第一篇：馬鈴薯組織培養技術要點

馬鈴薯脫毒種苗組織培養技術要點

班級：園藝112

姓名：馬寅

學號：201101070202 摘要：各種病毒、真菌、細菌等對馬鈴薯的侵染是導致我國馬鈴薯單產較低的主要原因，馬鈴薯脫毒種苗有巨大應用前景。本文綜合介紹了莖尖培養脫毒法組織培養的各技術要點，收集前沿技術信息。論述了馬鈴薯脫毒種苗組織培養過程中以及移栽處理。

關鍵詞：馬鈴薯脫毒種苗 組織培養 移栽

1、馬鈴薯產業現狀及危害其生產的主要因素

栽培種的馬鈴薯(SolanumtuberosumL．，2n=48)是雙子葉種子植物．屬茄科(Solanaceae)茄屬(Solanum)一年生喜涼草本植物【l】。又名洋芋、土豆，原產南美洲，在我國已有300多年的栽培歷史。馬鈴薯生育期短，產量高，營養豐富，是典型的糧菜兩用型作物，是我國四大栽培作物之一。【2】世界馬鈴薯面積分布的最大特點是以歐、亞兩洲種植為主，兩者種植面積占世界馬鈴薯總面積的78％，其中中國、俄羅斯、烏克蘭、印度四大生產國占世界種植面積的1／2。而馬鈴薯的發源地南美洲種植面積只占世界馬鈴薯總面積的5％。除整個美洲大陸保持相對穩定外，歐洲的種植面積在持續減少，而亞洲、非洲的種植面積在不斷增加。馬鈴薯在生產上絕大多數是利用塊莖進行無性繁殖。國際馬鈴薯中心(CIP)和國際食品政策中心(IFPRI)合作研究表明，到2020年為止，全世界對馬鈴薯的需求將有望增長40％。超過水稻、小麥和玉米的增長。特別是亞洲和非洲對馬鈴薯的需求將增長更快。[1]

2、馬鈴薯組織培養的理論體系及研究現狀

2.1組織培養及馬鈴薯組織培養的發展史

19世紀30年代，德國植物學家施萊登和德國動物學家施旺創立了細胞學說，根據這一學說，如果給細胞提供和生物體內一樣的條件，每個細胞都應該能夠獨立生活；1902年，德國植物學家哈伯蘭特細胞全能性的理論是植物組培的理論基礎。1958年，一個振奮人心的消息從美國傳向世界各地，美國植物學家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜韌皮部的細胞進行培養，終于得到了完整植株，并且這一植 株能夠開花結果，證實了哈伯蘭特在五十多年前關于細胞全能的預言。植物組培的簡單過程如下：剪接植物器官或組織——經過脫分化（也叫去分化）形成愈傷組織——再經過再分化形成組織或器官——經過培養發育成一顆完整的植株。

1955年法國人莫勒爾和他的同事們以馬鈴薯莖尖為外植體成功地產生無病毒植株，以馬鈴薯莖尖為外植體成功地產生無病毒植株，20世紀60年代以后由于組織培養技術日趨成熟和完善，世界各地的植物組織培養研究和產業化應用進入迅速發展階段，幾乎所有的馬鈴薯生產國都使用這項技術進行脫毒快繁，并部分地進行育種研究。2.2脫毒種苗

馬鈴薯系無性繁殖作物，在生長期間容易受病毒侵染造成退化。一旦感染病毒，無有效藥治，病毒在薯塊內的積累是導致馬鈴薯品質、產量下降的主要原因。為了解決這一問題，我國于 20世紀 70 年代初引進了馬鈴薯莖尖脫毒技術，1976年于內蒙古建立了第 1 個馬鈴薯脫毒原種場，80 年代逐漸普及到各省、市、自治區。

目前，馬鈴薯脫病毒的方法主要有 5 種: 莖尖培養脫毒法、熱處理脫毒法、熱處理結合莖尖培養脫毒法、化學處理脫毒法、愈傷組織培養脫毒法，其中應用最廣泛的是莖尖培養脫毒法及其與熱處理法相結合的方法。脫毒種苗可以顯著減少馬鈴薯生長期間的病蟲害，進而提高馬鈴薯產量和品質。[4]相關實驗及研究已表明，馬鈴薯脫毒試管苗生長較其他植物組培容易，是組織培養中的模式植物。2.3微型種薯

馬鈴薯試管薯是指在培養瓶內通過誘導，于試管苗葉腋間形成的直徑為2 ～ 10 mm 大小的塊莖。微型薯良種繁育體系減少了種薯繁殖周期和有關環節，能夠有效保證質量，提高生產水平，加快推廣，減少用種量。目前，美國、荷蘭等許多國家都在應用微型種薯繁育體系，有的國家已實行了法制化的良種繁育制度。我國在微型種薯方面的研究也取得了一定進展，毛碧增等成功建立了東農303 的高效脫毒微型薯誘導及繁育體系；劉華等用B9結合光照處理誘導試管薯，結果發現所有的黑暗處理都比光周期處理的結薯率高。[3]將脫毒苗定植在網棚，或原原種大田，生產原原種，或定植在溫室或網室內誘導脫毒微型薯形成。目前微型薯生產主要采取兩種方式：一是試管誘導培養生產微型薯；二是培養試管苗，2 然后通過扦插繁殖，并移栽于無土介質中生產微型薯。[4] 2.4莖尖培養脫毒法及其與熱處理法

馬鈴薯在栽培過程中，植株逐年變小．葉片皺縮卷曲，葉色濃淡不均，莖桿矮小細弱，塊莖變形龜裂，產量逐年下降，這些都表明馬鈴薯已經發生退化。種薯退化是弓1起產量降低和商品性狀變差的主要原因聊。據此，科學家從植物生理學、生物化學、栽培技術、栽培環境、種薯貯藏條件、病蟲害侵染等方面對馬鈴薯“退化”進行了深入的研究。研究表明：各種病毒、真菌、細菌等對馬鈴薯的侵染是導致我國馬鈴薯單產較低的主要原因。

目前，已知的馬鈴薯侵染病毒約有30種，由于馬鈴薯育種體系尚不健全，農民自留種現象普遍致使病毒感染面積占到栽培總面積的80％以上。在我國廣大馬鈴薯產區，危害馬鈴薯的5種主要病毒為馬鈴薯x病毒(PVX)、馬鈴薯A病毒和Y病毒(PVA，PVY)、馬鈴薯S病毒(PVS)、馬鈴薯卷葉病毒(PLILV)，以及馬鈴薯紡錘塊莖類病毒(PSTVD)。其中PVY、PLRV是危害最為嚴重的2類病毒。[5]

3、馬鈴薯莖尖脫毒技術的操作規程

3.1材料的選擇

實踐證明，同一個品種個體之間在產量上或病毒感染程度上都有很大的差異。進行莖尖分生組織培養之前．應于生育期對準備進行脫毒復壯的馬鈴薯品種或材料，進行田間株選和薯塊選擇，選擇具有該品種典型特性、生長健壯的單株(或無性系)，結合產量情況，選擇高產、大薯率高、無病斑的單株作為莖尖脫毒的基礎材料，以提高脫毒效果。由于馬鈴薯紡錘塊莖類病毒病(PSTV)在目前用植物莖尖分生組織方法很難脫掉，在進行莖尖剝離脫毒前，應先對人選的塊莖進行PSTV檢測，淘汰帶有PSTV的薯塊。[5][6] 3.2材料處理

為提高脫毒效果，脫毒材料在進行莖尖組織剝取前，應進行材料的熱處理，以鈍化病毒的活性，消除馬鈴薯卷葉病毒，提高脫毒效果。把入選的馬鈴薯塊莖進行打破休眠和催芽處理，當薯塊頂芽生長至lcm后，轉入光照培養箱內，以每天12h光照，照度3()()()lx，37℃的高溫處理6—8周。3.3取材和消毒

剪取經過熱處理后發芽塊莖上2～3cm長的芽若干個．用軟毛刷輕輕逐個刷 洗后放于燒杯中，用紗布封口。放于自來水下沖洗30min，然后在超凈工作臺進行嚴格消毒：先用75％的酒精浸15s，無菌水沖洗2次；再用0．1％的升汞浸泡8-10min(或用5％次氯酸鈉浸泡5—20min)，無菌水沖洗5～8次，每次3～5min(用無菌水沖洗過程中要不斷的晃動放置材料的容器，以保證漂洗更徹底)，沖洗完后放在滅過菌的培養瓶內待用。3.4剝離莖尖和接種

在超凈T作臺上，將消毒過的芽置于40x的解剖鏡下，一手用一把眼科鑷子將芽按住．一手用滅過菌的解剖針將葉片一層一層仔細剝掉，直至露出圓亮的生長點，用鋒利的無菌解剖針小心切取0．3mm以下的帶l，2個葉原基的莖尖．隨即將莖尖接種于已準備好的馬鈴薯莖尖培養基上，以切面接觸瓊脂。要注意確保所切下的莖尖不能與已剝去部分、解剖鏡臺或持芽的鑷子接觸。另外，在剝離過程中，必須注意使莖尖暴露的時間越短越好，因為超凈臺的氣流和酒精燈發出的熱都會使莖尖迅速變干。所以在選擇解剖鏡的燈源時，盡量以冷光燈為好．同時在材料下墊一張滅過菌的濕濾紙保濕，每剝一個莖尖后．換一張無菌濕濾紙。由于塊摹萌發的芽的數量有限。加上剝離過程中難免損傷到莖尖，導致可剝離的莖尖最少、成苗的機率小．易造成優良品種和材料的丟失。[7] 經過多年的實踐，我們總結出一種行之有效的方法：取經嚴格消毒過的塊莖芽(1cm長)接種在不含任何激素的馬鈴薯快繁培養基上，于25cc每天光照12h的培養室培養，3～4周后．待芽長成含4、5片葉子的小苗時，剪切成單節段，轉接于同樣的無激素MS培養基上，培養成苗。同樣方法擴繁l-2個周期，等苗達一定數量后，再直接用這些苗來剝離莖尖，既能保證材料不丟失，又能增加莖尖的數量，從而能增加成活的機率。

4、莖尖培養與病毒檢測

4.1培養基

選擇合適的培養基是莖尖培養成功與否的關鍵，根據我們的經驗，以Ms+GA2mg/L+BA0．5mg/L+NAA0．05+肌醇100mg/L+D-泛酸鈣0．2mg/L+食用白糖3％+瓊脂0．6％，pH5．8，為比較好的培養基組合。4.2培養

莖尖培養對培養器皿無特殊要求，一般以150ml三角瓶或250ml罐頭瓶，每瓶 裝40ml培養基，為節約培養基，每瓶接種2—3個莖尖，均勻分布于培養基表面。接種好的莖尖放在培養室內培養，溫度18-25℃，光照2 000～3 000lx，每天光照12h。培養2周后，培養瓶內的莖尖生長點便明顯變大變綠，30—40d即看到明顯伸長的小莖，葉原基形成可見的小葉，這時可轉入無激素的Ms培養基中。小苗繼續生長，并形成根系，4～5個月后即可發育成3—4個葉片的小植株，將其按單節切段，進行擴繁，成苗后，用于病毒檢測。

采用離體培養方法，研究了不同濃度多效處理對馬鈴薯試管苗生長和塊莖形成的影響。結果表明，在試管薯誘導條件下，0．1 mg／L多效唑處理促進了‘夏波蒂’提早結薯，使單瓶試管薯鮮重、平均直徑和單薯鮮重都顯著增加，同時降低了畸形薯率；而單瓶試管薯的結薯數量低于BA+CCC處理，但接近對照。這些結果表明：與廣泛應用的矮壯素相比，在馬鈴薯試管薯生產中使用多效唑能提高試管薯產量和質量，且其使用濃度僅為矮壯素的1／5000，有利于降低殘留并節約成本，是矮壯素較好的替代物之一。[6] 適宜的環境條件同樣重要。培養室必須清潔、無菌。馬鈴薯脫毒試管苗在2 000 LX的光照下，每天照16 h。試管苗生長最適宜的溫度是白天25-27℃，夜間16-2O℃，一定的晝夜溫差有利于試管苗壯苗，培養室的相對濕度為7O-8O，濕度過高過低都不利于試管苗的健壯生長。在陰雨的夏天，要除濕，使濕度降到5O 下，防止真菌，細菌污染。4.3病毒檢測

由莖尖分生組織培養獲得的小苗，經第一次擴繁后要對其進行嚴格的病毒檢測，以確定材料的脫毒情況。一般采用指示植物鑒定法、電鏡檢測法或抗血清鑒定法，經病毒檢測后，確認是不帶病毒的株系，才能進一步利用，對繼續帶病毒的株系應淘汰或進行再次脫毒。

5、主要存在問題

目前這種離體無性繁殖方法也還存在一些問題，嚴重制約著馬鈴薯脫毒推廣技術的進一步擴大遺傳上的不穩定性。

例如：組織培養條件再生植株器官形成時，可能有許多愈傷組織參與，而這些細胞的遺傳成分有的是變異的，有的是小變異的。而通過一個植物器管或一個節段直接長出芽用在具有遺傳嵌合性的品種上時，會產生一個嚴重的問題：不定 芽的形成會招致嵌合體裂解出現純型植株風險。5.1真菌和細菌污染

真菌和細菌污染是馬鈴薯組培過程中普偏存在地問題，控制不好很容易發生毀滅性的災難．必須做到提旱預防及時控制。操作前接種室要定期用甲醛熏蒸或紫外線殺菌，工作人員人內必須穿清潔工作服并套鞋套．嚴格做好工作人員操作前消毒規程．工作人員操作時候必須帶口罩禁止說話．嚴禁非工作人員出入．培養室內的材料，應該堅持定時查詢，發現污染問題及時處理同時適當降低培養室的濕度、溫度．減少空氣當中細菌數量。5.2“玻璃化”現象

不斷進行重復離體繁殖的時候．一部分培養物常常變成水漬狀、其植株莖部趨于透明狀．這類試管苗的生長和繁殖速度都會下降，最后甚至死亡．稱之為“玻璃化”現象，玻璃化的起因是細胞生長過程中的環境變化引起的。試管苗及時進行繼代培養，因為長時間培養，不能及時轉移，容易出現玻璃化苗。培養基細胞分裂素與生長素比例控制在一定濃度水平。因為過高。[7]易導致玻璃化苗的產生。培養基中瓊脂濃度應該控制在一定水平，過低時玻璃化苗比例增加，水浸狀嚴重，同時隨著多代培養后變異率越來越高．此外控制一定溫度、光照、通風都很重要。5.3快繁消毒問題

脫毒苗在快速繁殖的過程中溫室或者網室內棚脫毒苗在快速繁殖的過程中溫室或者網室內棚頂、墻壁、地面、土壤、蛭石、沙子以及工作人員嚴格消毒還不夠重視，在實際操作中，門窗和通風口50～60目紗布隔離，防止蟲媒再次感染。

6、馬鈴薯脫毒試管苗移栽與成活

從溫室建設，壯苗培育，試管苗移栽，水分管理，病蟲害防治等方面可提高其移栽成活率。

6.1移栽的條件① 溫室內最低溫度不低于6度。② 溫室內日照時間不低于12 h。③ 無污染的健壯試管苗。④ 溫室無蟲，無雜菌，基質澆透水。⑤ 基質pH5.5-6.5。6.2移栽

移栽前，在蛭石中撒入1-3 g／m 60 的多菌靈，2-3 g／m 65 代森錳鋅；同時，施入2Og／m。的磷酸二銨，10 g／m。的尿素，30 g／m 的硫酸鉀，澆透水，蓋上無機膜，全溫室噴一遍4O% 的氧化樂果800倍液或50 %抗蚜威800-1 000倍液，關閉門窗，提高基質溫度。5-7 d后，揭開無機膜，換氣，2-3 d后待用。

(2)移栽時，選擇苗高6-8 cm健壯且根系發達的試管苗，打開培養瓶口，置于煉苗室內2-3d。取出試管苗，在6℃中的水中將培養基沖洗干凈，浸入強力生根靈6 00O-8 000倍液2-3 min或25 mg/L的ABT生根劑溶液10-15 rain，然后，撈出來，按照4 cm×6 cm進行定植。定植時，用手指將蛭石劃開2-3 cm深的溝，把苗根放直，撒1-2 cm厚的蛭石，用霧狀噴頭噴水或噴霧器噴水，覆蓋塑料膜及60-70％ 的遮陽網。保持空氣濕度及防止強光直射，散射光有利于緩苗。

7、馬鈴薯組織培養的前景展望

組織培養是一種打破傳統的新型繁衍后代方法，能最大效率地利用空間，使高等作物生 長發育的微生物化，田間馬鈴薯育種材料圃種植 45000株/hm2在組織培養室每4cm 2培養1株且能多層架放置培養瓶加上繁殖周期短 變異母體材料擴大了500-2000倍。同時由于組織培養條件使染色體突變率的增強若再增設人工誘導突變劑，提高了變異率，所以組織培養在馬鈴薯育種是一種很有潛力的方法。[9]

參考文獻：

[1]屈冬玉，謝開云，金黎平，等．中國馬鈴薯產業現狀與趨勢

[2]中國馬鈴薯學術研討會與第五屆馬鈴薯大會論文集．2004：230—239． 裴榮信．馬鈴薯小整薯播種的理論與實踐．馬鈴薯雜志

[3]司懷輝等我國馬鈴薯組織和細胞培養研究進展，中國馬鈴薯。

[5]胡贊民;鄧向東;陳正華馬鈴薯脫毒微型薯人工種子工廠化生產技術研究[期刊論文]-中國科學院院刊。

[6]多效唑對馬鈴薯試管苗生長和塊莖形成的影響張志軍1，李會珍 2，姚宏亮2，周偉軍2(1．浙江大學農學系，浙江杭州310029；2．山西省農業種子總站，山西太原030001)[7]提高馬鈴薯脫毒試管苗溫室移栽成活率的方法孫偉勢(陜西省商洛市農業科學研究所，陜西商洛726000 [8]昆明市馬鈴薯莖尖分生組織培養脫毒技術 昆明市農科院 張麗芳等

[9]馬鈴薯莖尖脫毒號I央繁技術應用研究進展張思鳴1，王勇2，胡鈞銘2，王傳之2(1．貴港市種子管理站，廣西貴港537100；2．廣西大學農學院，廣西南寧530005)

第二篇：冬季馬鈴薯種植技術要點總結

寧南縣大行桑套作冬季馬鈴薯覆膜栽培技術要點

1、種薯處理：必須選用芽長1厘米左右，在散光下煉芽至綠色，出芽整齊的種薯。均忌使用未出芽的種薯，這是為以后破膜方便，減少勞動力的一項關鍵性技術；要求使用藥劑拌種或噴灑，使用一包銀法利兌一噴霧器水進行噴灑，晾干水汽后進行播種。

2、栽培方式：采用3尺拉線開廂，每廂種兩行；行距6寸，退步行8寸，畝植5000窩；深溝高廂，一次成型，種完后不用再上小廂和大廂。

將地整平整細后拉線挖溝，溝寬以窄板鋤挖出寬度為宜，大約7寸左右，深度不少于20厘米；挖好溝后在溝兩側錯窩擺放種薯，兩個種薯之間的距離是8寸，注意將種薯放在溝底兩側；然后在溝中間或兩個種薯中間施用農家肥和一半的馬鈴薯專用肥，將播種溝填平后再在廂面上施用另一半馬鈴薯專用肥；最后起高壟，廂面高度不小于30厘米，廂面寬度不超過2尺，在起好的壟大廂面上用芽前除草劑，如乙草胺等對廂面和廂溝進行噴灑一次。

3、地膜覆蓋：覆膜有兩種方式，一是播種后立即覆膜；二是整塊田出苗達10%左右開始覆膜，地膜應該選擇寬膜，寬度不少于3尺。無論是哪種覆膜方式都要注意即時破膜，避免馬鈴薯燒苗，要隨時檢查馬鈴薯出苗情況，發現有出苗頂膜的情況就要馬上破膜，就在破膜處抓土覆蓋。

4、施肥：馬鈴薯覆膜栽培采用的是將所有肥料作為底肥一次性施入的方式，以后不再施肥。畝用腐熟農家肥1000-1500公斤，馬鈴薯專用肥50公斤（氮、磷、鉀的含量為15：15：15），現蕾期畝用磷酸二氫鉀一包（400克）兌水4噴霧器（大約60公斤）進行葉面噴施兩次（每隔10天再噴一次）。

5、水漿管理：以田間土壤干濕度決定灌水次數，灌水灌浸廂水，速灌速排。

第三篇：關于植物組織培養技術感想

關于植物組織培養技術的感想

植物組織培養俗稱植物克隆，是當今國際農業領域的一項高新植物育苗技術，是在無菌條件下，將植物器官、組織、花藥、體細胞甚至原生質體等外植體接種到人工配制的培養基上培育成植株的技術。研究人員可以通過研究外植體其在不受植物體其他部分干擾的條件下的生長和分化規律，另一方面，研究植物體的器官、組織和細胞在改變培養條件，包括培養基的配方、光照和培養溫度等的生長、分化和發育規律，從而解決植物形態建成中的實際問題，為農林、醫學等生產提供理論基礎及實踐指導。

一、植物組織培養的原理

植物細胞的全能性是指植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力，整個過程包括細胞的脫分化和再分化過程。植物組織培養是利用植物細胞全能性，將其從植物體中分離出來，這一過程稱細胞脫分化，然后在一定的培養條件下經再分化，最后形成完整的植株的過程。

二、植物組織培養的基礎條件

植物組織培養的技術條件主要包括培養基的配制、無菌條件和培養條件等。

（一）培養基的配制

植物組織培養中一個關鍵的步驟。對組織培養的外植體生長而言，培養基的組分是一個決定性的因素，不同的植物材料要求不同的培養基，適于誘導愈傷組織的培養基不一定適于器官分化，適于固體培養的培養基不一定適于液體培養，因此要想獲得成功，必須精心選擇適宜的培養基。根據培養基的物理狀態，可將植物組織培養分為固體培養和液體培養。不同的外植體、不同的培養方法、不同的培養目的等，都要求采用不同的培養基。

一般來說植物體對土壤的pH值有一定的要求，所以外植體培養基也不例外。目前，在植物組織培養上常用的培養基有十幾種，其主要成分是大致如下：首先，培養基中含有大量的水分，可以滿足外植體生長對水分的需要。

其次，培養基中的礦質元素包括植物必需的大量礦質元素N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素Fe、Mn、B、Cu、Zn、Mo、Cl以及非必需的Na等。糖除了給外植體提供碳源外，還可調節培養基的滲透勢。碳源一般采用蔗糖，少量采用葡萄糖，濃度各有不同。

植物生長素和細胞分裂素要根據培養的目的適當選用。可采用IAA、IBA和NAA、KT、6-BA、ZT等。在誘導根和芽的等不同分化時段，還需根據要求調整培養基養分的比值。維生素B(硫胺素)是必需的，而煙酸、B16雖屬于不必需，但對生長有促進作用，所以一般也添加到培養基中。有些培養基中還包括氨基酸、水解酪蛋白、酵母汁、椰子乳等有機附加物，以促進細胞的分化。

（二）無菌條件

根據前面的配制可知，由于營養基的營養十分豐富，微生物極易滋生而造成污染，因此，在植物組織培養的整個過程中都必須保持嚴格的無菌條件。所以消毒顯得重要。外植體的消毒通常采用氯化汞、過氧化氫、次氯酸鈣、次氯酸鈉或70%的酒精等，消毒后需用無菌水充分沖洗。用具必須進行高溫高壓滅菌。培養室要盡量保持無菌狀態，定期用紫外燈照射和用殺菌劑熏蒸殺菌。

(三)培養條件

自然界中的植物體所需的光、溫、水、氣，植物組織培養時也同樣所需要。水分和氧氣條件一般容易得到滿足，而植物組織培養條件可通過人為控制光照和溫度，溫度一般控制在25~28℃之間，有的還要求有晝夜溫差，主要通過控制光強和光周期進行調節。人工光照一般采用日光燈，也可以透光的玻璃培養室利用自然光照。

三、植物組織培養的優缺點

（一）植物組織培養技術優點

植物可以不受生長季節限制地繁殖；不攜帶病毒，防止植物病毒的危害，極大的提高了農業生產效率；培養周期短，短時間內大批量的培育出所需要的植物新個體；可用組培中的愈傷組織制取特殊的生化制品；可短時間大量繁殖，用于拯救瀕危植物；可誘導之分化成需要的器官，如根和芽；解決有些植物產種子少或無的難題，如將香蕉進行組培得到人工種以方便移種。

（二）植物組織培養的缺點

為了滿足人們生活需要，吃飯問題已經與組培快繁密不可分了。由于培養基幾乎完全屬于人為調配獲得的，這就導致一個問題，調控的人是否理解植物的特性、是否熟悉培養基的理論和植物生理、是否有足夠的經驗來駕馭組織培養技術，這幾點都決定了組培育苗的品質。如果嚴格把關組培過程的話，那么組織培養或快速繁殖所獲得的苗，跟葉插、砍頭苗完全一樣，能最大程度的保留了植物的完整基因組。這是組培快繁的最大優勢，這也就決定了目前重要的作物、名貴花卉的繁殖和保存也都是組培快繁的途徑實現的。

轉基因植物食品對我們來說已經是一個公開的話題，也是借助組培快繁平臺來完成，我們生活中至少接觸30種轉基因植物的衍生產品。資料顯示這些衍生產品的缺點也比較明顯：1）表現為“硬化”不足，即從實驗室進入溫室后進行馴化栽培時間不夠，行內稱作“硬化”。2）激素殘留明顯，或者對激素的敏感性變化，少部分苗會在后期發根后呈現出一些殘留激素效應，這種效應不會超過一年，表現為容易出側芽、大量畸形根、生長周期紊亂、開花增多等。但是這種情況并不是組培快繁苗所特有，用激素誘導的葉插和砍頭苗也會出現這種癥狀，甚至更夸張！因此這一點并不是鑒別組培苗的根本。3）對有性繁殖的影響，由于組培快繁獲得的苗都是小苗，需要經過硬化和長期的溫室栽培才可能開花，所以一般存在對有性繁殖無影響。4）根原基異常，由于激素環境下會對導致根原基維管束的排列紊亂，這就導致了出根可能會受到抑制，正常的根無法順利萌發。

四、植物組織培養在生產實踐上的應用

（一）植物體的無性快速繁殖及脫毒

用組織培養技術進行植物的無性快速繁殖，已廣泛應用于一些花卉、果樹等園藝作物、農作物以及林木的育苗。如廣東、廣西和海南島香蕉的種植已大多采用試管苗，甘蔗和蘭花試管苗也已大量應用于生產，柑橘、菠蘿、草莓、桉樹以及其他許多花卉等也利用試管苗進行栽培。

受病毒感染的馬鈴薯植株，除了莖尖生長錐外，其他部位往往都帶有病毒。因此，繼續用塊莖作繁殖材料，必將導致后代植株染病。若利用莖尖生長錐作外植體進行無性快速繁殖，所生產出的幼苗將不帶病毒，從而達到脫毒的目的，可解決馬鈴薯品種的退化問題。利用組織培養技術進行無性快速繁殖具有許多優缺點，在實際生產中應該注意揚長避短，本著良心去做事，最好是建立相應的法規并嚴格執行。

（二）花粉培養和單倍體育種

利用花粉進行組織培養可以獲得單倍體植株。進行單倍體育種，可以加速育種的進程并可獲得純系。我國已培育出10多種花粉植株，如水稻、小麥、大黑麥、小黑麥、玉米、甜菜、茄子、煙草、辣椒、楊樹和橡膠樹等，其中小麥“花培一號”、煙草“單育一號”等優良品種已廣泛應用于生產。

（三）人工種子

將植物組織培養中產生的體細胞胚包裹在含有養分的膠囊內，可像種子一樣直接播種到大田用于生產，即所謂的人工種子。天然種子中的胚是合子胚，而人工種子中的胚是體胚，胚乳和種皮也是人工的。目前，已有胡蘿卜、芹菜、苜蓿、棉花、玉米、水稻、橡膠樹等幾十種植物的人工種子試種成功，但成本相對較高，美國己大規模生產樹木的人工種子。

（四）原生質體培養和體細胞雜交

采用酶法去除細胞壁的原生質體培養，不僅是研究細胞生命活動機理的良好體系之一，還可以通過原生質體培養開展原生質體融合與體細胞雜交，獲得新品系、新品種。從理論上講，細胞雜交比有性雜交可得到更多的不同類型。

五、總結

目前，植物組培方式以固體培養基培養為主，液體培養基培養由于具有物質交換快，生長速度快，產生的代謝物質不會在組織周圍積累等優點，值得大力研究與推廣。同時要有計劃、有步驟地引進先進的植物組培苗生產配套設施，建立健全培養室組培快繁與溫室栽培相配套的組培苗生產體系，確保培育出高質量的商品化組培苗。

總之，植物組織培養技術仍處于發展階段，還存在許多問題，其潛力也沒有得到充分發揮，許多機理有待深入探索，相信但隨著科技的進步和社會的發展，問題可以逐步得以解決。希望在不久的將來，植物組織培養技術能夠我國開發西部、建設森林城市、綠化山川、防風固沙、退耕還林、以及調整農村產業結構中發揮巨大作用，該項技術將會在我國甚至全世界將發揮舉足輕重的作用。

第四篇：馬鈴薯種植技術

馬鈴薯種植技術

最佳答案 每100克土豆所含營養如下 名 稱 數 量

水分(克)79.8 熱量(千卡)76 能量(千焦)318 蛋白質(克)2 脂肪(克)0.2

碳水化合物(克)17.2

膳食纖維(克)0.7

膽固醇(毫克)0 灰份(克)0.8

維生素A(毫克)5 胡蘿卜素(毫克)30 硫胺素(微克)0.08 核黃素(毫克)0.04 尼克酸(毫克)1.1 維生素C(毫克)27 維生素E(T)(毫克)0.34 a-E 0.08(β-γ)-E 0.1

δ-E 0.16 鈣(毫克)8

磷(毫克)40

鉀(毫克)342 鈉(毫克)2.7 鎂(毫克)23 鐵(毫克)0.8 鋅(毫克)0.37 硒(微克)0.78 銅(毫克)0.12 錳(毫克)0.14 碘(毫克)1.2

脫毒馬鈴薯大西洋栽培技術

一、品種習性：大西洋為油炸加工型品種，生育期從出苗至收獲85－90天左右，該品種較感晚疫病，既需冷涼的栽培環境又不耐低溫，因此生產中苗期應做好防凍工作，而各個技術環節都應抓好疫病的防治。

二、地塊選擇與準備：馬鈴薯是地下塊莖作物，需要深厚、疏松因此在地塊的選擇上要盡可能選擇疏松的沙質壤土作為栽培田塊，在滲水能力較差的水稻田種植，要推行高畦栽培，以利清溝排漬，增強土壤通透性。生產地點應集中連片，以便收購，煙區不提倡發展，種植區絕對不能與烤煙或其它茄科作物相鄰或輪作。田塊選擇好后進行冬翻曬白，開深溝起

高畦，畦寬90－100cm，畦高30cm，溝寬20－25cm。大西洋需肥量大，每1000kg塊莖需吸收

氮5.8kg、磷2.5kg、鉀10.8kg，NPK比約為2：1：4。特別是前中期吸收養分較多，因此要施

足基肥，基肥以有機肥和磷鉀肥為主，有機肥每畝需要1500kg以上，在整畦時施入，化肥選

擇氮磷鉀含量都為15％的含硫復合肥，每畝50kg，播種前在畦中間開溝施入。

三、種薯的處理：種薯的貯藏應選擇冷涼干燥的環境通風貯藏，播種前挑掉病、爛薯

塊再進行消毒與催芽，消毒一般用福爾馬林1份兌水200份，浸種5分鐘后充分攤涼，催芽可

利用室內自然催芽，如播種前10－15天仍未見芽眼，可用1ppm的“九二0”浸種15分鐘后撈

起，進入室外濕潤沙床或濕潤畦中，搭弓形架覆膜借助陽光和溫催芽，一般10－15天后可長

出1－2cm的壯芽。

薯塊過大在播種前可進行切塊處理，以保證每畝所需的播種密度。切塊時應保證每塊薯

塊都要帶有芽眼，薯塊大小不宜低于40g，切薯塊的刀具需準備兩把，浸在高錳酸鉀溶液中

消毒，輪換使用，切塊后切口需沾草木灰消毒，并攤涼8小時以上再進行播種。

四、播種期選擇：適期早播可避開后期高溫高濕氣候的不利影大西洋播種期安排要以

避晚霜凍害和塊莖膨大期避開25度以上高溫天氣為依據。當土層10cm溫度達

7－8度時，越早

播種產量越高。但是播種過早則極可能遭受凍害影響，在沒有防凍保護措施下栽培，大西洋

在零度以下既受凍害，造成絕收，這點各鄉鎮在示范推廣時應反復強調防凍措施的重要性，切不可麻痹大意。播種過遲，晚疫病發生嚴重，而且商品薯沒有好的市場價格，直接影響

種植效益。

五、播種： 每畝播種量需確保在3000至4000株，實行寬行窄株，每畦播兩行，株距

30cm，播種深度5－7cm，種薯在播前進行分選，將芽長相近的薯塊安排在同一塊播種，播種

時，芽眼朝下，切口朝上，減少爛薯，促進生長發達根系，播后用火燒土拌腐熟豬糞或雞鴨

糞蓋種，然后搭建中膜或地膜小拱棚防寒。出苗后密切注意棚溫，棚溫過高應及時揭膜通

風，出苗一個月后除去拱棚。

六、田間管理：

1、間苗：出苗后及時間苗，每穴保留一根最強壯的幼苗，其余的越

早去除對產量影響越小。間出的苗與不發芽的種薯要帶出田外深埋處理。

2、追肥：出苗后10天內進行第一次追肥，可用稀薄的人糞尿澆施，以保證馬鈴薯幼苗

生長所需的氮肥，為中后期的生長打好基礎。現蕾期進行第二次追肥，以鉀肥為主，配合適

量氮磷肥，以滿足結薯需要。施肥上應注意適氮增鉀，防止光長秧不結薯。如施氮過多表現

徒長，用0.02％硫酸鎂溶液噴施，可抑制徒長。

3、排水：田間濕度過大是病害發生的主要原因，因此要防止田間積水，降低田間濕

度。其方法是高畦栽培，深挖邊溝，水溝深度需在50cm以上，而且做到溝溝相通，遇雨能迅

速排走田間積水，同時要防止田間雜草叢生，經常進行清溝，這些工作需在雨季來臨前完

成。

4、中耕培土：整個生長過程一般要求中耕2－3次，齊苗時結合間苗進行第一次深中

耕，以提高地溫，促進發苗；團棵期進行第二次中耕和淺培土，以利多結薯；封壟前進行第

三次中耕培土，累積培土厚度為10－20cm，畦高35－40cm，培土能加厚結薯層次，有效提高

產量，同時避免薯塊外露，降低品質。

5、病蟲害防治：脫毒馬鈴薯大西洋主要病害為晚疫病和葉斑病，蟲害主要是蚜蟲和地

老虎。病害防治要以防為主，綜合防治，通過各種農業措施降低田間濕度，出苗后20天起，每隔7－10天噴一次藥，連噴3次以上。藥劑選擇上推薦使用代森錳鋅、雷多米爾、農用鏈霉

素、殺毒礬等藥劑，各種藥濟的使用一定要輪換使用，應密切關注病害的發生發展，及時采

取措施，最大限度降低病害造成的損失。防治蟲害則在播種時每畝施入2kg呋喃丹，可起到

較好的防效。

七、收獲貯藏： 大西洋成熟期的判斷有以下兩個方法，一是薯塊表面出現密集網紋，二是莖葉出現枯黃。大西洋薯塊采收前4－5天，要割去地上枝蔓，并選擇在無雨天氣采收，采收時應注意保證薯塊的完整性，避免機械損傷。采收后的貯藏環境一定要避光、陰涼、通

風，切不可陽光直射。

馬鈴薯新品種高產栽培技術要點

隨著種子事業的蓬勃發展，近年來很多種薯專業村、繁種戶引進許多新品種，但是由于對新品種種植技術不甚了解，使其種薯生產缺苗斷條，腐爛嚴重，收效甚微，效益平平。為使繁種戶提高生產技術水平，創高產，增效益。我公司進行了實地跟蹤服務，聘請專家到田間進行技術指導，最后總結出幾項高產栽培技術要點，現推廣到戶，望種植新品種的農民朋友遵照執行，確保“高一優”農業生產的順利發展。

近年來市場較流行的新品種有：早大白、魯引

1、荷蘭

15、中薯系列等這幾個新品種，種植時必須遵循如下要點：

一、困種催芽，困種催芽是保證提早出苗，出好苗，苗齊苗壯的重要技術措施，應做到“不催好芽，不下地栽種”。催芽的方法很多，但一般常用的方法是在播前20天出窖，將種薯放到10-15℃環境中，薯堆高40-80cm。用黑布蓋上，每5天左右翻動一次，使上下均勻，共2-3次，困種15天。翻動期間嚴格淘汰病薯，是防止不出苗的關鍵，待幼芽冒出時將種薯取出，平攤于光亮室內，使其均勻見光，達到白芽變成濃綠色、較粗壯、長度在0.5cm為宜，然后切塊。注意必須先困種后切栽子。不許先切栽子，然后裝入化肥袋困種，造成栽子未下田就腐爛。

二、切塊技術，切塊（割栽子）應考慮土壤墑情而定，一般每塊不要低于20—25克；每個切塊帶有1-2個芽眼，切塊應有相當厚度，多帶薯肉，充分利用頂芽優勢。頂芽要縱向切，側芽要橫向切，高產栽培應淘汰基芽（尾芽），以確保種薯高產。切塊時，切刀應進行消毒處理，遇到病薯時要換刀在切，常用方法用3%高錳酸鉀溶液或來蘇兒浸刀，也可用鹽水浸刀，邊切邊挑出病薯,嚴格防止病薯下田。

三、薯塊處理，切完的薯塊，切不可立即下田，應立即用敵克松或福美霜或甲霜靈錳鋅加多菌靈拌種殺菌，促進薯塊傷口愈合，干爽后才能下田，有條件的可用生產調節劑噴灑栽子，涼干成膜后，再下田播種，對種薯起到防止病菌感染浸入，促進植物生長，防病增產的作用。

四、播前選地選茬，馬鈴薯應選取肥力較好，土壤松軟的沙壤土，排水良好的平川地或坡崗地。（PH值在5.6—6.5微酸性土壤為宜）周圍30m距離內不能種植茄

科作物，特別是黃煙。糜谷茬、麥茬、蔥蒜茬為最好，其次是玉米、豆茬，提倡種薯地應選南北垅向栽培，東西垅栽培一般減產二成左右。其它白菜茬、甜菜茬、均不能用來種馬鈴薯。必須注意有嚴重藥害的地塊不能種馬鈴薯，特別是用過氯嘧黃隆、豆乙合劑、咪唑乙煙酸（普施特）、氟磺胺草醚等的地塊，二至四年不能種馬鈴薯，若種就要嚴重減產或絕產。

五、播種技術

（1）播期應選土壤深度10cm處，地溫在8℃以上為宜，早熟品種最佳播期一般在5月8—15日，晚熟品種在5月1 日至5月5日。借鑒物候期作參考，一般選在地氣起來后3至5天播種為宜，播種深以8cm為宜。施肥10-12cm深為宜，要種肥分離。

（2）播種時土壤濕度大時（手握成團），芽眼宜向上栽植，濕度中等 時芽眼向上向下均可，濕度過小時，芽眼宜向下栽植，特別干旱時應采取提前引溝，等雨后播種為宜。

（3）由于新品種薯塊大，產量高，結薯集中的特點，要求深栽，淺埋，多次覆土，即要求栽在垅溝里，然后淺覆土鎮壓保墑，避免張口垅，以利提高地溫，促進早出苗，當出齊苗后，再通過田間中耕作業而逐漸增加覆土層。垅的型狀應是大方頭型，切忌尖型垅，最好用小方犁覆土。

六、合理密植

合理密植是實現高產的中心環節，也是控制薯型、減少腐爛、提高種用價值的關鍵措施。其表現為苗勻、莖粗、薯多、個大，高產實驗證明馬鈴薯種植適宜密度70cm垅距，株距18-20cm，畝保苗在4800—5300株為宜。

七、合理施肥

1、馬鈴薯是高產喜肥作物，合理增施腐熟的馬糞和過圈肥等農家肥料，配合施用適量化肥，是大幅度提高馬鈴薯產量極為重要的技術措施，根據我縣實際，每畝施優質農家肥2500kg，剩余部分結合化肥作種肥施用，常用配方兩種：

①尿素5-7.5kg/667㎡，二銨15-20kg/667㎡，硫酸鉀10-12.5kg/667㎡或馬鈴薯專用肥35至40kg/667㎡。

②最新高產施肥配方底肥每667㎡用：磁化肥7.5kg、尿素2.5kg、二銨2.5kg、生物鉀1kg，活化磷1kg共計17kg，成本約42元/667㎡，播前地頭混合攪拌均勻。

施肥方法：實行種肥分離，用精量播種機播肥，深度20cm，覆土8-10cm。常規施肥方法最好在播種前將氮肥和磷肥混合摻入腐熟的有機肥中，條施溝內，然后播種。

2、適時追肥與防治病害相結合

①在株高10cm需噴強力增產寶5ml加抗病毒1號3ml。加水15kg667㎡噴灑，要求四輪四檔大油門作業（扎根）。

②株高20cm噴灑中華大肥王200g加300g尿素，加水15kg/667㎡葉片噴。（長秧）

③盛花期之后，應分三至五次用克露或乙磷鋁或殺毒礬或甲霜靈錳鋅或薯瘟消或薯病疫殺加多菌靈，按劑

量每隔七至十天對種薯田進行噴撒防治晚疫病。④開花后期，葉噴氨基酸微肥或用磷酸二氫鉀促進結薯膨大以利增產增收。

八、耕作要求

提倡一耢、兩鏟、三趟栽培模式，早熟品種要早鏟、早趟，花前耕作完畢，為防畸型薯的產生要求寬寬的垅臺，窄窄的壟溝，深松35cm此項措施是決定產量高低，薯型好壞的一項重要措施，保持薯在垅下10cm為宜。

九、防病事項

1、防病要及時：晚疫病在大氣濕度85%，溫度22-24℃易發生流行，一般在開花初期·就要噴藥防治，以防為主，防治結合。

2、為防止地上莖葉得病后出傳入地下莖塊中，造成種薯爛尾部，應及時拔出地上部秧子，這是防止爛薯的一項重要措施，時間一般在8月15日左右，植物初漸黃化時，雙腳踩住將秧拔出后運出地外。

3、防病的同時要注意防蟲害，用50%敵敵畏乳油1000倍液防治瓢蟲。用40%氧化樂果2000倍液防治蚜蟲。

十、貯藏辦法

貯藏是馬鈴薯一種生理生化過程，馬鈴薯淀粉在10—16℃時穩定，0—10℃時淀粉轉化成糖，同時發熱，此時窖門應敞開。種薯貯存最佳溫度是1—3℃，在4—13℃時是糖轉化成淀粉階段，此時最適合于淀粉加工，貯藏濕度85%最好；超過85%到93%時，窖易結頂，須用高溫噴燈處理，窖內應放上溫度濕度計。每天觀察一次，發現特殊情況應及時處理。窖門為進氣孔，同時應加出氣孔，窖上立個出氣爐筒，利用窖門和出氣爐筒子的高低差，形成空氣循環，窖內保持空氣新鮮，種薯貯藏在窖內的高度為：早熟品種在窖內高度為1.3—1.6m，晚熟品種在窖內高度為1.7m，散積堆放時，窖內堆放應平展，避免形成氣道，使空氣易流通，抑制生芽。袋積應小于2.7m,總體觀察貯藏量不能少于窖的2/3，太少易凍，太多易傷熱，此十項新技術是確保馬鈴薯新品種種植成功

第五篇：園林植物組織培養技術測試題一

《園林植物組織培養技術》測試題

一、填空題（每空0.5分，共15分）

1.植物組織培養按培養對象分為_______、_________、_________、__________、__________等幾種類型。

2.糖在植物組織培養中是不可缺少的，它不但作為離體組織賴以生長的_________。而且還能___________

3.無病毒植物的鑒定常用的方法有__________法、___________法、__________法。4.細胞全能性是指植物的每個細胞都具有該植物的__________和__________的能力。

5.7.6-BA / NAA的高低決定了外植體的發育方向，比值低時促進__________的生長，這時__________占主導地位；比值高促進__________的生長，這時__________占主導地位。

6．植物組織培養按培養的方式分為_______培養和_______培養。

7．在通過微莖尖培養脫毒時，外植體的大小應以成苗率和脫毒率綜合確定，一般以__________mm、帶__________個葉原基為好

8.在無毒苗的組織培養中，外植體的大小與其成活率成__________，而與脫毒效果成__________。

9.去除植物病毒的主要方法是_______和_______兩種方法，當把二者結合起來脫毒效果最好。

10.進行植物組織培養最基本的前提條件是_______。

11.植物組織培養按培養過程中是否需要光，可分為_______培養和_______培養。12.在組織培養中，不耐熱的物質用__________法滅菌，而培養基常用__________法滅菌。

13.大多數植物組織培養的適宜溫度范圍是_______℃，培養基的PH值范圍是_______。

14.病毒在植物體中的分布規律為___________________________________________

二、不定項選擇題（每題2分，共24分）1.培養室里的度一般保持在_________

A 30～40%；B 50～60%；C 70～80%；D 80～90% 2.下列不屬于生長素類的植物激素是_________。A Kt；B IAA；C NAA；D IBA 3.影響培養基凝固程度因素有_________。

A 瓊脂的質量好壞；B 高壓滅菌的時間；C 高壓滅菌的溫度；D 培養基的PH 4.活性炭在組織培養中的作用有_________。

A吸附有毒物質；B減少褐變，防止玻璃化； C創造黑暗環境，增加培養基的通透性，利于根的生長； D增加培養基中的養分；

5.下列具有細胞全能性的細胞是：_________。

A 成熟的老細胞；B 幼嫩的組織細胞；C 愈傷組織細胞D 番茄的受精合子 6.高溫易被破壞分解的植物激素是_________。A IAA；B GA；C NAA；D Zt 7.脫落酸（ABA）需要用_________法滅菌。

A 灼燒滅菌；B 干熱滅菌；C 過濾滅菌D高壓濕熱滅菌

8.同一植株下列_________部位病毒的含量最低。

9.環境的相對濕度過低會使培養基喪失大量水分，濕度過高時，易引起棉塞長霉，A 葉片細胞；B 莖尖生長點細胞；C 莖節細胞；D 根尖生長點細胞 9.能打破種子休眠，促進種子、塊莖、鱗莖等提前萌發的激素是：A GA；B IAA；C NAA；D Zt

10.下列不屬于活性炭在組織培養中作用的是_________。A吸附有毒物質；

B減少褐變，防止玻璃化；

C創造黑暗環境，增加培養基的通透性，利于根的生長； 11.植物組培時，培養溫度一般控制在_________

A 23~27℃B 25+2℃C ＜30℃D ＞15℃ 12.在植物組織培養中，培養基的pH一般為_________ A 低于5.0B 5.6~6.5C 6.0~7.0D 7.0以上

三、判斷題（每題1分，共10分）

1.一個已分化的細胞若要表現其全能性，首先要經歷脫分化過程。

2.一般的說，PH值高于6.5時，培養基全變硬；低于5時，瓊脂不能很好地凝固。3.一般來說，光照強度較強，幼苗容易徒長，而光照強度較弱幼苗生長的粗壯。4.用于外植體、手、超凈臺等的表面消毒酒精濃度越大，消毒效果越好越好。5.由性細胞發育而成的胚叫做胚狀體，而由體細胞發育而成的胚叫做合子胚。6.幼年細胞和組織比成年細胞和組織誘導愈傷組織容易。

7.未成熟胚較小、較嫩、顏色淺，易培養；成熟胚較大、較硬、顏色較深，不易培養。

8.環境的相對濕度可以影響培養基的水分蒸發，一般要求80％-90％的相對濕度。

造成污染。

10.殺死、消除或抑制部分微生物，使之不發生作用稱為消毒

四、名詞解釋（每題3分，共12分）1.植物組織培養 2.脫分化 3.接種 4.外植體

五、簡答題（共14分）

1.植物組織培養有哪些特點?（4分）

2.培養基的組成是什么（3分）；為什么要在配制培養基前配制母液？（3..植物組織培養的應用原理是什么?(3分)

4分）