第一篇：結(jié)核分枝桿菌危害評估報(bào)告

結(jié)核分枝桿菌生物安全危害評估報(bào)告

一.危害程度分類

（一）分類等級

在衛(wèi)生部公布的《人間傳染的病原微生物名錄》中將其列為第二類病原微生物（危害程度為Ⅲ級），屬高致病性病原微生物。

（二）不同實(shí)驗(yàn)操作生物安全實(shí)驗(yàn)室級別要求

根據(jù)《名錄》的規(guī)定，在實(shí)驗(yàn)操作涉及結(jié)核桿菌的大量培養(yǎng)、結(jié)核桿菌離心和凍干等易產(chǎn)生氣溶膠的實(shí)驗(yàn)操作以及以結(jié)核桿菌活菌感染的動物實(shí)驗(yàn)，應(yīng)在BSL-3或ABSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

臨床樣本的結(jié)核桿菌分離培養(yǎng)、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)、生化鑒定、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、PCR核酸提取、涂片、顯微觀察等初步檢測活動可在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

對經(jīng)有效方法滅活后不含結(jié)核桿菌活菌材料的分子生物學(xué)、免疫學(xué)等實(shí)驗(yàn)可在BSL-1實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。二.背景資料

（一）一般生物學(xué)特性

1.形態(tài)染色 結(jié)核桿菌細(xì)長略彎曲，端極鈍圓，呈單個或分枝狀排列，無鞭毛和芽孢。結(jié)核桿菌一般常用萎~鈉氏抗酸性染色法染色，結(jié)核桿菌為紅色，其他非抗酸性℃細(xì)菌呈藍(lán)色。

2.培養(yǎng)特性 結(jié)核桿菌為專性需氧菌。最適PH6.4-7.0，在35-40℃可生長，最適溫度為35-37℃，在2%-5%二氧化碳環(huán)境中可促進(jìn)其生長，在無氧條件下則迅速死亡。

（二）在外界環(huán)境的穩(wěn)定性

結(jié)核分枝桿菌因細(xì)胞壁含大量類脂質(zhì)，尤其是具有疏水性蠟樣物質(zhì)，對外界環(huán)境及理化因素的抵抗力比一般細(xì)菌繁殖體強(qiáng)，因而在外界環(huán)境中相當(dāng)穩(wěn)定，有利于結(jié)核菌的傳播。

（三）致病性和感染數(shù)量

1.致病性 人型結(jié)核桿菌是人類結(jié)核病的病原菌 2.感染數(shù)量 在自然條件下極易造成人群的感染。

（四）傳播途徑及暴露后果

1.傳播途徑 結(jié)核桿菌有多種傳播途徑，以呼吸道吸入帶菌的飛沫及帶菌的塵埃為主要傳播途徑。

2.暴露后后果 結(jié)核桿菌菌暴露后，在一定時間內(nèi)暴露俞久，感染的機(jī)會愈大。結(jié)核桿菌潛伏感染者一般無明顯癥狀，發(fā)病者多為慢性過程。可出現(xiàn)發(fā)熱、盜汗、食欲減退、消瘦、疲乏無力等一般結(jié)核病癥狀。如為肺結(jié)核還可出現(xiàn)咳嗽，咳痰、咳血及肺部X線改變等。部分病人，特別是兒童可出現(xiàn)腦膜炎及全身播散型結(jié)核。

（五）宿主范圍

天然宿主主要為人和牛.（六）結(jié)核病的預(yù)防、診斷和治療

1.預(yù)防 卡介苗接種對預(yù)防和減少兒童結(jié)核病，特別是結(jié)核性腦膜炎、血行播散性結(jié)核病的發(fā)生起著重要作用。目前對實(shí)驗(yàn)人員尚無有效的特異性預(yù)防措施。

2.診斷 感染后是否發(fā)病依據(jù)可疑癥狀，X線改變及病原學(xué)檢查來判定。肺結(jié)核的實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要有痰涂片檢查。

3.治療 對一般抗生素不敏感，對鏈霉素、異煙肼、利福平、乙胺丁醇、丙嗪酰胺等藥物敏感。

三.實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)活動及其危險(xiǎn)性與預(yù)防措施

（一）實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)活動背景資料

實(shí)驗(yàn)活動內(nèi)容 本實(shí)驗(yàn)室主要從事臨床常規(guī)標(biāo)本的涂片檢查和免疫學(xué)檢測

（二）可能造成不良后果的因素與預(yù)防措施

1.實(shí)驗(yàn)樣品涂片 用于顯微觀察的培養(yǎng)物、血液、唾液和糞便等樣品在固定和染色時，可能產(chǎn)生氣溶膠。

擬采取防護(hù)措施：涂片操作過程應(yīng)避免產(chǎn)生氣溶膠，制成涂片后立即染色可減少危險(xiǎn)。若涂片不能及時染色，建議將涂片浸泡在戊二醛溶液中。涂片應(yīng)當(dāng)用鑷子拿取恰當(dāng)儲存，并經(jīng)清楚污染或高壓滅菌后再丟棄。

（三）實(shí)驗(yàn)室危害評估

潛在危險(xiǎn)因素

危害程度 發(fā)生可能性 固有風(fēng)險(xiǎn) 措施合理性 殘留風(fēng)險(xiǎn) 實(shí)驗(yàn)樣品涂片（1）在固定和染色時產(chǎn)生氣溶膠

中度

可能

中度

合理

中風(fēng)險(xiǎn) 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備

（1）離心機(jī)使用過程中產(chǎn)生的氣溶膠

高度

可能

高度

合理

高風(fēng)險(xiǎn)（2）容器的破碎和傾灑造成污染

高度

可能

高度

合理

高風(fēng)險(xiǎn)（3）檢測未經(jīng)滅活的樣品對儀器與

環(huán)境造成的污染

中度

很可能

中度

合理

中風(fēng)險(xiǎn)

室內(nèi)空氣、實(shí)驗(yàn)用品以及操作臺面污染 中度

很可能

中度

合理

中風(fēng)險(xiǎn) 個人防護(hù)裝備

（1）手污染造成感染性物質(zhì)的食入

中度

很可能

中度

合理

中風(fēng)險(xiǎn)（2）與皮膚和眼睛的接觸感染

中度

很可能

中度

合理

中風(fēng)險(xiǎn)（3）個人防護(hù)裝備未徹底消毒造成污染 中度

很可能

中度

合理

中風(fēng)險(xiǎn)

四.工作人員素質(zhì) 細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室共有技術(shù)人員1名，參加醫(yī)院、科室培訓(xùn)3次以上。經(jīng)體檢健康狀況良好。五．評估結(jié)論

結(jié)核分枝桿菌在外界環(huán)境相當(dāng)穩(wěn)定，主要通過空氣傳播，宿主范圍較廣，感染性很強(qiáng)，微量的感染就可使敏感肌體感染，但發(fā)病率較低，未收集到實(shí)驗(yàn)室內(nèi)非呼吸道感染的資料。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)活動時應(yīng)嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)要求操作，實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員經(jīng)初審具備進(jìn)行相關(guān)的實(shí)驗(yàn)活動的資格。

第二篇：結(jié)核分枝桿菌說課稿[定稿]

《結(jié)核分枝桿菌》信息化教學(xué)設(shè)計(jì)說課稿

信息化教學(xué)設(shè)計(jì)課題是：《結(jié)核分枝桿菌》。選自《免疫學(xué)基礎(chǔ)與病原生物學(xué)》由陳育民、田冬梅主編，第四軍醫(yī)大學(xué)出版社出版，授課對象為中職一年級學(xué)生。《結(jié)核分枝桿菌》是本書第十六章第一節(jié)內(nèi)容，本次授課內(nèi)容學(xué)時一學(xué)時。下面我將從學(xué)習(xí)目標(biāo)與任務(wù)、學(xué)習(xí)者特征分析、信息資源與環(huán)境、信息化教學(xué)過程設(shè)計(jì)、教學(xué)評價(jià)與總結(jié)五個方面進(jìn)行闡述。

一、學(xué)習(xí)目標(biāo)與任務(wù)

1.根據(jù)中等職業(yè)教育的培養(yǎng)目標(biāo)，結(jié)合大綱要求和教材特點(diǎn)，現(xiàn)確定如下教學(xué)目標(biāo)：

1）認(rèn)知目標(biāo)：①了解結(jié)核桿菌的生物學(xué)特征

②掌握結(jié)核分枝桿菌的致病性

③了解結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)

④熟悉結(jié)核病的防治原則 2）能力目標(biāo)：①觀察、判斷結(jié)核桿菌培養(yǎng)結(jié)果

②掌握結(jié)核桿菌致病性物質(zhì)及所致疾病特點(diǎn)

③學(xué)會結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷及意義 3）情感目標(biāo)：①了解結(jié)核病發(fā)展現(xiàn)狀及對人群的危害

②樹立自覺防范的意識

③做好易感人群的宣傳教育

通過情感目標(biāo)的樹立、強(qiáng)化和培養(yǎng)，使學(xué)生認(rèn)識到預(yù)防疾病可減少患病人數(shù)，節(jié)約醫(yī)療資源，減少患者的醫(yī)療支出，這也是關(guān)愛病人的一種體現(xiàn)。

2.教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)：

1）教學(xué)重點(diǎn)：①結(jié)核分枝桿菌的主要生物學(xué)特征

②結(jié)核分枝桿菌的致病性

2）教學(xué)難點(diǎn)：①結(jié)核分枝桿菌的致病性

②結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果及意義

二、學(xué)習(xí)者特征分析

中職護(hù)理一年級學(xué)生，具有年齡小，自學(xué)能力差，不喜歡老師照本宣科，而又被動學(xué)習(xí)的特點(diǎn)，同時，他們又具有強(qiáng)烈的好奇心，喜歡新奇圖片、視頻、動畫等特點(diǎn)。根據(jù)學(xué)生實(shí)際情況，借助教室里的多媒體設(shè)備，運(yùn)用龐大的網(wǎng)絡(luò)資源，通過圖片、數(shù)據(jù)、視頻、動畫刺激學(xué)生感官，激發(fā)他們的自主學(xué)習(xí)欲望，通過教師的講解使學(xué)生從感興趣到了解及掌握本節(jié)課結(jié)核分枝桿菌的生物學(xué)特征、致病性及預(yù)防和治療的內(nèi)容。最終達(dá)到優(yōu)化教學(xué)效果的目的。

三、信息資源與環(huán)境

本節(jié)課運(yùn)用的信息化資源與環(huán)境為：教學(xué)軟件、視頻動畫及圖片、多媒體教室、互聯(lián)網(wǎng)、學(xué)生等。使學(xué)生在寓教于樂的環(huán)境中輕松的感受到學(xué)習(xí)的樂趣，從中掌握本節(jié)課重難點(diǎn)內(nèi)容。

四、信息化教學(xué)過程設(shè)計(jì)

在整個教學(xué)設(shè)計(jì)過程中首先通過情景創(chuàng)設(shè)引入新課內(nèi)容，講解新課的過程中在每個知識點(diǎn)通過插入大量生動的圖片、動畫、視頻等信息化資源激發(fā)學(xué)生興趣和求知欲，從而解決學(xué)生被動學(xué)習(xí)的問題，和學(xué)生一起討論、總結(jié)實(shí)施課堂反饋，從而了解學(xué)生掌握情況。

（一）本節(jié)課開始通過列舉著名詩人歌德、天才作曲鋼琴家肖邦、著名作家契科夫、著名文學(xué)家魯迅、紅樓夢里多愁善感的林黛玉等名人照片，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，通過和學(xué)生一起探討他們的死因，找到共同元兇結(jié)核病，從而導(dǎo)入本節(jié)課內(nèi)容：結(jié)核分枝桿菌。

（二）在學(xué)生感興趣的同時借助多媒體展示給他們課前在互聯(lián)網(wǎng)中搜集的關(guān)于結(jié)核分枝桿菌在全球影響的數(shù)據(jù)，刺激學(xué)生感官，激發(fā)學(xué)生思考結(jié)核分枝桿菌的危害及重要性，進(jìn)一步讓學(xué)生增加對本節(jié)課知識的渴求。

（三）本節(jié)第一個知識點(diǎn)：結(jié)核分枝桿菌生物學(xué)特征，為學(xué)生播放事先準(zhǔn)備好的關(guān)于結(jié)核分枝桿菌的動畫，在吸引學(xué)生的同時和學(xué)生一起歸納總結(jié)第一部分的知識點(diǎn)，使學(xué)生直觀的了解結(jié)核桿菌的形態(tài)、培養(yǎng)特征、抵抗力及預(yù)防和治療。

（四）本節(jié)第二個知識點(diǎn)：結(jié)核分枝桿菌致病性，在了解了生物學(xué)特征以后，通過圖片和學(xué)生一起回顧細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)及作用并聯(lián)系到它在細(xì)菌致病性中發(fā)揮的重要作用，結(jié)合播放的兩段視頻、動畫使學(xué)生直觀了解并歸納掌握重難點(diǎn)內(nèi)容：結(jié)核分枝桿菌致病性物質(zhì)及所致疾病。

（五）本節(jié)第三個知識點(diǎn)：結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)，由于此實(shí)驗(yàn)是臨床學(xué)生所要掌握的，中職護(hù)理院校的學(xué)生沒有一定的條件練習(xí)并觀看結(jié)果，那么我將為學(xué)生播放準(zhǔn)備好的本實(shí)驗(yàn)的視頻，使學(xué)生在觀看中了解實(shí)驗(yàn)原理，并通過生動的畫面掌握實(shí)驗(yàn)結(jié)果中的強(qiáng)陽性、陽性、陰性的測量及實(shí)際意義，這就解決了學(xué)生以往只能聽到課程內(nèi)容卻無法理解的問題。

（六）本節(jié)課第四個知識點(diǎn)：結(jié)核病的預(yù)防和治療。結(jié)合目前我國治療結(jié)核病的各項(xiàng)政策，和學(xué)生一起回顧前半部分內(nèi)容，共同找出該病的預(yù)防措施，并播放視頻講解如何聯(lián)合用藥，讓學(xué)生掌握作為醫(yī)護(hù)工作者如何做好結(jié)核病的預(yù)防。

至此本節(jié)課的內(nèi)容結(jié)束，在整堂中通過合理恰當(dāng)運(yùn)用信息化資源，解決了病原生物學(xué)這部分內(nèi)容，枯燥乏味學(xué)生被動學(xué)習(xí)的問題，使學(xué)生在大量豐富圖片視頻動畫中輕松掌握結(jié)核分枝桿菌生物學(xué)特性、致病性及預(yù)防和治療、結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)結(jié)果和意義。最后通過小組討論、課堂習(xí)題練習(xí)、結(jié)合視頻動畫總結(jié)每一部分內(nèi)容的知識點(diǎn)。最后利用班級qq群進(jìn)行知識搶答提問，鞏固本節(jié)課知識，讓學(xué)生通過各種信息化平臺掌握知識。

五、信息化教學(xué)設(shè)計(jì)評價(jià)與總結(jié)

本節(jié)課內(nèi)容的授課中從學(xué)生感興趣的名人故事入手、結(jié)合互聯(lián)網(wǎng)中搜集的和本節(jié)課內(nèi)容相關(guān)的疾病數(shù)據(jù)，激發(fā)學(xué)生自主探究能力，通過豐富生動的圖片及視頻、動畫的觀看，引導(dǎo)學(xué)生自主學(xué)習(xí)、討論、總結(jié)的能力，從而有效的突破重點(diǎn)、難點(diǎn)并反饋學(xué)生的掌握情況。

醫(yī)學(xué)課程的學(xué)習(xí)有大量的內(nèi)容必須靠記憶來掌握，在教學(xué)中，針對中職學(xué)生的認(rèn)知特點(diǎn)，采用信息化資源與環(huán)境幫助學(xué)生記憶，提高學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣和積極性，也培養(yǎng)了學(xué)生觀察、思考、分析、總結(jié)的能力，這是值得我們今后進(jìn)一步探索的。

第三篇：2結(jié)核分枝桿菌教案（本站推薦）

程名稱：臨床微生物學(xué)檢驗(yàn) NO：2 授課班級 12檢驗(yàn)4、5班 授課日期 2014.2.27-28 授課教師

模塊三,臨床細(xì)菌學(xué)

學(xué)習(xí)任務(wù)二 第14章 分枝桿菌、放線菌與諾卡菌 【學(xué)習(xí)目標(biāo)】

1.掌握結(jié)核分枝桿菌的基本特性及實(shí)驗(yàn)室檢查方法 2.熟悉結(jié)核分枝桿菌的臨床意義 3.了解分枝菌屬的分類 【教學(xué)重難點(diǎn)】

重點(diǎn)：結(jié)核分枝桿菌的基本特性及實(shí)驗(yàn)室檢查方法 難點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)室檢查方法 【教學(xué)方法】 講授+自主+討論 【導(dǎo)入新課】

復(fù)習(xí)前面的內(nèi)容、提問及一些關(guān)于結(jié)核桿菌的故事，臨床上對結(jié)核病的檢測依據(jù)是是什么，通過什么樣的檢查才能盡快盡早對病情進(jìn)行臨床診斷，這就是我們今天要學(xué)習(xí)的內(nèi)容。【教學(xué)內(nèi)容】

第14章 分枝桿菌 放線菌與諾卡菌 概 述

分枝桿菌與放線菌屬放線菌目（Actinomycetates）

分枝桿菌屬（Mycobacterium）是一類細(xì)長略帶彎曲專性需氧性桿菌。該菌一般認(rèn)為革蘭染色陽性。多數(shù)細(xì)菌在生長的一定時期抵抗酸-醇（acid-alcohol-fast），故又稱抗酸桿菌（acid-fast bacillus）

放線菌（Actinomyces）是一群在生物學(xué)特性上與細(xì)菌類同的原核細(xì)胞型微生物，與分枝桿菌、棒狀桿菌等有著親緣關(guān)系

放線菌是多數(shù)不致病，對人致病的主要有放線菌屬和諾卡菌屬。

前者為厭氧或微需氧菌，細(xì)胞壁中不含分枝菌酸，多引起內(nèi)源性感染。

后者為需氧菌，細(xì)胞壁中含有分枝菌酸，非人體正常菌群的成員，常引起外源性感染。

第一節(jié) 結(jié)核分枝桿菌

結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）簡稱結(jié)核桿菌、人和動物結(jié)核病的病原菌

一、分 類 MTB包括

人結(jié)核分枝桿菌（M.tuberculosis）

牛分枝桿菌（M.bovis）

非洲分枝桿菌（M.africanum）

坎納分枝桿菌（M.canettii）

田鼠分枝桿菌(M.microti)等

前四種對人類致病，其中人型MTB感染率最高

二、臨床意義

大約1/3的人口已感染MTB 有2000萬活動性結(jié)核病患者

每年新發(fā)病900萬人，死于結(jié)核病300萬人

近年來，AIDS的發(fā)病率上升，AIDS患者又極易患結(jié)核病，結(jié)核病已成為威脅人類健康的一個嚴(yán)重的全球性公共衛(wèi)生問題 WHO已把結(jié)核病與AIDS、瘧疾一起列為人類的最主要?dú)⑹?/p>

(一)所致疾病

通過呼吸道、消化道和損傷的皮膚等多途徑 感染機(jī)體，引起多種臟器的結(jié)核病，其中以肺結(jié)核為多見(二)免疫性

有菌免疫或稱傳染性免疫 細(xì)胞免疫

遲發(fā)型超敏反應(yīng)(三)變異

? 結(jié)核分枝桿菌易發(fā)生形態(tài)、菌落、生長溫度、毒力以及耐藥性的變異

? 卡介苗（Bacillus Calmette-Guérin，BCG）是有毒力的牛型結(jié)核分枝桿菌在甘油、膽汁和馬鈴薯的培養(yǎng)基中經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒變異株 ? 現(xiàn)已廣泛用于人類結(jié)核病的防治 ?

二、臨床意義(四)耐藥性

? 對常見抗菌藥物天然耐藥

? 多重耐藥結(jié)核病(multiple-drug resistance tuberculosis，MDRTB)是指對2種或2種以上的抗結(jié)核藥產(chǎn)生耐藥性的結(jié)核菌感染。臨床治療相當(dāng)棘手，死亡率很高

三、微生物學(xué)檢驗(yàn)

（一）基本特性

結(jié)核分枝桿菌尚未發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生內(nèi)毒素、外毒素及侵襲性酶

? 致病性可能與細(xì)菌在組織細(xì)胞內(nèi)大量繁殖引起的炎癥、代謝物質(zhì)的毒性以及菌體成分引起的免疫損傷有關(guān)

? 結(jié)核分枝桿菌的致病物質(zhì)主要是莢膜、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)

（二）標(biāo)本采集

? 據(jù)感染部位的不同采集不同的標(biāo)本

? 疑肺結(jié)核：收集清晨第一口痰，清潔干燥的容器內(nèi)送檢

? 疑泌尿系結(jié)核：清晨一次全部尿量或24小時尿沉淀10～15ml送檢，必要時作無菌導(dǎo)尿送檢（診斷泌尿道結(jié)核通常需3～5份標(biāo)本）

? 采集膿液應(yīng)直接從潰瘍處取膿汁或分泌物,深部膿腫用無菌注射器抽取送檢

? 其他：無菌抽取腦脊液、胸水、腹水及關(guān)節(jié)液等盛無菌試管送檢。腦脊液標(biāo)本靜置后，表面可有細(xì)薄凝塊，取凝塊作涂片或接種培養(yǎng)

（三）標(biāo)本直接檢查

1.形態(tài)學(xué)檢查

（1）直接涂片染色鏡檢

（2）濃縮集菌涂片檢查法

2.核酸檢測 ? 形態(tài)學(xué)檢查

? 齊-尼染色（Ziehl-Neelsen technique）是常用的抗酸染色法，染色后結(jié)核分枝桿菌呈紅色，背景呈藍(lán)色 ? 形態(tài)學(xué)檢查

? 用熒光染料金胺“O”染色，在熒光顯微鏡下菌體呈橘黃色 ? 用PCR法快速診斷MTB感染

? PCR法檢測DNA特異性更強(qiáng)，敏感性更高

? PCR須按法規(guī)要求規(guī)范操作，應(yīng)防止標(biāo)本污染出現(xiàn)假性結(jié)果

（四）分離培養(yǎng)與鑒定

1.培養(yǎng)特性

– 專性需氧 – 3％～5％CO2能促進(jìn)其生長

– 營養(yǎng)要求高:須在含血清、卵黃、馬鈴薯、甘油以及含某些無機(jī)鹽類的特殊培養(yǎng)基上才能生長良好。常用羅氏培養(yǎng)基

– 最適生長溫度為35～37℃，最適pH6.5～6.8 – 14～18h分裂1次，在固體培養(yǎng)基上2～5周才出現(xiàn)肉眼可見的菌落

– 典型菌落為粗糙型，表面干燥呈顆粒狀，不透明，乳白色或淡黃色，如菜花樣

2.分離培養(yǎng)

? 標(biāo)本接種于選擇性培養(yǎng)基中(常用羅氏，所含的孔雀綠或青霉素可抑制雜菌生長)? 37℃，5％～10％CO2培養(yǎng)8周

? 結(jié)核桿菌出現(xiàn)干燥呈顆粒狀、灰白色菌落 ? 涂片染色為抗酸陽性 ?

三、微生物學(xué)檢驗(yàn) 3.菌種鑒定(1)生化反應(yīng)

（2）噬菌體鑒定法

（3）分子生物法菌種鑒定

(4)高效液相色譜（HPLC）檢測分枝菌酸

? 生化反應(yīng)--煩瑣、費(fèi)時（4～8 周）,影響因素多 ? 結(jié)核分枝桿菌不發(fā)酵糖類 ? 能產(chǎn)生觸酶

? 人型MTB能合成煙酸，還原硝酸鹽，耐受噻吩-2-羧酸酰肼，而牛型MTB則不能 ? 人型和牛型的毒株中性紅試驗(yàn)均陽性，無毒株則為陰性，并失去索狀生長現(xiàn)象 ? 噬菌體鑒定法（PhaB）

? Wilson 等于1997年建立的快速檢測新技術(shù)

? 原理：是分枝桿菌噬菌體D29能感染活的分枝桿菌,未進(jìn)入感染菌體內(nèi)的噬菌體被隨后加入的殺毒劑滅活 ,已進(jìn)入菌體內(nèi)的噬菌體不受影響。噬菌體在感染菌體內(nèi)大量增殖 ,并將菌體裂解 ,釋放出的子代噬菌體可感染隨后加入的指示細(xì)胞 ,并將其裂解 ,在瓊脂平板上出現(xiàn)透亮的噬菌斑。

? 分子生物法菌種鑒定

? PCR 限制性片段長度多態(tài)性分析（PCR-RFLP）? PCR單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析（PCR-SSCP）? 核酸探針 ? 核酸序列分析 ? 多重PCR ? 高效液相色譜（HPLC）

? 檢測分枝菌酸：由于不同種的分枝桿菌細(xì)胞壁中的分枝菌酸不同，所以利用HPLC檢測分枝菌酸可鑒定菌種。?

三、微生物學(xué)檢驗(yàn)

（五）免疫學(xué)診斷 1．結(jié)核菌素試驗(yàn)

2．結(jié)核分枝桿菌抗原檢測 3.結(jié)核分枝桿菌抗體檢測 4.全血干擾素測定法

結(jié)核菌素試驗(yàn)

? 針對舊結(jié)核菌素(OT)與結(jié)核菌素純蛋白衍生物(PPD)兩種菌體蛋白

? 原理：當(dāng)將蛋白注入皮內(nèi)后，如受試者已感染結(jié)核桿菌，則結(jié)核菌素與致敏淋巴細(xì)胞特異性結(jié)合，在局部釋放淋巴因子，形成遲發(fā)性超敏反應(yīng)性炎癥，若受試者未感染MTB則無反應(yīng)。結(jié)核分枝桿菌抗原檢測

? 用ELISA 方法在血清中檢測結(jié)核分枝桿菌抗原-結(jié)核菌外分泌特異性抗原(external secreted specific antigen)濃度。

? 任何體液如血液、痰液、脊髓液、尿液和各式組織萃取液等體液可用于檢測特異蛋白抗原。結(jié)核抗體

? 作為活動性MTB感染的快速診斷方法之一

? 比傳統(tǒng)的痰涂片抗酸染色、MTB培養(yǎng)等方法簡便、快速、敏感性高，但存在一定的假陽性。?近年，膠體金、蛋白芯片檢查結(jié)核桿菌IgG抗體抗體，特別是后者，針對三種抗原（脂阿拉伯甘露糖、38K Da和16K Da蛋白質(zhì)抗原），其靈敏度和特異性均有所提高。全血干擾素測定法

? 原理：當(dāng)全血與PPD和對照抗原（植物血凝素）共同孵育后，致敏的淋巴細(xì)胞可分泌IFN-γ，通過檢測IFN-γ的含量來鑒定菌種。

? 2004年，Quantiferon-TB Gold assay 問世，應(yīng)用結(jié)核分枝桿菌RD1區(qū)域編碼的早期分泌抗原靶（ESAT）和培養(yǎng)濾液蛋白（CFP-10）特異抗原刺激細(xì)胞檢測。

?近來ESAT/CFP-10融合蛋白-ELISPOT用于診斷活動性結(jié)核病，準(zhǔn)確、靈敏、特異、快速。? 結(jié)果與結(jié)核菌素試驗(yàn)相當(dāng)，干擾因素小。

（六）藥物敏感性試驗(yàn)

? 將純培養(yǎng)物菌懸液，接種含各種濃度藥物的固體培養(yǎng)基上，同時做不含藥物的對照組。? 經(jīng)過培養(yǎng)，含有藥物的培養(yǎng)基上菌落數(shù)目是對照組的75％以上，則認(rèn)為該菌對該藥物濃度為完全耐藥，如無菌落生長則為敏感。

【小結(jié)】

結(jié)核分枝桿菌為專性需氧，營養(yǎng)要求較高。生長緩慢，在固體培養(yǎng)基上2～5周才出現(xiàn)肉眼可見的菌落。典型菌落為粗糙型，表面干燥呈顆粒狀，不透明，乳白色或淡黃色，如菜花樣。微生物檢驗(yàn)包括染色鏡檢、核酸檢測、分離培養(yǎng)、鑒定試驗(yàn)、免疫學(xué)診斷和藥物敏感性試驗(yàn)。

【課后預(yù)習(xí)】非結(jié)核分支桿菌，放線菌、卡諾菌 【課后作業(yè)】

1、如何進(jìn)行結(jié)核分支桿菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)？

2、結(jié)核菌素試驗(yàn)的原理是什么？

第四篇：實(shí)驗(yàn)室生物危害評估報(bào)告

實(shí)驗(yàn)室生物危害評估報(bào)告 評估日期：

參與評估人：

1、生物因子種類：

本實(shí)驗(yàn)室從事的是一般臨床免疫生化檢驗(yàn)工作，所涉及的樣本來自健康體檢人群和病人，樣本類型包括血清、全血、尿液、胸腔積液等，在實(shí)驗(yàn)室工作中所涉及的生物因子種類包括細(xì)菌、真菌、病毒、衣原體、支原體等。

2、來源：

本科室所涉及的生物因子來源主要是送檢樣本本身所存在的細(xì)菌、真菌、病毒、衣原體、支原體等。

3、傳染性：

本科室可能接觸到的傳染性病原體包括：

1)甲類傳染：鼠疫桿菌、霍亂弧菌。可分別引起鼠疫、霍亂等。

2)乙類傳染：艾滋病、肝炎病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、麻疹病毒、流行性出血熱病毒、流行性乙型腦炎病毒、登革熱病毒、痢疾桿菌、結(jié)核分支桿菌、傷寒和副傷寒桿菌、百日咳、淋球菌、梅毒鉤端螺旋體、瘧疾等。可分別引起艾滋病、病毒性肝炎、脊髓灰質(zhì)炎、麻疹、流行性出血熱、流行性乙型腦炎、登革熱、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾、肺結(jié)核、傷寒和副傷寒、流行性腦脊髓膜炎、淋病、梅毒、鉤端螺旋體病、瘧疾等

4、致病性：

本科室僅為臨床免疫生化檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室生物安全柜，不從事有關(guān)細(xì)菌、病毒、真菌的培養(yǎng)增殖實(shí)驗(yàn)，因此本科所涉及的病原體檢測實(shí)驗(yàn)均屬于BSL-2級生物安全。

5、傳播途徑：

本科室生物因子可能致病的傳播途徑包括氣溶膠、呼吸道、消化道、皮膚粘膜等途徑。

6、預(yù)防及治療：

對于本科室所有從事臨床試驗(yàn)的人員，均配備了工作服、手套、口罩等基本防護(hù)設(shè)備。在實(shí)驗(yàn)室配備了沖淋及洗眼裝置。同時成立了生物安全委員會，對所有員工均進(jìn)行了相應(yīng)的生物安全培訓(xùn)，并定期演練，所有員工均能按要求進(jìn)行操作。

7、結(jié)論：

本科的生物危害在可控范圍內(nèi)。

評估人員簽名：

第五篇：非結(jié)核分枝桿菌的醫(yī)院感染預(yù)防與控制

非結(jié)核分枝桿菌的醫(yī)院感染預(yù)防與控制

非結(jié)核分枝桿菌是指結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌,原稱為非典型分枝桿菌,是自然界廣泛存在的一種條件致病菌,存在于水、土壤和氣溶膠中,可導(dǎo)致免疫力低下的患者發(fā)生感染。尤其是注射部位易造成非結(jié)核分枝桿菌感染暴發(fā)，對患者健康造成危害，因此應(yīng)采取以下措施加強(qiáng)防控。

一、加大對消毒供應(yīng)中心、治療室、檢驗(yàn)科等醫(yī)院感染重點(diǎn)部門的管理力度，貫徹落實(shí)《醫(yī)院感染管理辦法》、《消毒管理辦法》等有關(guān)規(guī)定，健全制度，細(xì)化工作規(guī)范，確保醫(yī)療安全。

二、加強(qiáng)醫(yī)療用品的消毒滅菌工作。對耐高溫、耐高濕的醫(yī)療器械、器具和用品應(yīng)當(dāng)首選壓力蒸汽滅菌，盡量避免使用液體化學(xué)消毒劑進(jìn)行浸泡滅菌。使用的消毒藥械、一次性醫(yī)療器械、器具和用品應(yīng)當(dāng)符合國家有關(guān)規(guī)定。一次性使用的醫(yī)療器械、器具和用品不得重復(fù)使用。進(jìn)入人體組織和無菌器官的相關(guān)醫(yī)療器械、器具及用品必須達(dá)到滅菌水平，接觸皮膚、粘膜的相關(guān)醫(yī)療器械、器具及用品必須達(dá)到消毒水平。

三、規(guī)范使用醫(yī)療用水、無菌液體和液體化學(xué)消毒劑。各種抽吸的輸注藥液或者溶媒等開啟后應(yīng)當(dāng)注明時間，規(guī)范使用，并避免患者共用。無菌液體開啟后超過24小時不得使用。需要使用液體化學(xué)消毒劑時，要保證其使用方法、濃度、消毒時間等符合有關(guān)規(guī)定。同時加強(qiáng)對使用中的液體化學(xué)消毒劑的濃度監(jiān)測。

四、加強(qiáng)醫(yī)院感染監(jiān)測工作。及時發(fā)現(xiàn)早期診斷感染病例，特別是醫(yī)療機(jī)構(gòu)發(fā)生聚集性、難治性手術(shù)部位或注射部位感染時，應(yīng)當(dāng)及時進(jìn)行非結(jié)核分枝桿菌的病原學(xué)檢測及抗菌藥物敏感性、耐藥模式的監(jiān)測，根據(jù)監(jiān)測結(jié)果指導(dǎo)臨床及時應(yīng)用抗菌藥物，有效控制非結(jié)核分枝桿菌醫(yī)院感染。

五、加強(qiáng)對醫(yī)務(wù)人員的培訓(xùn)。特別要加大對一線醫(yī)務(wù)人員非結(jié)核分枝桿菌醫(yī)院感染預(yù)防與控制措施的培訓(xùn)力度，強(qiáng)化防控意識，加大對消毒滅菌、無菌技術(shù)操作、手衛(wèi)生及隔離等措施的落實(shí)力度，提高醫(yī)務(wù)人員有效預(yù)防和控制醫(yī)院感染的工作能力和處置能力，切實(shí)保障醫(yī)療安全。

百色市婦幼保健院感染管理科 2010年6月10日