第一篇：白細胞分類計數的臨床意義分析

白細胞分類計數的臨床意義分析

【摘要】目的：探討白細胞分類計數的臨床意義。方法：通過對我院血常規檢驗工作的分析，總結白細胞分類計數的工作重要性。結果：白細胞分類計數具有較高的臨床價值，值得臨床醫師參考使用。結論：白細胞檢驗結果在一定程度上決定著臨床診療的正確診斷和治療。

【關鍵詞】白細胞分類計數；臨床意義；檢驗科

【中圖分類號】R859 【文獻標識碼】B 【文章編號】1005-0515(2011)05-0168-02

白細胞分類計數是臨床血液學檢驗中的常規檢驗項目[1]。隨著基礎醫學及計算機科學的飛速發展，使得血液學檢驗技術突飛猛進，特別是近幾年來各種新型的血細胞分析儀以其自動化程度高、檢測參數多等優勢而不斷充斥市場，這對減輕檢驗人員勞動強度和提高檢測速度無疑起著積極的作用。現將我院檢驗科進年來總結的白細胞分類計數的臨床資料報道如下。材料與方法

1．1材料:儀器日本Sysmex XT-1800i全自動五分類血細胞分析儀；日本產尼康顯微鏡。試劑：原裝進口配套試劑。標本來源：我院近3年經過血常規檢查的1988例我院住院患者。

1．2 方法:儀器法采取患者靜脈標本2 ml注入EDTA―K：真空抗凝管中，在25℃室溫下3 h內檢測完畢。手工鏡檢法：將經過儀器檢測完畢的患者抗凝標本制作成薄厚適宜的血片，依據全國臨床檢驗操作規程，用瑞氏一姬姆薩染液染色后，選擇經驗豐富、技術熟練的檢驗人員在油鏡下計數分類200個白細胞，并求出各系所占比例的平均值。結果

白細胞分類計數具有較高的臨床價值，白細胞檢驗結果在一定程度上決定著臨床診療的正確診斷和治療。值得臨床醫師參考使用。討論

人體血液中非細胞成分包括血清或血漿，細胞成分包括紅細胞、白細胞和血小板。在末梢血液中，根據白細胞胞漿中有無顆粒，分為粒性白細胞和非粒性白細胞。粒性白細胞中包括中性粒細胞(又分桿狀核及分葉核)、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞；非粒性白細胞中包括淋巴細胞及單核細胞。其中中性粒細胞和單核細胞在人體內游戈，可以吞噬和消化進入人體內的細胞等微生物，還能吞噬人體壞死的細胞。淋巴細胞分為T淋巴細胞、B淋巴細胞、K細胞，它們參與人體的細胞免疫和體液免疫反應。白細胞總數的增多或減少，以及分類的改變，均有一定的臨床意義。

3.1 嗜中性粒細胞(N):在外周血中可分為中性桿狀核粒細胞(NST)和中性分葉核粒細胞(NSG)兩類。

3.1.1 嗜中性粒細胞增多：嗜中性粒細胞增多常伴隨白細胞總數的增多[2]。在生理情況下，下午較早晨為高，妊娠后期及分娩時，劇烈運動或勞動后，飽餐或淋浴后，高溫或嚴寒等均可暫時性增高。病理性增多見于：急性感染。嚴重組織損傷及大量血細胞破壞。如嚴重外傷，較大手術后，大面積燒傷，急性心肌梗死(心絞痛時不增高)及嚴重的血管內溶血。急性大出血。急性中毒。白血病及惡性腫瘤。

3.1.2 嗜中性粒細胞減少：<4×10??9／L稱白細胞減少。當嗜中性粒細胞絕對值<1.0×10??9／L，稱為粒細胞減少癥，<0.5×10??9／L時稱為粒細胞缺乏癥。主要見于：感染[3]。血液系統疾病。理化損傷。X線、γ射線，放射性核素；苯、鉛、汞以及氯霉素、磺胺類藥、抗腫瘤藥、抗糖尿病及抗甲狀腺藥。單核一巨噬細胞系統功能亢進。自身免疫性疾病。如系統性紅斑狼瘡等。

3.2 嗜酸性粒細胞(E)

3.2.1 嗜酸性粒細胞增多：①過敏性疾病。支氣管哮喘、藥物過敏反應、蕁麻疹、食物過敏、血管神經性水腫、血清病等。②寄生蟲病。血吸蟲病、肺吸生病、蛔蟲病、鉤蟲病等。③皮膚病。如濕疹、剝脫性皮炎、天皰瘡、銀屑病等。④血液病。如慢性粒細胞白血病，嗜酸粒細胞白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、嗜酸性粒細胞肉芽腫等。⑤某些惡性腫瘤。如肺癌等。腫瘤治療有效往往伴隨著嗜酸性粒細胞增多的改善。⑥某些傳染病。如猩紅熱時反而增多。

3.2.2 嗜酸性粒細胞減少：見于傷寒、副傷寒初期、大手術、燒傷等應激狀態或長期應用腎上腺皮質激素后，其臨床意義甚小。

3.3 嗜堿性粒細胞(B)

3.3.1 嗜堿性粒細胞增多：①過敏性疾病。結腸炎、藥物、食物、吸人物超敏反應、紅斑及類風濕性關節炎等。②血液病。如慢性粒細胞白血病，嗜堿性粒細胞白血病，以及骨髓增殖性疾病的骨髓纖維化等。③惡性腫瘤。特別是轉移癌時。④其他。如糖尿病、水痘、流感、天花、結核等。

3.3.2 嗜堿性粒細胞減少：無臨床意義。

3.4 淋巴細胞:

3.4.1 淋巴細胞增多：①感染性疾病。病毒感染如風疹、麻疹、流行性腮腺炎，傳染性單核細胞增多癥、傳染性淋巴細胞增多癥、病毒性肝炎及腎病綜合征出血熱等。此外，某些桿菌，如百日咳鮑特桿菌、結核分枝桿菌、布氏桿菌及梅毒螺旋體、弓形體等。③淋巴細胞性惡性疾病。急性和慢性淋巴細胞白血病、淋巴肉瘤白血病、毛細胞白血病等。③其他。自身免疫性疾病、腫瘤，慢性炎癥、GVHR或GVHD等[4]。

3.4.2 淋巴細胞減少：主要見于接觸放射線及應用腎上腺皮質激素、烷化劑、抗淋巴細胞球蛋白和先天性免疫缺陷性疾病和獲得性免疫缺陷綜合征。

3.5 單核細胞:

3.5.1 單核細胞增多：生理性增多見于嬰幼兒及兒童。病理性增多見于：①某些感染。如感染性心內膜炎、瘧疾、黑熱病、急性感染恢復期、活動性肺結核等。②某些血液病。如單核細胞白血病，粒細胞缺乏恢復期、多發性骨髓瘤、惡性組織細胞病、淋巴瘤、骨髓增生異常綜合征等。

3.5.2 單核細胞減少：無臨床意義。

定期觀察疾病過程中白細胞的變化，可以了解疾病的演變。通常在感染的急性期，主要表現白細胞總數增加，中性粒細胞增高[5]。如中性粒細胞僅為輕度增加，未成熟者極少，常表示輕度感染；如白細胞增加明顯或反而減少，且未成熟者明顯，常表示嚴重感染。但老年人患感染性疾病后白細胞并不明顯增加。

參考文獻

[1] 李筱梅，楊玉寶，李承文，等．白細胞分類計數方法學比較[J]．檢驗醫學，2004，19(2)：100-103

[2] 張之南，楊天楹，郝玉書．血液病學．第l版．人民衛生出版社．2003：1109

[3] 吳茅，王海英，陳秉宇，等．血細胞分析儀提示中性粒細胞增高標本指標被忽視及其對策[J]．臨床檢驗雜志，2002，20：47-48

[4] 孫芾，王厚芳，于俊峰，等．血細胞顯微鏡復檢標準的制定及臨床應用[J]．中華檢驗醫學雜志，2005，28：155-157

[5] 朱庚伯.漫話白細胞分類計數.家庭醫學2007(11):38

作者單位：271200 新泰市人民醫院檢驗科

第二篇：白細胞計數實驗報告

白細胞計數和分類

目的：掌握血涂片制備的操作要領、瑞氏染色方法、正常外周血五種白細胞形態特點、原理：各種白細胞必須經過染色，才易于區分其類別。常用者為瑞氏（Wright’s）染色法和姬姆薩(Giemsa)染色法。測定外周血液中各種白細胞的相對比值，以觀察其數量、形態和質量變化，通過顯微鏡觀察染色血涂片，計算血液中各類白細胞的百分率，稱為白細胞分類計數。利用白細胞總數和各類白細胞的百分率，即可計算每mm3血液中各類白細胞的絕對值。

實驗器材： 香柏油、蓋玻片、推片、采血針或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、pH6.4~6.8磷酸鹽緩沖液、蒸餾水、計數板及專用蓋片、針 1ml刻度移液管、1ml EP管、光學顯微鏡。20ul刻度移液管、推片

實驗步驟

白細胞分類

1．血片制作：

取一滴血，滴于潔凈無油脂的玻片一端。左手持玻片，右手再取邊緣光滑的另一玻片作為推片。將推片邊緣置于血滴前方，然后向后拉，當與血滴接觸后，血即均勻附在二玻片之間。此后以二玻片約呈30—45度的角度平穩地向前推至玻片另一端。推時角度要一致，用力應均勻，即推出均勻的血膜（血膜不可過厚、過薄）。將制好的血涂片晾干，不可加熱。

注：（1）良好涂片標準：

１)呈頭、體、尾舌形 ２)血膜厚薄適宜 ３)兩邊留有空隙

（2）涂片好壞與下列因素有關： 1）血滴大小

2）推片與玻片之間角度 3）推片速度

2、血涂片的染色步驟：

（1）用蠟筆在血膜兩端各劃一道線，以免染料外溢，置涂片于染色架上。

（2）滴加瑞氏染液，共計七八滴數，以蓋滿血膜為度，靜置1分鐘。

（3）再滴加等量的磷酸緩沖鹽溶液，輕輕搖動，并輕吹液體使染色液與緩沖液混合均勻，靜置15分鐘。

（4）用清水沖洗。切勿先傾去染液再沖洗，否則沉淀物附于血膜上不宜出去。沖洗后斜置血涂片于空氣中干燥。或先用濾紙吸取水分迅速干燥，即可鏡檢。

3、白細胞分類計數：先用低倍鏡檢查涂片及染色是否均勻。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均勻處（一般在體尾交界處），在油鏡下由此處開始按其形態特征進行分類計數，計數移動時避免重復。根據所見到的100個白細胞，記錄各種白細胞所占的百分數。

4、各類白細胞的形態特征

嗜中性白粒細胞：圓形，胞漿淡紅色，胞漿內有多量紫紅色細小顆粒（染色不佳時則看不清楚）。核為藍紫色。

嗜酸性白細胞：大小、形態與中性白細胞大體相似，唯胞漿內含有粗大的鮮紅色顆粒。核多數為兩葉。

嗜堿性白細胞：大小、形態與中性白細胞大體相似，但胞漿內含有粗大的深藍色，常遮蓋在核上。核分葉不明顯

淋巴細胞：分大小兩種，小淋巴細胞圓形，核染成深紫色，圓形或腎形，胞漿很少，常呈一小片月牙狀，染成藍色。大淋巴細胞，核圓形或腎形，胞漿相對較多，染成天藍色，在胞漿與核之間有淡染帶。有時內含少數紫紅色大顆粒。

單核細胞： 核染成紫色，其染色質疏松，核形不規則。胞漿較多，染成淺灰藍色 白細胞計數

加稀釋液 用吸管吸取白細胞稀釋液0.38ml于小試管中。

吸取血液 用微量吸管吸取新鮮全血或末梢血20ul，擦去管尖外部余血。將吸管插入小試管中白細胞稀釋液的底部，輕輕放出血液，并吸取上層白細胞稀釋液清洗吸管2-3次

混勻 沖池 將試管中血液與稀釋液混勻，待細胞懸液完全變為棕褐色

再次將小試管中的細胞懸液混勻。用滴棒蘸取細胞懸液1滴，充入改良Neubauer計數板的計數池中，室溫靜置2-3min，待白細胞完全下沉。

計數 在低倍鏡下計數四角4個大方格內的白細胞總數

計算

白細胞總數 =4大格白細胞數（N）/4×10 ×20 ×10^6

= N÷ 20 ×10^9/L

注：計數板上下各一個計數池計數區域分為9個大方格，四角的大方格各劃分為16個中方格，中央大方格劃分為25個中方格。四角的大方格為白細胞計數區，大方格四邊壓線細胞計左不數右，計上不數下

實驗結果

白細胞總數

白細胞=(35+42+39+37)/20*10^9=7.65*10^9/L 中性粒細胞65個,占65%

單核細胞5個,占5% 淋巴細胞:27個,占27%

嗜酸性粒細胞3個,占2% 嗜堿性粒細胞1個,占1%

注意事項

1、.采血時針刺深度必須適當，不能過度擠壓，防止組織液滲入或采血時間太長引起血液凝固。

2、白細胞總數在參考范圍內，大方格間的細胞數不得相差10個以上，兩次重復計數誤差不得超過10％。

3、按一定順序移動視野。

4、染色時切勿使染液干涸，否則發生不易去掉的沉淀。

5、水沖洗時間不宜過長，否則會脫色。

6、血涂片不可過厚 思考題

1．白細胞核不著色可能是因為操作中那種誤差引起的？

第三篇：解讀白細胞體積分布圖及白細胞分類的臨床意義

解讀白細胞體積分布圖及白細胞分類的臨床意義

【關鍵詞】 白細胞總數；白細胞體積分布圖；免疫

［摘 要］ 目的：由于血細胞分析儀的局限性，血細胞分類檢測仍然會存在一些不可避免的誤差，特別是血液性疾病患者，其血細胞檢測非常不完整，不全面，容易漏診，必須強調臨床上要用血推片染色鏡檢驗觀察其血細胞形態為準，才會為臨床診斷發揮作用。方法：血細胞分析儀。結果：對引起白細胞分類增高、降低的疾病作了全面詳細的分析并為臨床診斷提供依據。

［關鍵詞］ 白細胞總數；白細胞體積分布圖；免疫

白細胞是指外圍液中白細胞的總數，正常范圍是4×109／L~10×109／L，主要是對機體實現保護防御作用，并參入免疫反應，是臨床上最常見的指標之一。白細胞個體差異明顯，受許多因素影響，新生兒較高，一天之間早晨休息狀態下白細胞最低，下午最高，飯后較飯前高，一年之間冬季較夏季高，妊娠、分娩、劇烈運動及體力勞動均可使白細胞增高。白細胞體積分布圖是根據加入溶血劑后，白細胞膜通透性改變而發生皺縮，不同類型的白細胞皺縮后體積有明顯差異，每個皺縮白細胞通過血細胞分析儀的微孔時，產生脈沖信號經放大、甄別后，微機處理數據而得。現在隨著科技的發展，白細胞分類技術的自動化，白細胞分類從一項、二項、三項式分類已進入五項完全分類，為臨床疾病診斷提供了重要的幫助。一項式分類僅可分出淋巴細胞百分比；二項式分類可分出粒細胞和非粒細胞；三項式分類可分出粒細胞、中間細胞和淋巴細胞，其中間細胞含單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞；五項式分類包括中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞。現臨床上常見的是三、五項式分類。體積分類以劃分的標準依據、各種型號儀器及試劑的不同也有所不同，如cellDyn系列，體積在30 fl~90 fl的白細胞劃分為淋巴細胞群LYM，體積在90 fl~160 fl的白細胞劃分為中間細胞群MID，體積在160 fl~450 fl的白細胞劃分為粒細胞群GRAN。據以上檢驗指標的綜合分析，使其在臨床上對疾病的鑒別有著重要的意義和輔助價值，并為疾病的準確診斷奠定了基礎。

儀器及材料

1.1 儀器 各型血細胞自動分析儀。

1．2 材料 抗凝靜脈血。

白細胞體積分布圖結果

正常人白細胞體積分布圖可見兩個明顯分離的峰，左峰為小細胞群（淋巴細胞)，右峰為大細胞群(粒細胞)，兩峰之間為中間細胞群的分布。急性白血病時，由于異常的原始細胞增多，可見中間細胞群明顯增高，這時白細胞直方圖上只見一個峰，峰值在90 fl~160 fl之間，這時必須推片染色鏡檢以作診斷報告。慢性傳染性疾病肺結核病者，白細胞總數一般不增高，但伴有淋巴細胞的增多，在白細胞直方圖中表現出第一峰過高。另外白細胞直方圖可以反映某些人為因素或某些變化干擾白細胞計數和分類計數的情況，如外圍血出現有核紅細胞或巨大血小板，采血時由于技術而造成的血小板凝集或某些病理因素使紅細胞膜對溶血劑有抵抗作用，使紅細胞溶血不完全以至檢測標本中大量紅細胞膜碎片等情況，可使白細胞直方圖在50 fl以下區域出現一個或大或小的峰，因此當實驗結果出現此圖形時提示白細胞計數及分類不準確，需采取相應手段進一步檢測。

討論

在體積分類技術中，溶血劑是比較關鍵的試劑，它可將白細胞進行預處理，使細胞形態及體積大小基本固定，在分布圖中能分顯出三個峰，但不能將異常幼稚細胞檢出，當發現分布圖中淋巴細胞和中間細胞區過高時，應涂片采取鏡下分類以防漏檢血液性疾病。“三分類”以下的中低檔儀器多是加入溶血劑后，根據各類白細胞體積大小來分成兩群或三群而已，它不能區分幼稚細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和單核細胞，更不能識別異型淋巴細胞，中性粒細胞、毒性病變和有核紅細胞，因此要特別引起注意。

堅決反對有些實驗室使用血細胞分析儀后就不再作鏡下復查和分類的錯誤傾向，當出現下列任何一種情況時都要用顯微鏡檢查及分類。如白細胞、紅細胞、血紅蛋白、血小板任何一項有明顯升高和降低時；白細胞分類出現異常結果時；紅細胞、白細胞、血小板的任何一個直方圖出現異常時；儀器顯示警告信號時。

無論任何類型的血細胞分析儀，用于白細胞分類都只能作過篩性實驗，不能取代顯微鏡下分類，顯微鏡下的細胞形態學檢查仍是血細胞形態學診斷的依據，還必須結合臨床綜合考慮。各類白細胞的百分率及臨床意義

4．1 各類白細胞百分率的正常范圍 中性粒細胞(N)桿狀核：0%~5%；分葉核：50%~70%；淋巴細胞(L):20%~40%；嗜酸性粒細胞(F)：0．5%~5%；嗜堿性粒細胞(B)0%~1%；單核細胞(M)：3%~8%。

4．2 白細胞的病理意義 白細胞顯著增高見于白血病，尤其是慢性白血病。白細胞明顯增高見于感染引起的類白血病反應。臨床上白細胞增高見于急性化膿性感染，如膿腫、扁桃體炎、大葉性肺炎、膿胸、闌尾炎、腦膜炎、敗血癥等。部分細菌感染如猩紅熱、白喉等白細胞亦可增高。此外，燒傷手術后，尿毒癥等白細胞亦可增加。白細胞減少見于再生障礙性貧血，部分急性白血病等造血干細胞疾患;某些傳染病如傷寒、瘧疾、流感、傳染性肝炎、脾功能亢進、放射療法及腫瘤化療等。

4．3 中性粒細胞增多 在成人往往與白細胞總數增高同時出現，多見于各種急性化膿性感染、慢性粒細胞白血病、急性出血、溶血、手術后、尿毒癥、酸中毒、急性汞中毒、急性鉛中毒以及白喉、燒傷等。中性粒細胞減少見于一些傳染病如傷寒、副傷寒、瘧疾、麻疹、結核、流感等，也可見于化學藥物中毒，X線和鐳照射，抗癌藥物化療，極度嚴重感染，再生障礙性貧血，粒細胞缺乏等。

4．4 嗜酸性細胞增多 見于熱帶性嗜伊紅細胞增多癥、支氣管哮喘、變態反應、寄生蟲病、皮膚病、血液病、及過敏性疾病和慢性粒細胞白血病以及手術后、燒傷等。嗜酸性粒細胞減少見于傷寒、副傷寒以及應用腎上腺皮質激素后。

4.5 嗜堿性粒細胞增多 較少見于慢性粒細胞白血病、何杰金病、癌轉移、鉛及鉍中毒等。嗜堿性粒細胞減少無意義。

4．6 淋巴細胞增多 見于傳染性淋巴細胞增多癥、結核病、百日咳、急性慢性淋巴細胞白血病、傳染性單核細胞增多癥、麻疹、腮腺炎、傳染性肺炎，由于中性粒細胞減少而導致淋巴細胞相對增多的病例。淋巴細胞減少多見于傳染病急性期、放射病、細胞免疫缺陷以及由于中性粒細胞增高而導致淋巴細胞相對減少的病例。

4.7 單核細胞增多 見于單核細胞性白血病，某些結核病，瘧疾等。單核細胞減少一般無臨床意義。

參考文獻：

［1］ 葉應嫵.全國臨床檢驗操作規程［M］.第2版.南京：東南大學出版社，1997，4.［2］ 李影林.中華醫學檢驗全書［M］.北京：人民衛生出版社，1997：198200.［3］ 吳茅，王海英，陳秉宇，等.血細胞分析儀提示中性粒細胞增高標本指標被忽視及其對策［J］.臨床檢驗雜志，2002，20：4748.［4］ 李筱梅，楊玉寶，李承文，等.白細胞分類計數方法學比較［J］.檢驗醫學，2004，19(2)：100103.［5］ 孫芾，王厚芳，于俊峰，等.血細胞顯微鏡復檢標準的制定及臨床應用［J］.中華檢驗醫學雜志，2005，28：155157.

第四篇：白細胞五分類技術

20世紀時發現了電阻抗原理，由于血細胞是一種不良導體，將血液標本稀釋、溶血后制成白細胞懸液，在負壓的作用下，懸液流經一個帶有微孔的恒壓電路時，每個細胞會產生一個電阻脈沖信號，這些信號經過微機的放大、甄別、整形等處理，最后計算出單位體積內的白細胞數。

這種方法最初只能進行細胞計數，美國科學家庫爾特采用電子阻率與電子技術相結合，設計出了世界第一臺電阻抗三分群血液細胞分析儀，第一次將白細胞分為了大細胞群、中間細胞群、小細胞群，并應用于臨床，開創了血細胞分析的新紀元。三分類的方法中大細胞相當于中性粒細胞，中間細胞相當月嗜酸、嗜堿及單核細胞，小細胞相當于淋巴細胞。這種技術只起到了篩選的作用。隨著科學技術的迅速發展，三分群血細胞分析技術在臨床實踐中的局限日益明顯，因此，對血液白細胞進行五分類的儀器開始出現。1982年，Technicon公司生產的H6000型血液細胞分析儀器是第一部具有白細胞五分類能力的儀器。同時代的日本日立公司推出的圖像分析法的白細胞分析儀HITACHI8200型，僅僅可以完成白細胞血片分類并沒有其他血細胞計數分析能力。1990年前后，歐洲和題本許多廠家都陸續推出了各種類型的具有白細胞五分類功能的血細胞分析儀器。

目前已有的白細胞分類技術儀器按原理主要有三種類型：第一類是物理法，第二類是物理——化學法，第三類是圖像分析法。1.物理法 1.1 VCS法

Beckman-Coulter公司生產的血細胞分析儀將電學與光學結合，該方法稱為體積、電導、激光散射血細胞分析法（VCS）。V是利用電阻抗法測定細胞體積；C是利用高頻電磁波，根據各種細胞核漿的電導性不同測理細胞內部結構、核漿比例；S是利用光散射原理測量細胞內顆粒的大小密度等結構特性。計算機根據3種技術得到的資料綜合分析，將中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性細胞、嗜堿性細胞一一分開，以白細胞分類散點圖顯示這些細胞，并提示異常淋巴細胞、幼稚細胞、有核細胞、抗溶血紅細胞等信息。1.2 多角度偏振光激光散射技術

美國ABBOTT推出的五分類血細胞分析儀，采用了多角度偏振光散射技術（MAPSS）。MAPSS原理：血標本在特殊鞘液的作用下，紅細胞內血紅蛋白游離出細胞外，紅細胞變得透明，而白細胞的內部結構和膜結構基本保持自然狀態。當細胞懸液的鞘流經過檢測器時，儀器從4個不同的角度得到每個細胞的光信號，這4個角度分別為0°前向角光散射測定細胞的大小；7°～10°狹角光散射測定細胞內部結構及其復雜特征；90°垂直光散射測定細胞內部顆粒和胞漿成分；90°消偏振光散射利用嗜酸性細胞內顆粒特有的消偏振特性，將嗜酸性細胞直接分離。計算機綜合4個角度的光信號，將白細胞分類，并提供提示信息和相關圖譜。2.物理——化學法

2.1 流式細胞法、激光散射和細胞化學染色技術相結合技術

日本Sysmex公司全系列五分類血液細胞分析儀均采用此技術，這也是現在國內應用最廣泛的儀器。這種方法通過連續流動的系統，將待測細胞經處理或染色后壓入流動室，不含細胞的緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度，這樣鞘液就能被包繞著樣品高速流動組成一個圓形的流束，待測細胞單行排列依次通過檢測區域，通過光電效應將電信號轉換為可被計算機識別的數字信號，經處理，可分析出血細胞中白細胞總數，各分類細胞的百分率和絕對值，細胞體積大小和內部信息，并且顯示在屏幕上。2.2 激光散射和過氧化物酶染色相結合技術

西門子公司的全自動血液分析儀采用了這種技術。血標本進入儀器，在一系列的預處理液和白細胞過氧化物酶染色后流經檢測器。每個細胞在激光束的照射下，各類細胞因過氧化物酶含量不同，具有不同的光吸收信號；根據每個細胞的前向角大小可以得到細胞的體積數據，同時儀器有單獨的嗜堿性細胞直接計數通道，計算機根據這些信息得出細胞分類結果。2.3 雙鞘流技術和細胞化學染色法

ABX公司生產的血細胞分析儀采用了雙鞘流（DHSS）分析法。標本首先在第一鞘流液中經過電阻抗測定分析，得到細胞體積測定結果．然后通過第二鞘流引導再行光吸收率分析．對細胞內容物進行測定，最終將細胞測定信息在散射圖相應的位置表現出來。2.4 邁瑞激光散射和細胞化學染色技術

深圳邁瑞（Mindray）公司是國內最早生產五分類血細胞儀的廠家，采用半導體激光散射技術和細胞化學染色技術，配合改良的流式分析裝置對白細胞進行精確的五分類分析。激光散射分析技術是五分類法常用的分析技術。由于細胞的物理特性，當激光照射到細胞時，會有不同角度的散射光出現。低角度(1°～5°)散射光可反映細胞體積大小信息；中高角度（10°～20°）。散射光可反映細胞顆粒的復雜性信息。綜合這兩個角度散射光的信息．結合其他特殊技術來完成自細胞的五分類測定。3.圖像分析法

近年來，瑞典CellaVision AB公司開發出一種新型自動影像血細胞分析系統。國內南昌百特公司也已經研制出了新一代同類數字化血細胞形態分析儀。其工作原理模仿人“腦——眼”系統的智能識別過程，運用計算機圖像處理和模式識別，將從顯微鏡與攝像機得到的數字化細胞圖像進行自動處理分析和分類。這種儀器的主要特點是運用圖像處理分析技術提取細胞形態，色彩，紋理等方面的多種特征信息，并用模式識別技術進行細胞分類。

雖然這些細胞分類技術都為臨床提供了準確的檢驗結果，但是卻不能完全取代顯微鏡檢查。Sysmex全系列儀器由于使用先進的激光散射和核酸熒光染色技術相結合，對正常白細胞分類準確無誤，而且其散點圖對異常細胞的提示非常具有參考價值。Cellavision AB公司自動影像血細胞形態分析系統只能作為五分類血液分析儀器的后處理，進行白細胞的形態學觀察，雖可以大大減少工作量，但由于數據庫容量不足，識別精度不夠高等原因，仍然無法完全取代人工鏡檢。

第五篇：分類計數原理與分步計數原理教案

課題: 分類計數原理與分步計數原理

授課教師:孫瓊芳 班級:高二(2)班 時間:第十二周星期四第二節 ◆教學目標

1.正確理解分類計數原理與分步計數原理的內容.2.正確運用兩個基本原理分析、解決一些簡單問題.3.了解基本原理在實際生產、生活中的應用.4.提高分析問題、解決問題的能力.◆ 教學重點

分類計數原理與分步計數原理.◆ 教學難點

正確運用分類計數原理與分步計數原理.◆ 教學方法

啟發引導式 ◆ 教學準備

多媒體課件 ◆ 教學過程

一.由實際問題引入課題

2002年夏季在韓國與日本舉行的第17屆世界杯足球賽共有32個隊參賽．它們先分成8個小組進行循環賽，決出16強，這16個隊按確定的程序進行淘汰賽后，最后決出冠亞軍，此外還決出了第三、第四名．問一共安排了多少場比賽？

要回答上述問題，就要用到排列、組合的知識．排列、組合是一個重要的數學方法，粗略地說，排列、組合方法就是研究按某一規則做某事時，一共有多少種不同的做法．

在運用排列、組合方法時，經常要用到分類計數原理與分步計數原理，下面我們舉一些例子來說明這兩個原理．

二.講授新課 問題一：

從甲地到乙地，可以乘火車，也可以乘汽車.一天中，火車有3班，汽車有2班.那么一天中，乘坐這些交通工具從甲地到乙地共有多少種不同的走法？

圖示：

（分析略）

引伸1:若甲地到乙地一天中還有4班輪船可乘,那么一天中,乘坐這些交通工具從甲地到乙地共有多少種不同的走法? 引伸2:若完成一件事,有n類辦法.在第1類辦法中有m1種不同方法,在第2類辦法中有m

2種不同的方法,??,在第n類辦法中有mn種不同方法,每一類中的每一種方法均可完成這件事,那么完成這件事共有多少種不同方法?

分類計數原理：完成一件事，有n類辦法，在第1類辦法中有m1種不同的方法，在第2類辦法中有m 2種不同的方法，??，在第n類辦法中有mn種不同的方法。那么完成這件事共有

N = m1 + m2 + ? + mn

種不同的方法.問題二：

從甲地到乙地，要從甲地先乘火車到丙地，再于次日從丙地乘汽車到乙地.一天中，火車有3班，汽車有2班，那么兩天中，從甲地到乙地共有多少種不同的走法？

（分析略）

從如下的圖示中，我們可以具體地看到這6種走法。圖示：

所有走法

火車1——汽車1；火車1——汽車2；火車2——汽車1；火車2——汽車2； 火車3——汽車1；火車3——汽車2

在問題二的分析過程中，就體現了分步計數原理.分步計數原理：完成一件事，需要分成n個步驟，做第1步有m1種不同的方法，做第2步有m2種不同的方法，??，做第n步有mn種不同的方法.那么完成這件事共有

N = m1×m2×?×mn

種不同的方法.下面，我們結合例題來一起體會兩個基本原理的正確運用.［例1］ 書架的第1層放有4本不同的計算機書，第2層放有3本不同的文藝書，第3層放有2本不同的體育書．

（1）從書架上任取1本書，有多少種不同的取法？

（2）從書架的第1、2、3層各取1本書，有多少種不同的取法？

（解答略）

教師點評：解題的關鍵是從總體上看做這件事情是“分類完成”,還是“分步完成”。“分類完成”用“分類計數原理”;“分步完成”用“分步計數原理”。

［例2］電視臺在“歡樂大本營”節目中拿出兩個信箱，其中存放著先后兩次競猜中成績優秀的觀眾來信，甲信箱中有30封，乙信箱中有20封，現由主持人抽獎確定幸運觀眾，若先確定一名幸運之星，再從兩信箱中各確定一名幸運伙伴，有多種不同的結果？

（解答略）

教師點評：有些較復雜的問題往往不是單純的“分類”“分步”可以解決的，而要將“分類”“分步”結合起來運用．一般是先“分類”，然后再在每一類中“分步”，綜合應用分類計數原理和分步計數原理．

三、課堂練習

1、現有高中一年級的學生3名，高中二年級的學生5名，高中三年級的學生4名，從中任選一人參加接待外賓的活動，有多少種不同的選法？

2、某人有兩頂帽子，兩件上衣，三條褲子，兩雙鞋，問穿戴整齊共有多少種不同的裝束？.如圖,要給地圖A、B、C、D四個區域分別涂上3種不同顏色中的某一種,允許同一種顏色使用多次,但相鄰區域必須涂不同的顏色,不同的涂色方案有多少種？

思考:若用2色、4色、5色等,結果又怎樣呢?

4.一螞蟻沿著長方體的棱,從的一個頂點A爬到相對的另一個頂點C1的最近路線共有多少條？

四、小結：

1.本節課學習了分類計數原理與分步計數原理。

2.分類計數原理與分步計數原理的共同點是什么？不同點是什么？

3．解題的關鍵是從總體上看做這件事情是“分類完成”,還是“分步完成”。“分類完成”用“分類計數原理”;“分步完成”用“分步計數原理”。有些較復雜的問題往往不是單純的“分類”“分步”可以解決的，而要將“分類”“分步”結合起來運用．一般是先“分類”，然后再在每一類中“分步”，綜合應用分類計數原理和分步計數原理．

五、布置作業：課本P87習題10.1 第2、3題

六、思考題：將一個四棱錐的每一個頂點染上一種顏色,并使同一條棱上的兩端異色,如果只有5種顏色可用,求不同的染色方法種數?