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《生物制藥技術(shù)》實驗指導(dǎo)-實驗一

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第一篇:《生物制藥技術(shù)》實驗指導(dǎo)-實驗一

《生物制藥技術(shù)》實驗指導(dǎo)

實驗一 金霉素鏈霉菌培養(yǎng)基的制備(驗證型)

實驗?zāi)康模?/p>

1、學(xué)會培養(yǎng)基的配制

2、掌握滅菌方法。實驗原理:

金霉素鏈霉菌(Streptomyces aureofaciens)亦稱“金色鏈霉菌”,放線菌門(Actinobacteria),放線菌綱(Actinobacteria),放線菌目(Actinomycetales),鏈霉菌科(Streptomycetaceae),鏈霉菌屬(Streptomyces)。在固體培養(yǎng)基上產(chǎn)生金色色素,故名。其菌落為草帽型, 菌落直徑一般為3~5毫米, 表面較平坦, 中間有隆起。菌落開始為白色,長孢子后變青色。在顯微鏡下可以看到短桿狀的菌絲。抗菌素工業(yè)上用以生產(chǎn)金霉素。

放線菌是一類介于細菌與真菌之間的單細胞微生物。放線菌在土壤中分布最多,大多數(shù)生活在含水量較低、有機質(zhì)豐富和微堿性的土壤中。多數(shù)情況下,泥土中散發(fā)出的“泥腥味”就是由放線菌中鏈霉菌產(chǎn)生的土腥素造成的。放線菌大都好氧,屬于化能異養(yǎng),菌絲纖細,分枝,常從一個中心向周圍輻射生長。因其生長具輻射狀,故名放線菌。放線菌能像真菌那樣形成分枝菌絲,并在菌絲末端產(chǎn)生外生的分生孢子,有些種類甚至形成孢子囊,因而曾被誤認是真菌。但其菌落較小而致密,不易挑取。不少菌種在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)和工業(yè)上廣泛應(yīng)用,可產(chǎn)生抗菌素,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)和分離出的由放線菌產(chǎn)生的抗生素多達4 000多種,其中,有50多種抗生素已經(jīng)廣泛地得到應(yīng)用,如鏈霉素、紅霉素、土霉素、四環(huán)素、金霉素、卡那霉素、氯霉素等用于臨床治療人的多種疾病;有些可生產(chǎn)蛋白酶、葡萄糖異構(gòu)酶;有的用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn),如滅瘟素、井岡霉素、慶豐霉素等。

四環(huán)素類抗生素是由鏈霉菌生產(chǎn)或經(jīng)半合成制取的一類廣譜抗生素。抗菌譜極廣,包括革蘭氏陽性和陰性菌、立克次體、衣原體、支原體和螺旋體。品種主要包括金霉素、四環(huán)素和土霉素。四環(huán)素早在1948年即開始用于臨床,至今已有50余年歷史。現(xiàn)在四環(huán)素已被收入中國藥典2005版,還被收入美國、英國、日本等許多國家的藥典。上世紀70~80年代四環(huán)素產(chǎn)銷處于全盛時期,我國有上百家企業(yè)生產(chǎn),臨床用量很大。多年來由于四環(huán)素類的廣泛應(yīng)用,臨床常見病原菌對金霉素耐藥現(xiàn)象嚴重。1950年,國外有報道四環(huán)素族藥物引起牙著色,病因是在牙的發(fā)育礦化期服用四環(huán)素族藥物,可被結(jié)合到牙組織內(nèi),使牙著色。四環(huán)素還可在母體通過胎盤引起乳牙著色。其后又后續(xù)報道四環(huán)素沉積于牙、骨骼以至指甲等,而且還能引起釉質(zhì)發(fā)育不全。在這方面,國內(nèi)直至70年代中期方引起注意。自20世紀80年代后期起,因細菌耐藥性增加以及新的抗生素大量上市等原因,四環(huán)素產(chǎn)銷逐漸萎縮,市場疲軟。因為副作用大,只外用,用于治療結(jié)膜炎、沙眼。材料、試劑和器材: 試劑:

NaBr母液(100 g/L)KCl母液(100 g/L)

M-促進劑母液(2.5 g/L)器材:

1ml移液槍;不銹鋼鍋;電爐;臺秤、天平其它物品:

蒸餾水、250ml三角瓶、500ml三角瓶、鑰匙、燒杯、玻璃棒、量筒、紗布、剪刀、棉花塞、報紙、線繩、皮筋、記號筆、1.5mL離心管、1ml移液槍頭、槍頭盒 實驗步驟: 1.種子培養(yǎng)基

種子培養(yǎng)基(g/L):可溶性淀粉40,黃豆餅粉20,酵母粉5,蛋白胨5,CaCO3 4,(NH4)2SO4 3,MgSO4·7H2O 0.25,KH2PO4 0.25。

先稱取黃豆餅粉20g,單獨煮沸10分鐘,加入少量涼水降溫,4層紗布壓榨取汁,與其它稱好的各成分混合,定容至1L。

每50ml分裝到250ml三角瓶中,每組2瓶。2.定向發(fā)酵培養(yǎng)基

發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L):可溶性淀粉100,黃豆餅粉40,蛋白胨15,CaCO3 5,(NH4)2SO4 3,酵母粉2.5,MgSO4·7H2O 0.25,α—淀粉酶0.1。

配制方法同種子培養(yǎng)基,配好后分裝到500ml三角瓶中,每瓶100ml,分別加入如下成分,比較它們對四環(huán)素產(chǎn)量的影響:

(1)對照(不加其他成分);

(2)加入NaBr母液至終濃度為2g/L;(3)加入KCl母液至終濃度為2g/L;

(4)加入NaBr母液至終濃度為2g/L及M-促進劑母液至終濃度為0.025g/L。每兩組配一套。3.滅菌

將封好口的培養(yǎng)基121℃滅菌30min。同時滅1ml 剪口移液槍頭、1.5mL離心管。(總過程:稱量——溶化——定容——分裝——封口——滅菌)注意事項:

1.黃豆餅粉煮沸取汁。

2.培養(yǎng)基封口最好用8層紗布或棉花塞,最好不用橡膠塞,以增加透氣性。3.滅菌時鍋內(nèi)要補足水分。由于滅菌鍋較大,升溫排氣一定要充分(10min)。補充閱讀:

工業(yè)發(fā)酵中利用生產(chǎn)菌發(fā)酵得出最終產(chǎn)物是一個逐級放大的過程,各個不同的階段對于營養(yǎng)成分的要求也各有特點,根據(jù)發(fā)酵不同階段的要求,培養(yǎng)基可分為孢子培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基三種。

孢子培養(yǎng)基孢子培養(yǎng)基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養(yǎng)基,對這種培養(yǎng)基的要求是能使菌體迅速生長,產(chǎn)生較多優(yōu)質(zhì)的孢子,并要求這種培養(yǎng)基不易引起菌種發(fā)生變異。所以對孢子培養(yǎng)基的基本配制要求是:第一,營養(yǎng)不要太豐富(特別是有機氮源),否則不易產(chǎn)孢子。如灰色鏈霉在葡萄糖-硝酸鹽-其它鹽類的培養(yǎng)基上都能很好地生長和產(chǎn)孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只長菌絲而不長孢子。第二,所用無機鹽的濃度要適量,不然也會影響孢子量和孢子顏色。第三,要注意孢子培養(yǎng)基的pH和濕度。生產(chǎn)上常用的孢子培養(yǎng)基有:麩皮培養(yǎng)基、小米培養(yǎng)基、大米培養(yǎng)基、玉米碎屑培養(yǎng)基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養(yǎng)基。大米和小米常用作霉菌孢子培養(yǎng)基,因為它們含氮量少,疏松、表面積大,所以是較好孢子培養(yǎng)基。

種子培養(yǎng)基種子培養(yǎng)基是供孢子發(fā)芽、生長和大量繁殖菌絲體,并使菌體長得粗壯,成為活力強的“種子”。所以種子培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達到較高的溶解氧,供大量菌體生長繁殖。種 2 子培養(yǎng)基的成分要考慮在微生物代謝過程中能維持穩(wěn)定的pH,其組成還要根據(jù)不同菌種的生理特征而定。一般種子培養(yǎng)基都用營養(yǎng)豐富而完全的天然有機氮源,因為有些氨基酸能刺激孢子發(fā)芽。但無機氮源容易利用,有利于菌體迅速生長,所以在種子培養(yǎng)基中常包括有機及無機氮源。最后一級的種子培養(yǎng)基的成分最好能較接近發(fā)酵培養(yǎng)基,這樣可使種子進入發(fā)酵培養(yǎng)基后能迅速適應(yīng),快速生長。

發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌種生長、繁殖和合成產(chǎn)物之用。它既要使種子接種后能迅速生長,達到一定的菌絲濃度,又要使長好的菌體能迅速合成需產(chǎn)物。因此,發(fā)酵培養(yǎng)基的組成除有菌體生長所必需的元素和化合物外,還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體和促進劑等。但若因生長和生物合成產(chǎn)物需要的總的碳源、氮源、磷源等的濃度太高,或生長和合成兩階段各需的最佳條件要求不同時,則可考慮培養(yǎng)基用分批補料來加以滿足。

第二篇:《生物制藥技術(shù)》實驗

《生物制藥技術(shù)》實驗指導(dǎo)

實驗一 金霉素鏈霉菌培養(yǎng)基的制備(驗證型)

實驗?zāi)康模?/p>

1、學(xué)會培養(yǎng)基的配制

2、掌握滅菌方法。實驗原理:

金霉素鏈霉菌(Streptomyces aureofaciens)亦稱“金色鏈霉菌”,放線菌門(Actinobacteria),放線菌綱(Actinobacteria),放線菌目(Actinomycetales),鏈霉菌科(Streptomycetaceae),鏈霉菌屬(Streptomyces)。在固體培養(yǎng)基上產(chǎn)生金色色素,故名。其菌落為草帽型, 菌落直徑一般為3~5毫米, 表面較平坦, 中間有隆起。菌落開始為白色,長孢子后變青色。在顯微鏡下可以看到短桿狀的菌絲。抗菌素工業(yè)上用以生產(chǎn)金霉素。

放線菌是一類介于細菌與真菌之間的單細胞微生物。放線菌在土壤中分布最多,大多數(shù)生活在含水量較低、有機質(zhì)豐富和微堿性的土壤中。多數(shù)情況下,泥土中散發(fā)出的“泥腥味”就是由放線菌中鏈霉菌產(chǎn)生的土腥素造成的。放線菌大都好氧,屬于化能異養(yǎng),菌絲纖細,分枝,常從一個中心向周圍輻射生長。因其生長具輻射狀,故名放線菌。放線菌能像真菌那樣形成分枝菌絲,并在菌絲末端產(chǎn)生外生的分生孢子,有些種類甚至形成孢子囊,因而曾被誤認是真菌。但其菌落較小而致密,不易挑取。不少菌種在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)和工業(yè)上廣泛應(yīng)用,可產(chǎn)生抗菌素,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)和分離出的由放線菌產(chǎn)生的抗生素多達4 000多種,其中,有50多種抗生素已經(jīng)廣泛地得到應(yīng)用,如鏈霉素、紅霉素、土霉素、四環(huán)素、金霉素、卡那霉素、氯霉素等用于臨床治療人的多種疾病;有些可生產(chǎn)蛋白酶、葡萄糖異構(gòu)酶;有的用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn),如滅瘟素、井岡霉素、慶豐霉素等。

四環(huán)素類抗生素是由鏈霉菌生產(chǎn)或經(jīng)半合成制取的一類廣譜抗生素。抗菌譜極廣,包括革蘭氏陽性和陰性菌、立克次體、衣原體、支原體和螺旋體。品種主要包括金霉素、四環(huán)素和土霉素。器材:

1ml移液槍;鋁鍋;電爐 試劑:

NaBr母液(100 g/L)KCl母液(100 g/L)

M-促進劑母液(2.5 g/L)實驗步驟: 1.種子培養(yǎng)基

種子培養(yǎng)基(g/L):可溶性淀粉40,黃豆餅粉20,酵母粉5,蛋白胨5,CaCO3 4,(NH4)2SO4 3,MgSO4·7H2O 0.25,KH2PO4 0.25。

先稱取黃豆餅粉20g,單獨煮沸10分鐘,加入少量涼水降溫,4層紗布壓榨取汁,與其它稱好的各成分混合,定容至1L。

每50ml分裝到250ml三角瓶中,每組2瓶。2.定向發(fā)酵培養(yǎng)基

發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L):可溶性淀粉100,黃豆餅粉40,蛋白胨15,CaCO3 5,酵母粉2.5,(NH4)2SO4 3,MgSO4·7H2O 0.25,α—淀粉酶0.1。

配制方法同種子培養(yǎng)基,配好后分裝到500ml三角瓶中,每瓶100ml,分別加入如下成分,比較它們對四環(huán)素產(chǎn)量的影響:

(1)對照(不加其他成分);

(2)加入NaBr母液至終濃度為2g/L;(3)加入KCl母液至終濃度為2g/L;

(4)加入NaBr母液至終濃度為2g/L及M-促進劑母液至終濃度為0.025g/L。每兩組配一套。3.滅菌

將封好口的培養(yǎng)基121℃滅菌30min。同時滅1ml 剪口移液槍頭、1.5mL離心管。(總過程:稱量——溶化——定容——分裝——封口——滅菌)注意事項:

1.黃豆餅粉煮沸取汁。

2.培養(yǎng)基封口最好用8層紗布或棉花塞,最好不用橡膠塞,以增加透氣性。3.滅菌時鍋內(nèi)要補足水分。由于滅菌鍋較大,升溫排氣一定要充分(10min)。補充閱讀:

工業(yè)發(fā)酵中利用生產(chǎn)菌發(fā)酵得出最終產(chǎn)物是一個逐級放大的過程,各個不同的階段對于營養(yǎng)成分的要求也各有特點,根據(jù)發(fā)酵不同階段的要求,培養(yǎng)基可分為孢子培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基三種。

孢子培養(yǎng)基孢子培養(yǎng)基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養(yǎng)基,對這種培養(yǎng)基的要求是能使菌體迅速生長,產(chǎn)生較多優(yōu)質(zhì)的孢子,并要求這種培養(yǎng)基不易引起菌種發(fā)生變異。所以對孢子培養(yǎng)基的基本配制要求是:第一,營養(yǎng)不要太豐富(特別是有機氮源),否則不易產(chǎn)孢子。如灰色鏈霉在葡萄糖-硝酸鹽-其它鹽類的培養(yǎng)基上都能很好地生長和產(chǎn)孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只長菌絲而不長孢子。第二,所用無機鹽的濃度要適量,不然也會影響孢子量和孢子顏色。第三,要注意孢子培養(yǎng)基的pH和濕度。生產(chǎn)上常用的孢子培養(yǎng)基有:麩皮培養(yǎng)基、小米培養(yǎng)基、大米培養(yǎng)基、玉米碎屑培養(yǎng)基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養(yǎng)基。大米和小米常用作霉菌孢子培養(yǎng)基,因為它們含氮量少,疏松、表面積大,所以是較好孢子培養(yǎng)基。

種子培養(yǎng)基種子培養(yǎng)基是供孢子發(fā)芽、生長和大量繁殖菌絲體,并使菌體長得粗壯,成為活力強的“種子”。所以種子培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達到較高的溶解氧,供大量菌體生長繁殖。種子培養(yǎng)基的成分要考慮在微生物代謝過程中能維持穩(wěn)定的pH,其組成還要根據(jù)不同菌種的生理特征而定。一般種子培養(yǎng)基都用營養(yǎng)豐富而完全的天然有機氮源,因為有些氨基酸能刺激孢子發(fā)芽。但無機氮源容易利用,有利于菌體迅速生長,所以在種子培養(yǎng)基中常包括有機及無機氮源。最后一級的種子培養(yǎng)基的成分最好能較接近發(fā)酵培養(yǎng)基,這樣可使種子進入發(fā)酵培養(yǎng)基后能迅速適應(yīng),快速生長。

發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌種生長、繁殖和合成產(chǎn)物之用。它既要使種子接種后能迅速生長,達到一定的菌絲濃度,又要使長好的菌體能迅速合成需產(chǎn)物。因此,發(fā)酵培養(yǎng)基的組成除有菌體生長所必需的元素和化合物外,還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體和促進劑等。但若因生長和生物合成產(chǎn)物需要的總的碳源、氮源、磷源等的濃度太高,或生長和合成兩階段各需的最佳條件要求不同時,則可考慮培養(yǎng)基用分批補料來加以滿足。

實驗二 金霉素鏈霉菌的定向發(fā)酵(驗證型)

實驗?zāi)康模?/p>

1、學(xué)習和掌握無菌操作技術(shù)。

2、掌握定向發(fā)酵四環(huán)素的原理。實驗原理:

定向發(fā)酵是指通過改變培養(yǎng)基組分(加入某些物質(zhì))改變微生物代謝途徑,使發(fā)酵按主觀要求產(chǎn)生較多的產(chǎn)物。

金霉素、四環(huán)素和土霉素,它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)極為相似:

R1 R2 Cl H H OH H H

金霉菌原是產(chǎn)生金霉素(Chlortetracycline)的菌種,但因金霉素比四環(huán)素只多一個氯離子,所以只要在發(fā)酵液中加入某些物質(zhì),阻止氯離子進入四環(huán)素分子,從而使菌種產(chǎn)生較多的四環(huán)素。另外,金色鏈霉菌在30℃以下時,合成金霉素的能力較強;當溫度超過35℃時則只合成四環(huán)素。

本實驗中,利用溴離子在生物合成過程中對氯離子有競爭性抑制劑作用的原理,以及加入2-硫醇基苯并噻唑(即M—促進劑,分子式:C7H5NS2,通常作為橡膠硫化促進劑)抑制氯化酶的作用,從而增加四環(huán)素的產(chǎn)量。材料和試劑:

金霉素鏈霉菌:購于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(菌種保藏號:CGMCC4.1043;訂單號20111133 550元)。實驗步驟:

前期準備工作:配制斜面培養(yǎng)基(可選,1號培養(yǎng)基由菌種保藏中心提供)

1、麩皮36.0 g,K2HPO4 0.2 g,MgSO4·7H2O 0.1 g,(NH4)2HPO4 3 g,瓊脂 15~20 g,定容至1L,pH 7。

2、可溶性淀粉20g,KN O3 1g,K2HPO4 0.5g,MgSO4·7H2O 0.5g,NaCl

0.5g,F(xiàn)eSO4·7H2O 0.01g,定容至1L,pH 7.2~7.5。

1、制備斜面孢子:將保藏的菌種的比例接種于液體培養(yǎng)基中(不加瓊脂的斜面培養(yǎng)基),28℃下200 r/min振蕩培養(yǎng),將活化1d后的金霉素鏈霉菌種接入斜面培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)5~7天,金霉素 土霉素 四環(huán)素

待孢子長成灰色,于4℃冰箱中保藏。

2、種子培養(yǎng):在斜面上用接種鏟挑取1cm2左右生長良好的菌體接入裝有50ml四環(huán)素種子培養(yǎng)基的250ml錐形瓶中,230 r/min、28℃下振蕩培養(yǎng)20~24h。

3、發(fā)酵培養(yǎng):以剪口移液槍頭取10 ml種子液接入裝有100ml發(fā)酵培養(yǎng)液的500ml錐形瓶中(注意:同一處理組用同一瓶種子液接種),230 r/min、28℃下振蕩培養(yǎng)5 d。用于后面的測定效價和薄層層析實驗。

四環(huán)素的提取和精制(選作)

一、實驗?zāi)康?.掌握沉淀法精制四環(huán)素的原理、方法和基本操作技術(shù)。2 .熟悉pH 的控制與產(chǎn)量、質(zhì)最的關(guān)系。

二、實驗原理

四環(huán)素為兩性化合物,其等電點為5.4。當溶液pH 等于等電點時,四環(huán)素呈游離堿形式,從水溶液中沉淀出來。利用四環(huán)素的這一性質(zhì),可將四環(huán)素從發(fā)酵液中提取出來。

在連續(xù)結(jié)晶過程中,pH 的高低對產(chǎn)量、質(zhì)量都有一定的影響。四環(huán)素的等電點為5.4 , 在pH 4.5~7.5 之間,游離堿在水中的溶解度乎不變。若pH 控制在接近等電點時,沉淀結(jié)品雖然比較完全,收率也高,但此時會有大量雜質(zhì)同時析出,影響產(chǎn)品的色澤和質(zhì)量;若pH控制得較低一些,對提高產(chǎn)品質(zhì)量雖有好處,但沉淀結(jié)晶不夠完全,收率會低些,影響產(chǎn)量。因此,在選擇沉淀結(jié)晶pH 時,就必須同時考慮到產(chǎn)量、質(zhì)量的效果。在正常情況下,工藝上控制pH4.8左右。若沉淀結(jié)晶質(zhì)量較差,pH可控制得稍低些,有利于結(jié)晶質(zhì)量的改善,但不能低于4.5,否則收率低,影響產(chǎn)量。

四環(huán)素的提取和精制分酸化、純化、過濾、結(jié)晶和淋洗五個步驟。

(1)酸化加入草酸,使積聚在菌絲體內(nèi)的四環(huán)素盡可能多地成為可溶性鹽,而轉(zhuǎn)入液相。四環(huán)素在酸性條件下較隱定,且草酸與鈣離子反應(yīng)生成不溶性的草酸鈣,析出的草酸鈣能促進蛋白質(zhì)的凝固,提高濾液的純度和過濾速度。

(2)純化 純化劑(黃血鹽、硫酸鋅和硼砂)與草酸一起混合作用,可以除去發(fā)酵液中大量酸溶性蛋白質(zhì)、鐵離子和其他多種離子色素以及其他雜質(zhì),從而使濾液純凈,并減少發(fā)酵液的粘度,利于過濾。其中純化劑黃血鹽能與發(fā)酵液中的鐵離子作用,生成普魯士鹽而除去鐵離子。

(3)過濾 通過過濾,使四環(huán)素溶液與菌絲體以及其他雜質(zhì)分離,再經(jīng)過復(fù)濾、精濾,進一步提高濾液質(zhì)址,得到澄清的濾液。

(4)結(jié)晶

將濾液的pH調(diào)節(jié)到等電點,在較低溫度下析出純凈的四環(huán)素。

(5)淋洗 雖然發(fā)酵液經(jīng)酸化后大部分四環(huán)素已溶入溶液中,但仍有部分殘存在菌渣中,且過濾不可能十分徹底。所以用酸水淋洗,以提高收率。

三、實驗試劑及儀器 1.試劑

300 g/L草酸溶液、200 g/L 黃血酸鉀溶液、200 g/L 硫酸鋅溶液、200 g/L 硼砂溶液、濃氮水、3 g/L草酸溶液。2.儀器

1000 mL 燒杯、攪拌器、布氏漏斗、抽濾瓶、濾紙、量筒、pH 試紙、酸度計、溫度計、水泵、表面皿。

四、實驗步驟 1.酸化

取600ml 四環(huán)素發(fā)酵液,置裝有機械攪拌的1000 mL燒杯中,開始攪拌,待發(fā)酵液溫度降至20 ℃ 以下時,緩緩加入草酸溶液,草酸加入量為27~35g/L,并不時測定發(fā)酵液的pH。當發(fā)酵液pH為1.7~1.8 時(用酸度計測定),酸化完畢。2.純化

在酸化反應(yīng)的燒壞中,按酸化的發(fā)酵液凈體積,攪拌下依次緩慢加入純化劑(黃血酸鉀溶液、硫酸鋅溶液、硼砂溶液),每種溶液終濃度均為2 g/L,加入時間間隔15min,以便作用完全。3.過濾

將布氏漏斗裝于抽濾瓶上,鋪好濾紙,開啟水泵,用少量水將濾紙濕潤,并使濾紙緊貼布氏漏斗。將純化后的溶液緩緩倒入布氏漏斗,過濾濾液應(yīng)完全澄清,否則必須重新過濾,直到完全澄清。4.結(jié)晶

將抽濾瓶中的濾液倒入裝有機械攪拌的1000 mL燒杯中,開動攪拌,并用水或冰水冷卻。待濾液溫度冷至5 ~ 7 ℃ 時,徐徐加入經(jīng)過濾的濃氨水,并隨時用pH 試紙測定溶液的pH,當pH 達到4.6 ~4.8 時(用酸度計測定),停止加入氨水,并繼續(xù)攪拌2 h,使結(jié)晶完全。

裝好布氏漏斗后,將上述液緩緩倒人布氏漏斗,過濾。結(jié)晶液全部倒入后,抽干。用35~45 ℃ 的熱水充分洗滌粗堿3 次,抽干,再用0.3 %草酸洗滌,抽干。

五、注意事項

1.純化攪拌時間不應(yīng)少于2h,溶液溫度保持在15 ℃ 以下。2.pH 要調(diào)準確。

六、結(jié)果與討論 .計算四環(huán)素的得率。.討論影響四環(huán)素得率和純度的因素。

實驗三 四環(huán)素、金霉素的薄層層析鑒定(驗證型)

實驗?zāi)康模?/p>

掌握薄層層析的原理,四環(huán)素族抗生素的定性鑒定方法。實驗原理:

層析(色譜,chromatograpby)是相當重要、且相當常見的一種技術(shù),在把微細分散的固體或是附著于固體表面的液體作為固定相,把液體(與上述液體不相混合的)或氣體作為移動相的系統(tǒng)中(根據(jù)移動相種類的不同,分為液相層析和氣相層析二種),使試料混合物中的各成分邊保持向兩相分布的平衡狀態(tài)邊移動,利用各成分對固定相親和力不同所引起的移動速度差,將它們彼此分離開的定性與定量分析方法,稱為層析,亦稱色譜法。用作固定相的有硅膠、活性炭、氧化鋁、離子交換樹脂、離子交換纖維等,或是在硅藻土和纖維素那樣的無活性的載體上附著適當?shù)囊后w。將作為固定相的微細粉末狀物質(zhì)裝入細長形圓筒中進行的層析稱為柱層析(column chromatography),在玻璃板上涂上一層薄而均的支持物(硅膠、纖維素和淀粉等)作為固定相的稱為薄層層析(thin layer chromatography),或者用濾紙作為固定相的紙上層析。層析根據(jù)固定相與溶質(zhì)(試料)間親和力的差異分為吸附型、分配型、離子交換型層析等類型。但這并不是很嚴格的,有時常見到其中間類型。此外,近來 5 也應(yīng)用親和層析,即將與基質(zhì)類似的化合物(通常為共價鍵)結(jié)合到固定相上,再利用其特異的親和性沉淀與其對應(yīng)的特定的酶或蛋白質(zhì)。

分配層析在支持物上形成部分互溶的兩相系統(tǒng)。一般是水相和有機溶劑相。常用支持物是硅膠、纖維素和淀粉等親水物質(zhì),這些物質(zhì)能儲留相當量的水。被分離物質(zhì)在兩相中都能溶解,但分配系數(shù)不同,展層時就會形成以不同速度向前移動的區(qū)帶。一種溶質(zhì)在兩種互不混溶的溶劑系統(tǒng)中分配時,在一定溫度下達到平衡后,溶質(zhì)在固定相和流動相溶劑中的濃度之比為一常數(shù),稱為分配系數(shù)。當欲被分離的各種物質(zhì)在固定相和流動相中的分配系數(shù)不同時,它們就能被分離開。分配系數(shù)大的移動快(阻力小)。

薄層層析是以薄層材料為支持物,在密閉容器中,樣品在其上展開。當斑點不易為肉眼觀察時,可利用適當?shù)娘@色劑,或通過紫外燈下產(chǎn)生熒光的方法進行觀察。通過這種展開操作,各成分呈斑點狀移動到各自的位置上,再根據(jù)Rf值的測定進行鑒定。薄層色譜法具有分離與鑒定的雙重功能,通過薄層圖譜與對照品的圖譜相比較,除了能鑒出有效成分或特征成分外,還以完整的色譜圖作為一個整體對制劑加以鑒別。薄層色譜分析法由于簡便、快速,能有效地、直觀地反映藥品地真實性、穩(wěn)定性,現(xiàn)已成為藥物制劑的鑒別和質(zhì)量控制的行之有效的方法之一。薄層層析是鑒別抗生素的方法之一,層析后進行顯色,并繪制層析圖譜,根據(jù)層析圖譜對抗生素進行鑒定。本實驗以四環(huán)素、金霉素標準品溶液作為對照對發(fā)酵液進行鑒定。

儀器和設(shè)備:

1.玻璃層析缸

2.層析板(薄層層析硅膠煙臺芝罘區(qū)黃務(wù)硅膠開發(fā)實驗廠有售)3.毛細玻璃管或微量注射器 4.紫外投射儀 試劑:

四環(huán)素、金霉素標準品 用0.01M鹽酸溶解定容,4℃冰箱保存(可使用7天)。展開劑:正丁醇:醋酸:水(4∶1∶5)2L。凡士林 實驗步驟:

1.層析板處理

層析板105℃烘烤過夜,均勻噴上0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(PH4.5),于空氣中晾干、備用。

2.點樣

選取兩種定向發(fā)酵液加草酸酸化至pH為1.5~2.0,取上清約l.2 ml于1.5ml離心管中,10000 rpm,5min,備用。在距層析板底邊2.5~3 cm起始線上(用鉛筆劃線,做出點樣點記號),用毛細玻璃管在薄層層析板上點四環(huán)素標準品和金霉素標準品溶液3次,發(fā)酵液上清點8~10次,點樣點不大于0.4cm,每次都要吹干后再點。(一般效價在1000u/ml以上點3次,500~1000u/ml點4次,200~500u/ml點5次)。剩余的發(fā)酵液上清于4℃冰箱保存。

3.層析(展開)

用正丁醇:醋酸:水(4∶1∶5)的上相作展開劑。層析前需預(yù)先用展開劑預(yù)平衡層析缸,可在缸中倒入2cm高的展開劑,密閉,一般保持15-30分鐘。然后將層析板置于盛有展開劑的層析缸中,在室溫下展層6~8h(與溫度有關(guān))。封口不嚴可涂抹凡士林。

4.熒光顯影

待溶劑前沿展至板的一半以上時將層析板取出,標出溶劑前沿,于通風櫥中晾干,用氨水熏數(shù)秒鐘后即可在紫外燈下顯影,畫出黃色斑點,分別算出Rf值。(四環(huán)素標準品慢和金霉素標準品快)

無水四環(huán)素在波長365nm下顯黃色熒光,根據(jù)與標準對照可定性測定。注意事項:

因四環(huán)素能和鈣鹽形成不溶性化合物,故發(fā)酵液中的四環(huán)素濃度不高,預(yù)處理時通常用草酸將發(fā)酵液酸化至pH=1.5~2.0,使四環(huán)素盡量溶解。

點樣時必須注意勿損傷薄層表面。要控制好點樣量,樣品太少,斑點不清楚,難以觀察,但樣品量太多時往往出現(xiàn)斑點太大或拖尾現(xiàn)象。

若因樣品溶液太稀,可重復(fù)點樣,但應(yīng)待前次點樣的溶劑揮發(fā)后方可重新點樣,以防樣點過大,造成拖尾、擴散等現(xiàn)象,而影響分離效果。

作展開劑中極少量強極性溶劑(0.5%)或pH值的改變可顯著改善拖尾現(xiàn)象。

實驗四 四環(huán)素的效價測定(綜合型)

實驗?zāi)康模?/p>

1、了解抗生素效價的表示方法

2、學(xué)習抗生素的測定方法 實驗原理:

實驗利用比色法測定四環(huán)素和金霉素的效價。效價(titer或titre)是評價抗生素效能的標準,它代表抗生素對微生物的抗菌效力,也是衡量發(fā)酵液中抗生素含量的尺度,人們以1μg金霉素或四環(huán)素標準品為1個單位,0.6μg青霉素G鈉鹽為1個單位。

四環(huán)素和金霉素在酸性條件下,加熱,可產(chǎn)生黃色的脫水金霉素和脫水四環(huán)素,其色度與含量成正比。

在堿性條件下,四環(huán)素較穩(wěn)定,而金霉素則生成無色的異金霉素:

根據(jù)上述原理,可以在酸性條件下,利用比色法測定四環(huán)素、金霉素混合液的總效價;而四環(huán)素效價的測定可在堿性條件下,使金霉素生成無色的異金霉素,然后再在酸性條件下,使四環(huán)素生成黃色的脫水四環(huán)素,經(jīng)比色測得四環(huán)素效價。總效價與四環(huán)素效價二者之差即為金霉素的效價。本實驗只測定四環(huán)素的效價。

因四環(huán)素能和鈣鹽形成不溶性化合物,故發(fā)酵液中的四環(huán)素濃度不高,預(yù)處理時通常用草酸將發(fā)酵液酸化至pH=1.5~2.0,使四環(huán)素盡量溶解。發(fā)酵液中,由于雜質(zhì)的干擾,將影響比色的正確性,因此加入乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA)作為螯合劑,掩飾金屬離子的干擾,改變四環(huán)素脫水條件(降低酸度或延長加熱時間),可以減少雜質(zhì)對比色反應(yīng)的干擾。實驗步驟:

取上述保存的處理發(fā)酵液上清l ml(效價約為1000U/m1)于50ml容量瓶中,加入lml濃度為lg/l00ml EDTA溶液,加蒸餾水9ml,再加入lml濃度為3mol/L的NaOH,在20~25℃下保溫15min后,加入2.5ml濃度為6mol/L的HCl,煮沸15min后,冷卻,稀釋至刻度,在分光光度計上于440nm處測定其吸光度值。(紫外為100-390nm;可見光為380-780nm,根據(jù)波長選擇石英比色池或玻璃比色池,否則玻璃對于紫外光有吸收)

對照樣品(不加誘導(dǎo)劑)的前處理方法與上述步驟一樣,只是在加入HCl后,不加熱,稀釋至刻度,作為測定樣品的空白對照, 調(diào)零。

四環(huán)素標準品(1000U/ml)取1ml于50ml容量瓶中,加1ml濃度為6mol/L的HCl,水浴煮沸15min后,冷卻,稀釋至50ml,380nm測吸光度。(以蒸餾水作為空白測定)

以定向發(fā)酵培養(yǎng)基中的對照組作為空白對照,測定其它三個處理組的吸光度。(有時可能因?qū)φ战M處理不當而使其它組的讀數(shù)為負值,這時可以以蒸餾水作為空白。)

計算公式:

發(fā)酵液中四環(huán)素的效價=

A發(fā)酵 A四環(huán)素標準

×四環(huán)素標準品的效價

第三篇:《生物制藥技術(shù)》實驗指導(dǎo)-實驗三、四

《生物制藥技術(shù)》實驗指導(dǎo)

實驗三 四環(huán)素、金霉素的薄層層析鑒定(驗證型)

實驗?zāi)康模?/p>

掌握薄層層析的原理,四環(huán)素族抗生素的定性鑒定方法。實驗原理:

層析(色譜,chromatograpby)是相當重要、且相當常見的一種技術(shù),在把微細分散的固體或是附著于固體表面的液體作為固定相,把液體(與上述液體不相混合的)或氣體作為移動相的系統(tǒng)中(根據(jù)移動相種類的不同,分為液相層析和氣相層析二種),使試料混合物中的各成分邊保持向兩相分布的平衡狀態(tài)邊移動,利用各成分對固定相親和力不同所引起的移動速度差,將它們彼此分離開的定性與定量分析方法,稱為層析,亦稱色譜法。用作固定相的有硅膠、活性炭、氧化鋁、離子交換樹脂、離子交換纖維等,或是在硅藻土和纖維素那樣的無活性的載體上附著適當?shù)囊后w。將作為固定相的微細粉末狀物質(zhì)裝入細長形圓筒中進行的層析稱為柱層析(column chromatography),在玻璃板上涂上一層薄而均的支持物(硅膠、纖維素和淀粉等)作為固定相的稱為薄層層析(thin layer chromatography),或者用濾紙作為固定相的紙上層析。層析根據(jù)固定相與溶質(zhì)(試料)間親和力的差異分為吸附型、分配型、離子交換型層析等類型。但這并不是很嚴格的,有時常見到其中間類型。此外,近來也應(yīng)用親和層析,即將與基質(zhì)類似的化合物(通常為共價鍵)結(jié)合到固定相上,再利用其特異的親和性沉淀與其對應(yīng)的特定的酶或蛋白質(zhì)。

分配層析在支持物上形成部分互溶的兩相系統(tǒng)。一般是水相和有機溶劑相。常用支持物是硅膠、纖維素和淀粉等親水物質(zhì),這些物質(zhì)能儲留相當量的水。被分離物質(zhì)在兩相中都能溶解,但分配系數(shù)不同,展層時就會形成以不同速度向前移動的區(qū)帶。一種溶質(zhì)在兩種互不混溶的溶劑系統(tǒng)中分配時,在一定溫度下達到平衡后,溶質(zhì)在固定相和流動相溶劑中的濃度之比為一常數(shù),稱為分配系數(shù)。當欲被分離的各種物質(zhì)在固定相和流動相中的分配系數(shù)不同時,它們就能被分離開。分配系數(shù)大的移動快(阻力小)。

薄層層析是以薄層材料為支持物,在密閉容器中,樣品在其上展開。當斑點不易為肉眼觀察時,可利用適當?shù)娘@色劑,或通過紫外燈下產(chǎn)生熒光的方法進行觀察。通過這種展開操作,各成分呈斑點狀移動到各自的位置上,再根據(jù)Rf值的測定進行鑒定。薄層色譜法具有分離與鑒定的雙重功能,通過薄層圖譜與對照品的圖譜相比較,除了能鑒出有效成分或特征成分外,還以完整的色譜圖作為一個整體對制劑加以鑒別。薄層色譜分析法由于簡便、快速,能有效地、直觀地反映藥品地真實性、穩(wěn)定性,現(xiàn)已成為藥物制劑的鑒別和質(zhì)量控制的行之有效的方法之一。薄層層析是鑒別抗生素的方法之一,層析后進行顯色,并繪制層析圖譜,根據(jù)層析圖譜對抗生素進行鑒定。本實驗以四環(huán)素、金霉素標準品溶液作為對照對發(fā)酵液進行鑒定。

材料、試劑和器材: 儀器和設(shè)備:

玻璃層析缸;層析板(薄層層析硅膠煙臺芝罘區(qū)黃務(wù)硅膠開發(fā)實驗廠有售);吹風機;紫外投射儀;離心機(1.5ml轉(zhuǎn)子)試劑:

四環(huán)素、金霉素標準品(1000U/ml)用0.1 M鹽酸溶解并稀釋定容,4℃冰箱保存(可使用7天)。

展開劑:正丁醇:醋酸:水(4∶1∶5)2L。草酸、氨水 其它物品:

1.5ml離心管、小燒杯、玻璃棒、毛細玻璃管或微量注射器、pH試紙(pH覆蓋1.0~2.0)(或酸度計)、飯盒(或大培養(yǎng)皿)、凡士林 實驗步驟:

1.層析板處理

層析板105℃烘烤過夜,均勻噴上0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(PH4.5),于空氣中晾干、備用。

2.點樣

選取兩種定向發(fā)酵液加草酸酸化至pH為1.5~2.0,取上清約l.2 ml于1.5ml離心管中,10000 rpm,5min,備用。在距層析板底邊2.5~3 cm起始線上(用鉛筆劃線,做出點樣點記號),用毛細玻璃管在薄層層析板上點四環(huán)素標準品和金霉素標準品溶液3次,發(fā)酵液上清點8~10次,點樣點不大于0.4cm,每次都要吹干后再點。(一般效價在1000u/ml以上點3次,500~1000u/ml點4次,200~500u/ml點5次)。剩余的發(fā)酵液上清于4℃冰箱保存。

3.層析(展開)

用正丁醇:醋酸:水(4∶1∶5)的上相作展開劑。層析前需預(yù)先用展開劑預(yù)平衡層析缸,可在缸中倒入2cm高的展開劑,密閉,一般保持15-30分鐘。然后將層析板置于盛有展開劑的層析缸中,在室溫下展層6~8h(與溫度有關(guān))。封口不嚴可涂抹凡士林。

4.熒光顯影

待溶劑前沿展至板的一半以上時將層析板取出,標出溶劑前沿,于通風櫥中晾干,用氨水熏數(shù)秒鐘后即可在紫外燈下顯影,畫出黃色斑點,分別算出Rf值。(四環(huán)素標準品慢和金霉素標準品快)

無水四環(huán)素在波長365nm下顯黃色熒光,根據(jù)與標準對照可定性測定。注意事項:

因四環(huán)素能和鈣鹽形成不溶性化合物,故發(fā)酵液中的四環(huán)素濃度不高,預(yù)處理時通常用草酸將發(fā)酵液酸化至pH=1.5~2.0,使四環(huán)素盡量溶解。

點樣時必須注意勿損傷薄層表面。要控制好點樣量,樣品太少,斑點不清楚,難以觀察,但樣品量太多時往往出現(xiàn)斑點太大或拖尾現(xiàn)象。

若因樣品溶液太稀,可重復(fù)點樣,但應(yīng)待前次點樣的溶劑揮發(fā)后方可重新點樣,以防樣點過大,造成拖尾、擴散等現(xiàn)象,而影響分離效果。

作展開劑中極少量強極性溶劑(0.5%)或pH值的改變可顯著改善拖尾現(xiàn)象。

實驗四 四環(huán)素的效價測定(綜合型)

實驗?zāi)康模?/p>

1、了解抗生素效價的表示方法

2、學(xué)習抗生素的測定方法 實驗原理:

實驗利用比色法測定四環(huán)素和金霉素的效價。效價(titer或titre)是評價抗生素效能的標準,它代表抗生素對微生物的抗菌效力,也是衡量發(fā)酵液中抗生素含量的尺度,人們以1μg金霉素或四環(huán)素標準品為1個單位,0.6μg青霉素G鈉鹽為1個單位。

四環(huán)素和金霉素在酸性條件下,加熱,可產(chǎn)生黃色的脫水金霉素和脫水四環(huán)素,其色度與含量成正比。

在堿性條件下,四環(huán)素較穩(wěn)定,而金霉素則生成無色的異金霉素:

根據(jù)上述原理,可以在酸性條件下,利用比色法測定四環(huán)素、金霉素混合液的總效價;而四環(huán)素效價的測定可在堿性條件下,使金霉素生成無色的異金霉素,然后再在酸性條件下,使四環(huán)素生成黃色的脫水四環(huán)素,經(jīng)比色測得四環(huán)素效價。總效價與四環(huán)素效價二者之差即為金霉素的效價。本實驗只測定四環(huán)素的效價。

因四環(huán)素能和鈣鹽形成不溶性化合物,故發(fā)酵液中的四環(huán)素濃度不高,預(yù)處理時通常用草酸將發(fā)酵液酸化至pH=1.5~2.0,使四環(huán)素盡量溶解。發(fā)酵液中,由于雜質(zhì)的干擾,將影響比色的正確性,因此加入乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA)作為螯合劑,掩飾金屬離子的干擾,改變四環(huán)素脫水條件(降低酸度或延長加熱時間),可以減少雜質(zhì)對比色反應(yīng)的干擾。材料、試劑和器材: 試劑:

EDTA lg/l00ml、NaOH 3mol/L、HCl 6mol/L、蒸餾水

鹽酸四環(huán)素標準液: 精密稱取鹽酸四環(huán)素標準品0.0410 g 于燒杯中, 用適量蒸餾水(或0.1mol/L的鹽酸溶解)溶解, 轉(zhuǎn)移至200 m l容量瓶中定容配成0.2 m g /m l的溶液。器材:

分光光度計、玻璃比色池、水浴鍋、電爐、不銹鋼鍋、擦鏡紙、50ml容量瓶(或比色管)、大燒杯、移液槍、1mL槍頭、洗耳球 實驗步驟:

取上述保存的處理發(fā)酵液上清l ml(效價約為1000U/m1)于50ml容量瓶中,加入lml濃度為lg/l00ml EDTA溶液,加蒸餾水9ml,再加入lml濃度為3mol/L的NaOH,在20~25℃ 3 下保溫15min后,加入2.5ml濃度為6mol/L的HCl,煮沸15min后,冷卻,稀釋至刻度,在分光光度計上于440nm(或380 nm)處測定其吸光度值。(紫外為100-390nm;可見光為380-780nm,根據(jù)波長選擇石英比色池或玻璃比色池,否則玻璃對于紫外光有吸收)

對照樣品(不加誘導(dǎo)劑)的前處理方法與上述步驟一樣,只是在加入HCl后,不加熱,稀釋至刻度,作為測定樣品的空白對照, 調(diào)零。

取1ml四環(huán)素標準品于50ml容量瓶中,加1ml濃度為6mol/L的HCl,水浴煮沸15min后,冷卻,稀釋至50ml,440nm(或380 nm)測吸光度。(以蒸餾水作為空白測定)

以定向發(fā)酵培養(yǎng)基中的對照組作為空白對照,測定其它三個處理組的吸光度。(有時可能因?qū)φ战M處理不當而使其它組的讀數(shù)為負值,這時可以以蒸餾水作為空白。)

計算公式:

發(fā)酵液中四環(huán)素的效價= A發(fā)酵 A四環(huán)素標準

×四環(huán)素標準品的效價

第四篇:實驗一認識現(xiàn)代教育技術(shù)

實驗一認識現(xiàn)代教育技術(shù)

1、以“教育技術(shù)”“學(xué)習資源”、“現(xiàn)代教育技術(shù)”為關(guān)鍵詞,檢索并閱讀相關(guān)內(nèi)容,進一步了解現(xiàn)代教育技術(shù)

2、以“課程整合”、“教育資源庫”、“ 中小學(xué)教師教育技術(shù)能力建設(shè)”為關(guān)鍵詞,檢索并閱讀相關(guān)內(nèi)容

3、檢索并閱讀《中小學(xué)教師教育技術(shù)能力標準(試行)》,下載。

4、檢索并閱讀《江蘇省縣(市、區(qū))教育現(xiàn)代化建設(shè)主要指標》,了解現(xiàn)代教育技術(shù)在實現(xiàn)教育信息化、教育現(xiàn)代化中的作用

5、在檢索并閱讀上述材料基礎(chǔ)上,填寫教材單元一的活動

一、活動

二、活動三的“討論與思考”

6、下載教學(xué)媒體的圖片,傳到網(wǎng)絡(luò)存儲上。

第五篇:實驗一

實驗一

實驗?zāi)康模赫莆誛IN7的操作和系統(tǒng)設(shè)置 實驗內(nèi)容:

1、在資源管理器中打開“本地磁盤(C:)”,設(shè)置所有文件及文件夾的視圖方式為“中等圖標”,并“顯示預(yù)覽窗格”。

操作提示:右擊開始-打開資源管理器-打開音樂庫 組織—布局—顯示預(yù)覽窗格

2、為“附件”菜單中的“截圖工具”創(chuàng)建桌面快捷方式

操作提示:開始-所有程序-附件-截圖工具右擊-發(fā)送到桌面快捷方式;

3、為“開始”→“所有程序”→“Microsoft Office”子菜單中的“Microsoft Outlook 2010”創(chuàng)建桌面快捷方式,并鎖定到任務(wù)欄中。/附到“開始”菜單中。

4、在控制面板中將桌面背景更改為圖片文件第1單元素材DATA2tupian1-6.jpg。

5、在控制面板中將桌面“計算機”的圖標更改為“第1單元素材DATA2tubiao1-10.ico”的樣式。

6、在控制面板中設(shè)置桌面上僅顯示“計算機”和“回收站”的圖標。

7、在控制面板中將系統(tǒng)的“日期和時間”更改為“2010年10月1日 10:50:30”。在控制面板中將系統(tǒng)當前“時區(qū)”更改為“(UCT+08:00)臺北”。

8、在語言欄中添加“微軟拼音-簡捷2010”輸入法。在語言欄中刪除“微軟拼音-新體驗2010”輸入法。

在語言欄中設(shè)置計算機啟動時默認的輸入語言為“微軟拼音-簡捷2010”輸入法。

9安裝字體第1單元素材DATA2Ziti1-7.ttf。在控制面板中隱藏“微軟雅黑”字體。

在控制面板中預(yù)覽“華文新魏 常規(guī)”字體。在控制面板中刪除“華文細黑 常規(guī)”字體。

10、在控制面板中向桌面添加小工具“CPU儀表盤”,并設(shè)置其始終“前端顯示”。

在控制面板中向桌面添加小工具“日歷”,并設(shè)置顯示較大尺寸。在控制面板中卸載桌面小工具“時鐘”。

在控制面板中向桌面上添加“幻燈片放映”小工具,設(shè)置每張圖片顯示的時間為“10秒”,圖片轉(zhuǎn)換方式為“旋轉(zhuǎn)”。

11、在控制面板中設(shè)置隱藏桌面上所有的圖標。

結(jié)論分析:

通過這次實驗學(xué)會了WIN7操作系統(tǒng)的基本操作及操作系統(tǒng)的設(shè)置與優(yōu)化

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