第一篇：蛋白質含量測定——雙縮脲試劑法,實驗報告（大全）

20XX 報 告 匯 編 Compilation of reports

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生物化學實驗報告

姓

名：

學

號：

專業年級：

組

別：

生物化學與分子生物學實驗教學中心

報告文檔·借鑒學習word 可編輯·實用文檔 實驗名稱 蛋白質含量測定 —— 雙縮脲試劑法 實驗日期

實驗地點

合作者

指導老師

評分

教師簽名

批改日期

一、實驗目的 1.1.掌握雙縮脲測定血清總蛋白的基本原理、操作； 1.2.掌握雙縮脲試劑的配制； 1.3.熟悉血清總蛋白的臨床意義； 1.4.了解雙縮脲法測定血清總蛋白的特點和注意事項。

二、實驗原理 2.1.兩分子尿素加熱脫氨縮合成的雙縮脲（H2N-OC-NH-CO-NH2），因分子內含有兩個鄰接的肽鍵，在堿性溶液中可與 Cu2+發生雙縮脲反應，生成紫紅色絡合物。

2.2.蛋白質分子含有大量彼此相連的肽鍵（-CO-NH-），同樣能在堿性條件下與 Cu2+發生雙縮脲反應，生成的紫紅色絡合物，且在 540nm 處的吸光度與蛋白質的含量在 10～120g/L 范圍內有良好的線性關系。

三、材料與方法 ：

3.1.實驗材料：

3.1.1.實驗試劑：①小牛血清；②6.0mol/LNaOH 溶液；③雙縮脲試劑:硫酸酮、酒石酸鉀鈉、碘化鉀；④蛋白質標準液（70g/L）；⑤0.9%NaCl；⑥蒸餾水。

3.1.2.實驗器材：①試管；②燒杯；③容量瓶；④加樣槍；⑤刻度吸管；⑥玻璃棒 ；⑥1100 分光光度計；⑦電子天平；⑧水浴鍋。

報告文檔·借鑒學習word 可編輯·實用文檔 3.2.實驗步驟 取 3 支試管，做好標記，按下表操作：

加入物（ml）

B（空白）

S（標準）

U（待測）

小牛血清（1:10）

0.5 蛋白質標準液（1:10）

0.5

-0.9%Nacl

0.5

-雙縮脲試劑

4.0

4.0

4.0

a.各管混勻，觀察各試管顏色； b.將各試管置于 37℃水浴鍋中加熱 20min，觀察顏色； c.將試管中的液體倒入比色杯中，置于 1100 分光光度計的樣品槽內，在波長 540nm，以空白管調零，測 S 和 U 管吸的光度； d.測定結束后，將比色杯中的樣品回收進試管。

依據公式算出結果：）

蛋白質標準液濃度（）

血清總蛋白（g/LAAg/LSU? ?

四、結果與討論 ：

4.1.實驗現象：

①選取三支潔凈無損的試管，從左往右依次加入 0.9%氯化鈉溶液、蛋白質標準液、相應的小牛血清各 0.5ml，分別命名為 B 試管、S 試管和 U 試管，再分別向三支試管內加入 4ml 的雙縮脲試劑，溶液均成藍色透明狀。

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測定次數

平均吸光度 ②將三支試管放入 37℃水浴鍋中加熱 20min，取出后，B 試管呈淡藍色，S 試管和 U試管均成淺紫色，且 S 試管的顏色比 U 試管的顏色深。（如圖一）

圖一 水浴后三支試管顏色

圖二 分光計讀數 4.2.實驗數據

S

0.185

0.184

0.185

0.1847

U

0.152

0.151

0.152

0.1517 結果計算：代入公式：血清總蛋白（g/L)=(Au/As)X 蛋白質標準液濃度（g/L)，得出結果：血清總蛋白=57.493g/L。

4.3.結果討論 經查閱資料得：正常成人血清總蛋白含量為 60～80g/L，而小牛血清總蛋白含量比正常成人血清總蛋白含量略低一點，本次結果得出小牛血清總蛋白含量為 57.493g/L，符合情況。

4.3.1.成功原因：

①本次試驗的試劑混合水浴后出現了預期效果：B 試管呈淡藍色，S 試管和 U 試管均成淺紫色，且 S 試管的顏色比 U 試管的顏色深。B 試管呈淡藍色是因為 B 試管中沒有發生任何反應，所以呈現雙縮脲試劑本來的淡藍色，而 S 試管和 U 試管呈淺紫色是因為試劑中的蛋白質和雙縮脲發生了雙縮脲反應而呈淺紫色。

管號

報告文檔·借鑒學習word 可編輯·實用文檔 ②吸光度測試后得到的數據，經計算后得到了預期中的結果，是因為前面操作嚴謹。

4.3.2.誤差分析 ①三次重復測定過程中出現了一些浮動數據，可能是因為儀器本身存在的可允許的誤差范圍。

②第一次嘗試使用分光光度計的時候得到了負值，經查明是因為放置在其內的比色杯將磨面對準了通光面，經調整后，獲得了正確的數據。

4.4.課后復習題 4.4.1.什么叫雙縮脲試劑？為什么要在雙縮脲試劑中加入酒石酸鉀鈉和碘化鉀？ 答：雙縮脲試劑是一個用于鑒定蛋白質的分析化學試劑，遇到蛋白質顯紫色。它是一個堿性的含銅試液，呈藍色，由 0.1g/ml 氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/ml 硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制。硫酸銅、酒石酸鉀鈉的堿性溶液中會生成紫紅色絡合物,在這種比例的堿性水溶液中，本來形成的 Cu(OH)2 會與溶液中多余的 OH-形成[Cu(OH)4]2-絡離子，酒石酸鉀鈉的作用就是保護這種絡離子不被析出變為沉淀，向試劑中加入碘化鉀,可延長試劑的使用壽命。

4.4.2.試劑配制過程中，為何 NaOH 要單獨配制，最后加入？ 答：先單獨加入 NaOH 溶液是為了營造一個堿性環境,在堿性環境下雙縮脲試劑 B 中的 Cu2+與蛋白質肽鍵絡合產生顏色反應.如果先將雙縮脲試劑 A 與雙縮脲試劑 B 混合,即 NaOH 與 CuSO4 溶液混在一起,那么就會產生 Cu(OH)2 沉淀,藥劑就會失去作用,看不到效果,也就無法判斷是否存在蛋白質.4.4.3.簡述血清總蛋白測定的臨床意義。

答：臨床上，當血清總蛋白濃度降低時，可能代表：血清總蛋白濃度降低、蛋白質合成障礙、蛋白質丟失增加、營養不良或消耗增加或血漿稀釋。當血清總蛋白濃度增高時，可能代表：因多發性骨髓瘤而引起的蛋白質合成增加或因脫水、休克而引起的血漿

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第二篇：物理實驗報告-穩態法導熱系數測定實驗

穩態法導熱系數測定實驗

一、實驗目的

1、通過實驗使學生加深對傅立葉導熱定律的認識。

2、通過實驗，掌握在穩定熱流情況下利用穩態平板法測定材料導熱系數的方法。

3、確定材料的導熱系數與溫度之間的依變關系。

4、學習用溫差熱電偶測量溫度的方法。

5、學習熱工儀表的使用方法

二、實驗原理

平板式穩態導熱儀的測量原理是基于一維無限大平板穩態傳熱模型，這種方法是把被測材料做成比較薄的圓板形或方板形，薄板的一個表面進行加熱，另一個表面則進行冷卻，建立起沿厚度方向的溫差。

三、實驗設備

實驗設備如圖2所示。

圖2平板式穩態法導熱儀的總體結構圖

1.調壓器2.銅板3.主加熱板 4.上均熱片 5.中均熱片

6.下均熱片7.熱電偶 8.副加熱板 9.數據采控系統 10.溫度儀表 11.試樣裝置 12.循環水箱電位器 13.保溫材料 14.電位器

鍵盤共有6個按鍵組成，包括為“5”、“1”、“0.1”3個數據鍵，“±”正負號轉換鍵，“RST”復位鍵，“ON/OFF”開關鍵。

數據鍵：根據不同的功能對相應的數據進行加減，與后面的“±”正負號轉換鍵和“shift”功能鍵配合使用。“±”正負號轉換鍵：當“±”正負號轉換鍵為“+”時，在原數據基礎上加相應的數值；為“-”時，減相應的數值。“RST”復位鍵：復位數據，重新選擇。

控制板上的四個發光二極管分別對應四路熱電偶，發光二極管發光表示對應的熱電偶接通。由一臺調壓器輸出端采用并聯方式提供兩路輸出電壓，電位器對每路輸出電壓進行調整，作為兩個加熱板的輸入電壓。

四、實驗內容

1、根據提供的實驗設備儀器材料，搭建實驗臺，合理設計實驗步驟。調整好電加熱器的電壓(調節調壓器)，并測定相關的溫度及電熱器的電壓等試驗數據。

2、對測定的實驗數據按照一定的方法測量進行數據處理，確定材料的導熱系數與溫度之間的依變關系公式。

3、對實驗結果進行分析與討論。

4、分析影響制導熱儀測量精度的主要因素。

5、在以上分析結論的基礎之上盡可能的提出實驗臺的改進方法。

五、實驗步驟

1、利用游標卡尺測量試樣的長、寬、厚度，測試樣3個點的厚度，取其算術平均值，作為試樣厚度和面積。

2、測量加熱板的內部電阻。

3、校準熱工溫度儀表。

4、向水箱內注入冷卻水。

5、通過調整電位器改變提供給主加熱板和副加熱板的加熱功率，通過4位“LED”顯示主加熱板和副加熱板的溫度，根據主加熱板的溫度，調整電位器改變施加在副加熱板的電壓，使副加熱板的溫度與主加熱板的溫度一致。利用數字電壓表測量并記錄主加熱板電壓。

6、在加熱功率不變條件下, 試樣下表面和循環水箱下表面的溫度波動每5min不超過±1℃時，認為達到穩態。此時，記錄主加熱板溫度、試樣兩面溫差。

7、通過數據鍵輸入試樣面積、厚度等相關參數，由試樣面積、厚度、主加熱板的電阻、電壓、上表面溫度及上均熱片的上表面溫度獲得試樣的導熱系數。

8、改變電位器改變提供給主加熱板和副加熱板的加熱功率件，重復步驟(5至7)測量并記錄多個溫度下的材料導熱系數。

9、關掉電源。

六、實驗要求

1、采用精度不低于0.05 mm的厚度測量工具(游標卡尺)，沿試樣四周測量四處的厚度，取其算術平均值，作為實驗前試樣厚度。

2、用酒精將試件及均熱片擦洗干凈并晾干，晾干后在其上均勻涂抹導熱油。

3、用調壓器將電壓調至一定值，保持不變，經一段時間后，待跟試件上下表面接觸的銅片各點溫度為一定值時，即導熱過程達到穩定后記錄各點溫度及電熱器的電壓。

4、改變電加熱器的電壓(調節調壓器)，即改變電熱器熱量使之維持在另一個數值上，跟試件上下表面接觸的銅片各點溫度達到新的穩定狀態后，重復第3項的測量。

5、用最小二乘法計算不同橡膠材料的導熱系數隨溫度變化的關系式。

五、實驗報告要求

1、材料溫度可取材料上下表面溫度的平均值，即，其中：Tw1為試樣材料下表面溫度，Tw2為試樣上表面溫度。

2、實驗報告需用專用的實驗報告用紙進行書寫；

3、實驗報告中必須包含實驗目的和實驗步驟；

4、實驗報告中必須包括實驗數據的記錄；

5、實驗報告中必須包括實驗數據處理的具體步驟，并有材料的導熱系數隨溫度變化的關系式及關系曲線圖；

6、實驗報告中必須有對實驗數據結果的分析。

第三篇：河北科技大學HPLC法進行地塞米松磷酸鈉中特殊雜質的檢查及含量測定

實驗五HPLC法進行地塞米松磷酸鈉中特殊雜質的檢查及含量測定

一．目的要求

1.掌握實驗中藥物特殊雜質的來源和檢察原理。

2.掌握高效液相色譜法用于特殊雜質檢查及含量測定的方法。

二、實驗方法

有關物質取本品，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，作為供試品溶液；取地塞米松對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并稀釋成每1ml中約含1mg的溶液，作為對照品溶液；精密量取供試品溶液與對照品溶液各1ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照含量測定項下的色譜條件，取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使地塞米松磷酸鈉色譜峰的峰高為滿量程的15%～20%，再精密量取供試品溶液與對照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍。供試品溶液色譜圖中如有與地塞米松保留時間一致的峰，按外標法以峰面積計算，含量不得超過0.5%；其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液中地塞米松磷酸鈉峰面積的1/2，其他雜質峰面積的和不得大于對照溶液中地塞米松磷酸鈉峰面積的2倍。

【含量測定】照高效液相色譜法（附錄V D）測定。

色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以三乙胺溶液（取三乙胺7.5ml，加水至1000ml,用磷酸調節pH值至3.0±0.05）－甲醇－乙腈（55：40：5）為流動相；檢測波長為242nm.理論板數按地塞米松磷酸鈉峰計算一般為7000，地塞米松磷酸鈉與地塞米松的分離度應大于4.4。

測定法 取本品適量，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取適量，用流動相定量稀釋制成每1ml中含40μg的溶液，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取地塞米松磷酸鈉對照品適量，精密稱定，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。

四、注意事項：

五、思考題：

1.何謂反相高效液相色譜法？其常用的固定相和流動相有哪些？如何選擇？

2.液相色譜流動相、樣品前處理注意事項有哪些？

第四篇：03實驗三 酸堿混合物測定的方案設計(雙指示劑法)-教案

實驗三 酸堿混合物測定的方案設計(雙指示劑法)教案

課程名稱：分析化學實驗B 教學內容：酸堿混合物測定的方案設計(雙指示劑法)實驗類型：設計

教學對象：化工、環境工程、藥學、生物科學、應用化學、醫學檢驗、制藥、復合材料、生物工程、生物技術

授課地點：中南大學南校區化學實驗樓301 授課學時：4學時

一、教學目的與要求：

1、鞏固移液管、酸式滴定管的正確使用；

2、掌握電子分析天平的正確使用；

3、了解酸堿混合物的測定意義和常用堿度的表示方法；

4、學習HCl標準溶液的配制與標定；

5、掌握雙指示劑法測定堿混合物的原理、方法和計算；

6、熟悉甲基紅、酚酞、甲基橙指示劑終點顏色判斷和近終點時滴定操作控制

二、知識點：

酸堿反應、化學計量點、酸堿指示劑、滴定終點、堿度的表示方法、標準溶液、移液管、酸式滴定管、電子分析天平、實驗報告的撰寫（數據處理三線表表格化）、有效數字

三、技能點：

玻璃器皿的洗滌、移液管的使用、酸式滴定管的使用、電子分析天平的使用、HCl標準溶液的配制與標定

四、教學重點及難點：

重點：堿混合物測定的基本原理和操作方法

難點：甲基紅、酚酞、甲基橙指示劑的變色特征和近終點時滴定操作控制

五、教學方法：

任務驅動法、分組討論法、閱讀指導法、現場講解指導等

六、復習引入：

1、復習酸堿滴定法有關知識，提問學生:(1)HCl酸堿滴定法測定對象是什么？(溶液中的氫氧根（OH-）離子的濃度，并且溶液中的堿性物質的堿的強度要滿足cKb>10-8)(2)強酸直接滴定弱堿時一般以什么做指示劑？(甲基橙或甲基紅)(3)滴定終點顏色如何判斷？(由黃色變橙紅色30s不褪色為終點)[引入] 酸堿滴定法的應用：雙指示劑法測定混合堿的組分及其含量

[引言] 酸堿滴定法操作簡便，分析速度快和結果準確，因而在工農業生產和科學實踐中得到廣泛的應用。在實際工作中，常常會遇到酸堿混合組分的分析問題，如氫氧化鈉物質中常常含有一定量的碳酸鈉、純堿中含有一定量的碳酸氫鈉、氯化銨中會有一定量的游離鹽酸（HCl）、硫酸銨中會有一定量的游離硫酸（H2SO4），為了檢驗堿和銨鹽的質量等級，需要對混合酸堿物中的各組分進行測定；在氟化氫、四氟化硅的生產過程中，會有硫酸和氫氟酸混合酸體系，分析其各組分的含量，為生產工藝控制提供有效的保障。在同一個試樣中測定各組分的含量，用標準酸或標準堿溶液進行滴定分析，根據滴定過程中的pH值的變化情況，選用兩種不同的指示劑分別指示終點，這種方法稱為雙指示劑法。該法快速、簡捷，已廣泛應用于酸堿混合物的分析與測定。

[新授]課題：堿混合物測定的方案設計

[提出任務]教師提出本課題的學習任務：

1、工業混合堿測定的基本原理是什么？

2、堿度常用的表示方法有哪些?

3、氫氧化鈉與碳酸鈉混合堿的測定操作方法。[任務探索]

1、工業混合堿測定的基本原理是什么？ 根據有關學習資料，思考下列問題：

(1)工業混合堿主要是由什么物質組成的？用什么滴定法測定混合堿的組分及其含量？

(2)用什么試劑作指示劑？各指示劑的變色點和變色范圍是多少？

(3)測定Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的混合堿時，第一和第二化學計量點的pH值各是多少？ [歸納]引導學生歸納總結出混合堿測定的基本原理

工業堿是Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的混合物，采用雙指示劑法酸堿滴定進行分析，測定其組分及各組分的含量。

在混合堿的試液中加入酚酞指示劑（變色范圍8.0～10.0），用HCl標準溶液滴定至溶液呈微紅色（近無色）。此時溶液的pH值為8.31，試液中所含NaOH完全被中和，Na2CO3也被滴定成NaHCO3，反應如下：

NaOH + HCl = NaCl + H2O Na2CO3 + HCl = NaCl + NaHCO3

設滴定體積為V1ml。再加入甲基橙指示劑（變色范圍3.1～4.4），繼續用HCl標準溶液滴定至溶液由黃色變為橙色即為終點。此時溶液的pH值為3.9，試液中所含NaHCO3被中和成H2CO3，反應為：

NaHCO3 + HCl = NaCl + H2O + CO2↑

設此時消耗HCl標準溶液的體積為V2ml。根據V1和V2可以判斷出混合堿的組成。

設試液的體積為Vml。

當V1>V2時，試液為NaOH和Na2CO3的混合物，NaOH和Na2CO3的含量（以質量濃度g?L-1表示）可由下式計算：

?NOH?a(V1?V2)CHClMNaOH

V2V2CHClMNa2CO32V?Na2CO3?

當V1

?Na2CO3?2V1CHClMNa2CO32V

?NHCO?a3(V2?V1)CHClMNaHCO3V

[學生回答](1)工業混合堿主要是由什么物質成的？用什么滴定法測定混合堿的組分和含量？

工業堿通常是Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的混合物，采用雙指示劑法酸堿滴定進行分析，測定其組分及各組分的含量。(2)用什么試劑作指示劑？各指示劑的變色點和變色范圍是多少？

[講解]用酚酞和甲基橙作指示劑。酚酞的變色點的pH值為9.1，變色范圍是pH值為8.0～10.0，甲基橙的變色點的pH值為4.0，變色范圍是pH值為3.1～4.4(3)測定Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的混合堿時，第一和第二化學計量點的pH值各是多少？

[講解] 測定混合堿時，溶液中有Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的存在，當滴定達到第一化學計量點時，溶液為NaHCO3和NaCl的混合液，溶液的pH值主要由NaHCO3控制，可根據酸式鹽溶液計算第一化學計量點的pH值，其值為8.31；當滴定達到第二化學計量點時，溶液為飽和H2CO3和NaCl的混合液，溶液的pH值主要由飽和H2CO3控制，飽和H2CO3溶液的濃度一般為0.04mol·L-1，可根據多元酸溶液計算第二化學計量點的pH值，其值為4.0。

2、堿度常用的表示方法有哪些? [講解] 堿度常用的表示方法有Na2O、NaOH、Na2CO3、NaHCO3等物質含量或濃度來表示物質的堿度。

3、氫氧化鈉與碳酸鈉混合堿的測定操作方法。[閱讀] 指導學生閱讀實驗報告中的實驗步驟。[討論] 四個學生一組，歸納測定操作要點。

[提問] 學生代表小組發言：氫氧化鈉與碳酸鈉混合堿的測定步驟(1)0.1mol/L HCl標準溶液的配制及標定

準確稱取Na2B4O7·10H2O三份，每份0.4g～0.6g，置于250mL錐形瓶中，各加蒸餾水60mL，使之溶解，加甲基紅2滴，用欲標定的HCl溶液滴定，近終點時，應逐滴或半滴加入，直至被滴定的溶液由黃色恰變成淺紅色為終點。記錄消耗的HCl溶液體積，重復上述操作，滴定其余兩份基準物質。

根據Na2B4O7·10H2O的質量m和消耗HCl溶液的體積VHCl，按下式計算HCl標準溶液的濃度CHCl，CHCl?2m(Na2B4O7?10H2O)?1000M(Na2B4O7?10H2O)?VHCl

式中MNa2B4O7·10H2O-------硼砂的摩爾質量(381.4)。(2)氫氧化鈉與碳酸鈉混合堿的測定

用移液管移取

10.00mL試液

(3)數據記錄與處理及結論 a、HCl標準溶液的標定

序號 Na2B4O7·10H2O質量/g V（HCl）/ml C（HCl）/（mol·L）平均值 RSD 1 2 3

1250mL錐形瓶 HCl 滴定

1d 酚酞

HCl標液滴至恰好紅色消失

準確記錄HCl體積V2平行三次 黃色變橙色

再加入1d甲基橙

記下V1 結論：HCl標準溶液的濃度c=

95%置信度下平均值的置信區間c=x?2.5s b、酸堿混合物的測定 酸堿混合物中堿1的含量

序號 混合堿體積/ml V/ml ρ1/ g?L ρ1平均值 RSD 1 2 3

1-1注：當分析試液為NaOH和Na2CO3的混合溶液時，V1=V1-V

2當分析試液為Na2CO3和NaHCO3的混合溶液時，V1=V結論：混合堿中堿1的濃度ρ=

95%置信度下平均值的置信區間ρ=x?2.5s 酸堿混合物中堿2的含量

序號 混合堿體積/ml V/ml ρ1/ g?L ρ1平均值 RSD 1 2 3

2-1注：當分析試液為NaOH和Na2CO3的混合溶液時，V2=V2

當分析試液為Na2CO3和NaHCO3的混合溶液時，V2=V2-V1

結論：混合堿中堿2的濃度ρ=

95%置信度下平均值的置信區間ρ=x?2.5s

[小結] 采用雙指示劑法用HCl標準溶液滴定測定混合堿的組分及各組分的含量是國際國內廣泛應用的快速、簡捷的分析方法。在混合堿溶液中，先以酚酞為指示劑，用HCl標準溶液滴定混合堿溶液由紅色變呈微紅色（近無色）為終點，記錄HCl標準溶液消耗體積V1，再以甲基橙為指示劑，用HCl標準溶液滴定混合堿溶液由黃色變呈橙色為終點，記錄此時HCl標準溶液消耗體積V2，根據V1和V2的大小，判定混合堿的組成并計算各組分的含量。[演示] 學生代表上講臺演示測定操作過程，其余學生觀察其操作。[講解、示范] 教師點評學生演示操作過程的正誤之處并講解示范操作要點:(1)取樣的方法：取樣量25.00mL，取樣儀器:移液管(2)移液管的操作：吸液、調整液面的方法、放液

(3)酸式滴定管的操作：左手的用法，防止管尖和兩側漏液

(4)終點判斷：以酚酞為指示劑時，待滴定至溶液紅色消失又即可返紅時即接近終點，要注意每加一滴HCl標準溶液都需充分搖勻，最好每滴間隔2-3s，滴到微紅色剛好消失即為終點；以甲基橙為指示劑時，待滴定至溶液橙色出現又即可返黃時即接近終點，要注意每加一滴HCl標準溶液都需充分搖勻，最好每滴間隔2-3s，滴到橙紅色剛好出現即為終點 [講解注意事項]

1、HCl標準溶液使用前必須再次搖勻；

2、實驗前檢查活塞是否靈活或漏水，必要時重新涂油。注意手握活塞的正確姿勢，手心不可頂活塞；

3、混合堿系NaOH和Na2CO3組成時，酚酞指示劑可適當多加幾滴，否則常因滴定不完全使NaOH的測定結果偏低，Na2CO3的測定結果偏高。

4、最好用NaHCO3的酚酞溶液（濃度相當）作對照。在達到第一終點前，不要因為滴定速度過快，造成溶液中HCl局部過濃，引起CO2的損失，帶來較大的誤差，滴定速度也不能太慢，搖動要均勻。

5、近終點時，一定要充分搖動，以防形成CO2的過飽和溶液而使終點提前到達。

6、酚酞從紅色變為無色，但肉眼觀察這種變化不靈敏，因此滴到微帶淺紅色時為終點。每次滴定條件盡量掌握一致。[學生分組] 以每個同學一組分為24～30個小組

[學生實訓] 測定混合堿的組成及其含量并完成實驗報告。教師巡回指導 [交流討論] 引導學生說出自己完成任務的情況(成功或失誤之處)[試驗小結] 教師小結本課題實驗完成情況。

1、電子分析天平的正確使用，藥勺的正確握法，加固體樣品的正確加入方式；

2、酸式滴定管的規范操作：克服漏液的現象；

3、近終點時顏色判斷和操作：近終點，慢滴多搖，控制半滴操作；

4、分析誤差產生原因：滴定速度控制不當；終點判斷不準確；讀數誤差；酸式滴定管管尖和兩側漏液等因素。

[布置作業]：根據你的測定，我們本地區的燒堿或純堿指標屬于那個等級？(寫出測定實驗操作步驟、實驗數據和測定結果)