第一篇：生物檢驗實習總結1

一、實習目的及單位概況

實習目的在我們即將畢業步入社會的前夕，為了檢驗我們所學的理論知識，達到理論聯系實際的目的。學校組織畢業班的學生與本學期1——4周進行為期一個月的畢業生產實習。畢業實習是在完成全部基礎課程和專業課程的學習后通過到企業生產環節的實踐進一步鞏固加深課堂所學過的知識。通過在工作單位進行實地的實踐，更好的深化自己在學校所學的知識，鍛煉自己，使自己能更深的了解社會，畢業時能更好的融入社會。而且，通過畢業實習，多掌握一些有用的技能，為下一步找工作做準備。

1．單位概況

本單位是國家設質量技術監督檢驗檢疫總局的一個分支，下設各省縣市區局，主要職能是：

（一）負責《計量法》、《標準化法》、《產品質量法》、《特種設備安全監察條例》、《棉花質量監督管理條例》等法律、法規及相關配套法規、規章的貫徹實施和行政執法；

（二）統一管理標準化工作。宣傳貫徹國家標準、行業標準、地方標準并實施監

督；負責農業標準化的實施及其示范區工作；管理組織機構代碼和商品條碼工作。

（三）統一管理計量工作。推行法定計量單位，保障國家計量單位制的統一和量值的準確可靠；組織開展計量器具的強制檢定和量值傳遞；查處生產和流通領域的計量違法行為，組織計量仲裁檢定，調解計量糾紛。

（四）負責宣傳貫徹GB/T19000-ISO9000系列標準，積極推進質量認證工作，并按省質監局的部署，對質量認證中介機構的行為和認證標志的使用進行監督。

（五）負責鍋爐、壓力容器、壓力管道、電梯、起重機械、防爆電器等特種設備的安全監察和監督管理工作，依法查處各類違法行為。

（六）負責棉花等纖維質量監督工作，依法查處收購、加工、銷售、倉儲等環節的違法行為。

（七）負責質量技術監督行政執法工作。依法組織查處產品質量、標準和計量違法行為。受理消費者投訴和舉報，受理工商部門移交的在流通領域查出的屬于生產環節引起的產品質量問題，并依法組織查處。辦理行政復議案件。承擔市政府“打假辦”的日常工作，組織協調本市的“打假”工作，完成市政府授權牽頭的市場專項整治任務。

本單位主要職責是：建立、保存、相濟使用本地區社會公用計量標準和質量檢驗設備裝置，承擔量值傳遞、強制檢定、仲裁檢定、委托鑒定、非強制檢定、校準和檢測任務。承擔產品質量監督檢驗、委托檢驗、仲裁檢定、新產品質量檢定檢驗等多種產（商）品質量檢驗工作。

二、實習內容

通過國家或省制定的食品衛生檢測標準，檢測食品中各項化學物質或 元素的或微生物的含量以及 含量是否超標。例如酸牛乳質量檢測標準：（1）感官檢測（2）凈含量（3）脂肪（4）蛋白質（5）非脂乳國體(6)總固形物(7)酸度(8)蘋果酸(9)山梨酸(10)硝酸鹽(11)亞硝酸鹽(12)黃曲霉素M(13)大腸桿菌群（14）酵母（15）霉菌（16）致病菌（17）乳酸菌（18）鉛（19）無機砷（20）標簽.學習并掌握各項各項指標的檢測。還有很多食品很多項，再次就不一一介紹了。

三、實習結果

我感覺通過這一個多月的學習，我基本掌握的檢測項有：糕點的過氧化值檢測，酸價，砷得測定，掛面烹調損失得測定，食品中脂肪的測定，食品中有機酸的測定，食品中蛋白質的測定，生活飲用水好氧量的測定，食品中淀粉的測定，等等

四、實習總結和體會

作為2009年的畢業生就業壓力相較去年會更大了很多，我是一名生物工程系，生物技術及應用專業的大專畢業生。面對就業這個難問題深感其困難所在。一個偶然的機會可以讓我在平頂山市技術監督檢驗測試中心實習，雖說在學校學習過可都是理論知識，并沒實際操作過,心中始終有個心結又帶著那樣的迷惑,不安和好奇。

我在這一個多月里學到了很多書本以外的東西，任何一個企業都有它自己的企業文化，正是這種文化使大家得力量超一個方向使只要大家齊心協作沒有辦不了得事。提到協作就是要同事之間互相幫助。剛到單位我是一個沒有任何工作經驗的實習生,產生錯誤或者做的不到位的地方肯定是有的，但我要正視我的缺點，遇事不急噪要以溫和的態度。

雖然實習結束了，但是我覺的該學得還有很多很多，從身邊的每一個細小的事件上我們都能學到做人或者做事的經驗。希望我的路會越走越好，希望朋友們的路也越走越好。記得奮斗！以后是我們的！

第二篇：生物材料檢驗

103頁，1.苯的監測指標有哪些？哪些是有特異性的？

答：反，反-黏糠酸（t,t-MA）和苯琉基尿酸（S-PMA）是苯在機體內具有較強特異性和較高敏感性的代謝產物，與低水平苯暴露具有良好的線性相關關系，是較理想的職業苯接觸生物標志物。尿酚僅適合作為群體苯接觸程度的生物監測指標（非特異性）。呼出氣中苯可以作為職業接觸苯的確證實驗。

2.尿中黏糠酸和苯琉基尿酸的測定方法有哪些？簡述最常用方法的原理及注意事項？

答：氣相色譜法，高效液相色譜法，氣相色譜-質譜聯用法和高效液相色譜-質譜聯用法。1.原理

終末呼出氣樣品（肺泡氣）收集在50 ml呼出氣采集管內，用氮氣將樣品吹入活性炭管內，使樣品中苯吸附在活性炭上。280 ℃熱解吸，氮氣將釋出的苯帶入FFAP柱（改性的聚乙二醇）中，FID檢測，保留時間定性，峰高或峰面積定量。2.注意事項

（1）采樣應在無污染的室內進行；

（2）當回收率低于75%時，應檢查是否需要更換活性炭。活性炭在分析前應按熱解吸的條件活化一定時間，以除去活性炭所吸附的有機物。

（3）正己烷、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲苯、環己酮等均不干擾苯的測定。

3.甲苯和二甲苯的生物監測指標有哪些？為什么說馬尿酸作為甲苯接觸的生物指標是非特異性的？ 答：終末呼出氣中的甲苯和二甲苯均為特異性生物監測指標，尿中馬尿酸作為甲苯接觸的非特異性監測指標，甲基馬尿酸是一個較特異性的監測指標。正常人尿中也含有馬尿酸，但其含量水平因個體差異很大，主要影響因素有膳食及某些藥物攝入（水楊酸類藥物），另外，接觸乙苯、苯乙烯、苯甲醛、苯甲醇、苯甲酸等有機物也會使人尿中馬尿酸含量增高。4，簡述監測尿中1-羥基芘和3-羥基苯并a芘的意義及常用的方法？

答：1-羥基芘是芘的代謝產物，尿中1-羥基芘的濃度可以反映人體接觸環境中多環芳烴的水平，它不僅與環境空氣中芘的濃度有良好的正相關，而且與BaP有很好的正相關，因此人尿中1-羥基芘是多環芳烴一個靈敏有效的生物監測指標。高效液相色譜法

測定方法有：

HPLC，最為常用，無論是對于單一的羥基多環芳烴如3-羥基苯并[a]芘，還是多種羥基多環芳烴的同時檢測;GC-MS;HPLC-MS;超高 HPLC-MS ,ect.84頁，第六章 維生素的測定

2.維生素D的生物監測指標是什么？為什么選擇該指標？

答：首先在肝臟中羥基化，形成25(OH)D3與25(OH)D2兩種形式的25(OH)D，其后在腎進一步羥基化生成有生理活性的1,25(OH)2D2和1,25(OH)2D3或無生理活性的24R,25(OH)2D。

由于血清中25(OH)D的生物半減期約為15~20 d，而1,25(OH)2D的生物半減期僅為4~8 h，血清中25(OH)D含量明顯高于1,25(OH)2D，且后者的含量受到其他代謝過程的調控，已經確證維生素D缺乏的個體血清1,25(OH)2D含量水平可表現為正常甚至偏高。因此，比較而言，血清中25(OH)D的含量更適合作為評價人體維生素D是否缺乏的指標 4.什么是負荷實驗？其作用是什么？

答：負荷實驗是營養學中評價水溶性維生素營養狀況的常用方法。未參與代謝的硫胺素及核黃素以原型或結合形式經尿排出，攝入后4小時排出量最大，以尿負荷實驗后尿中硫胺素或核黃素含量分別反映人體這兩種維生素的營養狀況。

受試者清晨空腹排尿后口服5mg硫胺素/核黃素片劑，飲水200 ml以上，收集4h內尿液，尿中硫胺素含量：<100 μg為缺乏，100-200 μg為不足，>200 μg為正常； 尿中核黃素:<400 μg為缺乏，400-799 μg為不足，800-1300 μg為正常。

與其他水溶性維生素一樣，超出組織需求無法在體內大量貯存，以原形或以脫氫形式隨尿排出。因此，可通過負荷實驗評價人體維生素C營養狀況。

維生素C負荷實驗：受試者口服維生素C水溶液（含維生素C 5mg），收集4h尿樣，測定維生素C含量。

評價標準為：排出<5mg為缺乏，5?13mg為合格，>13mg為充裕。

第三篇：生物材料檢驗復習資料

生物材料檢驗：分析檢驗生物材料中化學物質及其代謝物的含量或因化學物質引起的的生物效應指標變化。

生物材料：是人體體液（如血液）、排泄物（如呼吸氣、尿液）、毛發，指甲以及組織臟器等的總稱。

生物標志物：指生物系統接觸外源性物質后出現的一種變化。分為三類：接觸性生物標志物、效應性生物標志物，敏感性生物標志物。

生物接觸限值（BEL）：大體相當于健康人吸入接觸最高允許濃度的毒物時生物材料中被測物的水平。

尿液可分為全日尿，晨尿，定時尿和隨時尿。

生物半減期：指進入生物體內的化學物質的里量通過各種途徑消除一半所需要的時間，又代謝半減期。

一、檢驗方法的一般要求：

1.方法的一般要求

1）靈敏度選擇符合生物監測的基本要求

2）操作簡便

3）試劑易得、價廉

4）效率高

5）符合國情，易推行、推廣 2．選擇和建立生物檢測方法必須考慮的因素： 1）被測成分

①

溶解性，穩定性 ②含量水平高g/L水平低ug/L 二、方法研制準則的基本內容

1．取樣、運輸、保存的原則

1）取樣：（1）容器工具材質不干擾測定

（2）取樣的操作要防止污染

（3）取樣時間根據半減期判斷決定

（4）取樣的體積 尿液>=50ml 靜脈血>=5ml 末梢血500ul

2)保存時間：一天，三天，一周，兩周一般只要求兩周 3）運輸過程：保證分析物穩定，必要時要冷藏和冷凍運輸

4）防腐劑（尿）和抗凝劑（血）

2.樣品預處理原則

1）尿液濃度按比重校正 尿標準比重1.020，>1.030及<1.010的尿液應棄去

2）樣品預處理的目的是消除干擾

（1）測定無機物時 ①用稀釋液稀釋后測定 ②混合酸消化

（2）測定有機物成分：先水解，再分離

（3）回收率>=75%

3.制定分析方法的程序

1）分析條件選擇、優化

2）確定檢出限

（1）影響檢出限的因素：試劑的純度，儀器的工作狀態，電源穩定性光源的溫度變化、污染等不可控制的因素。（2）檢出限的確定

一般用統計法，一般用空白值的3倍標準差計算；色譜法用3倍噪音水平，檢出限應小于0.3倍生物接觸限值。（3）檢出限的表示方法

濃度或絕對量表示，用濃度表示時要說明方法取樣體積。

3）精密度 ：同一個人用同一方法重復測定同一均勻樣品測定結果的符合程度通常在線性范圍內取高、中、低三個濃度水平分別重復測定3~5次。用RSD表示或用變異系數表示

復雜方法RSD<=20 簡單方法<=10.4)準確度（1）分析高低濃度水平和國家級標準物質各一組，測定值應在標準值的不確定范圍內。（2）用接觸表樣品的加標回收率表示

回收率>=75% 若>105%表明存在明顯的系統誤差。（3）用標準方法或權威方法比較：①兩個方法均值相對誤差應小于10% ②t檢驗 在確定一個置信水平條件，兩方法測定無明顯差異

5）干擾試驗 ：如果有干擾，要找出消除干擾的方法

6）樣品的穩定性實驗 ：時間：當天，3天，1周，2周 溫度：室溫，普通冰箱冷藏（4℃），冷凍保存（-8℃），低溫冰箱（-20℃）

4.方法的驗證

1）新方法的驗證：必須是另一單位①研制方提供方法所有技術材料

②驗證內容：四項

線性范圍，精密度，準確度，樣品的穩定性。2）引進國外標準方法或權威方法，引進方就是驗證方。

5.現場應用

①首先要觀察檢出率 ②觀察檢測結果與環境污染的符合程度 ③同時取非接觸樣品進行對照

三、確定生物監測指標的依據

（一）化學物質在體內的動力學過程

1.吸收

1）呼吸道吸收①氣體物質通過肺泡壁及周圍毛細血管吸收

②固體物質，溶解時吸收的前提

2）皮膚 ①有些有機物很容易被皮膚吸收 F=C/15 *(0.038-0.153p)exp(-0.016MN)F皮膚吸收量mg/㎝/h

2C化學物質在水中的飽和度mg/ml P辛醇-水的分配系數 MN相對分子質量 ②許多農藥易被皮膚吸收 如有機磷

2.體內分壓和貯存 1）起始主要分布于血液中最終分布取決親和力 2）血液側得量是反映新近吸收量或機體組織的水平3）血液中毒物或其他被測物并非均勻分布 4）一般脂溶性溶劑及鹵代烴會分布在脂肪組織中，乳汁是檢測有機氯農藥最好的樣品 5）體內儲存毒物的形式大多為結合狀態，測定尿液中的代謝物需要先水解

3.生物轉化 1）概念：外源性化合物在體內經過一系列化學變化并形成其衍生物以及分解產物的過程。2）有關生物轉化的討論 ①是毒物發生質的變化 ②生物轉化的數量關系，個體差異很大 ③是一種動態過程，對時間的了解是確定采樣時間的基礎，生物半衰期。

4.排出

易揮發性有機溶劑從呼吸氣中排出較多。長期蓄積的有機氯農藥可從乳汁中排出及叮嚀中排出，易代謝的有機毒物大多以結合態從尿中排出。

（二）、個體差異

1、毒物在生物體內的動力學過程有種屬家族和個體的差異，其中生物轉化過程變異極大；

2、生物監測的個體差異可用監測結果的變異系數表示；

3、個體差異降低了生物監測的精確性，卻可幫助檢出特殊敏感人群或耐受人群。

（三）、接觸水平（劑量）—效應（反應）關系

1、是確定一次生物監測指標的關鍵依據；

2、生物監測結果與空氣毒物濃度之間的相關資料，可作為選擇生物監測指標的替代依據。

四、檢驗指標的選擇與分類

（一）、選擇的基本要求

1、特異性好；

2、具有良好的劑量—效應關系；

3、穩定性好；

4、有準確可靠的檢驗方法。

（二）、生物材料檢驗指標的分類

1、化學物質原形：①化學物質在生物體內不進行生物轉化或轉化速度很慢；②缺乏毒物代謝動力學資料；③代謝產物在體內沒有特異性

2、化學物質代謝產物

3、生物效應指標。

五、樣品的采集與保存

一）、生物材料樣品的選擇

（一）、種類及特點

? 尿液: 最常用的1）特點：采集方便、無損傷性、采集量大

2）適用性：水溶性化學物質、代謝產物、金屬等

3）尿樣的種類：（1）全日尿（24h尿）收集24h內的全部尿液，通常只用于住院病人

（2）晨尿 起床后、早餐前第一次排出的尿

（3）定時尿： 生物半減期 ①班前尿：第2個工作日上班前以內排出的尿 ②班中尿：上班2~3h以后排出的尿 ③班末尿：下班前1h內排的尿 ④班后尿：下班以后1h以內排出的尿 ⑤周末尿：連續工作第五個工作日的班末尿。? 血液

1）特點：①成分較恒定 ②個體差異小 ③取樣污染機會小 ④損傷性采集樣品 ⑤血樣貯存條件要求較高；

2）種類：①血清：不抗凝離心分離出的上層清夜 ②血漿：加抗凝劑離心分離的上層清夜 ③全血 ④紅細胞。

呼出氣

1）特點

①優點：操作方便、干擾物少，非損傷性 ②缺點：a、被測物的含量比較低

b、肺泡氣中水分對某些測定有影響

c、肺部“死腔”中環境空氣對肺泡氣稀釋不穩定，影響測定結果的解釋；2）適用性 ①監測僅限于揮發性物質 ②主要用于測定化學物質原形 ③呼出氣監測結果能反映采樣期間車間空氣的平均濃度；

3）呼出氣的分類 混合呼出氣、終末呼出氣（肺泡氣）第一階段呼出的是空氣，第二

階段混合呼出氣，第三階段肺泡氣。

（二）、生物材料樣品的選擇

1、同一毒物或代謝產物在不同生物材料其生物學意義不一樣，血鎘代表近期接觸水平、尿鎘反映長期接觸的濃度；

2、選擇生物材料樣品種類的要求：①被測物有特異性 ②與外劑量有相關性 ③有足夠的穩定 ④測定結果重復性好，個體差異在允許范圍內 ⑤采樣能被受試者接受；

3、尿、血、呼出氣是目前較理想的生物材料樣品，美國BEI55個尿58%、血27%、呼出氣14%。

二）、樣品采集、運輸及保存

（一）、一般要求

1、采樣時間：依據生物半減期；

2、采樣環境：無污染；

3、采樣容器：①測無機成分、塑料、高壓聚合玻璃：硬質、石英

不銹鋼含Cr、Ni、Mn（不能用于測此三種元素）使用前要求用酸液（稀HNO3）浸泡24h洗滌；②測有機物

玻璃、塑料（不能用橡膠和添加染料的橡膠）冷凍保存不能用玻璃儀器；

4、樣品的運輸與保存；

5、采樣記錄①編號②檢驗項目③受試者信息④采樣信息：時間、地點、環境、過程。⑤采樣人及記錄人信息

（二）樣品采集與保存

1、尿樣

1）尿樣的校正：(1)比重校正法 ?標準比重1.020 ?校正公式C校正=（1.020-1.000）/（d-1.000)*c=kc ?d的使用范圍1.010～1.030(2)肌酐校正法.尿中被測物濃度（mg/g肌酐）=實測濃度（mg/L）/肌酐濃度（g/L），肌酐含量 2)采樣.?采集尿液不少于50ml,?用頂空分析法測定揮發性物質時.收集尿樣的容器要充滿尿樣并知道體積，?記錄2人上次排光膀胱的時間及采集樣的終點時間。

3)儲存.貯存一般2周.?反腐 加酸.氯仿.冷藏?測尿中汞或揮發性有機物要盡快測定?要保存5天以上的，最好冷凍

2、血樣

1）采集（1）、全血；要抗凝（2）、血清（血漿）或紅細胞

2)注意事項 ?采集過程避免污染.毛細管血?防止溶血.金屬針頭（取下）再擠出針管時不能太快?取末梢血要避免擠壓采集部位，自然流出棄去第一滴血④有三種情況不宜采集? 毛細管血a血液量超過5ml.b采集環境有外源性化學物質存在c測定揮發性成分

3)血樣的運輸與保存 ?避免振動和溫度的改變 ?血樣冷凍肯定溶血采集血清或血漿時，應分離再保存 ?臨時存放4℃過夜，長時間保存要冷凍

④測酶活性要采集后盡快分析

3.呼出氣.1）采集方法：?先深呼吸2~3次，再恢復正常呼吸時采集呼出氣?采集肺泡氣只收集末端呼出氣

2）注意事項：?受檢者必須時肺功能正常者 ?要選擇對被測物吸附小的容器 ?要在正常呼吸狀態下收集樣品呼出過程不能有阻力 ④采樣的時機要依被測物代謝速度決定

三、生物材料樣品的預處理原則

（一）無機物分析的樣品處理

1、稀釋法.1）.常用的稀釋劑;1)稀硝酸液（尿），2）TntonX—100表面活性劑3）基體改進劑溶液 2）.常用機體改進劑：硝酸鹽（NH4+ Ni2+ Ca2+）磷酸鹽（Na+ NH4+）3）.應用實例 :?磷酸銨，硝酸銨和TritonX-100可改善血清中銅鋅的測定 ?磷酸氫胺，硝酸銨測定血鉛可提高灰化溫度至1000℃

?硝酸鎳可使測定砷和Se的灰化溫度到1000℃

④磷酸銨可使測定Cd的灰化溫度增至800℃

2、酸提取法

1.硝酸提取，測定血鉛.6mol/L 硝酸離心取上清液。標準物質

被測成分的含量是已知的2，鹽酸提取3，三氯乙酸（固體）。鐵（有效）提取+2價鐵

3、礦物化法（無機法處理）

（二）有機物分析的樣品處理（p11）

第五節

鉛

一、接觸途徑：鉛礦，開采，冶煉

二、代謝物和生物監測指標

（一）動力學過程.1、吸收

1）呼吸道：鉛塵煙蒸汽

2)消化道：鉛塵

3）皮膚，無機物不吸收有機鉛化合物可被吸收（四乙基鉛）

2、分析：起始分布在血中有95%與紅細胞結合最終主要以磷酸鹽沉積于管中，其次是肝腎腦等

3、生物效應：抑制血紅蛋白的合成

1）抑制5—氨基乙酰丙酸脫水酶，導致血尿中δ-ALA增加 2）抑制糞川啉元氧化酶

3）抑制亞鐵螯合酶

4、排除：吸收的鉛主要經尿排出，尿鉛生物半減期較長。

（二）鉛接觸的生物監測指標

1、血鉛：直接反映近期接觸鉛的情況

2、尿鉛：反應機體中鉛的負荷量，是鉛中毒的輔助診斷指標

3、生物效應指標：1）尿中σ—ALA

2）血中鉛原卟啉

三、樣品的采集與保存——用于尿鉛血鉛的測定

1.尿樣.①采樣時間的限定

②隨即采集一次尿樣

③按1%比例加HNO3，4℃可保存兩周。

2.血樣.1）末梢血40 μL

2）靜脈血

四、尿鉛和血鉛的測定——石墨爐原子吸收法

（一）尿鉛的測定

1、原理：尿樣用基體改進劑液稀釋后直接進行測定，基體改進劑液NH4H2PO4+抗壞血酸

2、石墨爐升溫程序——適用涂銅石墨管

①干燥~70℃,40S ②灰化 450℃,30S ③原子化

2000℃ 5S（停氣）④清除 2200℃ 3S

3、石墨管涂鉬處理，向石墨管中加20μL鉬酸銨液，石墨爐升溫程序①~③并重復10次升溫，石墨管內壁呈灰白色

4、標準系列液配置

①鉛標準系列液

②基體改進劑液（混合液）

③正常人混合尿 ：

沒有接觸鉛的健康人的尿，取2份，一份比重小于1.020，一份比重大于1.020，混合成比重為1.020的尿液

5、說明 ： 1）基體改進劑液的作用 ：本法選用4%磷酸二氫銨-6%抗壞血酸作為基體改進劑，能有效地克服基體干擾

2）背景吸收的扣除

①背景校正器扣除背景吸收，氘燈背景校正

②石墨管涂鉬可降低背景吸收

（二）血鉛的測定

1、樣品處理：全血用TritonX-100液稀釋，稀HNO3酸化，進樣測定

2、石墨爐升溫程序:

①干燥：75℃-100℃,10S（斜坡升溫）②灰化450℃-500℃

30S 保持10S（斜坡）③原子化

2400℃

7S④清除

2500℃

3S

3、標準系列液： ①鉛標準液②TritonX-100液③正常人血

五、生化指標的測定

（一）尿中σ—ALA的測定

1、原理：①σ—ALA可與乙酰乙酸乙酯縮合生成吡咯化合物

②用乙酸乙酯萃取吡咯化合物③顯色，加對一二甲氨基苯甲酸生成紅色化合物λmax=554nm

2、操作要點： ①兩份經稀釋尿樣——加PH=6緩沖液

②樣品管加乙酰乙酸乙酯

③尿樣空白管補充緩沖液

④各沸水浴10min

⑤各加4mL乙酸乙酯萃取

⑥離心、靜置、分層

⑦取清夜顯色10min后測定

（二）全血中游離原卟啉的測定

1、原理：①用乙酸-乙酸乙酯破壞紅細胞②鹽酸萃取原卟啉，測定熒光強度

2、樣品處理： 1）樣品：20μL血+0.1mL生理鹽水

2）加硅藻土懸浮液，乙酸乙酯—乙酸液、振搖、破壞紅細胞

3）離心，取上清液加鹽酸萃取

第三節、鎘

一、接觸途徑：①鋅礦的開采及冶煉②工業上含鎘材料的生產③農業上也有鎘化合物的應用

二、代謝和生物監測指標

（一）代謝 1.吸收、呼吸道和消化道2.生物效應

急性中毒靶器官：肺

慢性中毒靶器官：肺、腎、骨

3.排出少量由尿排出，屬于蓄積性元素

（二）生物監測指標

1、尿鎘：只反映長期接觸情況2血鎘：只反映近期接觸情況

三、鎘接觸指標的測定——石墨爐原子吸收法

（一）尿鎘的測定

1、原理：用磷酸氫二銨液稀釋，直接標準曲線法定量

2、石墨爐升溫順序

1）干燥0~100℃

30S（斜坡）

2）灰化

100~200℃

20S（斜坡）

400℃ 10S（階梯）

3）原子化

1800℃

5S

4）清除

2000℃

3S

3、標準系列液：①鎘標準液

②空白尿液

③基體改進劑液

④1%NH3

（二）血鎘測定

1、原理：血樣加稀HNO3離心，取上清液測定，標準曲線法定量

2、標準系列液

①鎘血標準液 ：抗凝小牛全血+鎘標準液

②4%HNO3

第七節：汞

一、接觸機會

①礦的開采與冶煉 ②電器和儀表制造 ③化學工業

二、代謝和生物監測指標

（一）動力學過程 1.吸收主要是呼吸道 2.分布 無機汞主要是腎、其次肝、腦 有機汞主要是腦 其次肝、胃 3.排出 尿汞 生物半減期2~3個月

（二）生物監測指標 1.血汞：反映近期接觸無機汞的量 2.尿汞：用于診斷汞中毒觀察驅汞療效

三、樣品采集、保存 1.尿樣：①隨機取一次尿樣 ②加堿NaOH使濃度達到40g/L，4℃可保存2周 2.血 樣 ①周末血 ②抗凝 4℃可以保存數天

四、尿汞的測定——冷原子吸收法

（一）堿性氯化亞錫還原法

1.原理：在堿性條件及有Cd存在條件下，高濃度的SnCl2將有機汞及無機汞還原成元素，用測氯儀測定

2.標準系列液的配置 ①汞標準液 ②基體尿液 正常人混合尿 ③NaOH液 ④DL-半胱氨酸 3.測定 將上述標準系列液加1滴磷酸三酯，加SnCl2-CdSO4液立即通入空氣測定（載氣）4.說明：①磷酸三酯 消泡

②Cd2+催化作用

③DL-半胱氨酸起穩定劑的作用，防止無機汞吸附揮發；還可使有機汞不分解

④測定讀數：讀取最大吸光度值

（二）酸性SnCl2還原法

1.原理：用KMnO4和濃H2SO4分解尿樣，使汞都轉化成Hg2+，用SnCl2還原成Hg，吹空氣導入測汞儀

2.測定：尿液和標準系列液同樣用KMnO4和濃H2SO4分解

3.說明：1）KMnO4和濃H2SO4加入的順序：先加KMnO4液再加濃H2SO4 2）測定前先對氣路系統進行凈化；加SnCl2（酸性）測定空白水、吹氣觀察到儀器的響應值為零為止 每次測定都使響應值為0再測第二份

第三章：非金屬化合物及其代謝產物 第一節：CO

一、代謝及生物監測指標

1.吸收： 呼吸道

2.生物效應：進入機體與血紅蛋白結合形成碳氧血紅蛋白（HbCO）形式導致機體組織缺O

2CO?Hb?HbCO

3.分布： 血液中HbCO形式

4.排出 呼出氣 約有1%被氧化成CO2

5.生物監測指標 1）血中碳氧血紅蛋白 2）呼出氣中CO

三、樣品的采集與保存

1.呼出氣：1）采集班中（3h后）或班末呼出氣

2）收集終末呼出氣

2.血液：1）采集班中（3h后）或接觸最高濃度時的血

2）抗凝

3）密閉保存 4℃ 11周 4）最好取靜脈血 5）受試者不抽煙

四、血中碳氧血紅蛋白的測定——分光光度法

+

1、原理：1）血中血紅蛋白的四種成分：Hb、HbO2、HbCO、HbMet

SO2）HbCO，HbMet?Na????Hb 3）測定Hb和HbCO吸光度，最大吸收波長分別為

223432nm和420nm

2、測定方法：

1）摩爾吸光系數的測定：用吸光系數代替

（1）過飽和HbO2液的制備，血樣用水和Tris液適量稀釋通入O2 30min（2）飽和HbO2液的制備：取（1）中2份通入N2

（3）飽和HbCO液制備 取（1）中2份，通入CO 10min（4）HbCO和Hb液制備 在（2）和（3）的溶液中加Na2S2O4固體

（2）?Hb

（3）?Hb，HbCO

（5）分別測定420nm和430nm吸光度作為吸光常數（有四個值）

SO2）血樣測定 稀釋血樣?Na????224HbHbCO 分別測420nm和430nm的吸光度

3．計算 ：碳氧血紅蛋白（%）?A430K2-A420K4A420(K2?K4)?A430(K1?K3)

A420：血樣在420nm吸光度 ；A430血樣在430nm吸光度 K1、K2是HbCO在420nm、430nm的吸光常數 K3、K4是Hb在420nm、430nm的吸光常數

4.注意事項：

（1）所用氮氣和氧氣應為高純度氮和高純度氧，不純氮和氧氣中含微量的CO，能干擾測定結果

（2）連二亞硫酸鈉遇水易分解，在空氣中容易被氧化失效，應以小瓶分裝使用，避免接觸空氣和水分

（3）測定吸光系數必須采用新鮮血液，一次測定值在儀器波長穩定的情況下可以使用一段時間，但還應定期核檢。

（4）測試液應盡量避免接觸空氣，及時測定，否則會造成結果偏低

第二節

CS2

二、代謝及生物監測指標

（一）代謝

1、吸收：呼吸道、皮膚

2、生物轉化

1）吸收后約70~90%轉化為多種代謝產物

2）目前，接觸者中尿中已確認的有3種：TTCA、2-巰基-2-噻唑啉酮-5，硫脲（其中TTCA研究較少，生減期為2h）

3）排出：a.代謝產物隨尿排出 b.約20~30%以原形從呼吸道排出

c.約1%以原形從尿中排出

（二）生物監測指標

1、尿中TTCA：班末尿

2、呼出氣中CS2,目前研究較少

三、樣品采集與保存

四、尿中TTCA的測定——HPLC法

1、樣品的處理：A、取離心后的尿樣 B、稀HCL酸化：乙醚提取

C、離心分層，去上層醚液于試管中

D、40℃用N2吹干加20ul甲醇定容

2、說明：A、尿樣經離心后取上層尿液，易于分離

B、此法從國外引進，將原來的梯度洗脫改為等度洗脫。國外的梯度洗脫是用兩種配比的流動相切換洗脫

C、TTCA純品需自己純化

五、呼出氣中CS2測定

（一）GC法

1、樣品處理：（1）、呼出氣中CS2濃度在測定范圍內不需要處理，直接進樣

（2）、呼出氣中CS2低于測定濃度范圍需富集，用Tenron GC管富集

2、色譜條件：固定相：OV-17；檢測器：火焰光度檢測器

3、說明：（1）采集終末呼出氣，最后呼出的100ml

（2）TenronGC管：2,6-二苯基對苯醚的多孔聚合物，用于捕集/熱解吸

（3）富集測定要求做富集空白測定：用180ml氣體（沖洗氣）注入空白Tenron GC管中，熱解吸后測定

（二）檢氣管法：快速檢測法

1、根據檢氣管中形成色帶長度，粗略估計濃度

2、特點：操作簡單、快速、成本低、精度差，相對偏差達20%-30%以上 第四章

芳香烴及其代謝產物 第一節

苯

一、代謝及生物監測指標

1、吸收：主要是呼吸道，其次是皮膚

2、代謝與排泄

1）吸入的苯約50%以上以原形從肺中排出，約10%以原形儲存在有機組織中

2）約40%進入血液循環，在肝中代謝，代謝產物50%-70%的苯酚，6%為間苯二酚，2%為對苯二酚，還有極少量的粘糖酸等都以結合態從尿中排出 3）有極少量的苯以原形從尿中排出

3、生物檢測指標：

1）尿酚

A、因正常人尿中很有酚且個體差異大

B、尿酚不是特異性指標 C、僅用于群檢

2）呼出氣中的苯：在測定尿酚以后，測定呼出氣中苯作為確認試驗 3）尿苯：1993年有人提出用尿苯作苯接觸的生物接觸指標，目前，還沒納入生物監測指標

二、呼出氣中苯的測定——GC法

（一）原理：用塑料袋或采樣管收集呼出氣，呼出氣用N2吹入活性炭管吸附（-78℃）280℃熱解吸，用載氣（N2）導入色譜儀，FID檢驗，通過六通閥切換完成

（二）苯標準氣的配制：注入20ul苯于100ml玻璃配氣瓶中，臨用時從中抽取一定體積注入另一配氣瓶中稀釋成20ng/ml的苯標準氣

（三）測定 ： 1）取苯標準氣（0.5、1.0、2.0ul）和樣品分別注入呼吸氣的采樣管中

2）將采集管37攝氏度恒溫2h

3）一端與六通閥連接，一端接N4）吹入冷阱（-78℃）中的活性炭管

5）熱解吸導入色譜儀

三、尿酚的測定——GC法

1、原理：尿樣加鹽酸加熱（90℃水浴）水解，再用乙醚萃取苯酚

2、尿樣采集與保存：班末尿50ml

4℃

2周

3、樣品處理與測定： 1）5.0ml尿樣，1ml濃鹽酸于具塞試管中，90℃水浴1h

2）、用3.0ml乙醚振搖萃取

3）取上層醚液注入GC儀

4、標準曲線：苯酚標準系列液用3ml乙醚提取

4、色譜條件（1）液晶柱分離

分離苯酚和鄰間對甲酚。

（2）FFAP柱，分離苯酚和對甲酚

5、說明：（1）3ml乙醚萃取要避免乙醚揮發，分層后不是3ml，加乙醚補至3ml

（2）可用內標志法定量

四、甲苯、二甲苯

（一）代謝及生物監測指標

1）代謝

(1)甲苯 ①約15%~25%以原型呼出約1%從尿中排出

②約80%代謝甲苯→[O]苯甲酸→馬尿酸

馬尿酸排出的半減期為2~3人。

(2)二甲苯

①約5%原形從肺中呼出②60%~80%生物轉化主要終產物是甲基馬尿酸

2）生物監測指標

(1)甲苯①尿中馬尿酸非特異性對群體判斷有一定的定義②呼出氣體中甲苯作為確認

(2)二甲苯 ：尿中馬尿酸正常人尿中無甲基馬尿酸特異性指標

（二）、尿中馬尿酸的測定—比色法

（喹啉 苯磺酰氯比色法）

（1）原理

（2）樣品采集

兩天后班末尿，按100+1體積比加氯仿

（3）樣品處理與測定

（4）注意事項 ：

1、試劑加入順序不能顛倒

2、日光對顯色有破壞作用要避光放置（加入苯磺酰氯后）

第四節 乙苯

一、代謝及生物監測指標

（一）代謝與排泄

1、只有少部分以原形從呼吸道排出。

2、70%以上代謝后隨尿排出，主要代謝產物為扁桃酸60%苯酰甲酸25%

（二）監測指標：

1、呼出氣體中乙苯

2、尿中扁桃酸（非特異性）

二、生物監測方法：

1、呼出氣體中乙苯的測定GC法與呼出氣中笨的測定類似

2、尿中扁桃酸的測定 HPLC法

內標法定量 內標物 4-羥基苯甲酸

第五章 芳香族硝基和氨基化合物

第一節 苯胺

一、代謝和生物監測指標

1、吸收：主要通過呼吸道吸收，很容易經皮膚吸收

2、代謝 ①主要代謝途徑：苯胺—苯基羥胺—對氨基酚

②接觸24h后，有15~60%轉化為對氨基酚、以結合態隨尿排出

3、生物監測指標：尿中對氨基酚

正常人尿中含微量對氨基酚平均3.7mg/L

二、尿中對氨基酚的測定

（一）鹽酸萘乙二胺分光光度法

1、原理：①尿中對氨基酚經水解。萃取分離

②重氮化偶合顯色。重氮化試劑：亞硝酸鹽

偶和顯色劑：鹽酸萘乙二胺

2、操作要點

(1)樣品處理：①鹽酸酸化沸水浴水解約1人 ②萃取先用NaOH調中性，用乙酸乙酯萃取，再用鹽酸溶液反萃取。

(2)重氮化偶合反映 ①重氮化，酸性條件下加過量的亞硝酸鹽、反應10min

②除過量的NaNO2液加氨基磺酸胺溶液至無色氣泡產生止放10min

③偶合反應顯色：加鹽酸萘乙二胺生成紫紅色

(3)比色定量

580nm 尿空白管作參比，標準曲線法定量

3、說明：(1)尿樣應采集班末或班后尿，采樣前要詢問受檢者是否服用藥物

(2)重氮化反應，NaNO2過量才能完全重氮化 但NaNO2對偶和顯色有干擾

(3)重氮化反應應在盡量低溫條件下進行，而偶合反應在60°為宜，水浴加

熱前，偶合劑加入后充分混合（二）HPLC法

1樣品處理：

(1)水解，同上法

(2)萃取

①先在酸性條件下用乙酸乙酯萃取 ②再在中性條件下用乙酸乙酯萃取對氨基酚(兩次萃取除雜質)

2、說明：P96 用磷酸氫二鉀（弱堿）調節PH值

第二節：硝基苯

一、代謝產物和生物監測指標

1、吸收：很容易從皮膚吸收，主要從呼吸道吸收。

2、代謝：代謝產物有硝基酚和氨基酚還有少量苯胺，對硝基酚13—16%，對氨基酚10%。

3、排出：①代謝產物與葡萄糖醛酸和硫酸結合，隨尿排出。②少量以原形級微量本案隨呼出氣排出。

4、生物監測指標

尿中對硝基酚（特異性）

二、尿中對硝基苯酚的測定

P98

（一）、鄰甲酚分光光度法

1、原理：①尿樣經酸水解。②苯取 先用混合有機溶劑取，再用氫氧化銨溶液反萃取。③還原

用三氯化鈦將其還原成對氨基酚。④鄰甲酚顯色

藍色600nm比色定量。

2、樣品處理：1）水解 鹽酸酸化沸水浴1h。2）萃取 先用異戊醇—石油醚—乙醚萃取，再用3mol/L氯水反萃取。

3、顯色測定 ①先加鄰甲酚，再加三氯化鈦溶液。②立即振搖至黃色沉淀變成淡黃色沉淀，過濾③30min后600nm測定吸光度。

（二）HPLC法

1、樣品處理 1）水解同上法。2）萃取 二氯甲烷萃取3次定容至20ml。

2、說明

1）尿液采集后，盡快加鹽酸，10c以下運輸。2）流動相配比和流速可根據儀器性能調整。

第三節：三硝基甲苯

TNT

2,4,6—三硝基甲苯

一.代謝 1）經氧化還原化合等途徑代謝。2）以還原代謝途徑為主，主要代謝物4—硝基—2，6—二硝基甲苯。3）各種代謝產物以結合態隨尿排出。二.生物監測指標

4—A 三.GC法測定尿中4—A

o

1、樣品處理：1）鹽酸酸化沸水浴1h。2）萃取代謝 加固體碳酸氫鈉調PH7—8用甲苯萃取（尿樣1ml，甲苯1ml）2.色譜條件：

1）檢測器 ECD

2）固定相：OV—17（固定液）

3）柱溫 220℃

程序升溫效果更好

200℃（0.4min）10℃/min

220℃

5℃/min

240℃

第六章：鹵代烴化合物及其代謝產物的測定 第一節：氯乙烯

一、代謝

1）經呼吸道吸入大部分以原形從呼吸道中排出

2）少部分在肝臟轉化①先轉化成一種致癌活性物環氧氯乙烯

②在甘光甘肽或半胱氨酸參與下最終代謝物為亞硫基二乙酸（硫代二乙酸）

3）少量的氯乙烯以原形隨尿液排出

二、生物監測指標：尿中硫代氯乙酸，呼出氣中氯乙烯很少作為檢測指標

三．GC法測定尿中硫代氯乙酸

（一）原理 ①尿樣經酯化后水蒸氣蒸至近干 ②甲醇—乙醚溶解其中的硫代二乙酸 ③酯化 重氮甲烷酯化 ④火焰光度計監測

（二）樣品處理： 1）1ml尿液加0.1mlHCl酯化 2）瓷蒸發皿水蒸氣蒸干至結晶狀態 3）甲醇—乙醚溶解殘渣，上層夜轉入離心管混水浴濃縮至1ml

（三）酯化 ：（通風柜中進行）亞硝基甲脲與氫氧化鈉溶液反應生成重氮甲烷氣體導入樣液酯化溶液至淺黃色為止，在放置10min，最終用甲醇定容。

（四）注意事項？

第三節：三氯乙烯和四氯乙烯

一、代謝與生物監測指標

（一）代謝 1.三氯乙烯 1）吸入約20%以原形從肺中排出 2）有50—60%儲存在體內（蓄積性）3）大部分在肝中轉化成三氯乙酸和三氯乙醇還有少量一氯乙酸 4）脫離接觸50h后，尿中三氯乙酸濃度達到最高。2.四氯乙酸 ①約98%經肺排出 ②約2%代謝轉化成三氯乙酸

(二)生物監測指標 1.三氯乙烯：①尿中三氯乙酸和三氯乙醇聯合作為三氯乙烯接觸的生物監測指標 ②呼出空氣中三氯乙烯特異性指標

2.四氯乙烯：①尿中三氯乙酸 非特異性 ②呼出空氣中 特異性

二、尿中三氯乙酸的測定

（一）頂空GC法

??三氯乙烷

1、原理 ①在密閉頂空瓶中 三氯乙酸??②抽取頂空氣注入氣相色譜儀 ③FID檢測 內標法定量 內標物為正丁醇

第七章：農藥接觸指標的測定

第一節、有機磷農藥 二代謝和生物監測指標

（一）、毒性效應 抑制膽堿酯酶的活性造成乙酰膽堿過量，導致膽堿能神經過度興奮，使中樞神經系統紊亂

（二）、膽堿酯酶

1.真性膽堿酯酶

1）指的是乙酰膽堿酯酶和紅細胞膽堿酯酶 2）主要存在于神經組織和細胞中 3）對乙酰膽堿有很高的特異性 4）在血中活性占80%以上

2、假性膽堿酯酶 1）指的是血清膽堿酯酶 2）存在于血清中 3）是非特異性膽堿酯酶 4）在血中活性約20%

（三）生物監測指標 ：血中膽堿酯酶活性——效應性指標

（三全血中膽堿酯酶的活性測定）（1）三氯化鐵分光光度法

??乙酸+膽堿

1.原理：①乙酰膽堿?NH2OH酶②剩余的乙酰膽堿與羥胺反應 乙酸膽堿

FeCl3OH-乙酰羥胺

??紅色物質 520nm測定吸光度標準曲線法定量 ③顯色 乙酰羥胺??

2、標準系列液——乙酰膽堿標準系列液

3、樣品處理及測定

1）樣品處理：①將A、B兩個樣品管37℃水浴5min ②向A管加入乙酰膽堿標液1ml，37℃水浴中精確反應30min（每隔10min振搖一次）取出 ③立即向A、B管各加膽堿羥胺液4ml ④再向B管加乙酰膽堿標液1ml

2）測定 向A、B管及標準管各加鹽酸（1+2）2ml 加2ml FeCl3液振搖過濾 520nm測定吸光度

4、計算：被水解的乙酰膽堿吸光度=AB-AA以此吸光度（差值）查標準曲線得到被水解乙酰膽堿量（μmol）此值為40ul血37℃反應30min膽堿酯酶活性絕對值（G）

全血膽堿酯酶活性（μmol/ml）=c/0.04（絕對值）

全血膽堿酯酶活性相對值（%）=C/正常人血膽堿酯酶活性

5、注意事項：P116（2）DTNB分光光度法 ： 硫代乙酰膽堿試劑測定血清中酶活性

第四篇：病原微生物檢驗實習總結

病原微生物檢驗實習總結

大三下學期5月份，我們動物檢疫專業的同學開始了為期2個多月的教學實習，在眾多輔導老師之中，我有幸跟隨我校動物科技學院預防系的趙宇軍教授進行學習。實習的地點就在我校動科樓的微生物實驗室，以前我們曾在這里上過實驗課，所以并不陌生。這次大家來到實驗室為自行選擇課題進行相關實驗操作，我對世界聞名的金黃色葡萄球菌非常感興趣，在老師的帶領下進行了相關食物中該菌的檢驗。下面我們來回顧這次實驗。

一、實驗內容：食品中金黃葡萄球菌的檢測方法

金黃色葡萄球菌是一種引起人類和動物化膿感染的重要致病菌，也是造成人類食物中毒的常見致病菌之一。本菌廣泛分布于自然界，如空氣、土壤、水及其它環境中。在人類和動物的皮膚及外界相通的腔道中，也經常有本菌存在。據報導，在正常人群中的帶菌率可達30%~80%，其中皮膚帶菌率為8~22%，鼻腔和咽喉部等上呼吸道的帶菌率在40~50%以上，因此其可通過各種途徑和方式，尤其是經工作人員的手和上呼吸道而污染食品。由于致病金黃葡萄球菌能產生腸毒素，故一旦細菌污染食品，并在合適的溫度環境下，細菌可以大量繁殖并產生腸毒素，從而引起消費者食物中毒。

由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒，在世界各國都極為普遍。特別是在北美及歐洲等地區發病率更高。在上述這些國家中，每年有金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例，僅次于沙門氏菌，而在細菌性食物中毒病例排到第2~3位，有此而造成的經濟損失也相當慘重，在我國由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例也時有報導，所以目前世界各國都把金黃色葡萄球菌列為食品衛生的法定檢測項目。

我國對金黃色葡萄球菌目前采用的方法是以國家標準GB.4789-10-84及檢驗檢疫系統行業標準SN.0172-92作為依據。整個檢測過程獲得最終結果須時5天左右，既費時又費力，并造成貨物積壓，也影響貨物的及時出運，并使貨主的倉儲成本提高，造成較大的經濟損失。多年來很多食品微生物實驗室都在探索和尋找一些準確性高，并快速的檢測方法，最近我們分別從美國3M公司和法國生物梅里埃公司獲得兩種快速檢測致病性金黃色葡萄球菌的培養基，其名稱為：

① Petrifilm RSA.Count Plate（由美國3M公司研制生產），是一種薄膜型快速檢測金黃色葡萄球菌的計數平板。

② Baird-parker + RPF Agar.（由法國生物梅里埃公司研制生產的用Baird-Parker瓊脂加免血漿纖維蛋白原的金黃色葡萄球菌檢測計數平板）。

二、實驗原理：

Petrifilm.RSA.測試薄膜是由二部分組成。第一部分是由黃金色葡萄球菌培養基片，此培養基中含有經修正的Barid-Parker，營養成分加上以冷水可溶解的膠質。第二部分是一種耐熱核酸酶（TNase）反應片，含有DNA及甲苯胺蘭(Toluidine Blue-O)及四唑指示劑(Tetraeolium)。此指示劑有助于菌落的計數及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。

耐熱去氧核糖核酸（deoxyribonulcas Dnase）為產毒金葡菌之典型特征，此酶非常耐熱，在100℃加熱30min，不易喪失活性，在130℃之下，其D值為16.6min，此酶之分子量為16800，等電點PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測血漿凝固酶相似，是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法，在Petrifilm.RSA 檢測片上，耐熱DNA酶反應看起來，呈粉紅色環帶包圍著一個紅色或蘭色的菌落。

Petrifilm.RSA檢測片，必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應片一起使用，單獨使用將不會顯示菌落，因為具有輔助計數菌落的指示劑是在反應片上，而不是在Petrifilm.RSA檢測片

上。

Baird-parker + RPF agar，這一培養基中含有豐富的營養成分，其中以氯化鋰代替亞碲酸鉀，使菌落顏色呈黑色，RPF補充有兔血漿和牛纖維蛋白原，以便檢測凝固酶活力，胰酶可以抑制全部或部分圍繞凝固酶陽性菌落周圍沉淀暈環纖維蛋白的溶解，因此凡存在血漿凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌，將在培養基中呈現有暈環的黑色菌落，即可確認，并作計數。

三、實驗步驟

材料和方法：

本次實驗采用以下3種試劑：

1.美國3M公司提供的Petrifilm.Rapid.S.aureus Count Plate.2.法國生物~梅里埃公司提供的Baird-Parker + RPF agar.3.實驗室自配Baird-Park瓊脂（英國Oxoid）及新鮮兔血漿。

菌種來自美國菌種保存中心（America TyP Culture Collection）。金黃色葡萄球菌共10株菌株，其菌號分別為：

ATCC 27661 ATCC 27664 ATCC 13565 ATCC 51704

ATCC(K)12600 ATCC(R)65389 ATCC 25923 ATCC 29213

ATCC 8095 ATCC 12598

非金黃色葡萄球菌菌種5株，其菌號分別為：

ATCC 51813（大腸桿菌）、ATCC 624（無乳鏈球菌）、ATCC 51816（陰溝腸桿菌）、ATCC 6051（枯草桿菌）、ATCC 49214（腸炎沙門氏菌）、自然食品檢樣，任意購自市場。本次實驗是以同一測試樣品經均質并通過無菌生理鹽水作10倍遞增稀釋后取1至2個稀釋度同時接種上述三種培養基作平行實驗，在取得最終結果后相互進行比對。

上述三種培養基的接種方法是按生產商所提供的使用說明進行操作，另外Baird-Parker Agar 培養基是按SN0172-92標準進行操作。

A、本次實驗共測試已知標準菌種共15株，其中葡萄球菌10株，其他菌種5株（包括大腸桿菌、陰溝腸桿菌、腸炎沙門氏菌、枯草桿菌和無乳鏈球菌）。

B、測試自然食品檢樣共101只（其中包括肉11只、肉類14只、水產品17只、牛奶25只、蔬菜22只、豆制品12只）。

四、實驗結果：

A、被檢菌種10株，金黃色葡萄球菌在三種培養基上都能檢出生長情況良好，同一稀釋度的菌液，除個別菌株外在3種培養基計數檢測結果基本都在一個數量級上，無顯著差異。而5株非金黃色葡萄球菌的菌株在三種培養基上全部不能生長。

B、自然食品檢樣共接種101只，每一檢樣同一稀釋濃度分別同時種三種培養基，最終共檢出金黃色葡萄球菌45只，占全部檢樣的44.5％，其中Petrifilm RSA 檢出陽性結果為42只，占全部陽性檢樣的93.3％，Baird-Parker＋RPF Agar.檢出陽性結果26只，占全部陽性檢樣的57.7％。Baird-Parker.Agar 檢出陽性結果32只，占全部陽性檢樣的71.1％。

五、實驗討論

1.用15株標準菌在3種培養基中的檢測，10株金黃色葡萄球菌以同一濃度接種，結果生長良好，其最終計數基本一致，定位在同一數量級，5株非金黃色葡萄球菌接種上述三種培養基全部不長，說明上述三種培養基對金黃色葡萄球菌選擇良好。

2.以101只自然樣品同一均質稀釋液，同時接種三種培養基，從最終結果來看，對金黃色

葡萄球菌的陽性檢出率為44.5％

3.從檢測程序來年，Petrifilm.RSA及Baird-Parker＋RPF.Agar.都在樣品接種后28~30h觀察結果，并不必再做證實試驗，而如以Baird-Parker Agar檢測，須在接種后48h觀察平板，并挑取可疑菌落轉種到營養肉湯中，在經18-24h后做血漿凝固酶或耐熱DNA酶試驗進行證實，最終計數，前后約須80h。

4.從本次試驗中觀察，使用上述三種培養基對食品中金黃色葡萄球菌含量的直接計數檢測，其樣品接種液的含量擬控制在100個/ml以內，比較容易分清并計數，如菌量過濃，則將會影響最后的讀數，因此對新送的被檢樣品，如在不了解污染的情況下一般必須要做2個以上的稀釋度，同時分別接種，才能獲得較為滿意的結果。

而在Baird-Parker＋RPF Agar及Baird-Parker.Agar接種時必須將1ml樣液作三只平板涂布（0.3、0.3、0.4ml）這樣就會造成手續繁瑣試劑消耗較大，但Baird-Parker.RPF.培養基也可以1ml樣液作傾注培養，并作計數。

5.在整個測試過程中，我們發現，按使用說明對Petrifilm.RSA.及Barid-Parker＋RPF.Agar，操作規定在接種24h后觀察結果，此時往往由于菌落長得經較小，特征瓜不明顯，但如果繼續放置一夜以后金葡萄菌落特征明顯，并可能會經第一天觀察數量有所增加，這樣可以提高檢測結果的可信度。

6.由于對上述兩種培養基的試用期間我們尚未獲得供應商的報價，故無法測算每一樣品的測試成本價格。但可以予計上述兩面種快速檢測培養基的耗材費用要高于常規經典方法（Baird-Parker Agar）的費用。

7.通過本次實驗，我們感到使用美國3M公司生產的Petrifilm.RSA Plate培養基和法國生物－梅利埃公司生產的Baird-Parker RPF.Agar培養基檢測中的金黃色葡萄球菌。可以比目前常規檢測方法時間可縮短一半。并可以明顯節省大量人力。這完全符合實驗室快速檢測的要求，尤其是對基層較簡陋的實驗室條件中，更顯其使用方便的優越性。

實習總結：通過這次嚴謹而生動的實驗實習，為我們先前在教學中學習到的知道提供了一個實際的操作實施平臺，也為今后在這方面檢驗技術的工作起到了指引作用。在過去的學習中，我們并不了解具體的病原微生物實驗室檢驗技術的具體流程，注意事項等等非常關鍵和必須的防御手段。通過上學期生產實習，使我們對以前所不熟知的問題有了深入的認識，也對目前的情況有所思考和感悟。在我看來，動物檢疫人員在我國國民生活中起到了關鍵作用，民以食為天，沒有認真負責的實驗檢測，將給社會帶來巨大的飲食災難，為此，我感到非常自豪和驕傲。在今后的工作學習中，我將一如既往的認真下去，無愧自己的職責和稱號。

在此感謝我的院各級領導，特別是我的指導老師趙宇軍教授。

2010年7月

第五篇：醫學檢驗實習總結.

醫學檢驗實習總結

自2009年12月22日到xx醫科大學附屬醫院實習以來，實感時間之匆匆，不經意間就到了畢業的時候，六個月的實習生產，鍛煉了我許多，面對走向社會，自己對自己有了更深的了解，自己有信心走向社會。

在大學三年半的理論學習中，深知自己的學習方法有問題，算不上一名合格的學生；自達去年年底走向實習點后，在帶教老師的悉心指點下，自己一步一個腳印，尊敬同事，刻苦鉆研，在不斷的操作中逐漸對理論有了跟深刻的認識，雖然和優秀的畢業生相比，自己還有一定的差距，但和過去比比，確實進步了好多，逐漸熱愛上了醫學，更加喜歡上了醫學檢驗這門學科。

附屬醫院是一所三級甲等醫院，醫學實驗中心除擁有國內先進的檢驗儀器外，更有一直團結向上，嚴謹求實的科研隊伍。在日新月異的科技水平面前，更需要一種永不滿足的求知精神。醫學實驗中心是醫技科室，它在醫院中占有舉足輕重的地位。醫學實驗是疾病診斷的偵察兵，準確的實驗無疑是醫療的保障，這就要求實驗人員有嚴謹的態度，科學的作風。

醫學檢驗人員不僅僅是一名技師，他應更向臨床檢驗醫師方向發展，承擔起報告單的解釋，參與臨床醫生的查房，向醫師提供必要的治療建議，成功地醫治好病人。

醫學實驗中心工作任務繁重，責任大，人員少，無疑實習生有跟多的機會接觸實際操作。自2008年12月22日下實習點后，前前后后共輪轉了十三個臨床實驗室，切切實實體會到了檢驗人員的責任，工作的壓力。

醫學檢驗學的發展與自然科學的發展息息相關。隨著科學技術的不斷發展，醫學檢驗學的內容也逐步深化和拓展，是醫學檢驗學由單一學科發展成為一個擁有臨床檢驗基礎，臨床血液學檢驗，臨床微生物學檢驗，臨床免疫學檢驗，臨床生物化學檢驗，分子診斷學等眾多亞學科的科學。其檢驗技術也日新月異，從定性到定量檢驗，從手工檢驗到自動化分析，從常量標本一次檢驗一個項目到微量標本一次檢驗多個項目，從有創傷檢查到某些無創傷檢查等。目前醫學檢驗學已經成為發展最為迅速，應用高精尖技術最為集中的學科之一，并與其他學科一樣成為臨床醫學中不可缺少的一個分支或學科。

醫學檢驗是一門涉及多專業，多學科的邊緣性學科，是基礎醫學與臨床醫學的橋梁學科，也是臨床醫學在診斷，治療，判斷愈后和預防等方面的實用性學科。現代醫學檢驗學包含了檢驗技術和檢驗項目在臨床上的應用兩方面的內容。其基本任務是運用物理學，化學，生物學，免疫學，自動化檢驗等技術，對人體的血液，體液，排泄物，分泌物和脫落細胞等標本進行實驗室檢查，以獲得病原體，病理變化和臟器功能狀態等資料，為疾病診斷，治療，觀察病情，判斷預后提供依據，并結合病史資料，體格檢查和其他各種輔助診斷資料，進行綜合分析，以達到明確診斷，及時治療和制定預防措施的目的。

醫學檢驗學是技術性很強的學科，除了掌握基本理論和基本知識外，必需熟練掌握各種檢驗技術，做到技術熟練，操作規范，這樣才能為診斷和鑒別診斷疾病提供準確可靠的資料。理論聯系實際，除了掌握基礎醫學和臨床檢驗技能外，應對疾病的發生，發展有充分的了解，卻是掌握檢驗結果在診斷與鑒別診斷中的應用，并運用循證檢驗醫學的觀點篩選檢驗項目，為臨床醫師當好參謀，為病人減輕負擔，變被動檢驗為主動檢驗。并不斷采納具有最佳臨床價值的金標準檢驗項目和檢驗方法，為臨床提供更為有效的信息。由于機體反應不盡相同，疾病的病理生理變化又十分復雜，不斷變化。同時，檢驗方法本身也存在靈敏度和特異度等差異，其檢驗結果也有一定的局限性，這樣可造成不同疾病出現相同檢驗結果或相同疾病出現不同的檢驗結果的現象，對分析病情和診斷疾病造成一定困難。因此，分析檢驗結果時必需結合臨床表現和其他資料，只有綜合分析才能做出符合臨床實際的合理解釋。

醫學檢驗學所進行的工作是一項細致，嚴肅的工作，無論在進行臨床檢驗，還是進行科學研究，都必須由良好的職業道德和工作熱情，力求細致認真，一絲不茍，規范行事，為臨床診斷和科學研究提供有效準確的檢驗結果和資料，決不能因一時的疏忽大意，差錯，造成病人永久的痛苦或死亡。

作為合格的檢驗技師，應能自如地面對不斷變化的機遇與挑戰，不僅要了解和掌握醫學檢2驗學的技術和方法，還要掌握其臨床應用價值，為臨床提供咨詢服務，并積極參與臨床討論，與臨床醫師一起選擇檢驗項目，評價檢驗的價值，共同提高醫學檢驗水平。所以，我們必須積極地投生到我國醫學檢驗的改革和發展中去，認真學習，努力鉆研，不斷進步，為我國醫學檢驗學的發展和進步而貢獻力量。