第一篇：自身免疫病和風濕病的免疫學檢驗

自身免疫病（AID)是指由于過度而持久的自身免疫反應導致組織器官損傷并引起相應器官病變或臨床癥狀的一類疾病。風濕病是一類涉及到關節、軟骨、肌肉等結締組織的慢性疾病。

實驗室檢查特別是免疫學檢查對AID和風濕病的診斷是及其重要的。有些檢查可作為診斷指標之一；

有些檢查可作為病情進展和預后判斷的監測指標； 有些檢查可作為藥物療效的考核指標之一。

隨著免疫學技術的發展以及分子生物學的應用，各種自身抗體的檢查越來越多地應用于臨床。作為臨床醫生，應該熟悉這些檢驗的意義，并能結合臨床及其他檢查，客觀地運用這些指標，協助診斷，了解病情，指導治療。這里僅介紹臨床常用的一些自身抗體的檢測。

一、抗核抗體測定

（Antinuclear antibody ,ANA)ANA是抗細胞核多種成分的自身抗體，無種屬及器官特異性。ANA可分為抗DNA抗體、抗組蛋白抗體、抗非組蛋白抗體、抗核仁抗體及其他細胞成分抗體。這些抗體共同組成ANA譜。

抗核抗體（ANA）的檢查最常用于篩查全身性風濕病和自身免疫病。ANA的檢查可觀察到能與細胞核內的核酸和蛋白抗原起反應的自身抗體。細胞內可能存在對多種抗原起反應的抗體。只有某種抗體的效價很高時，IFA才能加以鑒別。homogenous（均質型）

又稱彌散型，相應的抗原是雙鏈DNA和組蛋白復合物。常見于SLE，特別是腎臟受累病人。也可見于其它結締組織病，如：風濕性關節炎，MCTD，干燥綜合征，硬皮病，慢性活動性肝炎及原發性膽汁性肝硬變。Peripheral(周邊型)

相應的抗原為雙鏈DNA，多見于活動性SLE病人。Speckle(斑點型)

主要是針對ENA的抗體，包括Sm，RNP，SSA，SSB，Scl-70。一般認為低效價的斑點型ANA不是結締組織病特有的，實際上不代表臨床異常。高效價的抗Sm抗體多與SLE有關。高效價的抗RNP自身抗體見于MCTD，但也見于SLE。抗SSA和抗SSB抗體，見于S.S，也可見于SLE。當病人有抗SSA抗體時，通常以皮膚表現和光過敏為主。，也存在于ANA陰性狼瘡和新生兒狼瘡。Scl-70抗體與硬皮病有關。Nucleoli(核仁型)

其靶抗原是與RNA分子相關的核蛋白。多見于硬皮病。

Centromere(著絲點型)

抗著絲點抗體（ACA），多見于全身性硬皮病的CREST綜合征。

常用檢測方法為IFA、ELISA、免疫印跡法、RIA、免疫斑點法、膠體金標斑點免疫滲濾法等。其中IFA是應用較廣的一種方法。一般采用鼠肝切片或Hep-2細胞為底物抗原片，當加入病人血清時，病人血清中的ANA可與細胞中相應抗原成分結合。再加入熒光標記抗人IgG，在熒光顯微鏡下可見細胞核內亮綠色熒光。〖參考值〗

<1:10或陰性 〖臨床意義〗

ANA陽性見于多種疾病，常用于風濕病及自身免疫病的診斷。SLE患者陽性率在95％以上，且效價常在1：80以上。在其他風濕病如RA、系統性硬化癥、皮肌炎、干燥綜合征(SS)、混合結締組織病(MCTD)等也可陽性。其他如肝病，病毒感染等也可呈低效價陽性。〖注意事項〗

在大約1%的正常人的體內可測到低效價的非特異性抗核抗體，80歲以上老人的檢出率可高達50%。高效價的ANA一般與活動期SLE密切相關。采用Hep-2細胞檢測ANA，可見到不同的染色模型。

此外，口服避孕藥的婦女也可檢測到ANA。

二、可提取性核抗原（Extractable nuclear antigen ENA)抗體

ENA是細胞內許多小分子的RNA和多肽組成的非組蛋白的酸性核蛋白顆粒。分布在細胞質中的稱為小細胞漿核糖核蛋白(scRNPs)；分布在細胞核內的稱為小細胞核核糖核蛋白(snRNPs)。目前已發現的有20余種，其中常用的抗ENA抗體有如下幾種。

（一）抗Sm抗體

Sm是病人Smith的縮寫。Sm抗原屬于SnRNP，由5個RNA和多肽組成，抗原表位在29KD、28KD和13.5KD多肽上，抗Sm抗體是酸性糖蛋白，是SLE的標記抗體。(二)抗nRNP(u1RNP)抗體

u1RNP是u1RNA和蛋白質組成的，抗原表位在73KD、32KD和17.5KD多肽上，是混合結締組織病（MCTD）的重要血清標志。

（三）抗SSA抗體

SS為干燥綜合征的縮寫。此抗體又稱抗RO抗體。SSA抗原是RNA和蛋白質復合物，抗原表位在52KD多肽上，主要見于原發性干燥綜合征患者及SLE。

（四）抗SSB抗體

SSB抗體常伴隨SSA抗體同時出現，又稱抗La抗體，SSB抗原屬于SnRNP，是含有RNA和50KD蛋白質的復合物。抗原表位在45KD、47KD和48KD多肽上。與SSA抗體并存對診斷SS有特異性。

（五）抗Scl-70抗體

Scl-70抗原表位在86KD、70KD的片段上，是DNA拓撲異構酶I的降解產物，抗Scl-70抗體幾乎僅見于硬皮病，陽性率30%左右。

（六）抗Jo-1抗體

Jo-1抗體是組氨酰tRNA合成酶，抗原表位在55KD多肽，抗Jo-1抗體是多發性肌炎和皮肌炎的標記抗體，陽性率25-40%。

（七）抗核糖體抗體

核糖體在核仁合成，然后轉入胞漿，抗原表位在大亞基上的38KD、16KD和15KD多肽上。抗核糖體抗體陽性主要見于SLE，陽性率20-30%。

檢測以上抗體的方法主要有：對流免疫電泳法(CIE)、雙相免疫擴散法，免疫印跡試驗(IBT)，免疫斑點技術和ELISA法等。一般采用兔胸腺或牛胸腺提取物或細胞提取物作為抗原。近年來，應用分子重組抗原制備的試劑盒已投入市場。〖參考值〗陰性 〖臨床意義〗

1.抗n RNP抗體：見于35－40％的SLE病人，在MCTD病人中陽性率可達95－100％，也可見于其他風濕性疾病。

2.抗Sm抗體：主要見于SLE及重疊綜合征，急性期病人75％為陽性。一般SLE患者30－40％陽性率。但Sm抗體陽性者90％以上為SLE，故稱之為SLE的標記抗體。

3.抗SSA和抗SSB抗體：見于40－45％的SS病人。抗SSA抗體也可見于25％的SLE病人及其他風濕性疾病；抗SSA抗體與新生兒狼瘡和先天性傳導阻滯有關。抗SSA抗體也可見于病毒感染等非風濕性疾病。抗SSB抗體對原發性干燥綜合征較特異，但陽性率僅27％左右。

4.抗Scl-70抗體：一般僅見于系統性硬化癥病人，陽性率20－60％。

5.抗Jol-1抗體見于30％的多發性肌炎病人及10％的皮肌炎病人。抗Jol-1抗體與多發性肌炎病人間質性肺炎的發生率增加有關。

6.抗rRNP 抗體：主要見于SLE患者，陽性率20%左右，與中樞神經系統病變有關，多在疾病活動期出現。〖注意事項〗

判斷試驗結果時要結合臨床表現作出評價，也應根據試驗方法來作出解釋。對流免疫電泳法和雙相擴散法敏感性低，但特異性較高；免疫印跡法、斑點免疫法及ELISA方法敏感性提高，但特異性相對減少。

三.抗雙鏈DNA抗體（Antidouble-stranded DNA，A-dsDNA，)

A-dsDNA 對SLE有高度特異性，是針對細胞核脫氧核糖核酸的自身抗體。臨床上常用的檢測方法有：①Farr??s法：125I－DNA與待檢標本中的A-dsDNA形成免疫復合物，加飽和硫酸銨使復合物沉淀，以γ計數器分別測定上清中游離及沉淀物中已結合的125I－DNA含量，可計算出血清中A－dsDNA的結合活性。

②ELISA法：將小牛胸腺DNA包被在微孔板中，加入病人血清，如有A-dsDNA則結合到微孔板上，加入酶標抗人IgG，加入底物顯色后經酶標儀比色可知血清中A-dsDNA抗體的量。

③免疫熒光法：采用馬疫錐蟲或短膜蟲作為基質，加入病人血清。血清中的A-dsDNA與膜上的天然DNA結合，加入熒光標記抗人IgG。馬疫錐蟲和短膜蟲的動基體會發出綠色熒光。

④金標斑點法：雙鏈DNA包被于硝酸纖維膜上，加入病人血清，加入金標記抗人IgG，如有A-dsDNA存在，會顯示紅色斑點。〖參考值〗依方法不同參考值也有不同。

Farr??s法：≤ 0.20

免疫熒光法：<1:10

ELISA法：依試劑盒而定，一般<70u

金標法：陰性 〖臨床意義〗

A-dsDNA 陽性對 SLE 有較高的特異性。大約60％的活動性 SLE 病人會出現 A-dsDNA。其他風濕性疾病也會出現，但陽性率非常低，如RA、S.S。

〖注意事項〗

假陽性結果非常少見，但陰性亦不能排除SLE的診斷。

四.抗中性粒細胞胞漿抗體（Antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)測定

ANCA是針對中性粒細胞胞漿多種成分的 自身抗體，主要有髓過氧化物酶(MPO)和蛋白酶3（Proteinase 3，PR3)的抗體。主要用于診斷Wegener 肉芽腫和系統性血管炎，特別是伴有腎病、呼吸疾病或其他類型血管炎引起多器官損害的患者。檢測方法有IFA、ELISA、IBT等。〖參考值〗

陰性。〖臨床意義〗

免疫熒光法檢查ANCA陽性一般分為兩種熒光類型，一種是胞漿型，稱為cANCA，一種是核周型，稱為pANCA。cANCA產生彌漫性細胞漿染色，是針對PR3的抗體，一般見于wegener肉芽腫病(WG)，特別是腎和肺受累的病人。pANCA產生核周染色，是針對MPO的抗體，主要見于系統性血管炎病人。

在WG病人中，cANCA陽性率在活動期可達80％，且有較高的抗體效價。在緩解期抗體陽性率低，且效價下降，或完全消失。

〖注意事項〗

ANCA 陽性也可見于 Good-Pastare??s 綜合征和SLE病人。WG的診斷不能單純依賴ANCA的結果，還要結合其他臨床表現，試驗室檢查和組織病理學檢查才能確定。ANCA效價不能完全反應疾病的活動以及對治療的反應。

pANCA 陽性不是特異性的抗MPO抗體，也可以是抗粒細胞胞漿中其他酶的抗體，如彈性蛋白酶，組織蛋白酶G等。ANCA檢測應注意排除其他自身抗體的交叉反應，如ANA。因其可產生假陽性應注意鑒別，并進行ANA檢測。

五、抗線粒體抗體（Antimitochondrial antibody,AMA)

AMA是以細胞漿中的線粒體為抗原的一種自身抗體，無器官和種屬特異性。一般采用大鼠腎及胃作為抗原基質，采用IFA檢測，陽性可見大鼠腎和胃的細胞漿呈現細顆粒狀熒光。采用免疫印跡法可將與線粒體抗原的反應分為從M1到M9九種類型，高效價的M2和M9型自身抗原與原發性膽汁性肝硬變相關。目前已有檢測M2的ELISA試劑盒供應。〖參考值〗

陰性

>1：10 為陽性 〖臨床意義〗

AMA是原發性膽汁性肝硬化的標記抗體，陽性率達90%，并且50%患者抗體效價達1：1280或更高。此外，也可見于慢性活動性肝炎、隱匿性肝硬化。肝外阻塞性黃疸患者AMA常陰性，因此可作為鑒別診斷的一個指標。正常人中陽性率<10%，且效價較低。六.抗平滑肌抗體（Antismooth muscle antibody，ASMA)

ASMA是抗肝細胞膜上一種肌動球蛋白的自身抗體。這種肌動球蛋白與平滑肌有交叉抗原性，因此與平滑肌有反應。一般采用IFA法，以大鼠胃作為抗原基質，陽性可見胃壁平滑肌呈現亮綠色熒光。

〖參考值〗 陰性，>1：10為陽性 〖臨床意義〗

主要見于明顯活動期的自身免疫性肝炎患者，陽性率在80%以上，效價

在1：80以上。急性病毒性肝炎早期ASMA也可陽性，且早于 HBsAg出現。其他疾病如傳染性單核細胞增多癥、SS、RA、支原體肺炎、腫瘤和病毒感染者也有不同程度的陽性率。正常人中僅有2%陽性。

七.抗甲狀腺球蛋白抗體（ATGA)和抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)

ATGA 是由甲狀腺炎引起的自身抗體，抗原是一種糖蛋白。ATGA有器官特異性而無種屬特異性。ATMA 的抗原是甲狀腺濾泡上皮細胞胞漿內的脂蛋白。常用檢測方法有：IFA、IHA、RIA、ELISA等。

〖參考值〗

IHA： 血清效價

≤1：32，>1：32為陽性，ATGA 和ATMA

ELISA：正常為陰性，P/N < 2.1，>2.1 為陽性, ATGA 和 ATMA

RIA：ATGA <30%；ATMA <15% l〖臨床意義〗

主要見于橋本甲狀腺炎、甲亢、甲低患者，也可見于甲狀腺瘤、惡性貧血、重癥肌無力、Edison 病和肝臟疾病等。SLE及其他自身免疫病也有一定的陽性率。

正常人也可檢出這兩種抗體，并且隨著年齡的增長，陽性率增加，特別是40歲以上婦女，可達18%左右。

應該注意到，有的患者ATGA陰性，但ATMA陽性，因此兩種抗體同時檢測可提高抗甲狀腺自身抗體的檢出水平。八.HLA－B27測定

HLA－B27 抗原為人類MHC I類 抗原B位點的表達產物，可分為幾種亞型。HLA －B27的檢測方法有多種，補體依賴性微量細胞毒法(CDMA)；流式細胞儀法；玫瑰花法；ELISA法；等電聚焦法等。近來應用PCR法檢測HLA－B27，敏感而特異，并且可進行B27亞型的分析。l〖參考值〗

非洲－美洲人：3－4%； l 高家索人：6－8%； l 亞洲人：1%。〖臨床意義〗

強直性脊柱炎(AS)患者HLA－B27陽性率為90－95%。大約42%的青年類風濕關節炎(JRA)存在HLA－B27，Reiter??s 綜合征患者陽性率大約79%。此外，腸病性關節炎、銀屑病性關節炎也有一定的陽性率。RA病人陽性率不高。〖注意事項〗

在評價HLA－B27陽性結果時應結合臨床表現綜合考慮，不能單純依靠此結果作出診斷。

其他免疫指標及檢測

C反應蛋白（C-Reactive Protein，CRP）

CRP是一種急性時相蛋白，由肝細胞合成，可與肺炎球菌細胞壁C多糖發生沉淀反應，故稱CRP。在各種炎癥的急性期或組織創傷時，血清CRP濃度急劇升高。CRP不僅可結合多種細菌（bacteria）,真菌(fungi)及原蟲（protozoal)體內的多糖物質，而且在鈣離子存在下，還可以結合磷脂酰膽堿和核酸。結合后的復合體具有激活補體(complement)的作用。

常用檢測方法為

酶聯免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)、速率散射比濁法（rate nephelometry）等。〖參考值〗

<8mg/L 〖臨床意義〗

血清CRP 升高多見于：急性、慢性細菌感染；組織損傷壞死；急性心肌梗死；各種炎癥；外科手術；腫瘤浸潤；急性風濕熱和活動性類風濕關節炎，以及其它關節炎性疾病。但病毒性感染一般CRP不升高，因此可作為病毒性感染和細菌性感染的鑒別指標。〖注意事項〗

CRP測定方法不同，在判定結果時應予考慮。此外，雌激素、口服避孕藥可使CRP增高，皮質激素和抗炎藥可使CRP下降。

類風濕因子（Rheumatoid Factor，RF）

RF是一種自身抗體，可與變性的IgG發生反應，與IgG 的Fc段結合。RF可分為IgG、IgM、IgA、IgD和IgE五型。凝集試驗檢測的主要為IgM型RF。RF主要見于類風濕性關節炎（rheumatoid arthritis RA)，也可見于其他結締組織病及其他疾病。檢測方法有乳膠凝集試驗、致敏羊紅細胞凝集法、速率散射比濁法、ELISA法等。〖參考值〗

乳膠法：陰性或<1：20

速率散射比濁法：<30IU/ml 〖臨床意義〗

RF見于90%以上的RA病人，效價常在1：160以上，含量多>80IU/ml。，一般方法所檢測的大部分是IgM-RF。

關于RF分型，臨床應用尚不廣泛。多數作者認為：IgM－RF效價高低可在一定程度上反映RA的活動性，但無明確的密切關系；IgG-RF與RA患者的滑膜炎、血管炎和關節外癥狀密切相關；IgA-RF見于RA、硬皮病、Felty綜合征和系統性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE)，也是RA臨床活動性的一個指標；IgE-RF 除RA患者外，也見于Felty綜合征和青年型RA。高水平IgM-RF陽性病人預后較差。

從早期RA患者的X線片分析，IgM-RF持續陽性的病人更易發生骨侵蝕。IgA-RF在SS病人中陽性率較高；IgE-RF在惡性關節炎病人中陽性率較高。在RA病人，高效價RF存在并伴有嚴重的關節功能受限時，常提示預后不良。〖注意事項〗

正常人也可有4％左右的陽性率。隨年齡增加，RF的檢出率會增加。RA病人RF也可陰性，不能單純依靠RF陽性來診斷RA。RF還可見于其它多種疾病，其中最常見的是干燥綜合征（S.S），發生率在90％以上，且含量一般較高。其它常見的RF陽性的疾病有： SLE、系統性硬化癥、高球蛋白血癥、結節病、梅毒、麻風、病毒感染、肝硬化等等。有些效價可在1：160以上，含量在80IU/ml以上，在解釋結果時應予注意。

冷球蛋白（Cryoglobulin CG，)

冷球蛋白是一種球蛋白，4℃時發生沉淀，30 ℃易聚合，37℃又溶解。CG分為三類：

1.I型(單克隆型)：大多為IgM或IgG 型，無抗補體作用。

2.II型(混合型)：兩種或兩種以上單克隆Ig混合，以IgM+IgG最常見，也可見IgA+ IgG；IgG+IgM+IgA等。有抗補體作用。

3.III型(多克隆型)： 沒有單克隆蛋白。

其檢測方法有血球壓積管法(定性)和分光光度計法(定量)。〖參考值〗

定性法：陰性

定量法：<80μg/ml。〖臨床意義〗

SLE 病人血清中可出現混合型CG。在血管炎、腎小球腎炎、淋巴細胞增生性疾病也可陽性。在巨球蛋白血癥或多發性骨髓瘤病人伴雷諾氏現象時與I型冷球蛋白血癥有關。II型冷球蛋白血癥與自身免疫病例如血管炎、腎小球腎炎、SLE、RA 和 SS 有關。在某些感染如肝炎、傳染性單核細胞增多癥、巨細胞病毒感染和弓形蟲病也可出現。〖注意事項〗

1.標本必須在37℃采集，并保持溫度直至進行實驗。

2.一般不用于無冷球蛋白血癥臨床表現的人群過篩。

3.冷凝集素可能引起某些自動血球計數儀的錯誤結果。小結:

總之，自身抗體的檢測對診斷自身免疫病有著重要的意義。人血清中存在著多種自身抗體，有器官特異性的，也有非器官特異性的。因此，在選擇自身抗體檢測時應綜合考慮，合理選用。

近年來出現了許多新的自身抗體，在此就不詳細敘述了，可以參看有關文獻。胞漿抗體

Hep-2細胞具有許多胞漿抗原。如有特異性胞漿抗體存在，可出現強陽性胞漿熒光。包括抗線粒體抗體（AMA）、抗核糖體抗體、抗肌動蛋白抗體即抗平滑肌抗體（ASMA）、抗高爾基體抗體、抗絲抗體（如Vimentin）。一般最有意義的是AMA和ASMA，可是熒光染色Hep2細胞卻不能鑒定這兩種抗體，可應用鼠腎和鼠胃切片作進一步分析。系統性風濕病活動期的評價

自身抗體檢測以診斷全身性疾病比監測該病活動更有意義。但抗dsDNA抗體效價卻與活動性有關。應定期檢測抗dsDNA抗體的效價及C3、C4的含量。以及測定循環免疫復合物（CIC）的含量。ESR和CRP在炎癥反應時常常升高。RA病情加重時，CRP明顯增高。SLE活動期，CRP一般正常。器官特異性自身免疫性疾病 組織抗體

許多自身抗體可采用IFA測定，用鼠腎和胃的切片能測出抗線粒體、平滑肌、肝腎微粒體和胃壁細胞的抗體。甲狀腺組織切片可測定抗甲狀腺自身抗體。自身免疫性肝病

在肝臟病變中，ANA陽性率可達40-80%。抗線粒體抗體（AMA）與原發性膽汁性肝硬變有關。特別是高效價的M2和M9線粒體抗原。

約一半的自身免疫性肝炎的病人有較高效價的ASMA。此外，肝腎微粒體抗體（LKMAs），抗可溶性肝抗原（SLA）抗體，抗肝細胞膜抗體等也可用于自身免疫性肝病診斷和監測。其他

腎臟疾病常測定的抗體有抗dsDNA抗體，抗腎小球基底膜抗體等，還可測定CIC，以及作腎組織活檢進行熒光染色。

韋格納肉芽腫病是一種發生于上下呼吸道的壞死性血管炎，也累及腎臟，病人常死于腎和肺衰竭。檢查抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCAs）是診斷指標之一。也可通過ELISA測定抗髓過氧化物酶抗體，抗蛋白酶3抗體，有助于診斷和鑒別診斷。

胃腸道疾病中，惡性貧血與抗胃壁自身抗體有關，與抗內因子抗體的相關性達75%。抗胰島細胞抗體（ICAs），抗谷氨酸脫羧酶抗體（GADA）與I型糖尿病有一定關系。重癥肌無力病人可出現抗骨骼肌抗體。多發性肌炎和皮肌炎可有抗Pm1和抗Jo-1抗體。抗心肌抗體常見于心肌梗死、心臟手術或心肌損傷后。

第二篇：免疫學檢驗教學大綱.

《免疫學檢驗》教學大綱

（供衛生檢驗專業使用）

一、課程性質、目的和任務

免疫學檢驗是研究免疫學技術在醫學領域中應用的一門學科，是衛生檢驗專業一門重要的專業課。免疫學檢測技術因其特異性強、敏感性高、穩定、簡便和快速的優勢，現已廣泛應用于生物學、臨床醫學、預防醫學及其他有關領域。

通過對該課程的學習，掌握各類免疫學檢驗技術的原理、類型、技術要點、實際應用及方法學評價，更好的為防病治病服務。

二、課程基本要求

課程基本要求分為“掌握”、“熟悉”和“了解”三個層次。“掌握”的內容要求理解透徹，能在本學科和相關學科的學習工作中熟練、靈活運用其基本理論和基本概念；“熟悉”的內容要求能熟知其相關內容的概念及有關理論，并能適當應用；“了解”的內容要求對其中的概念和相關內容有所了解。

通過對該課程的學習，使學生掌握各類免疫學檢驗技術的原理、類型、技術要點、實際應用及方法學評價，更好的為防病治病服務。

考試內容中“掌握”的內容約占70%，“熟悉、了解”的內容約占25%，有5%左右的大綱外內容。

本大綱的配套使用教材是衛生部規劃教材《免疫學檢驗》第一版（徐順清、劉衡川主編，北京：人民衛生出版社，2006年）。

三、課程基本內容、學時分配

免疫學檢驗總學時數為54學時（其中理論教學18學時，實習36學時）。主要內容為抗原抗體的純化、免疫原和特異性抗體的制備、沉淀反應和凝集反應、補體測定和補體結合試驗、標記免疫技術、免疫細胞檢測技術、免疫球蛋白測定、健康相關產品的免疫學檢驗等。并開設免疫球蛋白的分離純化、雙向免疫擴散試驗、聚丙烯酰胺凝膠電泳、酶聯免疫吸附試驗、NK細胞活性測定等實驗課。

第一章 抗原抗體的純化（2學時）

【掌握】

幾種常用抗原和抗體純化方法的基本原理、方法評價和應用。【熟悉】

各種抗原抗體純化方法的程序。【了解】

各種抗原抗體純化方法的影響因素以及分離物的選擇。

第二章 免疫原與特異性抗體的制備（2【掌握】

學時）1．人工免疫原的制備方法； 2．多克隆抗體的制備方法； 3．雜交瘤技術的原理及技術要點。【熟悉】

人鼠嵌合抗體、小分子抗體、雙特異性抗體、抗體庫技術的概念。【了解】

1．可溶性抗原的制備方法； 2．單克隆抗體制備流程及應用。

第三章 沉淀反應與凝集反應（2【掌握】

1．沉淀反應和凝集反應的基本原理、類型及應用； 2．雙向瓊脂擴散試驗、對流免疫電泳的原理及應用； 3．間接血凝試驗的原理及應用。【了解】

其他凝集技術類型、原理和應用。

學時）

第四章 補體測定和補體結合試驗（2學時）

【掌握】

1．溶血反應體系；

2．血清總補體溶血（CH50）測定。【熟悉】

補體結合試驗的類型與原理。【了解】

補體結合試驗的試驗方法、影響因素、方法評價及應用。

第五章 酶免疫技術（2學時）

【掌握】

1．固相酶免疫測定的方法類型及原理； 2．ELISA技術要點。【熟悉】

酶免疫技術的分類。【了解】

其他酶免疫技術及應用。

第六章 熒光免疫技術（1學時）

【掌握】

熒光抗體技術的原理、技術方法及在衛生檢驗中的應用。【熟悉】 熒光免疫顯微技術和流式熒光免疫技術的概念。【了解】

熒光抗體的制備方法。

第七章 放射免疫技術（1學時）

【掌握】

放射免疫測定的原理、方法、評價及應用。【熟悉】

放射免疫技術的類型。【了解】

免疫放射測定原理、技術類型及技術要點。

第八章 免疫細胞檢測技術（3學時）

【掌握】

1．T淋巴細胞功能檢測方法原理及結果判定； 2．B淋巴細胞功能檢測的體外實驗原理及結果判定； 3．NK細胞活性檢測方法原理、結果判定及衛生學意義； 4．吞噬細胞功能的檢測方法原理、結果判定及衛生學意義。【熟悉】

外周血液中單個核細胞、淋巴細胞及亞群分離純化方法，淋巴細胞保存及活力測定方法。【了解】

T淋巴細胞表面標志的檢測方法及衛生學意義的評價。

第九章 免疫球蛋白測定（1學時）

【掌握】

免疫球蛋白定量檢測方法及參考值，方法評價及應用。【了解】

血清Ig、尿微量Ig、腦脊液Ig定量檢測的臨床意義。

第十章 健康相關產品的免疫學檢驗（2學時）

【掌握】

1．保健食品免疫學檢驗項目、檢驗方法和評價標準； 2．化妝品的免疫學檢驗方法。【了解】

有毒有害物質的免疫學檢驗的技術要點、方法和應用。

第三篇：【免疫學總結】自身免疫性疾病

【免疫學總結】自身免疫性疾病

免疫自身穩定 是指機體的免疫系統對自身的組織細胞成分處于免疫耐受狀態不發生免疫應答。第一節

概述

自身免疫機體免疫系統對自身成分發生免疫應答的能力,通常對機體不造成損傷。

自身免疫病因機體免疫系統對自身成分發生免疫應答而導致的疾病狀態自身免疫性疾病的特點1)患者體內可檢測到針對自身抗原的自身抗體和/或自身反應性T淋巴細胞 2)自身抗體和/或自身反應性T淋巴細胞介導對自身細胞或自身成分的適應性免疫應答，造成損傷或功能障礙； 3)病情的轉歸與自身免疫反應強度密切相關；4)易反復發作，慢性遷延。

自身免疫性疾病的分類1.器官特異性自身免疫病(1)針對自身抗原的自身抗體或淋巴細胞損傷靶器官或腺體細胞。(2)某些自身抗體可通過對靶器官或腺體的正常功能過度刺激或抑制.代表疾病橋本氏甲狀腺炎、毒性彌漫性甲狀腺腫、胰島素依賴的糖尿病

2.全身性自身免疫病由針對多種器官和組織靶抗原的自身免疫反應引起，患者的病變可見于多種器官和組織。代表疾病：系統性紅斑狼瘡 第二節

自身免疫性疾病的免疫損傷機制及典型疾病 發病原因自身抗體和/或自身反應性T淋巴細胞介導的免疫應答。

發病機制由自身抗體/自身反應性T淋巴細胞，或二者共同引起的針對自身抗原的超敏反應性疾病，其發病機理和超敏反應的發病機理相同。

一、自身抗體引起的自身免疫性疾病自身抗體包括:細胞膜或膜吸咐成分自身抗體

細胞表面受體自身抗體（1）激動型抗受體自身抗體（2）阻斷型抗受體自身抗體

細胞外成分自身抗體(細胞外基質成份)1.自身抗體引起的細胞破壞性自身免疫性疾病自身抗體與細胞表面抗原結合后引起的損傷機制：a.補體依賴的細胞毒作用（CDC）、b.補體和抗體的調理作用、c.ADCC、d.嗜中性粒細胞的破壞細胞作用。常見疾病有自身免疫性溶血性貧血、血小板減少性紫癜、血型不合引起的輸血反應。

2.細胞表面受體自身抗體引起的自身免疫性疾病抗體與細胞表面受體結合，過度刺激器官功能（如Graves病），或阻斷受體與配體結合，抑制器官功能（如重癥肌無力）。3.細胞外成分自身抗體引起的自身免疫性疾病如肺出血腎炎綜合征，系由抗基底膜Ⅳ膠原自身抗體啟動的免疫應答，導致腎炎和肺部出血。4.自身抗體-免疫復合物引起的自身免疫性疾病如SLE，因免疫復合物沉積在各種組織的小血管壁，激活補體引起細胞損傷；核抗原物質釋出又導致產生更多的自身抗體，進一步加劇損傷。

二、自身反應性T淋巴細胞介導的自身免疫性疾病⒈胰島素依賴型糖尿病CTLà胰島的β細胞--使胰島素分泌嚴重不足 ⒉實驗性變態反應性腦脊髓膜炎（EAE）存在髓鞘堿性蛋白（MBP）特異的Th1 ⒊人多發性硬化病（MS）存在髓鞘堿性蛋白（MBP）特異的Th1 ⒋多發性硬化癥(中樞神經系統的疾病)

三、自身抗體、自身反應性淋巴細胞均可導致發病重癥肌無力（MG）（抗乙酰膽堿受體自身反應性T細胞）

類風濕關節炎（抗關節滑膜抗原的自身反應性淋巴細胞）第三節

自身免疫性疾病發生的相關因素

一、抗原方面的因素1．免疫隔離部位抗原的釋放免疫隔離部位

2.自身抗原發生改變由生物、物理、化學以及藥物等因素引起。

3.分子模擬有些微生物與人的細胞或細胞外成分有相同或類似的抗原表位，在感染人體后激發的針對微生物抗原的免疫應答，也能攻擊含有相同或類似表位的人體細胞或細胞外成分，這種現象被稱為分子模擬。

二、免疫系統方面的因素1．MHCⅡ類分子的異常表達只在APC表達。胰島素依賴糖尿病β胰島細胞高表達MHCII。2．免疫忽視的打破免疫忽視 是指免疫系統對低水平抗原或低親和力抗原不發生免疫應答的現象。3．調節性T細胞的功能失常發揮免疫抑制。

4．活化誘導的C死亡發生障礙激活的效應性淋巴C在行使效應功能后死亡的現象稱為活化誘導的細胞死亡（AICD）。5．淋巴細胞的多克隆激活：

6．表位擴展免疫系統針對一個優勢表位發生免疫應答后，可能對隱蔽表位相繼發生免疫應答，這種現象被稱為表位擴展。

三、遺傳方面的因素1．HLA等位基因的基因型和人類自身免疫性疾病的易感性相關

2．與自身免疫性疾病發生相關的其他基因 3．性別與某些自身免疫性疾病的發生相關 第四節

自身免疫性疾病的防治原則

1．預防和控制微生物感染采用疫苗和抗菌素控制，尤其長期感染。

2.應用免疫抑制劑環孢菌素A和FK506。特異性抑制T細胞功能，如抑制IL-2產生。

3．應用細胞因子及其受體的抗體或阻斷劑

第四篇：《臨床免疫學和免疫學檢驗》課程簡介

《臨床免疫學和免疫檢驗》課程簡介

課程名稱：《臨床免疫學和免疫檢驗》

英方名稱：《clinical immunology and immunological examinations 》 開課單位：遵義醫學院醫學檢驗系

課程性質：必修課

總 學 時：90學時，其中理論：46學時，實驗：44學時

學分：5學分

適用專業：醫學檢驗

教學目的：通過教學使學生掌握臨床免疫學基本理論及免疫學檢驗的方法。對各種

疾病血清、體液、組織等標本的免疫學檢驗原理及操作程序，依據抗原或抗體的變化規律，進而對疾病的發生、發展及預后做出診斷等。

內容簡介：臨床免疫學檢驗是研究免疫學技術及其在醫學領域中應用的一門學科。

重點闡述免疫學技術的原理、類型、技術要點、臨床應用及其方法學評價。內容包括：抗原抗體反應、免疫原和抗血清的制備、凝集反應、沉淀反應、補體檢測及應用、熒光免疫技術、酶免疫技術、流式細胞技術、免疫細胞的分離與檢測、細胞因子測定及應用、超敏反應及其檢測、自身免疫病及檢驗、免疫增殖病及檢驗、免疫缺陷病及其檢驗、腫瘤免疫及檢驗、移植免疫及檢驗、免疫學檢驗的質量控制等。

考核形式：閉卷考試

教材：《臨床免疫學和免疫學檢驗》，人民衛生出版社，王蘭蘭，3版，2003年。參考書目：

1.《現代檢驗醫學與臨床實踐》，上海科學技術文獻出版社，王鴻利，1999年。

2.《檢驗醫學自動化及臨床應用》人民衛生出版社，彭黎明，2003年。

3.《內科學》，人民衛生出版社，葉任高，6版，2004年。

主講教師：李樹仁教授

第五篇：《臨床免疫學檢驗》雙語教學的探索與實踐.

《臨床免疫學檢驗》雙語教學的探索與實踐

[ 10-02-07 09:47:00 ]

編輯：studa20

作者：蔣紅梅, 肖林生, 程萍，費櫻，逯惠敏

【關鍵詞】

高等院校； 醫學檢驗專業； 臨床免疫學檢驗； 雙語教學

雙語教學是指用外語（主要用英語）進行學科教學的一種教學體系。教育部2001年頒發了《關于加強高等學校本科教學工作提高教學質量的若干意見》，明確提出要在高等院校積極推動使用英語等外語進行教學。醫學院校開展雙語教學是培養具有較強外語應用能力醫學生的需要［1］。為提高檢驗人才的素質，使之能適應國內外醫學檢驗科學的發展，了解和掌握本學科的最新成果，在專業課程教學中引入雙語教學已成為必然的趨勢，2006年3～8月在醫學檢驗專業主干課程《臨床免疫學檢驗》教學中進行了中英雙語教學的調查和實踐，現報告如下。

材料和方法

1.1 研究對象

貴陽醫學院2003級本科醫學檢驗專業學生108人。

1.2 教學方法

采用全國高等醫藥院校規劃教材《臨床免疫學檢驗》［2］。選擇其中部分章節，按照教學大綱的要求，制成雙語教學CAI課件，教師做好中、英文上課的充分準備。授課采用以下4種形式：（1）采用中文教材、中英文混合課件（英文比例不超過50%）；（2）采用中文教材、補充英文資料、中文課件；（3）采用中文教材、補充英文資料、中英文混合課件（英文比例不超過50%）；（4）采用中文教材、補充英文資料、英文課件。授課時主要采用中文和英文并舉的教學方式，對重點和難點的理論知識點以中文講解為主，對比較淺顯易懂的部分，盡量用英語講解，進而調動學生積極性，英語講授內容比例占到總內容的50%以上。

1.3 調查方法

問卷調查在實施雙語教學結束后進行，由學生不記名填寫。調查使用自行設計的問卷，內容涉及對雙語教學的態度、雙語教學教材的選擇、授課語言（中英文）的應用比例、雙語教學授課效果等。

結果

2.1 學生對雙語教學的態度和建議

見表1。本次調查顯示，多數學生（65.8％）對《臨床免疫學檢驗》采用雙語教學表示理解和支持；多數學生（56.5％）希望采用中文教材、中英文混合課件（英文比例不超過50%）；多數學生希望教師以中文授課為主，僅介紹個別專業術語的英文名稱，或在用英文講授后，再翻譯成中文。表1 醫學檢驗本科學生對《臨床免疫學檢驗》雙語教學的態度和建議（略）

2.2 學生對《臨床免疫學檢驗》雙語教學效果的評價

見表2。對于采用雙語進行專業課程教學，僅21.3％學生認為學習效果比單純用漢語教學好，41.7％的學生認為對專業知識的學習效果比單純漢語教學差，另24.1％學生認為學習效果與單純中文教學差不多；對于雙語教學CAI課件，52.8%的學生認為不同英文程度的課件可作為雙語教學的輔助學習資料,67.6%的學生認為促進了專業英語的學習,9.3%的學生認為可提高英語的實際應用能力；并且與漢語教學相比，46.3％學生認為雙語教學使專業學習變得特別吃力，僅5.6％的學生認為可以學得很輕松。表2 醫學檢驗本科學生對《臨床免疫學檢驗》雙語教學效果的評價（略）

討論

高校開展雙語教學是我國高等教育順應時代發展的必然，本文在我院醫學檢驗本科專業課程《臨床免疫學檢驗》教學中作了有關雙語教學的調查和嘗試，認為在雙語教學實施過程中仍然存在一些需要解決的問題。

3.1 學生

學生是學習的主體，成功開展雙語教學需要學生的配合。在實施雙語教學之前，應對學生進行充分動員，讓他們對雙語教學有足夠的重視，只有這樣才能發揮他們的主觀能動性。在此項調查中，65.8%的學生支持雙語教學，說明多數學生思想上是認同雙語教學的，這是我們開展雙語教學的重要前提。但是仍有26.9%學生對雙語教學持強烈反對態度，作為教師不應該放棄任何一個學生，對這一部分學生應該認真分析其反對的原因。大多數學生的英語基礎較差，給開展雙語教學造成一定的困難。調查顯示，僅7.4%的學生接受教師全英文授課方式，多數學生要求教師用中文授課，僅個別專業名詞用英語表述，或在用一段英文授課后再作中文解釋。許多（41.7％）學生擔心使用雙語教學會對專業知識的學習效果有影響，并且46.3%的學生感覺雙語教學使得專業知識的學習特別吃力，這也是部分學生反對雙語教學的主要原因。應該說進入專業課程學習階段的大學生經過高中階段的英語學習、高考的選拔和低年級階段大學英語的學習，已有一定英文基礎，基本具備雙語教學的條件，教師應該鼓勵學生樹立信心，只要努力一定能接受雙語教學，在學好專業知識的同時，也一定能提高專業英語水平。同時這也提示，雙語教學是一個系統工程，要順利開展雙語教學，對學生基礎英語的培養非常重要，英語應用能力的提高絕不可能簡單地通過某一門課程的雙語教學就能完成，只有通過多門學科、多年級循序漸進地開展雙語教學才能提高學生應用英語的能力。同時專業課程教師實施雙語教學也必須有計劃有步驟進行，結合教學對象的實際情況，初期最好采取簡單滲透式和過渡式的方式，在實際教學過程中結合專業知識的難易、學生對專業知識的掌握程度靈活調整英語在教學中的應用比例，特別要注重專業詞匯的講解。