第一篇:2012年報檢員:國內動物檢疫-市場檢疫監督
2012年報檢員:國內動物檢疫-市場檢疫監督
一、市場檢疫監督的概念和意義
1)市場檢疫監督的概念
市場檢疫監督是指進入市場的動物、動物產品在交易過程中進行的檢疫。市場檢疫監督的目的是發現依法應當檢疫而未經檢疫或檢疫不合格的動物、動物產品,發現患病畜禽和病害肉尸及其他染疫動物產品。保護人體健康,促進貿易,防止疫病擴散。
2)市場檢疫監督的意義
市場檢疫的主要意義在于保護人、畜,促進貿易。市場是動物及其產品集散的地方,動物集中時,接觸機會多,來源復雜,容易互相傳染疫病。動物及其產品分散到各個地方,容易造成動物傳染病的擴散傳播。做好市場檢疫可以防止患有檢疫對象的動物上市交易,確保動物產品無害,起到保護畜禽生產發展,保證消費者安全,促進經濟貿易,促進產地檢疫的作用。同時,市場采購檢疫的好壞,可以直接影響中轉、運輸和屠宰動物的發病率、死亡率和經濟效益。所以,必須做好市場檢疫,管理好市場檢疫工作。同時,應當知道集貿市場檢疫是產地檢疫的延伸和補充,應努力做好產地檢疫,把市場檢疫變為監督管理,才是做好檢疫工作的方向。
二、市場檢疫監督的分類和要求
1)市場檢疫監督的分類
市場檢疫監督包含著幾種不同的情況:
⑴農貿集市市場檢疫監督在集鎮市場上對出售的動物、動物產品進行的檢疫稱為農貿集市市場檢疫。農村集市多是定期的,如隔日一集、三日一集等,亦有傳統的廟會。活畜交易主要在農村集市。
⑵城市農貿市場檢疫監督對城市農副產品市場各經營攤點經營的動物、動物產品進行檢疫。城市農貿市場多是常年性的,活禽的交易主要在城市農貿市場。
⑶邊境集貿市場檢疫監督對我國邊民與鄰國邊民在我國邊境正式開放的口岸市場交易的動物、動物產品進行檢疫。目前,我國許多邊境省區正式開放的口岸市場,動物、動物產品交易量逐年增多,在促進當地經濟發展的同時,畜禽疫病亦會傳入我國,必須重視和加強邊境集貿市場檢疫監督,防止動物疫病的傳入和傳出。
除此,據上市交易的動物、動物產品種類不同,有寵物市場檢疫監督、牲畜交易市場檢疫監督。牲畜交易市場檢疫監督是指在省、市或縣區較大的牲畜交易市場或地方傳統的牲畜交易大會上對交易的動物進行檢疫,還有專一性經營的肉類市場檢疫監督、皮毛市場檢疫監督等。
2)市場檢疫監督的要求
⑴要有檢疫證明
進入交易市場出售的家畜和畜禽產品,畜主或貨主必須持有檢疫證明、預防注射證明,接受市場管理人員和檢疫人員的驗證檢查。無證不行進入市場。當地農牧部門有權進行監督檢查。無證不行進入市場。當地農牧部門有權進行監督檢查。家畜出售前,必須經當地農牧部門的畜禽防檢機構或其委托的單位,按規定的檢疫對象進行檢疫,并出具檢疫證明。凡無檢疫證明、或檢疫證明過期、或證物不符者,由動物檢疫人員補檢、補注、重檢,并補發證明后才可進行交易。凡出售的肉,出售者必須憑有效期內的檢疫合格證明和胴體加蓋的合格驗訖印間上市,凡無證、無章者不準出售。
⑵市場上禁止出售下列動物、動物產品
①封鎖疫點、疫區內與所發生動物疫病有關的動物、動物產品。
②疫點、疫區內易感染的動物。
③染疫的動物、動物產品。
④病死、毒死或死因不明的動物及其產品。
⑤依法應當檢疫而未經檢疫或檢疫不合格的動物、動物產品。
⑥腐敗變質、霉變、生蟲或污穢不潔、混有異物和其他感官性狀不良的肉類及其他動物產品。
第二篇:2012年報檢員:國內動物檢疫-運輸檢疫
2012年報檢員:國內動物檢疫-運輸檢疫
一、運輸檢疫的概念、意義
1)運輸檢疫的概念
運輸檢疫是指出縣境的動物、動物產品在運輸過程中進行的檢疫。可分為鐵路運輸檢疫、公路運輸檢疫、航空運輸檢疫、水路運輸檢疫及趕運等。運輸檢疫的目的是防止動物疫病遠離跨地區傳播,減少途病途亡。
2)運輸檢疫的意義
運輸檢疫的查證驗物工作可促進產地檢疫的開展,也可防止因運輸造成疫病的發生和傳播,由于運輸過程中,動物相對集中,互相接觸感染疫病的機會增多。同時,由飼養地轉變為運輸,動物的生活條件突然改變,一些應激因素造成抗病能力減弱,極易暴發疫病。特別是隨著現代化交通運輸業的發展,疫病傳播速度加快,能把疫病傳播到很遠的地方。因此,做好運輸檢疫工作對防止動物疫病遠距離傳播,促時產地檢疫開展,都有著很重要的意義。
二、運輸檢疫的程序、組織和方法
1)運輸檢疫的程序
種用動物運輸檢疫程序一般包括運前檢疫→運輸時的檢疫→到達目的地后的檢疫三個環節。
2)運輸檢疫的組織和方法
⑴起運前檢疫的組織
按照運輸檢疫的要求,凡托運的動物到車站、碼頭后,應先休息2~3小時,然后進行檢疫。全部檢疫過程,應自到達時至裝車時止,爭取在6h以內完成。進行檢疫時,先驗訖押運員攜帶的檢疫證明。凡檢疫證明在3d內填發者,車站、碼頭動檢人員只進行抽查或復查,不必詳細檢查。若交不出檢疫證明,或畜禽數目、日期與檢疫證明不符又未注明原因,或畜禽來自疫區,或到站后發現有可疑傳染病病畜死禽時,車站碼頭動檢人員必須徹底查清,實施補檢。認為安全后出具檢疫證明,準于啟運。
車站碼頭檢疫因有時間限制,必須以簡便迅速的方法進行。檢查牛體溫可采用分組測溫法,每頭牛測溫時間盡可能有10min。豬、羊的檢疫最好利用窄廊,窄廊一般長13m,高0.65m,寬0.35~0.42m,兩側用圓木或木板構成,兩端設有活門,中間留有適當的空隙,以便檢查和測溫。檢查中發現有病畜,按規定處理。
⑵運輸途中或過境檢疫的組織
檢查點最好設在預定供水的車站、碼頭。檢疫時除查驗有關檢疫證明文件外,還應深入車、船仔細檢查畜群。若發現有傳染病時,按規定要求處理。必要時要求裝載動物的車船到指定地點接受監督檢查處理。待正常安全后方準運行。車船運行中發現病畜、死畜、可疑病畜時,立即隔離到車船的一角,進行救治及消毒,并報告車船負責人,以便與車站碼頭畜禽防檢機構聯系,及時卸下病、死家畜,在當地防檢人員指導下妥善處理。
⑶運到目的地檢疫的組織
動物運到卸載地時,動檢人員應對動物重新予以檢查。首先驗訖有關檢疫證明文件,再深入車船仔細地觀察畜群健康情況,查對畜禽數目。發現病畜或畜禽數目不符,禁止卸載。待查清原因后,先卸健畜,再卸病畜或死畜。在未判明疾病性質或死畜死亡原因之前,應將與病畜或尸體接觸過的家畜,進行隔離檢疫。有時盡管押運人員報告死畜是踩壓致死,但也不可疏忽大意,因為途中被踩死的家畜,往往是由于患了某些急性傳染病的家畜。
在各種運輸檢疫中都應與運輸等有關部門的協作,運輸檢疫一定會遇到很多困難。因此在組織運輸檢疫時,應根據具體情況,必須與運輸等有關部門作好協調工作。
第三篇:動物檢疫
檢疫:是以法律為依據,國家授權特定機關對有關生物及其產品和其他相關的商品實施科學檢驗鑒定與處理,以防止有害生物在國內蔓延和國際間傳播的一項強制性行政措施,或者說是為防止疫病的傳播所采取的防范管理措施。
生化需氧量:指在一定的時間和溫度下,水體中有機物經微生物氧化分解時所消耗的溶解氧量。紅下水檢驗點: 設在開膛摘出心、肝、肺之后,檢驗心、肝、肺及相應的淋巴結。
白下水檢驗點:設在開膛摘出腹腔臟器之后,主要檢驗胃、腸、脾、胰及相應的淋巴結。
法定檢疫證明:國家質量監督檢驗檢疫總局、農業部等法定的動物、動物產品(或食品)檢驗檢疫機關及國際獸醫衛生組織依法制定的檢疫證明為法定檢疫證明。
化學耗氧量:用化學氧化劑氧化廢水中的有機污染物質和一些還原物質(有機物、亞硝酸鹽、亞鐵鹽、硫化物等)所消耗的氧量。
副產品:指屠宰動物體除胴體以外的部分,包括頭、蹄、內臟器官、血液、脂肪、內分泌腺體及皮毛等。
胴體修整:胴體修整是清除胴體表面各種污物,修割掉胴體上的病變組織、損傷組織及游離組織,摘除有礙食肉衛生的組織器官,并對胴體進行修削整形,使胴體具有完好商品形象的加工操作。
人獸共患病:即能在人類和脊椎動物之間自然傳播的疾病或感染。包括人畜共患傳染病和人畜共患寄生蟲病。
白肌肉:即“P S E”肉,也稱水煮樣肉。僅見于豬肉。其特征為肉色蒼白、質地柔軟、幾乎軟塌,表面滲水等。
胴體:牲畜屠宰后放血后去毛、頭、尾、蹄、內臟的帶皮或不帶皮的軀體。
敗血癥:疾病過程中,血液內持續存在病原微生物或其毒性產物,造成廣泛的組織損害,臨床上出現嚴重的全身反應,這種全身性病理過程成為敗血癥。
紅細胞的滲透脆性: 紅細胞在低滲溶液中發生膨脹、破裂的特性,稱滲透脆性。
消毒和滅菌消毒:是指用物理或化學方法消除或殺滅病原微生物。只能將有害微生物的數量減少到不致病的程度,而不能完全殺滅微生物。
滅菌:是指用物理或化學的方法殺滅全部微生物,包括致病和非致病微生物以及芽孢。
急宰與冷宰:凡患一般病的屠畜,不能在正常車間屠宰的經動物衛生檢驗人員送急宰車間屠宰并進行宰后肉品檢驗及處理的叫急宰。冷宰:指對已經死亡的屠豬(牲畜)進行屠宰或解體加工而言。光禽:禽類宰殺拔毛后稱為光禽。
白肌病:是由于硒和維生素E缺乏引起以心肌和骨骼肌變性和壞死為特征的一種營養缺乏病。
淋巴器官:是由大量淋巴組織構成的器官,位于淋巴通路或血液通路上的形態結構。包括淋巴結、脾、胸腺(腔上囊)。
1、動物宰前檢疫的意義
(1)及時發現病畜,實行病、健康隔離,防止疫病散播,減輕加工環境和產品的污染,保證產品的衛生質量。
(2)及早檢出宰后檢驗難以檢出的疾病。
(3)防止宰殺國家禁宰的牲畜,如耕畜、種畜、幼畜和適齡母畜等。(4)及時發現疫情,并為疫病防治積累資料。
2、專職肉品衛生監督檢疫員的職責。答:(1)查驗證件,衛生監督:凡無有關證件或環境衛生不符合要求者,不得設點經營。
(2)市場肉類監督:對上市肉類進行衛生監督檢驗與處理,凡病死、毒死、死因不明的畜禽肉類以及未經檢驗或檢驗不合格的肉類,一律不準出售。
(3)劣質肉類檢驗:取締腐敗變質、脂肪酸敗、霉變、生蟲、污穢不潔等性狀異常的肉品,以及運輸過程中被農藥、化肥污染的肉品。
(4)宣傳動員:采取多種形式向肉類經營者宣傳獸醫衛生要求和經肉感染人的人獸共患病的危害性,提高他們的衛生意識,自覺抵制購入和銷售病、死畜禽肉。
(5)了解疫情,保證肉品衛生:肉類監督檢驗應堅持在站內集中進行,不得直接在交易地點進行,以免不能充分地實施檢查或造成交叉污染。必須與當地畜牧獸醫工作者保持經常聯系,及時掌握產地畜禽疫病動態幾屠宰檢疫狀況,做到心中有數,以防病肉上市。
3、剖檢淋巴結的原則及豬頭與胴體被檢淋巴結的選擇 剖檢淋巴結的原則:
(1)選擇收集淋巴液范圍廣的淋巴結(2)位置淺表而便于剖檢的淋巴結(3)能反應特定病變過程的淋巴結 豬頭與胴體被檢淋巴結的選擇:(1)頜下淋巴結(2)頸淺背側淋巴結(3)頸深淋巴結(4)髂下淋巴結
(5)腹股溝淺淋巴結(6)腹股溝深淋巴結(7)腘淋巴結
4、什么是黃脂與黃疸肉?如何鑒別這兩種肉? 黃脂肉(黃膘肉):是指皮下或腹腔脂肪發黃,質地較硬,而其他組織器官無異常的一種色澤異常肉。由于飼料因素和動物機體內色素代謝機能失調所致。
黃疸:動物機體因某些中毒性疾病、傳染病及發生溶血性疾病時,致使膽管排泄發生障礙,大量的膽紅素進入血液、組織液,將全身許多組織染成黃色。二者的鑒別:
黃脂:黃染部位僅見脂肪,尤其是皮下脂肪。肝膽無病變。吊掛2 4 h后顏色變淺或消失。
黃疸:疾病引起膽汁代謝障礙而造成的。全身皮膚、脂肪、黏膜、鞏膜、肌膜、關節囊液均顯黃色。大多患病動物的肝臟和膽道都會呈現病變。胴體在室溫下放置1晝夜后,其黃色會更加明顯。
5、市場肉類監督檢驗的程序
(一)詢問情況
(二)查驗證件
(三)運輸工具和包裝物的衛生狀態
(四)檢查獸醫驗訖印章
(五)肉品檢驗
6、廢棄物無害化處理的原則(1)無害化原則(2)減量化原則(3)資源化利用原則(4)生態化發展原則
(5)污染治理的經濟適用原則
7、檢驗“必檢淋巴結”的意義?
答:(1)必檢淋巴結能反映病原體侵害機體的途徑、程度甚至性質,尤其是傳染病,在淋巴結中形成特殊的病理形態學征象。(2)豬機體內淋巴結眾多,分布廣,必檢淋巴結是收集淋巴液較廣、最能反映機體病理狀態的代表器官,必檢淋巴結多位于機體淺表層,便于剖檢,可以減少對豬的機體破壞,保持生豬胴體的完整和不被損傷。
(3)必檢淋巴結的檢驗剖檢面較小,可避免組織切面過多,招致細菌侵入,以保證肉品衛生質量和商品價值。
(4)必檢淋巴結檢驗技術操作簡便,容易掌握,為進一步開展試驗室檢疫檢測和準確定性提供重要依據。
8、注水肉檢驗的方法。
答:注水肉檢驗的方法包括:(1)視檢(2)觸檢
(3)放大鏡檢查(4)刀切檢驗法(5)加壓檢驗法(6)試紙檢驗法(7)熟肉率檢驗法(8)肉的耗損檢驗法
9、食品檢驗檢疫技術現狀與發展趨勢 ?
答:檢驗檢疫能力是一個國家(地區)食品安全工作水平的重要標志。為此,各國都把發展檢測技術和方法置于優先地位。
(1)速測化:利用快速檢測方法,可以在很短的時間內就可以確定食品的安全性。例如酶聯免疫法、放射免疫法、受體傳感器法、金(熒光素)標記法、cDNA標記探針法、基因芯片技術等。
(2)系列化: 歐美國家對農藥殘留的檢測已從單個化合物的檢測發展到可以同時檢測幾百種化合物的多殘留系統分析,獸藥殘留的檢測也向多組分方向發展。
(3)精確化:目前,發達國家對殘留的限量越來越低。這對檢測方法的精確性提出更高的要求。例如,對二惡英及其類似物,檢測方法靈敏度的要求達到超痕量水平(10—~10),需要用高分辨質譜分析和采用穩定性同位素稀釋技術的嚴格質量控制手段。由于色質聯機結合穩定性同位素稀釋技術具有靈敏、特異、可靠的特點。
(4)標準化:食品檢驗檢疫具有法定性和權威性,因此食品檢驗檢疫技術標準化就尤為重要,各國和國際組織都高度重視。食品檢驗檢疫技術的標準化不僅僅國內有需求,而且已呈現國際化趨勢。一方面,傳統方法不斷完善并推廣應用,另一方面,新技術層出不窮,正在或有待建立通行標準。
(5)高技術化:高新技術在檢驗檢疫領域的應用已越來越廣泛。首先,殘留檢測技術進一步更新換代,包括氣相色譜與質譜聯用技術、液相色譜與質譜聯用技術、毛細管電泳與質譜聯用以及氣相、液相色譜與多級質譜聯用技術等。
10、動物的宰后檢驗與檢疫的意義和特點。
答: 意義:動物的宰后檢驗與檢疫是動物衛生檢驗最重要的環節,是宰前檢疫的繼續和補充。特點:1.病理變化不典型。2.屠宰加工速度快。3.胴體不準隨意切割。
11、肉品品質檢驗的具體包括哪些? 答:(1)除傳染病和寄生蟲以外的疾病,以及腫瘤、全身性水腫、膿毒敗血癥、過度瘠瘦、黃疸和各種普通病引起的肉品病變。
(2)有害腺體:甲狀腺、腎上腺和病變淋巴結。(3)屠宰加工質量:不帶毛、血、糞污等污染物。(4)注水或注入其他物質。(5)種公、母豬及晚閹豬。
(6)農藥、獸藥、激素的殘留及其他有害物質。(7)外傷骨折挫傷后的淤血、膿腫、炎癥及皮炎。(8)其他因素引起的肉品品質變化。
12、腸衣的常見缺陷及衛生處理。
答:
(一)污染
衛生處理 輕度污染的腸衣,經仔細清除污垢后,可以作為食用。污染嚴重,無法去凈糞污碎屑的腸管,作工業用或化制。
(二)腐敗
衛生處理 輕度腐敗的腸衣,可晾在陰涼通風處驅味,或用0.01%~0.2%高錳酸鉀溶液沖洗,以抑制腐敗分解。輕微腐敗腸衣經處理后可以食用,但不宜繼續保存。呈明顯腐敗的腸衣,作工業用或化制。
(三)褐斑
衛生處理 有輕度褐斑的腸衣,先用2%的稀鹽酸處理,再用蘇打水溶液洗滌,除去褐斑后可以作為食用。有嚴重褐斑的腸衣,不能作為食用。
(四)紅斑
衛生處理 通常形成紅斑色素的微生物只在腸壁表面生長,不但容易除掉,而且這些產色素微生物對人無害。一般不影響食用,故不作處理。
(五)青痕
衛生處理 一般不作處理。
(六)生霉
衛生處理 輕度生霉的腸衣,如果沒有明顯的感官變化,而且易于除去霉層的可以食用。嚴重生霉的腸衣,作工業用或銷毀。
(七)腸脂肪的酸敗
衛生處理 腸脂肪酸敗的腸衣,不能作為食用,應作工業用或銷毀。
(八)昆蟲
衛生處理 發現嚙痕或被昆蟲分泌物污染的腸段,不能作為食用。
13、什么是紅膘肉與放血不良肉肌肉?二者如何鑒別?
答:紅膘肉: 皮下脂肪由于毛細血管充血、出血或血紅素浸潤而呈粉紅色時,即為紅膘肉。放血不良肉肌肉:組織顏色發暗,當切開肌肉時,可見暗紅色區域,擠壓切面有血滴出;皮下靜脈血液滯留,脂肪組織內可見到毛細血管,甚至發生紅染,透過胸腹膜的漿膜,可看到結締組織中的血管,肋骨兩側的血管清晰可見。
鑒別:紅膘肉僅見于皮下脂肪。放血不良肉肌肉肉組織顏色暗紅。
14、簡述旋毛蟲的檢驗及處理方法
答:檢驗包括顯微鏡檢查法和集樣消化法
處理方法:
1.宰后檢驗在24個肉片標本內,發現包囊或鈣化的旋毛蟲不超過5個者,橫紋肌和心臟高溫處理后出場。超過5個以上者,橫紋肌和心臟作工業用或銷毀。
2.上述兩種情況的皮下及肌肉間脂肪可煉食用油,體腔內脂肪不受限制出場。3.腸可供制腸衣,其它內臟不受限制出場。
第四篇:動物檢疫
現代生物技術在動物檢疫中的應用
養殖
宋天增
201509510507 摘要:動物檢驗檢疫主要檢測內容包括動物疫病、獸藥等有毒有害物質、特定動物源成份。本文簡述了當前動物檢疫的主要檢測內容、傳統常規動物檢疫技術、核酸擴增技術在動物檢疫中應用和新型生物技術平臺技術在動物檢疫中的應用。
關鍵詞:動物檢疫;傳統檢疫技術;現代檢疫技術
動物檢疫(Animal Quarantine)遵照國家法律運用強制性手段和科學技術方法預防或阻斷動物疫病的發生以及從一個地區到另一個地區的傳播,通常指動物防疫監督機構的動物檢驗檢疫人員依法對動物、動物產品的傳染病、寄生蟲病進行檢查定性和處理的行政執法行為。通過動物檢疫,對可疑或已證實的疫病對象實行強制隔離,或作出適當處理,目的是防止動物傳染病的傳播,保障畜牧業生產和人民健康。
1動物檢驗主要檢測內容
1.1動物疫病
動物疫病(含人畜共患疫病)由病毒、細菌、真菌、寄生蟲、支原體、非常規病原(例阮病毒、立克次氏體)引起,在動物間或人與動物間傳播,造成較嚴重危害的各種傳染病。
我國進境動物疫病名錄97種:一類病15種,二類病82種;含水生動物疫病11種。OIE關注疫病(手冊2009)陸生動物疫病112種;水生動物疫病:25種。1.2獸藥等有毒有害物質
動物、動物產品、飼料中的獸藥殘留、重金屬、微生物毒素、生物毒素等。獸藥包括禁用藥和限量用藥,具體檢測項目和控制標準根據進出口國家或地區的要求。1.3特定動物源成份
瘋牛病傳播風險因子:飼料中的牛羊成分;
動物產品真偽鑒別:熟制肉類出口;珍貴皮草、珍貴中藥材、瀕危動物保護; 食物過敏源檢測:甲殼素、某些魚成份、轉基因成分:例轉基因魚等。
2傳統常規動物檢疫技術
流行病學檢疫時,對流行病的分析和確診有至關重要的作用,但是流行病學的調查總結過程中也存在工作量大且繁瑣,耗費的人力多等問題。
臨床檢疫方法具簡便易行,適合現場操作等優點,但是臨床檢疫對發病初期尚未出現有病證意義的、特征癥狀的病例,或非典型病例,或癥狀相似病例,往往難于做出診斷。
病理學檢疫技術既可驗證臨床診斷結果的正確與否,又可為實驗室診斷方法和內容的選擇提供參考依據。在剖解檢疫時,有些病例往往缺乏特征性的病變,特別是急性死亡的病例、非典型病例和早期屠 宰病例,所以在剖解檢疫這些病例時應選擇癥狀較典型、病程較長、未經治療的自然死亡病例進行剖檢。
病原學檢疫時從病料中分離出病原微生物,雖是確診的重要依據,但健康動物也有帶菌現象,所以病原學的檢疫結果還需與流行病學及臨床診斷癥狀、病理變化聯合起來綜合分析。而且任何一種病原學方法都存在有漏檢的可能,所以即使沒有發現病原體,也不能完全否定該種傳染病的診斷。
免疫學檢疫技術具有靈敏度高、特異性強、重復性好的檢測、操作簡單、快速等優點,是目前最理想的殘留篩選性分析方法之一。但酶聯免疫分析前期工作復雜,檢測對象針對性太強,開發免疫檢測試劑盒所需費用昂貴。
3現代生物技術在動物檢疫中的應用
現代生物技術在動物檢疫中的應用是基于分子生物學技術發展起來的分子生物學檢測技術。根據生物大分子結構特點與相互作用原理,從分子水平檢測某種特定生物大分子存在與否。
分子生物學檢疫又稱基因檢疫,主要是針對不同病原微生物所具有的特異性核酸序列和結構進行測定。自1976年以來,基因檢疫方法取得了巨大進展,建立了DNA限制性內切酶圖譜分析、核酸電泳圖譜分析、寡核苷酸指紋圖核酸探針、聚合酶鏈反應等。
在動物檢疫方面,具有代表性的技術主要有3大類: 核酸擴增技術:
蛋白質檢測技術:蛋白質電泳與免疫印跡、重組抗原-based、單克隆抗體-based。新技術平臺:生物芯片、變性高效液相色譜、生物傳感器。3.1核酸擴增技術在動物檢疫中應用
核酸擴增技術是對核酸進行體外生成和放大的技術,只要起始的生物材料里存在微量的特定核酸(如某種病原體的核酸),通過擴增反應就能得到大量的可檢測到的特定核酸產物,從而可證明檢測對象的存在。主要包括聚合酶鏈式反應(PCR),實時熒光PCR,LAMP, NASBA核酸擴增產物分析技術測序、雜交、酶切等。
PCR與實時熒光PCR是發展成熟且主要應用的核酸擴增技術。3.1.1 PCR檢測
PCR技術用于動物檢疫主要是檢測病原,做早期診斷和病原的鑒定。它不僅可以檢測活的病原體,而且還可檢出已滅活的病原體,只要病原體的核酸未降解。因此,當由于各種原因無法進行病原分離和鑒定時,該技術將發揮巨大的作用。
常規PCR檢測過程包括:取樣、樣品前處理與核酸提取-PCR反應,PCR產物電泳檢測,PCR產物的確證分析(測序、酶切等)。
3.1.2 實時熒光PCR檢測
實時熒光PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,每經過一個擴增循環,產生一個熒光信號,通過熒光強度變化監測產物量的變化,利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程,最終得到一條熒光擴增曲線,也可通過標準曲線對未知模板進行定量分析。實時熒光PCR檢測是當前實驗室及商業重點開發應用的快速檢測方法。其優點為:特異性好、靈敏度高、更快速;操作簡單、安全、自動化程度高、防污染;可實現定量檢測;設備、試劑成本較高;快速篩選檢測方法,仍需確證(常規PCR及序列分析)等。
實時熒光PCR技術應用范圍為重大動物疫病及各種傳染病病原快速檢測方法,疫情監控重要的技術依托;供港澳活禽及產品禽流感,新城疫監測;進境動物產品口蹄疫,豬生殖與呼吸系統綜合癥檢測;動物及產品甲型流感H1N1監測;飼料及動物產品中特定動物源成分檢測等。
3.1.3環介導等溫核酸擴增技術(LAMP)環介導等溫核酸擴增技術(LAMP)是在鏈置換DNA聚合酶啟動下的鏈置換DNA合成循環。反應起始階段形成DNA莖環結構(LAMP循環的起始結構),以莖環結構為模板進入擴增循環階段。擴增產物是不同長度的DNA混合物,分別具有不同個數莖環結構,產物DNA序列為擴增靶序列的交替反向重復序列,酶切后可得到單一產物。
需針對靶基因的6個特異序列設計4條引物,還可加上2條環識別引物以提高速度和產量。LAMP優點為簡便、成本低、更快速;設備和試劑成本低,時間短;高特異性、高靈敏度;識別6個區域的4條引物;敏感性比常規PCR高;高產量、易檢測;產量可達數十微克,可進行熒光檢測(熒光核酸染料)或濁度(焦磷酸鎂沉淀)檢測。適合基層實驗室甚至現場檢測。
LAMP缺點:更易污染、不方便產物回收及鑒定、設計空間較受限、擴增產度< 500時不能進行長鏈擴增。
3.1.4 核酸檢測技術應用現狀
核酸檢測技術直接應用于檢測各種動物病原、病原體分型,特定動物源成份、轉基因成份等,并已有一批總局明文批準采用的檢測項目如:禽流感、甲型流感H1N1、口蹄疫、SARS、鏈球菌、藍耳病、轉基因、動物源成份等。
近幾年發布(或立項)不少檢測標準(PCR/rPCR),基本覆蓋主要進境動物疫病項目。核酸檢測技術在直屬局實驗室(中心)均已開展應用或研發,設備和技術基礎良好。
國內外均有成熟的核酸檢測技術平臺和商業服務平臺(設備、試劑、技術服務);常見病原體已有商品化核酸檢測試劑盒;基本上較重要的各種動物病原體均有已發表的PCR檢測方法,全系統普遍具備自行開發建立特定病原的核酸檢測方法的能力。
3.1.5 基因工程、單克隆抗體與蛋白質檢測技術
基因工程、單克隆抗體與蛋白質檢測技術通過基因工程技術生產特異抗原(重組抗原)、單克隆抗體技術生產特異抗體等,該方法的建立基于重組抗原或單克隆抗體的各種血清學檢測方法:ELISA、膠體金試紙條、生物芯片等。
基因工程、單克隆抗體與蛋白質檢測技術是系統內研究開發檢測方法/檢測試劑盒的熱點方向之一。3.2新型生物技術平臺
隨著科技進步和學科的交融,分子生物學、材料科學、微電子、激光檢測、計算機數字信號處理等多學科技術相融合,實現快速、靈敏、高通量(同步檢測多種目標,或同時檢測多個樣品)和自動化檢 測和數據處理。
3.2.1生物芯片
伴隨著“人類基因組計劃”而衍生的一項重大高新技術,通過微加工和微電子等技術在載體表面構建微型生物化學分析系統,實現了對基因、蛋白質、細胞、組織以及其他生物組分的準確、快速、高通量的檢測。1992年第一塊生物芯片誕生,在近幾年迅速崛起,全球約有數百家生物技術公司和數千家研究機構從事生物芯片的研究和開發工作。
生物芯片技術是分子生物學技術與芯片技術相結合產生的一項高新技術。基因芯片制備及檢測流程,是利用原位合成法或將已合成好的一系列寡核甘酸以預先設定的排列方式固定在固相支持介質表面,形成高密度的寡核甘酸的陣列,樣品與探針雜交后,由特殊的裝置檢出信號,并由計算機進行分析得到結果,其在轉基因產品及動物產品中的微生物的檢疫有廣泛的運用。
美國是生物芯片技術最為領先的國家,目前美國生物技術公司研制的生物芯片已進入實用化、產業化階段。我國正式進入生物芯片的研究領域是在1998年,我國自主研發的各類生物芯片及其配套產品累計實現的銷售收入已超過億元人民幣。以生物芯片為核心的相關產業正在全球崛起!生物芯片主要包括:按檢測目標:基因芯片、蛋白芯片(包括藥殘檢測芯片)、組織芯片、細胞芯片、糖芯片;按載體:固相芯片、液相芯片。
在動物間一種生物芯片主要用于:傳染病(同步檢測多種病原體;同時檢測多個樣品);藥物殘留(同時檢測多種藥物);轉基因成分、特定動物源成分(同時檢測鑒別多種成分)。
3.2.2液相芯片(xMAP懸浮芯片技術)
21世紀初誕生、在流式細胞術、ELISA技術和芯片技術基礎上開發的新一代分子診斷技術平臺,有機整合了微球(Beads)、激光檢測技術、流體動力學、高速的數字信號處理系統和強大的計算機運算功能,具有更強的檢測特異性和靈敏性。
液相芯片(xMAP懸浮芯片技術)核心技術是乳膠微球包被和熒光色編碼以及液相分子雜交,檢測速度極快,約十幾分鐘可完成檢測。乳膠微球帶有獨特的色彩編號,每種小球可分別包被抗原、抗體或核酸等特異分子,小球體懸浮于液相體系中構成液相芯片系統,可以特異捕獲多達100種不同的目標分子實現同步特異檢測,其結果可在瞬間經激光判定后由電腦以數據信息的形式記錄下來,敏感性顯著超越抗原-抗體結合酶聯信號或常規核酸雜交信號檢測。該技術優點是反應快速、靈敏度高;通量大;可進行多元化分析,靈活性好;采用接近生物系統內部環境的完全液相反應體系,穩定性好;操作簡便,不需洗滌,耗時短等。
3.2.3變性高效液相色譜(DHPLC)技術
變性高效液相色譜(DHPLC)技術近年來發展起來的一項高性價比核酸檢測分析技術,可進行核苷酸片段分離分析、分析檢測已知或未知基因突變及SNP。被譽為“分子生物學新技術平臺”、“臨床基因診斷最佳技術平臺”。
設備依托:Transgenomic公司的WAVE?核苷酸片段分析系統利用離子對反相液相色譜原理進行核酸片段的分離和分析。DNA SepCartridge分離柱采用無孔多苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)共聚物微球 體作為穩定基質,當DNA樣品注入到色譜柱后,通過與緩沖液中的橋分子三乙基胺(TEAA)的相互作用被吸附到固相柱基質上,而乙腈可破壞這一相互作用;通過改變流動相中乙腈的濃度實現DNA片段的分離。
DHPLC技術特點是檢測準確性高,可分辨單個堿基的差異;操作簡單,自動化分析;結果重復性高,速度快;樣品通量高;消耗品低價性,性價比高。
3.2.3 生物傳感器(Biosensor)
生物傳感器(Biosensor)是將生物體的成份(酶、抗原、抗體、DNA、激素)或生物體本身(細胞、細胞器、組織)固定化在一器件上作為敏感元件的傳感器稱為生物傳感器。其工作原理是待測物質經擴散作用進入固定生物膜敏感層,經分子識別而發生生物學作用,產生的信息如光、熱、音等被相應的信號轉換器變為可定量和處理的電信號,再經二次儀表放大并輸出,以電極測定其電流值或電壓值,從而換算出被測物質的量或濃度。
根據生物分子識別元件上的敏感材料可分為:酶傳感器、微生物傳感器、免疫傳感器、組織傳感器、基因傳感器、細胞及細胞器傳感器。
生物傳感器可監測多種細菌、病毒、生物毒素。能在10s內偵檢出微量級生化戰劑,包括委內瑞拉馬腦炎病毒、黃熱病毒、炭疽桿菌、流感病毒、鼠疫耶爾森菌、埃博拉出血熱病毒、肉毒桿菌類毒素等;農藥、獸藥殘留(農產品、食品、環境監測)等方面。
3.2.4自動化檢測鑒定設備
科技進步使各種用途的自動化實驗室設備得以被發明制造并迅速投入市場、加以應用。顯著提高了實驗室和臨床診斷工作效率,節省人力、試劑、更為準確快速,更為安全。
例如,全自動微生物培養、鑒定和藥敏檢測分析系統;全自動酶免工作站;全自動微量移液和PCR工作站;全自動核酸蛋白純化系統等。
自動化設備的配備和使用將是高端實驗室建設發展的主要方向,也將帶動實驗室檢驗能力和水平的提高。如全自動酶免工作站、全自動核酸純化系統、全自動PCR移液工作站的研發是市場投放將逐步解決檢驗程序復雜、檢測周期漫長、檢測成本昂貴、檢驗人員專業素質要求較高等問題。
4展望
隨著科學技術的不斷發展,動物檢疫的各種技術也必將不斷地更新、完善和迅速發展,尤其是速測技術更能適應現代高效、快速的節奏和滿足社會的要求。它不僅是政府監管部門和生產企業的需要,而且是廣大消費者的迫切需要。為了保障消費者的安全和健康,增強動物產品的國際競爭力,應該靈活選擇各種測試技術,嚴把動物產品質量關。此外還應建全動物制品的監測技術,實施從農場生產到餐桌食用的全過程監控,從源頭抓起,提高動物養殖的科學管理,完善檢測技術,提高動物產品質量,推動養殖業和外貿可持續發展。
動物檢驗檢疫技術體系不可或缺的重要組成部分,現代生物技術在動物檢疫中的應用將日益常規化,檢測技術更細化、更精準;新型技術平臺的建立和應用常態化;自動化設備的配備使動物檢疫更加 方便;便攜式檢測工具的開發和應用使實現更多現場更加快速檢測。
參考文獻:(略)。
第五篇:動物檢疫股近期市場監督檢查工作總結
檢疫股旅游節期間市場監督檢查工作總結
為了加強旅游節期間的食品安全監管工作,確保畜產品質量安全,保障游客及廣大人民群眾飲食安全,檢疫股在旅游節來臨之前,根據近期省、市疫病防控相關文件精神和縣食安委的安排部署,對華藏寺農貿市場及縣城周邊范圍內所有規模養殖場和畜產品經營戶進行了一次重點監督檢查,現將此次監督檢查工作情況做如下總結匯報:
此次檢查行動歷時6天,共出動檢查人員38人(次),督查規模養殖場、各類畜產品經營戶92家,其中規模養殖場6戶、肉食經營鋪22家,蔬菜經營鋪27家,糧油副食店14家,超市8家,熟食店8家、蛋糕店7家。檢查面覆蓋縣城所有畜產品相關經營門店。檢查期間,通過口頭宣傳和書面材料發放等形式,大力宣傳《動物防疫法》等法律法規和畜產品安全知識。共發放《關于切實加強活禽及其產品監督管理的告知書》110份、《動物及動物產品無害化處理通知書》38份,提高了廣大經營者和消費者的安全意識和自我防范意識,形成“全民監督、群防群控”的社會氛圍。
此次監督檢查行動檢疫股把落實市場準入制度作為檢查的重點,加強畜產品市場準入、交易和退市等各項制度和法律法規的宣傳,對流通領域的市場、超市及餐飲單位等畜產品經營、加工活動進行重點監督檢查,凡無檢疫證明、檢疫標識和規定的檢測證明的動物產品,一律不許上市銷售和
加工使用。嚴格實行“查證驗物”,認真落實市場準入和憑檢疫證明經營制度。同時加強外來肉品的檢疫管理,要求所有動物及動物產品經營單位認真履行報檢制度,由檢疫員深入現場查證驗物,經檢疫合格后換發我所開具的動物產品檢疫證明才能進入市場銷售。
通過此次市場監督檢查活動的開展,使畜產品的市場準入和憑檢疫證明經營制度得到了更好的落實,各項法律法規的宣傳更加深入人心,提高了廣大經營者和消費者的安全意識和自我防范意識,確保了旅游節期間的畜產品質量安全,為今后的市場監督檢查工作的有力開展打下了堅實的基礎。