第一篇：金線蓮組培快繁技術研究

金線蓮組培快繁技術研究

【摘要】目的建立金線蓮快繁體系。方法以莖段為外植體，開展了莖段不同部位、培養基、激素、有機物和活性炭對不定芽增殖、幼苗生長的影響研究，并進行了移栽試驗。結果外植體以不含頂芽和長根的中間段莖節為好；不定芽增殖最佳培養基配方為MS（或B5）+BA3.0 mg/L +NAA0.5～1.0 mg/L，兩個月增殖倍數達5.0以上；壯苗最適培養基為1/2MS＋NAA3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%）；試管苗移栽適宜的基質為菜園土1份＋2～3 mm粗砂2份（或1份）＋木屑1份（或2份），3個月成活率均達100%，且生長良好。結論采用上述方法，能實現金線蓮幼苗的快速繁殖。

【關鍵詞】金線蓮； 快速繁殖； 增殖； 生長； 移栽

金線蓮Anoectochilus roxburghii（wall.）lindl為蘭科開唇蘭屬多年生草本，別名金蠶、金線蘭、金線虎頭蕉等，是我國傳統珍貴藥材，素有“金草”“神藥”“烏人參”等美稱，在民間應用范圍較廣，廣泛應用于風濕性關節炎、高血壓病、糖尿病、腎病等疑難雜癥的治療和強身健體、病后體虛恢復等方面，在浙江、福建、臺灣等省和東南亞地區被視為珍稀名貴藥材，特別在臺灣省更是備受青睞，被稱為“藥中之王”［1，2］。

金線蓮種子微小，由未成熟的胚及數層種皮細胞構成，自然萌發率和繁殖率低，目前市場上貨源主要來自于野生采挖，產品一直處于供不應求的狀況。近年來，隨著對其藥效學和臨床應用研究的深入，對金線蓮藥用價值的認識進一步提高，其市場貨源緊缺的狀況更為嚴峻，野生資源也不斷遭到破壞性采挖，以致于處于瀕臨滅絕之地。本研究旨在采用組織培養技術，解決金線蓮種苗來源，加快人工栽培，以保護金線蓮野生資源、穩定市場供應。現將有關實驗結果如下。

1材料與方法

1.1材料無菌繁殖體系的建立為浙江金線蓮野生種源，其它實驗為繼代培養的不定芽及無根幼苗莖段。

1.2無菌繁殖體系的建立 取生長健壯、無病蟲害的植株，去葉后放入低濃度的洗衣粉水中漂洗3～5 min，然后用流水沖洗30 min。在超靜工作臺前，用75% 酒精濕潤5～6 s，放入0.1%的HgCl溶液滅菌12～13 min，用無菌水沖洗5～6次。將消毒好的莖按上段（具莖尖）、中段和下段（匍匐莖段）切成長約1.5～2 cm，帶有1～2個節間的小段，分別接種于MS+6－BA 4.0 mg/L +NAA 0.4 mg/L 培養基上，pH5.6，蔗糖2.5%，瓊脂0.7%。培養條件為：溫度(25±2）℃，光照時間12 h/d，光照強度1 500～2 000 lx。

1.3不定芽誘導

1.3.1基本培養基對不定芽誘導的影響 采用單因素實驗，培養基選用MS

（Murashige-Skoog）［3］，1/2MS（大量元素減半，其他成分不變），VW(Vacin & Went)，B5（Gamborg·Miller & Ojima）和KC(Knudson C)等5種，分別添加6－BA 4.0mg/L，NAA 1.0 mg/L。

1.3.2激素對不定芽誘導的影響 以MS為基本培養基，添加不同種類及濃度的細胞分裂素和生長素。

上述實驗選取無菌健壯植株，切取長約1～1.5 cm，帶有一個節間的莖中段，每處理接10個莖節，重復3次。培養期間定時觀察不定芽生長情況，培養60 d后統計不定芽數。其它條件同實驗“1.2”項。

1.4壯苗培養

1.4.1激素對幼苗生長和發根的影響 以1/2MS為基本培養基，NAA設1～5 mg/L 5個處理，6－BA設0.5，1.0和1.5 mg/L 3個處理，共15個處理。

1.4.2添加物對幼苗生長和發根的影響以1/2MS＋NAA 2.0 mg/L＋6－BA 0.5 mg/L為基本培養，考察馬鈴薯提取物、香蕉提取物、蘋果提取物、椰子汁等4種天然有機物和活性炭對金線蓮幼苗生長的影響。

上述每種培養基均接入經增殖培養高約3 cm，具3～4節間、有1～2片的無根幼苗，每處理接種接無根幼苗10株，重復3次。培養后每隔15 d觀察生長情況1次，至3個月考察每株凈增加的葉片數、重量及發根數，并進行數理統計分析。

1.5移栽選苗高約6～8 cm，莖基直徑約2 mm，叢生根有2～3條的試管苗，煉苗4 d后，洗凈附著在植株上的培養基，并晾干洗滌水后移人直徑為15 cm，裝有不同基質的土盆中，考察不同基質對金線蓮試管苗成活率的影響。移栽前，實驗基質均用45%多菌靈可濕性粉劑800倍溶液澆透消毒。實驗條件為遮蔭度80%的蔭棚，保持空氣相對濕度的80%～90%。如發現有病死植株，及時拔除。每處理5盆，每盆種5株，重復3次，移栽3個月后考察成活株數，并進行數理統計分析。

2結果

2.1無菌繁殖體系的建立實驗表明，外植體莖段的分化程度對誘導結果存在一定的影響。從表1可知，上、中段莖均能萌動生長。上段莖因有頂芽的存在，頂端優勢表現較為強烈，因而以生長為主，不定芽發生較少，平均芽增殖數為0.6個；中段莖不定芽發生快、量大、長勢好，平均芽增殖數為4.05個，并形成多枝叢生狀。下段莖由于組織相對老化，雖有不定芽發生，但發生量與生長勢均較弱。這和陳自力［4］報道的結果一致。

從實驗中觀察到，不定芽的產生以側芽萌生為主。一般在培養15～20 d后，莖節上潛伏的葉腋芽萌動膨大，芽叢在節的四周萌出，起初為白色略帶黃色，隨著培養時間加長，芽不斷伸展，逐漸轉為黃綠色，形成主芽。葉腋芽是單生的，極個別節上能對生兩個腋芽，未發現莖部或切口處長出不定芽。培養30 d左右，主芽基部的節再生側芽(稱一級側芽)，45 d左右一級側芽節上又可發生二級側芽，隨著芽的生長、出現葉片，節處毛并產生根，外被濃密的白色絨毛，從而形成完整小植株。培養3個月后每天觀察，側芽分生組織的增殖，一般只出現主芽和一二級側芽或苗；培養5個月以上，主芽、側芽較高，葉片較多、大，只有少數出現三級側芽或苗。這種腋芽萌生的增殖形成了主軸分枝型的芽苗，隨培養時間或繼代繁殖代數的增加，或激素的作用，芽或苗因節間短，多數為形成似不定芽或叢生苗。培養過程中，未見愈傷組織，也沒有發現有原球莖和類原球莖產生。

表1金線蓮莖段外植體不定芽誘導（略）

2.2不定芽誘導

2.2.1基本培養基對不定芽誘導的影響 以金線蓮的莖節段作為外植體，腋芽能快速萌發出不定芽體。經60 d的培養，增殖倍數可達3.1～5.4倍。但基本培養基對不定芽的誘導具有明顯的影響，MS，B5培養基不定芽增殖率分別為5.4倍與5.2倍，比其它培養基增加23.8%～74.2%。

表2基本培養基對金線蓮不定芽誘導的影響（略）

經LSR差異顯著性測定，MS，B5培養基之間無明顯差異，與1/2MS，KC和VW之間存在極顯著差異，且MS，B5培養基上誘導產生的不定芽色綠、粗壯（見表2），表明MS，B5培養基適合作為金線蓮莖段不定芽誘導的基本培養基［5］。

2.2.2激素對不定芽誘導的影響激素種類、水平與配比對組織培養快速繁殖在效率存在明顯的影響，6-BA、KT和NAA是3種常用生長調節劑，其添加量對金線蓮不定芽增殖的影響很大。結果見表3。從表3可知，同為細胞分裂素的6-BA，KT在相同的添加量下對不定芽的增殖效果差異極顯著，6-BA比KT的增殖率提高46.0%和55.0%，表明6-BA比KT更適合金線蓮莖節不定芽的誘導。

6-BA的濃度也影響不定芽誘導效果。在添加量小于4.0 mg/L的情況下，隨濃度的提高，不定芽增殖率明顯上升，添加量為4.0 mg/L的不定芽增殖率比2.0，1.0 mg/L分別提高22.1%和47.6%。當6-BA添加量達到6.0 mg/L時，其增殖率還出現下降趨勢，表明本實驗條件下6-BA添加的適宜量為4.0 mg/L。

表3激素對金線蓮不定芽誘導的影響（略）

生長素NAA對金線蓮不定芽的誘導與生長具有明顯的促進作用。從表3可以看出，添加了NAA的培養基不定芽增殖量與生長明顯較不添加的好，芽體粗壯、色濃綠，其中添加0.5 mg/L的表現最好，添加1.0 mg/L的其次，但二者間差異未達到顯著水平；與其它不添加NAA的相比差異達極顯著水平。表明在本試驗條件下NAA適宜添加的量為0.5～1.0 mg/L。

2.3壯苗培養

2.3.1激素對幼苗生長的影響在金線蓮壯苗培養中，NAA較6-BA對促進幼苗生長的影響更為明顯。結果見表4。NAA濃度低于3 mg/L時，對幼苗生長有促進作用，隨濃度的增加，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量明顯增加，當濃度達到4.0 mg/L時，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量增加不明顯。6-BA在0.5 mg/L情況下，比不加的具有一定的促進作用，但未達顯著水平；在濃度為1.0 mg/L，1.5 mg/L情況下，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量反而減少，但在幼苗基部觀察到叢生狀不定芽的產生，表明6-BA在濃度高于1.0 mg/L情況下，有利于金線蓮不定芽的生成，對幼苗生長不利。

從表4也可以看出，處理9、10號在發根數、鮮生凈增量方面較其它處理明顯提高，達極顯著差異；在葉片凈增量方面，除與處理13、14號無明顯差異外，與其它處理之間的差異達極顯著水平，表明在金線蓮壯苗培養中，NAA適宜添加的量為3.0～4.0 mg/L，6-BA 添加量為0.5 mg/L或不加。

表4激素對金線蓮幼苗生長的影響（略）

2.3.2活性炭與有機添加物對幼苗生長的影響結果見表5。從表5可知，不同的添加物對金線蓮幼苗生長的影響表現不一，香蕉、椰子汁對促進幼苗生長最為有利，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量均高于其它處理，二者間無明顯差異；馬鈴薯對幼苗生長不利，與其它處理相比均存在極顯著差異水平。活性炭對金線蓮幼苗生長具有一定的促進作用，在添加0.3%情況下，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量與對照相比均顯著提高，差異達極顯著水平；但與香蕉、椰子汁處理相比，其促進幼苗生長的作用不如前二者，除發根數無差異外，葉凈增量與香蕉、椰子汁處理差異達顯著水平，鮮重凈增量差異達極顯著水平。同時觀察到活性炭、香蕉和椰子汁新發根潔白、粗壯。試驗結果表明添加20%香蕉和椰子汁最適宜金線蓮幼苗的生長。

表5添加物對金線蓮幼苗生長的影響（略）

2.4移栽金線蓮試管苗移栽3個月后的植株成活情況見表6。從表6中可以看出，處理7和處理9保持100%的成活率，處理3和處理8的植株成活率也在93%以上，處理1的成活率最低，僅為56%。經LSR差異顯著性測定，處理3、7、8、9號之間無明顯差異，與處理5、6號差異達顯著水平、與處理1、2、4號差異達極顯著水平。表明在菜園土中加

入粗砂、木屑能明顯提高金線蓮試管苗移栽的成活率，適宜添加的比例為1份菜園土中加入粗砂2份、木屑1份或粗砂1份、木屑2份，要求充分混勻。

表6種植基質對金線蓮試管苗移栽成活率的影響（略）

3小結

金線蓮不同部位的莖間對不定芽的誘導結果存在明顯的差異，以不含頂芽和長根的中間段莖節為好，不定芽增殖率達4倍以上。

采用金線蓮中間莖節作外植體誘導不定芽萌發時，適宜的培養基為MS或B5＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L～1.0 mg/L，蔗糖濃度為2.5%。

適宜的壯苗培養基為1/2MS＋NAA 3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%），蔗糖濃度為3.0%。3.4 試管苗在充分混勻的1份菜園土＋2份粗砂（2～3 mm）＋1份木屑，或1份菜園土＋粗砂1份＋木屑2份的基質中生長良好，3個月后成活率達100%。

【參考文獻】

［1］ 鐘岑生.金線蓮的藥用價值與開發［J］.廣西農業科學,1997,34(2):102.［2］ 許文江,陳 裕，林坤瑞.藥用野生金線蓮植物資源的研究［J］.福建熱作科技, 2000,25(4):9.［3］ 吳殿星，胡繁榮.植物組織培養［M］.上海:上海交通大學出版社,2004:20.［4］ 陳自力.花葉開唇蘭組織培養快速繁殖的研究［J］.林業勘察設計, 2003,23(2):46.［5］ 高 燕,白燕冰,趙云翔.金線蓮組織培養幾種培養基的篩選［J］.熱帶農業科技, 2004,27(3):12.

第二篇：金線蓮組培

金線蓮組培

摘要 目的建立金線蓮快繁體系。方法以莖段為外植體，開展了莖段不同部位、培養基、激素、有機物和活性炭對不定芽增殖、幼苗生長的影響研究，并進行了移栽試驗。結果外植體以不含頂芽和長根的中間段莖節為好；不定芽增殖最佳培養基配方為MS（或B5）+BA3.0 mg/L +NAA0.5～1.0 mg/L，兩個月增殖倍數達5.0以上；壯苗最適培養基為1/2MS＋NAA3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%）；試管苗移栽適宜的基質為菜園土1份＋2～3 mm粗砂2份（或1份）＋木屑1份（或2份），3個月成活率均達100%，且生長良好。結論采用上述方法，能實現金線蓮幼苗的快速繁殖。【關鍵詞】金線蓮； 快速繁殖； 增殖； 生長； 移栽

金線蓮Anoectochilus roxburghii（wall.）lindl為蘭科開唇蘭屬多年生草本，別名金蠶、金線蘭、金線虎頭蕉等，是我國傳統珍貴藥材，素有“金草”“神藥”“烏人參”等美稱，在民間應用范圍較廣，廣泛應用于風濕性關節炎、高血壓病、糖尿病、腎病等疑難雜癥的治療和強身健體、病后體虛恢復等方面，在浙江、福建、臺灣等省和東南亞地區被視為珍稀名貴藥材，特別在臺灣省更是備受青睞，被稱為“藥中之王”［1，2］。

金線蓮種子微小，由未成熟的胚及數層種皮細胞構成，自然萌發率和繁殖率低，目前市場上貨源主要來自于野生采挖，產品一直處于供不應求的狀況。近年來，隨著對其藥效學和臨床應用研究的深入，對金線蓮藥用價值的認識進一步提高，其市場貨源緊缺的狀況更為嚴峻，野生資源也不斷遭到破壞性采挖，以致于處于瀕臨滅絕之地。本研究旨在采用組織培養技術，解決金線蓮種苗來源，加快人工栽培，以保護金線蓮野生資源、穩定市場供應。現將有關實驗結果如下。

1材料與方法

1.1材料無菌繁殖體系的建立為浙江金線蓮野生種源，其它實驗為繼代培養的不定芽及無根幼苗莖段。

1.2無菌繁殖體系的建立 取生長健壯、無病蟲害的植株，去葉后放入低濃度的洗衣粉水中漂洗3～5 min，然后用流水沖洗30 min。在超靜工作臺前，用75% 酒精濕潤5～6 s，放入0.1%的HgCl溶液滅菌12～13 min，用無菌水沖洗5～6次。將消毒好的莖按上段（具莖尖）、中段和下段（匍匐莖段）切成長約1.5～2 cm，帶有1～2個節間的小段，分別接種于MS+6－BA 4.0 mg/L +NAA 0.4 mg/L 培養基上，pH5.6，蔗糖2.5%，瓊脂0.7%。培養條件為：溫度(25±2）℃，光照時間12 h/d，光照強度1 500～2 000 lx。

1.3不定芽誘導

1.3.1基本培養基對不定芽誘導的影響 采用單因素實驗，培養基選用MS（Murashige-Skoog）［3］，1/2MS（大量元素減半，其他成分不變），VW(Vacin & Went)，B5（Gamborg·Miller & Ojima）和KC(Knudson

C)等5種，分別添加6－BA 4.0mg/L，NAA 1.0 mg/L。

1.3.2激素對不定芽誘導的影響 以MS為基本培養基，添加不同種類及濃度的細胞分裂素和生長素。

上述實驗選取無菌健壯植株，切取長約1～1.5 cm，帶有一個節間的莖中段，每處理接10個莖節，重復3次。培養期間定時觀察不定芽生長情況，培養60 d后統計不定芽數。其它條件同實驗“1.2”項。

1.4壯苗培養

1.4.1激素對幼苗生長和發根的影響 以1/2MS為基本培養基，NAA設1～5 mg/L 5個處理，6－BA設0.5，1.0和1.5 mg/L 3個處理，共15個處理。

1.4.2添加物對幼苗生長和發根的影響以1/2MS＋NAA 2.0 mg/L＋6－BA 0.5 mg/L為基本培養，考察馬鈴薯提取物、香蕉提取物、蘋果提取物、椰子汁等4種天然有機物和活性炭對金線蓮幼苗生長的影響。

上述每種培養基均接入經增殖培養高約3 cm，具3～4節間、有1～2片的無根幼苗，每處理接種接無根幼苗10株，重復3次。培養后每隔15 d觀察生長情況1次，至3個月考察每株凈增加的葉片數、重量及發根數，并進行數理統計分析。

1.5移栽選苗高約6～8 cm，莖基直徑約2 mm，叢生根有2～3條的試管苗，煉苗4 d后，洗凈附著在植株上的培養基，并晾干洗滌水后移人直徑為15 cm，裝有不同基質的土盆中，考察不同基質對金線蓮試管苗成活率的影響。移栽前，實驗基質均用45%多菌靈可濕性粉劑800倍溶液澆透消毒。實驗條件為遮蔭度80%的蔭棚，保持空氣相對濕度的80%～90%。如發現有病死植株，及時拔除。每處理5盆，每盆種5株，重復3次，移栽3個月后考察成活株數，并進行數理統計分析。

2結果

2.1無菌繁殖體系的建立實驗表明，外植體莖段的分化程度對誘導結果存在一定的影響。從表1可知，上、中段莖均能萌動生長。上段莖因有頂芽的存在，頂端優勢表現較為強烈，因而以生長為主，不定芽發生較少，平均芽增殖數為0.6個；中段莖不定芽發生快、量大、長勢好，平均芽增殖數為4.05個，并形成多枝叢生狀。下段莖由于組織相對老化，雖有不定芽發生，但發生量與生長勢均較弱。這和陳自力［4］報道的結果一致。

從實驗中觀察到，不定芽的產生以側芽萌生為主。一般在培養15～20 d后，莖節上潛伏的葉腋芽萌動膨大，芽叢在節的四周萌出，起初為白色略帶黃色，隨著培養時間加長，芽不斷伸展，逐漸轉為黃綠色，形成主芽。葉腋芽是單生的，極個別節上能對生兩個腋芽，未發現莖部或切口處長出不定芽。培養30 d左右，主芽基部的節再生側芽(稱一級側芽)，45 d左右一級側芽節上又可發生二級側芽，隨著芽的生長、出現葉片，節處毛并產生根，外被濃密的白色絨毛，從而形成完整小植株。培養3個月后每天觀察，側芽分生組織的增殖，一般只出現主芽和一二級側芽或苗；培養5個月以上，主芽、側芽較高，葉片較多、大，只有少數出現三級側芽或苗。這種腋芽萌生的增殖形成了主軸分枝型的芽苗，隨培養時間或繼代繁殖代數的增加，或激素的作用，芽或苗因節間短，多數為形成似不定芽或叢生苗。培養過程中，未見愈傷組織，也沒有發現有原球莖和類原球莖產生。

表1金線蓮莖段外植體不定芽誘導（略）

2.2不定芽誘導

2.2.1基本培養基對不定芽誘導的影響 以金線蓮的莖節段作為外植體，腋芽能快速萌發出不定芽體。經60 d的培養，增殖倍數可達3.1～5.4倍。但基本培養基對不定芽的誘導具有明顯的影響，MS，B5培養基不定芽增殖率分別為5.4倍與5.2倍，比其它培養基增加23.8%～74.2%。

表2基本培養基對金線蓮不定芽誘導的影響（略）

經LSR差異顯著性測定，MS，B5培養基之間無明顯差異，與1/2MS，KC和VW之間存在極顯著差異，且MS，B5培養基上誘導產生的不定芽色綠、粗壯（見表2），表明MS，B5培養基適合作為金線蓮莖段不定芽誘導的基本培養基［5］。

2.2.2激素對不定芽誘導的影響激素種類、水平與配比對組織培養快速繁殖在效率存在明顯的影響，6-BA、KT和NAA是3種常用生長調節劑，其添加量對金線蓮不定芽增殖的影響很大。結果見表3。從表3可知，同為細胞分裂素的6-BA，KT在相同的添加量下對不定芽的增殖效果差異極顯著，6-BA比KT的增殖率提高46.0%和55.0%，表明6-BA比KT更適合金線蓮莖節不定芽的誘導。

6-BA的濃度也影響不定芽誘導效果。在添加量小于4.0 mg/L的情況下，隨濃度的提高，不定芽增殖率明顯上升，添加量為4.0 mg/L的不定芽增殖率比2.0，1.0 mg/L分別提高22.1%和47.6%。當6-BA添加量達到6.0 mg/L時，其增殖率還出現下降趨勢，表明本實驗條件下6-BA添加的適宜量為4.0 mg/L。

表3激素對金線蓮不定芽誘導的影響（略）

生長素NAA對金線蓮不定芽的誘導與生長具有明顯的促進作用。從表3可以看出，添加了NAA的培養基不定芽增殖量與生長明顯較不添加的好，芽體粗壯、色濃綠，其中添加0.5 mg/L的表現最好，添加1.0 mg/L的其次，但二者間差異未達到顯著水平；與其它不添加NAA的相比差異達極顯著水平。表明在本試驗條件下NAA適宜添加的量為0.5～1.0 mg/L。

2.3壯苗培養

2.3.1激素對幼苗生長的影響在金線蓮壯苗培養中，NAA較6-BA對促進幼苗生長的影響更為明顯。結果見表4。NAA濃度低于3 mg/L時，對幼苗生長有促進作用，隨濃度的增加，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量明顯增加，當濃度達到4.0 mg/L時，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量增加不明顯。6-BA在0.5 mg/L情況下，比不加的具有一定的促進作用，但未達顯著水平；在濃度為1.0 mg/L，1.5 mg/L情況下，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量反而減少，但在幼苗基部觀察到叢生狀不定芽的產生，表明6-BA在濃度高于1.0 mg/L情況下，有利于金線蓮不定芽的生成，對幼苗生長不利。

從表4也可以看出，處理9、10號在發根數、鮮生凈增量方面較其它處理明顯提高，達極顯著差異；在葉片凈增量方面，除與處理13、14號無明顯差異外，與其它處理之間的差異達極顯著水平，表明在金線蓮壯苗培養中，NAA適宜添加的量為3.0～4.0 mg/L，6-BA 添加量為0.5 mg/L或不加。

表4激素對金線蓮幼苗生長的影響（略）

2.3.2活性炭與有機添加物對幼苗生長的影響結果見表5。從表5可知，不同的添加物對金線蓮幼苗生長的影響表現不一，香蕉、椰子汁對促進幼苗生長最為有利，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量均高于其它處理，二者間無明顯差異；馬鈴薯對幼苗生長不利，與其它處理相比均存在極顯著差異水平。活性炭對金線蓮幼苗生長具有一定的促進作用，在添加0.3%情況下，葉片凈增量、發根數和鮮重凈增量與對照相比均顯著提高，差異達極顯著水平；但與香蕉、椰子汁處理相比，其促進幼苗生長的作用不如前二者，除發根數無差異外，葉凈增量與香蕉、椰子汁處理差異達顯著水平，鮮重凈增量差異達極顯著水平。同時觀察到活性炭、香蕉和椰子汁新發根潔白、粗壯。試驗結果表明添加20%香蕉和椰子汁最適宜金線蓮幼苗的生長。

表5添加物對金線蓮幼苗生長的影響（略）

2.4移栽金線蓮試管苗移栽3個月后的植株成活情況見表6。從表6中可以看出，處理7和處理9保持100%的成活率，處理3和處理8的植株成活率也在93%以上，處理1的成活率最低，僅為56%。經LSR差異顯著性測定，處理3、7、8、9號之間無明顯差異，與處理5、6號差異達顯著水平、與處理1、2、4號差異達極顯著水平。表明在菜園土中加入粗砂、木屑能明顯提高金線蓮試管苗移栽的成活率，適宜添加的比例為1份菜園土中加入粗砂2份、木屑1份或粗砂1份、木屑2份，要求充分混勻。

表6種植基質對金線蓮試管苗移栽成活率的影響（略）

3小結

金線蓮不同部位的莖間對不定芽的誘導結果存在明顯的差異，以不含頂芽和長根的中間段莖節為好，不定芽增殖率達4倍以上。

采用金線蓮中間莖節作外植體誘導不定芽萌發時，適宜的培養基為MS或B5＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L～1.0 mg/L，蔗糖濃度為2.5%。

適宜的壯苗培養基為1/2MS＋NAA 3.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋香蕉提取物20%（或椰子汁20%），蔗糖濃度為3.0%。3.4 試管苗在充分混勻的1份菜園土＋2份粗砂（2～3 mm）＋1份木屑，或1份菜園土＋粗砂1份＋木屑2份的基質中生長良好，3個月后成活率達100%。

【參考文獻】

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第三篇：金線蓮

人工培植金線蓮方式

因金線連分布于海拔500-1500公尺的闊葉林床，且生長緩慢，所以在栽培中溫度、濕度，是成功與否的重要因素。

1、溫度

金線連之發育、生長、開花與結果都有一定的溫度。在金線連栽培環境中，溫度的影響甚巨，溫度過低則生長緩慢(9)，高于30℃或低于15℃則不利于生長，若低于10℃，須加設施保溫，適宜的栽培溫度為20 ~ 25℃，栽培場所溫度過高時，可利用遮陰、澆水、加強通風或以蒸發冷卻方式如噴霧或使用水墻等方法以將溫度降下來。

2、濕度 空氣濕度高有住于生長并提高植株鮮重，但栽培介質不能過濕，過濕易導致莖腐病，特別在高溫(28-32℃)、高濕下，容易有鐮刀菌感染進而發生猝倒病，這是平地夏天不能栽培成功的主要原因。莖腐病(stem rot)之病源菌為Fusarium oxysporum，基腐病(basal rot)為Pythiumultimum，目前以莖腐病發生最為嚴重，占病害發生之 90%(8)。

3、光度

金線連屬于陰性植物，原生于森林內樹下半遮陰的地方，因此適合金線連栽培的光度，約為正常日光量的1/3，最忌夏秋中午左右之直射陽光，此將引起日灼損傷葉片，一般而言，若光度高于5000lux 則會使新生葉片白化，低于 1000lux將使植株纖細徒長，一般栽培時可利用75%遮光網雙層控制在4000lux 左右，如此除了具有遮陰效果外，也利于濕度的保存及通風。海拔1000公尺左右的地區栽培金線連，由于溫度適宜，因此夏天的生產量幾乎是平地的兩倍，惟冬天來螳劦釭`意寒害的發生，保溫設施中尤以隧道式陰棚較易保溫，平地栽培場若亦須采用此方式栽培，應將陰棚架高一些，以利于通風。

4、栽培介質

金線連屬地生蘭又是藥用植物，所以必須使用清潔及適宜的栽培介質栽培，適宜的介質除了須具備有良好的透氣性外尚須有良好的保水性，目前所使用的介質包括有蛇目屑、碳化稻殼、蛭石、真珠石、腐葉土及水苔等，栽培中依不同的介質混合比例，來調整介質的通氣性及保水性，苗株剛由瓶苗移出時最好以2號蛭石栽植，因蛭石系經高溫處理，吸水及透氣性均佳，且富含鎂及鉀離子，具蓄積養份之能力，可降低無菌狀態移出的苗株遭受病菌為害的機會，并可助于瓶苗適應環境變化的機會，金線連須水而不宜積水，澆水量及次數將會隨著植株的發育狀況及生長環境而須調整，介質中的肥料以緩效性的有機肥為主。

5、繁殖方式

在組織培養尚未被應用在金線連上時，傳統的繁殖方法為分株、扦插、種子播種，其中因為種子收獲不易及播種的發芽率低，所以以往大都以分株及扦插的方式繁殖，然而因易受環境的影響，此方式的存活率約為30 ~ 70 %(9)，金線連生長緩慢，以種子播種繁殖而言，必須兩年以后才能利用，現在利用莖段培養可以提早采收，而采收適期的決定仍然和栽培時間的長短有密切的關系，至少必須在出瓶栽培十個月(定植后8個月)采收較適宜。

我公司經多年的探索研究，在無菌播種繁殖金線蓮方面取得成功，現已形成年產優質種苗10萬瓶的規模，為我省人工種殖金線蓮打下了很好的基礎。

6、種殖基礎的選址：根據金線蓮生長特性，適宜選擇在無工業污染環境，有天然潔凈無污染水源，方便噴灌．靠山邊陰面處建立生產產地。

7、金線蓮種殖管理；金線蓮生長速度慢，每個月僅長出１－２葉片，還要不斷人工噴灌保持一定濕度，通氣等條件。一般每隔一定時間澆灌一次，適量施肥和抗病農藥保持金線蓮的生長要求。目前，我公司已摸索出一整套人工種殖金線蓮的生產管理經驗。在氣候條件適宜的地區，當年種殖，當年就可采收。

種植金線蓮時，通常用腐殖土作為基質。種植前，應將金線蓮苗從瓶子里取出，然后用清水把苗上的培養基清洗干，再把苗上的水滴晾干，但時間不可過長，否則令苗脫水就不好了。之后便可進行種植了。

人工栽培金線蓮主要是采用大棚栽培。建造大棚應根據金線蓮的生長要求，選擇在有林有水的山溝，以保證陰涼，有水灌溉，冬季避風保暖，減少散熱，保持濕度，且交通便利；大棚的透光度在40％～50％，大棚結構以北高南低的斜面為宜，棚前柱高1.5米，后柱高1.2米，柱距2～5米；頂鋪約5厘米厚的茅草，上蓋一層塑料薄膜，棚內畦高30～50厘米，畦寬1.2米；也可在棚內搭棚梁，進行立體種植；人工組培苗常年均可栽植，每平方米500～1000株，栽植宜淺忌深，栽后覆蓋干凈干燥的苔蘚，噴灑清水，棚內溫度不超過25℃，并注意保濕、保溫。云南省和廣東均可供應大面積生產所需的組培苗。

田間管理的好壞，關系到金線蓮的成活率、生長及產量，應著重做好以下工作：

①松土除草

②施肥 栽植后的生長階段，通常施用豆餅、豬糞、牛馬糞等農家肥，并在每100千克肥液中加少量的硫酸亞鐵，以促進葉色濃綠而富有光澤；在生長季節，每隔半個月還可用0.3％尿素加 0.2％磷酸二氫鉀溶液噴一次，連噴4次；施肥時切忌污染金線蓮葉片，不慎污染，應立即噴清水。

③澆水 適時澆水，提高土壤、空氣濕度。④搭蓋遮陰棚，調節透光度 棚內透光度的大小與生長發育密切相關，透光以三陽七陰為宜；早春棚上蓋草宜稀；4月份透光度可減少到30以下；10月以后可把大棚蓋草適當除去部分；

直射光照時間較長或西曬處，可采用圍籬、遮陽網等減少透光度。

金線蓮栽植后生長4～5個月，株高10厘米以上，5～6片葉，鮮重1～2克即可收獲。收獲時連根拔起（也可割莖留根再生），抖去泥土，置于陽光下曝曬或用火烘干即成干品。人工栽培的金線蓮一般畝產鮮草250～350千克，鮮草每千克售價150元左右，金線蓮是一種值得發展的經濟植物。

金線蓮別名金線蘭、金絲草，為蘭科開唇植物花葉蘭屬多年生珍稀中草藥。它在民間使用范圍較廣，素有“藥王”、“金草”、“神藥”、“烏人參”等美稱。經有關部門測定，金絲蓮中氨基酸組成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于國產和野生西洋參。目前，我國對金線蓮的藥用研究僅涉及文獻考證、栽培、組培及商品調查等。

金線蓮全草均可入藥，其味平、甘，有清熱涼血、祛風利濕、解毒、止痛、鎮咳等功效，主治咯血、支氣管炎、腎炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、風濕性關節炎腫瘤等疑難病癥。金線蓮屬植物有30多種，一般分布在海拔300～1200米的丘陵地，我國福建、廣東、廣西、海南、四川、貴州、云南均有野生金線蓮。它性喜陰涼、潮濕，尤其喜歡生長在有常綠闊葉樹木的溝邊、石壁、土質松散的潮濕地帶，要求溫度18℃～20℃，光照約為正常日照的1/3，最忌陽光直射。其株高8～20厘米，根莖細軟，莖圓筒形，先端直立，基部成匍匐狀，莖節明顯；葉互生具柄，呈橢圓形，葉面有光澤、墨綠色中有金黃脈網，葉背淡紫紅色；花為完全花，總狀花序具有1～6朵松散的花，花序梗長8～13厘米，被柔毛，花苞片淡紫色，卵狀披針形。金線蓮除藥用外，還是一種極具觀賞價值的室內觀葉珍品。由于其對生態環境要求嚴格，加之近年自然環境遭受嚴重破壞，野生金線蓮越來越少，因而商品價格居高不下，鮮草千克價達150元以上，干草千克價達1200～1700元。因此，國內有關單位經過研究實踐，自前人工栽培技術已進入推廣階段。

金線蓮鮮品是很容易識別的，金線蓮是草本植物,高一般在6--8CM，根莖較細，節明顯，有幾片長約4CM的葉子,比較有特點的是墨綠色葉頁面上有金黃色網狀脈，在陽光下會閃閃發光，故稱金線蓮.背面紫紅色，主脈3~7條總狀花序頂生，花序軸被柔毛，萼片淡紫色。氣微，味淡。

現在市面上有一種人工種植的金線蓮,圖片如下,主要特點就是葉子比較綠,背面是偏向粉紅色.根莖較粗.而且頁面的線呈銀白色。

一、金線蓮概況

1、金線蓮成份：金線蓮是蘭科開唇蘭屬，學名；花葉開唇蘭。金線蓮全草成份：含強心甙、留醇、多糖等。

2、金線蓮藥效：幾百年來長作為民間用藥，在民間傳說具有治療白病之功效，素有“藥王”美稱。臺灣醫學專家，將金線蓮用于治療乳癌（MCF-7）起到很好的效果<<福建藥物志>>記載其性平，甘，具有清熱，涼血，怯風濕。

主治：支氣管炎、腎炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、風濕性關節炎、急慢性肝病、降血壓、小兒急驚風等疑難雜癥。

3、金線蓮市場狀況：金線蓮同樣存在伴生，共生菌，目前國內有性繁殖還未取突破性進展，各研究機構都采用組織培育試管苗，應用在實際生產中容易造成醉倒病等抗性能力差，所以至今都無法形成規模化生產。近年來由于天然林受到人為破壞及人為大量采集，該物種呈枯絕狀態價格直線上升，市場價500元--600元公斤。

二、金線蓮的生長特性

野生金線蓮一般產于廣東、廣西、福建、云南、四川、貴州等，日本，斯里蘭卡，印度，尼泊爾也有分布。金線蓮通常是長在林下潮濕溝邊地帶，最佳適宜生產溫度18-33c，對光照要求不高，喜陰涼，通氣性好土壤腐質肥厚地帶。

三、人工培植金線蓮方式

1、選址：根據金線蓮生長特性，適宜選擇在無工業污染環境，有天然潔凈無污染水源，方便噴灌．靠山邊陰面處建立生產產地。

2、人工繁殖方式：采用人工搭建遮陰柵，取到夏天高溫防護，一般在遮陰柵內夏天溫度可以，保持在３４c以下這個溫度是適合金線蓮生長的，生產上培植金線蓮采用無性繁殖方法，其增值速度和擴蘩量一般為３－５倍，生長周期１１個月可采收鮮草（金線蓮）。初次培植，種苗采用各地收購來鮮草金線蓮做為種苗培植，第二年再次培植可自供種苗。在遮陰柵內可采用多層式（３－５層）培植，提高土地利用面積。

3、金線蓮管理；金線蓮生長速度慢，每個月僅長出１－２葉片，還要不斷人工噴灌保持一定濕度，通氣等條件。一般每隔一定時間澆灌一次，適量施肥和抗病農藥保持金線蓮的生長要求。

四、投資金線蓮培植效益，分析預算

1、簡易式：采用簡易式木制結構，１畝地。層式可利用培植面積１０００平方米，畝產量可達６００＼市斤鮮草金線蓮。第一年所需成本７萬元，產值１０萬元，當年可回收成本并營利成本的３０％。第二年成本３萬元，產值１０萬元，獲利７－８萬元，今后每年和第二年一樣。隨著規模不斷的擴大效益同樣成倍增長。

2、永久性：采用永久性鐵架式，成本更高，但使用時間長。第一年約高出簡易木制結構成本２－３倍，第二年獲利成本和簡易木制結構相同。

五、金線蓮發展方向

隨著生產技術不斷發展成熟，和品種的優化，今后在培植金線蓮可交給農戶來完成，公司＋農戶模式，把精力重點轉移到金線蓮的深加工方面上來，公司僅派出技術員分片指導種植金線蓮簽定金線蓮訂單回收鮮草，注重培育專業戶等方式，在深加工上注重開發保健型飲料，治療型膠囊等深加工產品。

珍貴藥材,別名金蠶、金線蘭、金石松、金線虎頭蕉、金線入骨消等,為蘭科開唇蘭屬多年生草本植物。在民

間素有“藥王”、“金草”、“神藥”、“烏人參”等美稱。金

線蓮還是花、葉觀賞價值極高的珍品,其株型小巧,葉型優美,葉脈金黃色、呈網狀排列。因此,金線蓮具有 廣闊的開發利用前景。1 藥用價值

金線蓮全草入藥,在民間常用于治療肺病、肝炎、腎炎、風濕性關節炎、糖尿病、高血壓及神經衰弱,外用 可治腫傷、創傷及毒蛇咬傷。近年來,金線蓮在治療高血壓、糖尿病及腫瘤方面,日益引起醫學界的重視。

現代分析研究表明金線蓮是一種滋補強壯藥,含有種類齊全的維生素和較高的多糖,其微量元素含量、氨基酸含量以及8 種人體必需氨基酸含量均高于國產西洋參和野生參[1 ,2]。日本山田博士報道發現了金線蓮的抗菌體,具有抗菌和抗癌的神奇功效,尤其是對肺部細胞的效果更為顯著。我國的研究者也發現金線蓮具有強心甙成分[3] 以及起鎮痛作用的生物堿[4] ,為金 線蓮強心和止痛功效提供了依據;陳卓等證實了金線蓮的降血糖作用[5] ,表明金線蓮的降血糖成分主要存在于水提物中[6];動物實驗還表明,野生、栽培、組培 的金線蓮均有明顯的安定、鎮痛及抗炎作用,進一步驗證了金線蓮的臨床療效[7]。2 生物學特性和資源分布 金線蓮為陸生蘭、多年生草本植物,株高4～18 cm , 根莖細軟,莖圓筒形,頂端直立基部成匍匐狀,莖節明顯,節上長有不定根;葉互生,葉柄基部呈鞘狀,葉片卵形或圓卵形,長1.5～3.5 cm、寬1～3 cm, 頂端急尖,基部近圓形,葉面黑紫色、有金黃色的網脈,葉背淡紫紅色;總狀花序,花序梗長8～13 cm, 具2～6 朵松散的花,花為完全花[8 ,9]。金線蓮的花期在不同地區 有所差異,在福建一般為9 月中旬至11 月上旬[10] ,在廣東東莞為10 月上旬至12 月上旬。金線蓮主要分布于亞洲的日本、中國、斯里蘭卡、印度和尼泊爾等國,在我國主要分布于亞熱帶地區,即臺灣、福建、浙江、江西、廣東、廣西、海南、云南、四川、貴州、西藏等省區,其中以臺灣、福建、浙江、江西為主產地[8]。

金線蓮屬陰性植物,性喜溫涼潮濕環境。正常功能葉的光飽和點為5 000 lx , 光補償點為400 lx[10]。金線蓮常生長在人跡較為稀少、群落結構完整的亞熱帶常綠闊葉林、針闊混交林或竹林下的枯枝落葉層上 或陰濕石頭間的腐質土上[ 11 ]。陳裕等調查發現,金線蓮在海拔300～1 200 m 均有分布,最適宜的生長環境是植被覆蓋較好、喬木層主要建群種為殼斗科、郁閉度 60 %～80 %、林內涼爽、土壤腐殖質較多、相對濕度大的小環境,尤其喜生長于山澗常綠闊葉林下枯枝落葉層、溝邊、巖縫、石壁、樹兜等陰濕處[ 12 ]。

金線蓮種子微小、發芽率很低,其生長對生態環境

要求嚴格,自然繁殖和生長緩慢,野生金線蓮資源非常

稀少;加上鳥獸喜食和人為采摘,以及近年來山地開

發,生態資源破壞,野生金線蓮數量銳減,現已瀕絕。因此為了保護和利用金線蓮這一珍貴藥用植物資源, 發展金線蓮的人工栽培勢在必行。3 栽培技術 3.1 繁殖方法

金線蓮的繁殖方法有種子繁殖、扦插繁殖和組培繁殖。金線蓮的種子微小,由未成熟胚及數層種皮細胞組成,一般不易發芽;采用扦插法的繁殖系數低,難以形成規模種植[13] ,因此生產上一般都是采用組培繁殖。目前金線蓮的組培繁殖已是一項非常成熟的技術,東莞市植物園和東莞市生物技術研究所都可提供大量的組培苗。3.2 煉苗移栽移栽前,把瓶蓋苗揭開置于栽植棚內煉苗1～2 周,或采用三步煉苗法煉苗:將未揭蓋的瓶苗置于棚內一段時間,然后松蓋煉苗幾天,最后揭蓋再煉苗3～5 天,效果更好13 ]。待組培苗莖由白色轉為綠色時,洗凈瓊脂培養基,用多菌靈400 倍消毒10 min, 按苗重、大小分級后,選壯苗(株高大于3 cm, 莖轉綠挺拔不披軟根2 條以上)直接定植。苗勢較弱的最好在室內用

干凈河沙先疾15 天左右,待其充分發根、莖生長粗壯后再移植于室外,可明顯提高成活率[14 ]。移栽要選擇陰涼天氣或涼爽的傍晚進行,夏季高溫高濕條件下

不宜移栽。何云芳等的研究結果表明,移栽期以9 月份最理想[ 13 ]。

金線蓮的栽培皇要求疏松、透氣、無菌、排水和保水性能良好,如苔蘚、椰糠、泥炭土、炭化稻殼、腐殖土、河沙等,也可幾種皇按一定比例混合以改善皇的通氣透水性能。我們用4 份泥炭土、2 份椰糠、4 份蛭石配制的混合皇種植效果較好。此外,1 份蛭石+1 份腐殖土[ 14 ]、5 份蛇木屑+1 份蛭石、3 份蛇木屑+1 份腐殖土+1 份炭化稻殼也是較好的栽培皇。植前皇要用多菌靈400 倍或托布津600 倍消毒[15 ]。種植時植株插入皇內1～2 個節,每m2 植300～500 株,植后淋透水。3.3 栽培環境

模擬原產地環境是金線蓮栽培成敗關鍵之一。人工栽培金線蓮主要是采用大棚栽培,也可在林蔭下栽培。地點最好選擇在有林有水的山溝,以保證陰涼和

灌溉。大棚栽培要注意通風透氣,調節好溫濕度和光照強度, 適宜的溫度、濕度、光照強度分別為20 ～ 25 ℃、76 %～85 %、2 600～3 800 lx[15] ,冬季覆膜保溫, 夏季噴霧或水簾降溫,遮陽網透光度為30 %左右。

3.4 肥水管理

施肥以遲效性有機肥為主,如豆餅、豬糞、牛馬糞

等農家肥。有機肥經漚制發酵、充分腐熟后兌水施用, 施后立即噴水清洗莖葉,以保持莖葉干凈。此外,還可配合葉面施肥,用0.3 % 尿素加0.2 % 磷酸二氫鉀溶液噴施。黃德貴等[ 15 用高效稀土1 600 倍液噴施,取得了顯著的增產效果。移栽后1 個月左右開始施肥:葉面施肥每月噴1 次,噴至葉面滴水為止;有機肥可2 個月施1 次,每667 m2 施50 kg 左右。金線蓮植株含水量高達80 %, 因此從移植至采收都要注意保持皇濕潤[ 16 ]。澆水施肥次數還與皇有關,如河沙保水保肥力弱,應少量多次施用,而椰糠、泥炭土等則反之。3.5 病蟲害防治

金線蓮病蟲害發生大多由高溫多濕、通風不良及受光照與栽培地不清潔寺,應設法克服這些不良因素和防除雜草。金線蓮在炎熱季節易發生莖枯病,春末夏初易發生立枯病、猝倒病,因此在病害高發季節, 可用農用硫酸鏈霉素1 000 萬單位或代森錳鋅200 倍、多菌靈1 000 倍等輪換噴施,每15 天噴1 次[15 ]。蟲害主要是蛞蝓和蝸牛,5～6 月尤為嚴重,可用蝸牛藥灑于苗床及四周防治[ 16 ]。金線蓮栽植后,在管理好的條件下生長5～6 月, 株高即可達到10 cm 以上,葉片5～6 片,鮮重1g 左右,收獲時可視苗情留茬重發。4 結語

金線蓮是我國一種重要的民間藥用植物。目前國內對金線蓮的研究主要是文獻考證、資源調查、生物學特性觀察、組培、栽培及營養成分分析和簡單的藥理實驗,而在藥用有效成分的分離與鑒定、制劑鑒定、炮制、藥理及臨床等方面缺乏深入的研究報道。由于藥性研究的工作尚未完備,金線蓮仍屬于青草藥的地位,其科學研究與產品開發尚有很大的空間,建議醫學界、生物研究界加大投入,促進金線蓮的藥物學研究,使之成為大眾化的醫學藥物。同時制定金線蓮的標準化栽培技術規程,促進金線蓮的規模化、產業化生產,為金線 蓮的藥學研究和藥物生產提供原料保障。

第四篇：魔芋組培良種擴繁技術研究及推廣應用工作報告

魔芋組培良種擴繁技術研究及推廣應用

工

作

報

告

1、項目背景

魔芋是21世紀的朝陽產業，魔芋產品市場短期內始終處于供不應求狀態。恩施自治州依靠得天獨厚的自然條件、區位優勢、政策支持和廉價的勞力、土地資源，給魔芋產業發展帶來了千載難逢的大好機遇。

魔芋作為無性繁殖作物，長期種植必然導致種性退化、抗性下降、病害逐年加重，并成為制約魔芋種植業乃至整個產業發展的瓶頸，一般年份減產二、三成，嚴重年份減產60%以上，甚至絕收。為了有效遏止病害發生，保障魔芋產業持續發展，最根本最有效的措施和辦法是選育新品種，并通過組織培養脫去自帶病原，實現種芋的提純復壯，從而增強抗性、提高產量和繁殖系數來滿足生產發展的需要。

恩施自治州農科院選出育省審命名的清江花魔芋及配套組培技術已經研究成熟，為了完善新品種三級繁育體系（育種單位組培原原種，科研開發單位生產原種，縣級農業部門或魔芋企業生產良種），加速組培良種推廣步伐，我們在恩施州農 1 科院及建始金璐、農泰、花果山公司等魔芋企業支持下，于2007年-2009年開展了魔芋培良種擴繁技術研究及推廣應用。

2、研究內容

為了探索魔芋組培良種擴繁技術，2008-2009年開展了不同栽培方式、不同栽培密度、不同覆蓋方式、不同商品肥料、高科技產品應用試驗，為組培良種推廣提供了科學依據。

2007年以來依托魔芋企業，組織農戶示范推廣組培良種1000畝，示范推廣的同時又開展了組培良種與常規自留種對比示范研究。

3、研究結果

3.1 組培良種栽培方式上應以間套栽培為主，采用玉米間套比單作（魔芋凈作）軟腐病發生及損失下降80%，單產增14%左右，繁殖系數高1倍多，純收入（含玉米項）畝增1300多元。

3.2 目前25克左右大小組培原種的最佳種植密度是8000-10000株/畝。

3.3 組培良種采用稻草及玉米秸桿覆蓋壟面軟腐病發生損失下降近40%以上，單產增10%以上。

3.4 組培良種所用商品肥料主選40%沃夫特硫型控釋復 2 合肥以替代目前生產上大面積推廣的40%煙草復合肥（含氯1.5%），畝增魔芋200多公斤，增幅20%以上。

3.5 組培良種使用高科技產品防病、增產效果更突出，供試中的保水劑、液態地膜防病效果高于60%，增產幅度20%以上，值得大力推廣，抗蒸騰劑、松土精增產10%以上，也具應用價值。

3.6 組培良種與常規自留種對比示范，軟腐病下降85%以上，單產增2100多公斤，農戶大面積推廣平均增產也達到1520公斤，在除去多投入的種芋成本后畝純增產值還有3800多元。

4、創新點

4.1 優良品種應用高科技產品提高了科技含量。4.2 本項研究技術實用性好，可操作性強，生產上推廣易收到立竿見影效果。

5、推廣應用成果

2007年以來已在花坪、紅巖、官店鄉（鎮）推廣應用組培良種1000畝。

6、效益分析 6.1 經濟效益

推廣組培良種生產種芋經濟效益突出，平均每畝增加產種 3 量1520kg，除去生產成本后還有純增產值3840元，全縣所推廣示范的1000畝組培良種就為芋農增收384萬元。建始縣魔芋種植8萬畝，其中基地種芋面積2萬畝，如果按照1/6比例建組培良種擴繁基地3300畝以滿足基地種芋用種需求，可為農民（含種芋生產者）直接增收1267萬元。

6.2 社會效益

組培良種擴繁技術研究及推廣應用，加速了種芋基地良種更新換代，充分發揮了良種的增產作用，確保了魔芋產業的可持續發展，使農民能穩定增收，企業能持續增效，財政能不斷增長，社會效益十分明顯。

6.3 生態效益

推廣應用組增良種及配套技術，不僅能解決種性退化、減輕病害發生損失、提高魔芋產量和產品質量，而且還能改良土壤、改善農田生態、提高土壤肥力和生產能力、提高土肥水資源利用率、減少資源浪費，生態效益極其良好。

二OO九年十二月

第五篇：組培與快繁實習報告——西北農林科技大學生物技術

一、時間：2008年10月14日——2008年10月15日

二、地點：陜西省眉縣湯峪太白山森林公園北10公里（西寶高速太白山站南3公里處）

三、基地指導老師：

四、學校指導老師：

五、西部蘭花生態園實習基地簡介 “西部蘭花”生態園位于陜西省眉縣境內，是在陜西省苗木繁育中心的基礎上建成的，總面積4080畝。現擁有水上娛樂垂釣園、高科奇觀園、珍稀樹種觀賞園、百果采摘園、花卉盆景園、疏林休閑娛樂園和科普教育基地7個園區39個觀光景點。擁有各類自動控溫40000余平方米，國內一流植物組培樓2300平方米，科研培訓樓3000平方米，年可“克隆”植物6000萬株；育苗生產線1500平方米，氣調冷庫2000平方米，水上垂釣娛樂園350000平方米；目前已引進繁育世界各國名優樹種420多種2100萬株；蝴蝶蘭、大花蕙蘭、紅掌等世界名貴花卉160余種在園內安家落戶。580余種世界名優花卉苗木品種使園內四季常青、三季有花；草地水塘與亭臺軒榭等建筑小品相映成趣，將生態園裝扮得清新秀麗、質樸自然，被譽為中國西部農業的綠色明珠。中心為陜西省唯一的“全國花卉生產示范基地”和“全國特色種苗基地”，是“全國無檢疫對象苗圃”、“全國農業生態旅游示范點”、“國家級引智示范推廣基地”和園林綠化二級資質企業。是集觀光旅游、科普教育、苗木花卉生產示范為一體的高科技林業生態園。

六、實習內容

（一）1.時間：2008年10月14日上午

2.地點：西部蘭花生態園1號、2號、3號、4號、5號溫室3.基地指導老師：

4.學校指導老師：5.實習內容1）1號溫室2）2號、3號溫室2號、3號溫室為紅掌引進及工廠化生產溫室，位于工廠化育苗分區中部，為V96文絡型8連棟溫室，面積6500m2，內有降溫、加溫、外遮陽、微霧環繞風機、滴灌、施肥、水處理系統，配有移動式苗床，計算機控制。主要用于名貴花卉生產。紅掌的管理：紅掌性喜溫暖、潮濕和半陰的環境，喜陽光而忌陽光直射，不耐寒，喜肥而忌鹽堿。澆水是pH值控制在5.2至6.1之間最好。花與葉數量的差別最重要的因素是光照。溫度紅掌生長最適宜溫度為20℃至28℃，最低不低于15℃，最高不超過30℃。在高溫季節，通過開啟濕簾及通風設備來降低室內溫度。濕度紅掌工廠化生產，關鍵是保持相對高的空氣濕度，一定的濕度有利于紅掌生長。

3）4號、5號溫室4、5號溫室，總面積4500平方米，圓拱形雙層充氣膜連棟溫室，覆蓋材料為以色列進口薄膜，整個溫室有六大系統組成：溫室主體，外遮陽系統，溫簾風扇降溫水處理系統，供暖系統，補光系統。該溫室主要用于生產紅掌、鳳梨等高檔花卉。

4）進入溫室前消毒操作規范每次進入溫室前，需將腳在門口消毒墊上來回擦拭數次，將手在消毒盆中清洗干凈；不要用手隨意觸摸在溫室內用手觸摸花株及設施，以防花株感染病菌；不要把雜物丟棄在溫室內；不要在溫室內吃東西；不要把其他植物及其他外來物品帶進溫室。5）參觀花卉的生產參觀的主要花卉有：粉冠軍、白冠軍、鳳梨、紅掌、西部神龜、維它、改良紅皇后、茱萸、紫背、白玉子等花卉。了解其生產條件，包括消毒、控溫、施肥、澆水要求。6）實習操作內容：紅掌的移苗，修剪，搬運原產于南美洲熱帶雨林潮濕、半陰的溝谷地帶，通過引種改良和用光、溫、水調節系統的大棚栽培，現在歐洲、亞洲、非洲皆有廣泛栽培。植物界 被子植物門 單子葉植物綱 天南星科Araceae，花燭屬Anthurium。生長習性：紅掌為多年生常綠草本花卉。性喜溫熱多濕而又排水良好的環境，怕干旱和強光暴曬。紅掌盆栽材料常見的有四種：組培苗、切株、穴盤苗和盆栽苗。

主要內容：將一批已經開花的紅掌，從移苗床上移到另一個已經消毒的移苗床上；將一批較小的紅掌根據其生長進行篩選分成不同的批次。消毒：配置一定濃度的高錳酸鉀消毒液，噴灑到空苗床上。注意不要噴灑到臨近的紅掌的葉面上。移苗：用盆搬移紅掌，搬移時要小心，注意不要傷害到紅掌的花、葉。篩選：根據紅掌的長勢，將其長勢相同移到一個移動苗床上，以便于管理。

鳳梨習性：喜溫暖濕潤和陽光充足的環境。喜疏松、透氣性佳、排水良好、微酸性土壤。栽培管理：夏季適溫為25～30℃，冬季適溫為15～18℃，最低溫度不能低于12℃。氣溫高時，可給植株噴水。柔和的陽光使葉片更加美麗。生長季節可大量澆水，同時在蓮座葉筒中灌些水。每次澆水后，待盆土較干時再澆第二次，不可過量。冬天盆土應稍干一些。5～9月生長旺盛期，每兩周施一次肥。除此之外，還應增施磷鉀肥兩次。

小組工作：為紅掌換盆，并添加培養基質（肥料土壤）

（二）科研部實習科研部主要是用于苗木的引種、實驗、推廣。現建有櫻桃園、核桃園、杏園、李子等示范園。

1.時間：2008年10月27日上午 2.地點：西部蘭花生態園1號、2號、3號、4號、5號溫室3.基地指導老師：

4.學校指導老師：

5.實習內容（1）櫻桃園實習

該園種有7個品種的櫻桃，主要用于對引種的櫻桃的生長、結實等性狀的記錄，以便于進行推廣。為提高光合利用率，合理利用空間，在櫻桃園中套種了植株小、快速生長期與櫻桃不能競爭、根系不發達、有經濟性作用的植物，如該園種植的是白菜、蘿卜等蔬菜。為防止地表水分蒸發，在櫻桃樹附近種植了三葉草，一方面用于固氮，另一方面可以作為綠肥使用。

櫻桃園中有引種三年的植株，還有引種7年的植株。櫻桃樹三年長成，第四年開始結果。樹形的管理要求是：主干分型，水平面擺布。在防治病蟲害方面，主要采取噴藥、樹干涂白。春季可以采取摘取蟲害的葉片，防治蟲卵。在蚜蟲發生的主要時期噴灑農藥，進行化學防治預防。

2、修剪a.修剪應注意事宜 櫻桃的枝分為發育枝和結果枝兩類，幼樹上發育枝較多，其前端葉芽延伸生長，擴大樹冠，下部腋芽抽生結果枝。進入結果期后，大部分一年生枝頂芽為葉芽外，腋芽多為花芽，稱為結果枝。結果枝依長度分為長果枝（15～20厘米）、中果枝（5～15厘米）、短果枝（5厘米左右）、花簇狀果枝（1～2厘米）。從結果能力看，長果枝座果力較差，一般在40%左右；中果枝結果能力因品種而不同；短果枝座果率高，果實品質亦佳；花簇狀果枝是盛果期旺樹上的主要結果枝，座果率能達80%左右。果實品質最佳，而且壽命長，可連續結果10～20年。結果枝和花簇狀果枝是產量形成的基礎。中國櫻桃、酸櫻桃在初果期，長、中果枝的比例大，而在盛果期則短果枝和花簇狀果枝為主。

c.結果樹的修剪 常在采果后進行夏季修剪。采用疏剪去除過密過強、擾亂樹冠的多年生大枝，進行樹冠結構調整，促進花芽形成。在疏除大枝時，注意傷口要小，要平，以利盡快愈和。疏除一年生枝時，可先在其基部腋花芽以上剪截，待結果光禿后，再疏除。冬季修剪時，應注意對骨干枝先端和短果枝的2～3年生枝段進行適當回縮，以刺激營養生長和新果枝的不斷形成，防止結果部位外移和樹冠內部光禿。

d.衰老樹的修剪 主要任務是及時更新復壯、利用生長勢強的徒長枝來形成新的樹冠。對骨干枝先衰弱而無結果能力的，要及時回縮。利用隱芽回縮更新時，中國櫻桃的隱芽壽命約5～10年。為了回縮有枝更新，回縮處最好有生長較正常的小分枝，這對樹體損傷較小。回縮修剪后發出的徒長枝，選擇方向、位置、長勢適當、向外開展的枝來培養新主枝、側枝。過多的應疏除，余者短截，促發分枝，然后緩放，使其形成結果枝組。大枝更新時，亦應在采果后進行，以免引起傷口流膠 病蟲防治 危害櫻桃樹的主要病蟲害有桑白蚧、刺蛾、桃紅頸天牛、蘋果透翅蛾、金緣吉丁蟲、金龜子、梨小食心蟲和炭疽病、櫻桃葉斑病、細菌性穿孔病、流膠病、根頸腐爛病等，應采取綜合措施加以防治。在冬季修剪時，剪除并燒毀病蟲枝，同時在落葉期噴布波美5度石硫合劑一次；在春梢葉片停長前，噴40%樂果1200倍液加70%甲基托布津800倍液一次；7～8月噴50%馬拉松乳劑1000倍液加65%代森鋅400～500倍液一次

2）核桃園實習核桃園基因庫，占地面積十畝，搜集保存優良核桃品種資源的基因庫，可為試驗示范、推廣、是優良種質資源，現有遼、遼

3、香菱、林

1、林

2、商洛1號、商洛2號、商洛3號、綠波、魯光、靈石8號、晉龍、美國黑核桃等26個品種。該核桃園用于選育新品種、優良新品種，有目的的做雜交。

嫁接 嫁接在3月下旬至4月上旬進行。首先采集接穗，3月中旬在芽即將萌動時，采集生長健壯、無病蟲害的1年生枝作接穗，采后分品種進行濕沙貯藏，4月上旬待核桃砧木芽萌動開始嫁接。砧木要求粗度在1．5cm左右，距地面l0cm處進行嫁接。核桃嫁接時有傷流，不易成活，嫁接前12小時內必須在根際部刻傷至木質部“放水”，再行劈接或插皮接，接后用塑料條綁緊傷口，接穗上端用漆涂抹防止水分蒸發。成活后及時除萌松綁，松綁時間以新稍生長20cm以上時進行為宜。待嫁接苗長至40cm左右時，用小竹桿或木棍固定，以防風折。效率最高、成活率最高的嫁接方法為“方塊芽接”。嫁接時間華北地區5月20日至6月20日；選取接穗，用嫁接刀切割成長3~4公分、寬0.8公分左右的方塊，掰下，然后在地面以上30公分左右當年生莖切除與芽片相當表皮，并向下切割出放水口；將芽片放入切口，盡量保持下部和一側緊密結合；用薄膜嚴密包扎，露出芽；接口以上留3片復葉剪砧；以后隨時抹除萌芽，促使嫁接芽萌發；嫁接芽15公分時，去掉幫條。成活率一般達到80%以上。

3）李子園實習實習項目：李子的修剪

技術要領：幼樹及初結果樹的冬季修剪：此期修剪應兼顧整形和結果兩個方面，對主、側枝延長枝要輕剪長放，一般留全枝長的2/3進行短截。疏除密擠枝、多杈枝、重疊枝和強旺枝，并控制競爭枝、直立旺枝的生長。對生長中庸、角度比較開張的發育枝應緩放，促其萌發中短枝，增加結果枝的數量，成花或結果后及時回縮培養成結果枝組。中、短枝角度大，成花容易，要盡量予以保留，以利結果。對生長較弱的幼樹宜適當短截，疏除過密、細弱枝，多保留健壯枝，拉平直立旺枝作為輔養枝，以促發粗壯的中、短果枝。

盛果期樹的冬季修剪：主要任務是調整生長和結果的關系，維持樹勢，延長盛果期結果的年限。修剪時可根據枝條長勢、樹冠各部位的空間情況，適當疏密、截弱，以保持穩定的結果部位和生長勢。對各級延長枝，一般進行中度短截(剪去當年生枝的1/3～2/3)，使其繼續抽生健壯新梢。對衰弱的主枝、側枝、多年生輔養枝、結果枝組、下垂枝，在有強壯枝的部位進行回縮更新或抬高角度，使其恢復生長勢。對樹冠下部及內膛枝，要注意及時更新復壯，使其不斷產生新的健壯結果枝。樹冠上部和外圍的過密枝、強旺枝，要進行回縮或疏除，以改善內膛光照。杏樹成枝力弱，對各部位的結果枝組、長果枝和長勢中庸的發育枝，只要不過密，一般不要疏除，可短截促發少量長枝，使中下部抽生中短枝交替結果。

衰老期樹的冬季修剪：衰老期杏樹各延長枝生長變弱，新梢短，骨干枝開始下垂，樹冠內部開始光禿，幾乎只在樹冠表面結果，產量降低。修剪的主要任務是更新骨干枝和枝組，增強樹勢，延長經濟結果年限。要利用中下部角度小、生長健壯的背上枝換頭。或在比較直立的枝段回縮，促使隱芽萌發更新。對位置適當的徒長枝，要利用其培養為骨干枝和結果枝組。對結果枝組和結果枝，本著去弱留強的原則，選留壯枝、壯芽進行更新修剪。樹勢極度衰弱、更新難以奏效的，要加強肥水管理，對主側枝及大枝組在10～15年生部位進行全樹大更新，一次完成，當年可萌發大量新梢，通過夏季抹芽、摘心和冬季整形修剪，第2年即可開花結果，恢復一定的產量。

（三）生產實習1.時間：2008年10月27日上午2.地點：西部蘭花生態園1號、2號、3號、4號、5號溫室3.基地指導老師：4.學校指導老師：5.實習內容

1）樹的造型主要用于樹的造型的是：橡樹、黃金槐、大荔花、紅玉蘭、接骨木。

2）紅葉李的扦插 技術要領： 苗圃地選擇和整地苗圃地應選擇排灌和交通運輸方便的地方，土層要求為深厚、肥沃、疏松的沙壤土。整地前，每畝地均勻撒施1至1．5噸腐熟農家肥，并用50％多菌靈1500克撒于土中，進行土壤殺菌消毒；再用4000克50％鋅硫磷顆粒劑撒施殺滅地下害蟲。然后深耕、細耙、整平土地，清除雜草廢農膜等雜物，做畦。畦長根據圃地而定，畦寬1米；畦與畦之間留溝，溝寬0．3米，深0．2米。做好后稍加鎮壓，將畦面中耕耙平，準備扦插。

提高紫葉李扦插繁殖成活率。一定要在小雪節氣前后挑選插條，插條長度應在18厘米以內，頂芽上保留2厘米的保護層。之后于清水中泡12小時，用沙土混合，在深度不超過70厘米的地窖中儲藏。儲藏時注意讓插條下部朝上，防止水分、養分流失。使用生根劑會導致插條中毒，成活率大幅降低，一般在20％以下。

扦插時間最好在驚蟄前后，早了生長慢，成活率低；晚了插條高度不一致。為了保證溫度，苗床上要鋪一層地膜。扦插前，先用手指或木棍把薄膜捅破，以防直接扦插脫落的薄膜包裹插條底部。扦插時，插條要垂直苗床插入，不能傾斜。扦插之后澆第一遍水，然后注意培土，盡量保證所有插條第一個芽都剛剛露出苗床。春季地下害蟲非常多，可用3911防治，每畝地用藥1至2公斤，兌水后隨第二遍水澆施。

6.參觀苗木花卉溫室繁殖示范區

該區位于推廣區中部，占地面積12畝。主要設施有：三連棟噴霧大棚6座，3240平方米，鋼架保溫育苗溫室一座，700平方米。日光溫室4座，1060平方米。利用三種不同形式的溫室設施，采用林業科技手段，對中心培育、引進的觀花、觀葉、觀果的珍貴種苗進行繁殖，示范栽培。

（四）組培部實習1.參觀組培部的設置

配藥室；灌裝室；中轉儲藏室；接種室；培養室；蝴蝶蘭培養室。

2.蝴蝶蘭的接種、培養 1）超凈工作臺的紫外消毒20min2）超凈工作臺用酒精噴霧消毒，擦拭。擦拭從里往外，從上往下。超凈工作臺側壁用從里往外擦拭。

3）剪刀、鑷子