第一篇:洋蔥鱗片葉表皮細胞的細胞骨架觀察實驗報告
洋蔥鱗片葉表皮細胞的細胞骨架觀察實驗報告
吳若自然科學大類 16307110316 單周四 119 2016/11/17
一、實驗目的: 1.掌握用光學顯微鏡觀察植物細胞骨架的原理及方法。2.認識細胞骨架的形態,聯系細胞骨架的功能。
二、實驗原理:
細胞骨架是指真核細胞中的蛋白纖維網架體系。廣義的細胞骨架包括細胞核骨架、細胞質骨架、細胞膜骨架和細胞外基質。根據蛋白質纖維的直徑、組成成分和組裝結構的不同可分為微絲、微管和中間纖維。細胞骨架對于維持細胞的形態結構及細胞運動、物質運輸、能量轉換、信號傳導和細胞分裂等有重要的作用。本試驗采用去垢劑TritonX-100 的緩沖液處理植物材料時,可將細胞的膜結構和大部分蛋白質抽提掉,但細胞骨架系統的蛋白卻被保存下來,后者用考馬斯亮藍R250 染色,在光學顯微鏡下可見一種網狀結構。
三、操作步驟:
1.取洋蔥內皮表層膜1cm2(可多取兩片)左右置于含2mlPBS液的小皿中濕潤5min后,吸去PBS 2.向小皿中加入1.5mlTritonX-100(1%),浸沒20min后,吸走TritonX-100
3.向小皿中加入2mlMbuffer浸沒置于搖床上5min,重復兩次后,吸走Mbuffer 4.向小皿中加入105ml戊二醛(3%),浸沒30min后,吸走戊二醛 5.向小皿中加入2mlPBS,浸沒置于搖床上5min,重復兩次
6.取出表皮平鋪于載玻片上,滴加100微升,靜置100min后吸取染料 7.向表面滴加蒸餾水洗滌后用紙巾洗去液體,重復兩次
8.蓋上蓋玻片,擦去殘余液體,用光學顯微鏡觀察并拍照記錄
四、實驗結果:
如圖所示,洋蔥內表皮細胞輪廓清晰可見,細胞壁及其分界明顯可見。可觀察到線性纖維交織而成的網狀結構,同一細胞內各處骨架密集度不均勻,細胞核區域纖維較密集,藍色較重。調節顯微鏡焦距可觀察到細胞不同橫切面的網絡結構的變化,表明細胞骨架以三維立體結構的形式分布在整個細胞內。
五、思考題:
1.簡述細胞質骨架的基本類型及結構特征
答:微管:中空的圓筒狀結構,直徑為18nm~25nm,構成微管的主要成分是微管蛋白。這種蛋白有兩個亞基,即α,β亞基它們成螺旋形排列。進化高度保守。微絲:由肌動蛋白組成的直徑約為7nm的骨架纖維,單體形式的球形肌動蛋白聚合形成纖維形肌動蛋白,在微絲結合蛋白的輔助作用下形成微絲高級結構,行使功能。
中間纖維:中空的骨狀結構,直徑介于微管微絲之間,具有明顯的組織細胞特異性,基本結構為一個中央α螺旋桿狀區輔以兩側大小和化學組成不同的端區。2.本實驗觀察到的藍色纖維主要是哪種細胞骨架?
答:應為微絲和中間纖維。3.考馬斯亮藍染色方法的優缺點。
答:優點:反應相對迅速,其結合物在室溫下1h內保持穩定,試劑配置簡單,操作簡便。
缺點:用于不同蛋白質測定時有較大的偏差,仍有一些物質干擾此法的測定。
六、實驗討論:
1.觀察和分析細胞骨架的意義?
答:細胞骨架是細胞結構的重要組成部分,也是細胞行為與功能的重要調節系統,觀察和分析細胞骨架的性質與變化將幫助我們更好地認識和研究細胞性質、功能與機制。
2.考馬斯亮藍是一個理想的細胞骨架染料嗎?本實驗的優點和缺點是什么?
答:不是,特異性熒光染料可能更好。本實驗優點是反應相對迅速,其結合物在室溫下1h內保持穩定,試劑配置簡單,操作簡便。缺點是無法直觀分辨微管,微絲和中間纖維等。
第二篇:觀察洋蔥表皮的實驗
觀察洋蔥表皮的實驗
實驗材料:顯微鏡、洋蔥、載玻片、蓋玻片、鑷子、碘酒
試驗方法:
(1)準備好顯微鏡。
(2)將洋蔥切開,掰下一塊嫩的鱗葉;用刀片在鱗葉表面輕輕劃一個井字,用鑷子在井字中
間輕輕撕下一塊洋蔥鱗葉的表皮。
(3)在載玻片上滴幾滴水,用鑷子夾住洋蔥表皮,放在載玻片的水中展平,用鑷子夾住蓋玻
片蓋上,注意不要有氣泡。
(4)在蓋玻片的左邊有水處滴一滴稀釋的碘液,用吸水紙在蓋玻片的右邊將碘液吸過來,給
洋蔥表皮染色。
(5)將經過上述步驟做好的切片放在顯微鏡的載物臺上,夾好。
(6)利用低倍鏡進行觀察。
制作細胞模型
制作材料:一包無色明膠、一個長方形的盒子,各種顏色的橡皮泥或泡沫塑料
制作方法:
(1)把在顯微鏡下觀察到的某種細胞的樣子畫在紙上。
(2)把名叫溶解在溫水中,再把他倒進一個長方形盒子里或一個圓形的盒子里。
(3)用橡皮泥或泡沫塑料模擬某種植物或動物細胞中的結構,在凍僵之前把他們插進明
膠中。
觀察洋蔥表皮的實驗
實驗材料:顯微鏡、洋蔥、載玻片、蓋玻片、鑷子、碘酒
試驗方法:
(7)準備好顯微鏡。
(8)將洋蔥切開,掰下一塊嫩的鱗葉;用刀片在鱗葉表面輕輕劃一個井字,用鑷子在井字中
間輕輕撕下一塊洋蔥鱗葉的表皮。
(9)在載玻片上滴幾滴水,用鑷子夾住洋蔥表皮,放在載玻片的水中展平,用鑷子夾住蓋玻
片蓋上,注意不要有氣泡。
(10)在蓋玻片的左邊有水處滴一滴稀釋的碘液,用吸水紙在蓋玻片的右邊將碘液吸過來,給
洋蔥表皮染色。
(11)將經過上述步驟做好的切片放在顯微鏡的載物臺上,夾好。
(12)利用低倍鏡進行觀察。
制作細胞模型
制作材料:一包無色明膠、一個長方形的盒子,各種顏色的橡皮泥或泡沫塑料
制作方法:
(4)把在顯微鏡下觀察到的某種細胞的樣子畫在紙上。
(5)把名叫溶解在溫水中,再把他倒進一個長方形盒子里或一個圓形的盒子里。
(6)用橡皮泥或泡沫塑料模擬某種植物或動物細胞中的結構,在凍僵之前把他們插進明
膠中。
第三篇:六年級下冊洋蔥表皮細胞實驗教案范文
分組實驗內容:觀察洋蔥表皮細胞課案
實驗名稱:觀察洋蔥表皮細胞實驗內容:教科版小學科學六年級下冊,第一單元《微小世界》第5節《用顯微鏡觀察身邊的生命世界
(一)》觀察洋蔥表皮細胞。實驗類型:分組實驗
實驗準備:教師:按學生妹三人一組,每組:洋蔥、小刀、清水、滴管、鑷子、吸水紙、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、放大鏡。學生:書本、抹布。實驗教學過程:
一、談話導入
師:這是一個洋蔥,如果從它的內表皮上揭下一塊,你能看到些什么?如果用上放大鏡又能看到些什么?如果用上顯微鏡又能看到些什么?
二、制作洋蔥表皮玻片標本
1、師:為了能更好地觀察它,首先我們要制作一個玻片標本。(師演示)1)在一個干凈的玻璃載片中間滴一滴清水
2)用鑷子把取下的洋蔥表皮放到栽玻片的水滴中央,注意標本要平展開,不能折疊。
3)用蓋玻片(或另一個玻璃載片)傾斜著蓋到標本上面,放蓋玻片時,先放一端,再慢慢放下另一端,注意不要有氣泡。
4)從標本的邊緣滴一滴稀釋的碘酒,并把玻片微微傾斜,再用吸水紙吸掉多余的水。
2、學生以組為單位制作玻片標本
二、用肉眼和放大鏡觀察洋蔥表皮
1、先用肉眼觀察洋蔥表皮,將看到的畫在科學記錄本上(或書上13頁)
2、材料員發給每位同學放大鏡,大家用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的畫到科學記錄本或書上。
3、交流用肉眼和放大鏡觀察到的有何不同。
三、用顯微鏡觀察洋蔥表皮
實驗過程:
1、用小刀將洋蔥表皮剝下一薄層,用顯微鏡觀察。
2、制作洋蔥切片:先取下一小片,用鑷子取下,輕放在滴了碘酒的載玻片上,用蓋玻片從右向左滑動放在切片上,再用吸水紙吸去多余的水。
3、將制作好的切片放在顯微鏡下,調好焦距觀察
4、觀察時用左眼觀察顯微鏡,右眼看圖,右手畫出細胞形狀圖
5、填好實驗報告冊,得出結論 實驗結論:
洋蔥表皮是由無數細胞構成的。生物體是由細胞構成的,的。細胞是有生命的,它會生長、繁殖、變化、衰老和死亡。生物體生長發育的過程中就是在它生長、繁殖、變化的過程,生物體的衰老、死亡也是由細胞的衰老、死亡引起的 師:如果我們將洋蔥表皮的玻片標本放到顯微鏡下觀察,又會有什么新的發現呢?
2、師出示顯微鏡,介紹各部分的名稱、功能及使用方法(如果學生五年級時已使用過,也可叫學生介紹老師指導更正,具體內容見13頁)
3、每2人一個顯微鏡觀察洋蔥表皮,不會使用的同學可根據13頁的提示進行操作。每組的材料員監督大家進行規范的操作,對不規范操作且不改正的同學取消其使用資格。同樣將顯微鏡下的發現畫到科學記錄本或書上。
4、交流我們在顯微鏡下的發現
(洋蔥表皮由一個個比較規則的多邊形組成。洋蔥表皮上的一個個小房間似的結構,是洋蔥的細胞。閱讀12頁的資料,了解胡克發現細胞的故事。讓學生談談對細胞的認識。)
第四篇:細胞實驗細胞骨架組分的熒光染色觀察
細胞生物學實驗
細胞骨架組分的熒光染色觀察
一、實驗目的
1、掌握細胞骨架的顯示方法
2、掌握熒光顯微鏡的使用方法
3、了解熒光顯微鏡下細胞骨架的基本形態結構
4、了解熒光探針Hoechst 33342(Ho.33324)與細胞成分的結合特性和光譜特性
二、實驗原理
1、微絲股價是一種高度動態的三維網狀結構,與細胞的多種生理活動如細胞運動、胞質分離、細胞器的定位、細胞內物質的運輸、吞噬作用、細胞極性生長等密切相關。
2、鬼筆環肽(phalloidin)是從一種毒性菇類中分離的劇毒生物堿,它同細胞松弛素的作用相反, 只與聚合的微絲結合, 而不與肌動蛋白單體分子結合。它同聚合的微絲結合后, 抑制了微絲的解體, 因而破壞了微絲的聚合和解聚的動態平衡。
3、由于鬼筆環肽非常特異地結合并穩定聚合態肌動蛋白, 因而對肌動蛋白的動態平衡造成嚴重影響.此外, 較高濃度的鬼筆環肽對細胞有毒害作用.因此, 用鬼筆環肽標記微絲并不是用于研究活體細胞的理想方法。
三、實驗材料
1、材料:CHO(中國倉鼠卵巢細胞)
2、試劑:
(1)PEM:50mM pipes(pH6.9), 5mM
EGTA, 5mM MgSO4, 0.225M 山梨醇
(2)0.5% Triton X-100溶于PEM緩沖液中。
(3)4%多聚甲醛溶于PEM緩沖液中。
四、實驗步驟
1、取出上次實驗爬片于小蓋玻片上的CHO細胞;
2、取出培養有CHO細胞的蓋片,于小平皿中37℃預溫 PEM洗3次(每次 1mL); 3、37℃預溫 4%多聚甲醛固定細胞15min(1mL)4、37℃預溫 PEM洗3次
5、加入0.5%Triton X-100處理約10min(1mL);
6、取一潔凈的載玻片,按照其的大小在其上放置一條封口膜,在封口膜上滴加20μL 60nM Alex-phalloidin 10L濕盒中室溫染色30min;
7、在parafilm 膜上加PEM,待蓋玻片被沖起后,再輕輕揭下蓋玻片; 8、37℃預溫 PEM洗數3次;
9、滴加10L Ho.33342復染色;
10、熒光鏡下觀察。【注意事項】
1、注意不要弄碎蓋片,分清細胞所在面;
2、各步洗細胞要輕,勿使細胞脫落;
3、熒光觀察注意避光操作
4、節約試劑。
五、實驗結果
圖一:CHO細胞微絲熒光染色圖
圖二:CHO細胞細胞核熒光染色圖
圖三:CHO細胞微絲與細胞核熒光染色疊加圖
六、實驗結果分析
染色后微絲呈綠色,細胞核為藍色,染色較為清晰。但細胞數量較多,導致有些染色結果重疊。
七、思考題
1、PEM緩沖液的作用是什么?
細胞內的微絲在含有ATP和Ca2+及低濃度的Na+,K+等陽離子溶液中,趨于解聚成G-actin;而在Mg2+和高濃度的Na+,K+等陽離子溶液中,G-actin則裝配為F-actin。PEM緩沖液提供高Mg環境,讓單體肌動蛋白(G-actin)聚合成絲狀肌動蛋白(F-actin)。同時,EGTA能螯合Ca2+,使G-actin裝配成F-actin,微絲骨架保持聚合狀態且較為舒張。用PEM緩沖液處理細胞,能夠模擬體內環境并提高細胞骨架的穩定性。2、0.5%Triton X-100處理細胞的作用是什么?
0.5%Triton X-100處理細胞的作用是溶解細胞膜上的脂類和蛋白質,增加細胞膜的通透性,使熒光染料能夠更容易地透過細胞膜與F-actin特異性結合。
3、鬼筆環肽用于細胞骨架研究的優缺點是什么?
(1)鬼筆環肽用于細胞骨架研究的優點:鬼筆環肽的分子量小,很容易通過細胞,不需要對細胞進行冷丙酮和TRITON X-100處理。鬼筆環肽可以與聚合的微絲結合,通過讓這種毒素吸附于熒光染料上面,可以研究細胞的內部工作機制,窺視細胞如何分裂。(2)鬼筆環肽用于細胞骨架研究的缺點:對細胞有毒性,價格昂貴。
參考文獻:細胞生物學實驗(桑建利, 譚信)
第五篇:《觀察植物葉表皮的氣孔》教學設計
《觀察植物葉表皮的氣孔》教學設計
【教材分析】
該實驗是蘇科版八年級上《綠色植物與生物圈中的水循環》中的植物的蒸騰作用下的一個觀察實驗,教材引導學生通過該實驗一方面發展了學生的實踐探究能力,體現了《生物課程標準》“提倡探究學習”的理念。另一方面理解了葉片上與蒸騰作用直接相關的結構——氣孔的作用。初步形成生物體的結構和功能是相適應的基本觀點。
【學情分析】
八年級學生對制作臨時裝片的方法已經有了一定的基礎,操作起來難度不大,但是怎樣撕取葉表皮,使其盡量不帶葉肉細胞是實驗成功與否的關鍵。所以教師要把教學的重心和主要任務指導學生及實驗的觀察上,選取新鮮的葉和萎蔫的葉作為實驗材料做對照實驗,將觀察到的氣孔畫出來,從實驗和觀察中發現問題、解決問題。同時讓學生自己采集葉片進行觀察,教師介紹指甲油氣孔拓影法,在此基礎上,學生的思維得以開放和發展,會生成許多新的問題。有助于激發學生的積極性和創新能力。【設計思路】
1.課前采集陸生植物的葉片。2.創設情境,導入新課
3.復習鞏固顯微鏡的使用方法及臨時裝片的制作,同時小組合作討論出實驗步驟。4.實施實驗,同時發現問題,提出問題,討論交流,教師巡視指導。5.小組展示氣孔的結構圖,同時對所提出的問題進行交流解答,不能解決的問題,教師幫助解決,與此同時對生成的新問題進行交流解答。
6.總結本節課。同時進行課外拓展,激發學生繼續探究的熱情。【教學目標】
1.知識與技能:
(1)通過實驗與觀察認識氣孔并能描述氣孔的組成,了解其開閉原理。
(2)培養學生制作臨時裝片的能力、畫圖能力。
(3)初步形成生物體的結構和功能是相適應的基本觀點。
2.過程與方法:
(1)通過設計和探究實驗,解決問題,在探究中獲得新知。
(2)使學生在探究合作學習中,掌握分析問題的視角,從多角度探究問題。;
3.情感態度與價值觀:
(1)通過探究學習,分工合作,培養學生的社會責任感,發展學生的實踐探究能力。
(2)通過課外拓展,培養學生樂于探索的精神。(3)培養學生嚴謹、實事求是的科學態度。【教學重點及解決策略】
1、重點:制作并觀察葉表皮的臨時裝片 解決策略:
通過視頻演示實驗過程和注意事項。教師將其中的重點如撕取葉下表皮的方法進行具體的操作示范。
2、難點:通過實驗能描述氣孔的組成及開閉原理以及畫圖 解決策略:
學生分組實驗:四人一小組討論如何合作展開實驗探究,意在幫助學生進一步理清思路并提醒其注意合作探究,培養基本的科學素養。然后學生在教師指導下開始實驗,在實驗的過程中提出相關的問題,討論解決。實驗結束后指導學生畫出觀察到的氣孔結構圖。
展示與交流:抽取四小組用食物投影向同學們展示他們畫得圖并交流實驗感受。【實驗準備】
學生準備:采集校園中陸生的植物葉片
教師準備:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、培養皿、鑷子、解剖針、水、濃鹽水、菠菜葉(浸水和干癟的兩種)、吸水紙、無色指甲油、制作好的指甲油氣孔拓影法做出的裝片 【教學流程圖】
【教學過程】
學生
自教學環節
教師的主
組織和引導
活動
1.課前準備
物
2.創設情景
導入新課
俗話說:“大地樹底下好乘涼”你能采用所學知識解釋嗎?集復習植物的蒸騰作,用,進而提出問題: 提
1、你知道水分是如何高從葉片中散發出來的了嗎?
對真認極
學生提前在校園 里尋找陸生植物的葉學片,并提醒學生采生集 葉片時要保護植積
2、散發水分的結構是本
3.實驗方案的設計程序什么?等問題進行知節識的遷移從而引出氣課孔的概念,進入本課的的實驗教學。學習興趣。
溫故知新,大膽猜想。
首先以課件學的方式展示氣孔的模習式圖,讓學生對氣孔熱
有個感性的認情識。然后同學們回開憶制作臨時裝片的方始法及步驟,接著用視高頻演示實驗過程和注漲意事項。教師將其中,的重點如撕取葉下表并皮的方法進行具體的表操作示范。
現強烈求知欲,展開討論和積極4.合作探究、實施實驗的思考,并回答。
【引導學生看書、討
論實驗步驟】
兩人一組,討論
出實驗的步驟,1、按照顯微鏡的使用
方法,取出、安裝、思調節好顯微鏡。
考
2、兩人一組,一人用并新鮮的菠菜葉片作為同實驗材料,一人用干桌癟的菠菜葉作為實驗簡材料,拿起葉片,使下單表面朝上,以一定角交度撕取一部分下表流
皮。撕下的應是伸到,葉片綠色部分以外積的、窄而無色的邊緣極部分。、3、把表皮放在載玻片主上,用解剖刀切成小動塊,滴加一滴清水,蓋說上蓋玻片,勿使表皮出干燥。(做完老師提實供的菠菜葉片后,用驗自己在校園里采集的步葉片再做一組)
驟
4、在低倍境下找到一。些氣孔。
合5、估略出視野中氣孔作的數目。
進
6、用同樣的方法對同行一葉片的上表皮上的實氣扎進行計數,盡可驗能現察多種類型的步葉。比較每類葉的上、驟下表皮上的每的氣孔的5.提出問題,討論及交流教目。操
7、畫出葉表皮氣孔的作結構圖。用鉛筆畫出。4-5個相連的葉表皮
細胞和一個由2個保
衛細胞圍成的氣孔,并注明各部分的名稱。
8、收鏡、清理桌面
9、提出在實驗中你遇到的問題及解決方法。
教師巡視指導,總結做學生提出的問題并寫實在黑板上:
驗
1、氣孔是怎樣構成的的?
同
2、為什么氣孔可以張時開和閉合?,3、氣孔的開閉是怎樣把調節的?是否與葉片想所含水分的多少有要
關?
了
4、保衛細胞的形狀是解怎樣的?細胞壁的厚的度是否均勻?受到拉問力時伸展情況是否一題樣?
記在書上。
通過實驗,積極思考,小6.實驗結果的觀察、比較與分析組討論,交流小結,自我組織答案并做好記錄。
分
【指導學生觀察與比7.課外拓展,積極創新較】 組
激勵學生分組展示有和交流實驗觀察的結序果。
展
作好簡單的評價與示鼓勵。
和
【課件演示】教師通交過動畫演示氣孔開閉流原理。同時發問:體實內水多時氣孔張開水驗少時氣孔閉合有什么結生理意義?從而使學果生初步形成生物的結。構和功能相適應的基解本觀點。
決
指導學生學會處理提實驗結果。
出
激勵學生參與討論的與交流,享受合作學問習的樂趣。
題
教師啟發學生思考:
1、如何使開放的氣孔積關閉?(引導學生用極所給實驗材料進行設思計及實驗)
考
2、通過不同植物葉片,的觀察,你認為哪一回種葉片易于撕下表答皮,適合做實驗材問料?
題
3、在取葉表皮時容易并帶上葉肉細胞,影響嘗實驗的觀察,你知道試還有什么辦法觀察植用物的氣孔嗎?
實
小結本課的基驗礎上引導學生對觀察得氣孔的方法的思考和到探究,激發學生主動答探究嘗試的興趣。教案師介紹指甲油氣孔拓
影法,并將做出的裝
片供學生觀察,鼓勵
學生課下完成實驗操作。(若時間充足也可課上完成)
【教學反思】
本節課是一節由學生親自動手,分工合作,共同完成的觀察實驗,由于有了一定的實驗操作基礎,在操作起來比較容易。但是在我任教的幾年中發現,如果僅僅讓學生按部就班的按照書本上的實驗步驟去完成實驗,對于氣孔的開閉原理,學生并不能真正的理解,于是我選擇的新鮮和萎蔫的葉片作為對照,同時在課外拓展中用濃鹽水作為材料讓學生自己想辦法讓張開的氣孔閉合,這樣讓學生在觀察氣孔結構的基礎上了解氣孔開閉的原理,從觀察到的表象深入到事物的實質。將教材進行提升,通過改進實驗的方式讓學生主動參與到學習中,力求通過富有吸引力的教學過程,使學生成為教學的主體,通過設置問題,發現問題,提出問題,激發學生的學習興趣和好奇心,引導學生積極主動地獲取生物科學知識,領悟科學研究方法,以達到新的課程標準要求。即便有些小組的實驗失敗了,但他們從實驗中得到的知識及嚴謹的科學態度是寶貴的,對學生以后的發展具有重要的作用。