中把安全工作中的措施落實到位。

“安全第一、預防為主”的方針雖然早已家喻戶曉，但實際上是喊得多、落實得少，叫得響、行動遲緩。安全工作不是一朝一夕的事情，也不是一個人的能力所能解決的，它受到多種因素的制約。只有加強安全生產過程監督，下大力度規范現場安全措施，加強對人員違章現場處理，不斷規范現場作業行為，推行標準化作業，將安全工作真正從事后分析轉移到過程監督中，才是扭轉不安全局面的有效措施。在此，我就如何抓好下半年安全工作，談幾點意見和看法，不當之處請提出批評指正。

1、加強對安全生產工作的領導是實現安全生產的根本保證。要搞好安全生產工作，必須加強對安全生產工作的領導。安全工作管理既強調管到底，又強調理到位。調理到位就是要理出頭序，理順關系；就是要不斷完善安全工作行為準則，檢查制度和標準，考核獎懲辦法。管到底，就是要使“安全第一，預防為主”的方針深入人心，要嚴抓細管，剛性考核，絕不姑息任何違章行為。比如有的職工蹬車，只要抓住就嚴厲處罰等等一些違章現象，始終堅持把安全生產擺在重要位置，不斷健全安全生產保證體系和安全生產監督體系，以全面落實安全生產責任制為核心，以完善安全生產法規、制度和責任制為基礎，以落實措施、反違章、推行質量標準化建設為原則，做到組織落實、措施落實、檢查落實、考核落實，使安全生產管理的基礎工作進一步加強。

2、安全管理制度化，安全措施規范化，作業行為標準化是安全生產管理的基本要求

“不以規矩，不成方圓”，沒有合理而規范的管理制度和安全措施，何以能做好安全生產工作，所以不斷完善、細化安全管理制度，制定具體的實施細則和辦法，完善安全管理規章制度是我們做好安全生產工作的最基本要求。不能只重效益，不重安全，我們安監檢查人員在檢查過程中發現有的單位根本不重視上級下發的各種制度，不落實到位，比如小班安全質量評估，沒有從這些規范中真正做細做好。在事故發生后才追悔莫及，才體會到安全生產管理工作的重要性，因此，在我們的安全生產工作中，每個人要規范的遵守安全生產工作制度和措施，而且要堅持做到貫徹落實，保障這些安全生產工作制度得以執行和落實。有了有效的制度，我們的安全生產工作才可能規范開展，收到應有效果，使安全管理制度化，安全措施規范化。比如：小班安全質量評估制度的落實，每個班都要認真對待，現場把隱患交代清楚，按標準按措施要求去施工，那么事故就會大大減少甚至會消滅事故。所以要求各單位嚴格按小班安全質量評估做起，從每個環節中落實到位，那么每個單位的質量標準提高了，再抓每個單位系統的存在的問題，把問題處理在萌芽之中，從隊長、班組長、瓦檢員在現場認真驗收工程質量，認真檢查施工過程的每個細小環節的安全狀況，那么每個班組都會掌握到每個細節的安全狀況，施工起來就不會出現質量問題，因此施工中的事故自然就會減少。

3、做好安全生產宣傳，抓安全生產教育，提升職工安全意識是前提條件。安全生產與職工日常生活緊密相關，做好安全生 產工作，做好安全生產宣傳，抓安全教育，提升職工安全意識是前提，職工安全意識的提高，職工自我保護能力的增強這些是抓好安全生產工作的基礎，使職工真正做到從“要我安全”到“我要安全”本質改變。充分利用每日一題，每周一案的學習，讓職工掌握技術知識、從“每周一案”中體會到事故教訓，使安全生產工作家喻戶曉、人人皆知，提升職工的安全意識，使安全生產工作深入人心，做到人人重安全，人人懂安全。安監處經常組織突擊檢查活動，一是宣傳、教育，抓住蹬車違章人員向全礦通報、罰款，二是警示那些違章人員不要違章。另外下半年要求各單位認真做班前安全講課活動，就本班要做的工作由工程師分析那里有安全隱患，應該注意的問題，貫徹到每名職工思想中，那么工作起來就會有所警示。今后下半年安監系統將不定期的進行突擊檢查活動，并對各單位的安全大課進行檢查。

4、安全生產工作重在管理監督到位，安全管理監督是確保安全生產的重要環節

今年全礦1－7月份工程質量定級共檢查394次，合格率為99.24%，優良品率25.12%，等外品率0.76%，其中：

采煤系統檢查47次，合格率為97.88%，優良品44.68%，等外率2.12%，掘進系統檢查151次，合格率為99.34%，優良品23.17%，等外率0.66%，開拓系統檢查196次，合格率99.49%，優良品21.94%，等外品0.51%，從定級和日常檢查來看抓好質量標準化是加強安全生產的重要環節，場子質量低劣，環境就會不好，那么自然影響到安全生產。所以要加強質量的安全管理工作。

安全工作重在管理監督到位，這是確保安全生產的重要環節。作為安監工作的監察工作者要根據生產不斷發展的需求，及時發現和消除隱患，及時糾正和查處違章，實現安全監督由事后監督向事前監督、過程監督的轉變，積極將安全隱患消滅在萌芽狀態。安監系統對那些工程質量“偷工減料”現象，進行嚴厲罰款，并在全礦通報批評，扣發工程質量工資，將會促進安全狀況的好轉。

5、全面建設隊班、組長建設工程。

我礦已下發峻煤發?2013?19號文件，關于龍煤股份公司鶴 崗分公司峻德煤礦關于對跟班隊長、班組長現場安全管理暫行規定（試行）的通知，按照文件規定下半年加強現場安全生產管理，明確跟班隊長、班、組長是當班安全、生產第一責任者，在生產中，一定要擺正安全與生產的關系，真正做到不安全不生產。

班組建設培養全體職工的良好安全心態，讓班組長強化安全意識，規范操作行為，提高安全技能，從而達到充分利用人的安全意識指導安全行為，用安全行為有效控制生產事故。作業現場施工是由班組完成，因此班組這個小的團體組成了整個的整體，如果在這個小團體中發揮好的積極作用，那么全礦的安全狀況就會好轉。并制定相應的規章制度，好的班組獎勵，出事故的班組進行處罰。

6、“以人為本”是核心，堅持以人為本，樹立人本理念是 創建安全文化的核心。

在今后的安全工作中要堅持以人為本。安全文化建設是預防事故的“人因工程”，以提高勞動者安全素質為主要任務。井下作業現場點多線長，環境復雜，因此心態安全文化是安全文化建設的基礎和前提，最能體現人本思想。無論是管理者還是操作者，只有心態安全，才會有行為安全；只有行為安全，才能保證安全制度落到實處。追求健康是人皆有之的基本需求，但為什么還存在“三違”現象屢禁不止的情況呢？關鍵問題就是沒有樹立正確的安全理念！比如說，有的單位管理者為追求生產任務，在安全管理的行為導向上，迫使或誘發本單位職工拼任務、拼體力，違章冒險蠻干；再比如，“我要安全”本來應是職工的內在需要，可現在卻變成了管理者強迫被管理者必須完成的一項硬性指標……錯誤觀念不破除，正確安全理念不樹立，安全文化建設就是竹籃打水。以往的安全教育大多是“我說你聽”，不是大道理滿堂灌，就是家長式的訓斥。解決安全教育入心入腦的問題，一定要注重情感投入，“于細微之處見真情”。如采取為職工過生日、送警句、交心談心等親情教育法，不失時機、潛移默化地向職工宣傳安全思想；充分發揮親情的感染作用，筑牢安全第二道防線，那么安全狀況就會有很好的轉變。

總之安全工作要自我凈化、自我完善、自我革新、自我提高，一切從實際出發系統學習孫成坤、呂新華關于“群眾路線教育實踐活動”的講話精神，貫徹到安全工作中去，堅決貫徹執行礦黨委的礦行政的決定，認真查找存在的突出問題，深入分析原因，總結經驗教訓，提出解決問題的思路舉措和辦法；進一步轉變工 作作風，提高工作效率。認真開展隱患排查治理，做到排查隱患治理隱患不留后患，對存在重大安全隱患的隊組，明確監管責任人，做到掛牌督辦，確保隱患治理工作的落實。建立安全隱患排查治理臺帳，把排查的安全隱患逐一建檔，做到安全隱患有登記，落實整改有措施，檢查督導有記錄，隱患銷號有驗收，做到安全隱患治理不留盲區，不留死角，形成安全隱患排查治理長效機制。各單位要以隱患排查治理為契機，規范安全管理，實現隱患登記、整改、回查、銷號的全過程管理，分析近年來事故安全，吸取教訓，舉一反三，提高發現問題及解決矛盾和問題的能力，提升安全管理水平，使安全生產長效機制落到實處，把下半年的工作做好。

2013-8-17，

第五篇：總結經驗教訓

總結經驗教訓

成功固然有方法，失敗必然有原因。一個人在追求成功的同時，免不了會遭受到許許多多的挫折和失敗。曾經努力地去奮斗但結果卻失敗了，這也許是人生的最大悲劇。除了少數的成功者之外，絕大多數人都遭受過失敗或正在失敗。在這里，除了要對自己所選擇的目標有強烈的信心、明確的目標，堅韌不拔的毅力......外，而必須懂得對失敗的原因加以分析、總結，只有這樣，才能避免下次重蹈覆轍。古語有云：失敗乃成功之母。現如今又有歌唱到：不經歷風雨哪能見彩虹，沒有人能隨隨便便成功。可見失敗是常有的事，就像我們小時候學走路，跌倒是常有的事。看看現在的我們哪個不是健步如飛。所以失敗并不可怕，恰恰相反，失敗卻是我們成功路上的良師益友。沒有這一次的跌倒，哪有下一次的穩健。所以我們不要懼怕失敗，就像我們從來不懼怕跌倒一樣。不要因為一次的失敗而放棄夢想。就像我們沒有因為一次的跌倒而放棄走路。只要你正確對待失敗，對失敗的原因認真的做好分析、總結。總結經驗教訓，在從新來過，那么我相信成功就只是早晚的事了。

大多數人經歷過失敗，或者正在經歷失敗。為什么成功的卻只有極少數呢，原因很簡單，我們通常在經歷過一次失敗后，便灰心喪氣，給自己找一個很好的理由便就此放棄了。從來沒有認真的對過去的失敗認真的分析總結，又或許我們失敗了，我們也分析了總結了，再做，還是失敗。于是更加冠冕堂皇的放棄。但是，成功哪有這么容易。正如前面的歌所唱的，沒有人能隨隨便便成功。要知道在通往成功的道路上是充滿荊棘的。我們只有踏平所有的荊棘才能看清通往成功的道路。所以我們要不斷的總結經驗教訓，失敗一次分析一次，失敗一次，總結一次。只要我們每次失敗都能進步一點一點，那我們就能往成功走近一點點。只要我們堅持不懈，我相信我們終有抵達成功的一天。

正如我們現在所生活的文明社會，不也是一步一步總結歷史的經驗教訓而走過來的嗎？所以對我們來說，失敗是一筆巨大的經驗財富，只要我們一點一點的總結，積少成多，運用我們失敗的經驗也終究會走上一條通往成功的大道。